JP2002525331A - 神経根障害を処置するための所定薬剤の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、ＴＮＦ−α抑制剤の有効量からなるＴＮＦ−αの放出により生じた脊髄障害を処置するための医薬組成物、並びにこの種の障害の処置方法およびこの種の処置に関する医薬組成物を作成する際のＴＮＦ−α抑制剤の使用に関するものである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 技術分野 本発明は、神経根障害を処置する医薬組成物を作成する際のＴＮＦ−α抑制剤
の使用、並びに神経根障害の処置方法に関するものである。

【０００２】 本発明の目的は、盤（ｄｉｓｋ）関連サイトキンの阻止により放射性疼痛とし
て腕もしくは脚部に昇りうる（坐骨神経痛）、盤ヘルニア化により誘発された神
経根障害を処置する可能性を得ることにある。

【０００３】 発明の背景 盤ヘルニア化は、顕著な疼痛および筋肉機能不全および／従って作業能力の損
失を生ぜしめうる面倒な障害である。ヘルニア化は脊椎における任意の盤（ｄｉ
ｓｋ）で生じうるが、腰椎および脳椎におけるヘルニア化が最も一般的である。
脳椎における盤ヘルニア化は腕における放射性疼痛および筋肉機能不全を誘発さ
せ、腰椎におけるヘルニア化は脚部における放射状疼痛および筋肉機能不全を誘
発しうる。脚部における放射性疼痛は一般に「坐骨神経痛」と称される。盤ヘル
ニア化は種々異なる程度にトラブルを生ぜしめ、疼痛は１−２ヶ月または重度の
場合は６ヶ月まで持続しうる。盤ヘルニア化の結果として生じうる腕もしくは脚
部の疼痛は極めて強烈であり、従って病状の期間に際し個人的患者の全生命状態
に影響を及ぼしうる。

【０００４】 ＵＳ−Ａ−５，７０３，０９２号はメタロプロテナーゼおよびＴＮＦ抑制剤と
してのヒドロキサミン酸化合物および炭素環式酸の、特に関節炎および他の関連
炎症病の処置における使用を開示している。神経根障害を処置するこれら化合物
の使用は開示も示唆もされていない。

【０００５】 ＵＳ−Ａ−４，９２５，８３３号は、骨蛋白合成および骨粗鬆症の処置を向上
させるテトラサイクリンの使用を開示している。

【０００６】 ＵＳ−Ａ−４，６６６，８９７号は、テトラサイクリンによる哺乳動物コラー
ゲン分解酵素の抑制を解持している。コラーゲン分解活性は過度の骨吸収、腹部
病、リュウマチ様関節炎、角膜潰瘍または皮膚もしくは他の結合組織コラーゲン
の吸収により証明される。

【０００７】 これら２種の刊行物はいずれも神経根障害またはその処置につき記載していな
い。

【０００８】 本発明の説明 今回驚くことに、メチルプレニゾロンを除くメタロプロテナーゼ抑制剤、化学
改質テトラサイクリンを含めテトラサイクリン、キノロン、コルチコステロイド
、タリドマイド、ラザロイド、ペントキシフィリン、ヒドロキサミン酸誘導体、
ナプトピラン、可溶性サイトキンリセプタ、ＴＮＦ−αに対するモノクローナル
抗体、アムリノン、ピモベンダン、ベスナリノン、ホスホジエステラーゼＩＩＩ
抑制剤、ラクトフェリンおよびラクトフェリン誘導同族体およびメラトニンより
なる群から選択される塩基もしくはその付加塩の形態における治療上活性量のＴ
ＮＦ−α抑制剤を医薬上許容しうるキャリヤと共に含む医薬組成物を使用するこ
とにより神経根障害を処置することができ、或いは神経根障害の徴候を少なくと
も軽減させうることが示された。

【０００９】 治療上有効量とは、他の治療用途につきこの種の化合物を使用する際に通常使
用される投与量である。これら薬の多くは産業上公知の薬剤（登録商標）である
。

【００１０】 この活性を有する化合物はたとえばテトラサイクリン、ドキシサイクリン、リ
メサイクリン、オキシテトラサイクリン、ミノサイクリンおよび化学改質テトラ
サイクリン、デジメチルアミノテトラサイクリンのようなテトラサイクリン類、
ヒドロキサミン酸化合物、炭素環式酸および誘導体、タリドマイド、ラザロイド
、ペントキシフィリン、ナプトピラン、可溶性サイトキンリセプタ、ＴＮＦ−α
に対するモノクローナル抗体、アムリノン、ピモベンダン、ベスナリノン、ホス
ホジエステラーゼＩＩＩ抑制剤、ラクトフェリンおよびラクトフェリン誘導同族
体、メラトニン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、サイプロフロキサシン、
ガチフロキサシン、ペフロキサシン、ロメフロキサシンおよびテマフロキサシン
である。これらは塩基または付加塩の形態で存在することができ、いずれの場合
も最も良好な医薬作用を有すると共に医薬上適する組成物にしうる最も良好な性
質を有する。

【００１１】 さらに、活性成分は塩基または付加塩の形態におけるインターフェロン−γ、
インターロイキン−１および酸化窒素（ＮＯ）のようなＴＮＦ−αの放出により
停止された化合物を抑制する物質を含む。

【００１２】 さらに本発明は、神経根障害の徴候を抑制する方法にも関するものである。

【００１３】 ドキソサイクリン、可溶性サイトキン−リセプタおよびモノクローナルサイト
キン抗体の作用が検討されており、使用方法および得られる結果を以下開示する
。

【００１４】例 研究設計 ＴＮＦ−α活性を阻止する髄核および各種処置の作用を、免疫組織化学および
神経伝達速度の記録を用い実験過程で評価した。

【００１５】背景データの要約： 髄核により誘発される観察効果のメタ分析は、これら作用が１種の特定サイト
キン、すなわち腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ（α））に関連しうることを示す。

【００１６】目的 ブタ髄核細胞におけるＴＮＦ（α）の存在を評価すると共に、ＴＮＦ（α）の
阻止が神経根伝達速度の髄核誘発低下をも阻止するかどうかを調べる。

【００１７】方法 シリーズ−１： 培養された髄核細胞をＴＮＦ（α）のモノクローナル抗体で免疫組織学的に染
色した。

【００１８】 シリーズ−２： 髄核を腰椎盤から採取すると共に１３頭のブタにおける肉尾骨馬尾に自家投与
した。４頭のブタには１００ｍｇのドキシサイクリンを静脈接種し、５頭のブタ
にはＴＮＦ−αに対する阻止性モノクローナル抗体を髄核にて局部的に施し、４
頭のブタは未処理で残すと共に比較を構成した。投与の３日後、神経根伝達速度
を投与帯域にわたり局部的電気刺激により決定した。

【００１９】 シリーズ−３： １３頭のブタには自家髄核をその肉尾骨馬尾にシリーズ−２と同様に設置した
。５頭のブタ（体重２５ｋｇ）にはレミケード（登録商標）（インフリキシマブ
）１００ｍｇを術前接種し、８頭のブタにはエンブレル（登録商標）（エタネル
セプ）１２．５ｍｇを術前接種し、さらに術後の３日間にわたり１２．５ｍｇで
接種した。髄核投与の７日後、神経根伝達速度を投与帯域にわたりシリーズ−２
に従い局部的電気刺激により決定した。

【００２０】結果 シリーズ−１： ＴＮＦ−αは髄核細胞に存在することが判明した。

【００２１】 シリーズ−２： ＴＮＦ−αに対する選択的抗体は神経根伝達速度の低下を制限したが、比較シ
リーズに対し統計上の有意性はなかった。しかしながら、ドキシサイクリンによ
る処理は伝達速度の髄核誘発低下を顕著に阻止した。

【００２２】 シリーズ−３： 両薬物（インフリキシマブおよびエタネルセプ）は髄核誘発神経障害を効率的
に阻止し、通常の平均神経伝達速度がこれら２種の薬物の両者で処理した後に見
られた。

【００２３】結論 先ず最初に特定物質、すなわち腫瘍壊死因子−αを、局部投与後に神経根の髄
核誘発作用に関連させた。この物質の作用は他の同様な物質と共に相乗的である
が、この研究のデータは髄核生物学的活性を持続理解するため極めて重要であり
、坐骨神経痛の将来の処置手段につき潜在的用途を有する。

