JP4332206B2 - 海洋生物の人工冬眠誘導方法 - Google Patents

Description

本発明は海洋生物の人工冬眠誘導方法に係り、さらに詳しくは海洋生物を含む海水の温度を段階的に下げながら、このように下がった各段階の温度維持時間を段階的に拡張することを特徴とする人工冬眠誘導方法に関する。

１９８０年代養殖技術の急激な発達に伴って韓国国内でも１９９０年代始めごろから高級養殖魚類の生産が増大されてきており（１９９７年浅海養殖魚類総生産量：３９１２１トン）、所得増大によって活魚の消費も大幅に増大しつつある。ところが、現在韓国国内の活魚を始めとした海洋生物の流通は活魚トラックを用いた低密度輸送技術（全重量の約１５〜２０％）に依存していて、長距離輸送の場合、交通渋滞による輸送時間の遅延などによって魚類の鮮度維持が難しく不味くなる、輸送費用がアップするなどの問題点を抱えている実情がある。

従来、活魚を始めとした海洋生物を運送する方法としては、（１）麻酔輸送法、（２）電気ショック輸送法、（３）冷却水槽輸送法、（４）人工冬眠輸送法などがある。具体的には、韓国登録特許（登録番号：１０−０２３２４０８）は、冷却海水を使った活魚の高密度輸送方法に係り、活魚輸送において海水温度を冷却させる方法であって活魚槽に海水、氷、塩を入れて海水の温度を一般輸送温度より５〜１５℃低く冷却して輸送することを特徴としている。他の韓国登録特許（登録番号：１０−０５３１７２８）は、活イカ輸送保管用氷温海水冷却装置に係り、活イカを氷温状態の低温状態に保管運搬するための氷温海水冷却装置を開示している。もう一つの韓国登録特許（登録番号：１０−００４６１０９）は、活魚輸送保存方法及び装置に係り、活魚の体に傷つかないように一匹ないし数匹ずつ収納する多数の通流孔を設けて動きを抑えられる低温下に置かれることを特徴とする活魚輸送方法を開示している。

しかし、前述したような従来の方法は全て活魚車の水温を下げる方法を基本にしており、このような活魚車を用いて国内外に流通されている冷却水槽輸送法は冷却水槽設備の費用負担と魚種別低温生理特性の不確実性、特殊車両の必要性と長時間運送中海洋生物の斃死の恐れがある。そして、前述した麻酔輸送法は衛生上の安全性の問題及び嫌悪感を引き起こす恐れがあり、電気ショック輸送法は前処理の困難と斃死、肉質の品質低下によって幅広く活用できないとの問題点がある。

韓国特許 １０−０２３２４０８号公報 韓国特許 １０−０５３１７２８号公報 韓国特許 １０−００４６１０９号公報

本発明は前述したような問題点を解決するために案出されたもので、その目的は海洋生物を含む海水の温度を段階的に下げながら、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を所定の時間維持させ、当該下がった各段階の温度で維持させる所定の時間を海洋生物が消費する酸素消費量の変化が大幅に減少するか、酸素消費量の変化が殆んどない時点まで段階的に拡張させた後、これを起点にして前記各段階で海水の温度を一定に維持する時間を段階的に短縮することによって、海洋生物の生存率を長時間維持させるところにある。

すなわち、本発明を通じて海洋生物を人為的に冬眠状態へ誘導させ、当該冬眠状態へ誘導された海洋生物を水のない無水状態（Ｗａｔｅｒｌｅｓｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）のボックスに包装することだけで海洋生物の生存率を長時間維持させようとするところにその目的がある。

本発明の他の目的は水中の生きている全生物を対象にして、既存の活魚輸送方法とは全く違って、生物自体の内因性生体リズムを理解し多段階の温度変化を経ることによって人為的に無水状態へ誘導して、海洋生物の内因性生体リズムを長時間停止させた後、再び元の生体リズムに戻らせる全く新たな技術を提供するところにある。

前述した目的を達成するための本発明に係る海洋生物の人工冬眠誘導方法は、海水に海洋生物を所定の時間維持させる段階と、当該海水の温度を所定の間隔によって段階的に下げながら、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を一定に維持する時間を当該下がった各段階によって段階的に拡張させる段階と、当該海洋生物が消費する酸素消費量の偏差のない海水の温度を起点にして、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を一定に維持する時間を当該下がった各段階によって段階的に短縮させる段階とを含むことが特徴である。

前述したように本発明によれば、海洋生物を含む海水の温度を段階的に下げながら、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を所定の時間維持させ、当該下がった各段階の温度で維持させる所定の時間を、海洋生物が消費する酸素消費量の変化が大幅に減少したり、内因性生体リズムが停止され酸素消費量の変化が殆んどない時点まで段階的に拡張させた後、これを起点にして当該各段階で海水の温度を一定に維持する時間を段階的に短縮することによって、海洋生物の生存率を長時間維持させることができる。

