JP5244810B2

JP5244810B2 - 合成ペプチドアミド

Info

Publication number: JP5244810B2
Application number: JP2009536339A
Authority: JP
Inventors: シュタインガート，クラウディオ，ディー．; メンザギ，フレデリック; ジアング，グアンチェン; アレキサンダー，ロベルタ，ヴェッザ; スエイラス−ディアス，ハビエル; スペンサー，ロバート，エイチ．; シャルマース，デレク，ティー．; ルオ，チョン
Original assignee: カラセラピューティクスインコーポレイテッド
Priority date: 2006-11-10
Filing date: 2007-11-12
Publication date: 2013-07-24
Anticipated expiration: 2027-11-12
Also published as: WO2008057608A3; ZA200903054B; US8217007B1; US20150197545A1; LTPA2022522I1; IL197923A0; US10793596B2; FR22C1054I1; WO2008057608A2; RU2009121297A; KR20090085096A; CN101627049A; JP2010509343A; CY2022032I1; US20190241610A1; FR22C1054I2; EP2064228B1; WO2008057608A8; BRPI0718651B1; FIC20220043I1

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２００６年１１月１０日に出願された米国仮特許出願第６０／８５８，１０９号ならびに、２００７年５月１０日に出願された米国仮特許出願第６０／９２８，５５０号の優先権の利益を主張するものであり、その内容全体を明示的に本明細書に援用する。

技術分野
本発明は、Ｄ−アミノ酸をペプチド鎖に導入した合成ペプチドアミドに関し、特に、κオピオイド受容体アゴニストである合成ペプチドアミドならびに、予防薬および治療薬としてのその使用方法に関する。

背景
κオピオイド受容体アゴニストを投与することで、多種多様な疾患および症状の治療または予防に介入するための標的として、κオピオイド受容体が提案されている。たとえば、齧歯類の糖尿病性神経障害におけるκ受容体アゴニストであるアシマドリンの薬効について説明している、Jolivalt et al., Diabetologia, 49(11):2775-85;Epub Aug. 19, 2006)ならびに、ラットにおける神経因性疼痛の絞扼性神経損傷（ＣＣＩ）モデルでのκアゴニストU-50,488の薬効と、その作用をオピオイドアンタゴニストであるナロキソンで遮断することについて説明している、Bileviciute-Ljungar et al., Eur. J. Pharm. 494:139-46 (2004)を参照のこと。これらの観察結果は、糖尿病性神経因性疼痛、ウイルスによる神経因性疼痛、化学療法後神経因性疼痛の治療に、κオピオイド受容体アゴニストを用いることを裏付けるものである。月経困難症の生理痛や子宮内膜症などの婦人科領域での症状をはじめとする内臓痛の治療または予防にκ受容体アゴニストを用いることが、概説されている。たとえば、Riviere, Br. J. Pharmacol. 141:1331-4 (2004)を参照のこと。

κオピオイド受容体アゴニストは、痛覚過敏をはじめとする痛みの治療用としても提案されている。痛覚過敏は、局部組織損傷（擦過傷、火傷）に伴う末梢感覚神経終末環境の変化によって引き起こされると考えられている。組織損傷や炎症が生じると、多モード侵害受容器（Ｃ線維）および高閾値機械受容器の興奮性が大幅に増す場合がある(Handwerker et al. (1991) Proceeding of the VI^th World Congress on Pain, Bond et al., eds., Elsevier Science Publishers BV, pp. 59-70; Schaible et al. (1993) Pain 55:5-54)。痛覚過敏の背景には、こうした興奮性増大・感覚鈍麻の過大反応があると考えられており、そこでは刺激に対する過大反応の結果が疼痛反応となる。受傷後の疼痛状態における痛覚過敏状態の重要性が繰り返し示されており、これが受傷後／炎症性疼痛状態の大部分を占めているように見える。たとえば、Woold et al. (1993) Anesthesia and Analgesia 77:362-79; Dubner et al. (1994) In, Textbook of Pain, Melzack et al., eds., Churchill-Livingstone, London, pp. 225-242を参照のこと。

心血管疾患を予防および治療するための標的として、κオピオイド受容体が提案されている。たとえば、Wu et al. "Cardioprotection of Preconditioning by Metabolic Inhibition in the Rat Ventricular Myocyte - Involvement of kappa Opioid Receptor"(1999) Circulation Res vol. 84: pp. 1388-1395を参照のこと。また、Yu et al. "Anti-Arrhythmic Effect of kappa Opioid Receptor Stimulation in the Perfused Rat Heart: Involvement of a cAMP-Dependent Pathway"(1999) J Mol Cell Cardiol. vol. 31(10): pp. 1809-1819を参照のこと。

κオピオイド受容体アゴニストでの治療によって、こうした神経変性または神経細胞死を伴う疾患や症状の発症または進行を予防するか、あるいは最低でも遅らせることが可能であることが明らかになっている。このように成果が改善されるのは、κオピオイド受容体アゴニストによる神経保護がゆえのことであると考えられる。たとえば、Kaushik et al. "Neuroprotection in Glaucoma"(2003) J. Postgraduate Medicine vol. 49(1): pp. 90-95を参照のこと。

免疫細胞にκオピオイド受容体が存在する(Bidlak et al., (2000) Clin. Diag. Lab. Immunol. 7(5):719-723)ことが、κオピオイド受容体アゴニストの阻害作用と関連しており、これがＨＩＶ−１の発現を抑制することが明らかになっている。Peterson PK et al., Biochem Pharmacol. 2001, 61(19):1145-51を参照のこと。

Walker, Adv. Exp. Med. Biol. 521:148-60 (2003)が、変形性関節炎、関節リウマチ、炎症性腸疾患および湿疹を治療するためのκアゴニストの抗炎症特性を評価した。また、κアゴニストU-50,488によって疼痛を抑え、フロインドアジュバント関節炎での変性を減らすことがBileviciute-Ljungar et al., Rheumatology 45:295-302 (2006)によって説明されている。

尿毒症性掻痒症やアヘンによる掻痒症の治療にκアゴニストであるTRK-820を用いることが、Wikstrom et al., J. Am. Soc. Nephrol. 16:3742-7 (2005)によって説明されており、サルのでのモルヒネによる掻痒症におけるU-50, 488の薬効がKo et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 305:173-9 (2003)によって説明されている。

κアゴニストを含む末梢オピオイドを胃腸病の治療に適用することについても、幅広く概説されている。過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、腸閉塞、機能性消化不良をはじめとする消化器疾患の治療にオピオイドを使用することについては、たとえば、Lembo, Diges. Dis. 24:91-8 (2006)を参照のこと。

眼炎症や緑内障をはじめとする眼科疾患にもκオピオイドで対応できることが明らかになっている。眼内圧を下げる上での強力なκオピオイド受容体アゴニストであるブレマゾシンの役割と、ノルビナルトルフィミン（ｎｏｒＢＮＩ）である原型的(prototypical)κオピオイド受容体アンタゴニストによってこの作用を阻止することについて説明している、Potter et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 309:548-53 (2004)ならびに、Dortch-Carnes et al., CNS Drug Rev. 11(2):195-212 (2005)を参照のこと。Gamacheに付与された米国特許第６，１９１，１２６号明細書には、眼の痛みの治療にκオピオイドアゴニストを用いることが開示されている。さらに、κオピオイドアゴニストの投与によって耳の痛みも治療可能であることが示されている。同じくGamacheに付与された米国特許第６，１７４，８７８号明細書を参照のこと。

κオピオイドアゴニストは、腎臓による水分排泄を促し、尿中ナトリウムの排泄量を減らす（すなわち、自由水利尿とも呼ばれる選択的水利尿を発生させる）。すべてではないが多くの研究者らが、これを脳下垂体からのバソプレシン分泌が抑制されることによる効果であるとしている。中枢作用性κオピオイドと末梢性選択的κオピオイドらしきもの(purportedly)とを比較する研究では、血液脳関門内のκオピオイド受容体がこの作用の媒介を担っているという結論に至った。他の研究者らは、ノシセプチン受容体で末梢的に作用するノシセプチンペプチドまたは荷電ペプチドコンジュゲートを用いて低ナトリウム血症を治療することを提案している。これは、κオピオイド受容体と関連しているが、κオピオイド受容体とは異なるものである。(D. R. Kapusta, Life Sci., 60:15-21, 1997)（米国特許第５，８４０，６９６号明細書）。米国特許出願公開第２００６００５２２８４号明細書。

発明の概要
本発明は、以下の式Ｉの式で表される合成ペプチドアミドならびに、式Ｉの合成ペプチドアミドの立体異性体、立体異性体混合物、プロドラッグ、薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、酸性塩水和物、Ｎ−オキシドおよび同形結晶形態を提供するものである。

式Ｉでは、Ｘａａ_１は、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ａ）（Ａ’）（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３カルボン酸、Ｄ−ｔｅｒｔ−ロイシン、Ｄ−ネオペンチルグリシン、Ｄ−フェニルグリシン、Ｄ−ホモフェニルアラニンまたはβ（Ｅ）Ｄ−ＡｌａのいずれであってもよいＮ末端アミノ酸を示し、式中、各（Ａ）および各（Ａ’）は、−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＮＯ_２、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２から独立に選択されるフェニル環置換基であり、式中、各（Ｅ）は、以下の置換基すなわち、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル、チエニル、チアゾリルから独立に選択される。

Ｘａａ_２は、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、３，４−ジクロロ−Ｄ−Ｐｈｅ、（Ａ）（Ａ’）（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１−ナフチルアラニン、Ｄ−２−ナフチルアラニン、Ｄ−Ｔｙｒ、（Ｅ）Ｄ−ＡｌａまたはＤ−Ｔｒｐのいずれであってもよい第２のアミノ酸であり、式中（Ａ）、（Ａ’）および（Ｅ）は各々独立に、（Ａ）、（Ａ’）および（Ｅ）の各々について上記にて列挙した置換基から選択される。

Ｘａａ_３は、Ｄ−ノルロイシン、Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｅ）Ｄ−Ａｌａ、Ｄ−Ｌｅｕ、（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−ホモロイシン、Ｄ−ＶａｌまたはＤ−Ｍｅｔのいずれであってもよい第３のアミノ酸であり、式中、（Ｅ）は、（Ｅ）について上記にて列挙した置換基から独立に選択される。

Ｘａａ_４は、（Ｂ）_２Ｄ−アルギニン、（Ｂ）_２Ｄ−ノルアルギニン、（Ｂ）_２Ｄ−ホモアルギニン、ζ−（Ｂ）Ｄ−ホモリジン、Ｄ−２，３−ジアミノプロピオン酸、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−アミノメチルフェニルアラニン、アミジノ−Ｄ−アミノメチル−フェニルアラニン、γ−（Ｂ）_２Ｄ−γ−ジアミノ酪酸、δ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−２−アミノ−３（４−ピペリジル）プロピオン酸、Ｄ−２−アミノ−３（２−アミノピロリジル）プロピオン酸、Ｄ−α−アミノ−β−アミジノプロピオン酸、α−アミノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α，４−ジアミノシクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α，４−ジアミノシクロ−ヘキサン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−メチルアミノシクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−メチルアミノシクロヘキサン酢酸、α−アミノ−１−アミジノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−グアニジノシクロヘキサン酢酸またはｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−グアニジノ−シクロヘキサン酢酸のいずれであってもよい第４のアミノ酸であり、式中、各（Ｂ）は独立に、−ＨまたはＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり、（Ｂ’）は−Ｈまたは（α−Ｍｅ）である。

リンク部分であるＷは、以下の３つの選択肢のうちいずれであってもよい。（ｉ）空（null）（ただし、Ｗが空である場合、ＹはＮであり、Ｘａａ_４のＣ末端に結合されてアミドを形成する）；（ｉｉ）ｂが０、１、２、３、４、５または６である−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｂ−；または（ｉｉｉ）ｃが２または３である−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｃ−Ｏ−（ただし、ＹはＣである）。上記の選択肢（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の各々において、ＷのＮ原子がＸａａ_４のＣ末端に結合されてアミドを形成する。

式Ｉにおける部分

は、置換されていてもよい４から８員環の複素環部分であり、式中、環部分の環ヘテロ原子はいずれもＮであり、式中、ＹおよびＺは各々独立に、ＣまたはＮである。しかしながら、この複素環部分が、６員環、７員環または８員環である場合、ＹとＺとは少なくとも２個の環原子で隔てられていなければならない。さらに、この複素環部分がＮである単一の環ヘテロ原子を有する場合、環部分は非芳香族である。

式Ｉの部分Ｖは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルである。オペレータであるｅは、０または１であり、ｅが０である場合、Ｖは空であり、Ｒ_１およびＲ_２は、同一または異なる環原子に直接に結合されている。

４つの別の実施形態のうちの第１の実施形態では、式Ｉの部分Ｒ_１が以下の基すなわち、−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、アミジノ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、アリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、Ｐｒｏ−アミド、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＣＮ、ＣＯＮＨ_２、ＣＯＲ’、ＳＯ_２Ｒ’、ＣＯＮＲ’Ｒ’’、ＮＨＣＯＲ’、ＯＲ’，またはＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’のうちのいずれであってもよく、置換されていてもよいヘテロシクリルは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノから独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよい。部分Ｒ’およびＲ’’は各々独立に、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル、アリールまたはヘテロシクリルである。あるいは、Ｒ’とＲ’’の組み合わせで、４員環から８員環の環を形成することも可能であり、この環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノから独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよい。部分Ｒ_２は、−Ｈ、アミジノ、単一または二重のＣ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＨＣＯＲ’、−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’または−ＣＯＯＨのうちのいずれであってもよい。

第２の別の実施形態では、部分Ｒ_１およびＲ_２が一緒になって、Ｙ・Ｚ含有環部分の単一の環原子に結合された、置換されていてもよい４員環から９員環の複素単環式または二環式の環部分を形成可能である。

第３の別の実施形態では、部分Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の単一の環原子と一緒になって、置換されていてもよい４員環から８員環の複素環部分を形成してスピロ構造を形成可能である。

第４の別の実施形態では、部分Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の２個またはそれよりも多くの隣接する環原子と一緒になって、Ｙ・Ｚ含有環部分に融合された、置換されていてもよい４員環から９員環の複素単環式または二環式の環部分を形成可能である。

式Ｉでは、Ｒ_１およびＲ_２を含む、置換されていてもよい４員環、５員環、６員環、７員環、８員環および９員環の複素環部分は各々、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、置換されていてもよいフェニル、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノから独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよい。さらに、式ＩのＹ・Ｚ含有環部分が単一の環ヘテロ原子を有する６員環または７員環であり、かつ、ｅが０である場合、Ｒ_１は−ＯＨにはなり得ず、Ｒ_１およびＲ_２はともに−Ｈであることはない。

式ＩのＹ・Ｚ含有環部分が、２個の環ヘテロ原子のある６員環（ＹおよびＺがともにＮであり、Ｗは空である）である場合、部分−（Ｖ）_ｅＲ_１Ｒ_２はＺ以外の環原子に結合される。さらに、上記の条件下、ｅが０であれば、Ｒ_１およびＲ_２はともに−Ｈにはなり得ない。最後に、Ｘａａ_３がＤ−Ｎｌｅである場合、Ｘａａ_４は（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇにはなり得ない。Ｘａａ_３がＤ−Ｌｅｕまたは（αＭｅ）Ｄ−Ｌｅｕである場合、Ｘａａ_４はδ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎにはなり得ない。

また、本発明は、上述したように本発明の合成ペプチドアミドである選択的κオピオイド受容体アゴニスト（本明細書では、κ受容体アゴニストまたは単にκアゴニストと同義である）を提供するものである。

また、本発明は、本発明の合成ペプチドアミドと、薬学的に許容される希釈剤、賦形剤または担体とを含む医薬組成物を提供するものである。

さらに、哺乳動物においてκオピオイド受容体関連疾患または症状を治療または予防する方法も提供される。この方法は、本発明の合成ペプチドアミドを有効量で含む組成物を哺乳動物に投与することを含む。また、本発明は、本発明の合成ペプチドアミドを用いて、哺乳動物におけるκオピオイド受容体関連疾患または症状の治療に役立つ薬剤および医薬組成物を調製するものでもある。

本発明はさらに、哺乳動物においてκオピオイド受容体関連疾患または症状を治療または予防する方法であって、関連する副作用（特に呼吸抑制、鎮静、多幸感、抗利尿、悪心、嘔吐、便秘、物理的寛容、依存症、嗜癖）のある、低用量(reduced dose)のμオピオイドアゴニスト鎮痛化合物と本発明の合成ペプチドアミドとを同時投与して、治療上の鎮痛作用を得る方法を提供するものである。この方法で投与される低用量のμオピオイドアゴニスト鎮痛化合物には、単独で投与した場合に得られる治療上の鎮痛作用と同じだけの作用を達成するのに必要な用量のμオピオイドアゴニスト鎮痛化合物での副作用よりも、関連する副作用が少ない。

また、本発明は、末梢痛覚過敏を治療または予防する方法であって、外用塗布または局所投与用に処方された溶媒剤に抗痛覚過敏的本発明の合成ペプチドアミドを有効量で含む組成物を、治療が必要な哺乳動物に有効量で外用塗布または局所投与することを含む方法を提供するものである。

さらに、本発明は、低ナトリウム血症または低カリウム血症を治療または予防することで、鬱血性心不全、肝硬変、ネフローゼ症候群、高血圧症または浮腫などの低ナトリウム血症または低カリウム血症に関連する疾患または症状を治療または予防する方法を提供するものであり、好ましくは、バソプレシン分泌量の増加が前記疾患または機能障害に関連している場合、上記の方法は、水利尿的有効量の本発明の合成ペプチドアミドを薬学的に許容される希釈剤、賦形剤または担体で哺乳動物に投与することを含む。