【００２４】 盤ヘルニア化にて脊椎神経根を圧縮する生物学上不活性な組織成分として従来
考えられていたが、最近では髄核は極めて活性であって厚膜外投与した際に隣接
神経根における構造上および機能上の両変化を誘発することが判明した（２４、
３７、３８、４１、４２）。かくして、自家髄核は軸索変化および特徴的ミエリ
ン障害（２４、３８、４１、４２）、血管浸透性増大（９、４４）、血管内凝集
（２４、３６）を誘発しうる共に、髄核細胞の膜結合構造もしくは物質がこれら
作用の原因になる（２４、３７）ことが確立された。さらに、これら作用はメチ
ルプレドニゾロンおよびサイクロスポリンＡ（２、３８）により効率的に阻止さ
れることも判明した。これらデータを重視すれば、これら作用の全てに関連する
少なくとも一種のサイトキン、すなわち腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）の存在が
認識される。ＴＮＦ−αが髄核誘発神経根障害に関与しうるかどうかを評価する
ため、髄核細胞におけるＴＮＦ−αの存在を評価すると共に、髄核誘発作用がド
キシサイクリン、可溶性ＴＮＦ−リセプタおよび選択性モノクローナルＴＮＦ−
抗体により阻止されうるかどうかを検討し、後者は髄核に局部的および全身的の
両者で投与した。

【００２５】材料および方法 シリーズ−１：ブタ髄核細胞におけるＴＮＦ−αの存在： 合計１３個の腰骨盤および胸骨盤からの髄核（ＮＰ）を、他の目的につき用い
られたブタから得た。ＮＰをＨａｍのＦ１２培地（ギブコ・ＢＲＬ、ペースレー
、スコットランド）で１回洗浄し、次いで遠心分離すると共にハムスのＦ１２培
地（０．８ｍｇ／ｍｌ、シグマ・ケミカル・カンパニー、セントルイス、ＭＯ、
ＵＳＡ）における５ｍｌのコラゲナーゼ溶液に４０分間にわたり３７℃にて２５
ｃｍ^２組織培養フラスコで懸濁させた。分離されたＮＰ細胞ペレットを、１％Ｌ
−グルタミン２００ｍＭ（ギブコ・ＢＲＬ、ペースレー、スコットランド）と５
０μｇ／ｍｌゲンタマイシンサルフェート（ギブコ・ＢＲＬ、ペースレー、スコ
ットランド）と１０％胎児ウシ血清（ＦＣＳ）（ギブコ・ＢＲＬ、ペースレー、
スコットランド）とが補充されたＤＭＥＭ／Ｆ１２ １：１培地（ギブコ・ＢＲ
Ｌ、ペースレー、スコットランド）に懸濁させた。これら細胞を３７℃にて空気
中５％ＣＯ_２で３〜４週間にわたり培養し、次いで組織培養処理ガラススライド
（ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー・ラブウェアー、フランクリン
・レークス、ＮＪ、ＵＳＡ）で直接培養した。ガラススライド上にて５日間の後
、細胞をその場にアセトンにより１０分間にわたり固定させた。３％Ｈ_２Ｏ_２（
シグマ・ケミカル・カンパニー、セントルイス、ＭＯ、ＵＳＡ）の３０分間にわ
たる添加およびウシ血清（イミュノピュアＡＢＣ、ペルオキシダーゼ、ネズミＩ
ｇＧ染色キットＮｏ．３２０２８、ピアス、ロックフォード、ＩＬ）の２０分間
にわたる添加により不適切な抗原を阻止した後、一次抗体（抗−ブタＴＮＦ−α
モノクローナル精製抗体、エンドゲン、ケンブリッジ、ＭＡ、ＵＳＡ）を＋４０
℃にて１晩にわたり添加し、１：１０、１：２０および１：４０にて希釈した。
比較のためＰＢＳ（燐酸緩衝塩水、メルク、ダルムスタット、ドイツ国）に懸濁
されたＢＳＡ（ウシ血清アルブミン、インテルゲン・カンパニー、ニューヨーク
、ＵＳＡ）を同様に添加した。翌日、各細胞をＰＢＳにおける１％ＢＳＡで洗浄
し、二次抗体（イミュノピュアＡＢＣ、ペルオキシダーゼ、ネズミＩｇＧ染色キ
ットＮｏ．３２０２８、ピアス、ロックフォード、ＩＬ）を３０分間施した。こ
の反応を増進させるため、細胞をアビジン−ビオチン複合体にさらに３０分間に
わたり露呈させた（イミュノピュアＡＢＣ、ペルオキシダーゼ、ネズミＩｇＧ染
色キットＮｏ．３２０２８、ピアス、ロックフォード、ＩＬ）。次いで各細胞を
２０ｍｇのＤＡＢ（３，３−ジアミノゲンジジン テトラヒドロクロライドＮｏ
．Ｄ−５９０５、シグマ・ケミカル・カンパニー、セントルイス、ＭＯ、ＵＳＡ
）および塩水１０ｍｌにおける０．０３３ｍｌの３％Ｈ_２Ｏ_２に１０分間露呈さ
せた。各細胞をＰＢＳで洗浄し、一連のエタノールにて脱水し、偏見のない観察
者により光学顕微鏡を装着すると共にＴＮＦ−αの存在を示す褐色着色の存在に
関し検査した。

【００２６】 シリーズ２：神経生理学的評価： １３頭のブタ（体重２５〜３０ｋｇ）に２０ｍｇ／体重１ｋｇのケタラー（登
録商標）（ケタミン５０ｍｇ／ｍｌ、パルケ−デービス、モリス・プレインズ、
ニュージャージー）を筋肉内注射すると共に４ｍｇ／体重１ｋｇのハイプノジル
（登録商標）（メトミデートクロライド５０ｍｇ／ｍｌ、ＡＢレオ、ヘルシング
ボルグ、スウェーデン国）と０．１ｍｇ／体重１ｋｇのストレスニル（登録商標
）（アザペロン２ｍｇ／ｍｌ、ヤンセン・ファーマスーチカ、ベールセ、ベルギ
ー国）を静脈内注射した。麻酔を２ｍｇ／体重１ｋｇのハイプノジル（登録商標
）および０．０５ｍｇ／体重１ｋｇのストレスニル（登録商標）の追加静脈注射
により維持した。これらブタにはさらに０．１ｍｇ／体重１ｋｇのステソリッド
・ノブム（登録商標）（ジアゼパム、ズメックス、ヘルシングボルグ、スウェー
デン）を術後に静脈注射した。

【００２７】 髄核をレトロ腹部経路を介し第５番腰椎盤から採取した（４２）。約４０ｍｇ
の髄核を第１尾骨椎の肉尾骨馬尾に施した。４頭のブタには処理を施さなかった
（処理なし）。４頭の他のブタには１００ｍｇのドキシサイクリン（ビブラマイ
シン、ファイザー・インコーポレイテッド、ニューヨーク、ＵＳＡ）の塩水１０
０ｍｌにおける静脈内輸液を１時間にわたり接種した。５頭のブタにおいて、髄
核をシリーズ１で用いた抗−ＴＮＦ−α抗体の１００ｇの１．１１ｍｇ／ｍｌ懸
濁物と混合した後、施した。

【００２８】 施してから３日間の後、ブタを２０ｍｇ／体重１ｋｇのケタラー（登録商標）
の筋肉内注射および３５ｍｇ／体重１ｋｇのペントタール（登録商標）（チオペ
ンタールナトリウム、アボットラボラトリーズ、シカゴ、ＩＬ）の静脈内注射に
より再麻酔した。これらブタをレスピレータで換気した。１００ｍｇ／体重１ｋ
ｇのクロラロース（α）−Ｄ（＋）−グルコ−クロラロース（メルク、ダムスタ
ット、ドイツ国）の静脈内ボルス注射および３０ｍｇ／ｋｇ／ｈｒのクロラロー
スの連続供給により維持した。第四仙骨から第三尾骨椎までの椎弓切除を行った
。神経根をスポンゴスタン（登録商標）（フェロサン、デンマーク国）で覆った
。局部的組織温度を連続監視すると共に、加熱ポンプにより３７．５〜３８．０
℃に維持した。

【００２９】 馬尾を、グラスＳＤ９スチミュレータ（グラス・インスツルメント・カンパニ
ー、クインシー、ＭＡ）に接続された２本のＥ２皮下白金針電極により刺激し、
馬尾に最初に１０ｍｍの頭蓋骨および／次いで１０ｍｍの尾部に露出領域まで間
けつ的にゆっくり置いた。露出神経繊維からの衝撃のみが登録されるよう確保す
べく、２つの刺激部位の間における脊椎キャナルから出た神経根を切除した。約
１０ｍｍ離間した尾部におけるパラスピナル筋に入れた２本の皮下白金針電極に
よりＥＭＧを記録した。この手順は再現性があって馬尾神経根の運動神経繊維の
機能的測定を示す。ＥＭＧをスーパースコープ・ソフトウエアーおよびマックア
ジオスＩＩ ＡＩＤコンバータ（ＧＷインスツルメンツ、ソマービル、ＭＡ）が
グラスＰ１８プレアンプリファイアー（グラス・インスツルメント・カンパニー
、クインシー、ＭＡ）と一緒に装着されたマッキントッシュＩＩｃｉコンピュー
タにより可視化させた。２つの記録からのＥＭＧの第１ピーク間における分離間
隔を決定すると共に、馬尾における２つの刺激部位間の分離間隔をキャリパーで
測定した。２つの刺激部位間における神経伝達速度をかくしてこれら２つの測定
値から計算することができた。

