JP2017529097A5

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Publication number: JP2017529097A5
Application number: JP2017525495A
Authority: JP
Filing date: 2015-07-22
Publication date: 2018-08-30
Anticipated expiration: 2035-07-22

Claims

細胞膜を透過して、そして細胞の細胞質に位置させる抗体を用いることによって、完全型免疫グロブリンタイプの抗体を細胞の細胞質に位置させる方法であって、前記抗体は、細胞を透過し、そして細胞質に位置する軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記軽鎖可変領域（ＶＬ）が、
配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；
配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；及び
配列番号６及び１２からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
を含む、前記方法。
前記軽鎖可変領域（ＶＬ）が、エンドサイトーシス及びその後にエンドソームを脱出することにより細胞質に位置させる能力を有する、請求項１に記載の方法。
前記軽鎖可変領域（ＶＬ）は、軽鎖可変領域のＮ末端から２番目および４番目のアミノ酸がそれぞれロイシン（Ｌ）およびメチオニン（Ｍ）で置き換えられた請求項１に記載の方法（但し、前記アミノ酸位置は、カバット（Ｋａｂａｔ）の番号付けシステムに従う）。
前記軽鎖可変領域は、軽鎖可変領域のＮ末端から９、１０、１３、１５、１７、１９、２１、２２、４２、４５、５８、６０、７９、および８５番目のアミノ酸がそれぞれセリン（Ｓ）、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、アスパラギン酸（Ｄ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、トレオニン（Ｔ）、リジン（Ｋ）、リジン（Ｋ）、バリン（Ｖ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）およびトレオニン（Ｔ）で置き換えられた請求項１に記載の方法（但し、前記アミノ酸位置は、カバット（Ｋａｂａｔ）の番号付けシステムに従う）。
前記軽鎖可変領域は、軽鎖可変領域のＮ末端から８９番目および９１番目のアミノ酸がそれぞれグルタミン（Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ，Ｑ）およびチロシン（Ｔｙｒｏｓｉｎｅ，Ｙ）で置き換えられた請求項１に記載の方法（但し、前記アミノ酸位置は、カバット（Ｋａｂａｔ）の番号付けシステムに従う）。
前記軽鎖可変領域（ＶＬ）は、配列番号１、２、および３からなる群から選択されたアミノ酸配列を含む請求項１に記載の方法。
細胞膜を透過して、そして細胞の細胞質に位置する完全型免疫グロブリンタイプの抗体を誘導する軽鎖可変領域（ＶＬ）であって、前記軽鎖可変領域（ＶＬ）が、
配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；
配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；及び
配列番号６及び１２からなる群から選択されたアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
を含む、前記軽鎖可変領域。
請求項７に記載の前記軽鎖可変領域を含む抗体。
前記抗体が、重鎖可変領域（ＶＨ）によって、細胞の細胞質中のＧＴＰ結合活性化ＲＡＳ（ＲＡＳ−ＧＴＰ）に特異的に結合し、
前記重鎖可変領域は、
配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；
配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；及び
配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
を含む請求項８に記載の抗体。
前記重鎖可変領域（ＶＨ）は、配列番号１３のアミノ酸配列を含む請求項９に記載の抗体。
疾患を予防又は治療する方法に用いる組成物であって、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の抗体を含み、好ましくは前記疾患が癌又は血管新生による疾患である、前記組成物。
前記抗体が、ペプチド、タンパク質、小分子薬物、ナノ粒子、及びリポソームからなる群から選択される生体活性分子と融合している、請求項１１に記載の組成物。
癌のインビトロ診断における組成物の使用であって、前記組成物が請求項８〜１０のいずれか一項に記載の抗体、又は抗体に融合している生体活性分子を有する請求項８〜１０のいずれか一項に記載の抗体を含み、前記生体活性分子がペプチド、タンパク質、小分子薬物、ナノ粒子、及びリポソームからなる群から選択される、前記使用。
請求項７に記載の軽鎖可変領域、または請求項８〜１０のいずれか一項に記載の抗体をコードするポリヌクレオチド。