化合物（１）、（６）、（７）、（１０）および（１１）の合成に用いられる一般的なスキームを示す。以下の反応体または条件すなわち、ａ）ホモピペラジン、ＤＣＭ；ｂ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨまたはＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｂ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨまたはＦｍｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ａｌｏｃ）−ＯＨまたはＦｍｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｃｂｚ）−ＯＨまたはＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨまたはＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｃ）２５％ピペリジン／ＤＭＦ溶液；ｄ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨまたはＦｍｏｃ−Ｄ−Ｎｌｅ−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｅ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｆ）Ｃｂｚ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｇ）４％ヒドラジンのＤＭＦ溶液；ｈ）Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、ＣＨＣｌ_３／ＡｃＯＨ／ＮＭＭ；ｉ）Ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ、コリジン、ＮＭＰ；ｊ）ジメチル−スルフェート、ＤＢＵ、ＮＭＲ；ｋ）メルカプトエタノール、ＤＢＵ、ＮＭＰ；ｌ）Ｃｂｚ−ＯＳｕ、ＤＭＦ；ｍ）アセトン、ＡｃＯＨ、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３、ＴＭＯＦ；ｎ）１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｏ）５０％ＴＦＡ／ＤＣＭ；ｐ）Ｓ−メチル−Ｎ−メチルイソチオ−尿素ヨウ化水素酸塩、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｑ）２−メチルチオ−２−イミダゾリンヨウ化水素酸塩、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｒ）ヨードエタン、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｓ）ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／ｍ−クレゾールを用いて、ステップａ〜ｓを実施した。化合物（２）〜（５）、（８）、（９）および（１２）〜（１４）の合成で用いられる一般的なスキーム。以下の反応体または条件すなわち、ａ）Ｎ−（１−Ｆｍｏｃ−ピペリジン−４−イル）−Ｌ−プロリン、ＤＩＥＡ、ＤＣＭ；ｂ）２５％ピペリジン／ＤＭＦ；ｃ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｄ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｅ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｆ）Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ、ＤＭＦ；ｇ）４％ヒドラジンのＤＭＦ溶液；ｈ）ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ、コリジン、ＮＭＰ；ｉ）ジメチルスルフェート、ＤＢＵ、ＮＭＰ；ｊ）メルカプトエタノール、ＤＢＵ、ＮＭＰ；ｋ）ＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏを用いて、ステップａ〜ｋを実施した。化合物（１５）〜（２４）の合成で用いられる一般的なスキーム。以下の反応体または条件すなわち、ａ）３５％ピペリジン、ＤＭＦ；ｂ）１−Ｂｏｃ−４−Ｎ−Ｆｍｏｃ−アミノ−ピペリジン４−カルボン酸、ＰｙＢＯＰ、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｃ）（ｉ）３５％ピペリジン、ＤＭＦ；（ｉｉ）Ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ、コリジン、ＮＭＰ；ｄ）３０％ＴＦＡのＤＣＭ溶液；ｅ）Ｂｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨまたはＢｏｃ−Ｄ−Ｄａｂ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨまたはＢｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、ＰｙＢＯＰ、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｆ）Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、ＰｙＢＯＰ、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｇ）Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、ＰｙＢＯＰ、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｈ）Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、ＰｙＢＯＰ、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｉ）２％ＤＢＵ／ＤＭＦ；ｊ）１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｋ）（ｉ）アセトン、ＴＭＯＦ、（ｉｉ）ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３、ＤＭＦ；ｌ）メルカプトエタノール、ＤＢＵ、ＮＭＰ；ｍ）Ｃｕ（ＯＡｃ）_２、ピリジン、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ_２Ｏ；ｎ）９５％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏを用いて、ステップａ〜ｎを実施した。化合物（２５）〜（３７）の合成で用いられる一般的なスキーム。以下の反応体または条件すなわち、ａ）ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ＤＩＥＡ、ＴＨＦ；ｂ）ＴＦＡ、ＤＣＭ；ｃ）Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ＤＩＥＡ；ｄ）Ｈ_２、Ｐｄ／Ｃ；ｅ）Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＡｌｌ、ＴＢＴＵ、ＤＩＥＡ、ＤＭＦ；ｆ）Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、ピロリジン；ｇ）ＨＮＲａＲ_ｂ、ＨＢＴＵ；ｈ）ＨＣｌ、ジオキサンを用いて、ステップａ〜ｈを実施した。内頸静脈カテーテルで５分間点滴して化合物（２）を３ｍｇ／ｋｇ投与後にラットの血漿および脳で検出される濃度。化合物（２）の濃度をｎｇ／ｍｌで示す。白い丸：血漿、黒い丸：脳。ＩＣＲマウスに化合物１ｍｇ／ｋｇを単回ボーラス皮下投与後の化合物（６）の血漿濃度。注射の５分後、１０分後、１５分後、２０分後、３０分後、６０分後、９０分後、１２０分後、１８０分後に血漿をサンプリングした。カニクイザルに化合物０．５６ｍｇ／ｋｇを単回ボーラス静脈内投与後の化合物（３）の血漿濃度。注射の２分後、５分後、１０分後、１５分後、３０分後、６０分後、１２０分後、２４０分後に血漿をサンプリングした。酢酸ライジングアッセイ（黒い丸）および歩行運動アッセイ（黒い四角）でのＩＣＲマウスにおける化合物（３）の用量反応曲線。静脈内経路で送達した場合のマウスにおける酢酸ライジングの化合物（２）による抑制の用量反応。ラットでＬ５／Ｌ６脊髄神経結紮によって誘導した機械的過敏反応に対する化合物（２）の作用。白い丸−溶媒剤単独；黒い丸−化合物（２）を０．１ｍｇ／ｋｇ；白い四角−化合物（２）を０．３ｍｇ／ｋｇ；黒い四角−化合物（２）を１．０ｍｇ／ｋｇ。^＊＊はｐ＜０．０１を示す；^＊＊＊はｐ＜０．００１対溶媒剤を示す（２要因ANOVA、ボンフェローニ）。ラットでの膵炎による腹部過敏症に対する異なる濃度での化合物（２）の作用。二塩化ジブチルスズまたは溶媒剤単独を静脈内投与し、von Freyフィラメントを用いる腹部圧刺激検査によって３０分間隔で過敏症を評価した。過敏症を１０回の圧刺激からの逃避数として表す。白い丸−溶媒剤単独；黒い丸−化合物（２）を０．１ｍｇ／ｋｇ；白い四角−化合物（２）を０．３ｍｇ／ｋｇ；黒い四角−化合物（２）を１．０ｍｇ／ｋｇ。^＊＊はｐ＜０．０１を示す；^＊＊＊はｐ＜０．００１対溶媒剤を示す（２要因ANOVA、ボンフェローニ）。ラットにおけるｎｏｒ−ＢＮＩおよびナロキソンメチオジドによる、化合物（２）が膵炎による腹部過敏症におよぼす作用の遮断。白い棒−溶媒剤単独、黒い棒−図示のようにナロキソンメチオジドまたはｎｏｒＢＮＩと併用した化合物（２）を１ｍｇ／ｋｇ。^＊＊＊はｐ＜０．００１対溶媒剤＋溶媒剤を示す（２要因ANOVA、ボンフェローニ）。

詳細な説明
本明細書全体で使用する場合、「合成ペプチドアミド」という用語は、式Ｉに一致する本発明の化合物あるいは、その立体異性体、立体異性体混合物、プロドラッグ、薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、酸性塩水和物、Ｎ−オキシドまたは同形結晶形態を意味する。Ｘａａ_１、Ｘａａ_２、Ｘａａ_３およびＸａａ_４が本発明の化合物中のＤアミノ酸に指定される場合、式Ｉに一致する本発明の合成ペプチドアミドの立体異性体は、Ｄ配置にアミノ酸を有する化合物に限定される（式Ｉにそのように指定される場合）。本発明の立体異性体は、Ｘａａ_１、Ｘａａ_２、Ｘａａ_３およびＸａａ_４の４つのアミノ酸のα炭素以外のキラル中心にＤ配置またはＬ配置のいずれかを有する化合物を含む。立体異性体混合物とは、このような本発明の立体異性体同士の混合物を示す。本明細書で使用する場合、ラセミ酸塩とは、Ｘａａ_１、Ｘａａ_２、Ｘａａ_３、Ｘａａ_４のα炭素の対掌性が変わることなくＸａａ_１、Ｘａａ_２、Ｘａａ_３、Ｘａａ_４のα炭素以外の１以上のキラル中心にＤ配置の化合物とＬ配置の化合物とを同じ割合で持つ立体異性体同士の混合物のことである。

本明細書でペプチドを定義するのに用いる命名法は、Schroder & Lubke, The Peptides, Academic Press, 1965に明記されたものであり、従来の表示法どおりＮ末端が左側、Ｃ末端は右側である。アミノ酸残基に異性体形態がある場合、特に明記しないかぎり、アミノ酸のＬ−異性体形態とＤ−異性体形態が包含されるものとする。本明細書では、アミノ酸は一般に、標準的な３文字コードで表記される。アミノ酸のＤ−異性体については、Ｄ−フェニルアラニンすなわちフェニルアラニンのＤ−異性体を「Ｄ−Ｐｈｅ」とするといった具合に配置接頭辞「Ｄ−」で示す。同様に、Ｌ−異性体を「Ｌ−Ｐｈｅ」のように配置接頭辞「Ｌ−」で示す。ペプチドについては、特に明記しないかぎり本明細書では、アミノ酸配列として左から右すなわちＮ末端からＣ末端に、通常の慣用どおりに示す。

本明細書で使用する場合、Ｄ−ＡｒｇはＤ−アルギニンを示し、Ｄ−Ｈａｒは、Ｄ−Ａｒｇよりも１メチレン基分だけ長い側鎖のあるＤ−ホモアルギニンを示し、Ｄ−Ｎａｒは、Ｄ−Ａｒｇよりも１メチレン基分だけ長い側鎖のあるＤ−ノルアルギニンを示す。同様に、Ｄ−ＬｅｕはＤ−ロイシンを意味し、Ｄ−ＮｌｅはＤ−ノルロイシン意味し、Ｄ−ＨｌｅはＤ−ホモロイシンを示す。Ｄ−ＡｌａはＤ−アラニンを意味し、Ｄ−ＴｙｒはＤ−チロシンを意味し、Ｄ−ＴｒｐはＤ−トリプトファンを意味し、Ｄ−ＴｉｃはＤ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３カルボン酸を意味する。Ｄ−ＶａｌはＤ−バリンを意味し、Ｄ−ＭｅｔはＤ−メチオニンを意味する。Ｄ−ＰｒｏはＤ−プロリンを意味し、Ｐｒｏ−アミドはプロリンアミドのＤ−またはＬ−形態を意味する。Ｄ−Ｐｒｏアミドは、アミドがそのカルボキシ部分に形成されたＤ−プロリンを示し、この場合のアミド窒素は、−ＮＲ_ａＲ_ｂの場合のようにアルキル置換されていてもよく、式中、Ｒ_ａおよびＲ_ｂは各々独立に、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基であるか、Ｒ_ａおよびＲ_ｂが−Ｈである。Ｇｌｙはグリシンを意味し、Ｄ−ＩｌｅはＤ−イソロイシンを意味し、Ｄ−ＳｅｒはＤ−セリンを意味し、Ｄ−ＴｈｒはＤ−トレオニンを意味する。（Ｅ）Ｄ−Ａｌａは、β炭素上の置換基（Ｅ）で置換されたアラニンのＤ−異性体を意味する。このような置換基（Ｅ）基の例としては、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル、チエニル、チアゾイルがあげられる。よって、シクロペンチル−Ｄ−Ａｌａは、β炭素にてシクロペンチルで置換されたアラニンのＤ−異性体を意味する。同様に、Ｄ−Ａｌａ（２−チエニル）と（２−チエニル）Ｄ−Ａｌａは同義であり、ともに２−環位に結合したチエニルによってβ炭素にて置換されたアラニンのＤ−異性体を意味する。

本明細書で使用する場合、Ｄ−Ｎａｌは、β炭素にてナフチルで置換されたアラニンのＤ−異性体異性体を意味する。Ｄ−２Ｎａｌは、ナフタレンへの結合が環構造の２位であるナフチル置換Ｄ−アラニンを意味し、Ｄ−１Ｎａｌは、ナフタレンへの結合が環構造の１位であるナフチル置換Ｄ−アラニンを意味する。（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅとは、フェニル環にて、ハロ、ニトロ、メチル、ハロメチル（たとえば、トリフルオロメチルなど）、ペルハロメチル、シアノ、カルボキサミドから独立に選択される１個または２個の置換基で置換されたＤ−フェニルアラニンのことである。Ｄ−（４−Ｆ）Ｐｈｅとは、フェニル環の４位でフルオロ置換されたＤ−フェニルアラニンのことである。Ｄ−（２−Ｆ）Ｐｈｅとは、フェニル環の２位でフルオロ置換されたＤ−フェニルアラニンのことである。Ｄ−（４−Ｃｌ）Ｐｈｅとは、４−フェニル環位でクロロ置換されたＤ−フェニルアラニンのことである。（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅとは、α炭素でメチル置換されたＤ−フェニルアラニンのことである。（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｅｕとは、α炭素でメチル置換されたＤ−ロイシンのことである。

（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｎａｒ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｈａｒという表記は、それぞれ、側鎖に２個の置換基である（Ｂ）基を有するＤ−アルギニン、Ｄ−ノルアルギニン、Ｄ−ホモアルギニンを示す。Ｄ−ＬｙｓはＤ−リジンを意味し、Ｄ−ＨｌｙｓはＤ−ホモリジンを意味する。ζ−（Ｂ）Ｄ−Ｈｌｙｓ、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓは、表示のとおり各々１個または２個の置換基（Ｂ）基で置換された側鎖アミノ基を有するＤ−ホモリジンおよびＤ−リジンを示す。Ｄ−ＯｒｎはＤ−オルニチンを意味し、δ−（Ｂ）α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎは、α炭素にて（Ｂ’）で置換され、側鎖δ−アミノ基にて（Ｂ）で置換されたＤ−オルニチンを意味する。

Ｄ−ＤａｐはＤ−２，３−ジアミノプロピオン酸を意味する。Ｄ−Ｄｂｕは、α，γ−ジアミノ酪酸のＤ−異性体を示し、（Ｂ）_２Ｄ−Ｄｂｕは、γアミノ基にて２個の置換基（Ｂ）基で置換されたα，γ−ジアミノ酪酸を示す。特に明記しないかぎり、このような二重置換された残基の（Ｂ）基は各々、Ｈ−およびＣ_１〜Ｃ_４−アルキルから独立に選択される。本明細書で使用する場合、Ｄ−ＡｍｆはＤ−（ＮＨ_２ＣＨ_２−）Ｐｈｅすなわち、そのフェニル環にてアミノメチルで置換されたフェニルアラニンのＤ−異性体を意味し、Ｄ−４Ａｍｆは、環の４位でアミノメチルが結合された特定のＤ−Ａｍｆを示す。Ｄ−Ｇｍｆは、フェニル環が−ＣＨ_２ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ_２で置換されたＤ−Ｐｈｅを示すＤ−Ａｍｆ（アミジノ）を意味する。Ａｍｄは、アミジノすなわち−Ｃ（ＮＨ）ＮＨ_２を示し、（Ａｍｄ）Ｄ−ＡｍｆおよびＤ−Ａｍｆ（Ａｍｄ）という表記もＤ−Ｇｍｆと同義に用いられる。ＩｌｙおよびＩｏｒという表記は、側鎖アミノ基がイソプロピルでアルキル化されたイソプロピルＬｙｓおよびイソプロピルＯｒｎを意味するものとして用いられる。

アルキルとは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルエチルなどであるが、これに限定されるものではない、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、環状アルキル基であり得るアルカンラジカルを意味する。Ｃ_１からＣ_８アルキルは、１から８個の炭素原子を有するアルキル基を示す。同様に、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルは、１から６個の炭素原子を有するアルキル基を示す。同様に、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルは、１から４個の炭素原子を有するアルキル基を示す。低級アルキルとは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルのことである。Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、Ｉｐｒ、Ｂｕ、Ｐｎは、一般的なアルキル基であるメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチルを示すものと同義に用いられる。アルキル基のリンケージは一般に、アルキル鎖の一端であるが、このリンケージは、エチルプロピルまたは１−エチルプロプ−１−イルとも呼ばれる３−ペンチルなど、鎖内のどこにあってもよい。Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノなどのアルキル置換は、関連する部分が１個または複数個のアルキル基で置換されていることを示す。

指定される部分が空である場合、その部分は欠如しており、当該部分が他の２個の部分に結合するとされていたら、その２個の他の部分は１つの共有結合によって接続される。本明細書において、接続部分を環の任意の位置で環に結合するとして示す場合、また、接続部分が空であればＲ_１およびＲ_２などの２個の他の部分に結合するとして示す場合、Ｒ_１およびＲ_２部分は各々、環の任意の位置に独立に結合可能である。

「複素環」、「複素環」および「ヘテロシクリル」という用語は、本明細書では同義に用いられ、窒素原子、イオウ原子または酸素原子であってもよいヘテロ原子とも呼ばれる非炭素環原子を少なくとも１個有する環または環部分を示す。環が特定の環員を有するとされる場合、その数は、環原子に結合する水素原子または置換基を参照することなく、環原子の数を定義する。複素環、複素環およびヘテロシクリル部分は、窒素原子、イオウ原子または酸素原子から独立に選択される複数のヘテロ原子を環に含み得る。環は、置換が可能な任意の位置で置換されていてもよい。たとえば、６員環および７員環は４環位で置換されることが多く、５員環は一般に３位で置換される（この場合、環は１環位でペプチドアミド鎖に結合する）が、これに限定されるものではない。

「飽和」という用語は、二重結合または三重結合がないことを示し、環に関してこの用語を用いるときは、環に二重結合または三重結合がないことを示すが、環に結合する置換基に二重結合または三重結合が存在することを除外するものではない。「非芳香族」という用語は、特定の環に関する文脈で、その環に芳香性がないことを示すが、当該環に縮合した芳香環、の一部である二重結合を含む二重結合が環内に存在することを除外するものではない。また、たとえば環イオウ原子が酸素原子置換基に二重結合するなど、飽和複素環部分の環原子が非環原子に二重結合することも除外されない。本明細書で使用する場合、複素環、複素環およびヘテロシクリル部分はまた、特に明記しないかぎり、飽和構造、部分的に不飽和の複素芳香環構造および縮合二環式環構造を含む。複素環、複素環またはヘテロシクリル部分は、環が複素環または炭素環であってもよい、飽和環、部分的に不飽和の環または芳香環であってもよい第２の環に縮合可能である。表記のある場合、２個の置換基は任意に、一緒になって別の環を形成するものであってもよい。環は、置換が可能な任意の位置で置換されていてもよい。複素環、複素環およびヘテロシクリル部分は、表記のある(indicted)場合、１つまたは複数の環位置にて、たとえば、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_３〜Ｃ_８シクロアルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、ハロＣ_１〜Ｃ_６アルキル、置換されていてもよいフェニル、アリール、ヘテロシクリル、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノなどの１つまたは複数の独立に選択される置換基で置換されていてもよい。フェニル置換基の好適な任意の置換基としては、たとえば、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_３アルコキシ、ハロＣ_１〜Ｃ_３アルキル、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノから選択される１つまたは複数の基があげられるが、これに限定されるものではない。