【００３０】 神経生理学的分析を行う人間は個々の動物につき実験プロトコールに気が付か
ず、検討を完結した後にデータを３つの実験群に配置し、これら群間の統計差を
スチューデンツ試験により評価した。この実験の実験プロトコールは地方動物研
究倫理委員会により承認された。

【００３１】 シリーズ−３： １３頭のブタには自家髄骨をシリーズ−２と同様な肉尾馬尾に戴置した。５頭
のブタ（体重２５ｋｇ）にはヒト／ネズミ モノクローナル抗体レミケード（登
録商標）（インフリキシマブ、イミュネックス・コーポレイション、シアトル、
ＷＡ９８１０１、ＵＳＡ）１００ｍｇを術前に静脈注射し、８頭のブタにはエン
ブレル（登録商標）（エタネルセプト、セントコールＢ．Ｖ．、ライデン、オラ
ンダ国）１２．５ｍｇを術前にｓ．ｃ．投与接種すると共に、さらに術後の３日
間にわたり１２．５ｍｇをｓ．ｃ．投与した。髄核投与の７日後に、神経根伝達
速度を投与帯域にわたりシリーズ−２に従って局部的電気刺激により決定した。
試験を盲倹するため神経生理学的評価を他の試験と並行して行い、分析を行った
人間は試験と各特定動物が受けた処理とを知らなかった。シリーズ−３には、髄
核または脂肪（比較）投与の７日後における神経伝達速度の予備知識に基づき、
処理なし動物を含ませなかった。群、すなわちインフリキシマブおよびエタネル
セプト、処理なし髄核（予備データからのプラス比較）と、レトロペリトニアル
脂肪（予備データからのマイナス比較）の投与との間の統計上の差をＡＮＯＶＡ
およびフィッシャーＰＬＳＤ（５％）を用いて評価した。

【００３２】結果 シリーズ−１：ブタ髄核細胞におけるＴＮＦ−αの存在： 染色ガラススライドの光学顕微鏡外観の例。「一次抗体」（比較）としてＰＢ
ＳにおけるＢＳＡを用いたセクションには染色が観察されず、不適切な抗原の標
識および可視化が存在しないことを確認した。抗−ＴＮＦ−α抗体を１：４０希
釈で施した場合、弱い染色のみが存在した。しかしながら、染色は抗体の希釈が
減少するにつれ増大した。染色が細胞のソーマに見られ、これはＴＮＦ−αが細
胞質、細胞膜に結合した細胞表面、またはその両者に位置するかどうかを区別す
ることができなかつた。

【００３３】 シリーズ−２：神経生理学的評価： 非改変髄核および処理なしの適用は事前の試験と同様な神経伝達速度の低下を
誘発した（表１）のに対し、ドキシサイクリンでの処理はこの低下を完全に阻止
した（ｐ＜０．０１スチューデント試験）。抗−ＴＮＦ−α−抗体の局部的投与
もこの低下の部分的阻止を誘発したが、ドキシサイクリンほど完全でなく非処理
シリーズと統計上有意差がなかった。

【００３４】 シリーズ３： 両薬剤での処理は神経根伝達速度の髄核誘発低下を防止すると思われた。何故
なら、これら両処理群の平均神経根伝達速度は事前の試験（表２）に見られるよ
うに脂肪投与シリーズの平均伝達に近かったからである。髄核を投与するが、処
理なしの場合は両薬剤につき見られるように統計的有意差が存在した：

【００３５】

【表１】 表１：シリーズ−２処理 ｎ ＮＣＶ（ｍ／ｓ＋ＳＤ） 局部的抗−ＴＮＦ−α ５ ６４±２８ ドキシサイクリン ４ ７６±９ 処理なし ４ ４６±１２

【００３６】

【表２】 表２：シリーズ−３処理 ｎ ＮＣＶ（ｍ／ｓ＋ＳＤ） 脂肪^＊ ５ ７６±１１ エンブレル（登録商標） ８ ７８±１４ レミケード（登録商標） ５ ７９±１５ 処理なし^＊ ５ ４５±１９ ＊参照番号４２、オルマーカー等、１９９３からのデータ

【００３７】検討 本試験のデータは、ＴＮＦ−αがブタの髄核細胞に存在しうることを示した。
ＴＮＦ−αを局部的投与の選択性モノクローナル抗体により阻止した場合、神経
根伝達速度の髄核誘発低下は部分的に阻止されたが、処理なし動物のシリーズと
比較して統計上の有意差はなかった。しかしながらドキシサイクリン、インフリ
キシマブおよびエタネルセプトでの全身的処理を用いてＴＮＦ−αを抑制した場
合、神経根伝達速度の低下が顕著に防止された。

【００３８】 近年、自家髄核の局部的投与は隣接神経根を損傷しうることが証明された。従
って盤ヘルニア化にて見られる神経根障害は単に神経根の機械的変形のみに基づ
かず、ヘルニア化した髄核の硬膜存在に関連する未知の「生化学的作用」によっ
ても誘発されうることが明らかとなった。この新規な研究分野は多くの実験的研
究をもたらしたが、関与するメカニズムおよび物質は充分知られていない。自家
髄核の局部的投与は軸索障害（２４、３７、３８、４０〜４２）、ミエリンシー
スの特徴的障害（２４、３８、４０〜４２）、血管浸透性の局部的増大（９、３
６、４４）、血管内凝集、神経内血流の低下（４３）、およびロイコタクシス（
３６）を誘発させうることが見られた。さらに髄核関連作用はメチルプレドニゾ
ロン（３８）およびサイクロスポリンＡ（２）により効率的に阻止されうるが、
インドメタシン（３）およびリドカイン（６９）による効率は若干低いことが見
られた。さらに、これら作用は髄核細胞（３７）により、特に細胞膜に結合した
物質もしくは構造体（２５）により媒介されることが了解された。これらデータ
を重要に考慮すれば、少なくとも１種の特定サイトキンはこれら観察作用（すな
わち腫瘍壊死因子−α（ＴＭＦ−α））に関連したことが明らかとなる。ＴＮＦ
−αは、主として髄核誘発ミエリン障害（２９、４７、５１、５４、６２、６４
、６６、７０）に近似した特徴的ミエリン障害として見られる神経障害（２９、
３１、４５、５０、６６）を誘発しうる。さらにＴＮＦ−αは血管浸透性におけ
る増大（４７、６６）をも誘発すると共に、凝集をも開始させる（２２、３４、
６３）。さらに、ＴＮＦ−αはステロイド（４、８、２１、６１、６８）および
サイクロスポリンＡ（１１、５５、６７、６８）によっても阻止されうる。しか
しながら、ＴＮＦ−αに対する阻止作用はＮＳＡＩＤ（１４、１７、２０）によ
りそれほど顕著でなく、リドカインにより極めて低く或いは反対である（５、３
２、４６、６０）。髄核の局部的投与はラットにおける疼痛関連挙動（特に熱ハ
イパーアルゲシア（２３、４０）をも誘発しうることが最近観察された。さらに
ＴＮＦ−αはこの種の挙動特徴的変化（１２、３５、５６、６６）にも関連する
と共に、一般に神経病（３０、５４、５６、５７）にも関連することが判明した
。しかしながら、髄核の細胞におけるＴＮＦ−αの存在可能性を評価した試験は
存在しない。

【００３９】 ＴＮＦ−αが神経根伝達速度における髄核誘発低下の観察に関連しえたかどう
かを評価するには、先ず最初に髄核細胞にＴＮＦ−αが存在したかどうかを分析
する必要があった。データは、ＴＮＦ−αがこれら細胞に存在したことを明らか
に示した。ＴＮＦ−αは先駆体（プロ−ＴＮＦ）として生成され、これは膜に結
合すると共に亜鉛依存性メタロ−エンドペプチダーゼ（ＴＮＦ−α変換酵素、Ｔ
ＡＣＥ）により細胞膜から分離させて活性化される（６、１５、１６、４８、４
９）。従って、これは自家髄核細胞の単なる細胞膜の投与が神経伝達速度低下を
誘発するという実験的知見に良く関連し、これは作用が膜結合物質により媒介さ
れることを示した。第２に、ＴＮＦ−αの作用は制御的に阻止せねばならかった
。先ず最初に、シリーズ−１における免疫組織化学につき使用したと同じ選択的
抗体（これはＴＮＦ−αの作用を阻止することも知られる）を投与前の髄核に添
加するよう選択する。さらに、ブタをＴＮＦ−αを阻止することが知られたドキ
シサイクリンで処理するよう選択する（２６、２７、３３、５２、５３）。しか
しながら、ドキシサイクリン製剤の低ｐＨに基づき、髄核への局部的添加の代わ
りに静脈内注射によりブタを処理するよう選択した。何故なら、低ｐＨにおける
髄核は髄核の作用を強化することが判明しているからである（３８、３９）。

