JP3227689B2 - 抗好中球細胞質抗体の測定方法 - Google Patents
抗好中球細胞質抗体の測定方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、抗好中球細胞質抗体の
測定方法に関する。
測定方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】抗好中球細胞質抗体（以下、ＡＮＣＡと
いう）は蛍光抗体間接法（以下、ＩＩＦ法という）によ
り検討され、その染色パターンから、細胞質が染色され
る(Cytoplasmic)-ＡＮＣＡ（以下、Ｃ−ＡＮＣＡとい
う）と、核周辺が染色される(Perinuclear)-ＡＮＣＡ
（以下、Ｐ−ＡＮＣＡという）の２つに分けられる。近
年、難治性の腎疾患であるウェゲナー肉芽腫症でＣ−Ａ
ＮＣＡを測定することが早期診断に極めて有力になった
ことから、Ｃ−ＡＮＣＡの測定が注目されるようになっ
た。しかしながらＩＩＦ法によるＣ−ＡＮＣＡの測定は
手技および蛍光パターンの解釈にかなりの経験と熟練を
要するため日常の臨床検査には適さなかった。
いう）は蛍光抗体間接法（以下、ＩＩＦ法という）によ
り検討され、その染色パターンから、細胞質が染色され
る(Cytoplasmic)-ＡＮＣＡ（以下、Ｃ−ＡＮＣＡとい
う）と、核周辺が染色される(Perinuclear)-ＡＮＣＡ
（以下、Ｐ−ＡＮＣＡという）の２つに分けられる。近
年、難治性の腎疾患であるウェゲナー肉芽腫症でＣ−Ａ
ＮＣＡを測定することが早期診断に極めて有力になった
ことから、Ｃ−ＡＮＣＡの測定が注目されるようになっ
た。しかしながらＩＩＦ法によるＣ−ＡＮＣＡの測定は
手技および蛍光パターンの解釈にかなりの経験と熟練を
要するため日常の臨床検査には適さなかった。
【０００３】その後、ヒト好中球のα顆粒でＣ−ＡＮＣ
Ａの対応抗原が同定されたことから、免疫学的作用を利
用した酵素免疫測定法（ＥＩＡ法）による試薬が市販さ
れ、簡便かつ短時間でＣ−ＡＮＣＡが測定されるように
なった。これは、合成樹脂製プレート等の表面に、ヒト
好中球から精製したＣ−ＡＮＣＡ抗原をコーティングさ
せ、乾燥状態にしたものに検体を入れ、発色剤を加えて
その吸光度を測定するものである。
Ａの対応抗原が同定されたことから、免疫学的作用を利
用した酵素免疫測定法（ＥＩＡ法）による試薬が市販さ
れ、簡便かつ短時間でＣ−ＡＮＣＡが測定されるように
なった。これは、合成樹脂製プレート等の表面に、ヒト
好中球から精製したＣ−ＡＮＣＡ抗原をコーティングさ
せ、乾燥状態にしたものに検体を入れ、発色剤を加えて
その吸光度を測定するものである。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、Ｃ−Ａ
ＮＣＡ抗原はヒト好中球のα顆粒から精製するため、他
の物質が混在しうる可能性がある。ヒト好中球のα顆粒
中には、Ｃ−ＡＮＣＡ抗原以外に、ミエロペルオキシダ
ーゼ（以下、ＭＰＯという）、エラスターゼ、ラクトフ
ェリン、カテプシンＧなどがあり、これらがＣ−ＡＮＣ
Ａ抗原と共存している。前述の共存抗原は検体中に存在
する抗ミエロペルオキシダーゼ抗体（以下、ＭＰＯ−Ａ
ＮＣＡという）などのＣ−ＡＮＣＡ以外の抗体と抗原抗
体反応を起こし、Ｃ−ＡＮＣＡ以外の物質を測定してし
まうという欠点がある。例えば、Ｃ−ＡＮＣＡとＭＰＯ
−ＡＮＣＡはその臨床的意義が異なるため、ＭＰＯ−Ａ
ＮＣＡよる非特異反応をＣ−ＡＮＣＡとして測定するこ
とは診断を混乱させ問題であった。本発明はこの問題を
解決することである。
ＮＣＡ抗原はヒト好中球のα顆粒から精製するため、他
の物質が混在しうる可能性がある。ヒト好中球のα顆粒
中には、Ｃ−ＡＮＣＡ抗原以外に、ミエロペルオキシダ