以下、添付した図面に基づき本発明の望ましい実施形態を詳述する。
本発明は海洋生物を人為的に冬眠状態へ誘導するためのもので、海洋生物を含む海水の温度を段階的に下げながら、このように下がった各段階における海水温度維持時間を段階的に拡張することが特徴である。

このため、本発明はまず海水に海洋生物を所定の時間維持させる。すなわち、海洋生物を含む海水を用意する。ここで、海水とは海の水を意味するものであるが、本発明は海水以外に淡水、その他の水を使用することも可能である。以下、説明の容易な理解のために海水を用いることと説明してきたが、本発明では海水以外に淡水及びその他の形態の何れの水を使用することも可能である。

次いで、本発明は前述したように用意された海水の温度を所定の間隔によって段階的に下げながら、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を一定に維持する時間を当該下がった各段階によって段階的に拡張させることを特徴とする。すなわち、当該用意された海水の温度を段階的に下げながら、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を所定の時間維持させ、当該下がった各段階の温度で維持させる一定時間を次第に拡張する。

従来の海洋生物を運搬するための方法は殆んど活魚を始めとした魚類を低温状態に維持させるか、あるいは氷で凍らせる冷却法であった。一方、本発明は水の温度を所定の間隔で下げながら海洋生物を人工冬眠状態へ誘導することが特徴である。例示的に、図１に示したように、当該用意された海水の温度が１３℃であり、この温度で海洋生物を１０分間維持させたならば、この海水の温度を１℃間隔で段階的に下げながら、当該下がった各段階の温度、すなわち１２℃、１１℃、１０℃及び９℃では海洋生物を含む海水の温度を２０分、３０分、４０分及び５０分と次第に拡張する。

本発明は前述したように海水の温度を所定の時間間隔をもって段階的に下げると同時に、このように下がった各段階における海水温度維持時間も段階的に拡張させることが海洋生物に最も効率よく人工冬眠状態へ誘導できることを確認した。もし、一時的に水温を一度に下げると、海洋生物は低温ショックを受けて死亡するようになるので、本発明は水温と時間を段階的に調節して海洋生物を下がった海水温度において適応期間をもたせることが特徴である。

この本発明において、前記海水の温度を所定の間隔によって段階的に下げる際、図１に示したように１℃毎に温度を段階的に下げることができる。また、２℃、３℃またはそれ以上の温度間隔でも次第に温度を下げることができ、この場合は２℃、３℃またはそれ以上の温度間隔に差が出る海水の温度別に温度を一定に維持する時間を異なるものとする。例えば、用意された海水の温度が１３℃であり、この温度で海洋生物を１０分間維持させたとすれば、１１℃では２０分、９℃では３０分にする。さらに、前述したように海洋生物を含む海水の温度を段階的に下げながら各段階における海水温度維持時間を段階的に拡張することは、時間によって海水の温度を明らかに区分できるが、図２に示したように一部時間区間では隣接する２つの海水温度間に重畳する部分が生じることも当然ありうる。

次の段階として、本発明は前述したように海水の温度を段階的に下げながら海水温度維持時間を段階的に拡張した後は、海洋生物が消費する酸素消費量の変化が大幅に減少するか、酸素消費量の変化が殆んどない海水の温度を起点に、当該各段階で海水の温度を一定に維持する時間を段階的に短縮することが特徴である。すなわち、海洋生物の呼吸状態や内因性生体リズムから海洋生物がストレスを最も多く受ける海水温度を把握した後、当該海水温度領域に維持する時間を最も長くすることによって、海洋生物が人工冬眠状態へ誘導されるまでに受けるストレスを最小化しようとすることである。

海水中に存在する海洋生物は海水温度が下がると次第に呼吸が苦しくかつ不規則的になり、よって所定の温度で海洋生物が消費する酸素消費量の変化は大幅に減少したり酸素消費量の変化が殆んどなくなる。これは海洋生物の呼吸生体リズムが著しく変わるか、あるいは呼吸生体リズムが停止されることを意味するもので、この海水温度領域で海洋生物はストレスを最も多く受ける。本発明は所定の温度を基準に海洋生物が消費する酸素消費量の変化が大幅に減少したり、殆んどない、さらには全くない海水温度では維持時間を最も長くし、追って下がった海水温度では海水の温度を一定に維持する時間を段階的に短縮することによって、海洋生物が受けるストレスを最小化しつつ海洋生物を人工的に冬眠状態へ誘導しようとするものである。