【００４０】 特定ＴＮＦ−α抑制につき最近開発された２種の薬剤をも、この試験に包含さ
せた。インフリキシマブは、ヒト一定領域とネズミ可変領域とで構成さたキメラ
モノクローナル抗体であってヒトＴＮＦ−αに特異的に結合する。３日間の観察
期間にわたりシリーズ−２で使用したモノクローナル抗体とは異なり、インフリ
キシマブを自家移植髄核に局部的に投与しなかったが、その代わりに臨床的に推
奨される投与量（４ｍｇ／ｋｇ）にて全身的に投与した。エタネルセプトは、ヒ
トＩｇＧのＦｃ部分よりなるダイマー融合蛋白である。この薬物を、小児科用途
につき推奨された投与量（０．５ｍｇ／ｋｇ、１週間２回）に匹敵する投与量に
て投与した。

【００４１】 神経伝達速度に関するデータは、低下が全身的処理により完全に阻止されると
共に、これらシリーズにおける神経伝達速度が事前の研究からの比較物質（レト
ロ腹部脂肪）投与の後の伝達速度に近かったことを示した（４２）。髄核への抗
−ＴＮＦ−α−抗体の投与も神経伝達速度の低下を部分防止したがドキソサイク
リンほど顕著でなく、このシリーズにおける速度は未処理動物でのシリーズにお
ける速度に対し統計上の有意差がデータの広い偏差に基づき存在しなかった。

【００４２】 局部的抗−ＴＮＦ−α−抗体処理が神経伝達速度の髄核誘発低下を部分的にの
み阻止したという事実およびデータの高い標準偏差は恐らく少なくとも３つの異
なる説明を有する。第１に、この群内の特定データを見れば、神経伝達速度は２
匹の動物にて低く（平均３７．５ｍ／ｓ）かつ３匹の動物で高い（平均８１．３
ｍ／ｓ）であることが判明した。従って、抗−ＴＮＦ−α処理シリーズには明確
に異なる２群のデータが存在する。これは高い標準偏差の説明となり、阻止作用
が３匹の動物にて充分であると共に２匹の動物では不充分であることを示唆する
。これら動物における作用の欠如は充分でないＴＮＦ−α分子に関する抗体の量
に単に基づき、高投与量の抗体を使用した場合はＴＮＦ−α作用がこれら動物に
おいても阻止されたであろう。次いで、この種のシナリオは、ＴＮＦ−α単独が
観察髄核誘発作用の原因となること、およびこれが低過ぎる抗体の量に基づき実
験的に証明しえなかったことを理論的に示唆する。

【００４３】 第２に、たとえばドキシサイクリンおよびミノサイクリンのようなテトラサイ
クリンも多数のサイトキンおよび他の物質を阻止しうることが知られている。た
とえば、これらはＩＬ−１（１、２８、５８）、ＩＦＮγ（２７）、ＮＯ−シン
テターゼ１およびメタロプロテナーゼ（１、５３、５８）を阻止することができ
る。特にＩＬ−１およびＩＦＮγはＴＮＦ−αと相乗作用することが知られてお
り、多かれ少なかれ神経毒性であることが知られている（７、１０、１３、１８
、１９、５６、５９）。これら物質はステロイドおよびサイクロスポリンＡによ
って阻止され、これらは髄核誘発作用がこれら物質により阻止されうることを示
した（８、６７）髄核誘発神経根障害に対する事前の観察によく対応する。従っ
て、ＴＮＦ−αの選択的阻止は神経作用に対する髄核誘発作用を完全に阻止する
には充分でないこと、および他の相乗性物質の同時的阻止も必要であるという可
能性も考えられる。たとえば他方において、このシナリオは、ＴＮＦ−αが単に
髄核誘発作用の原因となるに過ぎないこと、およびドキシサイクリンによっても
阻止される他の相乗性物質も必要であることを示唆する。

【００４４】 第３の説明は、髄核におけるＴＮＦの量が神経根に局在する病理学的連鎖を開
始させるのに充分であって血管浸透性および凝集の増大、並びに全身的白血球の
再生を含みうる点である。しかしながら、ＴＮＦ−αの主たる含有量を有すると
共に、充分な投与量における全身的処理がこれら白血球からの貢献を阻止するの
に必要であり、従って神経障害に到るイベントを阻止するのはこれら白血球であ
る。

【００４５】 ＴＮＦ−αは各種の病理学的作用を有する。これはたとえば神経組織および血
管のような組織に対する直接的作用を有し、他の病源物質を他の細胞が成形する
よう刺激し、さらに炎症細胞および神経組織に局在するシュワン細胞の両者によ
り一層多量のＴＮＦ−αの放出を開始させうる（６５）。従って、少量のＴＮＦ
−αでさえこれらプロセスを開始させるのに充分であり、かつサイトキン生成細
胞の局部的再生、並びに他のサイトキンおよびＴＮＦ−αの生成および放出にお
けるその後の増大も存在すると信ずる理由がある。ＴＮＦ−αは従って病理学的
プロセスの「発火キー」として作用しうると共に、髄核誘発神経障害の背後にあ
る病理学的連鎖の開始につき重要な役割を演ずる。しかしながら、ＴＮＦ−αの
主たる貢献は再生され、凝集し、かつ恐らく血管外滲出した白血球から再生する
こともでき、この薬理学的阻止の成功は全身的処置によってのみ達成されうる。

【００４６】 結論として、ＴＮＦ−αの正確な役割は実験設定から完全には理解しえないが
、特定物質（ＴＮＦ−α）が髄核誘発神経根障害に関連していると初めて結論し
うる。この新規な情報は、髄核誘発神経障害の持続的理解、並びにＴＮＦ−αお
よび関連物質による坐骨神経痛の処置に関する薬理学的介入の有力な将来の臨床
用途の問題を提起するのに極めて重要である。

【００４７】 ブタ髄核細胞におけるＴＮＦ−αの存在は従って免疫組織学的に証明された。
局部投与されたモノクローナル抗体によるＴＮＦ−αの阻止は神経根伝達速度の
髄核誘発低下を部分的に制限するのに対し、ドキシサイクリン、インフリキシマ
ブおよびエタネルセプトによる静脈内処置はこの低下を顕著に阻止した。これら
データは始めて１種の特定物質（すなわちＴＮＦ−α）を髄核誘発神経障害に関
連させた。

【００４８】 アミノグアニジンは、誘発性酸化窒素シンセターゼを抑制することにより神経
根障害にて酸化窒素（ＮＯ）の放出を抑制することを示し、従ってアミノグアニ
ジンはＴＮＦ−αの放出により停止される化合物を阻止する１種の化合物である
。

【００４９】 本発明の化合物はたとえば経口的に錠剤、カプセル、糖衣錠もしくはフィルム
被覆錠、液体溶液の形態で；経腸的に座薬の形態で；非経口的にたとえば筋肉内
または静脈内注射により或いは輸液によるような各種の投与形態にて投与するこ
とができる。種々異なる臨床徴候に対する治療方式を病理学の種類に考慮適合さ
せねばならず、通常のように投与のルート、化合物の投与形態、並びに関与する
患者の年齢、体重および症状にも適合せねばならない。

【００５０】 経口ルートは一般にこの種の化合物を必要とする全ての症状につき用いられる
。緊急の症例では好ましくは静脈注射が挙げられる。これら目的で、本発明の化
合物は約２０〜約１５００ｍｇ／１日の範囲の投与量にて経口投与することがで
きる。これら投与量は最適治療反応を与えるよう調整しうることは勿論である。

【００５１】 本発明の化合物を医薬上許容しうるキャリヤもしくは希釈剤と組み合わせて含
有する医薬組成物の性質は、所望の投与ルートに依存することは勿論である。こ
の組成物は通常の成分にて常法で処方することができる。たとえば本発明の化合
物は水溶液もしくは油性溶液もしくは懸濁液、錠剤、ピル、ゼラチンカプセル（
硬質もしくは軟質）、シロップもしくはドロップまたは座薬の形態で投与するこ
とができる。

