JP2000504687A - トポイソメラーゼインヒビターとしてのカラリン類似体 - Google Patents

トポイソメラーゼインヒビターとしてのカラリン類似体

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Abstract

(57)【要約】 本発明は、抗癌剤として有効なプロトベルベリンアルカロイド誘導体、およびその使用法を提供する。また、本発明は、トポイソメラーゼインヒビターとして有効なプロトベルベリン誘導体を提供する。本発明は、また、カンプトセシン耐性癌細胞に対して有効なトポイソメラーゼＩターゲテッド治療剤であり、かつＣＮＳ腫瘍に対して特に有効である、コラリンおよびニチジン誘導体を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】 トポイソメラーゼインヒビターとしてのカラリン類似体 従来技術 ＤＮＡトポイソメラーゼは、ＤＮＡのホスホジエステル主鎖を破壊しかつ再結 合することによって、ＤＮＡのトポロジカル状態を変更する核酵素の独特なクラ スを表す。哺乳動物のトポイソメラーゼＩは１つのＤＮＡ鎖を一時的に破壊する ことによってＤＮＡのトポロジーを変更することができるが、トポイソメラーゼ ＩＩは二本鎖の破壊を引き起こすことによって作用する。最近、トポイソメラー ゼの毒作用は、新規な癌化学療法の開発のための魅力的な薬理学的ターゲットと して認識された。アルカロイドおよびそれらの誘導体は、カンプトテシン（ｃａ ｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ）およびベルベリン（ｂｅｒｂｒｉｎｅ）を包含する、潜 在的抗腫瘍剤として研究されてきている（Ｈａｈｎ 他、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｓ、Ｖｏｌ．３．、Ｇｏｔｔｌｉｅｂ他（編）、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ：ＮｅｗＹｏ ｒｋ、ｐｐ．５７７−５８４（１９７５）；Ｓｈｉｄｅｍａｎ、Ｂｕｌｌ．Ｎａ ｔｌ．Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ Ｃｏｍｍｉｔｔｅ、１８：３（１９５０）；Ｂｈａ ｋｋｕｎｉ 他、Ｔｈｅ Ａｌｋａｌｏｉｄｓ；Ｖｏｌ．２８、Ｂｒｏｓｓｉ、 Ａ．（編）、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ｐｐ．９５− １８１ （１９８６）；Ｓｕｆｆｎｅｓｓ 他、Ｔｈｅ Ａｌｋａｌｏｉｄｓ； Ｖｏｌ．ＸＸＶ、Ｂｒｏｓｓｉ、Ａ．（編）、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ｐｐ．１７８−１９７（１９８５））。 カンプトテシンおよびその誘導体の広範な研究は、細胞のトポイ ソメラーゼＩが抗腫瘍アルカロイドカンプトテシンのための分子のターゲットで あることを確立した（Ｈｓｉａｎｇ 他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４８：１７２ ２−１７２６（１９８８））。しかしながら、腫瘍細胞のいくつかの系統はカン プトテシンに対する耐性を証明した。 トポイソメラーゼＩがカンプトテシンの分子のターゲットであることの証明は 、他のトポイソメラーゼＩターゲッティング抗腫瘍化合物（トポイソメラーゼＩ の毒物）の同定および開発をさらに剌激した。これらの中には下記のものがある ：アクチノマイシンＤ、モルホリノドキソルビシン、ＤＮＡマイナーグルーブ結 合性ビス−およびトリス−ベンズイミダゾール、ヨードカルバゾール誘導体、ブ ルガレイン、イントプリシン、サイントピン、インドロキノリンジオン、ニチジ ン（ｎｉｔｉｄｉｎｅ）誘導体およびベルベリン誘導体。これらの化合物の多数 は、また、トポイソメラーゼＩおよびＩＩの双方の二重毒物である。新規なトポ イソメラーゼＩの毒物の数は急速に増加しているが、カンプトテシンを除外して 、トポイソメラーゼＩ毒作用は新規な毒物のいずれについても細胞を殺すことに 関係することは証明されなかった。同様に、ＤＮＡ結合の介在的モードはトポイ ソメラーゼＩＩ毒作用に必須であることが知られており、このモードが二重毒物 としてトポイソメラーゼＩに毒作用を及ぼすことに関係するかどうかは不明瞭で ある。 イソキノリン環に関係する構造を有するアルカロイドの広く分布したクラスに 、研究は集中されてきてた。これらの化合物の２つ、すなわち、ベンゾフェナン トリジン、ニチジン、および関係するアルカロイドのファガロニンは、ｉｎ ｖ ｉｔｒｏにおいてトポイソメラーゼＩ仲介ＤＮＡ切断を誘導する高い効力を有す る（Ｗａｎｇ 他、Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．Ｔｏｘｉｃｏｌ． ６：８１３−８１８ （ １９９３））。動物において抗腫瘍活性を有することが知られているプロトベル ベリンのファミリーに属するいくつかの化合物も、トポイソメラーゼＩの毒物で あることが示された。ベルベリンは天然に存在するプロトベルベリンアルカロイ ドの最も集中的に研究されたものの１つであり、マウスのＰ−３８８白血病に対 して弱い抗腫瘍活性を示すことが報告された（Ｓｕｆｆｎｅｓｓ 他、Ｔｈｅ Ａｌｋａｌｏｉｄｓ、Ｖｏｌ．ＸＸＶ、Ｂｒｏｓｓｉ、Ａ．（編）、Ａｃａｄｅ ｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ｐｐ． 17８−１９７（１９８５）） 。 プロトベルベリンのアルカロイド類似体であるコラリン（ｃｏｒａｌｙｎｅ） は、ベルベリンに関していっそう顕著な抗腫瘍活性を有し、マウスにおいてＬ１ ２１０およびＰ３８８白血病に対して有意なｉｎ ｖｉｖｏ活性を示す（Ｚｅｅ −Ｃｈｅｎｇ 他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１７：３４７（１９７４）；Ｚｅｅ −Ｃｈｅｎｇ 他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９：８８２（１９７６））。その 抗腫瘍活性についての分子基準は同定されなかったが、二重らせんまたは三重ら せんＤＮＡに結合する能力は観測された抗白血病活性に寄与しうると推測された （Ｗｉｌｓｏｎ 他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９：１２６１（１９７６）；Ｌ ｅｅ 他、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２：５５９１−５５９７（１９９３） ）。コラリンの抗腫瘍活性は、その比較的低い毒性と組み合わせて、多数の誘導 体の合成についての研究を促進し（Ｚｅｅ−Ｃｈｅｎｇ 他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈ ｅｍ．１７：３４７（１９７４））、そしてコラリンの８−位におけるメチル置 換基の存在および５，６−位における不飽和がマウスにおけるＬ１２１０および Ｐ３８８白血病に強く関連づけらることを示唆した（Ｍｅｓｓｍｅｒ 他、Ｊ． Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６１：１８５８−１８５９（１９７２）；Ｃｕｓｈｍａｎ ｎ 他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２８：１０３１−１０３６（１９８５）；Ｓｔ ｅｒｍｉｔｚ 他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１８：７０８−７１３（１９７５） ；Ｊａｎｉｎ 他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３６：３６８６−３６９２（１９９ ３））。 しかしながら、安全なかつ有効な治療剤を開発するこれらの努力にかかわらず 、改良された細胞障害性を有しかつ薬剤耐性癌細胞に対して有効である抗癌剤が 必要とされている。 発明の要約 本発明は、下記式の化合物を提供する： 式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシ、好ましくは−ＯＣＨ3 であり、Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）ア ルキル、好ましくは−ＯＣＨ3 であるか、あるいは不存在であり、そしてＲ5 は Ｈ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキル、好ましくは−ＣＨ3 であるか、あるいは不存在で あり、そしてＲ8 およびＲ9 は独立して−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ2 ）2 である か、あるいは不存在である。 代りに、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、そしてＲ6およびＲ7 は一緒になって −ＯＣＨ2 Ｏ−である。 １つの態様において、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−である。 他の態様によれば、Ｒ8 は−ＣＨ＝ＣＨ−であり、Ｒ9 は不存在であり、そして Ｒ3 はＨである。他の態様において、Ｒ9 は−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ2 ）2 −であり、Ｒ1 またはＲ2 はＨであり、そしてＲ5 およびＲ8 は不存在である 。なお他の態様において、Ｒ8 およびＲ9 の双方は不存在である。 式（Ｉ）の化合物は、親化合物に関して、トポイソメラーゼＩに対して改良さ れた阻害活性を示し、また、トポイソメラーゼＩＩの有効なインヒビターである 。本発明の化合物は、また、癌細胞に対して有効な細胞障害因子であり、そして カンプトテシン耐性ヒト腫瘍細胞系統に対して細胞障害性活性を有する。 さらに、癌に悩む哺乳動物に、このような癌細胞の増殖を抑制するために有効 な量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる、癌細胞の増殖を抑制する方法 が提供される。 発明の詳細な説明 ＤＮＡトポイソメラーゼはＤＮＡのトポロジー的状態を修飾する核酵素である 。コラリンの類似体が合成され、そしてトポイソメラーゼＩおよびトポイソメラ ーゼＩＩの毒物としてのそれらの活性について評価された。また、これらの類似 体はヒトリンパ芽球細胞系統、ＲＰＭＩ８４０２、およびそのカンプトテシン耐 性変異型、ＣＰＴＫ−５；表皮癌腫細胞系統、ＫＢ３−１；およびグリア芽細胞 腫（ＣＮＳ腫瘍）、ＳＦ−２６８に対する細胞障害性について評価された。 これらの類似体の薬理学的活性は、置換パターンおよび置換基の特質に対する 強い依存性を示した。また、いくつかの１−ベンジルイソキノリンおよび３−フ ェニルイソキノリンが合成された。これ らの化合物は、コラリンの環構造の一部分のみを組込み、トポイソメラーゼの毒 物として、そして細胞障害性について評価された。これらの構造−活性の研究は 、コラリン環系に関連する構造の剛性か薬理学的活性のために重大であることを 示す。これらのコラリン類似体上の３，４−メチレンジオキシ置換基の存在は、 一般に、トポイソメラーゼの毒物として増強された活性に関係づけられた。５， ６−ジヒドロ−３，４−メチレンジオキシ−１０，１１−ジメトキシジベンゾ［ ａ，ｇ］キノリジニウムクロライドは、カンプトテシンに対して同様な活性を有 する、評価されたコラリン類似体の中で、最も効力のあるトポイソメラーゼＩの 毒物であった。この類似体はトポイソメラーゼＩＩの毒物としても例外的効力を 有した。 本発明によれば、癌に悩む哺乳動物に有効量の式（Ｉ）の化合物を投与するこ とによって癌細胞は抑制される。本明細書において使用するとき、「有効量」は ターゲット癌細胞の増殖を抑制する量である。本明細書において記載するように 、適当な投与量は約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲であろう。 本明細書に記載する組成物は、充実哺乳動物腫瘍または血液学的悪性疾患の治 療において有効であると考えられる。これらの充実腫瘍は、頭および頸部、肺、 中皮腫、縦隔、食道、胃、膵臓、肝胆汁系、小腸、結腸、直腸、肛門、腎臓、尿 管、膀胱、前立腺、尿道、陰茎、精巣、婦人科学的器官、卵巣、乳房、内分泌系 、皮膚および中枢神経系の癌；軟質組織および骨の肉腫；および皮膚および眼内 器官の黒色腫を包含する。血液学的悪性疾患は、幼児期の白血病およびリンパ腫 、ホジキン病、リンパ球および皮膚由来のリンパ腫、急性および慢性の白血病、 プラズマ細胞新形成およびエイズに関連する癌を包含する。治療の好ましい哺乳 動物種はヒトおよび家畜化動物である。 文献において報告されている方法に類似する方法を、ジベンゾ［ａ，ｇ］キノ リジニウム誘導体の製造において使用した（Ｚｅｅ−Ｃｈｅｎｇ 他、Ｊ．Ｐｈ ａｒｍ．Ｓｃｉ．６１：９６９−９７１（１９７２））。使用した一般的合成ア プローチをスキーム１において概説する。適当に置換されたジメトキシフェネチ ルアミンを３，４−ジメトキシフェニルアセチルクロライドと反応させると、フ ェニルアセトアミド、５ａ−ｃ、が生成し、これをオキシ塩化リンの存在におい て環化して、３，４−ジヒドロ−１−ベンジルイソキノリン中間体、６ａ−ｃ、 を製造した。これらのジヒドロイソキノリン中間体は、発煙Ｈ2 ＳＯ4 の存在に おいて無水酢酸を使用して、５，６−ジヒドロジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウ ム誘導体、７ａ−ｃ、に直接変換することができる。代りに、６ａ−ｃをフィル スマイヤー−ハーク（Ｖｉｌｓｍｅｉｅｒ−Ｈａａｃｋ）条件下に８ａ−ｃに変 換することができた(Le Ｑｕａｎｇ 他、Ａｃａｄ．Ｓｃ．、ｓｅｒ．Ｃ１３ ４０（１９６８））。また、ジヒドロイソキノリン中間体、６ａ−ｃ、を、炭素 担持パラジウムの存在において、それらの１−ベンジルイソキノリン誘導体、９ ａ−ｃ、に酸化することができる。９ａ−ｃをＨ2 ＳＯ4 の存在において無水酢 酸で処理すると、８−メチルジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウム誘導体、２ａ− ｃ、が生成した。フィルスマイヤー−ハーク条件下に、９ａ−ｃをジベンゾ［ａ ，ｇ］キノリジニウムクロライド誘導体、１０ａ−ｃ、に変換した。スキーム１ スキーム２ １−メチル−３−フェニルイソキノリン誘導体の製造に使用した合成法をスキ ーム２において概説する。文献の手法をわずかに変更した手法を使用して、１， ２−ジメトキシベンゼンおよび１，２−（メチレンジオキシ）ベンゼンを３，４ −ジメトキシフェニル−アセチルクロライドでフリーデル−クラフツアシル化す ると、それぞれ、中間体、１１ａおよび１１ｂ、が得られた。これらのケトンを Ｐ2 Ｏ5 の存在下にアセトニトリルと反応させて、６，７−ジメトキシ−１−メ チル−３−（３，４−ジメトキシフェニル）イソキノリン、１２ａ、および６， ７−メチレンジオキシ−１−メチル−３−（３，４−ジメトキシフェニル）イソ キノリン、１２ｂ、に変換した。 クロロホルム中のブロモトリブロマイドを使用して１２ａのメト キシ基の切り放して、テトラヒドロキシ誘導体、１３、を製造した。化合物１２ ａ、１２ｂ、および１３を、硫酸ジメチルで処理することによって、それぞれ、 それらの２−メチルイソキノリニウム誘導体、１４ａ、１４ｂ、および１５、に 変換した。 哺乳動物のトポイソメラーゼのインヒビターとしてコラリンおよび関係する化 合物の相対活性を、実施例中の表１に記載する。この表に示すように、コラリン およびその類似体のいくつかは、哺乳動物のトポイソメラーゼＩの毒物として、 ある場合においてカンプトテシンに匹敵する、顕著な活性を有した。マウスにお けるＬ１２１０およびＰ３８８白血病に対する１系列のコラリン誘導体の構造の 影響についての以前の研究において、８−アルキル置換の存在、平坦性、および 構造の剛性は抗腫瘍活性のための決定的因子であることが明らかにされた。この 研究において、コラリンの２， ３−位（２ａ、７ａ、８ａ、９ａ、１０ａ）ま たは３，４−位（２ｂ、７ｂ、８ｂ、９ｂ、１０ｂ）に等しい部位にメトキシ置 換基を有する類似体を評価した。さらに、３，４−メチレンジオキシ置換類似体 （２ｃ、７ｃ、８ｃ、９ｃ、１０ｃ）をまた合成し、それらの薬理学的活性を評 価した。これらのコラリン類似体の３，４−位におけるメチレンジオキシ基は、 トポイソメラーゼの毒物としてのそれらの効力に関連する共通の因子であるよう に見える。