JP2017519693A - 取り扱いによって引き起こされる微生物汚染からのコンタクトレンズの保護 - Google Patents

Abstract

密封コンタクトレンズパッケージは、無菌未着用コンタクトレンズと、イプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを収容する。εＰＬＬは、レンズをそれがそのパッケージから取り出される時に取り扱うことによって引き起こされる微生物汚染からコンタクトレンズを保護する。

Description

本発明の分野は、コンタクトレンズパッケージである。

コンタクトレンズの微生物汚染は、眼球浸潤物、感染、及び菌角膜炎におけるその関係に起因して深刻な公衆衛生上の懸念である。研究は、レンズ取り扱いがレンズの微生物汚染の発生率を大きく増大させることを明らかにしている（例えば、Ｓｚｃｚｏｔｋａ−Ｆｌｙｎｎ他、「眼球コンタクトレンズ」（２０１０）３６（２）：１１６−２９を参照されたい）。毎日使い捨てコンタクトレンズ着用者は、特に、使用後のコンタクトレンズのそれらのオリジナルパッケージ溶液内での規則違反の保管及びその後の再使用に起因する汚染の危険に曝される可能性がある（Ｂｏｏｓｔ他、「Ｏｐｔｏｍ Ｖｉｓ Ｓｃｉ」（２０１１）８８（１２：１４０９−１３）。

ε−ポリリジンは、Ｌ−リジンのイプシロン−アミノ及びカルボキシル基が結合されたＬ−リジンの約２５−３５残基のホモポリマーである。それは、ストレプトミセス属によって生成された天然発生ポリマーである。それは、広域抗菌活性を有し、日本国内の食品防腐剤としてかつ様々な消費者製品内の添加物として広く使用されている。コンタクトレンズ保護溶液中のε−ポリリジンの使用が説明されている（例えば、米国特許第６，１８７，２６４号明細書及び米国特許公開第２００５／００７４４６７号明細書を参照されたい）。ε−ポリ−Ｌ−リジン−グラフト−メタクリルアミドから製造された抗菌ヒドロゲルが報告されている（Ｚｈｏｕ他、「生体材料」３２（２０１１）２７０４−２７１２）。

他の背景文献は、現在特許出願中の米国特許出願第１４／１０９，９７６号明細書、米国特許公開第２０１２／００７４３５２明細書、米国特許公開第２０１１／００７１０９１号明細書、米国特許公開第２００５／００７４４６７号明細書、米国特許公開第２００４／０１３５９６７号明細書、米国特許第４，１６８、１１２号明細書、米国特許第７，２８２，２１４号明細書、米国特許第７，４０２，３１８号明細書、ＥＰ特許第１３２８３０３Ｂ１号明細書、及びＷＣＴ公開第ＷＯ０９４／１３７７４号明細書を含む。

米国特許第６，１８７，２６４号明細書 米国特許公開第２００５／００７４４６７号明細書 米国特許出願第１４／１０９，９７６号明細書 米国特許公開第２０１２／００７４３５２明細書 米国特許公開第２０１１／００７１０９１号明細書 米国特許公開第２００４／０１３５９６７号明細書 米国特許第４，１６８、１１２号明細書 米国特許第７，２８２，２１４号明細書 米国特許第７，４０２，３１８号明細書 ＥＰ特許第１３２８３０３Ｂ１号明細書 ＷＣＴ公開第ＷＯ０９４／１３７７４号明細書 米国特許第７，４２６，９９３号明細書 米国特許第３，９７７，５１７号明細書

Ｓｚｃｚｏｔｋａ−Ｆｌｙｎｎ他、「眼球コンタクトレンズ」（２０１０）３６（２）：１１６−２９ Ｂｏｏｓｔ他、「Ｏｐｔｏｍ Ｖｉｓ Ｓｃｉ」（２０１１）８８（１２：１４０９−１３） Ｚｈｏｕ他、「生体材料」３２（２０１１）２７０４−２７１２

本発明は、無菌未着用コンタクトレンズとイプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを含む密封コンタクトレンズパッケージを提供し、未着用コンタクトレンズは、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示し、この汚染の低減は、コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入された緑膿菌（ＰＡ）が、同一コンタクトレンズパッケージ溶液であるがεＰＬＬのないものにパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定される。本発明の一態様では、この試験において、未着用コンタクトレンズは、試験管内生理活性検定を使用して１０４ＣＦＵ ＰＡによる２４時間培養の後に試験した時に、対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらす。本発明の別の態様では、コンタクトレンズパッケージは、（ａ）無菌未着用コンタクトレンズとイプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを保持する空洞を含むプラスチックベース部材と、（ｂ）プラスチックベース部材との液密シールを形成する再密封可能カバーとを含む。

コンタクトレンズのそれらのオリジナル無菌パッケージからの最初の取り出しは、手洗い直後に取り扱われた時でさえもレンズの有意な微生物汚染をもたらす可能性があることが明らかにされている。コンタクトレンズパッケージ溶液へのイプシロンポリリシン（εΡＬＬ）の添加により、そのようなレンズ取り扱い汚染を低減又は完全排除することができることが見出されている。この保護効果は、εΡＬＬがコンタクトレンズ材料に付着されることを要求しない。従って、本発明は、あらゆるタイプのコンタクトレンズ材料に適用可能であるという点で有利である。本発明は、抗菌剤との着用者の眼の長時間の接触が望まれないか又は不要である状況において特に有利である。本明細書に開示するのは、無菌未着用コンタクトレンズと、レンズに対してパッケージからのその取り出し中に導入される微生物汚染を低減又は完全排除するのに有効な量のイプシロンポリリシン（εΡＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを含む密封コンタクトレンズパッケージである。本明細書に使用する時に、「未着用」は、コンタクトレンズが眼の上で置かれたことがないことを意味し、「密封」は、防水シールを有することを意味する。