ここで、前記所定の温度を基準にして海洋生物が消費する酸素量の変化が大幅に減少したり殆どないということは、段階的に下がった一つの各海水温度で海洋生物が消費する酸素消費量の変化、すなわち酸素消費量の最大値と最小値の偏差（すなわち、振幅）が以前より大きく縮まるかその偏差が微々たることを指す。所定の温度で調べられた海洋生物の酸素消費量の振幅が小さいということは海洋生物の呼吸活動がストレスによって萎縮していることであり、所定の温度で調べられた海洋生物の酸素消費量の振幅が大きいということは海洋生物の活発な呼吸活動を意味し、これは海水に含まれた溶存酸素量の変化でチェックできる。もし、初期に所定の温度を有する海水で第１酸素消費量を有する海洋生物を所定の時間維持させると、当該海水の温度を所定の間隔によって段階的に下げながら、この下がった各段階の温度毎に海水の温度を所定の時間維持させ、当該下がった各段階の温度で維持させる所定の時間を段階的に拡張させることは前述した通りであり、本発明の他の実施形態は当該下がった各段階の温度中、当該海洋生物が消費する酸素消費量が当該第１酸素消費量より３分の２ないし４分の１の量か、あるいは当該海洋生物が消費する酸素消費量の偏差が６．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし０．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内である海水の温度を起点にして、当該下がった各段階の温度で維持させる所定の時間を段階的に短縮することを特徴とする。

本発明は所定の温度で海洋生物が消費する酸素消費量の偏差を把握するため、本発明の実施過程中にまたはその前に予め、海洋生物の呼吸状態を測定する必要があり、本発明はこのような海洋生物の呼吸状態測定過程をさらに含める。例示的に、海洋生物を含む海水の溶存酸素量を測定することによって当該海洋生物の酸素消費量が分かり、本発明では特に海洋生物の呼吸状態を測定できる自動呼吸測定装置を用いることもできる。

海洋生物の呼吸状態を調べる方法は別に制限されるものではないが、本発明者によって発明され特許を受けた自動呼吸測定装置（韓国公開特許：１０−２００３−００７５９３１）が用いられる。これは図３に示したように水が循環する閉ループよりなるメイン循環ループと、このメイン循環ループ上に連通して設置され、被実験生物が収容される生物貯蔵槽と、当該メイン循環ループに並列で連結され当該メイン循環ループに酸素が飽和溶存された補充水を供給する補助循環ループ、及び当該メイン循環ループ内の溶存酸素量を測定して当該補助循環ループをメイン循環ループと連通させる演算制御部を含み、溶存酸素濃度と大気圧を自動で補正して生物の呼吸状態を長時間測定できるようになったものである。これを用いて海洋生物の呼吸状態を測定することに関する詳細な説明は当該発明され特許を受けた自動呼吸測定装置に対する説明に代えられる。その他本技術分野の当業者に知られている他の方法や装置を使って海洋生物の呼吸状態を測定することも本発明の範疇に含まれることは明白である。

また、本発明では前述したように測定された海洋生物の呼吸状態結果から、当該海洋生物の内因性生体リズムを調べることもできる。当該海洋生物の内因性生体リズムは光がなく、温度が一定であり、塩分が一定な状態の実験条件下で得られるのが望ましい。前述したような実験条件を有する実験容器内で、海洋生物により消費される溶存酸素量の変化状態を連続的に自動測定し、所定の時間で変化した溶存酸素量の平均値を把握して、当該海洋生物の内因性生体リズムを把握する。ここで水中の溶存酸素量に大きな影響を与える大気圧、水温、塩分度の変化は必要に応じて自動補正できる。例示的に、当該海洋生物の呼吸状態結果から当該海洋生物の代謝活性が１周期リズムを有するか、あるいは潮汐周期リズムを有するかが分かる。すなわち、図４は自動呼吸測定装置を用いて養殖場で飼育したオヒョウを対象にして６日間連続測定されたオヒョウの呼吸生理活性資料グラフであり、このように連続測定された資料を時系列周期分析プログラム用いて前述した海洋生物の周期を分析するものである。すると、図５のような１周期リズム形態の強い結果が得られる。

図６は自然状態で採捕されたオヒョウを対象にして連続呼吸生理活性を測定した結果であり、図７はこれを周期分析プログラムで分析して自然棲息地形態の潮汐周期リズムが海洋生物の体内に内在されていることを示す。海洋生物の呼吸状態結果から海洋生物の内因性生体リズムを調べることは所定のコンピュータシステムまたはプログラムを用いることができ、さらに本技術分野において幅広く知られている他の方法を用いて海洋生物の内因性生体リズムを調べることも可能である。

前述したとおり、本発明は海洋生物の呼吸状態や内因性生体リズムから海洋生物が最も多くストレスを受ける海水温度を把握し、このような海水温度区間で海洋生物を維持させる時間を最も延ばすことが特徴であり、この特徴は海洋生物が１周期を有するものや潮汐周期を有するものや、あるいは１周期と共に潮汐周期を有するものにも、同じく適用されうる。

図８は本発明により海洋生物が消費する酸素消費量の変化が大幅に減少するか、酸素消費量の変化の殆んどない時点の海水温度を決定するためのもので、海水温度による海洋生物の平均酸素消費量変化を例示的に示したグラフであり、これは２４時間の１周期リズムを有するオヒョウを例として挙げた。

これに示したように、海洋生物の平均酸素消費量の変化は海水の温度が次第に段階的に下がることによって減少することが確認でき、実際に所定の温度で海洋生物が消費する酸素量偏差、すなわち一つの温度を基準にした時、海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値の差も海水の温度が下がることによって減少する。これは海水の温度が下がることによって海洋生物の動きが活発にならず、よって海洋生物が消費する酸素消費量の変化も減少したり殆んど無くなるからである。