ーゼ（以下、ＭＰＯという）、エラスターゼ、ラクトフ
ェリン、カテプシンＧなどがあり、これらがＣ−ＡＮＣ
Ａ抗原と共存している。前述の共存抗原は検体中に存在
する抗ミエロペルオキシダーゼ抗体（以下、ＭＰＯ−Ａ
ＮＣＡという）などのＣ−ＡＮＣＡ以外の抗体と抗原抗
体反応を起こし、Ｃ−ＡＮＣＡ以外の物質を測定してし
まうという欠点がある。例えば、Ｃ−ＡＮＣＡとＭＰＯ
−ＡＮＣＡはその臨床的意義が異なるため、ＭＰＯ−Ａ
ＮＣＡよる非特異反応をＣ−ＡＮＣＡとして測定するこ
とは診断を混乱させ問題であった。本発明はこの問題を
解決することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、抗原抗体反応
において抗好中球細胞質抗体の抗原と共存するミエロペ
ルオキシダーゼ抗原による非特異反応を抑制することを
特徴とする抗好中球細胞質抗体の測定方法である。本発
明において抗原抗体反応とは、検体中の抗好中球細胞質
抗体（Ｃ−ＡＮＣＡ）と試薬中のＣ−ＡＮＣＡ抗原の反
応をいう。また、本発明において抗好中球細胞質抗体の
測定方法としては、上記抗原抗体反応を利用したサンド
イッチ免疫測定法などがある。
において抗好中球細胞質抗体の抗原と共存するミエロペ
ルオキシダーゼ抗原による非特異反応を抑制することを
特徴とする抗好中球細胞質抗体の測定方法である。本発
明において抗原抗体反応とは、検体中の抗好中球細胞質
抗体（Ｃ−ＡＮＣＡ）と試薬中のＣ−ＡＮＣＡ抗原の反
応をいう。また、本発明において抗好中球細胞質抗体の
測定方法としては、上記抗原抗体反応を利用したサンド
イッチ免疫測定法などがある。
【０００６】また本発明は、抗原抗体反応において抗好
中球細胞質抗体の抗原と共存するミエロペルオキシダー
ゼ抗原をヒト以外の動物由来抗ヒト好中球ミエロペルオ
キシダーゼ抗血清で特異的に抑制することを特徴とする
抗好中球細胞質抗体の測定方法である。
中球細胞質抗体の抗原と共存するミエロペルオキシダー
ゼ抗原をヒト以外の動物由来抗ヒト好中球ミエロペルオ
キシダーゼ抗血清で特異的に抑制することを特徴とする
抗好中球細胞質抗体の測定方法である。
【０００７】動物由来抗ヒト好中球ＭＰＯ抗血清は、ヒ
ト以外の免疫動物にＭＰＯ抗原を免疫し、この抗血清を
精製しＩｇＧ分画を得る。免疫動物は、ヒト以外なら使
用可能であるが、マウス、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、ブ
タ、ウマ等が望ましい。つまり、用いる抗血清（Ｉｇ
Ｇ) は、２次抗体である抗ヒトＩｇＧ抗体と交差反応を
しないもので、同じ免疫動物由来のものを使用すること
が望ましい。又、未精製抗血清自体を用いてもよいが、
この時抗血清内に非特異反応の原因となりうる物質が存
在する場合、それを除去する必要がある。
ト以外の免疫動物にＭＰＯ抗原を免疫し、この抗血清を
精製しＩｇＧ分画を得る。免疫動物は、ヒト以外なら使
用可能であるが、マウス、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、ブ
タ、ウマ等が望ましい。つまり、用いる抗血清（Ｉｇ
Ｇ) は、２次抗体である抗ヒトＩｇＧ抗体と交差反応を
しないもので、同じ免疫動物由来のものを使用すること
が望ましい。又、未精製抗血清自体を用いてもよいが、
この時抗血清内に非特異反応の原因となりうる物質が存
在する場合、それを除去する必要がある。
【０００８】この動物由来抗ヒト好中球ＭＰＯ抗血清
は、検体とＣ−ＡＮＣＡ抗原の反応前又は反応時に添加
するが、反応前に添加した方が抑制効果は大きい。
は、検体とＣ−ＡＮＣＡ抗原の反応前又は反応時に添加
するが、反応前に添加した方が抑制効果は大きい。
【０００９】Ｃ−ＡＮＣＡ抗原は不溶性担体に直接固相