Ｄ−Ｐｈｅおよび置換Ｄ−Ｐｈｅは、式Ｉの残基Ｘａａ_１に適したアミノ酸の例である。フェニル環は、２位、３位および／または４位のいずれにおいても置換可能である。可能な置換の具体例としては、たとえば、２位または４位での塩素またはフッ素があげられる。また、α炭素原子をメチル化してもよい。Ｄ−Ｐｈｅに対する保存された変化を示す他の等価な残基を使用することも可能である。その一例として、Ｄ−Ａｌａ（シクロペンチル）、Ｄ−Ａｌａ（チエニル）、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｉｃがあげられる。２位での残基Ｘａａ_２もＤ−Ｐｈｅまたは置換Ｄ−Ｐｈｅであってもよく、このような置換にはフェニル環の４位の炭素または３位と４位の両方に置換基が含まれる。あるいは、Ｘａａ_２は、ナフチルで置換されたＤ−Ｔｒｐ、Ｄ−ＴｙｒまたはＤ−アラニンであってもよい。３位の残基Ｘａａ_３は、どのような非極性アミノ酸残基であってもよく、一例として、たとえば、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｌｅｕ、（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−ＭｅｔまたはＤ−Ｖａｌがある。しかしながら、Ｄ−Ａｌａ（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル）あるいはＤ−ＰｈｅもＸａａ_３として使用可能である。４位の残基Ｘａａ_４は、Ｄ−ＡｒｇおよびＤ−Ｈａｒなどの陽に荷電したアミノ酸残基であればいずれであってもよく、これは、１個または２個のエチル基などの低級アルキル基で置換されていてもよい。あるいは、Ｄ−Ｎａｒならびに、Ｄ−ＬｙｓまたはＤ−Ｏｒｎ（いずれも、メチル基またはイソプロピル基などによるω−アミノ基アルキル化可能であり、あるいは、α炭素基でメチル化可能である）などの他の等価な残基を用いることも可能である。さらに、Ｄ−Ｄｂｕ、Ｄ−４−Ａｍｆ（アミジノで置換されていてもよい）およびＤ−Ｈｌｙｓも、この位置での好適なアミノ酸である。

本発明の化合物は、１つまたは複数のキラル中心を含有し、その各々が、特定の炭素原子周囲の４個の置換基からなる、おそらくは３次元である２つの空間的配置（立体配置）を有する。これらは、立体異性体として知られており、具体的には、鏡像異性体（すべてのキラル中心が反転）またはジアステレオ異性体（２つ以上のキラル中心、少なくとも１つのキラル中心が同一のままである）である。本発明の特定の実施形態では、テトラペプチド骨格を構成するアミノ酸Ｘａａ_１Ｘａａ_２Ｘａａ_３Ｘａａ_４がＤ−アミノ酸であり、哺乳動物で一般に見られるものとは配置が逆になっている。本発明の合成ペプチドアミドの立体異性体は、Ｘａａ_１〜Ｘａａ_４を構成するＤ−アミノ酸のα炭素以外のキラル中心に関する。よって、本発明の実施形態である合成ペプチドアミドの立体異性体（Ｘａａ_１〜Ｘａａ_４が各々Ｄ−アミノ酸で指定される）は、これらの位置にＬ−アミノ酸またはアミノ酸のラセミ混合物を含まない。同様に、ラセミ酸塩とは、本明細書では、Ｘａａ_１〜Ｘａａ_４を構成するＤ−アミノ酸のα炭素以外の中心に関するものである。立体異性体がＲ配置またはＳ配置のいずれかを取り得る本発明の合成ペプチドアミドのキラル中心は、Ｘａａ_４のカルボキシ末端に結合された部分のキラル中心を含み、Ｘａａ_１〜Ｘａａ_４のアミノ酸側鎖置換基のキラル中心も含む。

本明細書で説明する本発明の合成ペプチドアミド（合成ペプチドアミド化合物、本発明の化合物、化合物（数字）または単に「化合物」と同義である）を、別の形態で利用または調製することも可能である。たとえば、多くのアミノ含有化合物を酸性塩として利用または調製可能である。このような塩を用いると、化合物の単離性および取扱い性が改善されることが多い。たとえば、試薬や反応条件などに応じて、本明細書で説明する合成ペプチドアミドなどの化合物を、塩酸塩またはトシル酸塩として利用または調製可能である。同形結晶形態、すべてのキラル形態およびラセミ形態、Ｎ−オキシド、水和物、溶媒和物および酸性塩水和物も、本発明の範囲内に包含されるものとする。

酸性または塩基性である本発明の合成ペプチドアミドの中には、双性イオンとして存在できるものがある。遊離酸、遊離塩基および双性イオンをはじめとして、これらの合成ペプチドアミド化合物のすべての形態が、本発明の範囲内に包含されるものとする。アミノ基とカルボキシル基の両方を含む化合物は、その双性イオン形態と平衡で存在する場合が多いことも当該技術分野において周知である。よって、たとえばアミノ基とカルボキシル基の両方を含む、本明細書で説明する化合物ではいずれも、対応する双性イオンを含むものと理解されたい。

特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドは、式Ｉに一致する。

このような実施形態では、Ｘａａ_１−Ｘａａ_２−Ｘａａ_３−Ｘａａ_４は、テトラペプチド部分であり、式中、Ｘａａ_１はアミノ末端のアミノ酸であり、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ａ）（Ａ’）（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｉｃ、Ｄ−ｔｅｒｔ−ロイシン、Ｄ−ネオペンチルグリシン、Ｄ−フェニルグリシン、Ｄ−ホモフェニルアラニンまたはβ−（Ｅ）Ｄ−Ａｌａが可能であり、式中、各（Ａ）および各（Ａ’）は、−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＮＯ_２、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２から独立に選択されるフェニル環置換基であり、（Ｅ）は、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、チエニル、ピリジルまたはチアゾリルのうちのいずれかから選択可能である。テトラペプチド鎖の第２のアミノ酸であるＸａａ_２は、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、３，４−ジクロロ−Ｄ−Ｐｈｅ、（Ａ）（Ａ’）（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、Ｄ−Ｔｙｒ、（Ｅ）Ｄ−ＡｌａまたはＤ−Ｔｒｐのいずれであってもよい。テトラペプチド鎖の第３のアミノ酸であるＸａａ_３は、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｅ）Ｄ−Ａｌａ、Ｄ−Ｌｅｕ、（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−ＶａｌまたはＤ−Ｍｅｔが可能である。テトラペプチド鎖の第４のアミノ酸であるＸａａ_４は、（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｎａｒ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｈａｒ、ζ−（Ｂ）Ｄ−Ｈｌｙｓ、Ｄ−Ｄａｐ、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ａｍｆ、アミジノ−Ｄ−Ａｍｆ、γ−（Ｂ）_２Ｄ−Ｄｂｕ、δ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−２−アミノ−３（４−ピペリジル）プロピオン酸、Ｄ−２−アミノ−３（２−アミノ−ピロリジル）−プロピオン酸、Ｄ−α−アミノ−β−アミジノプロピオン酸、α−アミノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α，４−ジアミノシクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α，４−ジアミノシクロヘキサン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−メチルアミノ−シクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−メチルアミノシクロヘキサン酢酸、α−アミノ−１−アミジノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−グアニジノシクロヘキサン酢酸またはｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−グアニジノシクロヘキサン酢酸のうちいずれであってもよく、式中、各（Ｂ）は、−ＨおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルから別々に選択され、（Ｂ’）には、−Ｈまたは（α−Ｍｅ）基が可能である。

本発明の特定の実施形態では、任意のリンカー基Ｗが存在せず（すなわち空である）、ただし、この場合、ＹがＮである。他の実施形態態では、Ｗが−Ｎ−（ＣＨ_２）_ｂであり、ｂが０、１、２、３、４、５または６である。さらに他の実施形態態では、Ｗが−Ｎ−（ＣＨ_２）_ｃ−Ｏ−であり、ｃが２または３であり、ただし、このような実施形態では、ＹがＣである。

本発明の特定の実施形態では、式Ｉの部分

が、置換されていてもよい４員環から８員環の複素環部分であり、式中、環部分の環ヘテロ原子はいずれもＮであり、ＹおよびＺは各々独立に、ＣまたはＮであり、隣接する環原子ではない。このような実施形態では、この複素環部分が、６員環、７員環または８員環である場合、環原子ＹおよびＺが少なくとも２個の他の環原子で隔てられる。このような実施形態では、この複素環部分がＮである単一の環ヘテロ原子を有する場合、環部分が非芳香族である。

本発明のある特定の実施形態では、接続部分ＶがＹ−およびＺ含有環に直接に結合される。Ｖは、基Ｒ_１およびＲ_２で置換可能なＣ_１〜Ｃ_６アルキルである。置換基Ｒ_１は、−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、アミジノ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、アリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、Ｐｒｏ−アミド、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＲ’、−ＳＯ_２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＨＣＯＲ’、ＯＲ’または−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’のいずれであっても構わない。置換されていてもよいヘテロシクリルは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノから独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよい。部分Ｒ’およびＲ’’は各々独立に、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル、アリールまたはヘテロシクリルである。あるいは、Ｒ’とＲ’’の組み合わせで４員環から８員環の環を形成可能であり、この環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノから独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよい。置換基Ｒ_２は、−Ｈ、アミジノ、単一または二重のＣ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＨＣＯＲ’、−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’または−ＣＯＯＨのいずれであってもよい。

他の特定の実施形態では、Ｖは存在せず、置換基の基Ｒ_１およびＲ_２は、Ｙ・Ｚ含有複素環の同一または異なる環原子に直接に結合されている。

特定の実施形態の別の一態様では、部分Ｒ_１およびＲ_２が一緒になって、Ｙ・Ｚ含有環部分の単一の環原子に結合された、置換されていてもよい４員環から９員環の複素単環式または二環式の環部分を形成可能である。特定の一実施形態では、部分Ｒ_１およびＲ_２が、直接にＹ・Ｚ含有環部分の単一の環原子に結合された、置換されていてもよい４員環から９員環の複素単環式または二環式の環部分を形成する。

特定の実施形態の第２の別の態様では、部分Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の単一の環原子と一緒になって、置換されていてもよい４員環から８員環の複素環部分を形成してスピロ構造を形成可能である。

特定の実施形態の第３の別の態様では、部分Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の２個またはそれよりも多くの隣接する環原子と一緒になって、Ｙ・Ｚ含有環部分に融合された、置換されていてもよい４員環から９員環の複素単環式または二環式の環部分を形成可能である。

特定の実施形態では、Ｒ_１およびＲ_２を含む、置換されていてもよい４員環、５員環、６員環、７員環、８員環および９員環の複素環部分は各々、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、置換されていてもよいフェニル、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノから独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよい。

ある特定の実施形態では、Ｙ・Ｚ含有環部分が単一の環ヘテロ原子を含む６員環または７員環であり、かつ、ＹおよびＺのうちの一方がＣであり、ＹおよびＺのうちの他方がＮであり、かつ、ｅが０である場合、Ｒ_１は−ＯＨにはなり得ず、Ｒ_１およびＲ_２がともに−Ｈであることはない。さらに、Ｙ・Ｚ含有環部分が２個の環ヘテロ原子を有する６員環であり、ＹおよびＺがともにＮであり、Ｗが空である場合、部分−（Ｖ）_ｅＲ_１Ｒ_２はＺ以外の環原子に結合される。さらに、ｅが０であれば、Ｒ_１およびＲ_２はともに−Ｈにはなり得ない。最後に、Ｘａａ_３がＤ−Ｎｌｅである場合、Ｘａａ_４は（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇにはなり得ず、Ｘａａ_３がＤ−Ｌｅｕまたは（αＭｅ）Ｄ−Ｌｅｕである場合、Ｘａａ_４はδ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎにはなり得ない。

特定の実施形態では、本発明はまた、式

で表される合成ペプチドアミドあるいは、その立体異性体、ラセミ酸塩、プロドラッグ、薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、酸性塩水和物、Ｎ−オキシドまたは同形結晶形態も提供するものであり、式中、Ｘａａ_１は、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｉｃ、Ｄ−フェニルグリシン、Ｄ−ホモフェニルアラニン、β−（Ｅ）Ｄ−Ａｌａからなる群から選択され、式中、（Ａ）および（Ａ’）は各々、−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＮＯ_２、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２からなる群から独立に選択されるフェニル環置換基であり、式中、（Ｅ）は、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル、チエニル、チアゾリルからなる群から選択され、Ｘａａ_２は、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、Ｄ−Ｔｙｒ、（Ｅ）Ｄ−Ａｌａ、Ｄ−Ｔｒｐからなる群から選択され、Ｘａａ_３は、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｅ）Ｄ−Ａｌａ、Ｄ−Ｌｅｕ、（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−Ｖａｌ、Ｄ−Ｍｅｔからなる群から選択され、Ｘａａ_４は、（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇ、（Ｂ）_２Ｄ−ｎＡｒｇ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｈａｒ、ζ−（Ｂ）Ｄ−Ｈｌｙｓ、Ｄ−Ｄａｐ、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ａｍｆ、アミジノ−Ｄ−Ａｍｆ、γ−（Ｂ）_２Ｄ−Ｄｂｕ、δ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−２−アミノ−３（４−ピペリジル）プロピオン酸、Ｄ−２−アミノ−３（２−アミノピロリジル）プロピオン酸、Ｄ−α−アミノ−β−アミジノプロピオン酸、（Ｒ）−α−アミノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α，４−ジアミノシクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α，４−ジアミノシクロヘキサン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−メチルアミノシクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−メチルアミノシクロヘキサン酢酸、α−アミノ−１−アミジノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−グアニジノシクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−グアニジノシクロヘキサン酢酸からなる群から選択され、式中、各（Ｂ）は、ＨおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群から独立に選択され、（Ｂ’）はＨまたは（α−Ｍｅ）である。基Ｗは、
空（ただし、Ｗが空であり、ＹがＮである）と、
ｂが０、１、２、３、４、５または６である−Ｎ−（ＣＨ_２）_ｂと、
ｃが２または３である−Ｎ−（ＣＨ_２）_ｃ−Ｏ−（ただし、ＹはＣである）と、からなる群から選択され、
部分

は、置換されていてもよい４〜８員環の飽和一窒素または二窒素複素環部分であり、式中、ＹおよびＺ以外の環原子はヘテロ原子ではなく、ＹはＣまたはＮであり、ＺはＣまたはＮであり、少なくともＹおよびＺのうちの１つがＮであり、ただし、４員環または５員環の複素環の場合、ＹまたはＺのいずれかがＣであり、二窒素複素環の場合、ＹおよびＺは２個またはそれよりも多くの環炭素原子で隔てられ、
Ｖは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルであり、ｅは０または１であり、式中、ｅが０である場合、Ｖは空であり、Ｒ_１およびＲ_２は、同一または異なる環原子に直接に結合され、
Ｒ_１は、Ｈ、ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、アミジノ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、ジヒドロイミダゾール、Ｐｒｏ−アミド、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＨＣＯＲ’、−ＯＲ’または−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’であり、式中、Ｒ’およびＲ’’は各々独立に、ＨまたはＣ_１〜Ｃ_８アルキルであるか、Ｒ’とＲ’’の組み合わせで、４員環から８員環の環を形成し、この環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、アミジノからなる群から独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよく、Ｒ_２は、Ｈ、アミジノ、単一または二重のＣ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＨＣＯＲ’、−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’または−ＣＯＯＨであり、
ただし、Ｙ・Ｚ含有環部分が６員環または７員環であり、ＹおよびＺのうちの１つがＣであり、ｅが０である場合、Ｒ_１はＯＨではなく、Ｒ_１およびＲ_２がともにＨであることはなく、ただし、Ｙ・Ｚ含有環部分が６員環である場合、ＹおよびＺがともにＮであり、Ｗが空である場合、−（Ｖ）_ｅＲ_１Ｒ_２がＺ以外の環原子に結合され、ｅが０であれば、Ｒ_１およびＲ_２はともに−Ｈであることはなく、最後に、ただし、Ｘａａ_３がＤ−Ｎｌｅの場合、Ｘａａ_４は（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇにはなり得ず、Ｘａａ_３がＤ−Ｌｅｕまたは（αＭｅ）Ｄ−Ｌｅｕの場合、Ｘａａ_４はδ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎにはなり得ない。

一実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、Ｘａａ_１Ｘａａ_２は、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅであり、Ｘａａ_３は、Ｄ−ＬｅｕまたはＤ−Ｎｌｅであり、Ｘａａ_４は、（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｈａｒ、ζ−（Ｂ）Ｄ−Ｈｌｙｓ、Ｄ−Ｄａｐ、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ａｍｆ、アミジノ−Ｄ−Ａｍｆ、γ−（Ｂ）_２Ｄ−Ｄｂｕ、δ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎから選択される。上述の実施形態の特定の態様では、Ｘａａ_４は、Ｄ−Ｌｙｓ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｈａｒ、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓから選択される。

別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、Ｗは空であり、ＹはＮであり、ＺはＣである。上述の実施形態の特定の態様では、Ｙ・Ｚ含有環部分は、単一の環ヘテロ原子を有する６員環の飽和環である。

別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、ＹおよびＺはともにＮであり、Ｙ・Ｚ含有環部分における唯一の環ヘテロ原子である。

別の実施形態では、Ｙ・Ｚ含有環部分が２個の環ヘテロ原子を有する飽和６員環であり、Ｗが空である場合、Ｚは炭素原子である。

さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の０個、１個または２個の環原子と一緒になって、単環式または二環式の４〜９員環の複素環部分を構成する。上述の実施形態の特定の態様では、Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の１個の環原子と一緒になって、４員環から８員環の複素環部分を構成し、これによってＹ・Ｚ含有環部分がスピロ構造を形成し、Ｗは空である。

さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、ｅは０であり、Ｒ_１およびＲ_２は直接に同一の環炭素原子に結合される。

さらに他の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、Ｒ_１は、Ｈ、ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２ＣＯＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル、アミジノ、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル置換アミジノ、ジヒドロイミダゾール、Ｄ−Ｐｒｏ、Ｄ−Ｐｒｏアミドまたは−ＣＯＮＨ_２であり、式中、Ｒ_２は、Ｈ、−ＣＯＯＨまたはＣ_１〜Ｃ_３アルキルである。

別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、部分

は、

からなる群から選択される。

さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、式中、部分

は、プロリン部分でも置換プロリン部分でもなく、プロリン部分でもなく、式中、Ｒ_１またはＲ_２は、アミド部分を含む。

さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、この場合、Ｗが空であり、Ｙ・Ｚ含有環部分が単一の環ヘテロ原子のみを有する５員環の飽和環であり、ｅが０であり、Ｒ_１またはＲ_２のいずれかがＹに隣接する環炭素と結合した場合、Ｒ_１は、−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、アミジノ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、アリール、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＣＮ、−ＳＯ_２Ｒ’、−ＮＨＣＯＲ’、−ＯＲ’、−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’からなる群から選択され、Ｒ_２は、−Ｈ、アミジノ、単一または二重のＣ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、−ＣＮ、−ＮＨＣＯＲ’、−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’からなる群から選択される。