海洋生物が消費する酸素消費量の変化が減少したり殆んど無くなることは海洋生物の内因性生体リズムに変化があることを意味し、このような状態が発生する海水の温度は図８に示したように、約１３℃ほどの海水を用いる場合、オヒョウの呼吸生理代謝活動が正常状態で弱くなる１０℃付近（図８のＡ）と、水温減少によって呼吸生体リズムが著しく変わる６℃付近（図８のＢ）、内因性呼吸生体リズムが停止する４℃付近（図８のＣ）、それから水温がこれ以上減少するとしても新陳代謝変化のない２℃付近（図８のＤ）となる。

これにより、本発明の他の実施形態は海水の温度を段階的に下げる際に、１４℃ないし１２℃を第１温度にし、７℃ないし５℃を第２温度にし、５℃ないし３℃を第３温度にすることができる。望ましくは１３℃を第１温度にし、６℃を第２温度にし、４℃を第３温度にするのがさらに好適である。それで、１４℃ないし１２℃から５℃ないし３℃まで海水の温度を下げる場合に、当該第１温度から第２温度と第３温度を順を経ながら３段階で海水の温度を下げることができる。または、１４℃ないし１２℃を第１温度にし、５℃ないし３℃を第２温度にしてこの順を経て２段階で海水の温度を下げることも可能である。

すなわち、本発明の一実施形態である海水の温度を所定の間隔によって２段階で下げる際は、まず温度が第１温度である海水で第１酸素消費量を有する海洋生物を当該第１温度を有する海水で第１時間の間維持させ、次いで当該海水の温度を次第に下げながら第２温度では当該海水の温度を第２時間の間維持させることを特徴とする海洋生物の人工冬眠誘導方法である。ここで、当該第２温度は当該海洋生物の酸素消費量が当該第１酸素消費量の３分の１ないし４分の１となる少ない第２酸素消費量を有する温度であり、当該第２時間は当該第１時間の１０倍ないし１００倍長い時間を意味する。

これは、後述する本発明の実施例に含まれた表１及び図１を参照すれば、例えば１３℃で１２．２ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の第１酸素消費量を有する海洋生物を１０分間維持させ、次いで当該海水の温度を次第に下げながら、海洋生物の酸素消費量が０．１ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１になり、この内因性呼吸生体リズムが停止される４℃では海水の温度をこの温度で約２６０分程度の間維持させる。このように海洋生物の酸素消費量が当該第１酸素消費量の３分の１ないし４分の１となる少ない第２温度で前記第１時間の１０倍ないし１００倍長い第２時間の間海洋生物を維持させる場合、当該第２温度は海洋生物の酸素消費量の変化が殆んどないため、ストレスが最も多い部分であるが、本発明により最も長時間維持されるので、海洋生物を人工冬眠状態へ誘導するまでに与えるストレスとしては最も少なくなる。

このような本発明の他の実施形態である海水の温度を所定の間隔によって３段階で下げる際は、前述したように、温度が第１温度の海水で第１酸素消費量を有する海洋生物を当該第１温度を有する海水で第１時間の間維持させ、当該海水の温度を次第に下げながら第２温度では当該海水の温度を第２時間の間維持させ（当該第２温度は前記海洋生物の酸素消費量が当該第１酸素消費量より３分の２ないし５分の２となる少ない第２酸素消費量を有する温度であり、当該第２時間は当該第１時間より１０倍ないし２５倍長い時間である）、当該海水の温度を次第に下げながら第３温度では当該海水の温度を第３時間の間維持させる（当該第３温度は当該海洋生物の酸素消費量が当該第１酸素消費量の３分の１ないし４分の１となる少ない第３酸素消費量を有する温度であり、当該第３時間は当該第１時間の２６倍ないし１００倍長い時間である）ことを含むことも可能である。

これは本発明の実施例に含まれた表１及び図１を参照すれば、１３℃で１２．２ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の第１酸素消費量を有する海洋生物を１０分間維持させ、海洋生物の平均酸素消費量が９．８ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１になりながら内因性呼吸生体リズムが著しく変わる６℃では海水の温度をこの温度で１２０分間維持させ、海洋生物の平均酸素消費量が６．２ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１になりながら内因性呼吸生体リズムが停止（振幅差は０．１ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１）される４℃では海水の温度をこの温度で約２６０分間維持させる。この場合、前記第２温度は海洋生物の酸素消費量の変化が大幅に減少する部分であり、これを前記第３温度前に一定時間維持させることによって、海洋生物の生存率をさらに長時間延ばすことができる。

