JP2003105337A - 抗酸化剤の製造方法 - Google Patents
抗酸化剤の製造方法Info
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- JP2003105337A JP2003105337A JP2001302197A JP2001302197A JP2003105337A JP 2003105337 A JP2003105337 A JP 2003105337A JP 2001302197 A JP2001302197 A JP 2001302197A JP 2001302197 A JP2001302197 A JP 2001302197A JP 2003105337 A JP2003105337 A JP 2003105337A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 高活性の抗酸化剤の製造方法を提供する。
【解決手段】 低級アルコール濃度１５体積％以下のシ
ソ科植物抽出物水溶液を、合成吸着剤と接触させて、抗
酸化成分を合成吸着剤に吸着させ、次いで、該合成吸着
剤を、ｐＨ７．５以上の水、またはｐＨ７．５以上かつ
低級アルコール濃度１５体積％以下の低級アルコール水
溶液で洗浄し、その後、抗酸化成分を、低級アルコール
濃度２０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱
着液により、合成吸着剤より脱着させることを特徴とす
る抗酸化剤の製造方法。
ソ科植物抽出物水溶液を、合成吸着剤と接触させて、抗
酸化成分を合成吸着剤に吸着させ、次いで、該合成吸着
剤を、ｐＨ７．５以上の水、またはｐＨ７．５以上かつ
低級アルコール濃度１５体積％以下の低級アルコール水
溶液で洗浄し、その後、抗酸化成分を、低級アルコール
濃度２０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱
着液により、合成吸着剤より脱着させることを特徴とす
る抗酸化剤の製造方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、高活性の抗酸化剤
の製造方法に関する。更に詳しくは、ローズマリー等の
シソ科植物の抽出物を精製し、高活性の抗酸化成分を高
濃度で含む天然抗酸化剤を製造する方法に関する。
の製造方法に関する。更に詳しくは、ローズマリー等の
シソ科植物の抽出物を精製し、高活性の抗酸化成分を高
濃度で含む天然抗酸化剤を製造する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ローズマリー等のシソ科植物が、抗酸化
成分を含有することは既知であり、また、その抽出物が
高い抗酸化能を持つことはよく知られている。さらに、
該抽出物は抗酸化能以外にも皮膚の美白効果（特開平７
−１８７９８９号公報）、抗潰瘍効果（特開２０００−
７２６８５）等の機能を有することが開示されており、
食品、化粧品、医薬等の分野での有効利用が期待され
る。
成分を含有することは既知であり、また、その抽出物が
高い抗酸化能を持つことはよく知られている。さらに、
該抽出物は抗酸化能以外にも皮膚の美白効果（特開平７
−１８７９８９号公報）、抗潰瘍効果（特開２０００−
７２６８５）等の機能を有することが開示されており、
食品、化粧品、医薬等の分野での有効利用が期待され
る。
【０００３】該抽出物の抗酸化成分の精製方法に関して
は、種々検討されており、例えば、活性炭、珪藻土、酸
性白色土等の吸着剤を用いた精製処理（特開昭５５−１
８４３５、特開昭５５−１０２５０８号公報、特開昭５
７−２０３４４５号公報等）が知られている。また、特
開２０００−２５６３４５には、植物原料を低温で水抽
出した残さをアルカリで再抽出した抽出液と、先の低温
水抽出液を吸着剤処理した液とから、抗酸化作用のある
ポリフェノール類を高純度で得る方法が開示されてい
る。さらに特開２０００−７２６８５には、吸着剤処理
することにより、ローズマリー中のロスマリン酸成分を
高含有する画分を得る方法が開示されている。
は、種々検討されており、例えば、活性炭、珪藻土、酸
性白色土等の吸着剤を用いた精製処理（特開昭５５−１
８４３５、特開昭５５−１０２５０８号公報、特開昭５
７−２０３４４５号公報等）が知られている。また、特
開２０００−２５６３４５には、植物原料を低温で水抽
出した残さをアルカリで再抽出した抽出液と、先の低温
水抽出液を吸着剤処理した液とから、抗酸化作用のある
ポリフェノール類を高純度で得る方法が開示されてい
る。さらに特開２０００−７２６８５には、吸着剤処理
することにより、ローズマリー中のロスマリン酸成分を
高含有する画分を得る方法が開示されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、これらの精製
方法で得られた抗酸化剤の活性は、十分満足できるもの
ではなく、更なる改良が求められていた。
方法で得られた抗酸化剤の活性は、十分満足できるもの
ではなく、更なる改良が求められていた。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく鋭意検討を行った結果、シソ科植物抽出物
を吸着剤処理するに際し、溶離液のｐＨおよび組成を調
整することで、高活性の抗酸化成分を選択的に高濃度で
回収できることを見出し、本発明に到達した。即ち本発
明の要旨は、低級アルコール濃度１５体積％以下のシソ
科植物抽出物水溶液を、合成吸着剤と接触させて、抗酸
化成分を合成吸着剤に吸着させ、次いで、該合成吸着剤
を、ｐＨ７．５以上の水、またはｐＨ７．５以上かつ低
級アルコール濃度１５体積％以下の低級アルコール水溶
液で洗浄し、その後、抗酸化成分を、低級アルコール濃
度２０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱着
液により、合成吸着剤より脱着させることを特徴とする
抗酸化剤の製造方法に存する。
を解決すべく鋭意検討を行った結果、シソ科植物抽出物
を吸着剤処理するに際し、溶離液のｐＨおよび組成を調
整することで、高活性の抗酸化成分を選択的に高濃度で
回収できることを見出し、本発明に到達した。即ち本発
明の要旨は、低級アルコール濃度１５体積％以下のシソ
科植物抽出物水溶液を、合成吸着剤と接触させて、抗酸
化成分を合成吸着剤に吸着させ、次いで、該合成吸着剤
を、ｐＨ７．５以上の水、またはｐＨ７．５以上かつ低
級アルコール濃度１５体積％以下の低級アルコール水溶
液で洗浄し、その後、抗酸化成分を、低級アルコール濃
度２０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱着
液により、合成吸着剤より脱着させることを特徴とする
抗酸化剤の製造方法に存する。
【０００６】別の要旨は、ｐＨ６．５以上かつ低級アル
コール濃度１５体積％以下のシソ科植物抽出物水溶液
を、合成吸着剤と接触させて、抗酸化成分を合成吸着剤
に吸着させ、次いで、抗酸化成分を、低級アルコール濃
度２０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱着
液で、合成吸着剤より脱着させることを特徴とする抗酸
化剤の製造方法に存する。
コール濃度１５体積％以下のシソ科植物抽出物水溶液
を、合成吸着剤と接触させて、抗酸化成分を合成吸着剤
に吸着させ、次いで、抗酸化成分を、低級アルコール濃
度２０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱着
