JP2003183121A - 皮膚基底膜賦活用組成物 - Google Patents
皮膚基底膜賦活用組成物Info
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Abstract
膚基底膜賦活用組成物を提供すること。 【解決手段】 皮膚基底膜の形成促進、機能向上に関わ
るラミニン5の産生を促進するコメヌカ油を含有する皮
膚基底膜賦活用組成物。
Description
成分であるラミニン5の産生を促進するコメヌカ油を有
効成分として含む皮膚基底膜賦活用組成物に関する。
ど、皮膚の老化に伴って起こる変化には、加齢、日光曝
露、環境によるストレス、精神的ストレスなどが関与す
ることが知られている。皮膚内部のミクロの変化として
は、真皮でのI型コラーゲン、III型コラーゲンおよびエ
ラスチンなどの弾性繊維の減少や変性、基底膜でのIV
型コラーゲンやラミニンなどの減少や変性、表皮細胞の
ターンオーバーの異常などが起こっている。
ィブロネクチンなどの細胞外マトリックスタンパク質に
より構成される緻密な膜で、皮膚においては表皮と真皮
の結合部に存在する。表皮と真皮の結合を担い、皮膚の
構造維持に重要であるとともに、表皮のターンオーバー
の制御や表皮と真皮の間の情報伝達に関与する。
タンパク質の中で、特に重要な機能を持つタンパク質の
一種としてラミニン5が知られている。ラミニン5は表
皮細胞により産生され、表皮細胞と基底膜の結合に関与
するとともに、VII型コラーゲンと結合し、真皮と基
底膜の結合にも関与する(Rousselle,P.,
et al.,J.Cell Biol.,114,5
67−576,1991.,Rousselle,
P.,et al.,J.Cell Biol.,13
8,719−728,1997.,Chen,M.,e
t al.,J.Invest.Dermatol.,
112,177−183,1999)。ラミニン5遺伝
子の異常が表皮・真皮間の剥離と水泡形成を特徴とする
重篤な遺伝的疾患である結合型表皮水泡症(Herli
tz's junctional epidermol
ysis bullosa)を引き起こすことから、ラ
ミニン5は正常な皮膚構造の維持に必要不可欠なタンパ
ク質であることが知られている(Aberdam,
D.,et al.,Nat.Genet.,6,29
9−304,1994.,Pulkkinen,L.,
et al.,Genomics,24,357−36
0,1994.,Kivirikko,S.,et a
l.,Hum.Mol.Genet.,4,959−9
62,1995.)。
代前半から基底膜の断裂や多重化などの皮膚基底膜の損
傷が見られ、20歳代後半から30歳代前半に顕著に悪
化することから、基底膜の損傷が皮膚老化を引き起こす
重要な要因であることが示唆された。また、精製ラミニ
ン5やラミニン5の産生を促進する物質が基底膜の形成
を促進し、基底膜ケアの有用な物質であることが示され
た{J.Soc.Cosmet.Chem.Jpn.,
総説,35(1)1−7,2001}。
ために、基底膜の形成を促進する作用を持つ精製ラミニ
ン5やラミニン5の産生を促進する植物抽出物や化合物
を有効成分として含む組成物が開発されている(特開平
10-147515、特開平11-343226、特開2
000-226308、特願2000−331318、
特願2001−151485)。
ミニン5を有効成分として含む組成物は、ラミニン5が
非常に高分子の糖タンパク質であることから、安定性、
皮膚浸透性などに問題があり、必ずしも十分な皮膚賦活
用作用を期待できない。また、これまで知られているラ
ミニン5の産生を促進する物質は、安定性、安全性が十
分とはいえず、必ずしも十分な皮膚賦活用作用を期待で
きない。したがって、さらに安定性、安全性に優れた成
分の開発が期待されていた。
について、表皮細胞におけるラミニン5の産生を促進す
る作用を検討した。その結果、コメヌカ油がラミニン5