化されても、別途加えてもよい。不溶性担体はガラス、
アガロース、デキストラン、セルロース、ポリアクリル
アミド、ポリスチレン、ホモポリペプチド、ラテック
ス、ポリカボーネート、ポリプロピレン、アミノアルキ
ルシリカガラス、シリコンゴム等が使用され、その表面
に共有結合法、イオン結合法、物理的吸着等によりＣ−
ＡＮＣＡ抗原を付着させた後乾燥させて固相化されてい
る。
化されても、別途加えてもよい。不溶性担体はガラス、
アガロース、デキストラン、セルロース、ポリアクリル
アミド、ポリスチレン、ホモポリペプチド、ラテック
ス、ポリカボーネート、ポリプロピレン、アミノアルキ
ルシリカガラス、シリコンゴム等が使用され、その表面
に共有結合法、イオン結合法、物理的吸着等によりＣ−
ＡＮＣＡ抗原を付着させた後乾燥させて固相化されてい
る。
【００１０】
【作用】上述のように、試薬中のＣ−ＡＮＣＡ抗原に動
物由来抗ヒトＭＰＯ抗血清のＩｇＧ分画を添加すること
で、あらかじめＣ−ＡＮＣＡ抗原と共存するＭＰＯ抗原
による非特異反応が抑制されるので、該ＭＰＯ抗原によ
り検体中のＭＰＯ−ＡＮＣＡをＣ−ＡＮＣＡとして測定
することなく、正確なＣ−ＡＮＣＡ値を測定することが
可能になる。
物由来抗ヒトＭＰＯ抗血清のＩｇＧ分画を添加すること
で、あらかじめＣ−ＡＮＣＡ抗原と共存するＭＰＯ抗原
による非特異反応が抑制されるので、該ＭＰＯ抗原によ
り検体中のＭＰＯ−ＡＮＣＡをＣ−ＡＮＣＡとして測定
することなく、正確なＣ−ＡＮＣＡ値を測定することが
可能になる。
【００１１】
【実施例】〔実施例1〕 正常ヒト好中球由来のＣ−ＡＮＣＡ抗原をヌンク社製の
マイクロプレート（９６ウェル）に固定させたものを用
意した。リン酸緩衝液（ｐＨ７．３）を用いて抗ヒト好
中球ＭＰＯウサギ抗血清ＩｇＧ分画（アテンズリサーチ
社製）を表１に示す各濃度に調整した。該分画液を２０
０μl/ウェルずつマイクロプレートに分注し、２５℃で
６０分間インキュベーションした。その後該分画液を除
去し、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．
２）で洗浄した。次に、各々のウェルに検体としてリン
酸緩衝液（ｐＨ７．３）で７５倍に希釈したＣ−ＡＮＣ
Ａ含有ヒト血清またはＭＰＯ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清を
２００μl/ウェルずつ加え、２５℃で６０分間インキュ
ベーション後、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７．２）で洗浄を行った。さらにリン酸緩衝液（ｐＨ
７．３）で調整したオリオン社製のアルカリホスファタ
ーゼ標識抗ヒトＩｇＧ抗体を２００μl/ウェルずつ分注
し、２５℃で６０分間インキュベーションした。その後
反応液を除去し、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝液
（ｐＨ７．２）で洗浄後、ジエタノール−アミン−ＨＣ
ｌ緩衝液（ｐＨ９．７）で調整したシグマ社製のｐ−ニ
トロフェニルリン酸二ナトリウムを発色剤として２００
μl/ウェルずつ加え、０分と６０分との吸光度差を測定
した。吸光度の測定は、コロナ社製、タイプＭＴＰ１２
０のマイクロプレートリーダーを用い、４０５ｎｍの波
長で測定した。この結果を表１に示す。ここで表中の測
定値ＯＤ（Ｏｐｔｉｃａｌ Ｄｅｎｃｉｔｙ）は吸光度
差を表す。
マイクロプレート（９６ウェル）に固定させたものを用
意した。リン酸緩衝液（ｐＨ７．３）を用いて抗ヒト好
中球ＭＰＯウサギ抗血清ＩｇＧ分画（アテンズリサーチ
社製）を表１に示す各濃度に調整した。該分画液を２０
０μl/ウェルずつマイクロプレートに分注し、２５℃で