【００５２】 すなわち経口投与につき、本発明の化合物を含有する医薬組成物は好ましくは
錠剤、ピルもしくはゼラチンカプセルであって活性物質をたとえば乳糖、デキス
トロース、蔗糖、マニトール、ソルビトール、セルロースのような希釈剤；滑剤
、たとえばシリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムもしくは
カルシウムおよび／またはポリエチレングリコールのような希釈剤と一緒に含有
し、或いはこれらはさらにたとえば澱粉、ゼラチン、メチルセルロース、カルボ
キシメチルセルロース、アラビヤゴム、トラガカント、ポリビニルピロリドンの
ような結合剤；たとえば澱粉、アルギン酸、アルギネート、グリコール酸ナトリ
ウム澱粉、微結晶セルロースのような崩壊剤；たとえば炭酸塩および酸のような
起泡剤；染料；甘味料；たとえばレシチン、ポリソルベート、ラウリルサルフェ
ートのような湿潤剤、並びに一般に医薬組成物の処方に用いられる無毒性かつ医
薬上不活性な物質と一緒に含有する。この種の医薬組成物は公知方法にて、たと
えば混合、粒状化、錠剤化、糖衣もしくは薄膜被覆プロセスによって製造するこ
とができる。フィルム形成性化合物は、吸収および最大効果に関し腸管における
適正箇所にて放出するよう選択することができる。すなわちｐＨ依存性フィルム
形成体を用いてそのまま腸にて吸収させることができ、これにより異なるフタレ
ートを使用し或いはアクリル酸／メタクリル酸誘導体およびポリマーを用いるこ
とができる。

【００５３】 経口投与のための液体分散液は、たとえばシロップ、乳液および懸濁液とする
ことができる。

【００５４】 シロップはキャリヤとして、たとえば蔗糖もしくはグリセリンおよび／または
マンニトールおよび／またはソルビトールと一緒に蔗糖を含有することができる
。

【００５５】 懸濁液および乳液はキャリヤとして、たとえばアラビヤゴム、キサンタンゴム
、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチ
ルセルロース、ポリビニルアルコールを含有することができる。

【００５６】 筋肉内注射の懸濁液もしくは溶液は活性化合物と一緒に医薬上許容しうるキャ
リア、たとえば無菌水、オリーブ油、オレイン酸エチル、グリコール（たとえば
プロピレングリコール）を含有することができ、所望ならば適量のリドカイン塩
酸塩をも含有する。注射効果を低下させるアジュバントも添加することができる
。

【００５７】 静脈内注射もしくは輸液用の溶液はキャリヤとしてたとえば無菌水を含有する
ことができ、好ましくは活性化合物の注射分野で使用される無菌等張性塩水溶液
、並びにアジュバントをも含有することができる。

【００５８】 座薬は、活性化合物と一緒に医薬上許容しうるキャリア、たとえばココア脂ポ
リエチレングリコール、ポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル表面活性剤また
はレシチンを含有することができる。

【００５９】引例 １． Ａ．Ｒ．アミン、Ｍ．Ｇ．アツール、Ｇ．Ｄ．タッカー、Ｐ．Ｄ．パテ
ル、Ｐ．Ｒ．ビイアス、Ｒ．Ｎ．パテル、Ｉ．Ｒ．パテル、Ｓ．Ｂ．アブラムソ
ン。テトラサイクリンの新規な作用メカニズム：酸化窒素合成に対する作用。プ ロシーディング・ナショナル・アカデミー・サイエンス、ＵＳＡ 、１９９６；第
９３巻、第１４０１４−９頁。

【００６０】 ２． Ｉ．アライ、Ｓ．コンノ、Ｋ．オオタニ、Ｓ．キクチ、Ｋ．オルマーカ
ー。サイクロスポリンＡは脊椎神経根に対する髄核の毒性作用を阻止する。原稿
。

【００６１】 ３． Ｉ．アライ、Ｇ．Ｐ．マオ、Ｋ．オータニ、Ｓ．コンノ、Ｓ．キクチ、
Ｋ．オルマーカー。インドメタシンは隣接神経根における髄核関連作用を阻止す
る。原稿。

【００６２】 ４． Ｒ．Ａ．バウムガルトナー、Ｖ．Ａ．デラモ、Ｍ．Ａ．ビーベン。免疫
細胞ラインにおけるサイトキンの合成および放出に関する構成的かつ誘発性メカ
ニズム。ジャーナル・イミュノロジー、１９９６；第１５７巻、第４０８７−９
３頁。

【００６３】 ５． Ａ．ビダニ、Ｔ．Ａ．ヘミング。肺胞マクロファージにおける細胞質ｐ
Ｈ調整および刺激誘発作用剤機能に対するリドカインの作用。ラング、１９９７
；第１７５巻、第３４９−６１頁。

【００６４】 ６． Ｒ．Ａ．ブラック、Ｃ．Ｔ．ラウチ、Ｃ．Ｊ．コズロスキー、Ｊ．Ｊ．
ペスコン、Ｊ．Ｌ．スラック、Ｍ．Ｆ．ウォルフソン、Ｂ．Ｊ．カストナー、Ｋ
．Ｌ．ストッキング、Ｐ．レディー、Ｓ．スリニバサン、Ｎ．ネルソン、Ｎ．ボ
イアニ、Ｋ．Ａ．スクーレー、Ｍ．ゲルハルト、Ｒ．ディビス、Ｊ．Ｎ．フィッ
トナー、Ｒ．Ｓ．ジョンソン、Ｒ．Ｊ．パクストン、Ｃ．Ｊ．マーチ、Ｄ．Ｐ．
セレッチ。細胞から腫瘍壊死因子−αを放出させるメタロプロテナーゼ・ディス
インテグリン。ネイチャー、１９９７；第３８５巻、第７２９−３３頁。

【００６５】 ７． Ｒ．Ｍ．ブルッセ、Ｒ．ダンツアー、Ｋ．Ｗ．ケリー。インターロイキ
ン−１はマウスにおける腫瘍壊死因子−αの挙動作用を媒介するが代謝作用を媒
介しない。ヨーロピアン・ジャーナル・ファーマコロジー、１９９１；第２０９
巻、第２８１−３頁。

【００６６】 ８． Ｒ．ブラットサンド、Ｍ．リンデン。グルココルチコイドによるサイト
キン調整；細胞研究におけるメカニズムおよび作用。アリメント・ファーマコロ ジカル・テラピー 、１９９６；第１０巻、第８１−９０頁。

【００６７】 ９． Ｇ．ビレッド、Ｋ．オータニ、Ｂ．ライデビック、Ｋ．オルマーカー。
脊椎神経根に対する髄核の表皮投与によるエンドニューラル血管浸透性誘発の急
性増加。原稿。

【００６８】 １０． Ｃ．Ｃ．チャオ、Ｓ．ヒュー、Ｌ．エールリッヒ、Ｐ．Ｋ．ピーター
ソン。インターロイキン−１および腫瘍壊死因子−αは神経毒性を相乗的に媒介
する：酸化窒素およびＮ−メチル−Ｄ−アスパルテートリセプタの関与。ブレイ ン・ビヘビヤ・イミュノロジー 、１９９５；第９巻、第３５５−６５頁。

【００６９】 １１． Ｊ．ドーソン、Ｕ．ヒュルテンバッハ、Ａ．マッケンジー。サイクロ
スポリンＡはＴ−細胞独立メカニズムによりインタロイキン−１βおよび腫瘍壊
死因子−αの生体内生産を阻止するがインタロイキン−６を阻止しない。サイト キン 、１９９６；第８巻、第８８２−８頁。

【００７０】 １２． Ｊ．Ａ．デレオ、Ｒ．Ｗ．コルバム、Ａ．Ｊ．リックマン。モノニュ
ーロパシーの２種の動物モデルにおけるサイトキンおよび成長因子免疫組織化学
的脊椎プロフィル。ブレイン・リサーチ、１９９７；第７５９巻、第５０−７頁
。

【００７１】 １３． Ｒ．Ａ．ガジエント、Ｋ．Ｃ．クロン、Ｕ．オッテン。インタロイキ
ン−１βおよび腫瘍壊死因子−αは培養ラット星状細胞からの神経成長因子（Ｎ
ＧＦ）放出を相乗的に刺激する。ニューロサイエンス・レター、１９９０；第１
１７巻、第３３５−４０頁。

【００７２】 １４．Ｒ．ガルシア−ビクナ、Ｆ．ジアズ−ゴンザレズ、Ｉ．ゴンザレズ−ア
ルバロ、Ｍ．Ａ．デルポゾ、Ｆ．モイリネド、Ｃ．カバナス、Ｒ．ゴンザレズ−
アモロ、Ｆ．サンチェズ−マドリド。オキシカム族からの非ステロイド抗炎症性
薬物による白血球付着リセプタにおけるサイトキン誘発変化の予防。アルチチス ・リューマチズム 、１９９７；第４０巻、第１４３−５３頁。

【００７３】 １５． Ａ．Ｊ．ギアリング、Ｐ．ベケット、Ｍ．クリストドウロウ、Ｍ．チ
ャーチル、Ｊ．クレメンツ、Ａ．Ｈ．ダビッドソン、Ａ．Ｈ．デュルムモンド、
Ｗ．Ａ．ガロウェイ、Ｒ．ギルバート、Ｊ．Ｌ．ゴードン等。メタロプロテナー
ゼによる腫瘍壊死因子−α先駆体の処理。ネイチャー、１９９４；第３７０巻、
第５５−７頁。