さらに別の実施形態では、本発明は、κオピオイド受容体でのＥＣ_５０が約５００ｎＭ未満の式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものである。特定の態様では、合成ペプチドアミドは、κオピオイド受容体でのＥＣ_５０が約１００ｎＭ未満となり得る。さらに特定の態様では、合成ペプチドアミドは、κオピオイド受容体でのＥＣ_５０が約２０ｎＭ未満となり得る。最も特定の態様では、合成ペプチドアミドは、κオピオイド受容体でのＥＣ_５０が約１ｎＭ未満となり得る。上記実施形態の化合物は、ＥＣ_５０がμおよびδオピオイド受容体でκオピオイド受容体よりも少なくとも１０倍大きくなり得、好ましくは少なくとも１００倍大きく、最も好ましくは少なくとも１０００倍大きくなり得る（ＥＣ_５０がκオピオイド受容体で約１ｎＭ未満、ＥＣ_５０値がμオピオイド受容体およびδオピオイド受容体で約１０００ｎＭを超えるなど）。

さらに別の実施形態では、本発明は、ヒト肝臓ミクロソームと一緒に６０分間のインキュベーション後に、合成ペプチドアミドの濃度１０ｕＭで、Ｐ_４５０ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９またはＣＹＰ２Ｄ６のいずれに対しても有効濃度で約５０％阻害するにすぎない式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものである。

さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものであり、ラットにおいて約３ｍｇ／ｋｇの用量で、脳でのピーク濃度の少なくとも約５倍高い合成ペプチドアミドのピーク血漿濃度に達する。上述の実施形態の特定の一態様では、合成ペプチドアミドは、マウスの歩行運動低下アッセイで鎮静作用でのＥＤ_５０が、マウスのライジングアッセイでの鎮痛作用での合成ペプチドアミドのＥＤ_５０の少なくとも約１０倍である。

さらに別の実施形態では、本発明は、ラットで合成ペプチドアミドを約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与した後、約３時間で最大薬効の少なくとも約５０％に達する式Ｉの合成ペプチドアミドを提供するものである。

一実施形態では、本発明は、式Ｉの合成ペプチドアミドと薬学的に許容される賦形剤または担体とを含む医薬組成物を提供するものである。

別の実施形態では、本発明は、哺乳動物においてκオピオイド受容体関連疾患または症状を治療または予防する方法であって、κオピオイド受容体関連疾患または症状を治療または予防するのに十分な、式Ｉの合成ペプチドアミドを有効量で含む組成物を哺乳動物に投与することを含む方法を提供するものである。

さまざまなアッセイを利用して、本発明の合成ペプチドアミドが、κオピオイド受容体への高い親和性と選択性、ｉｎｖｉｖｏでの長期間にわたる生物活性を呈するか否か、また、ＣＮＳ副作用がないかどうかを試験することができる。受容体アッセイは当該技術分野において周知であり、μオピオイド受容体およびδオピオイド受容体同様に、いくつかの種に由来するκオピオイド受容体がクローニングされている。従来からの７種類の膜貫通Ｇタンパク質−結合受容体に、κオピオイド受容体ならびにμオピオイド受容体およびδオピオイド受容体がある。これらのクローニングした受容体は、ペプチドまたはペプチド誘導体などの特定の候補化合物のスクリーニングを容易に可能にするものであるが、当該技術分野において周知のように、天然の哺乳類オピオイド受容体源もスクリーニングに有用である(Dooley CT et al. Selective ligands for the mu, delta, and kappa opioid receptors identified from a single mixture based tetrapeptide positional scanning combinatorial library. J. Biol. Chem. 273:18848-56, 1998)。よって、μオピオイド受容体よりもκオピオイド受容体に対する本発明の合成ペプチドアミドの選択性を判断するには、組換えであるか天然由来であるかを問わず、κオピオイド受容体とμオピオイド受容体の両方に対するスクリーニングを実施することができる。

特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドが選択的κオピオイド受容体アゴニストである。特定の受容体に対するアゴニストとしての本発明の合成ペプチドアミドの力価を、最大限の効果の半分が達成される濃度（ＥＣ_５０値で表される）として測定することが可能である。本発明の合成ペプチドアミドのκオピオイドアゴニストとしての力価（最大作用率で表される）については、当該技術分野において周知の多種多様な方法で判断することができる。たとえば、Endoh T et al., 1999, Potent Antinociceptive Effects of TRK-820, a Novel κ-Opioid Receptor Agonist, Life Sci. 65(16) 1685-94；およびKumar V et al., Synthesis and Evaluation of Novel peripherally Restricted κ-Opioid Receptor Agonists, 2005 Bioorg Med Chem Letts 15:1091-1095を参照のこと。

このようなＥＣ_５０値を求めるアッセイ技法の例を以下にあげておく。オピオイド配位子を特徴付けるための多くの標準アッセイ法が、当業者間で周知である。たとえば、Waldhoer et al., (2004) Ann. Rev. Biochem. 73:953-990およびSatoh & Minami (1995) Pharmac. Ther. 68(3):343-364ならびに、本明細書に引用する文献を参照のこと。

ある特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドが、ＥＣ_５０が約５００ｎＭ未満のκオピオイド受容体アゴニストである。他の実施形態態では、合成ペプチドアミドは、κオピオイド受容体アゴニストとしてＥＣ_５０が約１００ｎＭである。さらに他の実施形態態では、合成ペプチドアミドはκオピオイド受容体アゴニストとしてＥＣ_５０が約１０ｎＭである。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドが、κオピオイド受容体アゴニストとして、ＥＣ_５０が約１．０ｎＭ未満、約０．１ｎＭ未満または約０．１ｎＭ未満であるか、あるいは約０．０１ｎＭ未満ですらある。

特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドが、μオピオイド受容体よりもκに対して高度に選択的である。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドのμオピオイド受容体に対するＥＣ_５０値が、κオピオイド受容体での対応するＥＣ_５０値に比して少なくとも約１００倍である。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドのμオピオイド受容体に対するＥＣ_５０値が、κオピオイド受容体での対応するＥＣ_５０値に比して少なくとも約１０００倍である。あるいは、本発明の合成ペプチドアミドの選択性が、κオピオイド受容体の場合よりもμオピオイド受容体のほうが高いＥＣ_５０で表されることもある。よって、特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドのＥＣ_５０値が、μオピオイド受容体の場合に約１０ｕＭを超え、κオピオイド受容体の場合のＥＣ_５０値が約１０ｎＭ未満であり、他の実施形態態では、約１．０ｎＭ未満、あるいは約０．０１ｎＭ未満である。別の実施形態では、特定の合成ペプチドアミドのＥＣ_５０が、κオピオイド受容体の場合で約１ｎＭ未満であり、ＥＣ_５０がμオピオイド受容体またはδオピオイド受容体の場合で約１０００ｎＭを超える。

本発明の合成ペプチドアミドの別の特性として、シトクロムＰ_４５０アイソザイムをあまり阻害しないという特徴的な特性がある。シトクロムＰ_４５０アイソザイムは、多くの治療用化合物および他の生物活性化合物の代謝酸素不活性化を担うヘム−チオレートタンパク質の大きなサブファミリを構成する。通常、それは多成分電子伝達鎖における末端酸化酵素として作用し、シトクロムＰ_４５０−含有モノオキシゲナーゼ系とも呼ばれるものである。

すでに５０種類を超えるシトクロムＰ_４５０アイソザイムが同定されており、核酸配列相同性で評価した遺伝的な関連性に基づいてファミリに分類されている。シトクロムＰ_４５０アイソザイムの中でもヒト細胞にもっとも豊富にみられるのが、１Ａ２および３Ａ４アイソザイムであるが、アイソザイム２Ｂ６、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６および２Ｅ１も投与された治療薬の酸素不活性化に大幅に寄与している。本発明の合成ペプチドアミドの有効濃度が保たれるｉｎｖｉｖｏ投与後の時間を長くするには、シトクロムＰ_４５０アイソザイムの阻害が有用であるが、こうした阻害によってシトクロムＰ_４５０による酸化対象となる同時投与した治療用化合物の持続時間も長くなる。このように持続時間が長くなることで、同時投与される治療薬が、治療に最適な期間を超えて持続することもあるし、ｉｎｖｉｖｏ濃度が所望のレベルまたは安全耐量を超えてしまうこともある。こうした持続時間の延長および／または濃度の上昇を正確に定量するのは困難であり、回避できればそのほうが好ましい。シトクロムＰ_４５０アイソザイムの活性に対する阻害がほとんどないかまったくない治療薬には、こうした潜在的な問題がないため、同時投与した治療用化合物がシトクロムＰ_４５０アイソザイムによって不活性化される率に影響する危険を伴わずに、他の治療薬と安全に動じ投与することが可能である。

本発明の合成ペプチドアミドの特定の実施形態は、合成ペプチドアミドの治療濃度でシトクロムＰ_４５０アイソザイムをほとんど阻害せず、他の実施形態は、その治療濃度でシトクロムＰ_４５０アイソザイムを実質的にまったく阻害しない。実施形態によっては、濃度１０ｕＭの合成ペプチドアミドが、シトクロムＰ_４５０アイソザイムＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９またはＣＹＰ２Ｄ６に対して約５０％未満しか阻害しない。特定の実施形態では、濃度１０ｕＭの合成ペプチドアミドが、これらのシトクロムＰ_４５０アイソザイムのいずれに対しても約２０％未満しか阻害しない。極めて特定の実施形態では、濃度１０ｕＭの合成ペプチドアミドがこれらのシトクロムＰ_４５０アイソザイムの約１０％未満しか阻害しない。

別の実施形態では、有効濃度での本発明の合成ペプチドアミドが、ヒト肝臓ミクロソームと一緒に６０分間のインキュベーション後に、合成ペプチドアミドの濃度１０ｕＭで、Ｐ_４５０ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９またはＣＹＰ２Ｄ６のいずれに対しても約５０％阻害するにすぎない。

哺乳動物またはヒトの患者に治療有効濃度で投与した場合、本発明の合成ペプチドアミドは、血液脳関門をほとんど通過しないか実質的にまったく通過しない。κオピオイド受容体（以下、κ受容体と同義に用いる）は、ヒトや他の哺乳動物の皮膚や体細胞組織をはじめとする末梢組織ならびに内臓に分布する。κ受容体は、脳にも見いだされる。末梢組織でκ受容体が活性化すると、痛みや炎症反応が抑制されるが、脳でκ受容体が活性化されると鎮静作用が生じ、重篤な不快感や幻覚につながることもある。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドを治療有効濃度で投与しても、実質的に血液脳関門を通過しないため、血液脳関門をいくらか通過する他の多くのκアゴニストにおける鎮静作用や幻覚発現作用が最小限になるか、完全に回避される。

本発明の合成ペプチドアミドが血液脳関門を通過する度合いを測定する上で役立つ手段の１つに、ピーク血漿濃度と脳組織内での濃度の比がある。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドを約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与すると、ピーク血漿濃度に達した時点で血漿中と比較して脳内では合成ペプチドアミドが少なくとも約５分の１の濃度になる。

本発明の合成ペプチドアミドが血液脳関門を通過する度合いを測定する上で役立つ別の有用な手段として、鎮静作用を達成するのに必要な用量と鎮痛作用を達成するのに必要な用量との比がある。κ受容体アゴニストによるκ受容体刺激の鎮痛作用および鎮静作用については、当業者間で周知の標準的なアッセイで測定可能である。

特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドは、鎮静作用でのＥＤ_５０が鎮痛作用でのＥＤ_５０の少なくとも約１０倍のものである。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドは、鎮静作用でのＥＤ_５０が鎮痛作用でのＥＤ_５０の少なくとも約３０倍である。さらに他の実施形態態では、本発明の合成ペプチドアミドは、鎮静作用でのＥＤ_５０が鎮痛作用でのＥＤ_５０の少なくとも約５０倍である。

別の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドは、マウスの活動量減少(locomotion-reduction)アッセイにおける鎮静作用でのＥＤ_５０が、マウスのライジングアッセイにおける合成ペプチドアミドの鎮痛作用でのＥＤ_５０の少なくとも約１０倍である。

本発明の合成ペプチドアミドが血液脳関門を通過するであろう度合いを予測する、別の有用な判断材料として、治療関連濃度で送達したときのヒトの細胞または他の哺乳類の細胞への合成ペプチドアミドの膜透過値によるものがある。特定の実施形態では、治療関連濃度での本発明の合成ペプチドアミドは、適宜培養したヒトまたは他の哺乳類の細胞の単層膜をほとんど貫通しないか、実質的基にまったく貫通することができない。この透過パラメータは、見かけの透過性すなわち、該当する化合物に対する特定の細胞単層膜の透過性を示すＰ_ａｐｐとして表すことが可能なものである。適宜培養できる哺乳類の細胞単層膜であれば、どのようなものを利用して該当する特定化合物に対する透過性を求めてもよいが、この目的では特定の細胞系が用いられることが多い。たとえば、本発明の化合物での膜の透過性を調べるための単層膜培養試験系として使用可能なヒト結腸腺癌に、Ｃａｃｏ−２細胞系がある。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドのＰ_ａｐｐが約１０^−６ｃｍ／秒未満である。他の特定の実施形態態では、本発明の合成ペプチドアミドのＰ_ａｐｐが約１０^−７ｃｍ／秒未満である。

一実施形態では、ラットにおいて本発明の合成ペプチドアミドの用量を約３ｍｇ／ｋｇとすると合成ペプチドアミドがピーク血漿濃度に達し、脳での濃度がそのようなピーク血漿濃度よりも少なくとも約５分の１になる。

別の実施形態では、ラットで合成ペプチドアミドを約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与した後、約３時間で本発明の合成ペプチドアミドが最大薬効の少なくとも約５０％に達する。

一実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドは、ヒトなどの哺乳動物で、長時間継続する持続作用を示す。一態様では、合成ペプチドアミドの持続作用が、０．１ｍｇ／ｋｇの合成ペプチドアミドの投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約５０％である。別の態様では、合成ペプチドアミドの持続作用は、０．１ｍｇ／ｋｇの合成ペプチドアミドの投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約７５％。特定の態様では、合成ペプチドアミドの持続作用は、０．１ｍｇ／ｋｇの合成ペプチドアミドの投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約９０％である。具体的な態様では、合成ペプチドアミドの持続作用は、０．１ｍｇ／ｋｇの合成ペプチドアミド投与後３時間の時点で、最大薬効の少なくとも約９５％である。

別の実施形態では、本発明は、上述の実施形態のいずれかに基づく合成ペプチドアミドと、薬学的に許容される賦形剤または担体とを含む医薬組成物を提供するものである。本発明は、κオピオイド受容体に対して選択的である本発明の合成ペプチドアミドを用いるおよび／または含む方法、組成物または剤形を提供するものである。特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドは、κオピオイド受容体に対して強い親和性を呈し、κオピオイド受容体アゴニストとしての力価が高い。

本発明の合成ペプチドアミドなどの化合物のプロドラッグは、投与時に代謝または他のプロセスで、その化合物の生物学的に活性な形態に変換可能な薬学的に許容される誘導体を含む。プロドラッグは、バイオアベイラビリティ、安定性または特定の製剤への適合性の点で、活性化合物よりもプロドラッグのほうが望ましい特性を持つような場合に特に適している。

本明細書で使用する場合、κオピオイド受容体関連疾患、症状または機能障害とは、κオピオイド受容体の活性化によって予防可能または治療可能なあらゆる疾患、症状または機能障害のことである。一態様では、本発明の合成ペプチドアミドは、κオピオイド受容体を活性化するκオピオイド受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドの特定の用量および投与経路を医師が選択して、その疾患、症状または機能障害を完全に予防または治療することが可能である。他の実施形態態では、本発明の合成ペプチドアミドの特定の用量および投与経路を医師が選択して、１つまたは複数の疾患兆候、症状または機能障害を寛解または低減することができる。

本明細書で使用する場合、本発明の合成ペプチドアミドの「有効量」または「十分な量」とは、特定の疾患、機能障害、症状または副作用の兆候を阻害、予防または治療する上で治療的に有効となり得る、本明細書で説明するような化合物の量を示す。本明細書で使用する場合、μオピオイドアゴニスト鎮痛化合物の「低用量」とは、本発明の合成ペプチドアミドなどのκオピオイドアゴニストと併用した場合に、特定の患者に、その化合物の１つまたは複数の副作用を抑える目的で通常与えられる量よりも少ない用量を示す。この用量をどのくらい減らすかについては、μオピオイドアゴニスト鎮痛の鎮痛または他の治療効果が、本発明の合成ペプチドアミドの鎮痛または他の治療効果によって少なくとも部分的にそして最も好ましくは完全に相殺される、副作用の低減に鑑みたときに、化合物の鎮痛または他の治療効果の低下が許容範囲内であるような形で選択することが可能である。μオピオイドアゴニスト鎮痛化合物と、κオピオイドアゴニストとして作用する本発明の合成ペプチドアミドとを同時投与すると、低用量の合成ペプチドアミドおよび／またはμオピオイドアゴニスト鎮痛化合物を取り込んで、これよりも高用量の合成ペプチドアミドまたはμオピオイドアゴニスト鎮痛化合物を単独で投与した場合と同一の治療効果を得ることができる。

本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される」とは、妥当な医学的判断の範囲内で、重篤な毒性、刺激、アレルギー反応または他の合併症を伴わずに、人間および動物の組織と接触させるのに適した、治療対象となる病状の合理的な損益比に見合う化合物、素材、組成物および／または剤形を示す。

本明細書で使用する場合、「薬用単位」とは、治療対象となる特定の個人または症状に合わせた単位薬用量として適した、物理的に別個の単位を示す。それぞれの単位は、任意に医薬担体との併用で所望の治療効果を生成するよう算出された、所定量の活性合成ペプチドアミド化合物を含むものであってもよい。単位剤形の具体的な内容については、（ａ）活性化合物の独特の特徴と、達成すべき特定の治療効果ならびに、（ｂ）このような活性化合物の配合技術分野に固有の制約化合物によって決定すればよい。薬用単位は、単位重量あたりの化合物重量で表されることが多く、たとえば被検体または患者の体重１キログラムあたりの化合物量（ｍｇ／ｋｇ）をミリグラム単位で示す。あるいは、特定の投与計画の単位時間ごとに単位重量あたりの化合物量（ｍｇ／ｋｇ／日）として薬用量を表すことも可能である。さらに別の例では、体の単位表面積あたりの化合物量（ｍｇ／ｍ^２）あるいは、単位時間ごとの体の単位表面積あたりの化合物量（ｍｇ／ｍ^２／日）として薬用量を表すことも可能である。外用製剤では、２分の１インチの軟膏を目に塗布し、製剤中の化合物濃度を製剤に対する割合で表すなど、その製剤で従来から用いられている方法で薬用量を表すことができる。