本発明により、無菌未着用コンタクトレンズとイプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを含む密封コンタクトレンズパッケージを提供する。未着用コンタクトレンズは、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を有利に示す。例えば、未着用コンタクトレンズは、同一コンタクトレンズパッケージ溶液であるがεＰＬＬのないものにパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較して、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示す。一態様では、本発明は、無菌未着用コンタクトレンズとコンタクトレンズパッケージ溶液とを含む密封コンタクトレンズパッケージを提供し、コンタクトレンズパッケージ溶液は、イプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含み、未着用コンタクトレンズは、コンタクトレンズパッケージから取り出す時に抗菌活性を有する。有利なことに、コンタクトレンズパッケージから取り出した後に、抗菌活性を有する未着用コンタクトレンズは、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示す。汚染の低減及び／又は抗菌活性は、コンタクトレンズパッケージ溶液から取り出した時にレンズに導入される緑膿菌（ＰＡ）のような少なくとも１つの細菌が、同一コンタクトレンズパッケージ溶液であるがεＰＬＬのないものにパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定することができる。本発明において、少なくとも１つの細菌は、緑膿菌及び／又は黄色ブドウ球菌を含み、それから構成され、本質的にそれから構成され、又はそれを有することができ、及び／又は少なくとも１つの細菌は、菌角膜炎に見出される細菌であり、及び／又は少なくとも１つの細菌は、眼の浸潤物及び／又は感染を少なくとも部分的に又は完全に引き起こすものである。抗菌活性は、例えば、未着用コンタクトレンズが、試験管内生理活性検定を使用して１０４ＣＦＵ ＰＡによる２４時間の培養後に試験した時に、対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらす試験において決定することができる。

本発明の開示のコンタクトレンズパッケージに密封されたコンタクトレンズは、限定ではないが、従来のヒドロゲル及びシリコーンヒドロゲルを含むあらゆるコンタクトレンズ材料から製造することができる。本明細書に使用する時に、「従来のヒドロゲル」は、任意的に他のモノマーと組み合わせて、メタクリル酸−２−ヒドロキシエチル（ＨＥＭＡ）又はビニルアルコールのような１又は２以上の親水モノマーの重合で形成された材料を指し、シロキサン（すなわち、少なくとも１つのＳｉＯ基を含む分子）を含有しない。従来のヒドロゲルの例は、エタフィルコンＡ、ネルフィルコンＡ、オキュフィルコンＢ、オキュフィルコンＤ、オマフィルコンＡ、オマフィルコンＤ、及びポリマコンを含む。シリコーンヒドロゲル材料は、典型的には１又は２以上の親水性モノマーを有する少なくとも１つのＳｉＯ基を含む１又は２以上のモノマー又はプレポリマーの重合で形成される。シリコーンヒドロゲルの例は、バラフィルコンＡ、コムフィルコンＡ、エンフィルコンＡ、ソモフィルコンＡ、ナラフィルコンＡ、ナラフィルコンＢ、ロトラフィルコンＡ、ステンフィルコンＡ、及びセノフィルコンＡを含む。特定の例では、密封コンタクトレンズパッケージは、無菌未着用シリコーンヒドロゲルコンタクトレンズを含む。特定の例では、シリコーンヒドロゲルコンタクトレンズは、非イオンであり、すなわち、イオン相互作用を通してεＰＬＬに存在するカチオン性アミン基と結合するアニオン基を含有しない。更に別の特定の例では、シリコーンヒドロゲルコンタクトレンズは、コムフィルコンＡ又はステンフィルコンＡから選択された材料から製造される。別の例では、密封コンタクトレンズパッケージは、オキュフィルコンＢ、オキュフィルコンＤ、又はオマフィルコンＡから選択された材料から製造された未着用従来ヒドロゲルコンタクトレンズを含む。

本発明の開示のコンタクトレンズパッケージに密封されたコンタクトレンズは、あらゆるレンズ着用様式とすることができる。レンズ着用様式は、レンズを取り外しなしで連続して何昼夜着用することができるかを指す。一例では、本発明の開示のコンタクトレンズパッケージに密封されたコンタクトレンズは、毎日使い捨てレンズである。毎日使い捨てレンズは、単回使用、約１２又は１６時間までの連続着用に使用され、単回使用後は廃棄しなければならない。別の例では、本発明の開示のコンタクトレンズパッケージに密封されたコンタクトレンズは、毎日着用レンズである。毎日着用レンズは、典型的には、起きている時間中に約１２−１６時間まで着用され、睡眠前に取り外される。毎日着用レンズは、典型的には、不使用時間中にレンズを洗浄及び消毒するコンタクトレンズ保護溶液を収容するコンタクトレンズケース内に保管される。毎日着用レンズは、典型的には最大３０日着用後に廃棄される。更に別の例では、コンタクトレンズは、長期着用レンズである。長期着用レンズは、典型的には、連続して６、１４、又は３０連続昼夜まで着用される。