【００７４】 １６． Ｅ．Ｊ．ガゼレ、Ｍ．Ｊ．バンダ、Ｄ．レパート。免疫におけるマト
リックス・メタロフロテナーゼ。ジャーナル・イミュノロジー、１９９６；第１
５６巻、第１４頁。

【００７５】 １７． Ｅ．ゴンザレズ、Ｃ．デラクルズ、Ｒ．デニコラス、Ｊ．エギロ、Ｇ
．ヘレロ−ビューモント。骨化症を有する患者の血液細胞によるサイトキンおよ
び他の炎症性媒介物の生産に対する非ステロイド抗炎症性薬物の長期作用。エイ ジェンツ・アクションス 、１９９４；第４１巻、第１７１−８頁。

【００７６】 １８． Ｈ．Ｐ．ハルツンク、Ｓ．ユンク、Ｇ．ストール、Ｊ．チーラセク、
Ｂ．シュミット、Ｊ．Ｊ．アルチェロス、Ｋ．Ｖ．トイカ。ＣＮＳおよびＰＮＳ
の脱髄障害における炎症性媒介物。ジャーナル・ニューロイミュノロジー、１９
９２；第４０巻、第１９７−２１０頁。

【００７７】 １９． Ａ．ハットリ、Ｓ．イワサルト、Ｋ．ムラセ、Ｍ．ツジモト、Ｍ．サ
トー、Ｋ．ハヤシ、Ｍ．コーノ。腫瘍壊死因子は、繊維芽細胞における神経成長
因子の生産を刺激する際にインタロイキン−１およびインタフェロン−γに対し
顕著に相乗性である。ＦＥＢＳレタース、１９９４；第３４０巻、第１７７−８
０頁。

【００７８】 ２０． Ｊ．Ｈ．ハーマン、Ｗ．Ｇ．ソウダー、Ｅ．Ｖ．ヘス。人工擬似膜誘
発骨吸収の非ステロイド抗炎症性薬物調整、ジャーナル・リウムトリジー、１９
９４；第２１巻、第３３８−４３頁。

【００７９】 ２１． Ｓ．イワモト、Ｋ．タケダ、インビトロにおけるＴＮＦの可能な細胞
毒性メカニズム。ハム・セル、１９９０；第３巻、第１０７−１２頁。

【００８０】 ２２． Ｋ．Ｍ．ジュルド、Ｃ．Ｊ．ステフェンス、Ｍ．Ｍ．ブラック、Ｂ．
Ｊ．ハント。皮膚脈管炎における内皮細胞活性化。クリニカル・エキスペリメン タル・ダーマトロジー 、１９９６；第２１巻、第２８−３２頁。

【００８１】 ２３． Ｍ．カワカミ、Ｔ．タマキ、Ｊ．Ｎ．ワインシュタイン、Ｈ．ハシズ
メ、Ｈ．ニシ、Ｓ．Ｔ．メラー。椎間板の同種移植片により発生する疼痛関連挙
動ラットにおける病理メカニズム。スパイン、１９９６；第２１巻、第２１０１
−７頁。

【００８２】 ２４． Ｓ．カヤマ、Ｓ．コンノ、Ｋ．オルマカー、Ｓ．ヤブキ、Ｓ．キクチ
。環状フィブロシスの切除は神経根の形態学的、血管的および機能的変化を誘発
する、実験研究。スパイン、１９９６；第２１巻、第２５３９−４３頁。

【００８３】 ２５． Ｓ．カヤマ、Ｋ．オルマーカー、Ｋ．ラルソン、Ｅ．ショルグレン−
ジャンソン、Ａ．リンダール、Ｂ．ライデビック。培養された自家髄核細胞は脊
椎神経根における構造的および機能的変化を誘発する。スパイン、１９９８；第
２３巻、第９０頁、第２１５５−５８頁。

【００８４】 ２６． Ｍ．クロッペンブルグ、Ｂ．Ｍ．クロッペンブルグ、Ｈ．Ｈ．デルー
ジ−ディユク、Ａ．Ｍ．ミルテンブルグ、Ｍ．Ｒ．ダハ、Ｆ．Ｃ．ブリードベル
ド、Ｂ．Ａ．ディージマンス、Ｃ．フェルベイジ。テトラサイクリン誘導ミノサ
イクリンは単細胞およびＴリンパ球によるサイトキン生産に差別的に作用する。 アンチミクロビアル・エージェンツ・ケモテラピー 、１９９６；第４０巻、第９
３４−４０頁。

【００８５】 ２７． Ｍ．クロッペンブルグ、Ｃ．Ｌ．フェルベイジ、Ａ．Ｍ．ミルテンブ
ルグ、Ａ．Ｊ．フェルボエーベン、Ｍ．Ｒ．ダハ、Ｂ．Ａ．ディジクマンス、Ｆ
．Ｃ．ブリーベルド。Ｔ細胞活性化に対するテトラサイクリンの影響。クリニカ ル・エキスペリメンタル・イミュノロジー 、１９９５；第１０２巻、第６３５−
４１頁。

【００８６】 ２８． Ｉ．Ｂ．ラムスター、Ｊ．Ｒ．プルマン、Ｒ．Ｓ．セレンチ、Ｊ．Ｔ
．グルビック。間隙流体におけるβ−グルクロニダーゼおよびインタロイキン−
１βに対するテトラサイクリン繊維療法の作用。ジャーナル・クリニカル・ペリ オドントロジー 、１９９６；第２３巻、第８１６−２２頁。

【００８７】 ２９． Ｐ．Ｐ．リベルスキー、Ｒ．ヤナギハラ、Ｖ．ネルルカール、Ｄ．Ｃ
．ガイドウセク。腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）により眼神経にて誘発された
病巣の更なる超構造的研究：実験的クロイツフェルド−ヤコブ病との比較。アク タ・ニューロバイオロジカル・エキスペリメント（ワルスズ） 、１９９４；第５
４巻、第２０９−１８頁。

【００８８】 ３０． Ｘ．Ｈ．リン、Ｙ．カシマ、Ｍ．カーン、Ｋ．Ｂ．ヘラー、Ｘ．Ｚ．
グー、Ａ．Ａ．サドン。ＡＩＤＳ患者からの眼神経におけるＴＮＦ−αの免疫組
織化学的研究。カレント・アイ・リサーチ、１９９７；第１６巻、第１０６４−
８頁。

【００８９】 ３１． Ｍ．Ｃ．マジカン、Ａ．Ａ．サドン、Ｎ．Ｓ．ラオ、Ｐ．Ｕ．デュゲ
ル、Ｗ．Ｎ．テンフラ、Ｐ．Ｓ．ギル。ウサギにおける腫瘍壊死因子−α（ＴＮ
Ｆ−α）誘発眼神経病。ニューロロジカル・リサーチ、１９９６；第１８巻、第
１７６−８４頁。

【００９０】 ３２． Ａ．マツモリ、Ｋ．オノ、Ｒ．ニシオ、Ｙ．ノセ、Ｓ．ササヤマ。ア
ミオダロンは、ヒト単核細胞による腫瘍壊死因子−αの生産を抑制する：心臓欠
陥におけるその作用の可能なメカニズム。サーキュレーション、１９９７；第９
６巻、第１３８６−９頁。

【００９１】 ３３． Ｓ．ミラノ、Ｆ．アルコレオ、Ｐ．ダゴスチノ、Ｅ．チラリ。テトラ
サイクリンの腹腔内注射はマウスを致死的エンドトキセミアから保護し、各種の
器官における誘発性酸化窒素シンセターゼ並びに血液におけるサイトキンおよび
ナイトレート分泌を下方調整する。アンチマイクロバイオロジカル・エイジェン ツ・ケモテラピー 、１９９７；第４１巻、第１１７−２１頁。

【００９２】 ３４． Ｐ．ナウロス、Ｄ．ハンドレー、Ｇ．マツエダ、Ｒ．デワール、Ｈ．
ゲルラッハ、Ｄ．ブローム、Ｄ．ステム。メトＡフィブロサルコーマにおける腫
瘍壊死因子／カテキン誘発血管内フィブリン形成。ジャーナル・エキスペリメン タル・メソッド 、１９８８；第１６８巻、第６３７−４７頁。

【００９３】 ３５． Ｔ．オカ、Ｙ．ワクガワ、Ｍ．ホソイ、Ｋ．オカ、Ｔ．ホリ。腫瘍壊
死因子−αの脳内血管注射はラットにおける熱ハイパーアルゲシアを誘発する。 ニューロイミュノモジュレーション 、１９９６；第３巻、第１３５−４０頁。

【００９４】 ３６． Ｋ．オルマーカー、Ｊ．ブロムキスト、Ｊ．ストロムベルグ、Ｕ．ナ
ンマルク、Ｐ．トムセン、Ｂ．ライデビック。髄核の炎症発生特性。スパイン、
１９９５；第２０巻、第６６５−９頁。