本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」とは、親化合物の酸塩または塩基塩を形成することで、親化合物を変化させた化合物の誘導体を示す。薬学的に許容される塩の例としては、アミンなどの塩基性残基の有機酸塩または鉱物塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩などがあげられるが、これに限定されるものではない。薬学的に許容される塩としては、たとえば無毒の無機酸または有機酸から形成される、親化合物の従来の無毒の塩または第４級アンモニウム塩があげられる。たとえば、このような従来の無毒の塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸由来のもの；酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸などの有機酸から調製される塩などがあげられる。これらの生理学的に許容可能な塩は、過剰な酸を用いて水性アルコールに遊離アミン塩基を溶解したり、ヒドロキシドなどのアルカリ金属塩基あるいはアミンで遊離カルボン酸を中和したりするなど、当該技術分野において周知の方法で調製される。よって、合成ペプチドアミドの薬学的に許容される塩は、酸性、塩基性のいずれかまたは両方の官能基を有するペプチドアミドから形成可能である。たとえば、カルボン酸基を有するペプチドアミドは、薬学的に好適な塩基の共存下で、ナトリウムカチオンまたはカリウムカチオンなどのカチオンと対になるカルボン酸アニオンを形成できる。同様に、アミン官能基を有するペプチドアミドであれば、ＨＣｌなどの薬学的に好適な酸の共存下、塩を形成できる。

合成ペプチドアミドの薬学的に許容される溶媒和物の一例に、ペプチドアミドと溶媒分子との組み合わせがある。これは、ペプチドアミドに対する当該溶媒分子の錯体を生成する。化合物の特に好適な水和物は、同等の活性を有する水和物または投与後に活性化合物に戻る水和物である。アミンを含有する合成ペプチドアミドの薬学的に許容されるＮ−オキシドは、アミンの窒素原子が酸素原子と結合した化合物である。

本発明の合成ペプチドアミドの薬学的に許容される結晶形態、同形結晶形態または非晶質形態は、本発明による合成ペプチドアミドの、薬学的に許容される、酸性、塩基性、双性イオン性、塩、水和物または他の適宜安定した、生理学的に相溶な形のどのような結晶形態または非結晶形態であってもよい。

本発明の合成ペプチドアミドを医薬組成物に入れることが可能である。この組成物は、薬学的に許容される希釈剤、賦形剤または担体に有効量の合成ペプチドアミドを含み得る。医薬組成物に用いられる従来の賦形剤、担体および／または希釈剤は通常、不活性で調製物の大部分を構成する。

特定の実施形態では、合成ペプチドアミドが、κオピオイド受容体アゴニストである。別の実施形態では、合成ペプチドアミドが、選択的κオピオイド受容体アゴニストである。標的部位は、このような治療または予防が必要な患者または被検体におけるκ受容体であってもよい。本発明の特定の合成ペプチドアミドκオピオイド受容体アゴニストは末梢に作用し、治療有効用量でＣＮＳ作用がほとんどないかまったくない。

薬学的な賦形剤または担体は、本発明の合成ペプチドアミドの送達用の溶媒剤として適した、相溶性で無毒の物質であればどのようなものであってもよい。好適な賦形剤または担体としては、滅菌水（好ましくは発熱物質を含まない）、生理食塩水、リン酸緩衝液生理食塩水（ＰＢＳ）、水／エタノール、水／グリセリン、水／ソルビトール、水／ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、セチルステアリルアルコール、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、ラクトース、グルコース、微結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、クエン酸、酒石酸、油、脂肪性物質、ワックスあるいは、上述したものを任意に組み合わせた好適な混合物があげられるが、これに限定されるものではない。

本発明による医薬組成物は、液体、半固体または固体の剤形として処方可能なものである。たとえば、医薬組成物は、注射用溶液、ドロップ、シロップ、スプレー、懸濁液、錠剤、パッチ、カプセル、包帯剤、坐薬、軟膏、クリーム、ローション、ゲル、エマルション、エアロゾルの形であってもよいし、ペレットまたは顆粒などの微粒子の形であってもよく、任意に、錠剤またはトローチ剤として圧縮したものや、カプセルに封入したものまたは液体に懸濁させたものであってもよい。錠剤は、バインダー、潤滑剤、希釈剤、着色剤、香味剤、湿潤剤を含むものであってもよく、腸溶コーティングをほどこして、胃の酸性環境では守られて腸管腔における胃よりもアルカリ性の条件で溶解されるようにしてもよい。あるいは、錠剤が糖衣錠であってもよいし、水溶性フィルムで被覆したものであってもよい。薬学的に許容されるアジュバント、緩衝剤、分散助剤などを、医薬組成物に含ませるようにしてもよい。

バインダーとしては、たとえば、スターチ、粘物質、ゼラチンおよびスクロースがあげられる。潤滑剤としては、タルク、リコポディウム、マグネシウムおよびステアリン酸カルシウム／ステアリン酸があげられる。希釈剤としては、ラクトース、スクロース、マンニトール、塩、スターチおよびカオリンがあげられる。湿潤剤としては、プロピレングリコールおよびモノステアリン酸ソルビタンがあげられる。

本明細書で使用する場合、局所適用または投与とは、本発明による医薬組成物を、有痛性および／または炎症症状を呈する炎症関節などの部位に投与することを示す。このような局所適用には、注射による関節内(intra-articular)適用などの関節内(intrajoint)適用、カテーテルによる適用または生体適合性装置の一部としての送達を含む。よって、局所適用は、たとえば、関節、軟組織部分（筋肉、腱、靱帯、眼内のまたは他の体内肉質部分など）または他の体内部分などの体内の不連続の部分への適用を示す。特に、本明細書で使用する場合、局所適用とは、組成物の存在下で活性剤を実質的に全身送達および／または全身投与をしない適用を示す。また、本明細書で使用する場合、局所適用とは、体の不連続の部分すなわち、さまざまな大きな体腔（たとえば、腹腔および／または胸膜腔など）以外の部分への適用を示すものである。

本明細書で使用する場合、外用塗布とは、表皮、他の真皮または他の体組織を含むがこれに限定されるものではない、体の任意の部分内または任意の部分上であればよい皮膚、眼、粘膜および唇などへの体の表面への塗布を示す。外用投与または塗布とは、本発明による医薬組成物を、皮膚または膜、特に角膜または口腔粘膜、膣粘膜または肛門粘膜などの組織に直接接触させることを意味する。よって、本明細の目的では、外用塗布とは、たとえば、皮膚（外皮または表皮）および粘膜（粘液産生、分泌および／または接触面）などの到達可能な体の表面の組織への適用を示す。特に、外用塗布とは、本組成物の存在下で活性化合物をほとんどまたは実質的にまったく全身送達しない適用を示す。一例としての粘膜表面として、眼、口（唇、舌、歯肉、頬、舌下腺および口蓋など）、喉頭、食道、気管支、気管、鼻孔、膣および直腸／肛門の粘膜表面があげられる。

経口投与の場合、カプセル、錠剤、粉末などの固体剤形で活性成分を投与してもよいし、エリキシル剤、シロップ、懸濁液などの液体剤形で投与してもよい。活性成分を、グルコース、ラクトース、スクロース、マンニトール、スターチ、セルロースまたはセルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ナトリウムサッカリン、滑石、炭酸マグネシウムなどの粉末状担体および不活性成分と一緒に、ゼラチンカプセルに封入することも可能である。添加して所望の色、味、安定性、緩衝能、分散性または他の周知の所望の特徴を提供できる別の不活性成分の例として、ベンガラ、シリカゲル、ラウリル硫酸ナトリウム、二酸化チタン、食用白色インクなどがあげられる。同様の希釈剤を利用して圧縮錠を製造することも可能である。錠剤とカプセルのどちらも、徐放製品として製造して、薬物を数時間にわたって連続放出することが可能である。圧縮錠を糖衣錠またはフィルムコーティングしたものとして、不快な味を隠したり錠剤を周囲から保護したりすることが可能であり、あるいは、腸溶コーティングをほどこして消化管で選択的に崩壊させることも可能である。経口投与用の液体剤形には、患者に受け入れてもらいやすくするために着色剤および香味剤を含有させてもよい。薬剤の安定性と吸収を容易にするために、胃の過酷なタンパク質分解環境を通り過ぎてから本発明のペプチドをカプセルから放出することも可能である。経口投与後にペプチドの安定性と吸収を高めるための方法については、当該技術分野において周知である（Mahato RI. Emerging trends in oral delivery of peptide and protein drugs. Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems. 20:153-214, 2003など）。

トローチ剤、咀嚼錠およびチューインガムなどの剤形を利用すると、有意な頬側吸収性を持つ本発明の合成ペプチドアミド化合物の経口剤形と比較して、一層短時間で治療作用が得られる。チューインガム製剤は、ベースが主にガムを構成している固体状の一用量調製剤であり、咀嚼を想定してはいるが嚥下は前提になく、咀嚼によって放出され、口内の痛みや炎症の局所治療あるいは頬側粘膜からの吸収後の全身送達に用いられることを想定した１つまたは複数の本発明の化合物を含有する。たとえば、AthanikarおよびGublerに付与された、発明の名称「Process for manufacturing a pharmaceutical chewing gum」の米国特許第６，３２２，８２８号を参照のこと。

経鼻投与の場合、末梢選択的κオピオイド受容体アゴニストをエアロゾルとして処方することが可能である。「エアロゾル」という用語には、細気管支または鼻孔への吸入が可能な本発明の化合物の気体による懸濁相を含む。具体的には、エアロゾルは、定量吸入器またはネブライザあるいはミスト噴霧器で生成できるような、本発明の化合物の液滴の気体による懸濁物を含む。また、エアロゾルは、空気または他のキャリアガスに懸濁された本発明の化合物の乾燥粉末組成物も含み、これは吸入装置などからのガス注入によって送達できるものである。Ganderton & Jones, Drug Delivery to the Respiratory Tract,Ellis Horwood (1987);Gonda (1990) Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 6:273-313；およびRaeburn et al. (1992) J. Pharmacol. Toxicol. Methods 27:143-159を参照のこと。

本発明の医薬組成物は、たとえば、静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、鼻腔内、経皮、腟内、直腸内、肺内または経口送達などの全身送達に適した製剤で調製可能なものである。あるいは、本発明の医薬組成物を、たとえば、外用またはイオン泳動送達用などの局所送達用あるいは、製剤をコーティング、拡散または含浸させたパッチによる経皮送達用、関節内注射などによる関節への局所適用用に適宜処方してもよい。

非経口投与用調製物としては、すぐに注射できる状態の滅菌溶液、使用直前に溶媒と混合できる状態の乾燥滅菌可溶性生成物（皮下錠剤を含む）、すぐに注射できる状態の滅菌懸濁液、使用直前に溶媒剤と混合できる状態の乾燥滅菌不溶性生成物、滅菌エマルションがあげられる。溶液は、水性であっても非水性であってもよく、注射、点滴による送達あるいは、移植可能なポンプを用いた送達向けに処方される。静脈内投与、皮下投与、筋肉内の投与の場合、本発明の有用な製剤としては、徐放特性のあるマイクロカプセル調製物(R. Pwar et al. Protein and peptide parenteral controlled delivery. Expert Opin Biol Ther. 4(8):1203-12, 2004)あるいは、脈管構造での循環時間が長くなることが当該技術分野において周知であって、一例としての形態がポリエチレンコートリポソームである、リポソームへの封入（Koppal, T. "Drug delivery technologies are right on target", Drug Discov. Dev. 6, 49-50, 2003など）がある。

眼投与の場合、本発明は、治療を必要とする患者の眼に、治療有効量の本発明の合成ペプチドアミドを投与することを含む、緑内障または眼痛および炎症を治療する方法を提供するものである。合成ペプチドアミドは、合成ペプチドアミドの徐放用のポリマーを含有するものであってもよいコンタクトレンズまたは眼内インプラントを用いて、眼に適合する医薬担体で外用投与または非全身投与可能である。このような眼に適合する医薬担体としては、アジュバント、抗菌保存剤、界面活性剤、ビスコライザ(viscolyzer)などがあげられる。多くの化合物が、濃度が高いと眼にとっては刺激になり、濃度が低いほど刺激が少ないことが当該技術分野において周知である。よって、製剤は、最低有効濃度の活性化合物、保存剤、界面活性、および／またはビスコライザを含むように設計されることが多く、前記ビスコライザは、眼への刺激を減らすよう表面張力が大きく、かつ、眼表面で眼溶液の保持量を増すものであると好ましい。このような本発明の合成ペプチドアミドの徐放は、インプラントであれば６か月間から１年間、コンタクトレンズであればこれよりも短い期間（３〜１４日間）継続可能である。このようなインプラントには、浸透ポンプ、生分解性物質または眼内徐放装置を用いることが可能である。このような外用組成物は、リポソームを併用するか併用しない緩衝生理食塩水溶液を含むものであってもよい。

水性ポリマー溶液、水性懸濁液、軟膏およびゲルを、眼に適用する目的で本発明の合成ペプチドアミドの外用製剤に利用することが可能である。水性製剤は、合成ペプチドアミドのリザーバを作製するリポソームを含むものであってもよい。これらの外用製剤の中には、軟膏塗布に伴う視覚上の不都合や障害を伴わずに、前角膜での保持性を高めるゲルもある。眼に適合する医薬担体はまた、生分解性合成ポリマーを含むものであってもよい。人間での使用が認可された生分解性ミクロスフェア組成物には、ポリラクチド：ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−コ−グリコール）酸がある。別の生分解性製剤としては、ポリ（無水物−コ−イミド）、ポリ（乳酸−グリコール酸）、ポリエチル−２−シアノアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリヒドロキシブチレートバレレート、ポリオルトエステル、ポリエチレン−オキシド／ポリブチレンテレフタレートがあげられるが、これに限定されるものではない。本発明の合成ペプチドアミドを含む徐放組成物を眼内移植または眼に注射すると、眼内圧を長期制御（数か月から数年の範囲）することが可能であるため、外用調製物の必要性が回避または低減される。眼薬物を処方・分注するための有用な方法が、Schwartz et alに付与された米国特許第７，１２２，５７９号明細書ならびに、Morizono et al.に付与された米国特許第７，１０５，５１２号明細書に開示されている。コンタクトレンズでの眼薬物の処方法は、Gulsen and Chauhan, Ophthalmic drug delivery through contact lenses. Investigative Ophthalmology and Visual Science, (2004) 45:2342-2347に開示されている。

経皮送達用調製物は、前記送達に適した装置に取り込まれ、前記装置は、たとえば、イオン泳動(Kalia YN et al. Iontophoretic Drug Delivery. Adv Drug Deliv Rev. 56:619-58, 2004)または真皮透過表面（Prausnitz MR. Microneedles for Transdermal Drug Delivery. Adv Drug Deliv Rev. 56:581-7, 2004）を利用したものであり、一例として、薬剤の経皮送達を改善する上で有用であることが当該技術分野において周知のものがあげられる。電気輸送装置とその操作方法が、米国特許第６，７１８，２０１号明細書に開示されている。イオン泳動を用いてペプチドの経皮送達を促進する方法が、米国特許第６，３１３，０９２号明細書および同第６，７４３，４３２号明細書に開示されている。

本明細書で使用する場合、「電気輸送」、「イオン泳動」、「イオン泳動の」という用語は、作用剤の入ったリザーバに起電力を印加して、１つまたは複数の薬学的に活性な化合物を体表面（皮膚または粘膜など）経由で送達することを示す。化合物については、エレクトロマイグレーション、電気穿孔、電気浸透またはこれらの任意の組み合わせで送達できる。電気浸透は、電気流体力学的流動、電気対流、電気誘導浸透とも呼ばれている。通常、化合物が組織に電気浸透するのは、たとえば、他のイオン性種のエレクトロマイグレーションによる溶媒流など、治療種の入ったリザーバに起電力を印可してその化合物が含まれる溶媒が移動した結果である。電気輸送プロセスの間、「電気穿孔」とも呼ばれる一過的に存在する皮膚孔の形成など、皮膚に特定の変化や変動が生じることがある。体表面への変化または変動に助けられた電気による種の輸送（皮膚孔の形成など）も、本明細書で使用する場合は「電気輸送」という用語に含まれる。よって、本明細書で使用する場合、本発明の化合物に適用して、「電気輸送」、「イオン泳動」、「イオン泳動の」という用語は、（１）荷電した作用剤のエレクトロマイグレーションによる送達、（２）荷電していない作用剤の電気浸透プロセスによる送達、（３）荷電した作用剤または荷電していない作用剤の電気穿孔による送達、（４）荷電した作用剤のエレクトロマイグレーションと電気浸透とを組み合わせたプロセスによる送達および／または（５）荷電した作用剤と荷電していない作用剤との混合物の、エレクトロマイグレーションと電気浸透とを組み合わせたプロセスでの送達を示す。電気輸送装置には通常、２個の電極が用いられ、いずれも体の皮膚のどこかと電気的に密着するよう配置される。一方の電極は活性電極またはドナー電極と呼ばれ、治療薬を体に送達する電極である。他方の電極は、対(counter)電極または対(return)電極と呼ばれ、体を経由する電気回路を閉じる役目を果たす。患者の皮膚と併せて、電池などの電気エネルギ源ならびに、通常は装置を流れる電流を制御できる回路と電極が接続されて、回路が完成する。

経皮送達対象となる化合物の電荷に応じて、負極またはカソードが、活性電極またはドナー電極であればよい。よって、本明細書では実施例１に例示する化合物など、輸送対象となる化合物が正に荷電している場合、正極（負極）を活性電極とし、負極（カソード）が回路を完成させる対電極としての役目を果たす。逆に、送達対象となる化合物が負に荷電している場合、カソード電極が活性電極になり、アノード電極が対電極になる。さらに、電気輸送装置には、体に送達される治療薬のリザーバまたはソースが必要である。このような薬剤リザーバは、電気輸送装置の負極またはカソードに接続され、１種以上の所望の種または作用剤を供給する固定源または可動式供給源となる。各電極アセンブリは、使用時に患者の皮膚に接触されるイオン伝導性の液体リザーバとイオン透過関係にある、導電性の電極で構成される。液体の入った容器よりも水和したゲルのほうが取り扱いと製造が容易であるため、Webster（米国特許第４，３８３，５２９号明細書）に説明されているようなゲルリザーバが、リザーバの１つの形態である。本発明のペプチド化合物の塩が水溶性であることと、皮膚に対する刺激がないためヒドロゲルリザーバと皮膚とを長時間にわたって接触させられることから、こうしたリザーバで使用可能な液体溶媒の１つに水がある。電気輸送の場合、本発明の合成ペプチドは、イオン系界面活性剤または水以外の共溶媒（たとえば、それぞれ米国特許第４，７２２，７２６号明細書および欧州特許出願第２７８，４７３号明細書を参照のこと）などのフラックスエンハンサーを用いて処方可能なものである。あるいは、たとえば、米国特許第５，２５０，０２３号明細書に記載されているように、電気輸送送達の前に皮膚の外層（すなわち角質層）を機械的に破壊することもできる。