本発明の開示のコンタクトレンズパッケージに密封されたパッケージ溶液は、有効量のεＰＬＬを含むあらゆるコンタクトレンズ適合溶液とすることができる。一例では、パッケージ溶液は、緩衝液及び／又は等張化剤、及びεＰＬＬの水溶液を含み、それから構成され、又は本質的にそれから構成される。別の例では、パッケージ溶液は、１又は２以上の追加の抗菌薬剤及び／又は沈痛剤、及び／又は親水性ポリマー、及び／又はレンズがパッケージに粘着するのを防止する界面活性剤及び／又は他の添加物のような追加の薬剤を含有する。パッケージ溶液は、約６．８又は７．０、約７．８又は８．０までの範囲のｐＨを有することができる。一例では、パッケージ溶液は、燐酸塩緩衝液又はホウ酸塩緩衝液を含む。別の例では、パッケージ溶液は、約２００から４００ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲、及び典型的には約２７０ｍＯｓｍ／ｋｇから約３１０ｍＯｓｍ／ｋｇまでの範囲のオスモル濃度を維持する量で塩化ナトリウム又はソルビトールから選択された等張化剤を含む。本発明の開示を通して「複数の例」、「例」、「一例」、又は類似の語句への言及は、特徴の特定の組合せが相互排他的であるか又は文脈が他のことを示さない限り、場合によっては（文脈に依存する）上述又は後述の例（すなわち、特徴）のあらゆる組合せと組み合わせることができるコンタクトレンズパッケージ、未着用コンタクトレンズ、又はパッケージ溶液の１又は複数の特徴を導入することを意図している。

有効量のεＰＬＬは、コンタクトレンズパッケージからの取り出し中にレンズに導入される微生物汚染を低減する量である（例えば、εＰＬＬが存在しないものと比較して）。パッケージからの取り出し中にレンズに導入される微生物汚染を低減するεＰＬＬの機能は、実質的に以下で実施例１又は実施例２に説明するような方法を使用して明らかにすることができる。実施例１は、通常の非病原性皮膚微生物叢によって引き起こされるコンタクトレンズの微生物汚染が、コンタクトレンズパッケージ溶液中のεＰＬＬの介在によって有意に低減することができることを明らかにしている。実施例２は、菌角膜炎に関連する最も一般的な病原体の１つである緑膿菌（ＰＡ）によって引き起こされるコンタクトレンズの微生物汚染も、コンタクトレンズパッケージ溶液中のεＰＬＬの介在によって有意に低減することができることを明らかにしている。特定の例では、実質的に実施例２に説明するようなレンズ取り扱い検定を使用して決定されるように、未着用コンタクトレンズは、εＰＬＬなしであるが他は同一であるコンタクトレンズパッケージ溶液を含む同じパッケージ内の対照コンタクトレンズと比較して、パッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入されるＰＡからの汚染の低減を示す。様々な例では、パッケージ溶液は、少なくとも５ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、２５ｐｐｍ、５０ｐｐｍ、１００ｐｐｍ、１５０ｐｐｍ、２００ｐｐｍ、２５０ｐｐｍ、又は５００ｐｐｍの量でεＰＬＬを含む。特定の例では、パッケージ溶液は、１０−５０ｐｐｍのεＰＬＬ、２５−７５ｐｐｍのεＰＬＬ、５０−１５０ｐｐｍのεＰＬＬ、又は１００−５００ｐｐｍのεＰＬＬを含む。パッケージ溶液中のεＰＬＬの濃度は、未着用コンタクトレンズとのその接触の前に決定される。

εＰＬＬは、典型的には、約２５から約３５リジン（ＬＹＳ）残基（ＣＡＳ番号２８２１１−０４−３）の範囲のホモポリマーとして市販されている。εＰＬＬの天然発生ホモポリマーの全ての部分を使用することができる。これに代えて、εＰＬＬの選択された部分を使用することができ（例えば、３０−３５ＬＹＳ残基のホモポリマー）、残りの部分は、取り出されてこのオプションでは使用されない。天然発生εＰＬＬの代わりとして、パッケージ溶液中に使用されるεＰＬＬは、合成ペプチド方法から取得することができる。

一部の例では、コンタクトレンズパッケージ溶液内に含まれるεＰＬＬの量は、実質的に以下で実施例４に説明するような試験管内生理活性検定を使用して決定されるように、１０⁴ＣＦＵ（コロニー形成単位）ＰＡによる２４時間培養後に試験した時に、対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらす。任意的に、コンタクトレンズパッケージ溶液内に含まれるεＰＬＬの量は、０．１０から１．９０のような０．０５から１．９５の対照コンタクトレンズと比較してログキルのＰＡを有する本発明のレンズをもたらす。コンタクトレンズパッケージ溶液中に含まれるεＰＬＬの量は、例えば、０．１から１．０のような０．０５から１．５の対照コンタクトレンズと比較してログキルのＰＡをもたらす場合がある。そのような例では、コンタクトレンズパッケージは、レンズの最初の取り扱いからそのオリジナルパッケージからのその取り出し中に導入される微生物汚染に対して有効であり続け、従って、毎日使い捨てコンタクトレンズに特に適している。