一方、本発明のさらに他の実施形態である海水の温度を所定の間隔によって２段階で下げる際は、前述したように第１温度を有する海水に海洋生物を第１時間の間維持させ、次いで当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値の差、すなわち酸素消費生体リズム振幅が１．１ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし０．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内の第２温度まで当該海水の温度を次第に下げ、この海水を当該第２温度で当該第１時間より１０倍ないし１００倍の長い時間維持させる段階を含むものである。本発明の実施例に含まれた表１及び図１を参照すれば、当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値の差が１．１ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし０．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内の第２温度は約４．５℃ないし１℃の範囲内（好ましくは４℃）であり、この場合当該第２温度は海洋生物の酸素消費量の変化が殆んどないため、ストレスが最も多い部分であるが、本発明により最も長時間維持されるので、海洋生物を人工冬眠状態へ誘導するまでに与えるストレスとしては最も少なくなる。

このような本発明のさらに他の実施形態である海水の温度を所定の間隔によって３段階で下げる際は、前述したように、第１温度を有する海水に海洋生物を第１時間の間維持させ、当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値の差（酸素消費生体リズムの振幅）が６．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし１．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内の第２温度まで当該海水の温度を次第に下げ、この海水を当該第２温度で当該第１時間より１０倍ないし２５倍長い第２時間の間維持させ、当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値の差が１．１ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし０．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内の第３温度まで当該海水の温度を次第に下げ、この海水を当該第３温度で当該第１時間より２６倍ないし１００倍長い第３時間の間維持させるものである。本発明の実施例に含まれた表１及び図１を参照すれば、当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値の差が６．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし１．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内の第２温度は約７．０℃ないし４．５℃の範囲内であり、この場合当該第２温度は海洋生物の酸素消費量の変化が大幅に減少する部分であり、これを当該第３温度前に所定の時間維持させることによって、海洋生物の生存率をさらに長時間延ばすことができる。

なお、前述したような本発明の色々な実施形態において前記海水の温度を次第に下げる場合において、前述したように当該海水の温度を所定間隔によって段階的に下げながら、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を一定に維持する時間を当該下がった各段階によって段階的に拡張させることが望ましい。

また、前述したような本発明の色々な実施形態において、前記海洋生物はオヒョウその他活魚であることが最も好適である。

海水の温度と維持時間を調節して海洋生物を人工冬眠状態へ誘導した後は、人工冬眠状態へ誘導された海洋生物を外部との熱遮断の可能なボックスに入れ、当該海洋生物の表面に水に濡らした蓋をして湿度を一定に維持させた後、当該ボックスを密封して人工冬眠状態へ誘導された海洋生物を運搬することができる。

海洋生物が含まれるボックス内に外気または熱が流入されれば、ボックス内部の温度が上がって、人工冬眠状態へ誘導された海洋生物が早く目を覚まして死んでしまうので、本発明ではこのような人工冬眠状態を所定の時間中持続させるために外部の熱または空気流入が遮断されるボックスを用いた。当該ボックスの内部温度は別に制限されないが、１℃ないし２℃の範囲内の内部温度に維持されるのが、海洋生物の人工冬眠状態の維持に最適であることを確認した。

また、本発明に係る前記海洋生物は人為的に冬眠状態へ誘導されたので水が要らないが、当該海洋生物の生存に必要な湿度維持のために水に濡らした蓋を用いた。このとき、当該海洋生物の表面に水に濡らした韓紙を被せて一定に９０％以上の湿度に維持させるのが最も望ましかった。

前述したような本発明による場合、海洋生物の内因性生体リズムを把握して当該海洋生物を人為的に冬眠状態へ誘導することができ、これにより無水状態（ｗａｔｅｒｌｅｓｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）でボックスに包装することだけで海洋生物の生存率を長時間維持させることができる。

その後、前記人工冬眠状態が維持された海洋生物を前記密封されたボックスと共に別の場所に移した後、当該ボックスを開封して７℃ないし９℃の範囲内の温度を有する水に当該海洋生物を放流するのが望ましい。この本発明は人工冬眠状態へ誘導された海洋生物を運送するためのものであって、特に当該密封されたボックスに入れて運送するものであり、運送した後は海洋生物のサイズによって異なるが、７℃ないし９℃の範囲内の温度を有する水に放流すれば、短くは数秒ないし１０分ほど後には人工冬眠状態から覚めるようになる。

この本発明は水中に生きている全生物を対象にして、既存の活魚輸送方法などとは全く異なるように、生物自体の内因性生体リズムを理解し、多段階の温度変化を経ることによって人為的に冬眠状態へ誘導して、海洋生物の内因性生体リズムを長時間停止させた後、再び元の生体リズムに戻らせる全く新たな技術が提供可能である。

以下、本発明の望ましい一実施形態を図面を参照して詳述する。本発明は下記の実施例によりさらによく理解でき、下記の実施例は本発明の例示目的のためのものであり、特許請求の範囲によって限定される保護範囲を制限しようとするものではない。

本実験で使用されたオヒョウは韓国の安山所在の水産市場で済州道産を購入して使用した。総実験魚は２９０個体であって、従来の方法によってビニル封筒または新聞紙包装での運搬に６３個体、そして本発明に係る人工冬眠誘導技術（無水運搬包装技術を用いる）に２２７個体を使った。