の産生を促進させることを見出し、本発明を完成した。
む皮膚基底膜賦活用組成物、2.コメヌカ油を含むラミ
ニン5の産生促進用組成物、3.光障害抑制用である1
または2記載の組成物、4.皮膚外用である1、2また
は3記載の組成物に関する。
イネ種子の精米直後のコメヌカから得られる半乾性油で
あり、一般に市販されている。淡黄色の油状液体で、中
性脂肪のほかに多量の遊離脂肪酸、ロウ分、トコフェロ
ール、オリザノール、ステロール、微量のリン脂質、糖
脂質、金属などを含む。脂肪酸の成分は、おもにオレイ
ン酸、リノール酸、パルミチン酸である。
り、空気や熱に対して非常に安定である。表皮細胞や線
維芽細胞などの皮膚細胞に対する毒性はほとんどなく、
非常に安全性が高い。
収して皮膚を保護する効果がある。また、コレステロー
ル低下作用もあり、舌触りが良く香味が良いので、食用
油として用いられている。コメヌカ油脂肪酸はオレイン
酸が多く、コメヌカ油から製造した石けんは水に溶けや
すく、洗浄力がすぐれ、家庭用洗剤として使用されてい
る。欧米では天然のサンスクリーンオイルとして使われ
ている(化粧品ハンドブック,日光ケミカルズ株式会社
他,中央印刷株式会社)。
効配合量は、コメヌカ油の調製法、製剤の形態などによ
り、適宜選択、決定され、特に限定されないが、0.0
1〜30重量%が適当である。
胞におけるラミニン5の産生を促進し、皮膚基底膜の活
性化、再生促進に有用であり、紫外線の照射により低下
した皮膚基底膜の働きを高めて、基底膜と基底細胞の結
合力を強化し、いわゆる光老化の再生作用を有する。
類、高級脂肪酸、高級アルコール、シリコーン、アニオ
ン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、
非イオン界面活性剤、防腐剤、糖類、金属イオン封鎖
剤、水溶性高分子のような高分子、増粘剤、粉体成分、
紫外線吸収剤、紫外線遮断剤、ヒアルロン酸のような保
湿剤、香料、pH調整剤、乾燥剤等を含有させることが
できる。ビタミン類、皮膚賦活剤、血行促進剤、常在菌
コントロール剤、活性酸素消去剤、抗炎症剤、抗癌剤、
美白剤、殺菌剤等の他の薬効成分、生理活性成分を含有
させることもできる。
油、マカデミアナッツ油、オリーブ油、ナタネ油、トウ
モロコシ油、ゴマ油、ホホバ油、胚芽油、小麦胚芽油、
トリオクタン酸グリセリン、等の液体油脂、カカオ脂、
ヤシ油、硬化ヤシ油、パーム油、パーム核油、モクロ
ウ、モクロウ核油、硬化油、硬化ヒマシ油等の固体油
脂、ミツロウ、キャンデリラロウ、綿ロウ、ヌカロウ、
ラノリン、酢酸ラノリン、液状ラノリン、サトウキビロ
ウ等のロウ類が挙げられる。
クワレン、スクワラン、マイクロクリスタリンワックス
等が挙げられる。
リスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン
酸、リノール酸、リノレン酸、ドコサヘキサエン酸(D
HA)、エイコサペンタエン酸(EPA)等が挙げられ
る。
アルコール、ステアリルアルコール、セチルアルコー
ル、セトステアリルアルコール等の直鎖アルコール、モ
ノステアリルグリセリンエーテル、ラノリンアルコー
ル、コレステロール、フィトステロール、オクチルドデ
カノール等の分枝鎖アルコール等が挙げられる。
キサンのジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリ
シロキサン等、環状ポリシロキサンのデカメチルシクロ
ペンタシロキサン等が挙げられる。
リン酸ナトリウム等の脂肪酸塩、ラウリル硫酸ナトリウ
ム等の高級アルキル硫酸エステル塩、POEラウリル硫
酸トリエタノールアミン等のアルキルエーテル硫酸エス
テル塩、N−アシルサルコシン酸、スルホコハク酸塩、
N−アシルアミノ酸塩等が挙げられる。
ステアリルトリメチルアンモニウム等のアルキルトリメ
チルアンモニウム塩、塩化ベンザルコニウム、塩化ベン
ゼトニウム等が挙げられる。
ン、アミドベタイン等のベタイン系界面活性剤等が挙げ