６０分間インキュベーションした。その後該分画液を除
去し、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．
２）で洗浄した。次に、各々のウェルに検体としてリン
酸緩衝液（ｐＨ７．３）で７５倍に希釈したＣ−ＡＮＣ
Ａ含有ヒト血清またはＭＰＯ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清を
２００μl/ウェルずつ加え、２５℃で６０分間インキュ
ベーション後、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７．２）で洗浄を行った。さらにリン酸緩衝液（ｐＨ
７．３）で調整したオリオン社製のアルカリホスファタ
ーゼ標識抗ヒトＩｇＧ抗体を２００μl/ウェルずつ分注
し、２５℃で６０分間インキュベーションした。その後
反応液を除去し、Ｔｗｅｅｎ２０を含むリン酸緩衝液
（ｐＨ７．２）で洗浄後、ジエタノール−アミン−ＨＣ
ｌ緩衝液（ｐＨ９．７）で調整したシグマ社製のｐ−ニ
トロフェニルリン酸二ナトリウムを発色剤として２００
μl/ウェルずつ加え、０分と６０分との吸光度差を測定
した。吸光度の測定は、コロナ社製、タイプＭＴＰ１２
０のマイクロプレートリーダーを用い、４０５ｎｍの波
長で測定した。この結果を表１に示す。ここで表中の測
定値ＯＤ（Ｏｐｔｉｃａｌ Ｄｅｎｃｉｔｙ）は吸光度
差を表す。
【００１２】尚、抗ヒト好中球ＭＰＯウサギ抗血清Ｉｇ
Ｇ分画の濃度は抗体価（μg antigen/ml）で規定する。
抗体価とは抗体活性値のことであり、１mlの抗血清中で
反応する抗原量を示している。今回使用した抗血清は、
ヒト好中球から精製したＭＰＯ抗原を免疫動物に免疫さ
せたものである。この抗血清とヒト好中球から精製した
ＭＰＯ抗原（分子量:150,000) で抗原抗体反応を行い、
反応により沈降した抗原量を求め、これを抗体価とし
た。
Ｇ分画の濃度は抗体価（μg antigen/ml）で規定する。
抗体価とは抗体活性値のことであり、１mlの抗血清中で
反応する抗原量を示している。今回使用した抗血清は、
ヒト好中球から精製したＭＰＯ抗原を免疫動物に免疫さ
せたものである。この抗血清とヒト好中球から精製した
ＭＰＯ抗原（分子量:150,000) で抗原抗体反応を行い、
反応により沈降した抗原量を求め、これを抗体価とし
た。
【００１３】
【表１】
【００１４】これより、抗ヒト好中球ＭＰＯウサギ抗血
清ＩｇＧ分画の添加は、Ｃ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清の測
定値には何ら影響を与えることなく、ＭＰＯ−ＡＮＣＡ
含有ヒト血清の測定値のみを低下させている。これは抗
ヒト好中球ＭＰＯウサギ抗血清ＩｇＧ分画がウェル上で
Ｃ−ＡＮＣＡ抗原と共存するＭＰＯ抗原とあらかじめ反
応し、検体中のＭＰＯ−ＡＮＣＡとＣ−ＡＮＣＡと共存
するＭＰＯ抗原が反応することを抑制していることを示
す。また、この抗ヒト好中球ＭＰＯウサギ抗血清ＩｇＧ
分画の有効濃度は、上表からも明らかなように１mlのウ
サギ抗血清に対し０．４９μg のＭＰＯ抗原と反応する
抗体価以上でその効果を示している。
清ＩｇＧ分画の添加は、Ｃ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清の測
定値には何ら影響を与えることなく、ＭＰＯ−ＡＮＣＡ
含有ヒト血清の測定値のみを低下させている。これは抗
ヒト好中球ＭＰＯウサギ抗血清ＩｇＧ分画がウェル上で
Ｃ−ＡＮＣＡ抗原と共存するＭＰＯ抗原とあらかじめ反
応し、検体中のＭＰＯ−ＡＮＣＡとＣ−ＡＮＣＡと共存
するＭＰＯ抗原が反応することを抑制していることを示