メチレンジオキシ誘導体、２ｃ、７ｃ、８ｃ、および１０ｃはコラリ ンのそれに匹敵する顕著な活性を保持したばかりでなく、かつまたトポイソメラ −ゼＩＩの毒物として顕著な活性を有した。トポイソメラーゼＩ毒作用の分子の メカニズムがトポイソメラーゼＩＩの毒物の原因となるものに関係することを示 唆する証拠が存在しないので、これらの類似体について、増強された活性がこれ らのトポイソメラーゼの双方について観察されるという観察は予測されてなかっ た。しかしなが ら、置換のパターンおよび置換基におけるこの変更がこれらの分子を、効力のあ るトポイソメラーゼＩおよびＩＩの毒物、ニチジン、上のアルコキシの置換パタ ーンに、いっそう密接に類似させるという事実にかんがみて、これらの結果は首 尾一貫している。 トポイソメラーゼの毒物として１系列のコラリン類似体の相対効力の評価にお いて、種々のコラリン誘導体のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性について報告された構 造−活性の関係に比較したとき、作用の有利である構造的要件において、また、 いくつかの差が認められた。この系列の化合物（８ｃ）における最良のトポイソ メラーゼＩの毒物は８−アルキル置換基を欠如し、これはマウスにおける抗腫瘍 活性についての構造−活性の研究と一致しないことに注目してみることは特に興 味深いことである。８ｃ（０．27μＭ、０．１μｇ／ｍｌ）およびカンブトテシ ン（０．２９μＭ、０．１μｇ／ｍｌ）についてほとんど等しい濃度で見出され るトポイソメラーゼＩの存在において観察されたＤＮＡの完全な切断により、８ ｃの潜在的活性は明らかである。 さらに、８ｃの５，６−位が飽和されているために、８ｃはそうでなければ平 らな分子の中にキンクを有する。マウスにおけるコラリン誘導体の抗腫瘍活性に ついての以前の研究において、この位置における不飽和の存在は活性の減少に関 係づけられた。平らであるおよび／または８−メチル置換基を有する、すべての 他の同様な置換分子２Ｃ、７Ｃ、および１０ｃは、トポイソメラーゼＩの毒物と して、８ｃに比較して１０倍低い活性を有する。８ｃの位置異性体であるベルベ リンは、同一条件下にトポイソメラーゼＩの毒物としてアッセイしたとき、不活 性である。化合物２ｂ、７ｂ、８ｂ、および１０ｂは、トポイソメラーゼＩの毒 物として有意な活性を示さなかった。したがって、３，４−メチレンジオキシ置 換基に関して 、これらのコラリン類似体の３，４−位におけるジメトキシ置換基はトポイソメ ラーゼＩの毒物としてそれらの効力を劇的に変更した。８ｃはトポイソメラーゼ ＩＩの毒物として適度の活性を示したか、２ｃおよび１０ｃを包含する、これら の類似体のいくつかは、トポイソメラーゼＩＩの毒物として効力のある活性を示 した（表１）。 １０ａを除外した、２，３−ジメトキシコラリン誘導体のすべては、トポイソ メラーゼＩＩの毒物として有意な活性をもたない選択的トポイソメラーゼＩの毒 物である。２ａ、７ａ、および８ａを使用して観測された結果と対照的に、化合 物１０ａはトポイソメラーゼＩの毒物として不活性であり、トポイソメラーゼ１ １に対して有意な活性を示した。トポイソメラーゼの毒物として１０ａおよび他 の２，３−ジメトキシコラリン誘導体の能力に関連する活性のこの例外的な差に ついての基礎は、この時において不明瞭である。 構造的剛性は、この系列の化合物内のトポイソメラーゼの毒物としての活性の 保持のために決定的な要件であろう。化合物９ａ、９ｂおよび９ｃは、８−位に おける炭素ならびに第四級アンモニウム基に関連するカチオン電荷を欠如するコ ラリンの開環類似体と見なすことができる。これらの類似体のすべての３つは、 トポイソメラーゼＩまたはトポイソメラーゼ１１の毒物として非常に弱い活性を 示した。 １−メチル−３−フェニルイソキノリン誘導体１２ａおよび１２ｂおよびそれ らのＮ−メチル化第四級化類似体１４ａおよひ１４ｂはコラリンのＣ5 −Ｃ6 部 分を欠如する開環類似体と見なすことかでき、有意なトポイソメラーゼ毒作用活 性を示さなかった。また、それぞれ、化合物１２ａ／１２ｂおよび１４ａ／１４ ｂのポリフェノール系類似体である化合物１３および１５は、トポイソメラーゼ ＩまたはＩＩの毒物として比較的無効であった。 ヒトリンパ芽球細胞系統、ＲＰＭＩ８４０２に対するコラリンおよびこれらの 類似体の細胞障害性を表１に要約する。ＭＴＡアッセイを使用して測定した細胞 障害性と、トポイソメラーゼＩまたはＩＩの毒物としての効力との間において、 明瞭な相関は観察されなかった。カンプトテシンと対照的に、これらの誘導体は カチオン第四アンモニウム化合物として存在する。トポイソメラーゼＩを阻害す るこれらの誘導体のいくつかの固有の活性に基づいて、コラリンの構造的に剛性 の類似体の構造に関連する第四級アンモニウム官能価は細胞の吸収を制限しかつ それらの細胞障害活性を減衰する主要な因子であうる可能性が存在する。コラリ ンおよびベルベリンの融合した平らなカチオン性芳香族環系は、ＤＮＡを挿入す ることか示された。さらに、コラリンはＤＮＡ三重らせんに結合することが示さ れた。これらのプロセスがトポイソメラーゼの毒作用およびこれらの分子の相互 作用におけるカチオン部分の役割に関係づけられる程度は、完全には確立されて ない。 この研究において合成されかつ細胞障害性について評価され、トポイソメラー ゼ毒作用として不活性であった類似体のいくつかは、有意な細胞障害性を示した 。詳しくは、化合物９ｃ、１３、ｌ４ｂおよび１５はＲＰＭＩ８４０２細胞に対 して明らかな細胞障害性を有した。これらの場合において、それらの細胞障害性 に関連する特定の薬理学的ターゲットは未知である。 また、トポイソメラーゼＩの突然変異の形態を含有するカンプトテシン耐性細 胞系統、ＣＰＴ−Ｋ５、において、これらの化合物の細胞障害活性を評価した。 この研究においていっそう効力のあるトポイソメラーゼＩの毒物（２ａ、２ｃ、 ７ａ、７ｃ、８ａ、８ｃ、１０ｃ）の細胞障害性にかんがみて、ＲＰＭＩ８４０ ２細胞のそれ らに比較してＣＰＴ−Ｋ５細胞について得られたＩＣ50 値の間に差が存在した 。これらのコラリン誘導体の細胞障害性に関連する薬理学的ターゲットがトポイ ソメラーゼＩの毒物としてのそれらの活性に関係するという指示として、これら のデータを見ることかできた。しかしながら、トポイソメラーゼＩの毒物として 不活性である類似体について認めるすることができる同様な差にかんかみて、こ の差をＣＰＴ−Ｋ５における特別にトポイソメラーゼＩの突然変異の形態に対す る作用に帰属させることができない。また、評価した化合物についてのこれらの 細胞系統の間の細胞障害性の差はカンプトテシンに関して小さいことは明らかで ある。 この研究において、コラリン類似体の間の小さい構造的変動は、トポイソメラ ーゼＩまたはトポイソメラーゼＩＩの毒物として、それらの活性に深遠な衝撃を 有することがあることが証明された。３，４−位にメチレンジオキシ置換基が存 在する場合、コラリン類似体はトポイソメラーゼＩおよびＩＩの双方の毒物とし て増強した活性を示した。これらの結果は、トポイソメラーゼＩＩとしてのニチ ジンの効力のある活性およびこれらのコラリン誘導体に対するニチジンの空間的 関係と一致する。この研究において、トポイソメラーゼＩＩの毒物として活性を ほとんどもたないトポイソメラーゼＩの毒物として効力のある活性を有するコラ リン類似体は、２，３−位にメトキシ置換基を有した。これらのデータか示唆す るように、ニチジンの同様に置換された類似体、すなわち、２，３−メチレンジ オキシ置換基と反対に１，２−ジメトキシ誘導体は、哺乳動物のトポイソメラー ゼＩまたはＩＩを阻害するそのポテンシャルに関して同様な選択性を示すことが できた。 また、化合物７ｃをグリア芽細胞腫細胞系統ＳＦ−２６８に対して試験した。 これらの結果を表２に表す。このような腫瘍細胞に対 する類似体の有効性および選択性は、活性な輸送が起こっているであろうことを 示唆する。髄腔内注射による本発明の類似体の投与は、全身的毒性をわずかにし てＣＮＳ腫瘍に対する選択的細胞障害性を達成する手段を提供する。 本明細書において記載する生物学的に活性な化合物の薬学上許容される塩は、 特許請求する方法において同様に使用することができる。有機または無機の塩基 、ＮａＯＨ、Ｎａ（ＣＯ3 ）2 、ＮａＨＣＯ3 、ＫＯＨおよびその他、ならびに 酸、例えば、塩酸およびスルホ酢酸およびその他を使用して、薬学上許容される 塩を形成することができる。 本明細書において記載する化合物および／またはそれらの塩は純粋な化学物質 として投与することかできるか、医薬組成物として活性成分を提供することが好 ましい。したがって、本発明は、さらに、１種または２種以上の化合物および／ またはそれらの薬学上許容される塩と、１種または２種以上の薬学上許容される 担体と、必要に応じて、他の治療成分および／または予防成分とを含んでなる医 薬組成物の使用を提供する。１種または２種以上の担体は、医薬組成物の他の成 分と適合性でありかつそれらの受容体に対して有害ではないという意味において 「許容され」なくてはならない。 医薬組成物は、経口的または非経口的（筋肉内、皮下および静脈内を包含する ）投与に適当であるものを包含する。組成物は、適当ならば、個々の単位投与形 態で好都合に提供することができ、そして薬学分野においてよく知られている任 意の方法により製造することができる。このような方法は、活性化合物を液状担 体、固体状基質、半固体状担体、微細固体状担体またはそれらの組合わせと一緒 にし、次いで、必要に応じて、生成物を所望の送出し系に造形する工程を包含す る。 経口投与に適当な医薬組成物は、各々が前もって決定した量の活性成分を含有 する、個々の単位投与形態、例えば、硬質または軟質のゼラチンカプセル、カシ ェ剤または錠剤として；粉剤としてまたは粒剤として；溶液、懸濁液として、ま たは乳濁液として提供することができる。また、活性成分はボーラス、舐剤また はペーストとして提供することができる。経口投与のための錠剤またはカプセル 剤は慣用の賦形剤、例えば、結合剤、充填剤、滑剤、崩壊剤、または湿潤剤を含 有することができる。錠剤をこの分野においてよく知られている方法に従い、例 えば、腸溶コーティングにより被覆することができる。 経口液状製剤は、例えば、水性または油性の懸濁液、溶液、乳濁液、シロップ 剤またはエリキシル剤の形態であるか、あるいは使用前に水または他の適当なベ ヒクルで構成するための乾燥生成物として提供することができる。このような液 状製剤は慣用の添加剤、例えば、懸濁剤、乳化剤、非水性ベヒクル（これは食用 油を包含する）、または保存剤を含有することかできる。 また、化合物は非経口投与（例えば、注射、例えば、ボーラス注射または連続 的注入による）のために処方することができ、そして単位投与形態においてアン プル、前もって充填した注射器、小さいボーラス注入容器または保存剤を添加し た多数回投与の容器で提供することができる。組成物は、油性または水性のベヒ クル中の懸濁液、溶液、または乳濁液のような形態を取ることができ、そして処 方剤、例えば、懸濁剤、安定剤および／または分散剤を含有することができる。 また、活性成分は、無菌の固体の無菌的単離によるか、あるいは、使用前に、適 当なベヒクル、例えば、無菌の、無発熱物質の水で構成するために、溶液から凍 結乾燥により得られた、粉末の形態であることができる。 表皮への局所投与のために、化合物は軟膏、クリームまたはローションとして 処方するか、あるいは経皮パッチの活性成分として処方することができる。適当 な経皮送達系は、例えば、Ｆｉｓｈｅｒ 他（米国特許第４，７８８，６０３号 ）またはＢａｗａｓ 他（米国特許第４，９３１，２７９号、第４，６６８，５ ０４号および第４，７１３，２２４号）に開示されている。軟膏およびクリーム は、例えば、水性または油性の基剤を使用して、適当な増粘剤またはゲル化剤を 添加して処方することができる。ローションは水性または油性の基剤を使用して 処方することかできそして、一般に、また、１種または２種以上の乳化剤、安定 剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、または着色剤を含有するであろう。また、活性成 分はイオン導入法により、例えば、米国特許第４，１４０，１２２号、第４，３ ８３，５２９号、または第４，０５１，８４２号に開示されているように、送達 することができる。 口の中への局所投与に適当な組成物は、単位投与形態、例えば、香味剤添加し た基剤、例えば、スクロースおよびアカシアゴムまたはトラガカント中の活性成 分を含んでなるロゼンジ；不活性基剤、例えば、ゼラチンおよびグリセリンまた はスクロースおよびアカシアゴム中の活性成分を含んでなるトローチ；粘液付着 性ゲル、および適当な液状担体中の活性成分を含んでなるうがい薬を包含する。 必要に応じて、前述の組成物は、使用する活性成分の持続放出を提供するよう に、例えば、活性成分をある種の親水性ポリマーの基質、例えば、天然のゲル、 合成ポリマーのゲルまたはそれらの混合物を含んでなる基質と組合わせることに よって持続放出を提供するように適合させることができる。 本発明による医薬組成物は、また、他のアジュバント、例えば、香味剤、着色 剤、抗菌剤、または保存剤を含有することかできる。 さらに、治療に要求される化合物、それらの塩または誘導体の量は選択した特 定の塩とともに変化するばかりでなく、かつまた投与のルート、治療する症状の 特質および患者の年令および症状とともに変化し、そして究極的に主治医または 臨床医の判断に従うであろうことを当業者は理解するであろう。 しかしながら、一般に、適当な投与量は、約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重 ／日、例えば、約１０〜約７５ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲、例えば、３〜約５０ ｍｇ／ｋｇ受容体体重／日、好ましくは６〜約９０ｍｇ／ｋｇ／日、最も好まし くは１５〜約６０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であろう。 化合物は好都合には単位投与形態、例えば、５〜１０００ｍｇ、好都合には１ ０〜７５０ｍｇ、最も好都合には５０〜５００ｍｇの活性成分／単位投与形態を 含有する単位投与形態で投与される。 理想的には、活性成分は約０．５〜約７５μＭ、好ましくは約１〜約５０μＭ 、最も好ましくは約２〜約３０μＭの活性化合物のピーク血漿濃度を達成するよ うに投与すべきである。これは、例えば、必要に応じて生理食塩水中の、活性成 分の０．０５〜５％の溶液の静脈内注射により達成することができるか、あるい は約１〜１００ｍｇの活性成分を含有するボーラスとして経口的に投与すること ができる。望ましい血液レベルは連続的注入により約０．０１〜５．０ｍｇ／ｋ ｇ／時を提供するか、あるいは約０．４〜１５ｍｇ／ｋｇの１種または２種以上 の活性成分を含有する間欠的注入により維持することができる。 望ましい投与量は単一の投与量において、あるいは適当な間隔、例えば、２、 ３、４またはそれより多い回数／日において投与される分割投与量で提供するこ とができる。細分投与量それ自体をさらに分割することができ、例えば、多数の 個々のゆるく間隔を置いた 投与、例えば、注入器からの多数回の吸入に分割することができるか、あるいは 眼の中への複数の点滴剤の適用により分割することができる。 種々の特定の、好ましい態様または技術を参照して、本発明を説明した。しか しながら、本発明の精神および範囲から逸脱しないで多数の変化および変更が可 能であることを理解すべきである。 下記の実施例により、本発明を例示する。これらの実施例は本発明を限定しな い。 実施例 実施例Ｉ−一般的 トマス−フーバー・ユニメルト（Ｔｈｏｍａｓ−Ｈｏｏｖｅｒ Ｕｎｉｍｅｌ ｔ）毛管融点装置を使用して、融点を測定した。パーキン・エルマー（Ｐｅｒｋ ｉｎ Ｅｌｍｅｒ）１６００フーリエ変換分光計を使用して、赤外スペクトルの データ（ＩＲ）を得、cm-1で報告する。プロトン（1 Ｈ ＮＭＲ）および炭素（13 Ｃ ＮＭＲ）核磁気共鳴を、それぞれ、２００ＭＨｚおよび５０ＭＨｚにお いて、バリアン・ゲミニ（Ｖａｒｉａｎ−Ｇｅｍｉｎｉ）−２００フーリエ変換 分光計で記録した。ＮＭＲスペクトルをＣＤＣｌ3 中で記録し（特記しない限り ）化学シフトをテトラメチルシラン（ＴＭＳ）からのダウンフィールドのδ単位 で報告する。結合定数をヘルツで報告する。生物医学および生物有機質量分析に ついてのワシントン大学源（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒ ｅｓｏｕｒｃｅ ｆｏｒ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏ−Ｏｒｇａｎ ｉｃ Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）から、質量スペクトルを得た。