【００９５】 ３７． Ｋ．オルマーカー、Ｈ．ブリスビー、Ｓ．ヤブキ、Ｃ．ノルドボルグ
、Ｂ．ライデビック。神経根構造および機能に対する正常、凍結およびヒアルウ
ロニダーゼ消化の髄核の作用。スパイン、１９９７；第２２巻、第４７１５頁；
ディスカッション４７６。

【００９６】 ３８． Ｋ．オルマーカー、Ｇ．ビロド、Ｍ．コムフィヨルド、Ｃ．ノルドボ
ルグ、Ｂ．ライデビック。髄核誘発神経根障害に対するメチルプレドニゾロンの
作用。スパイン、１９９４；第１９巻、第１８０３−８頁。

【００９７】 ３９． Ｋ．オルマーカー、Ｍ．イワブチ、Ｋ．ラルソン、Ｂ．ライデビック
。神経根伝達速度に対するインビトロ変性髄核の作用。原稿。

【００９８】 ４０． Ｋ．オルマーカー、Ｒ．Ｒ．マイヤース。座骨痛神経の病理学：ヘル
ニア化髄核の役割および脊椎神経根とＤＲＧとの変形。１９９８；第７８巻、第
９−１０５頁。

【００９９】 ４１． Ｋ．オルマーカー、Ｃ．ノルドボルク、Ｋ．ラルソン、Ｂ．ライデビ
ック。自家髄核により誘発される脊椎神経根における超構造的変化。スパイン、
１９９６；第２１巻、第４１１−４頁。

【０１００】 ４２． Ｋ．オルマーカー、Ｂ．ライデビック、Ｃ．ノルドボルク。自家髄核
はブタ馬尾神経根における神経生理学的および組織学的変化を誘発する［コメン
ト参照］。スパイン、１９９３；第１８巻、第１４２５−３２頁。

【０１０１】 ４３． Ｋ．オータニ、Ｉ．アライ、Ｇ．Ｐ．マオ、Ｓ．コンノ、Ｋ．オルマ
ーカー、Ｓ．キクチ。髄核誘発神経根障害、血流と神経伝達速度との関係。原稿
。

【０１０２】 ４４． Ｋ．オータニ、Ｇ．Ｐ．マオ、Ｉ．アライ、Ｓ．コンノ、Ｋ．オルマ
ーカー、Ｓ．キクチ。神経根における血管浸透性における髄核誘発増加。原稿。

【０１０３】 ４５． Ｍ．Ｓ．ペトロビッチ、Ｈ．Ｙ．スー、Ｘ．グー、Ｐ．デュガル、Ｋ
．Ｂ．ヘラー、Ａ．Ａ．サドン。ウサギ眼神経におけるＴＮＦ−α媒介軸索変性
のペントキシフィリン抑圧。ニューロロジカル・リサーチ、１９９７；第１９巻
、第５５１−４頁。

【０１０４】 ４６． Ｗ．Ｊ．ピッチラー、Ｍ．ザンニ、Ｓ．フォングレイエルズ、Ｂ．シ
ュナイダー、Ｄ．マウリ−ヘウベグ、Ｔ．ベンドランド。ヒト薬物特異性Ｔ細胞
クローンによる高ＩＬ−５産生。インターナショナル・アーカイブ・アレルギー ・イミュノロジー 、１９９７；第１１３巻、第１７７−８０頁。

【０１０５】 ４７． Ｅ．Ｊ．レッドホード、Ｓ．Ｍ．ホール、Ｋ．Ｊ．スミス。腫瘍壊死
因子の神経内注射により誘発される血管変化および脱髄化。ブレイン、１９９５
；第１１８巻、第８６９−７８頁。

【０１０６】 ４８． Ｓ．ロバッチェ−ガレア、Ｊ．Ｍ．ブルノー、Ｈ．ロベ、Ｖ．モラン
ド、Ｃ．カプデビラ、Ｎ．バートナーガー、Ｓ．チョウアイブ、Ｓ．ローマン−
ローマン。腫瘍壊死因子−α変換活性の部分精製および特性化。ヨーロピアン・ ジャーナル・イミュノロジー 、１９９７；第２７巻、第１２７５−８２頁。

【０１０７】 ４９． Ｍ．Ｓ．ローゼンダール、Ｓ．Ｃ．コー、Ｄ．Ｌ．ロング、Ｍ．Ｔ．
ブルアー、Ｂ．ローゼンツバイク、Ｅ．ヘドル、Ｌ．アンダーソン、Ｓ．Ｍ．パ
イル、Ｊ．モレランド、Ｍ．Ａ．マイヤース、Ｔ．コーノ、Ｄ．リオンス、Ｈ．
Ｓ．リッヒェンスタイン。亜鉛メタロプロテアーゼのＡＤＡＭ族からのプロ腫瘍
壊死因子−αプロセス酵素の同定および特性化。ジャーナル・バイオロジカル・ ケミストリー 、１９９７；第２７０巻、第２４５８８−９３頁。

【０１０８】 ５０． Ｇ．セド、Ｍ．ホンテバイリーヨスコビッツ。マクロファージ活性化
により誘発される神経病巣。リサーチ・イミュノロジー、１９９２；第１４３巻
、第５８９−９９頁。

【０１０９】 ５１． Ｋ．Ｗ．セーナジ、Ｃ．Ｓ．レイン。腫瘍壊死因子は、インビトロに
おけるミエリンおよびオリゴデントロサイトの損傷を媒介する。アニュアル・ニ ューロロジー 、１９８８；第２３巻、第３３９−４６頁。

【０１１０】 ５２． Ｌ．サピラ、Ｙ．ホウリ、Ｖ．バラク、Ａ．ハラビ、Ｗ．Ａ．ソスコ
イン、Ａ．スタブホルツ。歯周病歯からのセメント抽出物に対するヒト単核反応
：テトラサイクリンでの状態調節の作用。ジャーナル・ペリオドントロジー、１
９９６；第６７巻、第６８２−７頁。

【０１１１】 ５３． Ｌ．シャピラ、Ｙ．ホウリ、Ｖ．バラク、Ｗ．Ａ．ソスコルネ、Ａ．
ハラビ、Ａ．スタブホルツ。テトラサイクリンは、インビボにおけるポルヒロモ
ナス・ギンギバリス・リポ多糖類誘発病巣およびインビトロにおけるＴＮＦ−α
プロセシングを抑制する。ジャーナル・ペリオドンタル・リサーチ、１９９７；
第３２巻、第１８３−８頁。

【０１１２】 ５４． Ｍ．Ｋ．シャリエフ、Ｄ．Ａ．イングラム、Ｍ．スワッシュ。循環腫
瘍壊死因子−αは、ギレイン−バーレ症候群における電気診断異常に相関する。 アニュアル・ニューロロジー 、１９９７；第４２巻、第６８−７３頁。

【０１１３】 ５５． Ｃ．Ｓ．スミス、Ｇ．オルテガ、Ｌ．パカー、Ｗ．Ｔ．シアラー。サ
イクロスポリンＡはヒトＢリンパ球における腫瘍壊死因子−αの誘発を阻止する
。バイオケミカル・バイオフィジカル・リサーチ・コミュニケーション、１９９
４；第２０４巻、第３８３−９０頁。

【０１１４】 ５６． Ｃ．ソヌナー、Ｃ．シュミット、Ａ．ジョージ、Ｋ．Ｖ．トイカ。メ
タロプロテナーゼ抑制剤は、実験的ニューロパシーとのマウスにおける疼痛関連
挙動を減少させる。ニューロサイエンス・レタース、１９９７；第２３７巻、第
４５−８頁。

【０１１５】 ５７． Ｌ．Ｓ．ソルキン、Ｗ．Ｈ．キシアオ、Ｒ．ワグナー、Ｒ．Ｒ．マイ
ヤース。腫瘍壊死因子−αは、心外性一次アフレント繊維における異所活性を誘
発する。ニューロサイエンス、１９９７；第８１巻、第２５５−６２頁。

【０１１６】 ５８． Ｊ．スタインマイヤー、Ｓ．ダウフェルト、Ｙ．Ｏ．タイオ。インタ
ーロイキン−１処理関節軟骨からのプロテオグリカナーゼに対するテトラサイク
リンの薬理作用。バイオケミカル・ファーマコロジー、１９９８；第５５巻、第
９３−１００頁。

【０１１７】 ５９． Ｇ．ストール、Ｓ．ユング、Ｓ．ヤンダー、Ｐ．バンデルマイデ、Ｈ
．Ｐ．ハルツンク。ラット末梢神経系の免疫媒介脱髄化およびワレリヤン変性に
おける腫瘍壊死因子−α。ニューロイミュノロジー、１９９３；第４５巻、第１
７５−８２頁。

