JP2020122013A5

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Publication number: JP2020122013A5
Application number: JP2020082524A
Authority: JP
Filing date: 2020-05-08
Publication date: 2020-09-24

Claims

ヒトＢ細胞成熟抗原（「ＢＣＭＡ」）の細胞外ドメイン、およびヒトＣＤ３e（「ＣＤ３」）に特異的に結合する二特異性抗体であって、
ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合する第１のＦａｂであって、前記第１のＦａｂが第１の軽鎖および第１の重鎖を含み、前記第１の軽鎖が可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＬを含み、前記第１の重鎖が可変ドメインＶＨよび定常ドメインＣＨ１を含む、第１のＦａｂと；
ｂ）ＣＤ３に特異的に結合する第２のＦａｂであって、前記第２のＦａｂが第２の軽鎖および第２の重鎖を含み、前記第２の軽鎖が可変ドメインＶＬおよび定常ドメインＣＬを含み、前記第２の重鎖が可変ドメインＶＨおよび定常ドメインＣＨ１を含み、前記第２の軽鎖内の前記可変ドメインＶＬおよび前記第２の重鎖内の前記可変ドメインＶＨが、互いに置きかえられている、第２のＦａｂ
とを含み；
前記第２の軽鎖の定常ドメインＣＬ内で、１２４位におけるアミノ酸（ＫａｂａｔによるＥＵインデックスに従う番号付け）が、リシン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、またはヒスチジン（Ｈ）により独立に置換されており、前記第２の重鎖の定常ドメインＣＨ１内で、１４７位におけるアミノ酸および２１３位におけるアミノ酸（ＫａｂａｔによるＥＵインデックスに従う番号付け）が、グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）により独立に置換されている、
二特異性抗体。
前記二特異性抗体がさらに第３のＦａｂ断片を含み、前記第３のＦａｂが前記第１のＦａｂと同一である、請求項１に記載の二特異性抗体。
前記定常ドメインＣＬ内の１２４位におけるアミノ酸の置きかえに加えて、１２３位におけるアミノ酸（ＫａｂａｔによるＥＵインデックスに従う番号付け）が、リシン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、またはヒスチジン（Ｈ）により独立に置換されている、請求項１または２に記載の二特異性抗体。
前記１２４位におけるアミノ酸がＫであり、前記１４７位におけるアミノ酸がＥであり、前記２１３位におけるアミノ酸がＥであり、前記１２３位におけるアミノ酸がＲである、請求項３に記載の二特異性抗体。
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する前記第１のＦａｂが、
ａ）配列番号２１、配列番号２４、および配列番号２７のアミノ酸配列を、それぞれ重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として、配列番号３０、配列番号３３、および配列番号３６のアミノ酸配列を、それぞれ軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として含むか；
ｂ）配列番号２２、配列番号２５、および配列番号２８のアミノ酸配列を、それぞれ重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として、配列番号３１、配列番号３４、および配列番号３７のアミノ酸配列を、それぞれ軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として含むか；または
ｃ）配列番号２３、配列番号２６、および配列番号２９のアミノ酸配列を、それぞれ重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として、配列番号３２、配列番号３５、および配列番号３８のアミノ酸配列を、それぞれ軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として含むことを特徴とする、請求項１から４のいずれか一項に記載の二特異性抗体。
ヒトＣＤ３に特異的に結合する前記第２のＦａｂが、配列番号１、配列番号２、および配列番号３のアミノ酸配列を、それぞれ重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として、配列番号４、配列番号５、および配列番号６のアミノ酸配列を、それぞれ軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として含む、請求項５に記載の二特異性抗体。
前記二特異性抗体がさらにＣＨ３ドメインを含み、一方の重鎖のＣＨ３ドメインおよび他方の重鎖のＣＨ３ドメインの各々が、抗体のＣＨ３ドメインの間の、元の界面を含む界面において向かい合い、前記界面が、前記二特異性抗体の形成を促進するように変更されており、前記変更が、
ａ）前記二特異性抗体内の前記他方の重鎖のＣＨ３ドメインの前記元の界面と向かい合う、一方の重鎖のＣＨ３ドメインの前記元の界面内で、アミノ酸残基が、より大きい側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえられ、これにより、一方の重鎖のＣＨ３ドメインの前記界面内に、前記他方の重鎖のＣＨ３ドメインの前記界面内の空洞にはまる突起が作出されるように、一方の重鎖のＣＨ３ドメインが変更されていることと、
ｂ）前記二特異性抗体内の前記第１のＣＨ３ドメインの前記元の界面と向かい合う、前記第２のＣＨ３ドメインの前記元の界面内で、アミノ酸残基が、より小さい側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえられ、これにより、前記第２のＣＨ３ドメインの前記界面内に、前記第１のＣＨ３ドメインの前記界面内の突起がはまる空洞が作出されるように、前記他方の重鎖のＣＨ３ドメインが変更されていることと
を特徴とする、請求項１から６のいずれか一項に記載の二特異性抗体。
請求項１から７のいずれか一項に記載の二特異性抗体の調製のための方法であって、
ａ）宿主細胞を、請求項１から７のいずれか一項に記載の抗体の軽鎖および重鎖をコードする核酸分子を含む１つまたは複数のベクターで形質転換するステップと、
ｂ）前記宿主細胞を、前記軽鎖および前記重鎖の発現ならびに前記二特異性抗体の合成を可能とする条件下で培養するステップと、
ｃ）前記二特異性抗体を、前記培養物から回収するステップと
を含む方法。
請求項１から７のいずれか一項に記載の抗体の軽鎖および重鎖をコードする核酸分子を含むベクターを含む宿主細胞。
請求項１から７のいずれか一項に記載の抗体および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
医薬としての使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
形質細胞障害の処置における医薬としての使用のための、請求項１０に記載の医薬組成物。
前記形質細胞障害が多発性骨髄腫または全身性エリテマトーデスである、請求項１２に記載の医薬組成物。