られる。
ビタンモノオレエート等のソルビタン脂肪酸エステル
類、硬化ヒマシ油誘導体が挙げられる。
チルパラベン等を挙げることができる。
ジアミン四酢酸二ナトリウム、エデト酸、エデト酸ナト
リウム塩等のエデト酸塩を挙げることができる。
ラガカントガム、ガラクタン、グァーガム、カラギーナ
ン、ペクチン、寒天、クインスシード、デキストラン、
プルランカルボキシメチルデンプン、コラーゲン、カゼ
イン、ゼラチンメチルセルロース、メチルヒドロキシプ
ロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム(CMC)、アルギ
ン酸ナトリウムカルボキシビニルポリマー(CARBO
POL等)等のビニル系高分子、等を挙げることができ
る。
トガム、クインスシード、カゼイン、デキストリン、ゼ
ラチン、CMC、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロ
キシプロピルセルロースカルボキシビニルポリマー、グ
ァーガム、キサンタンガム、ベントナイト等を挙げるこ
とができる。
母、シリカ、ゼオライト、ポリエチレン粉末、ポリスチ
レン粉末、セルロース粉末、無機白色顔料、無機赤色系
顔料、酸化チタンコーテッドマイカ、酸化チタンコーテ
ッドタルク、着色酸化チタンコーテッドマイカ等のパー
ル顔料、赤色201号、赤色202号等の有機顔料を挙
げることができる。
酸、サリチル酸フェニル、パラメトキシケイ皮酸イソプ
ロピル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、2,4−ジヒ
ドロキシベンゾフェノン、等を挙げることができる。
ク、カルミン、ベントナイト、カオリン、酸化亜鉛等を
挙げることができる。
プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、1,
3−ブチレングリコール、1,2−ペンタンジオール、
グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン、キシリト
ール、マルチトール、マルトース、ソルビトール、ブド
ウ糖、果糖、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロ
ン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、ピロリドンカルボン
酸、シクロデキストリン等が挙げられる。
ール等のビタミンA類、リボフラビン等のビタミンB2
類、ピリドキシン塩酸塩等のB6類、L−アスコルビン
酸、L−アスコルビン酸リン酸エステル、L−アスコル
ビン酸モノパルミチン酸エステル、L−アスコルビン酸
ジパルミチン酸エステル、L−アスコルビン酸−2−グ
ルコシド等のビタミンC類、パントテン酸カルシウム等
のパントテン酸類、ビタミンD2、コレカルシフェロー
ル等のビタミンD類;α−トコフェロール、酢酸トコフ
ェロール、ニコチン酸DL−α−トコフェロール等のビ
タミンE類等のビタミン類を挙げることができる。プラ
センタエキス、グルタチオン、ユキノシタ抽出物等の美
白剤、ローヤルゼリー、ブナノキエキス等の皮膚賦活
剤、カプサイシン、ジンゲロン、カンタリスチンキ、イ
クタモール、カフェイン、タンニン酸、γ−オリザノー
ル等の血行促進剤、グリチルリチン酸誘導体、グリチル
レチン酸誘導体、アズレン等の消炎剤、アルギニン、セ
リン、ロイシン、トリプトファン等のアミノ酸類、常在
菌コントロール剤のマルトースショ糖縮合物、塩化リゾ
チーム等を挙げることができる。さらに、カミツレエキ
ス、パセリエキス、ブナノキエキス、ワイン酵母エキ
ス、グレープフルーツエキス、スイカズラエキス、コメ
エキス、ブドウエキス、ホップエキス、コメヌカエキ
ス、ビワエキス、オウバクエキス、ヨクイニンエキス、
センブリエキス、メリロートエキス、バーチエキス、カ
ンゾウエキス、シャクヤクエキス、サボンソウエキス、