【０１１８】 ６０． Ｙ．タカオ、Ｋ．ミカワ、Ｋ．ニシナ、Ｎ．マエカワ、Ｈ．オバラ。
リドカインはウサギにおける高酸素肺障害を減衰させる。アクタ・アネスセシオ ル・スカジナビア 、１９９６；第４０巻、第３１８−２５頁。

【０１１９】 ６１． Ｋ．Ｈ．テオ、Ｃ．Ａ．ブラッドレー、Ｊ．ガルト、Ｈ．バロウス。
温心臓手術後のサイトキン媒介血管拡張のステロイド抑制。サーキョレーション 、１９９５；第９２巻、第ＩＩ３４７−５３頁。

【０１２０】 ６２． Ｔ．ツカモト、Ｍ．イシカワ、Ｔ．ヤマモト。インビトロにおけるミ
エリン生成に対するＴＮＦ−αの抑圧制作用。アクタ・ニューロロジー・スカン ジナビア 、１９９５；第９１巻、第７１−５頁。

【０１２１】 ６３． Ｔ．バンデルポール、Ｐ．Ｍ．ヤンセン、Ｋ．Ｊ．バンジ、Ｍ．Ｂｒ
．ウェルボーン、Ｉ．デヨング、Ｃ．Ｅ．ハック、Ｈ．レッチャー、Ｗ．レスラ
ウワー、Ｓ．Ｆ．ラウリー、Ｌ．Ｌ．モイダウアー。腫瘍壊死因子−αは、ｐ５
５リセプタに対する作用を介し風船における凝集およびフィブリノリシスの活性
化を誘発する。ブラッド、１９９６；第８８巻、第９２２−７頁。

【０１２２】 ６４． Ｈ．ビラロヤ、Ｋ．ビオーロ、Ａ．ベンヤウンス−チェノウフィ、Ｎ
．バウマン。ルイスラットにおけるミエリン誘発の実験的アレルギーエンファロ
ミエリチス；眼神経および脊椎コードのグリア細胞およびニューロファジにおけ
る脳脊椎液免疫組織化学発現の血清における腫瘍壊死因子−αレベル。ジャーナ ル・ニューロイミュノロジー 、１９９６；第６４巻、第５５−６１頁。

【０１２３】 ６５． Ｒ．ワグナー、Ｒ．Ｒ．マイヤース。シュワン細胞は腫瘍壊死因子−
αを産生する：障害された非障害神経における発現。ニューロサイエンス、１９
９６；第７３巻、第６２５−９頁。

【０１２４】 ６６． Ｒ．ワグナー、Ｒ．Ｒ．マイヤース。ＴＮＦ−αの神経内膜注射は神
経病疼痛挙動をもたらす。ニューロレポート、１９９６；第７巻、第２８９７−
９０１頁。

【０１２５】 ６７． Ｓ．ワサキ、Ｉ．サカイダ、Ｋ．ウチダ、Ｔ．キイヌラ、Ｋ．カヨノ
、Ｋ．オキタ。ラットにおける実験誘発急性肝臓障害に対するサイクロスポリン
Ａの保護作用。リバー、１９９７；第１７巻、第１０７−１４頁。

【０１２６】 ６８． Ｂ．Ｋ．ウェルシル、Ｇ．Ｔ．フルタ、Ｊ．Ａ．ラビグネ、Ａ．Ｒ．
チョウドフリー、Ｚ．Ｓ．ワング、Ｓ．Ｊ．ガリ。デキサメタソン・サイクロス
ポリンＡは、多重メカニズムによるマスト細胞−白血球サイトキンカスケードを
抑圧する。インターナショナル・アーカイブ・アレルギー・イミュノロジー、１
９９５；第１０７巻、第３２３−４頁。

【０１２７】 ６９． Ｓ．ヤブキ、Ｙ．カワグチ、Ｋ．オルマーター、Ｂ．ライデビック。
髄核誘発神経根障害に対するリドカインの作用。スパイン、１９９８；第２３巻
、第２３８３−８９頁。

【０１２８】 ７０． Ｊ．ズー、Ｘ．Ｆ．バイ、Ｅ．ミックス、Ｈ．リンク。末梢神経系に
おけるサイトキンジコトミーは実験的アレルギー神経炎の出現に影響を与える：
ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−βおよ
びサイトリズムのためのＭＲＮＡ発現のダイナミックス。クリニカル・イミュノ ロジカル・イミュノパソロジー 、１９９７；第８４巻、第８５−９４頁。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年１２月２２日（２０００．１２．２２）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 39/395 Ａ６１Ｋ 39/395 Ｍ ４Ｃ０８５ Ａ６１Ｐ 25/02 Ａ６１Ｐ 25/02 ４Ｃ０８６ 43/00 １１１ 43/00 １１１ // Ｃ０７Ｄ 213/22 Ｃ０７Ｄ 213/22 215/22 215/22 401/04 401/04 473/06 473/06 491/107 491/107 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ， ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，Ｓ Ｌ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C031 EA18 4C050 AA02 AA07 BB07 CC07 CC18 EE01 FF03 GG03 HH04 4C055 AA01 BA02 BA42 CA03 CA25 CA52 EA01 4C063 AA01 BB01 CC28 DD26 EE01 4C084 AA17 NA14 ZA21 ZC02 4C085 AA14 BB17 EE01 4C086 AA01 AA02 BC17 BC41 CB07 DA29 GA06 GA08 GA12 NA14 ZA20 ZC02

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 メチルプレニゾロンを除くメタロプロテナーゼ抑制剤、化学
   改質テトラサイクリンを包含するテトラサイクリン、キノロン、コルチコステロ
   イド、タリドマイド、ラザロイド、ペントキシフィリン、ヒドロキサミン酸誘導
   体、炭素環式酸、ナプトピラン、可溶性サイトキンリセプタ、ＴＮＦ−αに対す
   るモノクローナル抗体、アムリノン、ピモベンダン、ベスナリノン、ホスホジエ
   ステラーゼＩＩＩ抑制剤、ラクトフェリンおよびラクトフェリン誘導同族体およ
   びメラトニンよりなる群から選択される塩基またはその付加塩の形態としての、
   脊髄盤ＴＮＦ−αを抑制することによるＴＮＦ−αの放出または存在により停止
   されるＴＮＦ−αおよび化合物の放出によって生ずる神経根障害としての脊髄障
   害を処置する医薬組成物を作成する際の、ＴＮＦ−α抑制剤の使用。
2. 【請求項２】 活性成分がテトラサイクリン、ドキシサイクリン、リメサイ
   クリン、オキシテトラサイクリン、ミノサイクリンおよび化学改質テトラサイク
   リン、デジメチルアミノテトラサイクリンよりなる塩基または付加塩の形態から
   選択される請求項１に記載の使用。
3. 【請求項３】 活性成分がドキシサイクリンである請求項２に記載の使用。
4. 【請求項４】 活性成分がヒドロキサミン酸化合物、炭素環式酸および誘導
   体、タリドマイド、ラザロイド、ペントキシフィリン、ナプトピラン、可溶性サ
   イトキンリセプタ、ＴＮＦ−αに対するモノクローナル抗体、アムリノン、ピモ
   ベンダン、ベスナリノン、ホスホジエステラーゼＩＩＩ抑制剤、メラトニンから
   選択される塩基または付加塩の形態の請求項１に記載の使用。
5. 【請求項５】 活性成分がノルフロキサシン、オフロキサシン、サイプロフ
   ロキサシン、ガチフロキサシン、ペフロキサシン、ロメフロキサシンおよびテマ
   フロキサシンから選択される塩基または付加塩の形態の請求項１に記載の使用。
6. 【請求項６】 活性成分が塩基または付加塩の形態におけるメタロプロテナ
   ーゼ抑制剤である請求項１に記載の使用。
7. 【請求項７】 活性成分が塩基または付加塩の形態におけるＴＮＦ−α（た
   とえばインターフェロン−γ、インターロイキン−１および酸化窒素（ＮＯ））
   の放出により停止される化合物を抑制する物質からなる請求項１に記載の使用。
8. 【請求項８】 人間を含め哺乳動物におけるＴＮＦ−αの放出によって生じ
   た神経根障害としての脊髄障害の処置方法において、メチルプレドニゾロンを除
   くメタロプロテナーゼ抑制剤、化学改質テトラサイクリンを含めテトラサイクリ
   ン、キノロン、コルチコステロイド、タリドマイド、ラザロイド、ペントキシフ
   ィリン、ヒドロキサミン酸誘導体、炭素環式酸、ナプトピラン、可溶性サイトキ
   ンリセプタ、ＴＮＦ−αに対するモノクローナル抗体、アムリノン、ピモベンダ
   ン、ベスナリノン、ホスホジエステラーゼＩＩＩ抑制剤、ラクトフェリンおよび
   ラクトフェリン誘導同族体およびメラトニンよりなる群から選択される塩基また
   はその付加塩の形態のＴＮＦ−α抑制剤の医薬上有効量を投与すること特徴とす
   る脊髄障害の処置方法。