JP3377005B2 - 腸の炎症状態を診断する方法 - Google Patents
腸の炎症状態を診断する方法Info
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明の技術分野
本発明は、腸管（すなわち、小腸および大腸（結腸お
よび直腸））の炎症状態を診断する新規方法に関してい
る。この方法の新規性は、腸内ガスにおける酸化窒素
（NO）がこのタイプの炎症の臨床関連指標であるとの私
達の発見に基づいている。
よび直腸））の炎症状態を診断する新規方法に関してい
る。この方法の新規性は、腸内ガスにおける酸化窒素
（NO）がこのタイプの炎症の臨床関連指標であるとの私
達の発見に基づいている。
消化管のこの部位における炎症状態は、例えば潰瘍性
大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患、腹腔疾患
などの食物拒否症、食物アレルギーあるいは敗血症によ
って生じる。
大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患、腹腔疾患
などの食物拒否症、食物アレルギーあるいは敗血症によ
って生じる。
従来の技術
NOが消化管の多くの箇所で生成し、生理的および病理
的症状に関与していることは知られている（Whittle G
J R,消化管の生理、New York:Raven Press（1994）267
−94）。
的症状に関与していることは知られている（Whittle G
J R,消化管の生理、New York:Raven Press（1994）267
−94）。
潰瘍性大腸炎におけるNOの病理的役割は示唆されてお
り、活発な潰瘍性大腸炎の患者では粘膜のNO合成が増加
することが示されている（Middletonら、Lancet 341（1
993）465−66;Boughton−Smithら、Lancet 342（1993）
338−40）。しかし、これらの研究はインビトロで行わ
れ、結腸および直腸の粘膜から採取した生検でのNO−合
成活性を測定するのに、間接的なシツルリン検定を用い
ていた。これらの試験では、活性が存在する大腸粘膜の
層を明らかにしていない。粘膜で形成したNOは大腸腔に
拡散する傾向にあるようであるが、そこに到達するため
には、NOは上皮細胞、上皮内細胞、例えば食細胞などの
管腔細胞を含む表面層において形成されねばならない。
この非常に活性なNOが粘膜層の深部で形成された場合
は、拡散経路の間に破壊されてしまう。ここに示す結果
は初めて、腸炎症疾患におけるNO−合成活性が結腸およ
び直腸の管腔に次いで上皮細胞層に存在することを明ら
かにする。
り、活発な潰瘍性大腸炎の患者では粘膜のNO合成が増加
することが示されている（Middletonら、Lancet 341（1
993）465−66;Boughton−Smithら、Lancet 342（1993）
338−40）。しかし、これらの研究はインビトロで行わ
れ、結腸および直腸の粘膜から採取した生検でのNO−合
成活性を測定するのに、間接的なシツルリン検定を用い
ていた。これらの試験では、活性が存在する大腸粘膜の
層を明らかにしていない。粘膜で形成したNOは大腸腔に
拡散する傾向にあるようであるが、そこに到達するため
には、NOは上皮細胞、上皮内細胞、例えば食細胞などの
管腔細胞を含む表面層において形成されねばならない。
この非常に活性なNOが粘膜層の深部で形成された場合
は、拡散経路の間に破壊されてしまう。ここに示す結果
は初めて、腸炎症疾患におけるNO−合成活性が結腸およ
び直腸の管腔に次いで上皮細胞層に存在することを明ら
かにする。
少量の亜硝酸塩のNOに変え得る腸細菌が存在すること
が認められている（Jiら、Biochem.Arch.5（1989）61−
66）。
が認められている（Jiら、Biochem.Arch.5（1989）61−
66）。
空気路に関しては、呼気中のNO濃度の変化が炎症状態
で認められている（Alvingら、WO 9502181;Alvingら、E