以下の実施例２において、未着用コンタクトレンズがコンタクトレンズパッケージから取り出された状態で、オリジナルブリスターホイルによって覆われた時の残りのパッケージ溶液は、１６時間までにわたって周囲温度に放置された時に微生物汚染に抵抗することができることが明らかにされる。すなわち、本明細書に説明するコンタクトレンズパッケージは、着用したレンズを２日目の着用のためにそのオリジナルパッケージ及び残りのパッケージ溶液中に一晩中保管する決まりを守らない毎日着用レンズ着用者から生じるかもしれない微生物汚染に対する保護を提供することができる。すなわち、一例では、コンタクトレンズパッケージは、コンタクトレンズとパッケージ溶液とを保持するように構成された空洞と、空洞の周りに外向きに延びるフランジ領域とを含むプラスチックベース部材を含む。取外し可能ホイルが、密封コンタクトレンズパッケージを与えるためにフランジ領域に取り付けられる。一般的に「ブリスターパック」と呼ばれるそのようなコンタクトレンズパッケージは、当業技術で公知である（例えば、米国特許第７，４２６，９９３号明細書を参照されたい）。他の例では、コンタクトレンズパッケージは、少なくとも２日にわたる毎日着用に使用されるコンタクトレンズを含み、パッケージは、レンズの次の交換のためのその最初の開封の後でそれが着用された後の一晩の保管のための再密封を可能にするように構成される。例えば、コンタクトレンズパッケージは、コンタクトレンズとパッケージ溶液とを保持するように構成された空洞を含むプラスチックベース部材と再密封可能カバーとを含むことができる。本明細書に使用する時に「再密封可能カバー」は、コンタクトレンズパッケージが開封された後でベース部材との液密又は流出防止シールを形成するように構成されたカバーである。例えば、プラスチックベース部材は、再密封可能カバーとして機能するキャップ上の適合する１組のネジとの係合のための複数のネジを含むことができる。そのような構成は、コンタクトレンズ保護ケースに一般的に使用されている（例えば、米国特許第３，９７７，５１７号明細書を参照されたい）。すなわち、本明細書に開示するコンタクトレンズパッケージの利点は、それが二重の目的に、すなわち、無菌未着用コンタクトレンズのためのコンタクトレンズパッケージとして、及び着用されたレンズのためのその後のコンタクトレンズ担持ケースとしての両方に機能することができるということである。

従来の製造方法は、上述の例のうちのいずれの密封コンタクトレンズパッケージを製造するのにも使用することができることが認められるであろう。すなわち、本発明の開示の一態様は、未着用コンタクトレンズとεＰＬＬを含むコンタクトレンズパッケージ溶液とをレセプタクルに入れて、カバーをレセプタクル上に置いて、レセプタクル上のカバーを密封する段階を含むコンタクトレンズパッケージを製造する方法である。一般的に、レセプタクルは、単一コンタクトレンズと、そのコンタクトレンズを完全に覆うのに十分な量、典型的に約０．５−１．５ｍｌのパッケージ溶液とを受け入れるように構成される。レセプタクルは、ガラス又はプラスチックのようなあらゆる適切な材料から製造することができる。一例では、レセプタクルは、コンタクトレンズとパッケージ溶液とを保持するように構成された空洞と、空洞の周りに外向きに延びるフランジ領域とを含むプラスチックベース部材を含み、カバーは、密封コンタクトレンズパッケージを与えるためにフランジ領域に取り付けられた取外し可能ホイルを含む。取外し可能ホイルは、ヒートシール又はグルーのようなあらゆる従来の手段によって密封することができる。別の例では、レセプタクルは、複数のネジを含むプラスチックベース部材の形態であり、カバーは、ベース部材のネジとの係合のための適合する１組のネジを含んでそれによって再密封可能カバーを与えるプラスチックキャップ部材を含む。他のタイプのパッケージ化も、再密封可能パッケージを与えるために使用することができることが認められるであろう。例えば、コンタクトレンズパッケージは、レセプタクルの適合する特徴部と係合して締り嵌めを形成する特徴部を含むプラスチックカバーを含むことができる。密封コンタクトレンズパッケージを製造する方法は、密封コンタクトレンズパッケージを加圧滅菌処理することによって未着用コンタクトレンズを殺菌する段階を更に含むことができる。

２０１３年１２月１８日出願の「抗菌眼科デバイス」という名称の米国特許出願第１４／１０９，９７６号明細書に説明された１又は複数のコンタクトレンズ、溶液の成分、調製の詳細、及び様々な他の詳細の全ては、引用によってその全体が本明細書に組み込まれて本出願の一部を形成する。

実施例
以下の実施例は、それによって限定されないことを理解すべきである本発明のある一定の態様及び利点を示すものである。

実施例１：洗浄した手による取り扱い後の市販コンタクトレンズの汚染
オリジナルブリスターパッケージ内の市販バラフィルコンＡコンタクトレンズが、このレンズ取り扱い研究に使用された。５人の個人が、石鹸と水で手を洗浄し、紙タオルを使用して手を乾かした。各ブリスターのホイルカバーは、調査者によって手袋をした手で無菌開封されている。各個人は、蛇口を締めるために使用した同じ手を使用してレンズを取り出し、ほぼ５秒間やさしくこすった。各擦られたレンズは、その後に、ｌｍＬのＰＢＳ−Ｔを有する個々の２ｍＬの無菌マイクロ遠心分離機（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ（登録商標））チューブに入れられ、キャップで覆われた。本明細書に使用する時に、ＰＢＳは、０．７８重量％のＮａＣｌ、０．０５重量％の塩基性リン酸ナトリウムのリン酸緩衝食塩水、及びｐＨ７．５の０．３６重量％の二塩基性リン酸ナトリウムを指す。ＰＢＳ−Ｔは、０．０５％のポリソルベート８０を有するＰＢＳを指す。

扱われたレンズから細菌を抽出するために、チューブは、１０秒ボルテックスをその間に入れた各３０秒の３サイクルにわたって超音波処理された。最終超音波処理後に、チューブは、マルチチューブボルテクサを使用して１０００ｒｐｍで１０分間ボルテックスされた。各チューブからの抽出液の容積全体は、血液寒天板上にメッキされ、生化学フード内で自然乾燥させられ、３７℃で４８−７２時間にわたって培養された。細菌は、ＣＦＵ／レンズとして計数及び報告された。異なる表現型を有する各細菌は、Ｂｉｏｔｙｐｅｒを使用して識別された。