電気輸送に非常に適した末梢合成ペプチドアミドについては、体表面（皮膚または粘膜など）を介したその電気流束を、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン(R. Burnette et al. J. Pharm. Sci. (1986) 75:738)またはバソプレシン(Nair et al. Pharmacol Res. 48:175-82, 2003)などのたとえば電気流束特性が周知の標準試験ペプチドと対比させるなどの方法で測定して選択可能である。経皮的な電気流束については、ｉｎｖｉｖｏまたはｉｎｖｉｔｒｏで実施される当該技術分野において周知の多数の方法で求めることができる。ｉｎｖｉｔｒｏで実施される方法としては、適切な哺乳動物の皮膚（人間の死体皮膚など）片を、皮膚片の角質層側がドナー区画に対向するような状態で電気流束セルのドナー区画と受容体区画との間に固定することがあげられる。送達対象となる薬剤を含有する液体溶液またはゲルを、角質層と接触して配置し、区画ごとに電極を１つずつとして電極に電流を印加する。受容体区画における薬剤の量をサンプリングして、経皮フラックスを計算する。経皮電気輸送薬剤送達を最適化するのに用いられている２つの功を奏するモデルが、ブタ単離皮膚フラップモデル(Heit MC et al. Transdermal iontophoretic peptide delivery: in vitro and in vivo studies with luteinizing hormone releasing hormone. J. Pharm. Sci. 82:240-243, 1993)と、無毛齧歯類またはモルモットから得た単離無毛皮膚の使用であり、たとえば、Hadzija BW et al. Effect of freezing on iontophoretic transport through hairless rat skin. J. Pharm. Pharmacol. 44, 387-390, 1992を参照のこと。経皮的なイオン泳動送達用の本発明の化合物は、その送達を容易にする目的で１個あるいは一般に２個の荷電した窒素を有する。

他の有用な経皮送達装置では、加圧下での高速送達によって針を使わずに皮膚浸透を達成している。当該技術分野において周知のように、当該技術分野では「透過エンハンサー」とも呼ばれる場合がある化学エンハンサーすなわち、角質層の透過性を高め、皮膚を介した薬剤の浸透をよくする薬剤と一緒に投与される（あるいは、場合によっては薬剤投与前に皮膚の前処理に用いられる）化合物を用いることで、経皮送達を改善可能である。化学的な透過エンハンサーは、無害であって、角質層を介しての薬剤の拡散（受動的拡散であるか電気輸送などのエネルギ駆動プロセスであるかを問わない）を容易にするだけの働きを持つ化合物である。たとえば、Meidan VM et al. Enhanced iontophoretic delivery of buspirone hydrochloride across human skin using chemical enhancers. Int. J. Pharm. 264:73-83, 2003を参照のこと。

直腸投与用の製薬剤形としては、全身作用向けの直腸坐薬、カプセル、錠剤があげられる。直腸坐薬とは、本明細書で使用する場合、体温で溶解または軟化して、１種または複数種の薬理学的に活性な成分または治療的に活性な成分を放出する、直腸に挿入するための固体の物体を意味する。直腸坐薬に用いられる、薬学的に許容される物質としては、ベースまたは溶媒剤ならびに、坐薬の融点を上げる作用剤があげられる。ベースの例としては、カカオバター（カカオ油）、グリセリン−ゼラチン、カルボワックス、（ポリオキシエチレングリコール）ならびに、脂肪酸のモノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリドの適切な混合物があげられる。さまざまなベースの組み合わせを利用することも可能である。坐薬の融点を上げる作用剤としては、鯨ロウおよびワックスがあげられる。直腸坐薬は、圧縮方法で調製されたものでもよいし、成形で調製されたものでもよい。直腸坐薬は一般に、重量が約２グラムから約３グラムである。直腸投与用の錠剤およびカプセルは、経口投与用製剤の場合と同一の薬学的に許容される物質を用いて、同一の方法で製造される。

非経口調製物に用いられる薬学的に許容される担体としては、水性溶媒剤、非水性溶媒剤、抗菌剤、等張剤、緩衝液、酸化防止剤、局所麻酔薬、懸濁剤および分散助剤、乳化剤、金属イオン封鎖剤またはキレート剤および他の薬学的に許容される物質があげられる。

水性溶媒剤の例としては、注射用塩化ナトリウム、注射用リンゲル溶液、注射用等張デキストロース、注射用滅菌水、注射用デキストロースおよび乳酸リンゲル溶液があげられる。非水性非経口溶媒剤としては、野菜由来の不揮発性油、ワタ種子油、とうもろこし油、ゴマ油および落花生油があげられる。複数回投与用の容器に封入される非経口調製物には、フェノールまたはクレゾール、水銀、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチルおよびプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル、チメロサール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウムをはじめとする静菌濃度または静真菌濃度の抗菌剤を添加しておく必要がある。等張剤としては、塩化ナトリウムおよびデキストロースがあげられる。緩衝液としては、リン酸塩およびクエン酸塩があげられる。酸化防止剤としては、亜硫酸水素ナトリウムがあげられる。局所麻酔薬としては、塩酸プロカインがあげられる。懸濁剤および分散助剤としては、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリドンがあげられる。乳化剤としては、ポリソルベート８０(Tween 80)があげられる。ＥＤＴＡなどの金属イオン封鎖剤または金属イオンのキレート剤を混合してもよい。医薬担体としては、水混和性溶媒剤の場合でエチルアルコール、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールもあげられ、水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸または乳酸を加えることで、ｐＨを生理学的に適合されるｐＨに調節することができる。

活性成分については、一度に投与してもよいし、間隔をあけて投与されるか、あるいは徐放製剤である少用量ずつに分けてもよい。「徐放製剤」という用語は、被検体に対して、たとえば数日間から数週間の時間をかけて本発明の合成ペプチドアミドを連続送達できる製剤を包含する。このような製剤は、皮下投与してもよいし筋肉内投与してもよいものであり、被検体内で時間をかけてあらかじめ定められた量の化合物の連続的に一定して放出できる。合成ペプチドアミドの徐放製剤は、たとえば、本明細書に援用する米国特許第４，６７７，１９１号明細書および同第４，７２８，７２１号明細書に記載されているものなどの薬剤含有ポリマーマイクロカプセルからなる製剤であってもよい。投与によって、所望の効果が得られる有効量が提供されるように、薬学的に活性な化合物の濃度を調節する。厳密な用量は、当該技術分野において周知のように、患者または動物の年齢、体重、症状に左右される。特定の被検体について、個々の必要性と製剤を投与する人物または投与を監督する人物の専門判断により、具体的な投与計画を経時的に調節することが可能である。よって、本明細書に記載の濃度範囲は一例にすぎず、特許請求の範囲に記載の発明の範囲または実用性を限定するものではない。

単位用量の非経口調製物としては、アンプルでのパッケージングまたは送達用の針のある注射器または針のない注射器への封入がある。非経口投与用の調製物はいずれも、当該技術分野で実施されているように一般に滅菌されている。一例として、活性化合物を含有する滅菌水性緩衝溶液の静脈点滴が、効果的な投与モードの１つである。別の実施形態では、活性剤を含む滅菌水性または油性溶液または懸濁液を必要に応じて注射して、所望の薬理学的効果を得ることが可能である。

本発明の医薬組成物は、静脈内、経皮、経粘膜、鼻腔内、皮下、筋肉内、経口または外用（たとえば眼になど）送達または投与可能なものである。組成物は、疾患または機能障害に羅患しているか、あるいはその危険性のある個体の予防治療のために投与可能なものである。治療目的での適用では、医薬組成物は一般に、疾患または機能障害のある被検体に対して、その疾患または機能障害を阻害、予防または寛解するのに十分な量で投与される。これを達成するのに適した量を、「治療有効用量」と定義する。

本発明の医薬組成物は、上述したいずれの製剤および送達モードでも、予防目的または治療目的で哺乳動物に投与可能である。哺乳動物は、どのような哺乳動物であってもよく、たとえば、家畜または野生の哺乳動物または野獣の哺乳動物であってもよい。哺乳動物は、どのような霊長目、有蹄動物、犬類または猫類であってもよい。たとえば、限定することなく、哺乳動物としては、イヌまたはネコなどのペットまたはコンパニオンアニマル；サラブレッドのウマまたはショー用動物などの高価な哺乳動物；ウシ、ヤギ、ヒツジまたはブタなどの家畜；または類人猿、ゴリラ、オランウータン、キツネザル、サルまたはチンパンジーなどの霊長目があげられる。本発明の医薬組成物を用いる予防法または治療に適した哺乳動物はヒトである。

本発明の医薬組成物は、κオピオイド受容体の活性化によって治療可能な疾患または症状のある哺乳動物に投与可能なものである。あるいは、この医薬組成物は、κオピオイド受容体の活性化によって予防可能な疾患または症状に羅患またはこれを発症する危険性のある哺乳動物に予防薬として投与可能なものである。本発明の医薬組成物を投与することで治療または予防可能な疾患または症状としては、限定することなく、痛み、炎症、掻痒症、低ナトリウム血症、低カリウム血症、鬱血性心不全、肝硬変、ネフローゼ症候群、高血圧症、浮腫、腸閉塞、咳、緑内障などの症状をはじめとして、κオピオイド受容体の活性化によって寛解可能な症状があげられる。

特定の実施形態では、本発明の医薬組成物が、他のオピオイド、カンナビノイド、抗鬱剤、抗痙攣剤、神経遮断薬、抗ヒスタミン薬、アセトアミノフェン、副腎皮質ステロイド、イオンチャネル遮断剤、非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、利尿薬（その多くが本発明の合成ペプチドアミドと相乗効果をなす）を含むが、これに限定されるものではない、１つまたは複数の他の治療用化合物またはアジュバントと同時投与可能あるいは、これを含むことが可能なものである。

好適なオピオイドとしては、限定することなく、アルフェンタニル、アルファプロジン、アニレリジン、ブレマゾシン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、コデイン、コノルホン、デキストロモラミド、デキストロプロポキシフェン、デゾシン、ジアモルヒネ、ジヒドロコデイン、ジヒドロモルヒネ、ジフェノキシラート、ジピパノン、ドクスピコミン、エトヘプタジン、エチルケタゾシン、エチルモルヒネ、エトルフィン、フェンタニール、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、ケトベミドン、レボメタジル、レボルファノール、ロフェンタニル、ロペラミド、メペリジン（ペチジン）、メプタジノール、メタドン、モルヒネ、モルヒネ−６−グルクロニド、ナルブフィン、ナロルフィン、ニコモルヒネ、オキシコドン、オキシモルフォン、ペンタゾシン、フェナゾシン、フェノペリジン、ピリトラミド、プロピラム、プロポキシフェン、レミフェンタニル、スフェンタニル、チリダート(tilidate)、トナゾシン、トラマドールがあげられる。

本発明の一実施形態は、モルヒネ、フェンタニール、ヒドロモルホンまたはオキシコドンなどのμオピオイド受容体で実質的なアゴニスト活性を持つオピオイドと、本発明の合成ペプチドアミドとを、μオピオイド用量節約効果を得る目的で同時処方および／または同時投与することであり、この場合、μオピオイドの用量が、特にオピオイドの影響を受けやすい患者でμオピオイドに一般的な副作用を最小限にするところまで抑えられる。このような副作用としては、便秘、悪心、嘔吐、鎮静、呼吸抑制、掻痒症（痒み）、精神錯乱、見当識障害および認知障害、尿閉、胆道痙攣、譫妄、ミオクローヌス発作、発作があげられる。μオピオイドの用量をどの程度まで減らすかについては専門家の判断が必要であり、さまざまなμオピオイドに特有の特徴ならびに、痛みの強さ、患者の年齢、併発している疾患、現時点での薬剤投与計画、潜在的な薬剤相互作用、過去の治療成果、患者の好みといった患者の特徴にも左右される(McCaffery, M. and Pasero, C., Pain Clinical Manual, Second Edition, Mosby, 1999)。

本発明の医薬組成物との併用投与またはこれに取り入れての投与に適したカンナビノイドとして、たとえば、テトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）またはＴＨＣ誘導体などのあらゆる天然カンナビノイドあるいは、たとえば、レボナントラドール、マリノール、ナビロン、リモナバンまたはサビテックス(savitex)などの合成カンナビノイドがあげられる。

本発明の医薬組成物との同時投与またはこれに取り入れての投与が可能な好適な抗鬱剤としては、たとえば、イミプラミン、デシプラミン、トリミプラミン、プロトリプチリン、ノルトリプチリン、アミトリプチリン、ドキセピン、クロミプラミンなどの三環系抗鬱剤；アモキサピン、マプロチリン、トラゾドン、ブプロピオン、ベンラファキシンなどの非定型抗鬱剤；フルオキセチン、セルトラリン、パロキセチン、シタロプラム、フルボキサミンなどの選択的セロトニン再取り込み阻害剤；レボキセチンなどの選択的ノルエピネフリン再取り込み阻害剤；またはネファゾドンおよびミルタザピンなどの二重作用抗鬱剤があげられる。

本発明の医薬組成物との同時投与またはこれに取り入れての投与が可能な好適な神経遮断薬としては、たとえば、ドンペリドン、メトクロプラミド、レボスルピリド、スルピリド、チエチルペラジン、ジプラシドン、ゾテピン、クロザピン、クロルプロマジン、アセトフェナジン、カルフェナジン、クロルプロチキセン、フルフェナジン、ロキサピン、メソリダジン、モリンドン、ペルフェナジン、ピモジド、ピペラセタジン、パークロルペラジン(perchlorperazine)、チオリダジン、チオチキセン、トリフロペラジン、トリフルプロマジン、ピパンペロン、アンペロジド、クエチアピン、メルペロン、レモキシプリド、ハロペリドール、リスペリドン、オランザピン、セルチンドール、ジプラシドン、アミスルプリド、プロクロルペラジン、チオチキセンなどのＤ２ドパミン受容体アンタゴニスト活性のある化合物といった神経遮断薬があげられる。

フェノバルビタール、フェニトイン、プリミドン、カルバマゼピン、エトスクシミド、ラモトリギン、バルプロ酸、ビガバトリン、フェルバマート、ガバペンチン、レベチラセタム、オクスカルバゼピン、レマセミド、チアガビン、トピラマートなどの抗痙攣剤も、本発明の医薬組成物に有用に取り入れることが可能なものである。

メトカルバモール、オルフェナドリン、カリソプロドール、メプロバメート、カルバミン酸クロルフェネシン、ジアゼパム、クロルジアゼポキシド、クロルゾキサゾンなどの筋肉弛緩薬；スミトリプタンなどの抗偏頭痛薬、カフェイン、メチルフェニデート、アンフェタミン、モダフィニルなどの滋養強壮薬；クロルフェニラミン、シプロヘプタジン、プロメタジン、ピリラミンなどの抗ヒスタミン薬ならびに、メチルプレドニゾロン、ベタメタゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、コルチゾン、デキサメサゾン、プレドニゾン、アルクロメタゾン、クロベタゾール、クロコルトロン、デソニド、デソキシメタゾン、ジフロラゾン、フルオシノロン、フルオシノニド、フルランドレノリド、フルチカゾン、フロロメタロン、ハルシノニド、ハロベタゾール、ロテプレドノール、モメタゾン、プレドニカルベート、トリアムシノロンなどの副腎皮質ステロイドも、本発明の医薬組成物に取り入れることが可能なものである。

たとえば、ナトリウムイオンチャネルブロッカー、カルバマゼピン（一般に、耳鳴症、不整脈、脳梗塞および癲癇の治療に用いられているようなもの）などのイオンチャネル遮断剤も、本発明の医薬組成物との同時投与またはこれに取り入れての投与が可能である。上記以外あるいは上記に加えて、ケタミンなどのＮＭＤＡ受容体に関連するイオンチャネルのアンタゴニストの場合と同様にジコノチドなどのカルシウムイオンチャネルブロッカーを用いることも可能である。これらのイオンチャネルブロッカーのうちの少なくともいくつかが、κアゴニストの鎮痛作用を増強でき、よって情動性(affective)除痛に必要な容量を減らすことができるという証拠がある。たとえば、Wang et al., 2000, Pain 84: 271-81を参照のこと。

本発明の医薬組成物との同時投与またはこれに取り入れての投与が可能である、抗炎症活性および／または鎮痛活性のある好適なＮＳＡＩＤまたは他の非オピオイド化合物として、以下の物質すなわち、エトフェナマート、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ニフルム酸などのアミノアリールカルボン酸誘導体；アセメタシン、アンフェナク、シンメタシン、クロピラク、ジクロフェナク、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェンクロズ酸、フェンチアザク、グルカメタシン、イソキセパク、ロナゾラク、メチアジン酸、ナプロキシン(naproxin)、オキサメタシン、プログルメタシン、スリンダク、チアラミド、トルメチンなどのアリール酢酸誘導体；ブチブフェン、フェンブフェンなどのアリール酪酸誘導体；クリダナク、ケトロラック、チノリジンなどのアリールカルボン酸、ブクロクス酸、カルプロフェン、フェノプロフェン、フルノキサプロフェン、イブプロフェン、イブプロキサム、オキサプロジンなどのアリールプロピオン酸誘導体、フルルビプロフェン、ピケトプロフェン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、プロチジン酸、チアプロフェン酸などのフェニルアルカン酸誘導体；エトドラクなどのピラノカルボン酸；メピリゾールなどのピラゾール；クロフェゾン、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、フェニルピラゾリジニノン、スキシブゾン、チアゾリノブタゾンなどのピラゾロン；アスピリン、ブロモサリゲニン、ジフルシナル、フェンドサール、サリチル酸グリコール、メサラミン、サリチル酸１−ナフチル、サリチル酸マグネシウム、オルサラジンおよびサリチルアミド、サルサラート、スルファサラジンなどのサリチル酸誘導体；ドロキシカム、イソキシカム、ピロキシカムなどのチアジンカルボキサミド、その他、ε−アセトアミドカプロン酸、アセトアミノフェン、ｓ−アデノシルメチオニン、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸、アミキセトリン、ベンダザック、ブコローム、カルバゾン、クロモリン、ジフェンピラミド、ジタゾール、ヒドロキシクロロキン、インドメタシン、ケトプロフェンおよびその活性代謝物である６−メトキシ−２−ナフチル酢酸；グアイアズレン、ミコフェノール酸のヘテロ環アミノアルキルエステルおよび誘導体、ナブメトン、ニメスリド、オルゴテイン、オキサセプロール、オキサゾール誘導体、パラニリン、ピホキシム、２−置換−４，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ｓ−ヒドロキシ−１，３−ピリミジン、プロクァゾンおよびテニダプならびに、セレコキシブまたはロフェコキシブなどのｃｏｘ−２（シクロオキシゲナーゼＩＩ）インヒビターのうちの１つまたは複数があげられるが、これに限定されるものではない。