す。また、この抗ヒト好中球ＭＰＯウサギ抗血清ＩｇＧ
分画の有効濃度は、上表からも明らかなように１mlのウ
サギ抗血清に対し０．４９μg のＭＰＯ抗原と反応する
抗体価以上でその効果を示している。
【００１５】〔比較例１〕 実施例で非特異反応抑制剤として添加した抗ヒト好中球
ＭＰＯウサギ抗血清のＩｇＧ分画の分注を除き、従来の
Ｃ−ＡＮＣＡ測定試薬で、Ｃ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清、
ＭＰＯ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清および健常人の血清を検
体として、実施例と同様な手順で測定した。その結果を
表２に示す。
ＭＰＯウサギ抗血清のＩｇＧ分画の分注を除き、従来の
Ｃ−ＡＮＣＡ測定試薬で、Ｃ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清、
ＭＰＯ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清および健常人の血清を検
体として、実施例と同様な手順で測定した。その結果を
表２に示す。
【００１６】
【表２】
【００１７】この結果から、健常人血清の測定値より平
均値＋２×ＳＤ（標準偏差）を正常値とすると、正常値
は(0.009＋2 ×0.00028 ＝0.00956)であるから、Ｃ−Ａ
ＮＣＡ含有ヒト血清およびＭＰＯ−ＡＮＣＡ含有ヒト血
清は正常値との間に明らかに差がある。これは、Ｃ−Ａ
ＮＣＡ抗原を固相化させたウェルに対して、ＭＰＯ−Ａ
ＮＣＡが反応していることから、Ｃ−ＡＮＣＡ抗原と共
存するＭＰＯ抗原と反応が起こっていると言える。
均値＋２×ＳＤ（標準偏差）を正常値とすると、正常値
は(0.009＋2 ×0.00028 ＝0.00956)であるから、Ｃ−Ａ
ＮＣＡ含有ヒト血清およびＭＰＯ−ＡＮＣＡ含有ヒト血
清は正常値との間に明らかに差がある。これは、Ｃ−Ａ
ＮＣＡ抗原を固相化させたウェルに対して、ＭＰＯ−Ａ
ＮＣＡが反応していることから、Ｃ−ＡＮＣＡ抗原と共
存するＭＰＯ抗原と反応が起こっていると言える。
【００１８】〔比較例2〕 実施例で添加した抗ヒト好中球ＭＰＯウサギ抗血清のＩ
ｇＧ分画の代わりに一般的に使用される非特異反応抑制
剤として、オルガノン社製の牛血清アルブミン（ＢＳ
Ａ）をＣ−ＡＮＣＡ測定試薬に加えた。そして実施例と
同様に検体としてＣ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清およびＭＰ
Ｏ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清を用いて、測定を行った。そ
の結果を表３に示す。
ｇＧ分画の代わりに一般的に使用される非特異反応抑制
剤として、オルガノン社製の牛血清アルブミン（ＢＳ
Ａ）をＣ−ＡＮＣＡ測定試薬に加えた。そして実施例と
同様に検体としてＣ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清およびＭＰ
Ｏ−ＡＮＣＡ含有ヒト血清を用いて、測定を行った。そ
の結果を表３に示す。
【００１９】
【表３】
【００２０】一般的な非特異反応抑制剤であるＢＳＡを
用いた実験結果は、添加量に関係なくＭＰＯ−ＡＮＣＡ
含有ヒト血清測定値がほぼ同じ値を示すことから、ＢＳ
ＡではＭＰＯ抗原を特異的に抑制する効果がないことが
分かる。
用いた実験結果は、添加量に関係なくＭＰＯ−ＡＮＣＡ
含有ヒト血清測定値がほぼ同じ値を示すことから、ＢＳ
ＡではＭＰＯ抗原を特異的に抑制する効果がないことが
分かる。
【００２１】
【発明の効果】本発明の測定方法を採用すれば、Ｃ−Ａ
ＮＣＡ抗原の活性を失活させることなくＣ−ＡＮＣＡ抗