一般的な皮膚細菌（表皮ブドウ球菌及びバルネイ菌）からの汚染の検出可能なレベルが、５つのバラフィルコンＡコンタクトレンズの全部で見出された。汚染の範囲は、１１５−６５００ＣＦＵ／レンズであった。無菌のレンズはなかった。識別された細菌は、菌角膜炎では一般的に見出されないものであるが、それらは、免疫無防備の患者に疾患を引き起こす可能性がある。

コンタクトレンズパッケージ溶液内のεＰＬＬが、ブリスターパッケージからのレンズ取り出し中に堆積した細菌に対してすぐに保護するか否かを決定するために、上述のレンズ取り扱い研究が、オキュフィルコンＤ、コムフィルコンＡ、及びオマフィルコンＡのコンタクトレンズを使用して繰り返され、これらのコンタクトレンズは、ＰＢＳ又は５００ｐｐｍのεＰＬＬを有するＰＢＳのいずれかのパッケージ溶液を収容するコンタクトレンズブリスターパッケージに個々にパッケージ化され、ホイルカバーで密封され、かつ加圧滅菌処理されたものであった。全ての３つのレンズは、εＰＬＬがパッケージ溶液に存在した時に以下の平均ログキル、すなわち、オキュフィルコンＤ−２．４、コムフィルコンＡ−１．４、及びオマフィルコンＡ−２．２でバイオバーデンの有意な低減を明らかにした。

最後に、上述のレンズ取り扱い研究を繰り返して、５００ｐｐｍのεＰＬＬの有無に関わらずＰＢＳパッケージ溶液を収容する密封加圧滅菌処理パッケージから取り出されたオキュフィルコンＤコンタクトレンズの汚染レベルを比較した。同じく、ＰＢＳパッケージ溶液を収容する密封加圧滅菌処理パッケージから取り出されたオキュフィルコンＤコンタクトレンズの微生物汚染のレベルを決定した。レンズは、無菌鉗子を使用してパッケージから無菌状態で取り出され、１ｍｌのＯｐｔｉｆｒｅｅ（登録商標）又はＡＱｕｉｆｙ（登録商標）銘柄のコンタクトレンズ溶液を収容する２４ウェルプレートのウェルに入れられた。ＣｌｅａｒＣａｒｅ（登録商標）銘柄コンタクトレンズ溶液に露出されたレンズは、製造業者供給のレンズホルダに入れられた。一晩の浸漬後に、レンズ（各レンズ溶液に５個）は、上述の手洗い、取り扱いプロトコルに従って保護溶液から取り出され、上述のように抽出された。予想通り、抗菌薬剤を含有していないＣｌｅａｒＣａｒｅ（登録商標）コンタクトレンズ溶液は、取り扱い汚染に対する保護を行わなかった。しかし，驚くべきことに、両方とも活性抗菌薬剤を含有するＯｐｔｉｆｒｅｅ（登録商標）銘柄コンタクトレンズ保護溶液及びＡＱｕｉｆｙ（登録商標）銘柄コンタクトレンズ保護溶液のいずれも、バイオバーデンに及ぼす有意な効果を有していなかった。ブリスター内のεＰＬＬを含有する溶液だけにより、細菌計数（ｐ＝０．００００２）の統計的に有意な低減があった。結果を表１に示している。

（表１）

これらの実験は、取り扱いが、従来のヒドロゲル及びシリコーンヒドロゲルコンタクトレンズの有意な微生物汚染源であることを示している。εＰＬＬは、レンズ取り扱いによってレンズ上に堆積した環境派生細菌に対して保護する。パッケージ溶液からεＰＬＬのキャリー・オーバーは、取り扱いによってもたらされるバイオバーデンを有意に低減した。

実施例２：レンズ取り扱い検定−菌角膜炎に一般的な病原体からのコンタクトレンズの汚染
εＰＬＬ（１０、２５、１００、又は５００ｐｐｍ）の有無に関わらずＰＢＳのパッケージ溶液を収容する加圧滅菌処理されたブリスターパッケージから取り出されるコムフィルコンＡレンズの表面上の細菌付着は、Ｎｏｍａｃｈｉ他、「眼とコンタクトレンズ」（２０１３）３９、２３４−２３８によって説明された方法の修正を使用して評価された。簡単には、コムフィルコンＡコンタクトレンズの表面上の細菌付着は、実質的に実施例３に説明するように調製された緑膿菌（ＰＡ）及び黄色ブドウ球菌（ＳＡ）の原液を使用して評価された。無菌の外科プラスチック手袋が、無菌状態で両手にはめられた。コムフィルコンのパッケージが開封された後に、手袋をした手の親指及び人差し指が菌液（ＰＢＳ中でほぼ１０³ＣＦＵ／ｍｌ）に浸り、パッケージからレンズを取り出すのに使用された。各タイプのパッケージ溶液の４つのレンズが試験された。各レンズは、１ｍＬのＰＢＳ−Ｔを有するマイクロ遠心分離機チューブに入れられ、１．５分にわたって超音波処理され、１０００ｒｐｍで１０分間にわたってボルテックスされた。抽出液の容積全体は、トリプシン性大豆寒天（ＴＳＡ）を有する培養皿上にメッキされ、培養器内で２日にわたって３７℃で成長させた。