本発明の医薬品との同時投与またはこれに取り入れての投与が可能である好適な利尿薬としては、たとえば、アセタゾールアミド、ジクロフェナミド、メタゾラミドなどの炭素脱水酵素の阻害剤；グリセリン、イソソルビド、マンニトール、尿素などの浸透圧利尿薬；フロセミド、ブメタニド、エタクリン酸、トルセミド、アゾセミド、ピレタニド、トリパミドなどのＮａ^＋−Ｋ^＋−２Ｃｌ⁻共輸送阻害剤（ループ利尿薬または高限界利尿薬）；ベンドロフルメチアジド、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチクロチアジド、ポリチアジド、トリクロルメチアジド、クロルタリドン、インダパミド、メトラゾン、キネタゾンなどのＮａ^＋−Ｃｌ⁻共輸送阻害剤（チアジドおよびチアジド様利尿薬）；また、アミロライドおよびトリアムテレンなどの腎上皮Ｎａ^＋チャネルの阻害剤ならびに、スピロノラクトン、カンレノン、カンレノ酸カリウム、エプレレノンなどのミネラルコルチコイド受容体のアンタゴニスト（アンドステロンアンタゴニスト）（まとめてＫ^＋−保持性利尿薬にも分類される）があげられる。一実施形態として、ループ利尿薬またはチアジド利尿薬の用量節約効果を目的としたループ利尿薬またはチアジド利尿薬と本発明の合成ペプチドアミドとの同時処方および／または同時投与があり、この場合、特に鬱血性心不全ならびに、体液保持量の減少とナトリウムバランスの正常化が、これを必要とする患者にとって有益となり得る他の病状の場合に、望ましくない水分保持量を最小限に抑え、低ナトリウム血症を予防または低減する目的で、ループ利尿薬またはチアジド利尿薬の用量が低減される。R M Reynolds et al. Disorders of sodium balance Brit. Med. J. 2006;332:702-705を参照のこと。

κオピオイド受容体関連低ナトリウム血症は、低ナトリウム血症（低ナトリウム症状）が存在するどのような疾患または症状であってもよく、人間の場合、血漿ナトリウム濃度が１３５ｍｍｏｌ／Ｌ未満に下がると、単独で、あるいはより多くの場合、他の病状の合併症として、あるいは、ナトリウム枯渇を引き起こす薬物を使った結果として、発生し得る異常などである。

別の実施形態に、カリウム保持性利尿薬の用量を減らすことを目的としたスピロノラクトンまたはエプレレノンなどのミネラルコルチコイド受容体アンタゴニストといったカリウム保持性利尿薬と、本発明の合成ペプチドアミドとの同時処方および／または同時投与があり、この場合、肝硬変患者などの高カリウム血症または代謝性アシドーシスを最小限にするために、前記利尿薬の用量が低減される。

特定の実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドは、治療関連用量でｉｎｖｉｖｏにて投与すると長時間継続する持続作用を示すものである。たとえば、実施形態によっては、合成ペプチドアミドの量が３ｍｇ／ｋｇになる用量で本発明の合成ペプチドアミドを哺乳動物に投与すると、κオピオイド受容体依存性アッセイにて投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約５０％が維持される。他の特定の実施形態態では、合成ペプチドアミドの量が０．１ｍｇ／ｋｇになる用量で本発明の合成ペプチドアミドを哺乳動物に投与すると、κオピオイド受容体依存性アッセイにて投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約５０％が維持される。最大薬効は、特定のκオピオイド受容体依存性アッセイで、すべての被験アゴニストで測定された薬効の最高レベルとして、作業時に規定される。

特定の実施形態では、０．１ｍｇ／ｋｇの用量で本発明の合成ペプチドアミドを哺乳動物に投与すると、投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約７５％が維持される。さらに他の実施形態態では、０．１ｍｇ／ｋｇの用量で本発明の合成ペプチドアミドを哺乳動物に投与すると、投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約９０％が維持される。他の特定の実施形態態では、０．１ｍｇ／ｋｇの用量で本発明の合成ペプチドアミドを哺乳動物に投与すると、投与後３時間の時点で最大薬効の少なくとも約９５％が維持される。

本発明はさらに、哺乳動物においてκオピオイド受容体関連疾患または症状を治療または予防する方法を提供するものであり、この方法は、本発明の合成ペプチドアミドを有効量で含有する組成物を哺乳動物に投与することを含む。哺乳動物は、たとえば、家畜または野生の哺乳動物または野獣の哺乳動物など、どのような哺乳動物であってもよい。あるいは、哺乳動物は、霊長目、有蹄動物、犬類または猫類であってもよい。たとえば、限定することなく、哺乳動物としては、サラブレッドまたはショー用動物などの高価な哺乳動物といったペットまたはコンパニオンアニマル；ウシ、ヤギ、ヒツジまたはブタなどの家畜；または類人猿またはサルなどの霊長目があげられる。特定の一態様では、哺乳動物はヒトである。

有効量は、当業者が常法で判断可能なものである。たとえば、哺乳動物でκ受容体関連疾患または症状を予防または治療するのに十分な薬用単位として、有効量を求めることができる。あるいは、たとえば、体液が関節リウマチ患者の炎症関節の滑液などの標的組織に対して直接的に並置される場合など、哺乳動物における治療関連体液のＥＣ_５０濃度を近似するのに十分な量あるいは、ＥＣ_５０濃度の２倍または３倍または最大約５倍または約１０倍を近似するのに十分な量として有効量を求めてもよい。

一実施形態では、本発明の合成ペプチドアミドが、有効量の本発明の合成ペプチドアミドと薬学的に許容される賦形剤または担体とを含む医薬組成物である。一態様では、医薬組成物は、ヒトなどの哺乳動物でκオピオイド受容体関連症状を治療または予防するのに有効な量の本発明の合成ペプチドアミドを含む。別の態様では、κオピオイド受容体関連症状は、痛み、炎症、掻痒症、浮腫、腸閉塞、咳または緑内障である。

一実施形態では、本発明の医薬組成物はさらに、以下の化合物すなわち、オピオイド、カンナビノイド、抗鬱剤、抗痙攣剤、神経遮断薬、副腎皮質ステロイド、イオンチャネル遮断剤または非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）のうちの１つまたは複数を含む。

本発明の合成ペプチドアミドおよび薬学的に許容される溶媒剤または担体を含む医薬組成物を利用して、１つまたは複数の多種多様なκオピオイド受容体関連疾患、機能障害または症状を治療または予防することが可能である。

本発明の合成ペプチドアミドで予防可能または治療可能なκオピオイド受容体関連疾患、機能障害または症状は、急性疼痛または慢性疼痛、炎症、掻痒症、低ナトリウム血症、浮腫、腸閉塞、咳、緑内障を含むがこれに限定されるものではない、どのようなκオピオイド受容体関連症状であってもよい。たとえば、κオピオイド受容体関連疼痛は、神経因性疼痛、体性痛、内臓痛または皮膚痛などであり得る。疾患、機能障害または症状によっては、２以上の痛みの形態と関連しているものもある。たとえば、術後の痛みは、利用した外科手術のタイプと程度次第で、神経因性疼痛、体性痛、内臓痛および皮膚痛のいずれかまたはすべての成分を含むことがある。

κオピオイド受容体関連炎症は、副鼻腔炎、関節リウマチ腱鞘炎、滑液包炎、腱炎、外側上顆炎、癒着性関節包炎、骨髄炎、骨関節炎、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、眼炎症、耳炎症または自己免疫炎症を含むがこれに限定されるものではない、どのような炎症性疾患または症状であってもよい。

κオピオイド受容体関連掻痒症は、たとえば、結膜炎に関連するものなどの眼の掻痒症、耳の掻痒症、末期腎不全に関連する掻痒症（この場合、多くの患者が腎臓透析を受けている）、他の形態の胆汁鬱滞（原発性胆汁性肝硬変、妊娠時肝内胆汁鬱滞、慢性胆汁鬱滞性肝疾患、尿毒素、悪性胆汁鬱滞、黄疸を含む）ならびに、湿疹（皮膚炎）などの皮膚科学的な症状（アトピー性皮膚炎または接触性皮膚炎、乾癬、真性多血症、扁平苔癬、慢性単純性苔癬、シラミ症（シラミ）、甲状腺中毒症、足部白癬、蕁麻疹、疥癬、膣炎、痔に関連する肛門掻痒症を含む）ならびに、昆虫に噛まれた掻痒症、μオピオイド誘導掻痒症などの薬剤誘導掻痒症をはじめとする、どのような掻痒疾患または症状であってもよい。

κオピオイド受容体関連浮腫は、たとえば、鬱血性心疾患または抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）不適合分泌症候群による浮腫など、どのような浮腫疾患または症状であってもよい。

κオピオイド受容体関連腸閉塞は、術後腸閉塞またはオピオイド誘導腸管機能不全を含むがこれに限定されるものではない、どのような腸閉塞疾患または症状であってもよい。

κオピオイド受容体関連神経因性疼痛は、たとえば、三叉神経痛、糖尿病性疼痛、帯状疱疹関連痛などのウイルスによる痛み、化学療法に伴う痛み、神経侵害転移癌疼痛、外傷性傷害および外科手術に関連する神経因性疼痛ならびに、偏頭痛などの神経障害性成分を持つと考えられている頭痛類など、どのような神経因性疼痛であってもよい。

κオピオイド関連痛には、レーザー角膜切除術（ＰＲＫ）後、眼挫創、眼窩底骨折、化学火傷、角膜擦過傷または刺激あるいは、結膜炎関連、角膜潰瘍、強膜炎、上強膜炎、強角膜炎、眼部帯状疱疹、角膜実質炎、急性虹彩炎、乾性角結膜炎、眼窩蜂巣炎、眼窩偽腫瘍、天疱瘡、トラコーマまたはブドウ膜炎などの眼の痛みも含まれる。

κオピオイド関連痛には、咽頭痛、特に炎症症状に関連したもの、アレルギー性鼻炎、急性気管支炎、感冒、接触潰瘍、単純ヘルペスウイルス病変、感染性単核球症、インフルエンザ、喉頭癌、急性咽頭炎、急性壊死性潰瘍性歯肉炎、扁桃周囲膿瘍、咽頭火傷、咽頭炎、逆流性咽喉頭炎、急性副鼻腔炎および扁桃炎なども含まれる。

また、κオピオイド受容体関連痛は、関節痛、腎臓結石痛、尿路結石痛、胆石痛および胆管結石痛、子宮痙攣、月経困難症、子宮内膜症、乳腺炎、消化不良、術後の痛み（たとえば、虫垂切除、結腸直腸開腹手術、ヘルニア修復、前立腺切除、大腸切除、胃切除、脾臓摘出、結腸切除、人工肛門造設、骨盤腹腔鏡手術、卵管結紮、子宮摘出、精管切除または胆嚢摘出によるものなど）、医療処置後の痛み（たとえば、大腸内視鏡検査、膀胱鏡検査、子宮鏡検査または子宮頚部生検または子宮内膜生検後の痛みなど）、耳の痛み、癌の突出痛ならびに、ＩＢＤまたはＩＢＳまたは他の炎症症状といったＧＩ機能障害に関連した痛み、特に内臓の痛み（胃食道逆流性疾患、膵炎、急性多発性腎炎(polynephritis)、潰瘍性大腸炎、急性腎盂腎炎、胆嚢炎、硬変、肝腫瘍、肝炎、十二指腸潰瘍または胃潰瘍、食道炎、胃炎、胃腸炎、大腸炎、憩室炎、腸管閉塞、卵巣嚢胞、骨盤内炎症性疾患、穿孔性潰瘍、腹膜炎、前立腺炎、間質性膀胱炎）あるいは、昆虫毒またはサリチル酸塩またはＮＳＡＩＤといった薬剤などの有毒な作用剤への曝露であってもよい。

本発明は、ヒトなどの哺乳動物においてκオピオイド受容体関連疾患または症状を治療または予防する方法を提供するものであり、この方法は、本発明の合成ペプチドアミドを有効量で含む組成物を哺乳動物に投与することを含む。別の実施形態では、κオピオイド受容体関連症状が、痛み、炎症（リウマチ性関節炎の炎症、骨関節炎、ＩＢＤの炎症、ＩＢＳの炎症、眼炎症、耳炎症または自己免疫炎症など）、掻痒症（アトピー性皮膚炎、腎臓透析関連掻痒症、眼の掻痒症、耳の掻痒症、昆虫に噛まれた掻痒症またはオピオイド誘導掻痒症など）、浮腫、腸閉塞、咳または緑内障である。一態様では、痛みが、神経因性疼痛（三叉神経痛、偏頭痛、糖尿病性疼痛、ウイルスによる痛み、化学療法に伴う痛みまたは転移癌疼痛など）、体性痛、内臓痛または皮膚痛である。別の態様では、痛みが、関節痛、腎臓結石痛、子宮痙攣、月経困難症、子宮内膜症、消化不良、術後の痛み、医療処置後の痛み、眼の痛み、耳の痛み、癌の突出痛あるいは、ＩＢＤまたはＩＢＳなどのＧＩ機能障害に関連した痛みである。別の態様では、痛みが、手術に関連した痛みであり、ここでいう手術は、骨盤腹腔鏡手術、卵管結紮、子宮摘出および胆嚢摘出である。あるいは、痛みは、たとえば、大腸内視鏡検査、膀胱鏡検査、子宮鏡検査または子宮内膜生検などの医療処置に関連した痛みであってもよい。具体的な態様では、アトピー性皮膚炎は、乾癬、湿疹または接触性皮膚炎であってもよい。別の具体的な態様では、腸閉塞が、術後腸閉塞またはオピオイド誘導腸管機能不全である。

κオピオイド受容体関連痛は、局部組織損傷に伴う末梢感覚神経終末環境の変化によって引き起こされると考えられている痛覚過敏を含む。組織損傷（擦過傷、火傷など）や炎症が生じると、多モード侵害受容器（Ｃ線維）および高閾値機械受容器の興奮性が大幅に増す場合がある(Handwerker et al. (1991) Proceeding of the VIth World Congress on Pain,Bond et al., eds., Elsevier Science Publishers BV, pp. 59-70; Schaible et al. (1993) Pain 55:5-54)。痛覚過敏の背景には、こうした興奮性増大・感覚鈍麻の過大反応があると考えられており、そこでは刺激に対する過大反応の結果が疼痛反応となる。受傷後の疼痛状態における痛覚過敏状態の重要性が繰り返し示されており、これが受傷後／炎症性疼痛状態の大部分を占めているように見える。たとえば、Woold et al. (1993) Anesthesia and Analgesia 77:362-79;Dubner et al. (1994) In, Textbook of Pain, Melzack et al., eds., Churchill-Livingstone, London, pp. 225-242を参照のこと。

別の実施形態では、κオピオイド受容体関連症状が、痛み、炎症（リウマチ性関節炎の炎症、骨関節炎、ＩＢＤの炎症、ＩＢＳの炎症、眼炎症、耳炎症または自己免疫炎症など）、掻痒症（アトピー性皮膚炎、腎臓透析関連掻痒症、眼の掻痒症、耳の掻痒症、昆虫に噛まれた掻痒症またはオピオイド誘導掻痒症など）、浮腫、腸閉塞、咳または緑内障である。一態様では、痛みが、神経因性疼痛（三叉神経痛、偏頭痛、糖尿病性疼痛、ウイルスによる痛み、化学療法に伴う痛みまたは転移癌疼痛など）、体性痛、内臓痛または皮膚痛である。別の態様では、痛みが、関節痛、腎臓結石痛、子宮痙攣、月経困難症、子宮内膜症、消化不良、術後の痛み、医療処置後の痛み、眼の痛み、耳の痛み、癌の突出痛あるいは、ＩＢＤまたはＩＢＳなどのＧＩ機能障害に関連した痛みである。別の態様では、痛みが、手術に関連した痛みであり、ここでいう手術は、骨盤腹腔鏡手術、卵管結紮、子宮摘出および胆嚢摘出である。あるいは、痛みは、たとえば、大腸内視鏡検査、膀胱鏡検査、子宮鏡検査または子宮内膜生検などの医療処置に関連した痛みであってもよい。具体的な態様では、アトピー性皮膚炎は、乾癬、湿疹または接触性皮膚炎であってもよい。別の具体的な態様では、腸閉塞が、術後腸閉塞またはオピオイド誘導腸管機能不全である。

別の実施形態では、κオピオイド受容体関連症状が、自由水利尿としても知られるナトリウム保持性利尿およびカリウム保持性利尿によって予防可能または治療可能なκオピオイド受容体関連症状である。本発明の合成ペプチドアミドを投与することで予防可能または治療可能な上述のようなκオピオイド受容体関連症状の一例として、浮腫があげられる。浮腫は、鬱血性心疾患またはＡＤＨ不適合分泌症候群による浮腫など、多種多様な疾患または症状であってもよい。

別の実施形態では、κオピオイド受容体関連症状が、低ナトリウム血症または他の浮腫性の疾患である。κオピオイド受容体関連低ナトリウム血症または浮腫は、たとえば、鬱血性心不全または抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）不適合分泌症候群による低ナトリウム血症および浮腫あるいは、チアジド利尿薬および／またはループ利尿薬を用いる集中利尿薬療法に関連した低ナトリウム血症など、どのような低ナトリウム血症または浮腫性の疾患または症状であってもよい。本発明の合成ペプチドアミドは、有意なナトリウム保持性水利尿効果およびカリウム保持性水利尿効果を呈するが、これは、低ナトリウム血症および／または低カリウム血症に関連した浮腫形成病理症状の治療に有用である。よって、本発明の合成ペプチドアミドには、低ナトリウム血症関連症状を治療または予防する方法における用途もある。その一例については後述する。低ナトリウム血症関連症状は、水分の状態に応じて、循環血液量増加性、循環血液量正常または循環血液量減少性に分類できる。

循環血液量増加性低ナトリウム血症は通常、鬱血性心不全、ネフローゼ症候群および肝硬変の症例で見られるように、体内の水分量全体が増えることで引き起こされる。

循環血液量正常低ナトリウム血症は、抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）不適合分泌症候群に見られることが多く、肺炎、小細胞肺癌、多飲、頭部外傷症例、有機的な原因（ハロペリドールなどの特定の薬剤の使用など）または心因性の原因と関連していることもある。

循環血液量減少性低ナトリウム血症は、体内の総ナトリウム濃度が相対的に低下することによるものであり、利尿薬の使用、間質性腎炎または発汗過多と関連していることもある。