ur.Resp.J.6（1993）1368−70;Hamidら、Lancet 342（1
993）1510−13;Karithonovら、lancet 343（1994）146
−147）。
で認められている（Alvingら、WO 9502181;Alvingら、E
ur.Resp.J.6（1993）1368−70;Hamidら、Lancet 342（1
993）1510−13;Karithonovら、lancet 343（1994）146
−147）。
NO値の増加は逆流気においても認められている（Alvi
ngら、WO 9502181;Lundbergら、Gut 35（1994）1543−1
546）。少し異なった測定方法によって、呼気中のNOは
肺から発生することが示唆されている（Gustafsson,WO
−Ａ−9305709およびSE−Ａ−91032433）。
ngら、WO 9502181;Lundbergら、Gut 35（1994）1543−1
546）。少し異なった測定方法によって、呼気中のNOは
肺から発生することが示唆されている（Gustafsson,WO
−Ａ−9305709およびSE−Ａ−91032433）。
本発明の対象
本発明の対象は、上記の腸管炎症状態の診断方法を含
み、特にNO生成とこれらの状態との相関に関係する。
み、特にNO生成とこれらの状態との相関に関係する。
本発明およびその基になる発見
我々は、大腸および直腸に活発な炎症のある患者の結
腸および直腸から採取した管腔ガスのNO濃度を測定する
ことに成功した。これらの濃度を対照の健常人から得た
濃度と比較した。
腸および直腸から採取した管腔ガスのNO濃度を測定する
ことに成功した。これらの濃度を対照の健常人から得た
濃度と比較した。
われわれの発見によると、NO値は腸に炎症状態がある
場合に増加する。用語“健常人”は、腸粘膜に炎症のな
い者を意味する。
場合に増加する。用語“健常人”は、腸粘膜に炎症のな
い者を意味する。
従って、発明方法は下記の工程を特徴とする。
・ヒト腸管腔からガスのサンプルを採取する
・その酸化窒素（NO）量を測定する
・その値を健常人で得た値または他の時点で同一人で得
た値と比較する 健常人の値に比較して高い値は、サンプルを得た者の
腸における炎症状態の指標である。他の時点での値、す
なわち以前の値に比して、値が高くなっていると、炎症
状態が悪化していることを表している。反対に、値の低
下は改善を意味する。サンプル採取および測定方法は比
較する同士、もちろん基本的に同じでなければならな
い。
た値と比較する 健常人の値に比較して高い値は、サンプルを得た者の
腸における炎症状態の指標である。他の時点での値、す
なわち以前の値に比して、値が高くなっていると、炎症
状態が悪化していることを表している。反対に、値の低
下は改善を意味する。サンプル採取および測定方法は比
較する同士、もちろん基本的に同じでなければならな
い。
サンプルは空腹時の腸管腔から得るのが望ましいが、
かならずしも空腹でなくてよい。腸管から細菌を完全に
なくすることができないが、測定方法は有効に機能す
る。サンプルは、例えば結腸鏡術の間、ガスを集積する
シリンダを付け、例えば結腸に入れたカテーテルを通じ
て採取する（結腸鏡には通常、腸管腔からのガスサンプ
ルを引き込み得る導管が装着されている）。サンプルは
また、Raabらが記載するのと同じ型の器具によっても採
取し得る（Am.J.Gastroenterol.87（1992）1453−145
9）。Krogらも参照（WO−Ａ−108013）。直腸に関して
は、ガスサンプルは、例えば直腸内ガスをシリンダに吸
引することにより直接集めることができる。サンプルは
また、例えばOdlindら記載の装置を用いて、小腸管腔か
ら採取することができる（EP−Ａ−455,368）。Raabら
及びKrogらの両者により示された方法論は、結腸および
直腸の分節についてのサンプル代表を得るのが可能であ
ることを示している。
かならずしも空腹でなくてよい。腸管から細菌を完全に
なくすることができないが、測定方法は有効に機能す
る。サンプルは、例えば結腸鏡術の間、ガスを集積する
シリンダを付け、例えば結腸に入れたカテーテルを通じ
て採取する（結腸鏡には通常、腸管腔からのガスサンプ
ルを引き込み得る導管が装着されている）。サンプルは
また、Raabらが記載するのと同じ型の器具によっても採
取し得る（Am.J.Gastroenterol.87（1992）1453−145
9）。Krogらも参照（WO−Ａ−108013）。直腸に関して
は、ガスサンプルは、例えば直腸内ガスをシリンダに吸
引することにより直接集めることができる。サンプルは
また、例えばOdlindら記載の装置を用いて、小腸管腔か
ら採取することができる（EP−Ａ−455,368）。Raabら
及びKrogらの両者により示された方法論は、結腸および
直腸の分節についてのサンプル代表を得るのが可能であ
ることを示している。
NO量は、濃度、絶対値または内的あるいは外的基準と
の相対値として定め／計算され得る。その量は、NOと共
に腸内ガス中に、望ましくは一定の値で、本来的に存在
する成分を標準とした値として表される（内的基準）。
NO量は、空気流を考慮したとき、時間単位当たり分泌さ
れた量としても計算され得る。Krogら（WO−Ａ−10801
3）およびOdlindら（EP−Ａ−455,368）により記載され
たバロン法を用いたときは、得られた値は露出している
粘膜領域に関係する。局所のNO産生は、基質Ｌ−アルギ
ニンを経口的に、静脈にまたは局所的に、例えば低度の
炎症の検出を可能にする結腸鏡を経て、投与することに
より増加し得る。
の相対値として定め／計算され得る。その量は、NOと共
に腸内ガス中に、望ましくは一定の値で、本来的に存在
する成分を標準とした値として表される（内的基準）。
NO量は、空気流を考慮したとき、時間単位当たり分泌さ
れた量としても計算され得る。Krogら（WO−Ａ−10801
3）およびOdlindら（EP−Ａ−455,368）により記載され
たバロン法を用いたときは、得られた値は露出している
粘膜領域に関係する。局所のNO産生は、基質Ｌ−アルギ
ニンを経口的に、静脈にまたは局所的に、例えば低度の
炎症の検出を可能にする結腸鏡を経て、投与することに
より増加し得る。
外来患者から腸内ガスを採取するには、直腸サンプル
が望ましい（このような患者について他の採取方法を排
除するものではない）。直腸からの採取は、ガスが腸管
内に自由に拡散し得る場合、NO値が直腸および結腸の両
方の炎症を測定することになる。Krogらの技法（WO−Ａ
−108013）を用いて、直腸の炎症を測定するNO値が得ら
れる。
が望ましい（このような患者について他の採取方法を排
除するものではない）。直腸からの採取は、ガスが腸管
内に自由に拡散し得る場合、NO値が直腸および結腸の両
方の炎症を測定することになる。Krogらの技法（WO−Ａ
−108013）を用いて、直腸の炎症を測定するNO値が得ら
れる。
ガスサンプル中のNOの検定方法は、この分野でよく知
られている。低い値が対象であるので、化学発光検出法
に基づくNOガス分析器が優先日の時点では望ましい。例
えば、Archer,FASEB J.,（1993）349−60およびAlving
ら、WO 9502181参照。
られている。低い値が対象であるので、化学発光検出法
に基づくNOガス分析器が優先日の時点では望ましい。例
えば、Archer,FASEB J.,（1993）349−60およびAlving
ら、WO 9502181参照。
試験
潰瘍患者
活発な潰瘍性大腸炎の６患者（27−48歳、平均38歳）
および粘膜に炎症のない対照の12患者（26−68歳、平均
59歳）（悪性腫瘍またはポリープの疑いで結腸鏡が使用
される）について、結腸鏡術の間、腸腔ガスを結腸およ
び直腸の種々の部位から薄いカテーテルを通して吸引し
た（60cl、５秒以上）。各患者において炎症が組織的に
確認された。潰瘍性大腸炎の患者の内、２人はコルチコ
ステロイドおよびサリチル酸塩を経口で服用し、２人は
サリチル酸塩のみを服用し、残りの２人は試験の時点で
はいかなる薬剤も服用していなかった。各患者で結腸鏡
術の前に、水浣腸および等張ポリエチレングリコール
（Laxabone商標、TIKA,Lund,スエーデン）の摂取を含む
通常の措置がとられた。
および粘膜に炎症のない対照の12患者（26−68歳、平均
59歳）（悪性腫瘍またはポリープの疑いで結腸鏡が使用
される）について、結腸鏡術の間、腸腔ガスを結腸およ
び直腸の種々の部位から薄いカテーテルを通して吸引し
た（60cl、５秒以上）。各患者において炎症が組織的に
確認された。潰瘍性大腸炎の患者の内、２人はコルチコ
ステロイドおよびサリチル酸塩を経口で服用し、２人は
サリチル酸塩のみを服用し、残りの２人は試験の時点で
はいかなる薬剤も服用していなかった。各患者で結腸鏡
術の前に、水浣腸および等張ポリエチレングリコール
（Laxabone商標、TIKA,Lund,スエーデン）の摂取を含む
通常の措置がとられた。
吸引されたガスは直ちに化学発光検出NO分析器（CDL
700,ECO Physics,Durnten,スイス）にかけられ、NOのピ
ーク値が記録されら。NOの検出限界は10億分の一（pp
b）であり、電磁流コントローラ（Environics Inc,Midd
leton,コネチカット，米国）を用いて、分析器はN2中の
NOの濃度が目盛り付けされている。NO値は、シリンダ中
で３分間以上、大きく相違する濃度（５−25,000ppb）
で安定していた。化学発光検出はNOに非常に特異的であ
り、他の酸化窒素の干渉がない（Archer,FASEB J.7（19
93）249−60）。大気中のNO値は4ppb以下であった。Man
n−Whitney U検定を非対比較のために使用した。
700,ECO Physics,Durnten,スイス）にかけられ、NOのピ
ーク値が記録されら。NOの検出限界は10億分の一（pp
b）であり、電磁流コントローラ（Environics Inc,Midd
leton,コネチカット，米国）を用いて、分析器はN2中の
NOの濃度が目盛り付けされている。NO値は、シリンダ中
で３分間以上、大きく相違する濃度（５−25,000ppb）
で安定していた。化学発光検出はNOに非常に特異的であ
り、他の酸化窒素の干渉がない（Archer,FASEB J.7（19
93）249−60）。大気中のNO値は4ppb以下であった。Man
n−Whitney U検定を非対比較のために使用した。
結腸中の管腔NO値は、各人の値を結腸の種々の部位
（Ｓ字結腸、下行、横行および上行結腸）についての平
均Vfとして計算したときに、潰瘍性大腸炎の患者は（77
41±1919）、対照（45±７）に比して100倍以上（pH＝
0.0001）であった。結腸および直腸の種々の部位ごとの
平均を表に示す。
（Ｓ字結腸、下行、横行および上行結腸）についての平
均Vfとして計算したときに、潰瘍性大腸炎の患者は（77
41±1919）、対照（45±７）に比して100倍以上（pH＝
0.0001）であった。結腸および直腸の種々の部位ごとの
平均を表に示す。
表：潰瘍性大腸炎患者（UC）および対照者の大腸の種々
の部位において採取した管腔ガスの平均NO濃度 対照（ｎ＝12） UC（ｎ＝６） 直腸 27 2125 Ｓ状結腸 32 3912 下行結腸 46 10125 横行結腸 71 10475 上行結腸 65 10900 いかなる部位においても２群間で重なり合うことは無
かった。NO濃度はすべての結腸で増加した。最も高い濃
度は炎症の最も激しい箇所から採取したガスで見られた
が、炎症症状のない結腸部位でもNO値は有意に上昇し
た。コルチコステロイドまたはサリチル酸塩を投与した
潰瘍性大腸炎患者における管腔NO濃度は、対照に比較し
て非常に高く、また無投薬の潰瘍性大腸炎の患者と相違
がなかった。
の部位において採取した管腔ガスの平均NO濃度 対照（ｎ＝12） UC（ｎ＝６） 直腸 27 2125 Ｓ状結腸 32 3912 下行結腸 46 10125 横行結腸 71 10475 上行結腸 65 10900 いかなる部位においても２群間で重なり合うことは無
かった。NO濃度はすべての結腸で増加した。最も高い濃
度は炎症の最も激しい箇所から採取したガスで見られた
が、炎症症状のない結腸部位でもNO値は有意に上昇し
た。コルチコステロイドまたはサリチル酸塩を投与した
潰瘍性大腸炎患者における管腔NO濃度は、対照に比較し
て非常に高く、また無投薬の潰瘍性大腸炎の患者と相違
がなかった。
クローン病
クローン病の２患者について、上記と同じ方法を用
い、結腸NO値を測定したところ、約1000ppbであった。
このように、この疾患の結腸ガス中のNO値は中程度とみ
られる。
い、結腸NO値を測定したところ、約1000ppbであった。
このように、この疾患の結腸ガス中のNO値は中程度とみ
られる。
NO合成の免疫組織化学
IBD患者および対照者の結腸鏡術の間、NOシンターゼ
の存在および場所を免疫組織化学的に確認するために、
粘膜生検がなされた。簡単に述べれば、腸粘膜組織標本
を、固定し凍結した後、14μｍの厚さの切片にする。誘
発NOシンターゼの存在が家兎ポリクローナル抗血清を用
いて確認された。この抗血清は、喘息患者の炎症した気
管支上皮を染色し、対照を染色しない（Hamidら、Lance
t 342（1993）1510−1513）。視覚化のためには、蛍光
物FITCと共役しているヤギ−抗−家兎−IgG−抗体を用
いた。この方法により、誘発NOシンターゼが潰瘍性大腸
炎およびクローン病の患者の腸上皮においてのみ発見さ
れ、対照患者においては見いだされなかった。しかし、
染色には出来不出来があり、すべての標本では見られな
かった。
の存在および場所を免疫組織化学的に確認するために、
粘膜生検がなされた。簡単に述べれば、腸粘膜組織標本
を、固定し凍結した後、14μｍの厚さの切片にする。誘
発NOシンターゼの存在が家兎ポリクローナル抗血清を用
いて確認された。この抗血清は、喘息患者の炎症した気
管支上皮を染色し、対照を染色しない（Hamidら、Lance
t 342（1993）1510−1513）。視覚化のためには、蛍光
物FITCと共役しているヤギ−抗−家兎−IgG−抗体を用
いた。この方法により、誘発NOシンターゼが潰瘍性大腸
炎およびクローン病の患者の腸上皮においてのみ発見さ
れ、対照患者においては見いだされなかった。しかし、
染色には出来不出来があり、すべての標本では見られな
かった。
考察
管腔ガス中のNOは腸粘膜において産生されるようであ
り、NO−シンターゼ活性について報告されている（Boug
hton−Smithら、Lancet 342（1993）338−340）。
り、NO−シンターゼ活性について報告されている（Boug
hton−Smithら、Lancet 342（1993）338−340）。
この段階では、細菌の一部の株が亜硝酸塩からNOを製
造できるので、いくらかの管腔NOが細胞由来かもしれな
いとのことを除外し得ない（Jiら、Biochem.Arch.5（19
89）61−66）。しかし、この研究においては、細菌は主
なNO源ではない。なぜなら、すべての患者が結腸鏡術の
前に注意深く準備され、糞便は見られなかったからであ
る。細菌のより一般的な性質は硝酸塩を亜硝酸塩に還元
する能力である。更に、硝酸塩も亜硝酸塩も食物のあり
ふれた成分である。従って、亜硝酸塩および硝酸塩は腸
管における局所的NO産生の特異的な標識とならない。炎
症大腸の患者における非炎症領域から採取した管腔ガス
にみられる高NO濃度は、大腸炎において結腸が弛緩およ
び膨張している、すなわち、結腸の各部分が行き来しや
すくなり、腸内ガスが均一に分散するとの事実におそら
く因るものであろう。
造できるので、いくらかの管腔NOが細胞由来かもしれな
いとのことを除外し得ない（Jiら、Biochem.Arch.5（19
89）61−66）。しかし、この研究においては、細菌は主
なNO源ではない。なぜなら、すべての患者が結腸鏡術の
前に注意深く準備され、糞便は見られなかったからであ
る。細菌のより一般的な性質は硝酸塩を亜硝酸塩に還元
する能力である。更に、硝酸塩も亜硝酸塩も食物のあり
ふれた成分である。従って、亜硝酸塩および硝酸塩は腸
管における局所的NO産生の特異的な標識とならない。炎
症大腸の患者における非炎症領域から採取した管腔ガス
にみられる高NO濃度は、大腸炎において結腸が弛緩およ
び膨張している、すなわち、結腸の各部分が行き来しや
すくなり、腸内ガスが均一に分散するとの事実におそら
く因るものであろう。
腸粘膜からの生検における炎症の組織的な分析が一般
的炎症状態の代表的なものでないだろうことは、よく知
られている問題である。ガス中のNOはより一様に分布す
るだろうから、この方法は、疾患すなわち粘膜の炎症領
域と罹患領域の炎症程度とを、よく相関せしめ得る。ク
ローン病におけるNOの低い値はこの一つの例示である。
なぜなら、クローン病に比して潰瘍性大腸炎においては
上皮の広い部分が通常罹患しているからである。全粘膜
において無傷の腸管腔でのNOの直接測定、および全粘膜
におけるNO−シンターゼ活性の間接的測定のいずれも
（Middletonら、Lancet 341（1993）465−66;Boughton
−Smithら、Lancet 342（1993）338−40）、NO産生が腸
に炎症のある患者おいては対照患者におけるより非常に
大きいことを示す。
的炎症状態の代表的なものでないだろうことは、よく知
られている問題である。ガス中のNOはより一様に分布す
るだろうから、この方法は、疾患すなわち粘膜の炎症領
域と罹患領域の炎症程度とを、よく相関せしめ得る。ク
ローン病におけるNOの低い値はこの一つの例示である。
なぜなら、クローン病に比して潰瘍性大腸炎においては
上皮の広い部分が通常罹患しているからである。全粘膜
において無傷の腸管腔でのNOの直接測定、および全粘膜
におけるNO−シンターゼ活性の間接的測定のいずれも
（Middletonら、Lancet 341（1993）465−66;Boughton
−Smithら、Lancet 342（1993）338−40）、NO産生が腸
に炎症のある患者おいては対照患者におけるより非常に
大きいことを示す。
しかし、２人の潰瘍性大腸炎患者におけるNO産生の差
異は、直接管腔法を用いたときに非常に大きくなった
（４−８倍に比し100倍）。更に、クローン患者におい
て間接法ではNO−シンターゼ活性が増加しないが、われ
われの直接法は管腔NOの約20倍に増加した値を示した。
間接法で全粘膜におけるNO産生を測定すると、粘膜のす
べての層からの正常NO産生が寄与し、背景値を増加し、
群間の差異を小さくする。他方、管腔NO測定は粘膜の最
も表面の部分のみでのNO産生を反映し得、深い粘膜構造
部で産生されるNOは、例えば粘膜血管中のヘモグロビン
により捕捉されるので、管腔に達しない。したがって、
このことは、炎症状態において管腔ガス中に検出される
NO産生が非常に表面の粘膜層に存在するものであること
を示唆している。腸でのNOガス測定は、NO産生が正常の
上皮においては全く起きないので、炎症の鋭敏な尺度で
あり得る。
異は、直接管腔法を用いたときに非常に大きくなった
（４−８倍に比し100倍）。更に、クローン患者におい
て間接法ではNO−シンターゼ活性が増加しないが、われ
われの直接法は管腔NOの約20倍に増加した値を示した。
間接法で全粘膜におけるNO産生を測定すると、粘膜のす
べての層からの正常NO産生が寄与し、背景値を増加し、
群間の差異を小さくする。他方、管腔NO測定は粘膜の最
も表面の部分のみでのNO産生を反映し得、深い粘膜構造
部で産生されるNOは、例えば粘膜血管中のヘモグロビン
により捕捉されるので、管腔に達しない。したがって、
このことは、炎症状態において管腔ガス中に検出される
NO産生が非常に表面の粘膜層に存在するものであること
を示唆している。腸でのNOガス測定は、NO産生が正常の
上皮においては全く起きないので、炎症の鋭敏な尺度で
あり得る。
活性な潰瘍性大腸炎は誘発NOシンターゼの活性増大に
関連している。これは、誘発NOシンターゼがステロイド
感受性であるとの伝統的な考え（Moncadaら、Pharmaco
l.Rev.43（1991）109−141）に明らかに一致していな
い。なぜなら、われわれの研究および以前の研究（Boug
hton−Smithら、Lancet 342（1993）338−40）におい
て、コルチコステロイド処置患者は非処置者とNO産生に
関しては相違しなかったからである。これは粘膜におけ
るNO−産生細胞へのステロイドの不完全な浸透を反映し
ているか、ステロイド耐性誘発NOシンターゼの存在が分
かっていないのか、いずれかである。われわれの研究で
は、サリチル酸塩はNO産生に関与しないようであった。
しかし、サリチル酸塩処置の全患者が継続中の処置にも
かかわらず、潰瘍性大腸炎に苦しんでいたことを指摘し
なければならない。このように、処置がより効果的であ
り、潰瘍の活性化が生じないような他の潰瘍性大腸炎患
者において、サリチル酸塩がNO合成に関与するかどうか
は、われわれには分かっていない。これらの急性症状お
よび高NO値の患者について処置が明らかにうまくいって
いないので、腸内NOの測定は新薬の試験に利用できよ
う。
関連している。これは、誘発NOシンターゼがステロイド
感受性であるとの伝統的な考え（Moncadaら、Pharmaco
l.Rev.43（1991）109−141）に明らかに一致していな
い。なぜなら、われわれの研究および以前の研究（Boug
hton−Smithら、Lancet 342（1993）338−40）におい
て、コルチコステロイド処置患者は非処置者とNO産生に
関しては相違しなかったからである。これは粘膜におけ
るNO−産生細胞へのステロイドの不完全な浸透を反映し
ているか、ステロイド耐性誘発NOシンターゼの存在が分
かっていないのか、いずれかである。われわれの研究で
は、サリチル酸塩はNO産生に関与しないようであった。
しかし、サリチル酸塩処置の全患者が継続中の処置にも
かかわらず、潰瘍性大腸炎に苦しんでいたことを指摘し
なければならない。このように、処置がより効果的であ
り、潰瘍の活性化が生じないような他の潰瘍性大腸炎患
者において、サリチル酸塩がNO合成に関与するかどうか
は、われわれには分かっていない。これらの急性症状お
よび高NO値の患者について処置が明らかにうまくいって
いないので、腸内NOの測定は新薬の試験に利用できよ
う。
腸に炎症状態がある患者でみられるNO産生の増加は、
組織に有益か、それとも有害か、いまなお明らかでな
い。NOおよび後の反応生産物は、過剰に産生すると、宿
主細胞に対して細胞毒作用を有するであろう（Tepperma
nら、Am.J.Physiol.265（1993）G214−G218）。一方、
高濃度の管腔NOは、例えば、鼻空気路（Lundbergら、Eu
r.J.Resp.7（1994）1501−1504）および胃（Lundberg
ら、Gut 35（1994）1543−1546）に、局所組織に損傷を
与えることなく、正常に存在する。更に、NOは、宿主保
護メカニスムにおいて、例えば、その静菌作用により重
要な役割を演じていることが示唆されている（Moncada
ら、Pharmacol.Rev.43（1991）109−141）。このこと
は、活性な潰瘍性大腸炎の患者において、活性でない疾
患の患者および対照者に比して、細菌数の減少がみられ
るとの以前の知見により支持される（Hartleyら、J.Med
ical.Microbiol.36（1992）96−103）。
組織に有益か、それとも有害か、いまなお明らかでな
い。NOおよび後の反応生産物は、過剰に産生すると、宿
主細胞に対して細胞毒作用を有するであろう（Tepperma
nら、Am.J.Physiol.265（1993）G214−G218）。一方、
高濃度の管腔NOは、例えば、鼻空気路（Lundbergら、Eu
r.J.Resp.7（1994）1501−1504）および胃（Lundberg
ら、Gut 35（1994）1543−1546）に、局所組織に損傷を
与えることなく、正常に存在する。更に、NOは、宿主保
護メカニスムにおいて、例えば、その静菌作用により重
要な役割を演じていることが示唆されている（Moncada
ら、Pharmacol.Rev.43（1991）109−141）。このこと
は、活性な潰瘍性大腸炎の患者において、活性でない疾
患の患者および対照者に比して、細菌数の減少がみられ
るとの以前の知見により支持される（Hartleyら、J.Med
ical.Microbiol.36（1992）96−103）。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 ルンドバリィ，ヨン
スウェーデン、エス−113 31ストック
ホルム、サンクタ・エリクスガータン
116番
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
G01N 33/497
G01N 33/50
G01N 33/84
Claims (6)
- 【請求項１】腸管腔から分離したガスサンプル中の一酸
化窒素（NO）を測定し、得た値を健常人の値または同一
人の他の時点での値と比較することを特徴とする、ヒト
腸管における炎症状態の検定のためにNOの増加した値を
検査する方法。 - 【請求項２】該サンプルが空の腸管腔から分離したサン
プルであることを特徴とする、請求項１の方法。 - 【請求項３】該サンプルが結腸の管腔から分離したサン
プルであることを特徴とする、請求項１または２の方
法。 - 【請求項４】該サンプルが直腸の管腔から分離したサン
プルであることを特徴とする、請求項１または２の方
法。 - 【請求項５】増加した値を潰瘍性大腸炎の一つの指標と
することを特徴とする、請求項１−４の方法。 - 【請求項６】増加した値をクローン病の一つの指標とす
ることを特徴とする、請求項14の方法。
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| SE9404161A SE503876C2 (sv) | 1994-11-30 | 1994-11-30 | Detektion av inflammatoriska tillstånd i tarmkanalen genom att mäta kväveoxidhalten i ett prov taget ur tarmlumen |
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| SE9102812L (sv) * | 1991-09-27 | 1993-01-18 | Lars Erik Gustafsson | Saett att faststaella aktuell lungfunktion samt anordning foer att indikera naemnda lungfunktion |
| US5459076A (en) * | 1992-04-22 | 1995-10-17 | Brigham And Women's Hospital | Method for detecting nitric oxide, nitrosonium equivalents, S-nitrosothiols and S-nitroso-proteins in biological systems |
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| US5756540A (en) * | 1995-06-02 | 1998-05-26 | Mcw Research Foundation, Inc. | Methods for in vivo reduction of nitric oxide levels and compositions useful therefor |
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-
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