液で、合成吸着剤より脱着させることを特徴とする抗酸
化剤の製造方法に存する。
【０００７】別の要旨は、下記条件でＨＰＬＣ分析した
場合、そのリテンションタイムが、ロスマリン酸のリテ
ンションタイムを基準として−２．６±１分であり、且
つ分子量が４７８の成分のピークの面積％が、２０％以
上であることを特徴とする抗酸化剤に存する。 ＜ＨＰＬＣ分析条件＞ カラム：Inertsil ODS 80A（５μｍ ４．６mm I．
D．×250mm，GL SciencesInc.） カラム温度：４０℃ 移動相：Ａ−４重量％リン酸水溶液、Ｂ−アセトニトリ
ル 流量：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ検出器、波長２８０ｎｍ 注入量：２５μＬ 分析時間：３５分 Gradient条件： ０分（Ａ９０体積％、Ｂ１０体積％）→３０分（Ａ６０
体積％、Ｂ４０体積％）→３５分（Ａ６０体積％、Ｂ４
０体積％）
場合、そのリテンションタイムが、ロスマリン酸のリテ
ンションタイムを基準として−２．６±１分であり、且
つ分子量が４７８の成分のピークの面積％が、２０％以
上であることを特徴とする抗酸化剤に存する。 ＜ＨＰＬＣ分析条件＞ カラム：Inertsil ODS 80A（５μｍ ４．６mm I．
D．×250mm，GL SciencesInc.） カラム温度：４０℃ 移動相：Ａ−４重量％リン酸水溶液、Ｂ−アセトニトリ
ル 流量：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ検出器、波長２８０ｎｍ 注入量：２５μＬ 分析時間：３５分 Gradient条件： ０分（Ａ９０体積％、Ｂ１０体積％）→３０分（Ａ６０
体積％、Ｂ４０体積％）→３５分（Ａ６０体積％、Ｂ４
０体積％）
【０００８】
【発明の実施の形態】以下、本発明の抗酸化剤の製造方
法を、詳細に説明する。次に、この抗酸化剤の製造方法
を説明する。この製造方法は、シソ科植物抽出物に含ま
れる成分のうち、高活性な抗酸化成分（メトキシルテオ
リン配糖体と推定）を選択的に高濃度で回収する方法で
ある。 ［製造方法１］本方法は、低級アルコール濃度１５体積
％以下のシソ科植物抽出物水溶液を、合成吸着剤と接触
させて、抗酸化成分を合成吸着剤に吸着させ（第１工
程）、次いで、該合成吸着剤を、ｐＨ７．５以上の水、
またはｐＨ７．５以上かつ低級アルコール濃度１５体積
％以下の低級アルコール水溶液で洗浄し（第２工程）、
その後、抗酸化成分を、低級アルコール濃度２０体積％
以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液により、合
成吸着剤より脱着させる（第３工程）。 （１）第１工程 シソ科植物抽出液の調製 本発明に用いられるシソ科植物原料は、特に限定される
ものではなく、例えばシソ、アオジソ、チリメンジソ、
ローズマリー（マンネンロウ）等が挙げられるが、なか
でもローズマリーが好ましい。
法を、詳細に説明する。次に、この抗酸化剤の製造方法
を説明する。この製造方法は、シソ科植物抽出物に含ま
れる成分のうち、高活性な抗酸化成分（メトキシルテオ
リン配糖体と推定）を選択的に高濃度で回収する方法で
ある。 ［製造方法１］本方法は、低級アルコール濃度１５体積
％以下のシソ科植物抽出物水溶液を、合成吸着剤と接触
させて、抗酸化成分を合成吸着剤に吸着させ（第１工
程）、次いで、該合成吸着剤を、ｐＨ７．５以上の水、
またはｐＨ７．５以上かつ低級アルコール濃度１５体積
％以下の低級アルコール水溶液で洗浄し（第２工程）、
その後、抗酸化成分を、低級アルコール濃度２０体積％
以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液により、合
成吸着剤より脱着させる（第３工程）。 （１）第１工程 シソ科植物抽出液の調製 本発明に用いられるシソ科植物原料は、特に限定される
ものではなく、例えばシソ、アオジソ、チリメンジソ、
ローズマリー（マンネンロウ）等が挙げられるが、なか
でもローズマリーが好ましい。
【０００９】抽出物の抽出に用いられる植物原料の形態
としては、全草、各植物部位または該部位の２種以上を
混合したものを用いることができるが、好ましくは葉も
しくは全草が用いられる。これら植物原料は、生でも乾
燥物でもよいが、好ましくは乾燥物である。粉砕程度は
特に制限されないが、例えば粗切り状態が好ましい。上
記植物原料から抗酸化成分を抽出するに際し、抽出溶媒
としては、水、低級アルコール、または低級アルコール
水溶液が用いられるが、好ましくは低級アルコール水溶
液である。尚、本明細書において、低級アルコールと
は、炭素数１〜４のアルコールを意味する。低級アルコ
ールとしては、直鎖状、分岐鎖状のいずれのも用いるこ
とができる。具体的には、例えば、メタノール、エタノ
ール、ｎ−ブタノール等が挙げられ、これらの中でも、
メタノール、エタノールが好ましい。アルコール水溶液
のアルコール濃度は、通常１０〜８０重量％、好ましく
は３０〜６０重量％、更に好ましくは４０〜６０重量％
である。抽出溶媒の量は、植物原料の重量に対して、通
常１〜１００倍量、好ましくは２〜１０倍量使用され
る。抽出溶液中の固形分濃度が、０．１〜３０重量％、
好ましくは１〜１０重量％の範囲となるように抽出溶媒
の量を調節すると、抽出効率が高く好ましい。
としては、全草、各植物部位または該部位の２種以上を
混合したものを用いることができるが、好ましくは葉も
しくは全草が用いられる。これら植物原料は、生でも乾
燥物でもよいが、好ましくは乾燥物である。粉砕程度は
特に制限されないが、例えば粗切り状態が好ましい。上
記植物原料から抗酸化成分を抽出するに際し、抽出溶媒
としては、水、低級アルコール、または低級アルコール
水溶液が用いられるが、好ましくは低級アルコール水溶
液である。尚、本明細書において、低級アルコールと
は、炭素数１〜４のアルコールを意味する。低級アルコ
ールとしては、直鎖状、分岐鎖状のいずれのも用いるこ
とができる。具体的には、例えば、メタノール、エタノ
ール、ｎ−ブタノール等が挙げられ、これらの中でも、
メタノール、エタノールが好ましい。アルコール水溶液
のアルコール濃度は、通常１０〜８０重量％、好ましく
は３０〜６０重量％、更に好ましくは４０〜６０重量％
である。抽出溶媒の量は、植物原料の重量に対して、通
常１〜１００倍量、好ましくは２〜１０倍量使用され
る。抽出溶液中の固形分濃度が、０．１〜３０重量％、
好ましくは１〜１０重量％の範囲となるように抽出溶媒
の量を調節すると、抽出効率が高く好ましい。
【００１０】抽出時の温度は、植物原料の種類等にもよ
るが、通常室温〜９０℃、好ましくは５０〜８０℃の範
囲である。更に好ましくは、常圧にてアルコール水溶液
が還流する程度の温度である。このとき、抽出器は解放
系でも閉鎖系でもよい。抽出時間は、原料及び抽出温度
等にもよるが、通常０．５〜１０時間、好ましくは１〜
４時間である。
るが、通常室温〜９０℃、好ましくは５０〜８０℃の範
囲である。更に好ましくは、常圧にてアルコール水溶液
が還流する程度の温度である。このとき、抽出器は解放
系でも閉鎖系でもよい。抽出時間は、原料及び抽出温度
等にもよるが、通常０．５〜１０時間、好ましくは１〜
４時間である。
【００１１】抽出処理の後、抽出溶液と植物原料残渣を
分ける手段は、濾過等の公知の方法が用いられる。抽出
処理後の植物原料残渣に対し、更に抽出操作を１〜３
回、好ましくは２回程度行ない、最初の抽出溶液と合わ