原中の非特異反応を抑制できる。つまり、Ｃ−ＡＮＣＡ
抗原と共存するＭＰＯ抗原だけを特異的に抑制し、目的
とするＣ−ＡＮＣＡの正確な測定が可能である。
ＮＣＡ抗原の活性を失活させることなくＣ−ＡＮＣＡ抗
原中の非特異反応を抑制できる。つまり、Ｃ−ＡＮＣＡ
抗原と共存するＭＰＯ抗原だけを特異的に抑制し、目的
とするＣ−ＡＮＣＡの正確な測定が可能である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 国際公開92／2819（ＷＯ，Ａ１) Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ ａｎｄ Ｎｅ ｗ Ｚｅａｌａｎｄ Ｊ．ＭＥｄ．，Ｖ ｏｌ．21，Ｎｏ．４（1991）ｐ．433− 437 Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖ ｏｌ．127，Ｎｏ．１（1990）ｐ．139− 146 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G01N 33/48 - 33/98
Claims (1)
- 【請求項１】 抗原抗体反応において抗好中球細胞質抗
体の抗原と共存するミエロペルオキシダーゼ抗原をヒト
以外の動物由来抗ヒト好中球ミエロペルオキシダーゼ抗
血清で特異的に抑制することを特徴とする抗好中球細胞
質抗体の測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP08748394A JP3227689B2 (ja) | 1994-04-01 | 1994-04-01 | 抗好中球細胞質抗体の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP08748394A JP3227689B2 (ja) | 1994-04-01 | 1994-04-01 | 抗好中球細胞質抗体の測定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07280806A JPH07280806A (ja) | 1995-10-27 |
| JP3227689B2 true JP3227689B2 (ja) | 2001-11-12 |
Family
ID=13916199
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP08748394A Expired - Fee Related JP3227689B2 (ja) | 1994-04-01 | 1994-04-01 | 抗好中球細胞質抗体の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3227689B2 (ja) |
-
1994
- 1994-04-01 JP JP08748394A patent/JP3227689B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｚｅａｌａｎｄ Ｊ．ＭＥｄ．，Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ．４（１９９１）ｐ．４３３−４３７ |
| Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖｏｌ．１２７，Ｎｏ．１（１９９０）ｐ．１３９−１４６ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH07280806A (ja) | 1995-10-27 |
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |