JP2000512658A - 損傷を与えたｒｎａ断片を含むサンスクリーン組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、化粧品または医薬品に使用可能な担体と組み合わせた、保護に有効な量の、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片に関する。この組成物は、紫外線による皮膚の損傷の防止、および光加齢の防止に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】 損傷を与えたＲＮＡ断片を含むサンスクリーン組成物発明の属する技術分野 本発明は、サンスクリーンの分野に関する。より特定的には、本発明は損傷を 与える太陽の放射線からの保護をもたらすＲＮＡを含むサンスクリーンおよび化 粧品組成物に関する。発明の背景 日光に長時間あたると、数多くの好ましくない皮膚症状を引き起こす危険が増 加することは、現在ではよく証明されている。太陽の放射線は多くの皮膚がんを おこす原因として関わるだけでなく、しわ、小じわ、斑、および肌色のくすみの ようなさまざまな結果をもたらす加齢プロセスを加速することが示されている。 皮肉なことに、健康な生活における運動や体育活動の重要性に対する一般の認識 が高まったことにより、屋外での活動が増えて、日光にさらされることの危険性 に関する知識が普及しているのにも関わらず、多くの人々が、必要以上の日光を 浴びる結果となっている。そこで、太陽による損傷に対して十分なレベルの保護 ができるようなサンスクリーンを開発することが重要となる。 現在、太陽光線の影響に対して大きな保護効果を有する数多くのサンスクリー ンおよび化粧品が利用可能である。最も一般的に用いられるサンスクリーンの多 く、たとえば、ｐ−アミノ安息香酸(PABA)およびそのエステル、ベンゾフェノン 類、および桂皮酸エステルは、化学的なサンスクリーン、すなわち、自然界には 見いだされない合成化学物質である。これらの物質の多くはとても保護能力が高 く、ターゲットとなる集団の多くの人々が使用することができるが、化学的サン スクリーンを使用したくない、または、過敏性あるいはアレルギー反応の理由か ら使用できない人々がかなりの数で存在する。これらの人々は天然の、すなわち 、日常的に自然界に見いだされるようなサンスクリーンを要求している。そこで 、天然のサンスクリーンを探し出すことが、最近の流れとなっている。 注目を集めた天然に存在する物質として、核酸、特にＤＮＡおよびＲＮＡがあ る。たとえば、米国特許第5,470,577号および第5,532,001号には、ＤＮＡ断片、 特に、一本鎖ＤＮＡ断片、二本鎖ＤＮＡ断片、これらの混合物、デオキシヌクレ オチド、ジヌクレオチドおよびジヌクレオチド二量体を、表皮細胞中でのメラニ ン合成を刺激するために用いることが開示されており、上記特許によれば、紫外 線からの保護が得られると記載されている。さらに、WO 9601617には、核酸は紫 外線に対する障壁となり得ると述べられており、局所用の組成物に使用できるこ とが示唆されている。GB2233557もまた、ＲＮＡ、リボヌクレオチドまたはリボ ヌクレオシド、およびその塩あるいは他の誘導体を含む細胞保護薬を開示してお り、その細胞保護薬が光の影響から皮膚を保護すると述べている。 照射されたＲＮＡの断片を、紫外線にさらされた細胞の保護のために用いるこ とは以前には報告されていない。本発明において、紫外線により損傷を与えたＲ ＮＡ断片を皮膚細胞に加えると、予期せざることに、その後に紫外線による障害 にさらされた場合に、これらの細胞の修復または紫外線抵抗性を誘導することが できることが判明した。損傷を与えたＲＮＡ断片は、サンスクリーン組成物およ び紫外線からのある程度の保護対策が望まれる他の皮膚用製品の有用な成分であ る。発明の概要 本発明は、化粧品または医薬品に使用可能な担体と組み合わせた、保護に有効 な量の、紫外線で損傷を与えたＲＮＡ断片を含む化粧品または医薬品組成物に関 する。本発明はさらに、保護に有効な量の、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断 片を皮膚細胞に適用することからなる、皮膚細胞を紫外線による損傷から保護す る方法に関する。さらに、本発明は、有効量の、紫外線により損傷を与えたＲＮ Ａ断片を皮膚に適用することからなる、皮膚の光加齢を防止する方法に関する。発明の詳細な説明 本発明は、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を生きている皮膚細胞に適用 すると、その後細胞が紫外線にさらされた場合に、未処理の細胞と比較して処理 済み細胞の生存率が増加するという知見に基づいている。特に、全ＲＮＡを紫外 線で処理することにより生成した損傷ＲＮＡで処理された細胞は、ＵＶＢの細胞 毒性効果からかなりよく保護されることが注目された。得られる保護の強さのレ ベルは、照射されていないＲＮＡにより得られるレベルよりも高い。 本発明で用いられるＲＮＡは、どのような供給源から得られたものでもよく、 どのようなタイプのものでもよい。たとえば、植物、動物または微生物源から得 られたものであってよいし、また、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、トラン スファーＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、ミトコンドリアＲＮＡ（mtＲＮＡ）、ウイルスＲ ＮＡ、または合成ＲＮＡであってよい。好ましい実施態様においては、全ＲＮＡ をＵＶＣ(波長約254nm)で少なくとも約３分間、好ましくは少なくとも５分間照 射する。他の波長の紫外線もまたＲＮＡを照射するために用いることができるが 、その場合は線量が高くなるだろう。特に好ましい実施態様においては、用いら れるＲＮＡは実質的に純粋なもので、すなわち少なくとも90%はＲＮＡ以外の物 質を含まないものである。紫外線処理はＲＮＡの断片化をもたらす。 上記の方法で調製された断片を、プレート上にまいた表皮細胞に約１μｇ/ml の量で適用し、対照として未照射のＲＮＡを用いた。次いで、プレートを、15mJ 間隔で0から75mJの強度でＵＶＢにさらした。一晩インキュベートした後、照射 ＲＮＡで処理した細胞は、紫外線の損傷作用から皮膚細胞を保護したことが見い だされた。未照射のＲＮＡもまたある程度の明白な保護をもたらすが、照射ＲＮ Ａにより提供される保護のほうがはるかに大きい。 本発明の断片はさまざまな化粧品または医薬品に配合することができる。たと えば、断片は、紫外線からの保護が望ましいメーキャップ組成物、たとえば口紅 、アイシャドー、ファンデーション、または屋外で皮膚に塗ることを意図した他 のあらゆるタイプの組成物、たとえばモイスチャライザーまたはリップバルサム (lip balm)にサンスクリーン成分として加えることができる。断片はまた、サン スクリーン組成物の活性成分として有用である。断片は水溶性で、当業者に公知 の方法を用いて通常おこなわれる手段で対象となる製品に配合することができる 。好ましい実施態様においては、断片は、精製した形で用いる場合、全組成物の 重量基準で、約0.001-5%、好ましくは約0.5-3%の量で加える。 本発明の断片は他の太陽光線から保護する物質と組み合わせて用いることもで きる。かくして、別の実施態様において、断片は、他のあらゆる種類のサンスク リーンから選ばれた一つ以上のサンスクリーンと組み合わされる。第二のサンス クリーンは、物理的バリヤー型、たとえば、二酸化チタンもしくは酸化亜鉛、ま たは化学的バリヤー型、たとえば、ベンゾフェノン類；ｐ−アミノ安息香酸(PAB A)およびその誘導体；サリチル酸フェニルまたはホモメンチル；またはケイ皮酸 エステルであってよい。他のサンスクリーンとの組み合わせは、断片を単独で用 いることができるようなあらゆる状況、たとえば、メーキャップ製品、サンスク リーン製品、またはセルフタンニング(self-tanning)製品において有用である。 追加のサンスクリーンは、その通常の使用法に従って決定された量で製品に配合 することができる。 さらに別の実施態様においては、断片は、紫外線により引き起こされる皮膚の 損傷からの補足的な保護をもたらす抗酸化剤またはフリーラジカル捕捉剤とも組 み合わせられる。このような物質の例には、ビタミンＥおよびその誘導体、ビタ ミンＣおよびその誘導体、緑茶抽出物、プロアントシアニジン、β-カロチン等 が含まれる。 さらに別の実施態様においては、ＲＮＡ断片は光加齢の防止にも有用である。 上に記したように、繰り返しおよび/または長時間にわたって太陽の紫外線にさ らされると、実質的に皮膚のエラスチンおよびコラーゲンの質および量の早期の 減退を招く。これらの変化は、深いしわおよび小じわ、弾力の消失、皮膚の乾燥 およびなめらかさの低下、および、斑点あるいは色素沈着によるしみの増加のよ うな加齢の典型的な徴候として外面的に現れる。本発明の断片により提供される 紫外線からの保護により、光加齢に対する望ましい保護をもおこなうことができ る。このように、上記の製品中におけるサンスクリーンとしての使用に加えて、 上に記載したようなさまざまな皮膚用製品中に使用した場合、断片は単独で光加 齢を防止するために使用することができる。 この方法において、照射された断片は他の抗加齢剤または皮膚強化剤と組み合 わせることもできる。この目的で、断片は一つ以上の以下の製品と組み合わせる ことができる：αまたはβヒドロキシ酸、たとえば、乳酸、グリコール酸、クエ ン酸、αヒドロキシオクタン酸、αヒドロキシデカン酸、αヒドロキシラウリン 酸、酒石酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、αヒドロキシ酪酸、αヒドロキシ イソ酪酸、リンゴ酸、マンデル酸、ピルビン酸、およびタルトロン酸、およびサ リチル酸；レチノイド、たとえば、レチノール、酢酸レチニル、パルミチン酸レ チニル、酪酸レチニル、オレイン酸レチニル、リノレン酸レチニル、およびレチ ノイン酸；DHEAおよびその誘導体。 本発明を以下の限定的でない実施例によりさらに詳しく説明する。実施例 I. 照射された細胞の生存度の増加 A. 材料および方法 1. ＲＮＡ断片の調製 Sigma社より購入した20マイクログラムのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ） を1mlのPBSに可溶化した。可溶化したＲＮＡを二つの0.5mlアリコートに分割し 、それぞれを35mmのペトリ皿に入れた。一方のアリコートを254nmのＵＶＣで５ 分間照射し、他方のサンプルは紫外線にさらさなかった。次いで、それぞれのサ ンプルを10%DMEMで体積が10mlとなるようにさらに希釈し、最終濃度が1μｇ/ml となるようにした。このストック溶液は、次いで、希釈しないで、またはさらに 希釈して0.1、0.5または１μｇ/mlの最終濃度とした。 2. 皮膚細胞の処理 Hacat皮膚細胞（形質転換したヒトケラチノサイト）を二つの96ウェルプレー トにまき、およそ75%の集密度に達した後、処理をおこなった。調製されたＲＮ Ａ溶液をそれぞれのウェルに加え、37℃で加湿下に5%の二酸化炭素のもとで一晩 インキュベートした。次に、プレートを180μｌのPBSで三回すすぎ、100μｌのP BSを加えて照射をおこなった。プレートを、15mJの間隔で0から75mJ/cm²のＵＶ Ｂで照射した。照射後、PBSを吸引し、ｍＲＮＡ溶液を上に記したように加えた 。37℃で一晩インキュベートした後、ニュートラルレッド色素取り込みアッセイ を用いてプレートの細胞生存度をアッセイした。 B. 結果 表1aおよび2aは、保護剤として未照射(1)および照射(2)mＲＮＡを用いて得ら れた結果を示しており、これらの結果は、照射後の生存パーセントで表す。表1b および2bは、未照射の対照と比較したそれぞれの処理についての生存率の変化パ ーセントを示している。表1a 表1b 表2a 表2b これらの結果は、照射されたＲＮＡ断片で処理した細胞と未照射のＲＮＡのみ で処理した細胞では生存率に顕著な差があることを示しており、それゆえ、照射 されたＲＮＡ断片の保護効果を証明している。 II．ＲＮＡ断片含有組成物の調製 以下に、本発明のＲＮＡ断片を含む組成物の例を記載する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，Ｍ Ｗ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＷ，ＨＵ，Ｉ Ｄ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ， ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ ，ＹＵ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．化粧品または医薬品に使用可能な担体と組み合わせた、保護に有効な量の、 紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を含む化粧品または医薬品組成物。 ２．断片がＵＶＣにより損傷を与えたものである、請求項１記載の組成物。 ３．ＲＮＡがメッセンジャーＲＮＡである、請求項１記載の組成物。 ４．断片が重量で約0.001から5%の量で存在する、請求項２記載の組成物。 ５．断片が約0.5%-3%の量で存在する、請求項４記載の組成物。 ６．組成物がサンスクリーンである、請求項１記載の組成物。 ７．少なくとも一つの追加のサンスクリーン剤をさらに含む、請求項１記載の組 成物。 ８．組成物が、口紅、ファンデーション、パウダー、またはアイシャドーからな る群から選択されるメーキャップ製品である、請求項１記載の組成物。 ９．組成物がモイスチャライザーまたはリップバルサムである、請求項１記載の 組成物。 10．さらに抗酸化剤を含む、請求項１記載の組成物。 11．保護に有効な量の、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を含む組成物を皮 膚細胞に適用することからなる、皮膚細胞を紫外線による損傷から保護する方 法。 12．断片がＵＶＣにより損傷を与えたものである、請求項11記載の方法。 13．ＲＮＡがメッセンジャーＲＮＡである、請求項11記載の方法。 14．断片が約0.001から5%の量で存在する、請求項12記載の方法。 15．断片が約0.5%から3%の量で存在する、請求項14記載の方法。 16．断片がサンスクリーン剤と組み合わされている、請求項11記載の方法。 17．断片が抗酸化剤と組み合わされている、請求項11記載の方法。 18．保護に有効な量の、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を含む組成物を皮 膚に適用することからなる、光加齢を防止する方法。 19．断片がＵＶＣにより損傷を与えたものである、請求項18記載の方法。 20．ＲＮＡがメッセンジャーＲＮＡである、請求項18記載の方法。 21．断片が組成物中に重量で約0.001から5%の量で存在する、請求項19記載の方 法。 22．断片が約0.5%から3%の量で存在する、請求項21記載の方法。