下表２は、異なるパッケージ溶液から取り出されたコンタクトレンズ上の平均ＣＦＵ／レンズ（ｎ＝４）を示している。
（表２）

ＰＡで汚染された指及び親指によるコンタクトレンズの取り出し後に、上述のように、ブリスターパッケージ及び残りのパッケージ溶液は、オリジナルブリスターホイルで覆われた状態で周囲温度に放置された。１６時間後に、残留パッケージ溶液の容積全体（〜１ｍＬ）は、ＴＳＡを有する培養皿上にメッキされ、成長するように２日にわたって３７℃で培養器に入れたまま放置された。追加されたいずれのｅＰＬもないパッケージ溶液は、平均３３１ＣＦＵ／レンズを有した。ｅＰＬ含有パッケージ溶液のいずれも微生物成長を示さず、すなわち、全てが０ＣＦＵ／レンズ）を有していた。

実施例３：細菌懸濁液の調製
培養物は、回転攪拌器上で３７℃で一晩５０ｍＬのトリプティケースソイブロス（ＴＳＢ）中で下表３に示す細菌種の各々の単一コロニーを成長させることで調製された。１ｍＬの各培養物は遠心分離され、細菌ペレットが、表３に示す１．０ｍＬの希釈剤中に再度懸濁された。各細菌種に関して、ほぼ１０⁸ＣＦＵ／ｍＬの懸濁液が、細菌懸濁液を希釈して表３に示す光学密度を達成することによって調製された。各懸濁液は、実施例２に説明する取り扱い検定又は実施例４に説明する試験管内生理活性検定における使用のために更に希釈された。
（表３）

実施例４：試験管内生理活性検定
コンタクトレンズは、パッケージから取り出され、残留パッケージ溶液を除去するために数秒間（例えば、４秒間）２．５ｍｌの無菌ＰＢＳですすがれた。すすがれたレンズは、その後に、１．０ｍＬの１０４ＣＦＵ ＰＡを含む２４ウェルプレートの個々のウェルに移動される。プレートは、２４時間穏やかな振動を用いて３７℃で培養された。レンズは、ウェルから取り出され、２．５ｍＬの無菌ＰＢＳを含有する１２ウェルプレートのウェルに移動された。プレートは、約３０秒間穏やかに回転された。この段階は、各レンズに対して一度繰り返された。

各洗浄されたレンズは、ブロスを中和する１ｍＬのＤｅｙ−Ｅｎｇｌｅｙ（ＤＥ）を含有するマイクロ遠心分離機チューブに入れられ、付着した細菌は、約２分間の超音波処理及び約１０分間のボルテックスの組合せによって除去された。連続希釈が、ブロスを中和するＤＥを使用して各回収細胞懸濁液に対して行われ、適切な希釈物がＴＳＡ上にメッキされた。プレートは、３７℃で一晩培養され、ＣＦＵが計数された。

各プレートに対するＣＦＵは、希釈係数（ＤＦ）、並びにメッキ希釈係数（ＰＤＦ）によって乗算される。与えられた試料に対して回収された全ＣＦＵは、その後にｌｏｇ１０に変換される。εＰＬＬを含むパッケージ溶液中にパッケージ化されたコンタクトレンズ（すなわち、「試験レンズ」）のログキルを計算するために、試験レンズのＣＦＵ／レンズのｌｏｇは、対照レンズのｌｏｇから差し引かれ、対照レンズは、パッケージ溶液がεＰＬＬを欠くこと以外は、試験レンズと同一であり、同一パッケージ及びコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化されたものである。例えば、抗菌レンズの平均ｌｏｇ１０値が１．０５であり、活性抗菌剤を欠く他の点では同一の対照レンズの平均ｌｏｇ１０が５．５２である場合に、ログキルは、５．５２−１．０５＝４．４７である。

本明細書における開示は、ある一定の例示的な実施例を参照したが、これらの実施例は、例示であり、制限を目的としないことは理解されるものとする。例示的な実施例を説明したが、上述の詳細説明の意図は、追加の本発明の開示によって定義されるような本発明の精神及び範囲に該当する場合がある実施例の全ての修正物、代替物、及び均等物を網羅するように解釈されることである。