せて用いてもよい。 シソ科植物抽出液の前処理 上記方法で得られた抽出液中の低級アルコール濃度が１
５体積％を越える場合には、吸着剤処理の前に、抽出液
中の低級アルコールの濃度を１５体積％以下に下げる必
要がある。低級アルコール濃度が１５体積％を越える
と、抗酸化剤成分が、吸着剤に十分吸着しないので好ま
しくない。低級アルコール濃度は低い方がよく、好まし
くは１０体積％以下であり、更に好ましくは５体積％以
下であり、０であることが最も好ましい。
分ける手段は、濾過等の公知の方法が用いられる。抽出
処理後の植物原料残渣に対し、更に抽出操作を１〜３
回、好ましくは２回程度行ない、最初の抽出溶液と合わ
せて用いてもよい。 シソ科植物抽出液の前処理 上記方法で得られた抽出液中の低級アルコール濃度が１
５体積％を越える場合には、吸着剤処理の前に、抽出液
中の低級アルコールの濃度を１５体積％以下に下げる必
要がある。低級アルコール濃度が１５体積％を越える
と、抗酸化剤成分が、吸着剤に十分吸着しないので好ま
しくない。低級アルコール濃度は低い方がよく、好まし
くは１０体積％以下であり、更に好ましくは５体積％以
下であり、０であることが最も好ましい。
【００１２】アルコール濃度を下げる方法としては、蒸
留等によるアルコール留去や水添加、あるいはそれらの
組み合わせ等が考えられる。あるいは、アルコールと共
に水も完全に留去し、固体状の抽出物を得た後、水また
はアルコール濃度１５体積％以下のアルコール水溶液に
溶解しても良い。このアルコール濃度を下げる操作にお
いて、アルコール濃度の低下に伴い、沈殿物が析出する
ことがある。以後の合成吸着剤処理工程への負荷を小さ
くするために、該沈殿物は濾過等の手段により分離した
方が望ましい。なお、この沈殿物には油溶性の抗酸化成
分が多く含有されているので、油脂の酸化防止等へ利用
できる。 抽出物水溶液を合成吸着剤と接触 低級アルコール濃度１５体積％以下の抽出物水溶液を合
成吸着剤に接触させ、抽出物中の抗酸化成分を合成吸着
剤に吸着させる。
留等によるアルコール留去や水添加、あるいはそれらの
組み合わせ等が考えられる。あるいは、アルコールと共
に水も完全に留去し、固体状の抽出物を得た後、水また
はアルコール濃度１５体積％以下のアルコール水溶液に
溶解しても良い。このアルコール濃度を下げる操作にお
いて、アルコール濃度の低下に伴い、沈殿物が析出する
ことがある。以後の合成吸着剤処理工程への負荷を小さ
くするために、該沈殿物は濾過等の手段により分離した
方が望ましい。なお、この沈殿物には油溶性の抗酸化成
分が多く含有されているので、油脂の酸化防止等へ利用
できる。 抽出物水溶液を合成吸着剤と接触 低級アルコール濃度１５体積％以下の抽出物水溶液を合
成吸着剤に接触させ、抽出物中の抗酸化成分を合成吸着
剤に吸着させる。
【００１３】本発明で用いられる合成吸着剤としては、
特に限定されないが、例えば、比表面積が３００〜１５
００ｍ2／ｇ程度、細孔容積が０．３〜２．５ｍＬ／ｇ
程度、最頻度半径が２０〜７００Å程度が好ましい。こ
のような合成樹脂の具体例としては、ダイヤイオンTMＨ
Ｐ２０ＳＳ、ＨＰ２０、ＨＰ２１等のＨＰ樹脂、セパビ
ーズTMＳＰ８２５、ＳＰ８５０、ＳＰ２０７等のＳＰ樹
脂（以上、三菱化学社製）、アンバーライトＸＡＤ−
２、ＸＡＤ−４、ＸＡＤ−１６（以上、ロームアンドハ
ース社製）等のスチレン−ジビニルベンゼン系樹脂；ダ
イアイオンTMＨＰ２ＭＧ（三菱化学社製）、アンバーラ
イトＸＡＤ−７、ＸＡＤ−８（以上、ロームアンドハー
ス社製）等のアクリル系樹脂等が挙げられる。
特に限定されないが、例えば、比表面積が３００〜１５
００ｍ2／ｇ程度、細孔容積が０．３〜２．５ｍＬ／ｇ
程度、最頻度半径が２０〜７００Å程度が好ましい。こ
のような合成樹脂の具体例としては、ダイヤイオンTMＨ
Ｐ２０ＳＳ、ＨＰ２０、ＨＰ２１等のＨＰ樹脂、セパビ
ーズTMＳＰ８２５、ＳＰ８５０、ＳＰ２０７等のＳＰ樹
脂（以上、三菱化学社製）、アンバーライトＸＡＤ−
２、ＸＡＤ−４、ＸＡＤ−１６（以上、ロームアンドハ
ース社製）等のスチレン−ジビニルベンゼン系樹脂；ダ
イアイオンTMＨＰ２ＭＧ（三菱化学社製）、アンバーラ
イトＸＡＤ−７、ＸＡＤ−８（以上、ロームアンドハー
ス社製）等のアクリル系樹脂等が挙げられる。
【００１４】合成吸着剤は、通常カラムに充填される。
カラムの形状は特に制限無いが、通常円筒型のカラムが
用いられる。合成吸着剤は、カラムに充填後、通常、エ
タノール、水で順次洗浄してから、抽出物の分画に使用
される。合成吸着剤に抽出物溶液を通液して、抽出物中
の抗酸化成分を吸着剤に吸着させる。吸着剤処理に供す
る１回あたりの抽出物溶液量は任意だが、用いる合成吸
着剤量に対して抽出物溶液量が少ないと１回あたりの処
理量が少なくなり、非効率的であるし、多すぎると抽出
物中の抗酸化成分の合成吸着剤への吸着が飽和し、吸着
できない分が生じ、目的抗酸化成分のロスが大きくな
る。よって、抽出物溶液中の目的抗酸化成分の樹脂への
吸着が完全に飽和しない程度の量の抽出物溶液を処理す
るのが効率的で好ましい。例えば、合成吸着剤１００ｍ
Ｌに対し、乾燥重量で１〜１０重量％の抽出物を含む水
溶液５０〜５０００ｍＬを通液させる。 （２）第２工程 合成吸着剤に、ｐＨ７．５以上の水またはｐＨ７．５以
上かつ低級アルコール濃度１５体積％以下の低級アルコ
ール水溶液（以下、「アルカリ洗浄液」という）を、洗
浄液として通液して、合成吸着剤を洗浄する。
カラムの形状は特に制限無いが、通常円筒型のカラムが
用いられる。合成吸着剤は、カラムに充填後、通常、エ
タノール、水で順次洗浄してから、抽出物の分画に使用
される。合成吸着剤に抽出物溶液を通液して、抽出物中
の抗酸化成分を吸着剤に吸着させる。吸着剤処理に供す
る１回あたりの抽出物溶液量は任意だが、用いる合成吸
着剤量に対して抽出物溶液量が少ないと１回あたりの処
理量が少なくなり、非効率的であるし、多すぎると抽出
物中の抗酸化成分の合成吸着剤への吸着が飽和し、吸着
できない分が生じ、目的抗酸化成分のロスが大きくな
る。よって、抽出物溶液中の目的抗酸化成分の樹脂への
吸着が完全に飽和しない程度の量の抽出物溶液を処理す
るのが効率的で好ましい。例えば、合成吸着剤１００ｍ
Ｌに対し、乾燥重量で１〜１０重量％の抽出物を含む水
溶液５０〜５０００ｍＬを通液させる。 （２）第２工程 合成吸着剤に、ｐＨ７．５以上の水またはｐＨ７．５以
上かつ低級アルコール濃度１５体積％以下の低級アルコ
ール水溶液（以下、「アルカリ洗浄液」という）を、洗
浄液として通液して、合成吸着剤を洗浄する。
【００１５】このアルカリ洗浄液で合成吸着剤を洗浄す
ることにより、合成吸着剤に吸着されていた成分のう
ち、不活性成分または／及び低活性成分は脱着し除去さ
れる。これに対し、本発明で回収を目的とする高活性成
分は脱着しない。洗浄液のｐＨは８以上が好ましく、９
以上が更に好ましく、通常１２以下である。１２を越え
ると、抗酸化成分が分解する可能性がある。
ることにより、合成吸着剤に吸着されていた成分のう
ち、不活性成分または／及び低活性成分は脱着し除去さ
れる。これに対し、本発明で回収を目的とする高活性成
分は脱着しない。洗浄液のｐＨは８以上が好ましく、９
以上が更に好ましく、通常１２以下である。１２を越え
ると、抗酸化成分が分解する可能性がある。
【００１６】水または低級アルコール水溶液のｐＨ調整
剤としては、特に制限はないが、例えば、水酸化ナトリ
ウム、水酸化カリウム、リン酸水素２ナトリウム、リン
酸水素２カリウム、珪酸ナトリウム、炭酸ナトリウム等
があげられるが、中でもリン酸水素２ナトリウムが好ま
しい。また、一般的に知られる緩衝液すなわちリン酸緩
衝液、トリス緩衝液、Ｍａｃｌｌｖａｉｎ氏緩衝液等を
利用してｐＨを調整してもよい。
剤としては、特に制限はないが、例えば、水酸化ナトリ
ウム、水酸化カリウム、リン酸水素２ナトリウム、リン
酸水素２カリウム、珪酸ナトリウム、炭酸ナトリウム等
があげられるが、中でもリン酸水素２ナトリウムが好ま
しい。また、一般的に知られる緩衝液すなわちリン酸緩
衝液、トリス緩衝液、Ｍａｃｌｌｖａｉｎ氏緩衝液等を
利用してｐＨを調整してもよい。
【００１７】アルカリ洗浄液中のアルコール濃度は、１
５体積％を越えると、高活性成分も脱着するので好まし
くなく、好ましくは１２体積％以下であり、通常５体積
％以上である。アルカリ洗浄液は、合成吸着剤１００ｍ
Ｌに対し、通常５０〜５００ｍＬ、好ましくは１００〜
３００ｍＬ使用する。アルカリ洗浄液で洗浄後、水、ま
たは低級アルコール濃度２０体積％未満の低級アルコー
ル水溶液（以下、「洗浄用アルコール水溶液」という）
で、合成吸着剤を洗浄し、ｐＨ調節剤を除去することが
好ましい。この洗浄用アルコール水溶液中の低級アルコ
ール濃度が２０％以上になると、目的とする高活性成分
が脱着し、収率が低下し好ましくない。低級アルコール
濃度は、好ましくは１７〜１９体積％、更に好ましくは
１５〜１８体積％である。洗浄用アルコール水溶液は、
通常、合成吸着剤１００ｍＬに対し５０〜３００ｍＬ、
好ましくは１００〜２００ｍＬ使用する。 （３）第３工程 洗浄後の合成吸着剤に、低級アルコール濃度２０体積％
以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液を通液し、
高活性成分を脱着させる。脱着液中の低級アルコール濃
度は、２５体積％以上であることが好ましく、３０体積
％以上であることが更に好ましい。脱着液の低級アルコ
ール濃度は、通常６０体積％以下、好ましくは５０体積
％以下である。６０体積％を越えると不活性成分または
／及び低活性成分が脱着してきて好ましくない。脱着液
は、通常、合成樹脂１００ｍＬに対し、１００〜５００
ｍＬ通液する。
５体積％を越えると、高活性成分も脱着するので好まし
くなく、好ましくは１２体積％以下であり、通常５体積
％以上である。アルカリ洗浄液は、合成吸着剤１００ｍ
Ｌに対し、通常５０〜５００ｍＬ、好ましくは１００〜
３００ｍＬ使用する。アルカリ洗浄液で洗浄後、水、ま
たは低級アルコール濃度２０体積％未満の低級アルコー
ル水溶液（以下、「洗浄用アルコール水溶液」という）
で、合成吸着剤を洗浄し、ｐＨ調節剤を除去することが
好ましい。この洗浄用アルコール水溶液中の低級アルコ
ール濃度が２０％以上になると、目的とする高活性成分
が脱着し、収率が低下し好ましくない。低級アルコール
濃度は、好ましくは１７〜１９体積％、更に好ましくは
１５〜１８体積％である。洗浄用アルコール水溶液は、
通常、合成吸着剤１００ｍＬに対し５０〜３００ｍＬ、
好ましくは１００〜２００ｍＬ使用する。 （３）第３工程 洗浄後の合成吸着剤に、低級アルコール濃度２０体積％
以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液を通液し、
高活性成分を脱着させる。脱着液中の低級アルコール濃
度は、２５体積％以上であることが好ましく、３０体積
％以上であることが更に好ましい。脱着液の低級アルコ
ール濃度は、通常６０体積％以下、好ましくは５０体積
％以下である。６０体積％を越えると不活性成分または
／及び低活性成分が脱着してきて好ましくない。脱着液
は、通常、合成樹脂１００ｍＬに対し、１００〜５００
ｍＬ通液する。
【００１８】尚、上記第１工程〜第３工程における、カ
ラムの通液速度としては、通常、ＳＶ（１時間当たりの
通液量／樹脂の見掛け体積）で０．１〜２０、好ましく
は０．５〜１０、更に好ましくは１〜５の範囲である。
また、その際の温度としては、通常５〜４０℃で実施さ
れる。 ［製造方法２］本方法は、ｐＨ６．５以上かつ低級アル
コール濃度１５体積％以下のシソ科植物抽出物水溶液
を、合成吸着剤と接触させて、抗酸化成分を合成吸着剤
に吸着させ（第１工程）、次いで、抗酸化成分を、低級
アルコール濃度２０体積％以上の低級アルコール水溶液
からなる脱着液で、合成吸着剤より脱着させる（第２工
程）。
ラムの通液速度としては、通常、ＳＶ（１時間当たりの
通液量／樹脂の見掛け体積）で０．１〜２０、好ましく
は０．５〜１０、更に好ましくは１〜５の範囲である。
また、その際の温度としては、通常５〜４０℃で実施さ
れる。 ［製造方法２］本方法は、ｐＨ６．５以上かつ低級アル
コール濃度１５体積％以下のシソ科植物抽出物水溶液
を、合成吸着剤と接触させて、抗酸化成分を合成吸着剤
に吸着させ（第１工程）、次いで、抗酸化成分を、低級
アルコール濃度２０体積％以上の低級アルコール水溶液
からなる脱着液で、合成吸着剤より脱着させる（第２工
程）。
【００１９】本方法は、製造方法１における第１工程と
第２工程を、１つの工程にまとめて簡略化したものであ
る。即ち、製造方法１では、第１工程で、抽出物中に不
活性成分または／及び低活性成分、高活性成分を一旦合
成吸着剤に吸着させたのち、第２工程で、不活性成分ま
たは／及び低活性成分をアルカリ洗浄液で除去してい
る。しかし、本方法では、第１工程では、不活性成分ま
たは／及び低活性成分を、最初から合成吸着剤に吸着さ
せず、高活性成分のみ吸着させている。本方法は、製造
方法１の方法と比較し、処理方法が簡略化されているの
で、製造上好ましい。 （１）第１工程 前処理 製造方法１と同様の方法で、シソ科植物抽出液を製造し
た後、抽出液中の低級アルコール濃度を１５体積％以下
に調整すると共に、ｐＨを６．５以上に調整する。ｐＨ
の調整は、製造方法１の第２工程で使用したｐＨ調節方
法が使用できる。ｐＨは７以上が好ましく、通常１１以
下である。１１を越えると、抗酸化成分が分解する可能
性がある。
第２工程を、１つの工程にまとめて簡略化したものであ
る。即ち、製造方法１では、第１工程で、抽出物中に不
活性成分または／及び低活性成分、高活性成分を一旦合
成吸着剤に吸着させたのち、第２工程で、不活性成分ま
たは／及び低活性成分をアルカリ洗浄液で除去してい
る。しかし、本方法では、第１工程では、不活性成分ま
たは／及び低活性成分を、最初から合成吸着剤に吸着さ
せず、高活性成分のみ吸着させている。本方法は、製造
方法１の方法と比較し、処理方法が簡略化されているの
で、製造上好ましい。 （１）第１工程 前処理 製造方法１と同様の方法で、シソ科植物抽出液を製造し
た後、抽出液中の低級アルコール濃度を１５体積％以下
に調整すると共に、ｐＨを６．５以上に調整する。ｐＨ
の調整は、製造方法１の第２工程で使用したｐＨ調節方
法が使用できる。ｐＨは７以上が好ましく、通常１１以
下である。１１を越えると、抗酸化成分が分解する可能
性がある。
【００２０】製造方法２では抽出液のｐＨを６．５以上
に調整するのに対し、製造方法１のアルカリ洗浄液のｐ
Ｈを７．５以上に調整している。この理由は、本発明で
除去したい不活性成分または／及び低活性成分が、本来
アルコール濃度１５体積％以下では、ｐＨ６．５以上で
吸着剤から脱着するものであり、また製造方法１では、
吸着剤に接触させる抽出物溶液は通常ｐＨ４〜５の酸性
なので、それを中和する分が必要になるからと考えられ
る。低級アルコール濃度を１５体積％以下にする方法、
好ましい低級アルコール濃度は製造方法１の第１工程の
前処理と同様である。 抽出物水溶液を合成吸着剤と接触 製造方法１と同様に、合成吸着剤をカラムに充填し、前