オヒョウの呼吸活動と内因性生体リズムの分析： まず、海洋生物の内因性生体リズムを用いた人工冬眠状態を理解するためには対象魚類がどのような内因性生体リズムを持って代謝活性するのかを分析するのが重要である。

魚類の内因性生体リズム測定は実験条件が大事である。このような実験条件は最小限２つ以上の外部の環境条件が一定状態を維持してこそ内因性生体リズムとして認められうる（ｐａｌｍｅｒ１９９５）。魚類は目があるので、光の影響によってメラニン色素に影響を及ぼして魚類の行動や生理活動に影響を及ぼす恐れがあって内因性生体リズムを観察し難い。

本発明では光が遮断され水温を一定（図４：１９℃、図６：２１．５℃）に維持できるＢＯＤ ｉｎｃｕｂａｔｏｒ（ＶＳ１２０３Ｐ５Ｎ、Ｖｉｓｏｎ Ｃｏ．、Ｓｅｏｕｌ、Ｋｏｒｅａ）を使用した。養殖産オヒョウの呼吸活動による内因性生体リズム分析は本発明者により開発された図３に示す自動呼吸測定器（Ａｕｔｏｍａｔｉｃ Ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｔ−Ｆｌｏｗ−ｒｅｓｐｉｒｏｍｅｔｅｒ：ＡＩＦＲ）を用いて測定した。ＡＩＦＲで１３５時間の間連続して測定された呼吸測定資料は所定のコンピュータプログラム（ＫａｌｅｉｄａＧｒａｐｈｙ、Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｅｓｓｅｘ Ｊｕｎｃｔｉｏｎ、ＶＴ、ＵＳＡ）を用いて最小二乗法による２％移動平均で示した（図４、図６）。オヒョウの呼吸活動による内因性生体リズム周期分析は最大均質スペクトル分析（Ｍａｘｉｍｕｍ Ｅｎｔｒｏｐｙ Ｓｐｅｃｔｒａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ：ＭＥＳＡ）プログラムを用いた。生体リズムの周期分析のためには一定時間間隔の連続的な資料が必要であり、当該ＡＩＦＲで測定された資料を１０分毎の数値を平均値に変換させた後ＭＥＳＡプログラムで分析して、図５の周期分析資料が得られた。このように養殖産オヒョウは２４時間の１周期リズムに殆ど一致した２４．８時間の１周期リズムを示した（図７）。しかし、海に棲息する自然産魚類や海洋生物をＡＩＦＲで連続して呼吸を観察すれば図６のように全く異なる形態に現れた。図６は潮間帯に棲息する蜆（Ｍａｎｉｌａ Ｃｌａｍ、Ｒｕｄｉｔａｐｅｓ ｐｈｉｌｉｐｐｉｎａｒｕｍ）の呼吸を２６０時間中ＢＯＤ ｉｎｃｕｂａｔｏｒ（暗い状態と一定水温２１．５℃）で連続的にＡＩＦＲで測定した結果である。２％の移動平均で分析したところ、１日に２つのピークが強く現れ、このような資料をＭＥＳＡで分析した結果、月の影響を受ける１２．２時間の潮汐周期の影響が強いことが分かり、２５．１時間の１周期リズムも観察された。当該蜆の内因性生体リズム実験において理解できるように、海洋生物は棲息地によって生体リズムが異なることが分かる。ＡＩＦＲで海洋生物の呼吸を長時間測定すれば海洋生物の内因性生体リズムを観察することができ、これは海洋生物を人工冬眠状態へ誘導させるのに大事な基礎資料になりうる。

海水温度低下によるオヒョウの平均酸素消費量の変化： 前述した実施例１によるオヒョウの呼吸活動と内因性生体リズム分析方法及び分析資料に基づき、本発明に係る人工冬眠誘導装置を用いて、海洋生物を含む海水の温度を下げながら当該海洋生物が消費する酸素消費量の変化が大幅に減少したり、酸素消費量の変化の殆んどない時点の海水温度を決めた。

その結果、図８に示したように、オヒョウを対象にする場合、温度１３℃の海水に保管していたオヒョウを水温１０℃に下げても生存には全く問題なかった。それで、本発明者らは図９に示したように、当該海水の温度を１３℃で１０分間維持させ、１２℃で２０分、１１℃で３０分ほどずつ水温を下げることによって時間を増加させた。水温６℃では開始時の１３℃における露出時間（１０分）より１２倍ほど多い１２０分、５℃では１８０分、生体リズムが停止される水温４℃ではストレスを最小化するために２６０分で最長の露出をした。そして、海水の温度を下げながら次第に露出時間を短縮した。すなわち、当該海水を３℃で１８０分、２℃で１２０分、１℃で２０分に露出時間を短縮しつつ海水内にオヒョウが維持されるようにした。最終的には氷点下（−）０．２℃で１５分間露出した。

このように、海水の温度を段階的に下げながらこのように下がった海水の温度によって海水の温度維持時間を段階的に増加させることの一例を図９に示した。そして、このような水温変化は人工冬眠誘導装置のコンピュータプログラムにより自動で調節した。反復実験結果、人工冬眠誘導時点を１３℃程度で誘導するのが海洋生物のストレスを最小にし、総冬眠誘導時間は約２０時間ほどかかることを確認した。

また、図８に示した海水温度による海洋生物の平均酸素消費量変化グラフに基づき、一定基準温度でオヒョウが消費する酸素量の最大値と最小値及びこれによる酸素消費量変化振幅、それから海水の温度区間別海洋生物の平均酸素消費量変化グラフの傾きを下記の表１にまとめた。

前記表１に示したように、オヒョウの酸素消費量振幅による傾きは水温が１３℃から１０℃に下がる時１．７７であった。海水の温度範囲が１０℃から８℃、８℃から６℃にそれぞれ２℃ずつ下がる時は当該傾きが０．２５と同一であり、これは１３℃から１０℃に下がる時より小さい値であり、これにより海水の温度が１０℃から６℃に下がる区間ではオヒョウの呼吸や代謝活動に大きな変化がないと判断される。しかし、６℃から４℃に下がる区間では酸素消費量振幅の傾きが２．７であり大きかったので、このような水温範囲では代謝活動に大きな変化があることを確認した。海水の温度が４℃以下の場合は酸素消費量が殆んど一定（６．１ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１）であり、傾きは０．０５であって、水温変化にも酸素消費量の変化は殆んどなかった。

活魚とオヒョウを用いた人工冬眠の実験： 引き続き、前述したように人工冬眠状態へ誘導された活魚とオヒョウを内部温度が５℃に維持されるボックスに入れ、その表面に全体を水に濡らした韓紙を被せた後、当該ボックスを密封して保管した。保管時間の経過によって当該ボックス内に存する活魚とオヒョウの無水状態がどれぐらい長時間維持されるのかを記録し、当該活魚とオヒョウの生存率を把握し、その結果は下記の表２に示した通りである。

前述した表２に示したように、本発明に係る人工冬眠誘導技術と無水運搬包装技術が適用された活魚とオヒョウは無水状態維持時間が従来の方法より長く、活魚とオヒョウの生存率は従来の方法によるものより著しく優れた。

以上、本発明を特定の望ましい実施例に関連して示しかつ説明したが、これは特許請求の範囲により設けられる本発明の技術的特徴や分野を逸脱しない範囲内で本発明が多様に改造及び変化されうることは当業者にとって明らかである。

以上述べたように、本発明によれば海洋生物を人為的に冬眠状態へ誘導し、これにより水のない無水状態（ｗａｔｅｒｌｅｓｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）で当該冬眠状態へ誘導された海洋生物を紙ボックスに包装することだけでも海洋生物の生存率を長時間維持させることができる。本発明は水中の全生物を対象にして、既存の活魚輸送方法などとは全く異るように、生物自体の内因性生体リズムを理解し多段階の温度変化を経ることによって人為的に無水状態へ誘導して、海洋生物の内因性生体リズムを長時間停止させた後、再び元の生体リズムに戻らせる全く新たな技術を提供することができる。

本発明により段階的に下がった海水の温度によって温度維持時間を段階的に増加させる第１例を説明するための模式図である。 本発明により段階的に下がった海水の温度によって温度維持時間を段階的に増加させる第２例を説明するための模式図である。 本発明により海洋生物の酸素消費量を測定できる自動呼吸測定装置の一例を示す構成図である。 本発明により測定された養殖産海洋生物の呼吸状態及びこれより得られた１周期リズムを例示的に示すグラフである。 本発明により測定された養殖産海洋生物の呼吸状態及びこれより得られた１周期リズムを例示的に示すグラフである。 本発明により測定された自然産海洋生物の呼吸状態及びこれより得られた潮汐周期リズムを例示的に示すグラフである。 本発明により測定された自然産海洋生物の呼吸状態及びこれより得られた潮汐周期リズムを例示的に示すグラフである。 本発明により海洋生物が消費する酸素消費量の変化が大幅に減少したり、酸素消費量の変化が殆んどない時点の海水温度を決定するための海水温度による海洋生物の酸素消費量の変化を例示的に示すグラフである。 本発明により段階的に下がった海水の温度によって段階的に増加させる温度維持時間の一例を説明するためのグラフである。

Claims (10)

1. 海水に海洋生物を所定の時間維持させる段階と、
   当該海水の温度を所定の間隔によって段階的に下げながら、この下がった各段階の温度毎に海水の温度を一定に維持する時間を、当該下がった各段階によって段階的に拡張させる段階と、
   当該海洋生物が所定の温度で消費する平均酸素消費量の偏差のない海水の温度を起点にして、当該下がった各段階の温度毎に海水の温度を一定に維持する時間を、当該下がった各段階の温度によって段階的に短縮する段階とを含む海洋生物の人工冬眠誘導方法。
2. 所定の温度である海水で第１酸素消費量を有する海洋生物を所定の時間維持させる段階と、
   当該海水の温度を所定の間隔によって段階的に下げながら、この下がった各段階の温度毎に海水の温度を所定の時間維持させ、当該下がった各段階の温度で維持させる所定の時間を段階的に拡張させる段階と、
   当該下がった各段階の温度のうち所定の温度において、当該海洋生物が消費する平均酸素消費量が当該第１酸素消費量より３分の２ないし４分の１の少なさか、あるいは当該海洋生物が消費する酸素消費量の偏差が６．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし０．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内の海水の温度を起点にして、当該下がった各段階の温度で維持させる所定の時間を段階的に短縮する段階とを含む海洋生物の人工冬眠誘導方法。
3. 海水の温度を所定の間隔によって３段階で下げる海洋生物の人工冬眠誘導方法であって、
   温度が第１温度の海水で第１酸素消費量を有する海洋生物を、当該第１温度を有する海水で第１時間の間維持させる段階と、
   当該海水の温度を次第に下げながら第２温度では当該海水の温度を第２時間維持させる段階（当該第２温度は当該海洋生物の酸素消費量が当該第１酸素消費量より３分の２ないし５分の２少ない第２酸素消費量を有する温度であり、当該第２時間は当該第１時間より１０倍ないし２５倍長い時間である）と、
   当該海水の温度を次第に下げながら第３温度では当該海水の温度を第３時間維持させる段階（当該第３温度は当該海洋生物の酸素消費量が当該第１酸素消費量の３分の１ないし４分の１の少ない第３酸素消費量を有する温度であり、当該第３時間は当該第１時間の２６倍ないし１００倍長い時間である）とを含む海洋生物の人工冬眠誘導方法。
4. 海水の温度を所定の間隔によって２段階で下げる海洋生物の人工冬眠誘導方法であって、
   温度が第１温度の海水で第１酸素消費量を有する海洋生物を、当該第１温度を有する海水で第１時間維持させる段階と、
   当該海水の温度を次第に下げながら第２温度では当該海水の温度を第２時間維持させる段階（当該第２温度は当該海洋生物の酸素消費量が当該第１酸素消費量の３分の１ないし４分の１の小さい第２酸素消費量を有する温度であり、当該第２時間は当該第１時間の１０倍ないし１００倍長い時間である）とを含む海洋生物の人工冬眠誘導方法。
5. 海水の温度を所定の間隔によって３段階で下げる海洋生物の人工冬眠誘導方法であって、
   第１温度を有する海水に海洋生物を第１時間維持させる段階と、
   第２温度（当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値との差が６．０ｍｌＯ _２ ｋｇ ^−１ ＷＷｈ ^−１ ないし１．０ｍｌＯ _２ ｋｇ ^−１ ＷＷｈ ^−１ の範囲内となる一定の温度）まで当該海水の温度を次第に下げ、当該海水を当該第２温度で当該第１時間より１０倍ないし２５倍長い第２時間の間維持させる段階と、
   第３温度（当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値との差が１．１ｍｌＯ _２ ｋｇ ^−１ ＷＷｈ ^−１ ないし０．０ｍｌＯ _２ ｋｇ ^−１ ＷＷｈ ^−１ の範囲内となる一定の温度）まで当該海水の温度を次第に下げ、当該海水を当該第３温度で当該第１時間より２６倍ないし１００倍長い第３時間の間維持させる段階とを含む海洋生物の人工冬眠誘導方法。
6. 海水の温度を所定の間隔によって２段階で下げる海洋生物の人工冬眠誘導方法であって、
   第１温度を有する海水に海洋生物を第１時間の間維持させる段階と、
   第２温度（当該海洋生物が消費する酸素量の最大値と最小値との差が１．１ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１ないし０．０ｍｌＯ_２ｋｇ^−１ＷＷｈ^−１の範囲内となる一定の温度）まで当該海水の温度を次第に下げ、当該海水を当該第２温度で当該第１時間より１０倍ないし１００倍長い時間の間維持させる段階とを含む海洋生物の人工冬眠誘導方法。
7. 前記海水の温度を次第に下げることは、
   前記海水の温度を所定間隔によって段階的に下げながら、この下がった各段階の温度毎に海水の温度を一定に維持する時間を当該下がった各段階によって段階的に拡張させることを特徴とする請求項３ないし請求項６のいずれか１項に記載の海洋生物の人工冬眠誘導方法。
8. 前記第１温度は１４℃ないし１２℃であり、前記第２温度は７℃ないし５℃であり、前記第３温度は５℃ないし３℃であることを特徴とする請求項３または請求項５に記載の海洋生物の人工冬眠誘導方法。
9. 前記第１温度は１３℃であり、前記第２温度は４℃であることを特徴とする請求項４または請求項６に記載の海洋生物の人工冬眠誘導方法。
10. 前記海洋生物は活魚またはオヒョウであることを特徴とする請求項１ないし請求項６のいずれか１項に記載の海洋生物の人工冬眠誘導方法。

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