いくつかの文献及び特許を本明細書で先に引用した。引用した文献及び特許の各々は、これによりその全体が引用によって組み込まれる。

本発明は、あらゆる順番及び／又はあらゆる組合せで以下の態様／実施形態／特徴を含む。
１．無菌未着用コンタクトレンズと、イプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを含み、未着用コンタクトレンズが、実質的に同一であるがεＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較して、コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入される緑膿菌（ＰＡ）からの汚染の低減を示す密封コンタクトレンズパッケージ。
２．無菌未着用コンタクトレンズと、イプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを含み、未着用コンタクトレンズが、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示し、この汚染の低減が、コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入される緑膿菌（ＰＡ）が、同一であるがεＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定される密封コンタクトレンズパッケージ。
３．試験において、未着用コンタクトレンズは、試験管内生理活性検定を使用して１０⁴ＣＦＵ ＰＡによる２４時間の培養後に試験した時に対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらすいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
４．試験において、未着用コンタクトレンズは、試験管内生理活性検定を使用して１０⁴ＣＦＵ ＰＡで２４時間培養後に試験された時に、対照コンタクトレンズと比較して１ログキル未満（但し、０ログキルよりも多い）のＰＡをもたらすいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
５．コンタクトレンズは、シリコーンヒドロゲルコンタクトレンズであるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
６．コンタクトレンズは、非イオンコンタクトレンズであるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
７．コンタクトレンズは、イオンコンタクトレンズであるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
８．コンタクトレンズは、毎日使い捨てコンタクトレンズであるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
９．コンタクトレンズは、毎日着用コンタクトレンズであるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１０．パッケージ溶液は、５ｐｐｍと５００ｐｐｍの間のεＰＬＬを含むいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１１．パッケージ溶液は、５ｐｐｍと５０ｐｐｍの間のεＰＬＬを含むいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１２．コンタクトレンズパッケージは、（ａ）ｉ）未着用コンタクトレンズとコンタクトレンズパッケージ溶液とを保持する空洞及びｉｉ）空洞の周りに外向きに延びるフランジ領域を含むプラスチックベース部材と、（ｂ）フランジ領域に取り付けられた取外し可能ホイルとを更に含むいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１３．コンタクトレンズパッケージは、（ａ）未着用コンタクトレンズとコンタクトレンズパッケージ溶液とを保持する空洞を含むプラスチックベース部材と、（ｂ）プラスチックベース部材との液密シールを形成する再密封可能カバーとを更に含むいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１４．プラスチックベース部材は、再密封可能カバー上の適合する１組のネジとの係合のための複数のネジを含むいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１５．少なくとも１つの細菌は、緑膿菌であるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１６．少なくとも１つの細菌は、黄色ブドウ球菌であるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１７．少なくとも１つの細菌は、菌角膜炎に見出される細菌であるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様のパッケージ。
１８．未着用コンタクトレンズとεＰＬＬを含むコンタクトレンズパッケージ溶液とをコンタクトレンズを受け入れるように構成されたレセプタクルに入れる段階と、カバーを用いてレセプタクルを密封して密封コンタクトレンズパッケージを与える段階とを含み、未着用コンタクトレンズが、実質的に同一であるがεＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較して、コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入された緑膿菌（ＰＡ）からの汚染の低減を示し、未着用コンタクトレンズが、試験管内生理活性検定を使用して１０⁴ＣＦＵ ＰＡによる２４時間の培養後に試験した時に、対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらす密封コンタクトレンズパッケージを製造する方法。
１９．未着用コンタクトレンズと、εＰＬＬを含むコンタクトレンズパッケージ溶液とをコンタクトレンズを受け入れるように構成されたレセプタクルに入れる段階と、カバーを用いてレセプタクルを密封して密封コンタクトレンズパッケージを与える段階とを含み、未着用コンタクトレンズが、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示し、この汚染の低減が、コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入される緑膿菌（ＰＡ）が、同一であるがεＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定され、未着用コンタクトレンズが、試験管内生理活性検定を使用して１０⁴ＣＦＵ ＰＡによる２４時間の培養後に試験した時に、対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらす密封コンタクトレンズパッケージを製造する方法。
２０．コンタクトレンズパッケージは、上述（例えば、１から１７）のいずれか１つの実施形態であるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様の方法。
２１．密封コンタクトレンズパッケージを加圧滅菌処理することによって未着用コンタクトレンズを殺菌する段階を更に含むいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様の方法。
２２．未着用コンタクトレンズと、εＰＬＬを含むコンタクトレンズパッケージ溶液とをコンタクトレンズを受け入れるように構成されたレセプタクルに入れる段階と、カバーを用いてレセプタクルを密封して密封コンタクトレンズパッケージを与える段階とを含み、未着用コンタクトレンズが、実質的に同一であるがεＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液でパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較して、コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入された緑膿菌（ＰＡ）からの汚染の低減を示し、コンタクトレンズパッケージが、再密封可能カバーを含む密封コンタクトレンズパッケージを製造する方法。
２３．未着用コンタクトレンズと、εＰＬＬを含むコンタクトレンズパッケージ溶液とをコンタクトレンズを受け入れるように構成されたレセプタクルに入れる段階と、カバーを用いてレセプタクルを密封して密封コンタクトレンズパッケージを与える段階とを含み、未着用コンタクトレンズが、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示し、この汚染の低減が、コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中にレンズに導入される緑膿菌（ＰＡ）が、同一であるがεＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定され、コンタクトレンズパッケージが、再密封可能カバーを含む密封コンタクトレンズパッケージを製造する方法。
２４．コンタクトレンズパッケージは、１から１７のいずれか１つであるいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様の方法。
２５．密封コンタクトレンズパッケージを加圧滅菌処理することによって未着用コンタクトレンズを殺菌する段階を更に含むいずれかの前出又は以下の実施形態／特徴／態様の方法。

本発明は、文章及び／又は段落に示すように上述の及び／又は以下のこれらの様々な特徴又は実施形態のあらゆる組合せを含むことができる。本明細書に開示する特徴のいずれの組合せも、本発明の一部と見なされ、組合せ可能な特徴に関していずれの制限も意図されていない。

本出願人は、本発明の開示における全ての引用参考文献の内容全体を特に組み込むものである。更に、量、濃度、又は他の値、又はパラメータが、範囲、好ましい範囲、又は好ましい上限値及び好ましい下限値のリストとして与えられる時に、これは、範囲が別に開示されるか否かに関わらず、あらゆる対のあらゆる上限範囲又は好ましい値、及びあらゆる下限範囲又は好ましい値で形成された全ての範囲を特に開示するように理解されるものとする。数値の範囲が本明細書に説明された場合に、特に断らない限り、その範囲は、その終点及び範囲の全ての整数及び分数を含むことが意図されている。範囲を定義する時に、本発明の範囲が、説明される特定の値に限定されることは意図されていない。

本発明の他の実施形態は、本明細書に開示する本発明のこの仕様及び実施を考慮することから当業者には明らかであろう。本明細書及び実施例は、単に例示的であると見なされ、本発明の真の範囲及び精神は、以下の特許請求の範囲及びその均等物によって示されるように意図されている。

Claims (20)