述の前処理をした抽出物水溶液を、合成吸着剤に通液す
る。例えば、合成吸着剤１００ｍＬに対し、乾燥重量で
１〜１０重量％の抽出物を含む抽出液を５０〜５０００
ｍＬを通液させる。
に調整するのに対し、製造方法１のアルカリ洗浄液のｐ
Ｈを７．５以上に調整している。この理由は、本発明で
除去したい不活性成分または／及び低活性成分が、本来
アルコール濃度１５体積％以下では、ｐＨ６．５以上で
吸着剤から脱着するものであり、また製造方法１では、
吸着剤に接触させる抽出物溶液は通常ｐＨ４〜５の酸性
なので、それを中和する分が必要になるからと考えられ
る。低級アルコール濃度を１５体積％以下にする方法、
好ましい低級アルコール濃度は製造方法１の第１工程の
前処理と同様である。 抽出物水溶液を合成吸着剤と接触 製造方法１と同様に、合成吸着剤をカラムに充填し、前
述の前処理をした抽出物水溶液を、合成吸着剤に通液す
る。例えば、合成吸着剤１００ｍＬに対し、乾燥重量で
１〜１０重量％の抽出物を含む抽出液を５０〜５０００
ｍＬを通液させる。
【００２１】この後、水、または低級アルコール濃度２
０％未満の低級アルコール水溶液（洗浄用アルコール水
溶液）で、合成吸着剤を洗浄し、ｐＨ調節剤を除去する
ことが好ましい。この洗浄用アルコール水溶液中の低級
アルコール濃度が２０％以上になると、目的とする高活
性成分が脱着し、収率が低下し好ましくない。低級アル
コール濃度は、好ましくは１７〜１９体積％、更に好ま
しくは１５〜１８体積％である。洗浄用アルコール水溶
液は、合成吸着剤１００ｍＬに対し、通常５０〜３００
ｍＬ、好ましくは１００〜２００ｍＬである。 （３）第２工程 製造方法１の第３工程と同様に、低級アルコール濃度２
０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液を
通液し、高活性成分を脱着させる。脱着液中の低級アル
コール濃度は、３０体積％以上であることが好ましい。
脱着液の低級アルコール濃度は、通常６０体積％以下、
好ましくは５０体積％以下である。６０体積％を越える
と不活性成分が脱着してきて好ましくない。脱着液は、
通常、合成樹脂１００ｍＬに対し、１００〜５００ｍＬ
通液する。
０％未満の低級アルコール水溶液（洗浄用アルコール水
溶液）で、合成吸着剤を洗浄し、ｐＨ調節剤を除去する
ことが好ましい。この洗浄用アルコール水溶液中の低級
アルコール濃度が２０％以上になると、目的とする高活
性成分が脱着し、収率が低下し好ましくない。低級アル
コール濃度は、好ましくは１７〜１９体積％、更に好ま
しくは１５〜１８体積％である。洗浄用アルコール水溶
液は、合成吸着剤１００ｍＬに対し、通常５０〜３００
ｍＬ、好ましくは１００〜２００ｍＬである。 （３）第２工程 製造方法１の第３工程と同様に、低級アルコール濃度２
０体積％以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液を
通液し、高活性成分を脱着させる。脱着液中の低級アル
コール濃度は、３０体積％以上であることが好ましい。
脱着液の低級アルコール濃度は、通常６０体積％以下、
好ましくは５０体積％以下である。６０体積％を越える
と不活性成分が脱着してきて好ましくない。脱着液は、
通常、合成樹脂１００ｍＬに対し、１００〜５００ｍＬ
通液する。
【００２２】尚、製造方法２の第１工程及び第２工程の
カラムの通液速度、カラム処理時の温度は、製造方法１
と同様である。又、製造方法１及び製造方法２におい
て、低級アルコールとして、エタノールを使用すること
が特に好ましい。製造方法１及び製造方法２で得られる
回収液は、溶媒を一部濃縮して使用してもよいし、溶媒
の全部を除去して固体として使用してもよい。また、上
述では、合成吸着剤をカラムに充填して精製する方法を
例にとり説明したが、本発明の製造方法１及び製造方法
２はこれに限定されるものではなく、合成吸着剤をカラ
ムに充填せずに、バッチ式で精製してもよい。例えば、
製造方法１では、シソ科植物抽出物水溶液と合成吸着剤
を混合したのち溶液をろ過し、次いで合成吸着剤とアル
カリ洗浄液を混合したのち溶液をろ過し、次いで合成吸
着剤と脱着液を混合し、ろ過して濾液を回収してもよ
い。同様に、製造方法２では、ｐＨ調整した抽出液を合
成吸着剤とを混合し、溶液をろ過し、次いで合成吸着剤
と脱着液を混合し、ろ過して濾液を回収してもよい。
カラムの通液速度、カラム処理時の温度は、製造方法１
と同様である。又、製造方法１及び製造方法２におい
て、低級アルコールとして、エタノールを使用すること
が特に好ましい。製造方法１及び製造方法２で得られる
回収液は、溶媒を一部濃縮して使用してもよいし、溶媒
の全部を除去して固体として使用してもよい。また、上
述では、合成吸着剤をカラムに充填して精製する方法を
例にとり説明したが、本発明の製造方法１及び製造方法
２はこれに限定されるものではなく、合成吸着剤をカラ
ムに充填せずに、バッチ式で精製してもよい。例えば、
製造方法１では、シソ科植物抽出物水溶液と合成吸着剤
を混合したのち溶液をろ過し、次いで合成吸着剤とアル
カリ洗浄液を混合したのち溶液をろ過し、次いで合成吸
着剤と脱着液を混合し、ろ過して濾液を回収してもよ
い。同様に、製造方法２では、ｐＨ調整した抽出液を合
成吸着剤とを混合し、溶液をろ過し、次いで合成吸着剤
と脱着液を混合し、ろ過して濾液を回収してもよい。
【００２３】本発明の製造方法により、下記条件でＨＰ
ＬＣ分析した場合、そのリテンションタイムが、ロスマ
リン酸のリテンションタイムを基準として−２．６±１
分であり、且つ分子量が４７８の成分のピークの面積％
が、２０％以上の抗酸化剤を製造することができる。 ＜ＨＰＬＣ分析条件＞ カラム：Inertsil ODS 80A（５μｍ ４．６mm I．
D．×250mm，GL SciencesInc.） カラム温度：４０℃ 移動相：Ａ−４重量％リン酸水溶液、Ｂ−アセトニトリ
ル 流量：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ検出器、波長２８０ｎｍ 注入量：２５μＬ 分析時間：３５分 Gradient条件： ０分（Ａ９０体積％、Ｂ１０体積％）→３０分（Ａ６０
体積％、Ｂ４０体積％）→３５分（Ａ６０体積％、Ｂ４
０体積％） 該分子量４７８成分、Ｃ22Ｈ22Ｏ12の化学式で表わされ
る化合物である。その構造は、フラボンの一種であるル
テオリンと類似した構造の物質で、フラボン骨格のＢ環
の４’位と５’位およびＡ環の５位にＯＨ基を有し、Ａ
環の６位と７位のいずれか一方に酸素原子を介した単糖
を、他方にメトキシ基を有する構造（本明細書では、
「メトキシルテオリン配糖体」と称する）と推定され
る。その構造式を下記に示す。ただし、糖の構造は、現
時点で不明である。
ＬＣ分析した場合、そのリテンションタイムが、ロスマ
リン酸のリテンションタイムを基準として−２．６±１
分であり、且つ分子量が４７８の成分のピークの面積％
が、２０％以上の抗酸化剤を製造することができる。 ＜ＨＰＬＣ分析条件＞ カラム：Inertsil ODS 80A（５μｍ ４．６mm I．
D．×250mm，GL SciencesInc.） カラム温度：４０℃ 移動相：Ａ−４重量％リン酸水溶液、Ｂ−アセトニトリ
ル 流量：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ検出器、波長２８０ｎｍ 注入量：２５μＬ 分析時間：３５分 Gradient条件： ０分（Ａ９０体積％、Ｂ１０体積％）→３０分（Ａ６０
体積％、Ｂ４０体積％）→３５分（Ａ６０体積％、Ｂ４
０体積％） 該分子量４７８成分、Ｃ22Ｈ22Ｏ12の化学式で表わされ
る化合物である。その構造は、フラボンの一種であるル
テオリンと類似した構造の物質で、フラボン骨格のＢ環
の４’位と５’位およびＡ環の５位にＯＨ基を有し、Ａ
環の６位と７位のいずれか一方に酸素原子を介した単糖
を、他方にメトキシ基を有する構造（本明細書では、
「メトキシルテオリン配糖体」と称する）と推定され
る。その構造式を下記に示す。ただし、糖の構造は、現
時点で不明である。
【００２４】
【化１】
（上記式中、Ｒ1とＲ2のいずれか一方がメチル基、他方
が糖（Ｃ6Ｈ11Ｏ5）を表す。） 抗酸化剤中の該分子量４７８成分の含有量は高い方が好
ましく、好ましくは、上記分析条件において、該ピーク
面積％が３０％以上であることが好ましく、４０％以上
であることが好ましい。
が糖（Ｃ6Ｈ11Ｏ5）を表す。） 抗酸化剤中の該分子量４７８成分の含有量は高い方が好
ましく、好ましくは、上記分析条件において、該ピーク
面積％が３０％以上であることが好ましく、４０％以上
であることが好ましい。
【００２５】本発明の製造方法で得られる抗酸化剤は、
メトキシルテオリン配糖体の含有量が高く、かつ、従来
の精製方法により得られた抗酸化剤より高活性であるこ
と、およびメトキシルテオリン配糖体は抗酸化成分とし
て知られているルテオリン配糖体の誘導体であることか
ら、このメトキシルテオリン配糖体こそが、非常に高活
性な抗酸化成分であると考えられる。
メトキシルテオリン配糖体の含有量が高く、かつ、従来
の精製方法により得られた抗酸化剤より高活性であるこ
と、およびメトキシルテオリン配糖体は抗酸化成分とし
て知られているルテオリン配糖体の誘導体であることか
ら、このメトキシルテオリン配糖体こそが、非常に高活
性な抗酸化成分であると考えられる。
【００２６】本製造方法で得られる抗酸化剤は、高い抗
酸化活性を有し、そのまま飲食品や化粧品などの抗酸化
剤として使用できる。また、該抗酸化剤は、特に活性酸
素消去能に優れるため、体内に取り込まれる飲食品、医
薬品、医薬部外品に使用した場合、体内の活性酸素除去
効果が期待される。また、皮膚や毛髪用の化粧品に使用
された場合、皮膚や毛髪の活性酸素除去効果が期待され
る。
酸化活性を有し、そのまま飲食品や化粧品などの抗酸化
剤として使用できる。また、該抗酸化剤は、特に活性酸
素消去能に優れるため、体内に取り込まれる飲食品、医
薬品、医薬部外品に使用した場合、体内の活性酸素除去
効果が期待される。また、皮膚や毛髪用の化粧品に使用
された場合、皮膚や毛髪の活性酸素除去効果が期待され
る。
【００２７】
【実施例】以下に実施例により本発明を具体的に説明す
るが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではな
い。なお、下記の実施例及び比較例において、抗酸化能
評価及びＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）分析
は次の通り行った。 ＜抗酸化能評価＞抗酸化能評価は、ＳＯＤ様活性をＳＯ
Ｄテストワコー（和光純約工業株式会社製）により測定
し、活性酸素消去能を相対比較することにより行った。
具体的な測定方法は以下の通りである。
るが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではな
い。なお、下記の実施例及び比較例において、抗酸化能
評価及びＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）分析
は次の通り行った。 ＜抗酸化能評価＞抗酸化能評価は、ＳＯＤ様活性をＳＯ
Ｄテストワコー（和光純約工業株式会社製）により測定
し、活性酸素消去能を相対比較することにより行った。
具体的な測定方法は以下の通りである。
【００２８】各抗酸化成分を濃度０．０２５重量％とな
るように水に溶解し、これをＳＯＤ様活性測定用原液と
した。各ＳＯＤ様活性測定用原液０．１ｍＬと酵素液
（酵素原液を酵素希釈液と混合したもの。キサンチンオ
キシダーゼ０．０４９単位／ｍＬ）１ｍＬと発色試薬１
ｍＬを混合後、３７Ｃで２０分間インキュベートし反応
させた。２０分後、反応停止液２ｍＬを添加、混合して
反応を停止させた。そして、反応停止後の液の５６０ｎ
ｍにおける吸光度（ＥS）を測定した。さらに、ＳＯＤ
様活性測定用原液の代わりに水０．１を用いて同様に反
応、反応停止させた液の吸光度（ＥBL）、および、酵素
液の代わりにブランク液１ｍＬを用いて同様に反応、反
応停止させた液の吸光度（ＥS-BL）、および、ＳＯＤ様
活性測定用原液の代わり水０．１ｍＬを用い、かつ酵素
液の代わりにブランク液１ｍＬを用いて同様に反応、反
応停止させた液の吸光度（ＥBL-BL）を測定し、次式よ
り阻害率％を求めた。阻害率％が高いものほどＳＯＤ様
活性が高いと言える。
るように水に溶解し、これをＳＯＤ様活性測定用原液と
した。各ＳＯＤ様活性測定用原液０．１ｍＬと酵素液
（酵素原液を酵素希釈液と混合したもの。キサンチンオ
キシダーゼ０．０４９単位／ｍＬ）１ｍＬと発色試薬１
ｍＬを混合後、３７Ｃで２０分間インキュベートし反応
させた。２０分後、反応停止液２ｍＬを添加、混合して
反応を停止させた。そして、反応停止後の液の５６０ｎ
ｍにおける吸光度（ＥS）を測定した。さらに、ＳＯＤ
様活性測定用原液の代わりに水０．１を用いて同様に反
応、反応停止させた液の吸光度（ＥBL）、および、酵素
液の代わりにブランク液１ｍＬを用いて同様に反応、反
応停止させた液の吸光度（ＥS-BL）、および、ＳＯＤ様
活性測定用原液の代わり水０．１ｍＬを用い、かつ酵素
液の代わりにブランク液１ｍＬを用いて同様に反応、反
応停止させた液の吸光度（ＥBL-BL）を測定し、次式よ
り阻害率％を求めた。阻害率％が高いものほどＳＯＤ様
活性が高いと言える。
【００２９】
【数１】阻害率％＝｛（ＥBL−ＥBL-BL）−（ＥS−Ｅ
S-BL）｝／（ＥBL−ＥBL-BL）×100 ＜ＨＰＬＣ分析条件＞ カラム：Inertsil ODS 80A（５μｍ ４．６mm I．
D．×250mm，GL SciencesInc.） カラム温度：４０℃ 移動相：Ａ−４重量％リン酸水溶液、Ｂ−アセトニトリ
ル 流量：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ検出器、波長２８０ｎｍ 注入量：２５μＬ 分析時間：３５分 Gradient条件： ０分（Ａ９０体積％、Ｂ１０体積％）→３０分（Ａ６０
体積％、Ｂ４０体積％）→３５分（Ａ６０体積％、Ｂ４
０体積％） 実施例１ ローズマリー乾燥葉（粗切り）１００ｇに４５体積％エ
タノール水溶液を１０００ｍＬ加えて３時間７０℃にて
還流し、その後ろ紙でろ過して抽出液を得た。ろ紙上の
ローズマリー抽出残さを、さらに１０００ｍＬの４５体
積％エタノール水溶液にて上記と同様に、抽出操作を更
に２回繰り返して抽出液を得た。これらの抽出液を合わ
せ約２７００ｍＬのローズマリー抽出液を得た。これ
を、エバポレータを用いて減圧下（約５０ｍｍＨｇ）、
約５５℃にて溶媒留去し、水添加することにより、沈殿
物を含むエタノール含有量１重量％以下の濃縮抽出液５
００ｍＬを得た。これを、平均孔径１．６μｍのガラス
繊維フィルターでろ過してろ液と沈殿物とに分けた。
S-BL）｝／（ＥBL−ＥBL-BL）×100 ＜ＨＰＬＣ分析条件＞ カラム：Inertsil ODS 80A（５μｍ ４．６mm I．
D．×250mm，GL SciencesInc.） カラム温度：４０℃ 移動相：Ａ−４重量％リン酸水溶液、Ｂ−アセトニトリ