ヘチマエキス、トウガラシエキス、レモンエキス、ゲン
チアナエキス、シソエキス、アロエエキス、ローズマリ
ーエキス、セージエキス、タイムエキス、茶エキス、海
藻エキス、キューカンバーエキス、チョウジエキス、ニ
ンジンエキス、マロニエエキス、ハマメリスエキス、ク
ワエキス等の各種抽出物を挙げることができる。
乳液、懸濁液等の液剤、ゲル、クリーム等の半固形剤、
粉末、顆粒、カプセル、マイクロカプセル、固形等の固
形剤の形態で適用可能である。従来から公知の方法でこ
れらの形態に調製し、ローション剤、乳剤、ゲル剤、ク
リーム剤、軟膏、硬膏、ハップ剤、エアゾール剤、坐
剤、注射剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、丸剤、シロップ
剤、トローチ剤等の種々の剤型とすることができる。こ
れらを身体に塗布、貼付、噴霧、飲用等により適用する
ことができる。特にこれら剤型の中で、ローション剤、
乳剤、クリーム剤、軟膏剤、硬膏剤、ハップ剤、エアゾ
ール剤等が皮膚外用剤に適している。化粧料としては、
化粧水、乳液、クリーム、パック等の皮膚化粧料、メイ
クアップベースローション、メイクアップクリーム、乳
液状又はクリーム状あるいは軟膏型のファンデーショ
ン、口紅、アイカラー、チークカラーといったメイクア
ップ化粧料、ハンドクリーム、レッグクリーム、ボディ
ローション等の身体用化粧料等、入浴剤、口腔化粧料、
毛髪化粧料とすることができる。
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
るラミニン5産生促進作用の測定 ヒト皮膚三次元モデルは、TESTSKIN(LSE−
high)(東洋紡績)を用い、プロトコールにしたが
って培養した。植物性スクワラン(花王)にウシ胎児血
清(FBS)またはコメヌカ油(築野食品工業)を溶解
し、アッセイリング内の組織上に80μl添加し、24
時間培養した。FBSはラミニン5の産生を促進する公
知の物質であり、ここでは対照として用いた(特開平1
1-343226)。培養液で数回洗浄して薬剤を完全
に除去した後、UVBを0および240mJ/cm2で
照射した。新たに薬剤を添加し、さらに24時間培養し
た。組織を回収し、組織抽出用溶液{50mM Tri
s−HCl(pH7.5)、1% (Octylphe
noxy)polyethoxyethanol(Si
gma−Aldrich)}を加え、ホモジナイズし
た。15,000rpm、30分間遠心して組織片を除
去した後、50mM Tris−HCl(pH7.5)
にて透析した。
nzyme−linked immunosorben
t assay)によりラミニン5産生促進作用を調べ
た。組織抽出液を50mM Tris−HCl(pH
7.5)で適当に希釈し、96ウェルELISA用プレ
ートに4℃で18時間吸着させた。細胞培養上清液を除
去後、ブロッキング溶液{1%の牛血清アルブミン(B
SA)を含むPBS(−)}に浸し、37℃で1時間ブ
ロッキングした。洗浄液{0.05%のポリオキシエチ
レン(20)ソルビタンモノラウレート(和光純薬)を
含むPBS(−)}にて洗浄後、一次抗体溶液{洗浄液
で5mg/mlに調製したラミニンγ2鎖に対するモノ
クローナル抗体(クローンD4B5)(Mizushi
ma,H.,etal.,Horm.Res.,50,7−14,
1998.)}を添加し、37℃で2時間反応させた。
洗浄後、二次抗体{洗浄液で1mg/mlに調製したビ
オチン化抗マウスイムノグロブリンG(Vector
laboratories)}を添加し、室温で1時間
反応させた。洗浄後、酵素溶液{洗浄液で1mg/ml
に調製したアルカリフォスファターゼアビジンD(Ve
ctor laboratories)}を添加し、室
温で1時間反応させた。洗浄後、基質液{1mg/ml
のp−nitrophenyl phosphate
(ICN Biomedicals,Inc.)を含む