1. 密封コンタクトレンズパッケージであって、
   無菌未着用コンタクトレンズと、
   イプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液と、
   を含み、
   前記未着用コンタクトレンズは、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示し、
   前記汚染の低減は、前記コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中に前記レンズに導入される緑膿菌（ＰＡ）が、同一であるが前記εＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定され、
   前記未着用コンタクトレンズは、試験管内生理活性検定を使用して１０⁴ＣＦＵ ＰＡによる２４時間培養の後に試験した時に、前記対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらす、
   ことを特徴とするパッケージ。
2. 前記コンタクトレンズは、シリコーンヒドロゲルコンタクトレンズであることを特徴とする請求項１に記載のパッケージ。
3. 前記コンタクトレンズは、非イオンコンタクトレンズであることを特徴とする請求項１又は請求項２に記載のパッケージ。
4. 前記コンタクトレンズは、毎日使い捨てコンタクトレンズであることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載のパッケージ。
5. 空洞及び該空洞の周りに外向きに延びるフランジ領域を含むプラスチックベース部材と、該フランジ領域に取り付けられた取外し可能ホイルとを含むことを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載のパッケージ。
6. 前記パッケージ溶液は、５ｐｐｍと５００ｐｐｍの間のεＰＬＬを含むことを特徴とする請求項１から請求項５のいずれか１項に記載のパッケージ。
7. 密封コンタクトレンズパッケージであって、
   ａ）無菌未着用コンタクトレンズとイプシロンポリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とを保持する空洞を含むプラスチックベース部材と、
   ｂ）前記プラスチックベース部材との液密シールを形成する再密封可能カバーと、
   を含み、
   前記未着用コンタクトレンズは、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示し、
   前記汚染の低減は、前記コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中に前記レンズに導入された緑膿菌（ＰＡ）が、同一であるが前記εＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定される、
   ことを特徴とするパッケージ。
8. 前記コンタクトレンズは、シリコーンヒドロゲルコンタクトレンズであることを特徴とする請求項７に記載のパッケージ。
9. 前記コンタクトレンズは、イオンコンタクトレンズであることを特徴とする請求項７又は請求項８に記載のパッケージ。
10. 前記コンタクトレンズは、毎日着用コンタクトレンズであることを特徴とする請求項７から請求項９のいずれか１項に記載のパッケージ。
11. 前記プラスチックベース部材は、前記再密封可能カバー上の適合する１組のネジとの係合のための複数のネジを含むことを特徴とする請求項７から請求項１０のいずれか１項に記載のパッケージ。
12. 前記パッケージ溶液は、５ｐｐｍと５００ｐｐｍの間のεＰＬＬを含むことを特徴とする請求項７から請求項１１のいずれか１項に記載のパッケージ。
13. 前記少なくとも１つの細菌は、緑膿菌であることを特徴とする請求項１から請求項１２のいずれか１項に記載のパッケージ。
14. 前記少なくとも１つの細菌は、黄色ブドウ球菌であることを特徴とする請求項１から請求項１３のいずれか１項に記載のパッケージ。
15. 前記少なくとも１つの細菌は、菌角膜炎に見出される細菌であることを特徴とする請求項１から請求項１４のいずれか１項に記載のパッケージ。
16. 密封コンタクトレンズパッケージを製造する方法であって、
    未着用コンタクトレンズとεＰＬＬを含むコンタクトレンズパッケージ溶液とをコンタクトレンズを受け入れるように構成されたレセプタクルに入れる段階と、
    カバーを用いて前記レセプタクルを密封して密封コンタクトレンズパッケージを与える段階と、
    を含み、
    前記未着用コンタクトレンズは、少なくとも１つの細菌からの汚染の低減を示し、
    前記汚染の低減は、前記コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中に前記レンズに導入された緑膿菌（ＰＡ）が、同一であるが前記εＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較される試験によって決定され、
    前記コンタクトレンズパッケージは、再密封可能カバーを含む、
    ことを特徴とする方法。
17. 前記密封コンタクトレンズパッケージを加圧滅菌処理することによって前記未着用コンタクトレンズを殺菌する段階を更に含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
18. 前記未着用コンタクトレンズは、試験管内生理活性検定を使用して１０⁴ＣＦＵ ＰＡによる２４時間培養の後に試験した時に、前記対照コンタクトレンズと比較して２ログキル未満のＰＡをもたらすことを特徴とする請求項１６又は請求項１７に記載の方法。
19. 密封コンタクトレンズパッケージを製造する方法であって、
    未着用コンタクトレンズとイプシロンボリリシン（εＰＬＬ）を含むコンタクトレンズパッケージ溶液とをコンタクトレンズを受け入れるように構成されたレセプタクルに入れる段階と、
    前記レセプタクルをカバーを用いて密封して密封コンタクトレンズパッケージを与える段階と、
    を含み、
    前記未着用コンタクトレンズは、試験管内生理活性検定を使用して１０⁴ＣＦＵ ＰＡによる２４時間培養の後に試験された時に、同一であるが前記εＰＬＬなしのコンタクトレンズパッケージ溶液にパッケージ化された対照コンタクトレンズと比較して２ログキルよりも多くない緑膿菌（ＰＡ）をもたらし、
    前記未着用コンタクトレンズは、前記対照コンタクトレンズと比較して前記コンタクトレンズパッケージ溶液からの取り出し中に該レンズに導入されるＰＡからの汚染の低減を示す、
    ことを特徴とする方法。
20. 前記密封コンタクトレンズパッケージを加圧滅菌処理することによって前記未着用コンタクトレンズを殺菌する段階を更に含むことを特徴とする請求項１９に記載の方法。