ル 流量：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ検出器、波長２８０ｎｍ 注入量：２５μＬ 分析時間：３５分 Gradient条件： ０分（Ａ９０体積％、Ｂ１０体積％）→３０分（Ａ６０
体積％、Ｂ４０体積％）→３５分（Ａ６０体積％、Ｂ４
０体積％） 実施例１ ローズマリー乾燥葉（粗切り）１００ｇに４５体積％エ
タノール水溶液を１０００ｍＬ加えて３時間７０℃にて
還流し、その後ろ紙でろ過して抽出液を得た。ろ紙上の
ローズマリー抽出残さを、さらに１０００ｍＬの４５体
積％エタノール水溶液にて上記と同様に、抽出操作を更
に２回繰り返して抽出液を得た。これらの抽出液を合わ
せ約２７００ｍＬのローズマリー抽出液を得た。これ
を、エバポレータを用いて減圧下（約５０ｍｍＨｇ）、
約５５℃にて溶媒留去し、水添加することにより、沈殿
物を含むエタノール含有量１重量％以下の濃縮抽出液５
００ｍＬを得た。これを、平均孔径１．６μｍのガラス
繊維フィルターでろ過してろ液と沈殿物とに分けた。
【００３０】得られたろ液より、エバポレータを用いて
さらに溶媒を完全留去し、２２ｇの抗酸化成分を含む固
形分を得た。この固形分を抗酸化剤原体として、以下の
合成吸着剤による分画に供した。この５重量％の抗酸化
剤原体水溶液６０ｍＬをガラス製カラム（径１２．５ｍ
ｍφ）にスチレン−ジビニルベンゼン系樹脂（三菱化学
社製：ダイヤイオンTMＨＰ２０ＳＳ）を３０ｍＬ込んだ
装置に、ＳＶ＝約３の通液速度で通液し、続いてｐＨ調
整剤として０．５重量％のリン酸水素２ナトリウムを添
加した１０体積％エタノール水溶液（ｐＨ９．５）から
なる洗浄液を６０ｍＬ通液し、その後さらに６０ｍＬの
１８％エタノール水溶液（ｐＨ調整剤無添加）を通液
し、合成吸着剤を洗浄した。その後、脱着液として３０
体積％エタノール水溶液を９０ｍＬ通液して、カラム出
口で抗酸化成分を含む脱着液９０ｍＬを回収した。この
抗酸化成分を含む脱着液よりエバポレータにて溶媒を完
全に留去し、０．２ｇの固体の抗酸化剤Ａを得た。該抗
酸化剤の０．０２５重量％水溶液を調製し、それをＳＯ
Ｄ様活性測定用原液としてＳＯＤ様活性を測定すると同
時にＨＰＬＣ分析を行い、分子量４７８の高活性抗酸化
成分のピーク面積％を求めた。
さらに溶媒を完全留去し、２２ｇの抗酸化成分を含む固
形分を得た。この固形分を抗酸化剤原体として、以下の
合成吸着剤による分画に供した。この５重量％の抗酸化
剤原体水溶液６０ｍＬをガラス製カラム（径１２．５ｍ
ｍφ）にスチレン−ジビニルベンゼン系樹脂（三菱化学
社製：ダイヤイオンTMＨＰ２０ＳＳ）を３０ｍＬ込んだ
装置に、ＳＶ＝約３の通液速度で通液し、続いてｐＨ調
整剤として０．５重量％のリン酸水素２ナトリウムを添
加した１０体積％エタノール水溶液（ｐＨ９．５）から
なる洗浄液を６０ｍＬ通液し、その後さらに６０ｍＬの
１８％エタノール水溶液（ｐＨ調整剤無添加）を通液
し、合成吸着剤を洗浄した。その後、脱着液として３０
体積％エタノール水溶液を９０ｍＬ通液して、カラム出
口で抗酸化成分を含む脱着液９０ｍＬを回収した。この
抗酸化成分を含む脱着液よりエバポレータにて溶媒を完
全に留去し、０．２ｇの固体の抗酸化剤Ａを得た。該抗
酸化剤の０．０２５重量％水溶液を調製し、それをＳＯ
Ｄ様活性測定用原液としてＳＯＤ様活性を測定すると同
時にＨＰＬＣ分析を行い、分子量４７８の高活性抗酸化
成分のピーク面積％を求めた。
【００３１】ＳＯＤ様活性測定とＨＰＬＣ分析結果を表
−１に示した。 実施例２ 実施例１で得た抗酸化剤原体を、ｐＨ調整剤として１重
量％のリン酸水素２ナトリウムを含む１０体積％エタノ
ール水溶液に５重量％になるように溶解した。該溶解液
のｐＨは７．０であった。該溶解液６０ｍＬをガラス製
カラム（径１２．５ｍｍφ）にスチレン−ジビニルベン
ゼン系樹脂（三菱化学社製：ダイヤイオンTMＨＰ２０）
を３０ｍＬ込んだ装置に、ＳＶ＝約３の通液速度で通液
した。続いて６０ｍＬの１８％エタノール水溶液を通液
し、合成吸着剤を洗浄した。その後、脱着液として３０
体積％エタノール水溶液を９０ｍＬ通液して、カラム出
口で抗酸化成分を含む脱着液９０ｍＬを回収した。この
抗酸化成分を含む脱着液よりエバポレータにて溶媒を完
全に留去し、約０．２ｇの固体状の抗酸化剤Ｂを得た。
該抗酸化剤の０．０２５重量％水溶液を調製し、それを
ＳＯＤ様活性測定用原液としてＳＯＤ様活性を測定する
と同時にＨＰＬＣ分析を行い、分子量４７８の高活性抗
酸化成分のピーク面積％を求めた。
−１に示した。 実施例２ 実施例１で得た抗酸化剤原体を、ｐＨ調整剤として１重
量％のリン酸水素２ナトリウムを含む１０体積％エタノ
ール水溶液に５重量％になるように溶解した。該溶解液
のｐＨは７．０であった。該溶解液６０ｍＬをガラス製
カラム（径１２．５ｍｍφ）にスチレン−ジビニルベン
ゼン系樹脂（三菱化学社製：ダイヤイオンTMＨＰ２０）
を３０ｍＬ込んだ装置に、ＳＶ＝約３の通液速度で通液
した。続いて６０ｍＬの１８％エタノール水溶液を通液
し、合成吸着剤を洗浄した。その後、脱着液として３０
体積％エタノール水溶液を９０ｍＬ通液して、カラム出
口で抗酸化成分を含む脱着液９０ｍＬを回収した。この
抗酸化成分を含む脱着液よりエバポレータにて溶媒を完
全に留去し、約０．２ｇの固体状の抗酸化剤Ｂを得た。
該抗酸化剤の０．０２５重量％水溶液を調製し、それを
ＳＯＤ様活性測定用原液としてＳＯＤ様活性を測定する
と同時にＨＰＬＣ分析を行い、分子量４７８の高活性抗
酸化成分のピーク面積％を求めた。
【００３２】ＳＯＤ様活性測定とＨＰＬＣ分析結果を表
−１に示した。 比較例１ 実施例１で得た抗酸化剤原体の０．０２５重量％の水溶
液を調製し、それをＳＯＤ様活性測定用原液としてＳＯ
Ｄ様活性を測定すると同時にHPLC分析を行い、分子量４
７８の高活性抗酸化成分のピーク面積％を求めた。 比較例２ 実施例１で得た抗酸化剤原体の５重量％水溶液６０ｍＬ
をガラス製カラム（径１２．５ｍｍφ）にスチレン−ジ
ビニルベンゼン系樹脂（三菱化学社製：ダイヤイオンTM
ＨＰ２０ＳＳ）を３０ｍＬ込んだ装置に、ＳＶ＝約３の
通液速度で通液し、続いてｐＨ調整剤として０．５重量
％のリン酸を添加した１０体積％エタノール水溶液（ｐ
Ｈ２．３）からなる洗浄液を６０ｍＬ通液し、その後さ
らに６０ｍＬの１８％エタノール水溶液を通液し、合成
吸着剤を洗浄した。その後、脱着液として３０体積％エ
タノール水溶液を９０ｍＬ通液して、カラム出口で抗酸
化成分を含む脱着液９０ｍＬを回収した。この抗酸化成
分を含む脱着液よりエバポレータにて溶媒を完全に留去
し、約０．４ｇの固体状の抗酸化剤Ｃを得た。該抗酸化
剤の０．０２５重量％水溶液を調製し、それをＳＯＤ様
活性測定用原液としてＳＯＤ様活性を測定すると同時に
ＨＰＬＣ分析を行い、分子量４７８の高活性抗酸化成分
のピーク面積％を求めた。
−１に示した。 比較例１ 実施例１で得た抗酸化剤原体の０．０２５重量％の水溶
液を調製し、それをＳＯＤ様活性測定用原液としてＳＯ
Ｄ様活性を測定すると同時にHPLC分析を行い、分子量４
７８の高活性抗酸化成分のピーク面積％を求めた。 比較例２ 実施例１で得た抗酸化剤原体の５重量％水溶液６０ｍＬ
をガラス製カラム（径１２．５ｍｍφ）にスチレン−ジ
ビニルベンゼン系樹脂（三菱化学社製：ダイヤイオンTM
ＨＰ２０ＳＳ）を３０ｍＬ込んだ装置に、ＳＶ＝約３の
通液速度で通液し、続いてｐＨ調整剤として０．５重量
％のリン酸を添加した１０体積％エタノール水溶液（ｐ
Ｈ２．３）からなる洗浄液を６０ｍＬ通液し、その後さ
らに６０ｍＬの１８％エタノール水溶液を通液し、合成
吸着剤を洗浄した。その後、脱着液として３０体積％エ
タノール水溶液を９０ｍＬ通液して、カラム出口で抗酸
化成分を含む脱着液９０ｍＬを回収した。この抗酸化成
分を含む脱着液よりエバポレータにて溶媒を完全に留去
し、約０．４ｇの固体状の抗酸化剤Ｃを得た。該抗酸化
剤の０．０２５重量％水溶液を調製し、それをＳＯＤ様
活性測定用原液としてＳＯＤ様活性を測定すると同時に
ＨＰＬＣ分析を行い、分子量４７８の高活性抗酸化成分
のピーク面積％を求めた。
【００３３】ＳＯＤ様活性測定とＨＰＬＣ分析結果を表
−１に示した。
−１に示した。
【００３４】
【表１】
【００３５】
【本発明の効果】本発明の製造方法によれば、高活性抗
酸化成分を高濃度に含有する抗酸化剤を製造することが
できる。この抗酸化剤は、食品、化粧品等の分野に特に
有用であり、特に肌の美白効果が期待される。
酸化成分を高濃度に含有する抗酸化剤を製造することが
できる。この抗酸化剤は、食品、化粧品等の分野に特に
有用であり、特に肌の美白効果が期待される。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
Ｆターム(参考） 4B018 LE05 MD61 ME06 MF01
4C083 AA111 CC02 CC31 EE11
EE16 EE21
4C088 AB38 AC05 BA10 CA13 NA14
ZA89 ZC02
4H025 AC06 BA01
Claims (9)
- 【請求項１】 低級アルコール濃度１５体積％以下のシ
ソ科植物抽出物水溶液を、合成吸着剤と接触させて、抗
酸化成分を合成吸着剤に吸着させ、 次いで、該合成吸着剤を、ｐＨ７．５以上の水、または
ｐＨ７．５以上かつ低級アルコール濃度１５体積％以下
の低級アルコール水溶液で洗浄し、 その後、抗酸化成分を、低級アルコール濃度２０体積％
以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液により、合
成吸着剤より脱着させることを特徴とする抗酸化剤の製
造方法。 - 【請求項２】 脱着液中の低級アルコール濃度が、６０
体積％以下であることを特徴とする請求項１に記載の抗
酸化剤の製造方法。 - 【請求項３】 シソ科植物がローズマリーであることを
特徴とする請求項１または２に記載の抗酸化剤の製造方
法。 - 【請求項４】 ｐＨ６．５以上かつ低級アルコール濃度
１５体積％以下のシソ科植物抽出物水溶液を、合成吸着
剤と接触させて、抗酸化成分を合成吸着剤に吸着させ、 次いで、抗酸化成分を、低級アルコール濃度２０体積％
以上の低級アルコール水溶液からなる脱着液で、合成吸
着剤より脱着させることを特徴とする抗酸化剤の製造方
法。 - 【請求項５】 脱着液中の低級アルコール濃度が、６０
体積％以下であることを特徴とする請求項４に記載の抗
酸化剤の製造方法。 - 【請求項６】 シソ科植物がローズマリーであることを
特徴とする請求項４または５に記載の抗酸化剤の製造方
法。 - 【請求項７】 下記条件でＨＰＬＣ分析した場合、その
リテンションタイムが、ロスマリン酸のリテンションタ
イムを基準として−２．６±１分であり、且つ分子量が
４７８の成分のピークの面積％が、２０％以上であるこ
とを特徴とする抗酸化剤。 ＜ＨＰＬＣ分析条件＞ カラム：Inertsil ODS 80A（５μｍ ４．６mm I.D.
×250mm，GL SciencesInc.） カラム温度：４０℃ 移動相：Ａ−４重量％リン酸水溶液、Ｂ−アセトニトリ
ル 流量：１ｍＬ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ検出器、波長２８０ｎｍ 注入量：２５μＬ 分析時間：３５分 Gradient条件： ０分（Ａ９０体積％、Ｂ１０体積％）→３０分（Ａ６０
体積％、Ｂ４０体積％）→３５分（Ａ６０体積％、Ｂ４
０体積％） - 【請求項８】 請求項７に記載の抗酸化剤を含有する飲
食品。 - 【請求項９】 請求項７に記載の抗酸化剤を含有する化
粧品。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001302197A JP4061877B2 (ja) | 2001-09-28 | 2001-09-28 | 抗酸化剤の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001302197A JP4061877B2 (ja) | 2001-09-28 | 2001-09-28 | 抗酸化剤の製造方法 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003105337A true JP2003105337A (ja) | 2003-04-09 |
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|---|---|---|---|
| JP2001302197A Expired - Lifetime JP4061877B2 (ja) | 2001-09-28 | 2001-09-28 | 抗酸化剤の製造方法 |
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| JP (1) | JP4061877B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005213221A (ja) * | 2004-01-30 | 2005-08-11 | Aroesu:Kk | 二糖類分解酵素阻害物質の製造方法 |
| JP2014131967A (ja) * | 2013-01-04 | 2014-07-17 | Nagase & Co Ltd | 美白用皮膚外用組成物 |
| WO2019026933A1 (ja) | 2017-08-02 | 2019-02-07 | サントリーホールディングス株式会社 | 色素褪色が抑制された容器詰飲料 |
-
2001
- 2001-09-28 JP JP2001302197A patent/JP4061877B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (4)
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|---|---|---|---|---|
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| JP2014131967A (ja) * | 2013-01-04 | 2014-07-17 | Nagase & Co Ltd | 美白用皮膚外用組成物 |
| WO2019026933A1 (ja) | 2017-08-02 | 2019-02-07 | サントリーホールディングス株式会社 | 色素褪色が抑制された容器詰飲料 |
| US11484046B2 (en) | 2017-08-02 | 2022-11-01 | Suntory Holdings Limited | Packed beverages suppressed in the fading of dyes |
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| JP4061877B2 (ja) | 2008-03-19 |
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