カ ラムクロマトグラフィーは、示された溶媒合系を使用してＳｉｌｉＴｅｃｈ３２ −６３μｍ（ＩＣＮ Ｂｉｏ ｍｅｄｉｃａｌｓ、ドイツ国エシュウェッゲ）で実施したフラッシュクロマトグ ラフィーを意味する。燃焼分析をアトランティック・マイクロラブス・インコー ポレーテッド（Ａｔｌａｎｔｉｃ Ｍｉｃｒｏｌａｂｓ， Ｉｎｃ．、ジョージ ア州ノークロス）により実施した。 実施例ＩＩ−８−メチルジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート （２ａ−ｃ）の合成の一般的手順 発煙（２０％）硫酸（１ｍｌ）を４ｍｌの新しく蒸留した無水酢酸に添加して 、激しく発熱性の反応を発生させ、混合物はワイン・レッドの色となった。この 混合物を８５〜９０℃に１０分間加熱した。次いで１−ベンジルイソキノリンの 溶液（９ａ−ｃ）１ｍｌの新しく蒸留した無水酢酸中の２．３５ｍｍｏｌ）を窒 素雰囲気下にワイン・レッドの硫酸溶液に添加し、生ずる混合物を８５〜９０℃ に３０〜６０分間加熱した。次いで反応混合物を室温に冷却し、５ｍｌのメタノ ールを滴下し、３０分間撹拌した。次いで混合物を氷浴中で冷却し、さらに３０ 分間撹拌した。得られた固体状生成物を濾過し、連続的に２回２ｍｌの蒸留水で 、２回２ｍｌのメタノールで、２回１０ｍｌの水で洗浄した。次いで粗生成物を 熱メタノールから再結晶化させて、所望生成物が黄色結晶質物質として９０〜９ ５％の収率で得られた。 ８−メチル−２，３，１０，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］キノリ ジニウムアセトサルフェート（２ａ）：９ａから製造した；融点２８０℃；ＩＲ １７３５；1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ３．２８（ｓ，３Ｈ）、３．９４ （ｓ，３Ｈ）、４．０３（ｓ，３Ｈ)、４．０９（ｓ，６Ｈ）、７．４２（ｓ， １Ｈ）、７．５３（ｓ，１Ｈ）、７．８０（ｄ， １Ｈ，Ｊ＝８．０）、７．９ ８（ｓ，１Ｈ）、８．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０）、９．２８（ｓ ，１Ｈ）；13 Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ１７．５、５６．２、５６．６ 、５７．２、１０４．１、１０５．０、１０７．３、１０８．１、１１６．０、 １１９．９、１２０．８、１２１．９、１２３．７、１２４．７、１３３．５、 １３４．５、１４５．４、１５１．６、１５２．７、１５２．９、１５６．３； 分析、Ｃ24 Ｈ25 ＮＯ9 Ｓについての計算値：Ｃ，５７．２５、Ｈ，５．００、 Ｎ，２．７８；実測値：Ｃ，５７．０７、Ｈ，５．１７、Ｎ，２．７２。 ８−メチル−３，４，１０，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］キノリ ジニウムアセトサルフェート（２ｂ）：９ｂから製造した；融点２６７−２６９ ℃分解（文献14融点２６７−２６９℃分解）；ＩＲ（ヌジョール）２７６２、１ ７０２、１６４２、１５９５、１５４６；1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ３ ．４０（ｓ，３Ｈ）、３．４３（ｓ，３Ｈ）、４．００（ｓ，３Ｈ）、４．０９ （ｓ，３Ｈ）、４．１３（ｓ，６Ｈ）、７．７７（ｓ，１Ｈ）、７．８５（ｄ， ２Ｈ，Ｊ＝８．１)、８．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１）、８．７５（ｄ，１Ｈ ，Ｊ＝８．０）、８．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０）、９．６７（ｓ，１Ｈ）；13 Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ１７．７、５６．８、５６．９、５７．３ 、６１．６、１０４．９、１０５．５、１１５．１、１１６．３、１１７．ｌ） １１９．５、１２１．３、１２２．３、１２２．９、１２６．９、１３４．５、 １３５．５、１４７．２、１５３．１、１５３．７、１５６．９：分析、Ｃ24 H25 NＯ9 Ｓについての計算値：Ｃ，５７．２４、Ｈ，５．００、Ｎ，２．７８； 実測値：Ｃ，５７．０８、Ｈ，５．３５、Ｎ，２．７５。 ８−メチル−３，４−メチレンジオキシ−１０，１１−ジメトキシジベンゾ［ ａ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート（２ｃ） ：９ｃから製造した；融点＞２７０℃分解；ＩＲ（ヌジョール）３４１７、１７ ２７、１６４８、１６１５、１５５１；1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ３． ４１（ｓ，３Ｈ）、４．１３（ｓ，３Ｈ）、６．４６（ｓ，２Ｈ）、７．７０（ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７）、７．７６（ｓ，１Ｈ）、７．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８ ．０）、7.８９（ｓ，１Ｈ）、８．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７）、８．８４（ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０）、９．６４（ｓ，１Ｈ）：分析、Ｃ23 Ｈ21 ＮＯ9 Ｓ・ ２．２５Ｈ2 Ｏについての計算値：Ｃ，５２．３２、Ｈ，４．４４、Ｎ，２．６ ５；実測値：Ｃ，５２．２１、Ｈ，４．２４、Ｎ，２．６８。ＨＲＭＳ、Ｃ21 Ｈ18 ＮＯ4 についての計算値：３８４．１２３６；実測値：３４８．１２３７ 。 実施例ＩＩＩ−フェニルアセトアミド（５ａ−ｃ）の合成の一般的手順 クロロホルム（６ｍｌ）中の３，４−ジメトキシフェニルアセチルクロライド （４ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気下に、適当に置換されたフェネチルアミン （４ｍｍｏｌ）、クロロホルム（６ｍｌ）、および２Ｍの炭酸ナトリウム（３ｍ ｌ）の混合物に０℃において激しく撹拌しながら滴下した。反応が完結するまで （１〜３時間）撹拌を０℃において続けた。追加の２ｍｌのクロロホルムおよび ２ｍｌの水を使用して、反応混合物を分液漏斗に移した。有機相を分離し、水相 を５ｍｌのクロロホルムで抽出した。一緒にしたクロロホルム抽出液を連続的に ５ｍｌの０．１Ｎ ＮａＯＨ、５ｍｌの０．１Ｎ ＨＣ１および５ｍｌの飽和Ｎ ａＣｌ溶液で洗浄した。クロロホルム抽出液を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、蒸発させ た。粗生成物をメタノールから結晶化させると、純粋なアミドが白色針状結晶と して９５〜１００％の収率で得られた。 Ｎ−（３，４−ジメトキシフェニルエチル）−２−（３，４−ジ メトキシフェニル）アセトアミド（５ａ）：３，４−ジメトキシフェニルエチル アミンおよび３，４−ジメトキシフェニルアセチルクロライドから製造した；融 点１２５℃(文献17融点１２３−１２５℃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３３２７、３０６ ４、３００７、２９１６、２８４０、１６４２、１６０８、１５９１；1 Ｈ Ｎ ＭＲδ２．６７（ｔ，２Ｈ）、３．４０−３．４７（ｍ，４Ｈ）、３．８３（ｓ ，６Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、３．８８（ｓ，３Ｈ）、５．３０（ｂｒｓ， １Ｈ）、６．５２−６．８６（ｍ，６Ｈ）；13 Ｃ ＮＭＲδ３５．６、４１． ２、４３．５、５６．３、５６．４、１１１．７、１１２．２、１１５．８、１ ２１．１、１２７．５、１２７．９、１２８．５、１２９．１、１３１．１、１ ３１．６、１３７．３、１４８．１、１４９．５、１５８．５、１７１．８。 Ｎ−（２，３−ジメトキシフェニルエチル）−２−（３，４−ジメトキシフェ ニル）アセトアミド（５ｂ）：２，３−ジメトキシフェニルエチルアミン（Ｌｉ ｎｄｅｍａｎｎ、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ）１９４９、３２、ｐ．６９− ７５）および３，４−ジメトキシフェニルアセチルクロライドから製造した；融 点８０℃（文献29融点７９−８０℃）；ＩＲ３３１５、２９６２、２８３８、１ ６３６、１５９３、１５４８；1 Ｈ ＮＭＲδ２．６１（ｔ，２Ｈ）、３．２２ −３．３０（ｍ，４Ｈ)、３．５８（ｓ，３Ｈ）、３．６４（ｓ，６Ｈ）、３． ６７（ｓ，３Ｈ）、６．２２（ｂｒｓ，１Ｈ）、６．４４−６．７９（ｍ，６Ｈ ）；13 Ｃ ＮＭＲδ３０．０、４１．０、４３．７、５５．９、５６．２、５ ６．３、６０．９、１１２．２、１１１．９、１１２．９、１２２．０、１２２ ．６、１２４．４、１２７．９、１３３．１、１４７．５、１４８．５、１４９ ．５、１５３．１、１７１．９。 Ｎ−（２，３−メチレンジオキシフェニルエチル）−２−（３， ４−ジメトキシフェニル）アセトアミド（５ｃ）：２，３−メチレンジオキシフ ェニルエチルアミン28よび３，４−ジメトキシフェニルアセチルクロライドから 製造した；融点１２４℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３２９７、３０８４、２９３５、１６ ４３、１４５８；1 ＨＮＭＲδ２．６６（ｔ，２Ｈ）、３．３６−３．４２（ｍ ，４Ｈ）、３．７５（ｓ，３Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、５．７３（ｓ，２Ｈ ）、５．８１（ｂｒｓ，１Ｈ）、６．６１−６．７６（ｍ，６Ｈ）；13 Ｃ Ｎ ＭＲδ２９．８、３９．７、４３．８、５６．４、１０１．０）１０７．５、１ １１．９、１１２．９、１２０．７、１２２．０）１２２．１、１２３．３、１ ２７．７、１４６．０）１４７．５、１４８．７、１４９．６、１７１．８；分 析、Ｃ19 Ｈ21 ＮＯ5 についての計算値：Ｃ，６６．４６、Ｈ，６．１６、Ｎ， ４．０８；実測値：Ｃ，６６．３ＬＨ，６．１６、Ｎ，４．０７。実施例ＩＶ− ジヒドロイソキノリン（６ａ−ｃ）の合成の一般的手順 アセトアミド（５ａ−ｃ、２．４７ｍｍｏｌ）をオキシ塩化リン（５．６９ｍ ｍｏｌ）および乾燥トルエン（１０ｍｌ）と、窒素雰囲気下に２０〜６０分間、 還流させた。次いで溶媒を注意して蒸発させ、残留物を約５ｍｌのメタノール中 に溶解した。この溶液を約１０〜１５ｍｌの冷水中に注いだ。１０ｍｌのエーテ ルで２回洗浄した後、１０ｇの氷を水性層に添加した。窒素を氷冷水性層を通し て泡立てて入れ、ｐＨを濃水酸化アンモニウムでｐＨ１０に調節した。次いで水 性層を塩化ナトリウムで飽和させ、２０ｍｌのエーテルで５回抽出した。一緒に したエーテル抽出液を無水塩化カリウムで乾燥し、濾過し、蒸発させると、ジヒ ドロイソキノリン、６ａ−ｃ、が得られた。これらの化合物は容易に酸化するの で、空気への暴露を回避した。ジヒドロイソキノリンをそれ以上精製しないで７ ａ−ｃ、８ａ−ｃ、および９ａ−ｃの製造に使用した。 実施例Ｖ−５，６−ジヒドロ−８−メチルジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムア セトサルフェート（７ａ−ｃ）の合成の一般的手順 各ジヒドロイソキノリン（６ａ−ｃ、２．３５ｍｍｏ１）をｌ．０ｍｌの新し く蒸留した無水酢酸中に溶解した。８−メチルジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウ ムアセトサルフェート（２ａ−ｃ）の合成に使用した手順に類似する手順を用い た。前の手順において用いた対応する１−ベンジルイソキノリン中間体の存在下 に、それぞれのジヒドロイソキノリン中間体を使用した。得られた生成物を沸騰 するメタノールから結晶化させると、輝いた黄色の結晶質生成物が８５〜９０％ の収率で得られた。 ５，６−ジヒドロ−８−メチル−２，３，１０，１１−テトラメトキシジベン ゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート（７ａ）：６ａから製造した； 融点２７８−２７９℃(文献１３２７７−２７９℃)；ＩＲ（ＫＢｒ）３４５０、 ２９４６、１７２５、１６１１、１５６７；1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ ３．１８（ｔ，２Ｈ）、３．２３（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，３Ｈ）、３．８ ９（ｓ，３Ｈ）、３．９４（ｓ，３Ｈ）、４．０８（ｓ，６Ｈ）、４．７５（ｔ ，２Ｈ）、７．１３（ｓ，１Ｈ）、７．６３（ｓ，２Ｈ）、７．８０（ｓ，１Ｈ ）、８．７４（ｓ，１Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ１７．８、２６ ．２、４９．８、５６．ｌ、５６．３、５６．８、５７．３、１０６．２、１０ ６．４、１０９．１、１１０．９、１１７．５、１２０．０） １２２．２、１ ２８．６、１３５．６、１３９．０、１４８．９、１５１．６、１５２．２、１ ５５．４、１５６．９、１６７．５。 ５，６−ジヒドロ−８−メチル−３，４，１０，１１−テトラメトキシジベン ゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート（７ ｂ）：６ｂから製造した；融点２５５−２５６℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４３２、２ ９４６、１７２３、１６０９、１５６７、１５０２、１４２９；1 Ｈ ＮＭＲ（ ＤＭＳＯ−ｄ6）δ３．２０（ｔ，２Ｈ）、３．２２（ｓ，３Ｈ）、３．８２（ ｓ，３Ｈ）、３．９４（ｓ，３Ｈ）、４．０７（ｓ，６Ｈ）、４．７４（ｔ，２ Ｈ）、７．２６（ｄ， ＩＨ，Ｊ＝８．９)、７．６７（ｓ， ＩＨ）、７．７ ８（ｓ，１Ｈ）、７．８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９）、８．６７（ｓ，１Ｈ）；13 Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ１７．７、２１．０、４９．４、５６．３、 ５６．８、５７．３、５６．８、５７．３、６０．７、１０６．３、１１２．７ 、１１７．６、１２１．３、１２２．３、１２２．９、１２８．９、１３５．５ 、１３８．９、１４４．７、１５２．３、１５４．６、１５５．３、１５６．９ 、１６７．６；分析、Ｃ24Ｈ27ＮＯ9Ｓ・１．２５Ｈ2 Ｏについての計算値：Ｃ ，５４．５９、Ｈ，５．６３、Ｎ，２．６５；実測値：Ｃ，５４．５９、Ｈ，５ ．６０、Ｎ，２．６７；ＨＲＭＳ，．Ｃ22Ｈ24ＮＯ4 についての計算値：３６６ ．１７０５；実測値：３６６．１７０６。 ５，６−ジヒドロ−８−メチル−３，４−メチレンジオキシ−１０，１１−ジ メトキシジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート（７ｃ）：６ｃ から製造した；融点＞２７０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４３４、２９２０、１７２４ 、１６１７；1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ３．１６（ｔ，２Ｈ）、３．２ ３（ｓ，３Ｈ）、３．４０（ｓ，３Ｈ）、４．０８（ｓ，６Ｈ）、４．７６（ｔ ，２Ｈ）、６．２３（ｓ，２Ｈ）、７．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０）、７．６ ７（ｓ，１Ｈ）、７．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、 ８．６９（ｓ，１Ｈ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ１７．９、２０． ８、４９．２、５６．８、５ ７．３、１０２．７、１０６．３、１０６．５、１０８．５、１１６．２、１１ ８．１、１２１．２、１２２．４、１２２．７、１３５．５、１３９．０、１４ ４．２、１４９．６、１５２．４、１５５．６、１５７．０、１６７．６；分析 、Ｃ23Ｈ23ＮＯ9 Ｓ−Ｈ2 Ｏについての計算値：Ｃ，５４．４３、Ｈ，４．９６ 、Ｎ，２．７６；実測値：Ｃ，５４．３９、Ｈ，４．９６、Ｎ，２．７４；ＨＲ ＭＳＮＣ2lＨ20ＮＯ4 についての計算値：３５０．１３９２；実測値：３５０． １３８４。 実施例ＶＩ−５，６−ジヒドロジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロライド（ ８ａ−ｃ）の合成の一般的手順 冷却した（０℃）ジメチルホルムアミドにオキシ塩化リン（７．４２ｍｍｏｌ ）を窒素雰囲気下に添加した。この混合物を０℃において１５分間撹拌した。次 いで５．５ｍｌのジメチルホルムアミド中のそれぞれのジヒドロイソキノリン（ ２．７ｍｍｏｌ）溶液を添加し、０℃において１〜２時間撹拌した。次いで反応 混合物を１００℃において１〜２時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、２ ０gの氷および１０ｍｌの６Ｎ ＨＣｌを含有する混合物中に注いだ。生ずる沈 澱を濾過し、連続的に５ｍｌの冷水で２回、１０ｍｌのエーテルで２回洗浄した 。各場合における最終生成物をメタノールから再結晶化した。 ５，６−ジヒドロ−２，３，１０，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］ キノリジニウムクロライド（８ａ）：６ａから製造した；融点２６１−２６２℃ ；ＩＲ（ヌジョール）１６６４、１６６０、１５６４；1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ3 Ｏ Ｄ）δ３．３５（ｔ，３Ｈ）、３．９１（ｓ，３Ｈ）、４．０２（ｓ，３Ｈ）、 ４．１０（ｓ，３Ｈ）、４．１７（ｓ，３Ｈ）、５．０４（ｔ，２Ｈ）、７．１ ０（ｓ，１Ｈ）、７．７８（ｓ，１Ｈ）、８．６０（ｓ，１Ｈ）、 ９．６４（ｓ，１Ｈ）、１０．１２（ｓ，１Ｈ）；13 Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ ）δ２８．１、５６．４、５６．７、５６．９、５７．３、５７．８、１０４． ４、１０６．６、１０７．５、１０８．１、１０８．２、１０９．０）１１０． ２、１１２．４、１１２．５、１１２．８、１１５．４、１１７．７、１１９． ６、１３０．４、１４６．５；分析、Ｃ21Ｈ22ＮＯ4 Ｃ１・０．７５Ｈ2 Ｏにつ いての計算値：Ｃ，６２．８４、Ｈ，５．９０、Ｎ，３．４９；実測値：Ｃ，６ ２．７９、Ｈ，５．８４、Ｎ，３．４６；ＨＲＭＳ、Ｃ21Ｈ22ＮＯ4 についての 計算値：３５２．１５４９：実測値：３５２．１５４９。 ５，６−ジヒドロ−３，４，１０，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］ キノリジニウムクロライド（８ｂ）：６ｂから製造した；融点２５２℃；ＩＲ（ ヌジョール）３３８３、１６３２、１６００、１５７１；1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳ Ｏ−ｄ6 ）δ３．２７（ｔ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．９５（ｓ，３ Ｈ）、４．０１（ｓ，３Ｈ）、４．０８（ｓ，３Ｈ）、４．８０（ｔ，２Ｈ）、 ７．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９）、７．６８（ｓ，１Ｈ）、７．７３（ｓ，１ Ｈ）、７．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９）、８．８２（ｓ，１Ｈ）、９．６０（ ｓ，１Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ２０．９、５４．４、５６．３ 、５６．６、５６．９、６０．６、１０５．７、１０６．７、１１２．７、１１ ８．４、１２０．４、１２２．４、１２２．６、１２９．１、１３６．８、１３ ８．５、１４５．２、１４５．７、１５２．５、１５４．９、１５７．６；分析 、Ｃ21H22ＮＯ4 Ｃｌ・１．５Ｈ2 Ｏについての計算値：Ｃ，６０．７９、Ｈ， ５．７１、Ｎ，３．３８；実測値：Ｃ，６０．７９、Ｈ，５．７１、Ｎ，３．３ ８；ＨＲＭＳ、Ｃ20Ｈ18ＮＯ4 についての計算値：３３６．１２３６；実測値： ３３６．１２ ４４。 ５，６−ジヒドロ−３，４−メチレンジオキシ−１０，１１−ジメトキシジベ ンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロライド（８ｃ）：６ｃから製造した；融点＞ ２８０℃；ＩＲ（ヌジョール）２７２５、１６２２、１５７４；1 Ｈ ＮＭＲ（ ＣＤ3 ＯＤ）δ３．２７（ｔ，２Ｈ）、４．０７（ｓ，３Ｈ）、４．１３（ｓ， ３Ｈ）、４．６２（ｔ，２Ｈ）、６．１６（ｓ，２Ｈ）、７．０３（ｄ，１Ｈ， Ｊ＝８．４）、７．６０（ｓ，１Ｈ）、７．６３（ｓ，１Ｈ）、７．７５（ｄ， １Ｈ，Ｊ＝８．４）、８．６０（ｓ，１Ｈ）、９．３４（ｓ，１Ｈ）；13Ｃ Ｎ ＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）δ２２．２、５６．０、５７．３、５７．７、１０４．３、 １０６．６、１０７．５、１０９．６、１１７．３、１２０．１、１２２．３、 １２２．９、１２４．６、１３９．２、１４６．５、１４６．６、１５２．０、 １５５．０、１６０．３；分析、Ｃ20Ｈ18ＮＯ4 Ｃ１・２Ｈ2 Ｏについての計算 値：Ｃ，５８．８９、Ｈ，５．４３、Ｎ，３．４３；実測値：Ｃ，５８．７４、 Ｈ，５．３９、Ｎ，３．４５；ＨＲＭＳ、Ｃ20Ｈ18ＮＯ4についての計算値：３ ３６．１２３６：実測値：３３６．１２４４。 実施例ＶＩＩ−１−べンジルイソキノリン（９ａ−ｃ）の合成の一般的手順 適当なジヒドロイソキノリン（３．４ｍｍｏｌ）を２２０〜２３０℃において ０．３ｇの１０％炭素担持パラジウムとともに５ｍｌのテトラリン（使用前に窒 素で２０分間パージした）中で３〜４時間還流させた。次いで反応混合物を１８ ０℃に冷却し、窒素雰囲気下にシュレンク（Ｓｃｈｌｅｎｋ）型濾過ユニット（ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．）を使用して濾過した。室温に冷却 した後、濾液を０℃に冷却し、塩化水素（１．０Ｍ、無水エーテル 中）を添加して、混合物のｐＨをｐＨ１．０に調節した。１−ベンジルイソキノ リンの塩酸塩が沈澱した。この沈澱を濾過し、１０ｍｌの無水エーテルで３回洗 浄し、乾燥すると、それぞれの１−ベンジルイソキノリン塩酸塩が９０〜１００ ％の収率で得られた。次いで乾燥した塩酸塩を最小量のメタノール（２〜５ｍｌ ）中に溶解し、これに１０ｇの氷を添加した。濃水酸化アンモニウムを氷冷水溶 液に添加して、ｐＨを１０に調節した。水性層を塩化ナトリウムで飽和させ、次 いで３×１０ｍｌの部分のクロロホルムで抽出した。一緒にしたクロロホルム抽 出液を乾燥（Ｎａ2 ＳＯ4 ）し、蒸発させると、９ａ−ｃか得られた。 ５，６−ジメトキシ−１−（３，４−ジメトキシベンジル）イソキノリン塩酸 塩（９ｂ）：６ｂから製造した；融点２０６−２０８℃(文献14２０6−２０８℃ )；ＩＲ（ヌジョール）２６７６、１６３０、１６２５、１５８８；1Ｈ ＮＭＲ （ＣＤ．ＯＤ）δ３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、４．０３（ｓ ，３Ｈ）、４．１５（ｓ，３Ｈ）、４．８７（ｓ，２Ｈ）、６．８６（ｔ，２Ｈ ）、７．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１）、８．３１（ｄ，２ Ｈ，Ｊ＝５．７）、８．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１）；13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ ）δ３８．１、５６．９、５７．１、５８．１、６２．５、１１３．７、１１４ ．２、１１９．２、１２０．８、１２２．５、１２２．８、１２７．７、１２９ ．１、１３１．２、１３５．９、１４３．５、１５０．５、１５１．３、１５８ ．５、１６０．２。 ５，６−メチレンジオキシ−１−（３，４−ジメトキシベンジル）イソキノリ ン（９ｃ）：６ｃから製造した；融点１１１℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３４２９、３０ ６４、３００３、２９３０；1Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）δ２．９３（ｓ，３Ｈ ）、４．０３（ｓ，３Ｈ） 、４．０４（ｓ，３Ｈ）、６．０１（ｓ，２Ｈ）、６．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８ ．８）、７．０７（ｓ，１Ｈ）、７．２５（ｓ，１Ｈ）、７．６０（ｍ，２Ｈ） 、７．６８（ｓ，１Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）２３．２、５６．５、７ ６．９、７７．４、７８．２、１０１．６、１０４．４、１０６．０、１０７． ８、１０９．９、１１４．１、１２１．０、１２２．５、１３４．０、１３５． ２、１４８．１、１４９．２、１５０．１、１５３．１、１５６．２；分析、Ｃ19 Ｈ17Ｏ4についての計算値：Ｃ，７０．５８、Ｈ，５．３０、Ｎ，４．３３； 実測値：Ｃ，７０．８５、Ｈ，５．５１、Ｎ，４．３１。 実施例ＶＩＩＩ−ジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロライド（１０ａ−ｃ） の合成の一般的手順 使用する手順は、５，６−ジヒドロジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロラ イド、８ａ−ｃ、の合成において使用した手順に類似した。前の手順における対 応するジヒドロイソキノリン中間体の代わりに、１−ベンジルイソキノリン中間 体を使用した。得られた生成物を氷酢酸および６Ｎ ＨＣＩの１：１混合物から 結晶化させると、黄色結晶質生成物として１０ａ−ｃが９２〜９８％の収率で得 られた。 ２，３，１０，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロ ライド（１０ａ）：９ａから製造した；融点、ＩＲ、1 Ｈ ＮＭＲ、13Ｃ ＮＭ Ｒは以前に報告された通りであった12。 ３，４，１０，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロ ライド（１０ｂ）：９ｂから製造した；融点２２３−２２５℃分解；ＩＲ（ＫＢ ｒ）３３９４、２９４７、２８４３、１６２６、１５９８、１５６１、１５０３ 、１４３３；1 Ｈ ＮＭＲ（同軸管を使用し、９ｂを外側管中のトリフルオロ酢 酸中に溶解し 、そしてジュウテリウム酸化物を内側管に入れた）δ４．５１（ｓ，３Ｈ）、４ ．５５（ｓ，６Ｈ）、４．６１（ｓ，３Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）、７．９６ （ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２）、８．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝ ７．３）、８．７８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３）、９．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９． ２）、９．５６（ｓ，１Ｈ）、９．８３（ｓ，１Ｈ）；13 Ｃ ＮＭＲ（同軸管 を使用し、９ｂを外側管中のトリフルオロ酢酸中に溶解し、そしてジュウテリウ ム酸化物を内側管に入れた）δ５８．４、５８．８、５９．１、６４．７、１０ ７．０）１０７．２、１１８．９、１１９．２、１１９．７、１２１．６、１２ ５．０）１２６．８、１２７．２、１３２．０）１３９．４、１３９．５、１４ ０．０、１４５．１、１５６．６、１５７．９、１６１．１；分析、Ｃ21Ｈ20Ｎ Ｏ4 Ｃｌ・１．２５Ｈ2Ｏについての計算値：Ｃ，６１．７６、Ｈ，５．５５、 Ｎ，３．４３；実測値：Ｃ，６０．６７、Ｈ，５．３７、Ｎ，３．４３；ＨＲＭ Ｓ、Ｃ21Ｈ20ＮＯ4についての計算値：３５０．１３９２；実測値：３５０．１ ３９２。 ３，４−メチレンジオキシ−１０，１１−ジメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］キノ リジニウムクロライド（１０ｃ）：９ｃから製造した；融点＞２７０℃分解；Ｉ Ｒ（ＫＢｒ）３４１４、３０１５、２９２８、１６２０、１５６４、１４８８：1 Ｈ ＮＭＲ（同軸管を使用し、化合物を外側管中のトリフルオロ酢酸中に溶解 し、そしてジュウテリウム酸化物を内側管に入れた）δ４．５５（ｓ，３Ｈ）、 ４．６０（ｓ，３Ｈ）、６．６７（ｓ，２Ｈ）、７．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８． ５）、７．９２（ｓ，２Ｈ）、８．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７）、８．６８（ ｔ，２Ｈ）、９．４７（ｓ，１Ｈ）、９．７７（ｓ，１Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（同 軸管を使用し、化合物を外側管中のトリフルオロ酢酸中に溶解し、そしてジュウ テリウム酸化 物を内側管に入れた）δ５８．８、５９．１、１０６．７、１０７．０、１１５ ．２、１１５．７、１１８．４、１１９．８、１２１．７、１２１．８、１２６ ．６，１３１．１、１３９．５、１３９．９、１４０．３、１４７．ｌ、１５３ ．６、１５６．４、１６１．１；分析、Ｃ20Ｈ16ＮＯ4 Ｃｌ・１．７５Ｈ2 Ｏに ついての計算値：Ｃ，５９．８６、Ｈ，４．９０、Ｎ，３．４９；実測値・Ｃ， ５９．７２、Ｈ，４．９３、Ｎ，３．４８；ＨＲＭＳ、Ｃ20Ｈ16ＮＯ4について の計算値：３３４．１０７９；実測値：３３４．１０７５。 実施例ＩＸ−３，４，３’，４’−テトラメトキシデソキシベンゾイン（１１ａ ） １０ｍｌの新しく蒸留した乾燥ジクロロメタン中の１，２−ジメトキシベンゼ ン（０．６４ｇ）４．６６ｍｍｏｌ）および３，４−ジメトキシフェニルアセチ ルクロライド（１．０ｇ、４．６６ｍｍｏｌ）の撹拌した混合物に、粉末状無水 塩化アンモニウム（０．７８ｇ）をゆっくり添加した。発熱反応が起こった。混 合物を還流しているとき、オレンジ色溶液は褐色になった。反応混合物をさらに ２時間加熱還流させ、次いで室温に放冷した。５ｇの砕氷および５．５ｍｌの７ ．５Ｎ ＨＣｌを含有する混合物の中に、冷却した溶液を注いだ。有機相を分離 し、水相を１０ｍｌのジクロロメタンで３回抽出した。一緒にしたジクロロメタ ン抽出液を乾燥（Ｎａ2 ＳＯ4 ）し、濾過し、蒸発させると、白色固体状物か得 られ、これをエタノール反応させると、１１ａの純粋な白色針状結晶か９８％の 収率で得られた；融点１０５−１０７℃（文献30融点１０４−１０６℃）；1 Ｈ ＮＭＲδ３．８５（ｓ，６Ｈ）、３．９１（ｓ，３Ｈ）、３．９４（ｓ，３Ｈ ）、４．１８（ｓ，２Ｈ）、６．８１（ｓ，２Ｈ）、６．９１（ｍ，２Ｈ）、６ ．９１（ｍ，２Ｈ）、７． ５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０）、７．６６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４、２．０） ；13Ｃ ＮＭＲδ４５．２、５６．３、５６．４、５６．５、１１０．４、１１ １．１、１１１．８、１１２．８、１２１．３、１２１．９、１２３．９、１２ ７．９、１３０．２、１４８．４、１４９．５、１５３．８、１９７．０。 実施例Ｘ−３，４−ジメトキシ−３’，４’−メチレンジオキシデソキシベンゾ イン（１１ｂ） １５ｍｌの新しく蒸留した乾燥ジクロロメタン中の３，４−ジメトキシフェニ ルアセチルクロライド（３．２５ｇ）１５ｍｍｏｌ）の溶液を、−１０℃の１５ ｍｌのジクロロメタン中の１，３−ベンゾジオキソール（１．８３ｇ）１５ｍｍ ｏｌ）および塩化錫（ＩＶ）（４．６ｇ、１７．６ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に滴 下した。次いでこの混合物を室温に上昇させ、さらに２時間撹拌した。次いで反 応混合物を２５ｍｌの６Ｎ ＨＣｌ中に注ぎ、１６時間撹拌した。次いで有機相 を分離し、水相を２０ｍｌのアリコートのジクロロメタンで３回抽出した。一緒 にしたジクロロメタンの抽出液を連続的に２０ｍｌの０．１Ｎ ＮａＯＨおよび ２０ｍｌの蒸留水で洗浄した。次いでジクロロメタン抽出液を乾燥（Ｎａ2 ＳＯ4 ）し、濾過し、蒸発させると、クリーム色固体状物か得られた。粗生成物をエ タノールから結晶化させると、３．０ｇの１１ｂの白色針状結晶が６６％の収率 で得られた；融点１１０−１１１℃；ＩＲ（ヌジョール）２７２５、１６７５、 １５８９、１５１９；1Ｈ ＮＭＲδ３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．８１（ｓ，３ Ｈ）、４．０９（ｓ，２Ｈ）、５．９６（ｓ，２Ｈ）、６．７６（ｍ，４Ｈ）、 ７．４２（ｄ、１Ｈ，Ｊ＝１．５）、７．５８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４、１． ５）；13Ｃ ＮＭＲδ４５．３、５６．３、１０２．３、１０８．３、１０８． ７、１１１．８、１１２．７、１１２．９、１２１． ９、１２５．４、１２７．７、１３１．８、１４８．４、１４８．６、１４９． ４、１５２．２、１９６．４；分析、Ｃ17Ｈ16ＮＯ5についての計算値：Ｃ，６ ７．９９、Ｈ，５．３７；実測値：Ｃ，６７．９８、Ｈ，５．３２。 実施例ＸＩ−１−メチル−３−フェニルイソキノリン（１２ａ、１２ｂ）の合成 の一般的手順 １０ｍｌのアセトニトリル中のそれぞれのデソキシベンゾインの溶液（１００ ｍＭ）に、無水五酸化リン（４ｍｍｏｌ）を３つの部分で添加した。反応混合物 を窒素雰囲気下に１８〜２０時間撹拌した。１０ｍｌの水の添加により反応混合 物を急冷した。生ずる懸濁液を１０％ＮａＯＨで中和し、３×１０ｍｌの部分の ジクロロメタンで３回抽出した。一緒にした有機相を乾燥（Ｎａ2 ＳＯ4 ）し、 濾過し、蒸発させると、クリーム色残留物が得られた。この残留物をシリカゲル のクロマトグラフィーにかけ、溶離剤として、それぞれ、ジクロロメタンおよび 酢酸エチルの９５：５混合物を使用すると、対応する１−メチル−３−フェニル イソキノリン、１２ａおよび１２ｂ、が７５〜８５％の収率で得られた。 ６，７−ジメトキシ−１−メチル−３−（３，４−ジメトキシフェニル）イソ キノリン（１２ａ）：１１ａから製造した；融点１６８−１６９℃（文献31１６ ８−１７０℃）；ＩＲ（ヌジョール）２７２５、１６２１、１５７３、１５０８ ；1 Ｈ ＮＭＲδ２．９５（ｓ，３Ｈ）、３．９３（ｓ，３Ｈ）、４．０２（ｓ ，９Ｈ）、６．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４）、７．０８（ｓ，１Ｈ）、７．２ ５（ｓ，１Ｈ）、７．６０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４、２．０）、７．７１（ｓ ，２Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲδ２３．２、５６．４、１０４．３、１０５．９、１１ ０．４、１１１．７、１１３．９、１１９．５、１２２．４、１３３．６、１３ ３．９、１４９．２、１４ ９．６、１４９．７、１５３．１、１５６．２。 ６，７−ジメトキシ−１−メチル−３−（３，４−メチレンジオキシフェニル ）イソキノリン（１２ｂ）：１１ｂから製造した；融点１７４℃；ＩＲ（ヌジョ ール）２７２７、１６２２、１５７３、１５０４；1Ｈ ＮＭＲδ２．９３（ｓ ，３Ｈ）、４．０３（ｓ，３Ｈ）、４．０４（ｓ，３Ｈ）、６．００（ｓ，２Ｈ ）、６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８）、７．０７（ｓ，１Ｈ）、７．２５（ｓ ，１Ｈ）、７．６０（ｍ，２Ｈ）、７．６７（ｓ，１Ｈ）；13ＣＮＭＲδ２３． ２、５６．５、１０１．６、１０４．４、１０６．０、１０７．８、１０８．９ 、１１４．１、１２１．０、１２２．５、１３３．９、１３５．２、１４８．１ 、１４８．６、１４９．２、１５０．１、１５３．１、１５６．２；分析、Ｃ19 Ｈ17ＮＯ4 についての計算値：Ｃ，７０．５８、Ｈ，５．３０、Ｎ，４．３３； 実測値：Ｃ，７０．５５、Ｈ，５．２８、Ｎ，４．３０。実施例Ｘ１１−６，７ −ジヒドロキシ−１−メチル−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）イソキノ リン（１３） 化合物１２ａ（２５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を５ｍｌの乾燥クロロホルム 中に溶解し、ドライアイスおよびアセトンの混合物で−５０℃に冷却した。この 混合物に、７．４ｍｌのジクロロメタン中の三臭化ホウ素の１．０Ｍ溶液を滴下 した。反応混合物を４時間かけて室温にした。沈澱を濾過し、２ｍｌ部分のエー テルで２回洗浄した。この粗生成物をエタノールから再結晶化させると、１３が 白色針状結晶として９８％の収率で得られた；融点＞２８０℃分解；ＩＲ（ヌジ ョール）３３２６、１６０２、１５３１；1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ．ＯＤ）δ３．０ ８（ｓ，３Ｈ）、６．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１）、７．１９（ｄｄ，１Ｈ， Ｊ＝８．１、１．９）、７．２４（ｓ，１Ｈ）、７．３７（ｓ，１Ｈ）、７．６ １（ｓ，１Ｈ ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）δ１７．８、１０９． ６、１１０．６、１１６．１、１１７．３、１１９．６、１２１．２、１２２． ８、１２５．６、１３８．４、１４２．５、１４７．７、１４９．５、１５２． ０、１５４．３、１５８．３；ＨＲＭＳ、Ｃ16Ｈ13ＮＯ4 についての計算値：２ ８３．０８４４；実測値：２８３．０８３９。 実施例ＸＩＩＩ−１，２−ジメチル−３−フェニルイソキノリニウム誘導体（１ ４ａ、１４ｂ、１５）の合成の一般的手順 それぞれの１−メチル−３−フェニルイソキノリン誘導体（０．６７ｍｍｏｌ ）の各々を１ｍｌの硫酸ジメチルに添加した。次いでこの反応混合物を１００℃ に２０〜６０分間加熱し、次いで室温に放冷した。無水エーテル（８ｍｌ）を冷 却した反応混合物に添加し、生ずる懸濁液を５分間撹拌した。沈澱を濾過し、メ タノールから再結晶化させると、対応するＮ−メチルイソキノリニウム塩が９５ 〜１００％の収率で得られた。 ６，７−ジメトキシ−１，２−ジメチル−３−（３，４−ジメトキシフェニル ）イソキノリニウムメソサルフェート（１４ａ）：１２ａから製造した；融点２ ２４−２２６℃；ＩＲ（ヌジョール）３５０８、１６４０、１６１３、１５４８ 、１５０６；1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）δ３．２１（ｓ，３Ｈ）、３．６７（ ｓ，３Ｈ）、３．９４（ｓ，３Ｈ）、３．９８（ｓ，３Ｈ）、４．１１（ｓ，３ Ｈ）、４． １２（ｓ，１Ｈ）、７．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６）、７．４８ （ｍ，２Ｈ）、７．６２（ｓ，１Ｈ）、７．６６（ｓ，１Ｈ）、８．２４（ｓ， １Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）δ１８．０、５６．９、５７．１、５７． ３、５７．６、１０６．０、１０７．５、１１２．８、１１３．５、１２０．７ 、１２２．７、１２３．２、１２６．４、１３９．１、１５１．５、１７０．４ 、 １７０．９、１７１．３；分析、Ｃ22Ｈ27ＮＯ8 Ｓ・１．５Ｈ2 Ｏについての計 算値：Ｃ，５３．６５、Ｈ，５．８３、Ｎ，２．８４；実測値：Ｃ，５３．３５ 、Ｈ，５．５２、Ｎ，２．９１。 ６，７−ジメトキシ−１，２−ジメチル−３−（３，４−メチレンジオキシフ ェニル）イソキノリニウムメソサルフェート（１４ｂ）：１２ｂから製造した； 融点２３５−２３７℃；ＩＲ（ヌジョール）３４７９、１６１２、１５６８；1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ３．２２（ｓ，３Ｈ）、３．３８（ｓ，３Ｈ） 、４．０６（ｓ，６Ｈ）、６．２０（ｓ，２Ｈ）、７．１４（ｍ，２Ｈ）、７． ２３（ｍ，１Ｈ）、７．７０（ｓ，１Ｈ）、７．８６（ｓ，１Ｈ）、８．０９（ ｓ，１Ｈ）：13Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）δ１８．２、４３．５、５６．８ 、５６．９、１０２．２、１０６．２、１０６．３、１０９．１、１１０．０、 １２２．９、１２３．２、１２４．１、１２７．７、１３４．７、１４４．９、 １４７．９、１４９．０、１５２．５、１５６．９、１５７．１；分析、Ｃ21Ｈ23 ＮＯ8Ｓについての計算値：Ｃ，５３．１１、Ｈ，５．１５、Ｎ，３．１１； 実測値：Ｃ，５３．０３、Ｈ，５．１９、Ｎ，２．９５。 ６，７−ジヒドロキシ−ｌ，２−ジメチル−３−（３，４−ジヒドロキシフェ ニル）イソキノリニウムメソサルフェート（１５）：１３から製造した；融点１ １８−１２０℃；ＩＲ（ＫＢｒ）３２４９、１６１４、１５２８、１４５４；1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）δ３．０８（ｓ，３Ｈ）、３．６８（ｓ，３Ｈ）、６ ．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１）、７．２１（ｍ，２Ｈ）、７．３７（ｓ，１Ｈ ）、７．６１（ｓ，１Ｈ）、７．９４（ｓ，１Ｈ）；13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ ）δ１７．８、１０９．６、１１０．６、１１６．１、１１７．３、１１９．６ 、１２１．２、１２２．８、１２５．６ 、１３８．４、１４２．６、１４７．７、１４９．５、１５２．０、１５４．３ 、１５８．３：分析、Ｃ18Ｈ19ＮＯ8Ｓについての計算値：Ｃ，５２．８１、Ｈ ，４．６８、Ｎ，３．４２；実測値：Ｃ，５２．７９、Ｈ，４．６５、Ｎ，３． ４０。 実施例ＸＩＶ−材料 酵素の発現に使用したプラスミドｐＥＴ１１ａおよび大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ） ＢＬ２１（ＤＥ３）株をノバゲン（Ｎｏｖａｇｅｎ）から購入した。ＩＰＴＧを シグマ（Ｓｉｇｍａ）から購入した。細菌ライゼイトのウェスタンブロット分析 に使用したＥＣＬ系をアマーシャム（Ａｍｅｒｓｈａｍ）（英国）から購入した 。すべての制限酵素およびベント（Ｖｅｎｔ）ポリメラーゼをニュー・イングラ ンド・バイオラブス(new Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）から購入した。哺 乳動物トポイソメラーゼ１１を公表された手順に従い仔ウシ胸腺から分離した（ Ｈａｌｌｉｇａｎ 他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２４７５−２４８２ ））。ＪＮ２−１３４酵母株における種々のトポイソメラーゼＩ遺伝子を発現す る単一コピーの酵母プラスミドＹＣｐＧＡＬ１は、Ｍ−Ａ．Ｂｊｏｒｎｓｔｉ博 士（Ｔｈｏｍａｓ Ｊｅｆｆｅｒｓｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｔｙ、ペンシルベニア 州フィラデルフィア）からの贈り物であった。すべての細菌および酵母の培地は ディフコ（Ｄｉｆｃｏ）（ミシガン州デトロイト）から購入したが、細胞培養の 培地はギブコ（Ｇｉｂｃｏ）−ＢＲＬ（マリイランド州ガイサーバーグ）から購 入した。 実施例ＸＶ−大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）におけるトポイソメラーゼＩの発現 大量のヒトトポイソメラーゼＩを得るために、ヒトトポイソメラーゼＩｃＤＮ ＡをｐＥＴ１１ａベクターの中にクローニングし、このベクターにおいてｃＤＮ Ａの転写は誘導可能なＴ７プロモーター の制御下にあった（Ｓｔｕｄｉｅｒ 他、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎＥｎｚｙｍｏｌ ．Ｖｏｌ．１８５：６０−８９、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒ ｅｓｓ（１９９０））。簡単に述べると、プラスミドＹＣｐＧＡＬ１−ｈＴＯＰ １（Ｂｊｏｒｎｓｔｉ他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４９：６３１８−６３２３（ １９８９））から、ＢａｍＨＩおよびＥｃｏＲＩ部位における切断により、ヒト トポイソメラーゼＩの全体のコーディング配列を含有する３．４ｋｂのＤＮＡフ ラグメントおよび停止コドンの下流のほぼ１ｋｂの非翻訳領域を単離した。ベク ターｐＥＴ−１１ａを同一制限酵素で切断し、脱リン酸化し、ベクターのクロー ニング部位の下流の適切なリーディングフレームにおいてインサートに結合した 。結合混合物を使用して大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）を形質転換し、正しいクローン ｐＥＴ１Ｂを単離し（地図について第２Ａ図を参照のこと）、その同一性を制限 マッピングにより確証した。ｐＥＴにおける翻訳開始は上流のＮｄｅＩ挿入に位 置するので、発現されたトポイソメラーゼＩはそのＮ−末端に１５アミノ酸の融 合を有する。次いでｐＥＴ１Ｂを大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＢＬ２１（ＤＥ３）の 中に形質転換し、０．４ｍＭのＩＰＴＧで１時間誘導すると、細菌ライゼイトを １０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析した。ヒトトポイソメラーゼＩに対するウサ ギ抗体を使用するウェスタンブロッティングにより、発現を確証した。発現した タンパク質の単離は簡単な手順で行った。簡単に述べると、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌ ｉ）細胞を、超音波突発を繰り返すことにより溶解した。超音波抽出を１ＭのＮ ａＣｌおよび６％のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）中で実施して核酸を除去 した。 ＰＥＧ上清をヒドロキシアパタイトカラム上で直接クロマトグラフィーにかけ た。 発現されたヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩを０．６Ｍのリン酸カリウム段階で 溶離した。溶離した酵素を５０％のグリセロール、３０ｍＭのリン酸カリウム（ ｐＨ７．０）、１ｍＭのジチオスレイトール（ＤＴＴ）および０．１ｍＭのＥＤ ＴＡに対して透析し、−２０℃において貯蔵した。精製した酵素の緩和活性は、 仔ウシ胸腺トポイソメラーゼＩよりも約２桁低い比活性を有した。 実施例ＸＶＩ−大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）におけるカンプトテシン耐性（ＣＰＴ− Ｋ５）トポイソメラーゼＩの発現 ＣＰＴ−Ｋ５（１９）における耐性表現型の原因となる点突然変異ＣＡＧ（Ａ ｓｐ５３３）−＞ＣＧＧ（Ｇｌｙ）を含有する２つの相補的オリゴヌクレオチド を合成し、順次のＰＣＲ法を使用してトポＩコーディング配列において操作した （Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌ ｏｇｙ、Ｉｎ：Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．（編）、Ｖｏｌ．１、ｐｐ．８． ５．７．Ｂｏｓｔｏｎ：Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｎｃｅ（１９９１））。 ２つのオリゴヌクレオチドは下記の通りである：５’−ＣＴＴＣＣＴＣＧＧＧＡ ＡＧＧＧＣＴＣＣＡＴＣＡＧＡＴＡＣ−３’（プライマーＸ１）、および５’− ＧＴＡＴＣＴＧＡＴＧＧＡＧＣＣＣＴＴＣＣＣＧＡＧＧＡＡＧ−３’（プライマ ーＸ２）、ここで下線が引かれている配列は突然変異したコドンを表す。各オリ ゴヌクレオチドを別々のＰＣＲ反応において使用して、それぞれ、Ｘ１およびＸ ２についての相対的プライマー対としてオリゴヌクレオチド５’−ＡＣＴＧＴＧ ＡＴＣＣＴＡＧＧＧ−３’（「Ａ」）およひ５’−ＣＴＴＣＡＴＣＧＡＣＡＡＧ ＣＴＴ ＧＣＴＣＴＧＡＧ−３’（「Ｈ」）を使用して、突然変異部位に隣接して ２つのＤＮＡセグメントを増幅した。「Ａ」および「Ｈ」はユニーク制限部位Ａ ｖｒＩＩおよびＨｉｎｄＩＩＩの付近のヒトトポＩ配列に対して相 補的である。ＰＣＲの第１ラウンド後、２つの増幅された産物Ｘ１−ＨおよびＸ ２−Ａは、オリゴヌクレオチドＸｌおよひＸ２のオーバーラップのために、それ らの１５塩基対の相補的配列により変性およびアニールされた。次いで二本鎖Ｄ ＮＡのこの短いストレッチを、７２℃においてベントポリメラーゼにより２分間 、推定上の７４８塩基対の全長産物Ａ−Ｈに延長した。次いで２つの外部のプラ イマー「Ａ」および「Ｈ」を使用して、突然変異したトポＩフラグメントを含有 する全長のＤＮＡフラグメントを増幅した。次いで増幅された突然変異体トポイ ソメラーゼＩｃＤＮＡをＡｖｒＩＩおよびＨｉｎｄＩＩＩで消化し、トポイソメ ラーゼＩｃＤＮＡ配列の対応するＡｖｒＩＩ／ＨｉｎｄＩＩＩフラグメントを置 換することによってｐＥＴ１Ｂの中にクローニングした。プラスミドｐＥＴ１Ｂ −ＣＰＴＫ５は野生型ヒトトポイソメラーゼＩｃＤＮＡの代わりに突然変異体Ｃ ＰＴ−Ｋ５トポイソメラーゼＩｃＤＮＡを含有し、これを発現のために大腸菌（ Ｅ．ｃｏｌｉ）ＢＬ２１（ＤＥ３）の中に形質転換した。ＩＰＴＧで誘導すると 、ライゼイト中のタンパク質はウェスタンブロッティングにより確証された。次 いでＣＰＴ−Ｋ５トポイソメラーゼＩを、野生型酵素について記載されているよ うに、細菌ライゼイトから精製した。 実施例ＸＶＩＩ−トポＩおよびトポ１１の切断アッセイ 組換えトポイソメラーゼＩおよび仔ウシ胸腺トポイソメラーゼＩおよびＩＩに ついての切断アッセイを記載されているように実施した（Ｌｉｕ他、Ｊ．Ｂｉｏ ｌ．Ｃｈｅｍ．２５８：１５３６５−１５３７０（１９８３））。発表された手 順に従い、切断アッセイに使用したプラスミドＹＥｐＧ ＤＮＡを調製し、その ３’末端において標識化した。 実施例ＸＶＩＩＩ−酵母の細胞毒性アッセイ トポイソメラーゼＩ機能か消滅したとき、酵母は生存できること、およびトポ イソメラーゼＩの毒物は機能的トポイソメラーゼＩを有する細胞のみを殺すこと が確立されている（Ｂｊｏｒｎｓｔｉ 他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４９：６３ １８−６３２３（１９８９））。したかって、種々の薬剤の存在において被験株 の各々の増殖の相対的程度を無薬剤の対照プレートと比較すると、１）薬剤が酵 母に対して細胞毒性作用を有するかどうか、２）細胞毒性がトポＩ特異的である かどうか、および３）ヒトトポＩと比較して酵母について薬剤の異なる特異性が 存在するかどうかが示される。 トポイソメラーゼＩ特異的ｉｎ ｖｉｖｏ細胞毒性アッセイをＫｎａｂ他（Ｋ ｎａｂ他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：２２３２２−２２３３０（１９９ ３））から採用した。この系において、単一のコピーの酵母プラスミドベクター 、ＹＣｐＧＡＬ１の中にクローニングした種々のトポＩ遺伝子（Ｋｎａｂ 他、 Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：２２３２２−２２３３０（１９９３））は、 サッカロミセス・セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のＪＮ２−１３４株 においてＧＡＬ１プロモーター制御下に発現される（ＭＡＴａ、ｒａｄ５２：： ＬＥＵ２、ｔｒｐｌ、ａｄｅ２−１、ｈｉｓ７、ｕｒａ３−５２、ｉｓｅ１、ｔ ｏｐ１−１、１ｅｕ２）（Ｂｊｏｒｎｓｔｉ 他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４９ ：６３１８−６３２３（１９８９））。ベクター中のトポＩ構築物は、それぞれ 、下記の通りである：野生型酵母トポＩ（ＹＣｐＧＡＬ−ＳｃＴＯＰ１）、非機 能的酵母トポＩ(ここで活性部位チロシン−７２７はフェニルアラニンに突然変 異している）（ＹＣｐＧＡＬ１−Ｓｃｔｏｐ１Ｙ７２７Ｆ）（Ｋｎａｂ 他、Ｊ ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：２２３２２−２２３３０（１９９３））、およ び野生型ヒトトポイソメラーゼＩ（ＹＣｐＧＡＬ−ｈＴＯＰ１）（Ｂｊｏｒ ｎｓｔｉ 他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４９：６３１８−６３２３（１９８９） ）。薬剤の細胞毒性およびトポＩ特異性を定性的に試験するために、特異的プラ スミドを含有する酵母細胞を連続希釈し（５倍に）、ウラシルおよび２％ガラク トースを補充したドロポウト（ｄｒｏｐｏｕｔ）培地中で増殖させた。さらに、 プレートは下記の成分を含有した：Ａ：対照、プレート中の薬剤の不存在；Ｂ： カンプトテシン（ＣＰＴ）、０．５μＭ；Ｃ：コラリン、１μＭ；Ｄ：メチレン ジオキシ−ジヒドロ−デメチル−コラリン（ＭＤＤ−コラリン）、１μＭ、およ びＥ：ニチジン、１μＭ。プレートを３０℃において３日間増殖させて、サッカ ロミセス・セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）中で発現された種々のトポ イソメラーゼＩ酵素に対する異なる化合物の致死的作用および試験する薬剤を評 価した。 実施例ＸＩＸ−細胞毒性アッセイ ＭＴＴ−マイクロタイタープレートのテトラゾリニウム細胞毒性アッセイによ り、試験した薬剤のＩＣ50を測定した（Ｍｏｓｍａｎｎ、Ｔ．、Ｊ．Ｉｍｍｕｎ ｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ６５：５５−６３（１９８３）；Ｄｅｎｉｚｏｔ 他、 Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ８９：２７１−２７７（１９８６））。 ヒトリンパ芽球ＲＰＭＩ８４０２細胞およびそれらのカンプトテシン耐性ＣＰＴ −Ｋ５細胞（Ａｎｄｏｈ 他、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：５５６５−５５６９（１９８７））は、Ｔｏｓｈｉｗｏ Ａｎｄｏｈ博 士（愛知癌中央研究所、日本国名古屋）から提供された。細胞系統Ａ２７８０お よびそのカンプトテシン耐性誘導体ＣＰＴ−２０００は、Ｊａｕｌａｎｇ Ｈｗ ａｎｇ博士（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ 、Ａｃａｄｅｍｉａ ｓｉｎｉｃａ、台湾）から提供された。細胞 （２０００細胞／ウェル、２００ｍｌの増殖培地中に播種した）を３７℃におい て５％ＣＯ2 中で懸濁増殖させ、１０％熱不活性化胎仔ウシ血清、Ｌ−グルタミ ン（２ｍＭ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、およびストレブトマイシン（０ ．１ｍｇ／ｍｌ）を補充したＲＰＭＩ培地中の規則的継代により維持した。細胞 を連続的に４日間異なる薬剤濃度に暴露し、第４日の終わりにおいてアッセイし た。各濃度および無薬剤の対照を６レプリカウェル中で少なくとも２回反復した 。結果をプロットし、次いでＩＣ50を測定した。薬剤感受性ヒト類表皮癌ＫＢ３ −１細胞系統およびそのビンブラスチン選択多薬剤耐性変異型ＫＢ−Ｖ１細胞（ Ａｋｉｙａｍａ 他、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １１：１１７−１２６（１９８５）） は、Ｍｉｃａｅｌ Ｇｏｔｔｅｓｍａｎｎ博士（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅ ｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）により提供された。それらを３７℃において５％ＣＯ2 中で単層培養物として増殖させ、１０％熱不活性化胎仔ウシ血清を補充したダ ルベッコ変性イーグル培地中の規則的継代により維持した。ＫＢ−Ｖ１細胞を１ ｍｇ／ｍｌのビンブラスチンの存在において維持した。 表１． コラリン誘導体および関係する化合物のトポイソメラーゼＩおよび トポイソメラーゼＩＩ仲介ＤＮＡ切断ａ）４日の連続的薬剤暴露後にＩＣ50を計算した。 ｂ）トポイソメラーゼＩ切断値はＲＥＣ（Ｒｅｌａｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｉｖ ｅ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）、すなわち、カンプトテシン（ＣＰＴ）（そ の値を任意に１と仮定した）に関する濃度として報告し、これら値はヒトトポイ ソメラーゼＩの存在におけるプラスミドＤＮＡに対する同一切断を生成すること ができる値である。 ｃ）トポイソメラーゼＩＩ切断値はＲＥＣ（Ｒｅｌａｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｉ ｖｅ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）、すなわち、ＶＭ−２６（その値を任意に １と仮定した）に関する濃度として報告し、これら値は仔ウシ胸腺トポイソメラ ーゼＩＩの存在におけるプラスミドＤＮＡに対する同一切断を生成することがで きる値である。 ｄ）細胞毒性の指示の不存在はアッセイした最高の投与量より実質的に大きいＩ Ｃ50値の指示と考えた。 コラリン類似体７ｃをグリア芽細胞腫細胞に対するその有効性について試験し た。使用したアッセイはＲＰＭＩ８４０２細胞系統について前述したアッセイに 類似した。結果を表２に示す。表２において、白血病細胞系統（ＲＰＭＩ８４０ ２）、表皮癌（ＫＢ３−１）およびグリア芽細胞腫（ＳＦ−２６８）に対する化 合物７ｃの作用を比較する。 実施例ＸＸ−結果 ヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩがコラリンおよびその誘導体の細胞障害性ター ゲットであるかどうかを確立するために、ヒトトポイソメラーゼＩｃＤＮＡをＴ ７発現系において発現させた。発現されたヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩを単一 のクロマトグラフィー工程により精製した。組換えヒトＤＮＡトポイソメラーゼ Ｉを使用して 、コラリンおよびその誘導体の活性を評価した。組換えヒトＤＮＡトポイソメラ ーゼＩおよび仔ウシ胸腺から精製されたトポイソメラーゼＩは、匹敵する切断活 性を有し、そしてカンプトテシンおよびコラリンの存在において同様な切断パタ ーンを生成する。 組換えヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩは、コラリンまたはカンプトテシンの存 在においてＹＥｐＧ ＤＮＡ上の広範なＤＮＡの破壊を誘導した。これらのＤＮ Ａの破壊は、下記の基準によりトポイソメラーゼＩ切断可能な複合体の形成を反 映することが示された：（１）中性アガロースゲル上への負荷の前に反応が変性 されない場合、破壊は観察されなかったので、それらは一本鎖の破壊を表す；（ ２）破壊はタンパク質結合であり、６５℃に加熱したとき可逆的であること（ト ポイソメラーゼＩ切断可能な複合体の特徴）か示された。コラリンにより誘導さ れる切断パターンは、カンプトテシンのそれと同一でない場合、同様であり、２ つの薬剤がトポイソメラーゼＩに対して同様な作用モードを共有することを示唆 する。 コラリンが二重毒物であるかどうかを試験するために、仔ウシ胸腺ＤＮＡトポ イソメラーゼＩＩに対するコラリンの活性を評価した。コラリンは精製された仔 ウシ胸腺ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩに対する活性を本質的にもたないことが決 定された。ニチジンおよびＶＭ−２６の双方を比較の対照として使用した。ニチ ジンは、ＶＭ−２６と同様であるが、コラリンと異なり、高度に効力のあるトポ イソメラーゼ１１の毒物である。 コラリンがむしろ特異的なトポイソメラーゼＩの毒物であるという事実は、細 胞におけるコラリンの細胞毒性ターゲットとしてのトポイソメラーゼＩの役割の 評価を可能とする。酵母細胞におけるカンプトテシンの唯一の細胞毒性ターゲッ トとしてのヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩの役割を証明するために、ヒトＤＮＡ トポイソメラ ーゼＩを発現する酵母ｔｏｐ１欠失株は首尾よく適用された。ヒトトポイソメラ ーゼＩまたは非機能的酵母トポイソメラーゼＩを発現する酵母株に対してコラリ ンは細胞毒性を示さなかったが、コラリン誘導体のいくつかはヒトトポイソメラ ーゼＩを発現する酵母細胞に対して高度に細胞毒性であった。ＭＤＤ−コラリン はヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩを発現する酵母細胞に対して高度に細胞毒性で あるか、機能的または非機能的酵母トポイソメラーゼＩを発現する酵母細胞に対 して細胞毒性ではない。この結果か示すように、ＭＤＤ−コラリンの細胞毒性タ ーゲットは酵母系におけるヒトトポイソメラーゼＩである。機能的酵母トポイソ メラーゼＩを発現する酵母細胞はカンプトテシンに対して非常に感受性であるの で、それらかコラリンに対して耐性であることは驚くべきことであった。ニチジ ンはＭＤＤ−コラリンに構造的に類似するので、酵母系におけるその活性をまた 評価した。ニチジンは、ＭＤＤ−コラリンと同様に、ヒトトポイソメラーゼＩを 発現する酵母細胞に対して高度に細胞毒性であるが、機能的または非機能的酵母 トポイソメラーゼＩを発現する酵母細胞に対して細胞毒性ではない。この結果は 、再び、ヒトトポイソメラーゼＩがニチジンの細胞毒性ターゲットであり、そし て酵母トポイソメラーゼＩがニチジンに対して耐性であるという見解を支持する 。 ヒト細胞における細胞毒性ターゲットとしてのトポイソメラーゼＩの可能な役 割を評価するために、コラリン誘導体を２対のカンプトテシン耐性細胞系統（Ｒ ＰＭＩ８４０２／ＣＰＴ−Ｋ５およびＡ２７８０／ＣＰＴ２０００）に対して試 験した。双方の細胞系統の対において、カンプトテシンに対する耐性はヒトトポ イソメラーゼＩの構造遺伝子内の突然変異に寄与して、カンプトテシン耐性ヒト トポイソメラーゼＩに導いた（Ｔａｍｕｒａ 他、Ｎｕｃ１．Ａｃ ｉｄｓ Ｒｅｓ．１９：６９−７５（１９９１））。表１に示すように、カンプ トテシンについての耐性指数が１０００〜１０，０００範囲であるか、コラリン 誘導体およびニチジンについての耐性指数は１〜９の間で変化した。 カンプトテシンおよびコラリン誘導体（また、ニチジン）により生成される同 様な切断パターンにかんがみて、コラリン誘導体およびニチジンに対するカンプ トテシン耐性細胞系統の有意な交差耐性の欠如は驚くべきことであった。これら の薬剤は追加の１または２以上の細胞障害性ターゲットを有することを示しうる 。 また、耐性細胞におけるカンプトテシン耐性トポイソメラーゼＩは、非オーバ ーラッピングレセプタ一部位のために、コラリン誘導体およびニチジンに対する 耐性を単に付与しない。これらの２つの可能性を区別するために、カンプトテシ ン耐性トポイソメラーゼＩをＣＰＴ−Ｋ５細胞から単離し、コラリン誘導体およ びニチジンに対する耐性／感受性について試験した。不都合なことには、ＣＰＴ −Ｋ５細胞から精製されたＣＰＴ−Ｋ５トポイソメラーゼＩは結論的結果を与え るために十分に活性ではなかった。この問題を克服するために、ｉｎ ｖｉｔｒ ｏ部位特異的突然変異誘発を実施して、ヒトトポイソメラーゼＩｃＤＮＡのヌク レオチド位置１８０９におけるＡ→Ｇ転移突然変異をつくった。タンパク質のア ミノ酸配列中のＡｓｐ→Ｇｌｙ（アミノ酸＃５３３）変化を引き起こす突然変異 は、カンプトテシン耐性の原因となることが示された（Ｔａｍｕｒａ 他、Ｎｕ ｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １９：６９−７５（１９９１））。この突然変異 をｐＥＴ１Ｂ上のヒトトポイソメラーゼＩｃＤＮＡの中に操作した。ＣＰＴ−Ｋ ５トポイソメラーゼＩの過度の発現のために、生ずるプラスミド、ｐＥＴ１Ｂ／ ＣＰＴ−Ｋ５を使用した。過度に発現された組換えＣＰＴ−Ｋ５トポイソメラー ゼ Ｉを部分的に精製し、そして、同様な方法において発現および精製された野生型 ヒトトポイソメラーゼＩと、ほぼ同一の特異的活性を有することが示された。 組換えＣＰＴ−Ｋ５トポイソメラーゼＩは、カンプトテシンに対して高度に耐 性（１０００倍を越える）であることか示された。しかしながら、組換えＣＰＴ −Ｋ５トポイソメラーゼＩはニチジンに対してのみ限界的に（１０倍より小さい ）耐性でありそしてＤ−コラリンに対して中程度に（約３０倍）耐性であった。 驚くべきことには、切断アッセイにより証明されるように、組換えＣＰＴ−Ｋ５ トポイソメラーゼＩはコラリンに対して高度に耐性であった。 表２に示すように、化合物７ｃはグリア芽細胞腫細胞に対して例外的な細胞毒 性を有し、そして白血病または表皮癌細胞系統よりも、このＣＮＳ腫瘍細胞に対 して細胞毒性である。ＳＦ−２６８に対するその有効性は、この化合物の選択的 吸収が起こりうることを示唆する。 これらの研究が証明するように、コラリン類似体はトポイソメラーゼＩおよび ／またはトポイソメラーゼＩＩの毒物として増強された活性を示す。これらのデ ータか示唆するように、ニチジンの同様に置換された類似体は哺乳動物のトポイ ソメラーゼＩまたはＩＩの毒物の抑制に関して同様な選択的を示すことができる であろう。
【手続補正書】 【提出日】１９９８年８月１３日（１９９８．８．１３） 【補正内容】 (1) 明細書第51頁の後に別紙配列表を加入します。 （なお、配列は国際出願時の明細書第28頁、翻訳された明細書第41頁に記 載されていたものです。） (2) 請求の範囲を別紙の通り補正します。 請求の範囲 １．癌細胞の増殖を抑制するための、式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 は独立して−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ2 ）2 であるか、あるい は不存在であり、ただし、 Ｒ8 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ）2 −であるとき、Ｒ9 は不存在であり かつＲ3 はＨであり、そして Ｒ9 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ2 ）2 であるとき、Ｒ1 またはＲ2 はＨ でありかつＲ5 およびＲ8 は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ２．癌細胞が中枢神経系の中に位置する、請求項１に記載の化合物。 ３．癌が白血病または黒色腫である、請求項１に記載の化合物。 ４．癌が充実腫瘍である、請求項１に記載の化合物。 ５．腫瘍が乳房、肺、結腸、または卵巣の腫瘍である、請求項１に記載の化合 物。 ６．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アル コキシであり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるい はＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ3 はＨであり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 は（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、 Ｒ8 は−ＣＨ＝ＣＨ−であり、そして Ｒ9 は不存在である） の化合物、または薬学上許容される塩。 ７．Ｒ6 およびＲ7 が−ＯＣＨ3 である、請求項６に記載の化合物。 ８．Ｒ1 が−ＯＣＨ3 である、請求項７に記載の化合物。 ９．Ｒ2 が−ＯＣＨ3 である、請求項７に記載の化合物。 １０．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 は不存在であり、 Ｒ8 は不存在であり、そして Ｒ9 は−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ2 ）2 であり、 ただし、 Ｒ1 またはＲ2 はＨである） の化合物またはその薬学上許容される塩。 １１．Ｒ6 およびＲ7 が−ＯＣＨ3 である、請求項１０に記載の化合物。 １２．Ｒ4 がＣＨ3 である、請求項１１に記載の化合物。 １３．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ3 である、請求項１２に記 載の化合物。 １４．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ2 Ｏ−である、請求項１２ に記載の化合物。 １５．Ｒ4 がＨである、請求項１１に記載の化合物。 １６．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ3 である、請求項１５に記 載の化合物。 １７．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ2 Ｏ−である、請求項１５ に記載の化合物。 １８．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、およびＲ3 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキ シであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ6 およびＲ7 の各々はＯＨであり、そして Ｒ8 およびＲ9 の各々は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。 １９．Ｒ4 がＣＨ3 である、請求項１８に記載の化合物。 ２０．Ｒ5 がＣＨ3 である、請求項１９に記載の化合物。 ２１．Ｒ1 がＨであり、そしてＲ2 およびＲ3 の各々がＯＨである、請求項２ ０に記載の化合物。 ２２．癌に悩む哺乳動物に、ある量の式：（式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨＮＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏーであり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 は独立して−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ2 ）2 であるか、あるい は不存在であり、ただし、 Ｒ8 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ）2 −であるとき、Ｒ9 は不存在であり かつＲ3 はＨであり、そして Ｒ9 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ2 ）2 であるとき、Ｒ1 またはＲ2 はＨ でありかつＲ5 およびＲ8 は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩を投与することからなる治療法。 ２３．癌細胞が中枢神経系の中に位置する、請求項２２に記載の方法。 ２４．癌を有する哺乳動物における腫瘍細胞を抑制するために有効な薬剤を製 造するために、式：（式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨＮＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1−Ｃ8）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1−Ｃ8）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 は独立して−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ2 ）2 であるか、あるい は不存在であり、ただし、 Ｒ8 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ）2−であるとき、Ｒ9 は不存在であり かつＲ3 はＨであり、そして Ｒ9 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ2 ）2 であるとき、Ｒ1 またはＲ2 はＨ でありかつＲ5 およびＲ8 は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩を使用する方法。 ２５．哺乳動物がヒトである、請求項２４に記載の方法。 ２６．癌が白血病または黒色腫である、請求項２４に記載の方法。 ２７．癌が充実腫瘍である、請求項２４に記載の方法。 ２８．腫瘍が乳房、肺、結腸、または卵巣の腫瘍である、請求項２７に記載の 方法。 ２９．癌細胞が中枢神経系の中に位置する、請求項２４に記載の方法。 ３０．前記化合物を薬学上許容される担体と組み合わせて投与する、請求項２ ４に記載の方法。 ３１．前記担体が液状ベヒクルである、請求項３０に記載の方法。 ３２．前紀担体が非経口投与に適合する、請求項３０に記載の方法。 ３３．前記担体が錠剤またはカプセルである、請求項３０に記載の方法。 ３４．有効量の式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2Ｏ−であり、 Ｒ4 Ｈまたは（Ｃ1 Ｃ8）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 は独立して−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ2 ）2 であるか、あるい は不存在であり、ただし、 Ｒ8 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ）2 −であるとき、Ｒ9 は不存在であり かつＲ3 はＨであり、そして Ｒ9 が−ＣＨ＝ＣＨ−またはー（ＣＨ2 ）2 であるとき、Ｒ1 またはＲ2 はＨ でありかつＲ5 およびＲ8 は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩を、薬学上許容される担体と組み合わせ て、含んでなる医薬組成物。 ３５．化合物８−メチル−３，４，１０，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート；８−メチル−３，４−メチレンジオ キシ−１０，１１−ジメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］−キノリジニウムアセトサル フェート；５，６−ジヒドロ−８−メチル−３，４，１０，１１−テトラメトキ シ−ジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート；５，６−ジヒドロ −８−メチル−３，４−メチレンジオキシ−１０，１１−ジメトキシジベンゾ［ ａ，ｇ］キノリジニウムアセトサルフェート；５，６−ジヒドロ−３，４，１０ ，１１−テトラメトキシジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロライド；５，６ −ジヒドロ−３，４−メチレンジオキシ−１０，１１−ジメトキシジベンゾ［ａ ，ｇ］キノリジニウムクロライド；３，４，１０，１１−テトラメトキシ−ジベ ンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロライド；または３，４−メチレンジオキシ− １０，１１−ジメトキシ−ジベンゾ［ａ，ｇ］キノリジニウムクロライド；また はそれらの薬学上許容される塩。 ３６．化合物６，７−ジメトキシ−１−メチル−３−（３，４−メチレンジオ キシフェニル）イソキノリン；６，７−ジヒドロキシ−１−メチル−３−（３， ４−ジヒドロキシフェニル）イソキノリン；６，７−ジメトキシ−１，２−ジメ チル−３−（３，４−メチレンジオキシフェニル）イソキノリニウムメソサルフ ェート；または６，７−ジヒドロキシ−１，２−ジメチル−３−（３，４−ジヒ ドロキシフェニル）−イソキノリニウムメソサルフェート；またはそれらの薬学 上許容される塩。 ３７．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アル コキシであり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるい はＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ3 はＨであり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、 Ｒ8 は−（ＣＨ2 )2 −であり、そして Ｒ9 は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ３８．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、 あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 Ｈまたは（Ｃ1 Ｃ8 アルキルであり、 Ｒ5 は不存在であり、 Ｒ8 は不存在であり、そして Ｒ9 は−ＣＨ＝ＣＨ−であり、 ただし、 Ｒ1 またはＲ2 はＨである） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ３９．式：（式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、 あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 は不存在であり、 Ｒ8 は不存在であり、そして Ｒ9は−（ＣＨ2 ）2 −であり、 ただし、 Ｒ1 またはＲ2 はＨである） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ４０．式： （式中、 Ｒ1 ＯＨであり、 Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アル コキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるい はＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1−Ｃ8）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1−Ｃ8）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 の各は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ４１．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アル コキシであるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり 、 Ｒ2 はＯＨであり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 の各々は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ４２．式： （式中、 Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシ であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2Ｏ−であり、 Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 の各々は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ４３．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシ であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ8 およびＲ9 の各々は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。 ４４．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 およびＲ3 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシ であり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、 Ｒ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、そして Ｒ8 およびＲ9 の各々は不存在である） の化合物またはその薬学上許容される塩。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/473 Ａ６１Ｋ 31/47 ６０６ Ｃ０７Ｄ 221/18 Ｃ０７Ｄ 221/18 455/03 455/03 471/04 １０２ 471/04 １０２ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ， ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，Ｇ Ｅ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ， ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，Ｐ Ｌ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ，ＹＵ (72)発明者 リュ，レロイ フォング アメリカ合衆国，ニュージャージー 08807，ブリッジウォーター，フェアアク レス ドライブ ５ (72)発明者 マケイ，ダーシャン ビー. アメリカ合衆国，ニュージャージー 08854，ピスカタウェイ，ビビール ロー ド 720

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １．式： （式中、 Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ6 およびＲ7 は独立してＨ、ＯＨ、または（Ｃ1 −Ｃ8 ）アルコキシであり、Ｒ2 およびＲ3 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、Ｒ1 およびＲ2 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であるか、あるいはＲ6 およびＲ7 は一緒になって−ＯＣＨ2 Ｏ−であり、 Ｒ4 はＨまたは(Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであり、 Ｒ5 はＨ、(Ｃ1 −Ｃ8 ）アルキルであるか、あるいは不存在であり、そして Ｒ4 およびＲ9 は独立して−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ2 ）2 であるか、あるい は不存在であり、ただし、 Ｒ8 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ）2 −であるとき、Ｒ9 は不存在であり かつＲ3 はＨであり、そして Ｒ9 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ2 ）2であるとき、Ｒ1 またはＲ2 はＨ でありかつＲ5 およびＲ8 は不存在である） の化合物、あるいはＲ5 およびＲ9 が存在する場合、その薬学上許容される塩。 ２．Ｒ8 が−ＣＨ＝ＣＨ−である、請求項１に記載の化合物。 ３．Ｒ6 およびＲ7 が−ＯＣＨ3 である、請求項２に記載の化合 物。 ４．Ｒ1 が−ＯＣＨ3 である、請求項３に記載の化合物。 ５．Ｒ2 が−ＯＣＨ3 である、請求項３に記載の化合物。 ６．Ｒ9 が−ＣＨ＝ＣＨ−または−（ＣＨ2 )2 −である、請求項１に記載の 化合物。 ７．Ｒ6 およびＲ7 が−ＯＣＨ3 である、請求項６に記載の化合物。 ８．Ｒ4 がＣＨ3 である、請求項７に記載の化合物。 ９．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ3 である、請求項８に記載の 化合物。 １０．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ2 Ｏ−である、請求項８に 記載の化合物。 １１．Ｒ4 がＨである、請求項７に記載の化合物。 １２．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ3 である、請求項１１に記 載の化合物。 １３．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ2 Ｏ−である、請求項１１ に記載の化合物。 １４．Ｒ8 およびＲ9 が不存在である、請求項１に記載の化合物。 １５．Ｒ6およびＲ7がＯＨである、請求項１４に記載の化合物。 １６．Ｒ4 がＣＨ3 である、請求項１５に記載の化合物。 １７．Ｒ5 がＣＨ3 である、請求項１６に記載の化合物。 １８．Ｒ1 がＨであり、Ｒ2 およびＲ3 がＯＨである、請求項１７に記載の化 合物。 １９．Ｒ6 およびＲ7 が−ＯＣＨ3 である、請求項１４に記載の化合物。 ２０．Ｒ4 がＣＨ3 である、請求項１９に記載の化合物。 ２１．Ｒ5 がＣＨ3 である、請求項２０に記載の化合物。 ２２．Ｒ1 がＨであり、Ｒ 2 およびＲ3 が−ＯＣＨ3 である、請求項２１に 記載の化合物。 ２３．Ｒ2 およびＲ3 が−ＯＣＨ2 Ｏ−である、請求項２２に記載の化合物。 ２４．癌に悩む哺乳動物にある量の請求項１に記載の化合物を投与することか らなる、癌細胞の増殖を抑制する治療法。 ２５．癌細胞が中枢神経系（ＣＮＳ）の中に位置する、請求項２４に記載の方 法。 ２６．癌を有する哺乳動物における腫瘍細胞の増殖を抑制するために有効な薬 剤を製造するために請求項１に記載の化合物を使用する方法。 ２７．哺乳動物がヒトである、請求項２６に記載の方法。 ２８．癌が白血病または黒色腫である、請求項２６に記載の方法。 ２９．癌が充実腫瘍である、請求項２６に記載の方法。 ３０．腫瘍が乳房、肺、結腸、または卵巣の腫瘍である、請求項２９に記載の 方法。 ３１．癌細胞が中枢神経系（ＣＮＳ）の中に位置する、請求項２６に記載の方 法。 ３２．前記化合物を薬学上許容される担体と組み合わせて投与する、請求項２ ６に記載の方法。 ３３．前記担体が液状ベヒクルである、請求項３２に記載の方法。 ３４．前記担体が非経口投与に適合する、請求項３２に記載の方法。 ３５．前記担体が錠剤またはカプセルである、請求項３２に記載の方法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012533590A (ja) * 2009-07-20 2012-12-27 ナクソスファルマ・ソシエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ 抗癌剤としてのベンゾキノリジニウム塩誘導体

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW460464B (en) * 1996-11-25 2001-10-21 Nippon Kayaku Kk Novel phenanthridinium derivative having an anti-tumor activity and pharmaceutical composition containing the same
US6140328A (en) * 1997-12-12 2000-10-31 Rutgers, The State University Of New Jersey Heterocyclic cytotoxic agents
IL137351A0 (en) 1998-02-12 2001-07-24 Univ Rutgers Heterocyclic topoisomerase poisons
US6833373B1 (en) 1998-12-23 2004-12-21 G.D. Searle & Co. Method of using an integrin antagonist and one or more antineoplastic agents as a combination therapy in the treatment of neoplasia
US6858598B1 (en) 1998-12-23 2005-02-22 G. D. Searle & Co. Method of using a matrix metalloproteinase inhibitor and one or more antineoplastic agents as a combination therapy in the treatment of neoplasia
CN1093129C (zh) * 1999-08-19 2002-10-23 广州市海科生物技术有限公司 一种具有抗肿瘤生理活性的尖叶唐松草阿原碱及其提取方法
US6740650B2 (en) 1999-10-29 2004-05-25 Rutgers, The State University Of New Jersey Heterocyclic cytotoxic agents
WO2003041660A2 (en) 2001-11-14 2003-05-22 Rutgers, The State University Solubilized topoisomerase poisons
ATE390923T1 (de) 2001-11-14 2008-04-15 Univ Rutgers Topoisomerase-giftmittel
JP4789414B2 (ja) 2001-11-14 2011-10-12 ラトガーズ，ザ ステイト ユニバーシティ 可溶化トポイソメラーゼ毒性剤
US6992089B2 (en) 2002-08-09 2006-01-31 Rutgers, The University Of New Jersey Nitro and amino substituted topoisomerase agents
WO2004014862A1 (en) 2002-08-09 2004-02-19 Rutgers, The State University Nitro and amino substituted heterocycles as topoisomerase i targeting agents
WO2004014918A1 (en) 2002-08-09 2004-02-19 Rutgers, The State University Nitro and amino substituted topoisomerase agents
AU2003290818A1 (en) 2002-11-12 2004-06-03 Edmond J. Lavoie Topoisomerase-targeting agents
US8410109B2 (en) 2005-07-29 2013-04-02 Resverlogix Corp. Pharmaceutical compositions for the prevention and treatment of complex diseases and their delivery by insertable medical devices
PT2118074E (pt) 2007-02-01 2014-03-20 Resverlogix Corp Compostos para a prevenção e tratamento de doenças cardiovasculares
EP2014651A1 (en) * 2007-07-12 2009-01-14 Exonhit Therapeutics SA Compounds and methods for modulating Rho GTPases
SI2346837T1 (sl) 2008-06-26 2015-05-29 Resverlogix Corporation Postopki pripravljanja kinazolinonskih derivatov
US8952021B2 (en) 2009-01-08 2015-02-10 Resverlogix Corp. Compounds for the prevention and treatment of cardiovascular disease
DK2403856T3 (da) 2009-03-06 2013-04-08 Univ Rutgers Methylendioxybenzo[i]phenanthridinderivater anvendt til behandling af cancer
KR101913109B1 (ko) 2009-03-18 2018-10-31 리스버로직스 코퍼레이션 신규한 소염제
US9757368B2 (en) 2009-04-22 2017-09-12 Resverlogix Corp. Anti-inflammatory agents
WO2010127363A1 (en) 2009-05-01 2010-11-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Toposiomerase inhibitors
CN102746292B (zh) * 2011-04-18 2015-03-18 中国医学科学院医药生物技术研究所 环化的小檗碱衍生物及其制备方法和用途
CA2851996C (en) 2011-11-01 2020-01-07 Resverlogix Corp. Pharmaceutical compositions for substituted quinazolinones
US9073878B2 (en) 2012-11-21 2015-07-07 Zenith Epigenetics Corp. Cyclic amines as bromodomain inhibitors
US9765039B2 (en) 2012-11-21 2017-09-19 Zenith Epigenetics Ltd. Biaryl derivatives as bromodomain inhibitors
JP2016507496A (ja) 2012-12-21 2016-03-10 ゼニス・エピジェネティクス・コーポレイションＺｅｎｉｔｈ Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ． ブロモドメイン阻害剤としての新規複素環式化合物
US9642846B2 (en) 2013-03-15 2017-05-09 Georgetown University Antifungal drugs
BR112016005199B1 (pt) 2013-08-23 2022-02-22 Neupharma, Inc Certos compostos químicos, composições, e métodos
EP3270694A4 (en) * 2015-02-17 2018-09-05 Neupharma, Inc. Certain chemical entities, compositions, and methods
US10111885B2 (en) 2015-03-13 2018-10-30 Resverlogix Corp. Compositions and therapeutic methods for the treatment of complement-associated diseases
CN105541714A (zh) * 2015-12-16 2016-05-04 浙江普洛康裕制药有限公司 一种罂粟碱及盐酸罂粟碱的制备方法
JP2019515025A (ja) 2016-04-04 2019-06-06 ラトガース ザ ステイト ユニバーシティー オブ ニュージャージー トポイソメラーゼ毒
WO2018035061A1 (en) 2016-08-15 2018-02-22 Neupharma, Inc. Certain chemical entities, compositions, and methods
CN110759963A (zh) * 2018-07-25 2020-02-07 中山大学 一种稠环类化合物及其制备方法和用途

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5126351A (en) * 1991-01-24 1992-06-30 Glaxo Inc. Antitumor compounds
US5223506A (en) * 1991-06-04 1993-06-29 Glaxo Inc. Cyclic antitumor compounds

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012533590A (ja) * 2009-07-20 2012-12-27 ナクソスファルマ・ソシエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ 抗癌剤としてのベンゾキノリジニウム塩誘導体

Also Published As

Publication number Publication date
KR19990082488A (ko) 1999-11-25
NZ330705A (en) 2000-03-27
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HUP9900413A2 (hu) 1999-05-28
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IL124803A0 (en) 1999-01-26
PT888346E (pt) 2001-10-31
AU710070B2 (en) 1999-09-16
ES2161442T3 (es) 2001-12-01
PL328402A1 (en) 1999-01-18
AU710070C (en) 2001-08-30
EP0888346A1 (en) 1999-01-07
CN1211252A (zh) 1999-03-17
DE69705112T2 (de) 2002-03-21
HUP9900413A3 (en) 2002-02-28
CA2241551A1 (en) 1997-08-14
EP0888346B1 (en) 2001-06-06
TR199801555T2 (xx) 1998-11-23

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