0.75M Tris−HCl(pH10.3)}を添
加し、37℃で30分反応後、405nmでの吸光度を
測定した。
%、1.0%および3.0%で処理した時の結果を図1
に示す。ここでFBSを1.0%で処理するとは、FB
Sの原液を植物性スクワランに1.0%で加えて処理す
ることをいう。また、コメヌカ油を0.1%、1.0%
および3.0%で処理するとは、コメヌカ油の原液を植
物性スクワランにそれぞれ0.1%、1.0%および
3.0%で加えて処理することをいう。薬剤を無処理
で、UVBを非照射の場合を100%として評価した。
その結果、コメヌカ油はUVB非照射および照射のいず
れにおいても濃度依存的にラミニン5産生を促進した。
尚、FBSを処理した場合も同様にラミニン5の産生を
促進した。
る光傷害抑制作用の測定 ヒト皮膚三次元モデルは、TESTSKIN(LSE−
high)を用い、プロトコールにしたがって培養し
た。植物性スクワランにFBSまたはコメヌカ油を溶解
し、アッセイリング内の組織上に80μl添加し、24
時間培養した。培養液で数回洗浄して薬剤を完全に除去
した後、UVBを0および240mJ/cm 2で照射し
た。新たに薬剤を添加し、さらに24時間培養後、組織
培養液を回収し、15,000rpm、30分間遠心し
て組織片を除去した。
受けた細胞から遊離される乳酸脱水素酵素(LDH)活
性を測定することにより、細胞毒性を測定した。LDH
活性の測定は、LDH−細胞毒性テストキット(和光純
薬)を用いて行った。PBS(−)を用いて適当に希釈
した組織培養液を96ウェルの反応プレートに分注後、
発色液を処理し、室温で20分間反応させた。反応停止
液を処理後、マイクロプレートリーダーにより560n
mの吸光度を測定し、細胞毒性を評価した。
%、1.0%および3.0%で処理した時の結果を図2
に示す。薬剤を無処理で、UVBを非照射の場合の細胞
毒性率を100%として評価した。UVBを非照射の場
合は、薬剤処理の有無に関わらず、ほぼ同程度の細胞毒
性率であった。一方、UVBを照射した場合は、無処理
に比べて細胞毒性率は約2倍に増加したが、コメヌカ油
を処理した場合は、濃度依存的に細胞毒性率が低下し
た。尚、FBSを処理した場合も同様に細胞毒性率が低
下した。
た。 (1)ステアリルアルコール 6.0% (2)ステアリン酸 2.0% (3)水添ラノリン 4.0% (4)スクワラン 9.0% (5)オクチルドデカノール 10.0% (6)POE(25)セチルアルコールエーテル 3.0% (7)モノステアリン酸グリセリン 2.0% (8)コメヌカ油 1.0% (9)防腐剤 適量 (10)香料 適量 (11)1,3ブチレングリコール 6.0% (12)PEG 1500 4.0% (13)精製水 残余 上記成分(1)〜(10)を80℃に加熱溶解し油相と
する。成分(11)〜(13)を70℃に加熱溶解し水
相とする。油相に水相を徐々に加え乳化し、攪拌しなが
ら40℃まで冷却し、さらに30℃まで攪拌冷却してク
リームを得た。
む本発明組成物は、表皮細胞におけるラミニン5の産生
を促進し、皮膚基底膜の構造維持および機能向上を促
す。したがって、老化した皮膚、特に紫外線により障害
を受けた皮膚に対して、皮膚基底膜の構造変化および機
能低下を予防、防止、改善することにより、しわ、し
み、くすみ、たるみのない若々しい肌の状態を維持する
ことができる。
油を処理した場合のラミニン5発現量を示す図である。
油を処理した場合の光障害抑制を示す図である。
Claims (4)
- 【請求項1】 コメヌカ油を含む皮膚基底膜賦活用組成
物。 - 【請求項2】 コメヌカ油を含むラミニン5の産生促進
用組成物。 - 【請求項3】 光障害抑制用である請求項1または2記
載の組成物。 - 【請求項4】 皮膚外用である請求項1、2または3記
載の組成物。
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