低ナトリウム血症のこれらの形態はさらに、尿中ナトリウム濃度（すなわち、濃度が１リットルあたり３０ミリモルよりも高いか低いかに応じて分類できる。R M Reynolds et al. Disorders of sodium balance, Brit. Med. J. 2006; 332:702-705を参照のこと。

これらの症状以外に、限定することなく、肺、十二指腸、膵臓、卵巣、膀胱および尿管の癌腫、胸腺腫、中皮腫、気管支腺腫、カルチノイド、神経節細胞腫およびユーイング肉腫をはじめとする、ＡＤＨ分泌過剰症の新生物疾患；肺炎（細菌性またはウイルス性）、膿瘍（肺または脳）、空洞化（アスペルギルス症）、結核（肺または脳）、髄膜炎（細菌性またはウイルス性）、脳炎およびＡＩＤＳなどの感染症；脳血管閉塞または出血および海綿静脈洞血栓症などの脈管疾患；ギランバレー症候群、多発性硬化症、振戦譫妄、筋萎縮性側索硬化症、水頭症、精神病、末梢神経障害、頭部外傷（閉鎖性および穿通性）、ＣＮＳ腫瘍または感染および視床下部浸透圧受容器に影響するＣＮＳ傷害要因などの神経性疾患；脳梁欠損症、口唇裂／口蓋および他の正中線欠損をはじめとする先天性奇形；急性間欠性ポルフィリン症、喘息、肺虚脱および陽圧呼吸などの代謝性疾患；チアジド利尿薬、アセトアミノフェン、バルビツレート、コリン系薬物、エストロゲン、経口血糖降下薬、バソプレシンまたはデスモプレシン、高用量オキシトシン、クロルプロパミド、ビンクリスチン、カルバマゼピン、ニコチン、フェノチアジン、シクロホスファミド、三環系抗鬱剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤およびセロトニン再取り込み阻害剤などの薬剤；入院時、外科手術時または競技の間や後（すなわち、運動関連低ナトリウム血症）などの過剰な低張液の投与ならびに、高齢者における低ナトリウム栄養補助食品の使用をはじめとする他の多数の症状が、低ナトリウム血症と関連している。たとえば、Harrison's Principles of Internal Medicine, 16th Ed. (2005), p. 2102を参照のこと。

低ナトリウム血症に関連する他の状態としては、腎不全、ネフローゼ症候群（膜性腎症および微小変化群）、悪液質、栄養不良、横紋筋融解症、外科手術、待機的心臓血管カテーテル法、失血ならびに、高カルシウム血症、低カリウム血症、浸透圧利尿につながる糖尿を伴う高血糖があげられる。

また、本発明は、ヒトなどの哺乳動物における神経変性疾患または症状を治療または予防する方法を提供するものであって、この方法は、上述したような有効量の合成ペプチドアミドを含む組成物を哺乳動物に投与することを含む。神経変性疾患または症状は、たとえば、虚血、無酸素症、脳卒中、脳傷害、脊髄損傷または再灌流障害などのどのような神経変性疾患または症状であってもよい。あるいは、神経変性疾患または症状は、眼の神経変性疾患であってもよい。本発明の方法で治療可能または予防可能な眼の特定の神経変性疾患としては、緑内障、黄斑変性症、レチナール虚血性疾患および糖尿病性神経障害があげられる。

特定の実施形態では、本発明は、神経変性成分を有する疾患および症状などの特定のニューロン疾患および症状の予防方法または治療方法を提供するものである。未処理細胞の神経変性および／または神経細胞死につながり得る病理または傷害による作用から神経細胞を保護するのに有効な量で、本発明の合成ペプチドアミドを投与することが可能である。たとえば、有効量の本発明の合成ペプチドアミドを投与することで、神経変性成分を有する眼のいくつかの疾患または症状を予防または治療することが可能である。このような眼の疾患および症状としては、緑内障、黄斑変性症、レチナール虚血性疾患および糖尿病性神経障害があげられる。これらの疾患および症状の進行には、たとえば、介入しなければ細胞死につながる経路に神経細胞が至るプログラム細胞死（アポトーシス）などによる神経変性または神経細胞死が関与すると考えられている。κオピオイド受容体アゴニストを用いる治療によって、これらの疾患および症状の発症または進行を予防あるいは、少なくとも遅らせることができることが見いだされた。このように成果が改善されるのは、κオピオイド受容体アゴニストによる神経保護が原因であると考えられる。たとえば、Kaushik et al. "Neuroprotection in Glaucoma"(2003) J. Postgraduate Medicine vol. 49(1): pp. 90-95を参照のこと。

緑内障の場合、κオピオイド受容体アゴニストを投与することによる予防および治療が、κオピオイド受容体の活性化で誘導される少なくとも２つの別個の作用すなわち、神経保護と眼内圧（ＩＯＰ）の低下によって生じると考えられている。特定の理論に拘泥されることなく、神経保護は、少なくともある程度、酸化障害や他の傷害要因に対する保護につながる、眼での心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）の誘導によるものと考えられる。

異常に高い眼内圧も、緑内障の発症につながる要因であると考えられる。眼内圧の上昇も、κオピオイド受容体アゴニストを投与して、この受容体が活性化することで開始される３とおりの作用すなわち、房水分泌量の低下、房水流出、自由水利尿（水の喪失につながる、ナトリウム保持性利尿およびカリウム保持性利尿）によって予防または治療可能である。

また、本発明は、高眼内圧（ＩＯＰ）などの哺乳動物の眼のκ−受容体関連疾患または症状を治療または予防する方法を提供するものである。この方法は、上述したような有効量の合成ペプチドアミドを含む組成物を哺乳動物に投与することを含む。本発明の一態様では、合成ペプチドアミドを外用投与する。別の態様では、合成ペプチドアミドをインプラントとして投与する。

他の実施形態態では、本発明は、細胞変性成分を有する特定の心血管疾患および症状を予防または治療する方法を提供するものである。本発明の合成ペプチドアミドは、未処理細胞の神経変性および／または神経細胞死につながり得る病理または傷害による作用から心筋細胞を保護するのに有効な量で投与可能なものである。たとえば、有効量の本発明の合成ペプチドアミドを投与することで、いくつかの心血管疾患または症状を予防または治療することが可能である。このような心血管疾患および症状としては、限定することなく、冠状動脈性心疾患、虚血、心筋梗塞、再灌流障害および不整脈があげられる。たとえば、Wu et al. "Cardioprotection of Preconditioning by Metabolic Inhibition in the Rat Ventricular Myocyte - Involvement of kappa Opioid Receptor"(1999) Circulation Res vol. 84: pp. 1388-1395を参照のこと。また、Yu et al. "Anti-Arrhythmic Effect of kappa Opioid Receptor Stimulation in the Perfused Rat Heart: Involvement of a cAMP-Dependent Pathway"(1999) J Mol Cell Cardiol. vol. 31(10): pp. 1809-1819も参照のこと。

有効量の本発明の合成ペプチドアミドを投与することで予防または治療可能な他の組織および臓器の疾患および症状としては、虚血、無酸素症、脳卒中、脳または脊髄損傷および再灌流障害があげられるが、これに限定されるものではない。

本発明の合成ペプチドアミドで治療可能または予防可能なκオピオイド受容体関連痛の別の形態が痛覚過敏である。一実施形態では、この方法は、痛覚過敏に羅患しているか、あるいは痛覚過敏を発症する危険性のある哺乳動物に有効量の本発明の合成ペプチドアミドを投与して、痛覚過敏を予防、寛解または完全に軽減する。

本発明の合成ペプチドアミドは、アレルギー性皮膚炎、接触性皮膚炎、皮膚潰瘍、炎症、発疹、真菌による刺激に関連する痛覚過敏症状、感染因子、火傷、擦過傷、打撲、挫傷、凍傷、発疹、ざ瘡、虫さされ／昆虫咬傷、皮膚潰瘍、粘膜炎、歯肉炎、気管支炎、咽頭炎、咽頭痛、帯状疱疹、真菌による刺激、単純疱疹、おでき、足底疣贅、外科手術または膣病変に関連する痛覚過敏症状などであるが、これに限定されるものではない、痛覚過敏症状を治療または予防するための本明細書に開示の方法で投与可能なものである。たとえば、本発明の合成ペプチドアミドを、口、食道または喉頭または気管支あるいは鼻孔などの粘膜表面に外用投与可能である。あるいは、本発明の合成ペプチドアミドを、膣または直腸／肛門に外用投与可能である。

さらに、本発明の合成ペプチドアミドは、火傷、擦過傷、打撲、擦過傷（角膜擦過傷など）、挫傷、凍傷、発疹、ざ瘡、虫さされ／昆虫咬傷、皮膚潰瘍（たとえば、糖尿病性潰瘍または褥瘡性潰瘍）、粘膜炎、炎症、歯肉炎、気管支炎、咽頭炎、咽頭痛、帯状疱疹、真菌による刺激（足白癬または頑癬など）、単純疱疹、おでき、足底疣贅または膣病変（真菌症または性行為感染疾患に関連する膣病変など）に関連した痛覚過敏症状を治療または予防するための本明細書に開示の方法で投与可能なものである。痛覚過敏の治療または予防を目的とした本発明の合成ペプチドアミドの投与向けに企図される方法としては、眼、口、喉頭、食道、気管支、鼻孔、膣または直腸／肛門の表面に化合物を外用塗布するものがあげられる。

術後回復に関連する痛覚過敏症状も、本発明の合成ペプチドアミドの投与対象とすることが可能である。術後回復に関連する痛覚過敏症状は、たとえば、放射状角膜切開手術、抜歯、乳腺腫瘍摘出、会陰切開、腹腔鏡検査および関節鏡検査など、どのような術後回復に関連する痛覚過敏症状であってもよい。

炎症に関連する痛覚過敏症状も、本発明の合成ペプチドアミドの投与対象となる。歯周組織炎、歯科矯正による炎症、炎症性結膜炎、痔および性器の炎症を、本発明の合成ペプチドアミドを外用または局所投与して治療または予防することが可能である。

また、本発明は、利尿の誘導を必要とする哺乳動物において利尿を誘導する方法を提供するものである。この方法は、上述したような本発明の合成ペプチドアミドを有効量で含む組成物を哺乳動物に投与することを含む。

さらに、本発明は、哺乳動物においてプロラクチン分泌を誘導する方法を提供するものである。この方法は、上述したような本発明の合成ペプチドアミドを有効量で含む組成物を哺乳動物に投与することを含む。プロラクチン分泌を誘導する方法は、乳汁分泌不全、不適切な乳汁分泌、乳汁分泌不足、精子運動能低下、年齢による機能障害、Ｉ型糖尿病、不眠症または不適切なレム睡眠に羅患したヒトなどの哺乳動物の治療に適している。特定の態様では、この方法は、合成ペプチドアミドと、低用量のμオピオイドアゴニスト鎮痛化合物（関連する副作用を有する）とを同時投与して、治療上の鎮痛作用を提供することを含み、この低用量の化合物では、単独投与した場合に治療上の鎮痛作用を達成するのに必要なμオピオイドアゴニスト鎮痛化合物の用量に関連する副作用よりも、関連の副作用が少なくてすむ。

また、本発明は、哺乳動物においてκオピオイド受容体を結合する方法を提供するものであって、この方法は、本発明の合成ペプチドアミドを有効量で含有する組成物を哺乳動物に投与するステップを含む。有効量は、当業者が常法で判断可能なものである。たとえば、哺乳動物においてκオピオイド受容体を結合し、抗侵害受容作用、抗炎症作用、水利尿作用または血清プロラクチン濃度の上昇または他の任意のκオピオイド受容体応答作用を得るのに十分な薬用単位として、有効量を求めることができる。あるいは、哺乳動物の体液におけるＥＣ_５０を近似するのに十分な量あるいは、哺乳動物の治療関連体液のＥＣ_５０の２倍または３倍または最大約５倍または約１０倍を近似するのに十分な量として有効量を求めてもよい。

本発明のペプチドアミドの合成
本明細書で使用する場合、化学表示「テトラペプチド−［ω（４−アミノ−ピペリジン−４−カルボン酸）］」は、４−アミノピペリジン−４−カルボン酸由来の本発明の合成ペプチドアミドのアミノアシル部分を示す目的で用いられ、この場合、特に明記しないかぎり、ピペリジン環の窒素原子がテトラペプチドフラグメントのＣ末端カルボニル−炭素に結合される。

化合物（１）（６）、（７）、（１０）、（１１）の調製に用いられる一般的な合成スキームを図１に示す。化合物（２）から（５）、（８）、（９）、（１２）〜（１４）の調製に用いられる一般的な合成スキームを図２に示す。合成ペプチドアミド（１５）〜（２４）の調製に用いられる一般的な合成スキームを図３に示す。合成ペプチドアミド（２５）〜（３７）の調製に用いられるスキームを図４に示す。

化合物（１）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号１）：

化合物（２）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号２）：

化合物（３）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号１）：

化合物（４）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号２）：

化合物（５）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｈａｒ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号３）：

化合物（６）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号１）：

化合物（７）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−［ホモピペラジンアミド］（配列番号４）：

化合物（８）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｈａｒ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号３）：

化合物（９）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−ｉＰｒ）Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号５）：

化合物（１０）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号６）：

化合物（１１）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｎａｒ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号７）：

化合物（１２）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｄｂｕ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号８）：

化合物（１３）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｎａｒ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号７）：

化合物（１４）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｄａｐ（アミジノ）−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号６）：

化合物（１５）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号２）：

化合物（１６）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｈａｒ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号３）：

化合物（１７）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−ｉＰｒ）Ｄ−Ｌｙｓ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号５）：

化合物（１８）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号６）：

化合物（１９）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号６）：

化合物（２０）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ホモピペラジンアミド］（配列番号６）：

化合物（２１）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ホモピペラジンアミド］（配列番号６）：

化合物（２２）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｄｂｕ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号８）：

化合物（２３）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｎａｒ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号７）：

化合物（２４）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号４）：

化合物（２５）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［２，８−ジアザスピロ［４，５］デカン−１−オンアミド］（配列番号２）：

化合物（２６）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［２−メチル−２，８−ジアザスピロ［４，５］デカン−１−オンアミド］（配列番号２）：

化合物（２７）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１，３，８−トリアザスピロ［４，５］デカン−２，４−ジオンアミド］（配列番号２）：

化合物（２８）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［５−クロロ−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２（３）Ｈ−オンアミド］（配列番号２）：

化合物（２９）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［モルホリノ（ピペリジン−４−イル）メタノンアミド］（配列番号２）：

化合物（３０）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４−フェニル−１−（ピペリジン−イル−１Ｈ−イミダゾール−２（３Ｈ）−オンアミド］（配列番号２）：

化合物（３１）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４−（３，５−ジメチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イル）ピペリジンアミド］（配列番号２）：

化合物（３２）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１−（ピペリジン−４−イル）インドリン−２−オンアミド］（配列番号２）：

化合物（３３）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１−フェニル−１，３，８−トリアザスピロ［４．５］デカン−４−オンアミド］（配列番号２）：

化合物（３４）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−イルメチルアミド］（配列番号２）：

化合物（３５）Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［（５−メチルピラジン−２−イル）メチルアミド］（配列番号２）：

化合物（３６）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２（３Ｈ）−オンアミド］（配列番号２）：

化合物（３７）：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンアミド］（配列番号２）：

一般的な実験合成方法：
アミノ酸誘導体とレジンとを事業者（Novabiochem, Bachem, Peptide InternationalおよびPepTech Corporation）から購入した。他の化学薬品と溶媒は、Sigma-Aldrich, Fisher ScientificおよびVWRから購入した。本明細書の化合物については、Ｆｍｏｃ法とＢｏｃ法の両方を利用して、固相ペプチド化学分野の標準的な方法で合成した。特に明記しないかぎり、反応はいずれも室温にて実施した。

以下にあげる標準的な参考資料に、一般的な実験セットアップと必要な開始材料および試薬の入手方法についての手引きが記載されている。Kates, S. A., Albericio, F., Eds., Solid Phase Synthesis, A Practical Guide, Marcel Dekker, New York, Basel, (2000)；Bodanszky, M., Bodanszky, A., Eds., The Practice of Peptide Synthesis, Second Edition,Springer-Verlag, (1994)；Atherton, E., Sheppard,R. C., Eds., Solid Phase Peptide Synthesis, A Practical Approach, IRL Press at Oxford University Press, (1989)；Stewart, J. M., Young, J. D., Solid Phase Synthesis, Pierce Chemical Company, (1984)；Bisello, et al.,J. Biol. Chem. 273, 22498-22505 (1998)；and Merrifield, R. B., J. Am. Chem. Soc. 85, 2149-2154 (1963)。

本明細書では、さらに以下の略号を使用する。
ＡＣＮ：アセトニトリル
Ａｌｏｃ：アリルオキシカルボニル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
Ｃｂｚ：ベンジルオキシカルボニル。
Ｃｂｚ−ＯＳｕ：Ｎα−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセン−７
ＤＣＭ：ジクロロメタン
Ｄｄｅ：１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）エチル
ＤＩＣ：Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＡＴＵ：２−（１Ｈ−９−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ：２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィ
ｉ：イソ
ｉｖＤｄｅ：１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）−３−メチルブチル
ＮＭＭ：４−メチルモルホリノ
ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリジノン
Ａｌｌ：アリル
ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ：ｏ−ニトロベンゼンスルホニルクロリド
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロ−ベンゾフラン−５−スルホニル
ＰｙＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＲＰ：逆相
ＴＢＴＵ：２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボーレート
ＴＥＡＰ：リン酸トリエチルアンモニウム
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
ＴＭＯＦ：オルトギ酸トリメチル
ＴＭＳＯＴｆ：トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル
Ｔｒｔ：トリチル

Ｆｍｏｃ法で合成したペプチドを、ＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２．５：２．５）の混合物で切断した。この切断ステップは、ＨＦ／アニソール（ｖ／ｖ＝９：１）の混合物またはＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／ｍ−クレゾール（ｖ／ｖ／ｖ＝２：７：１）の混合物のいずれかを用いて、Ｂｏｃ法で行った。

ペプチド鎖伸長のカップリング反応を手作業またはペプチド合成器のいずれかで実施した。これには、アミノ酸誘導体２〜４倍過剰のカップリング試薬を用いた。さまざまな本発明の化合物の合成で使用したカップリング試薬については、以下の組み合わせすなわち、ＤＩＣ／ＨＯＢｔ、ＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ、ＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ、ＴＢＴＵ／ＤＩＥＡ、ＰｙＢＯＰ／ＤＩＥＡ、ＢＯＰ／ＤＩＥＡから選択した。

レジン結合ペプチドの位置番号４でのアミノ酸側鎖の脱保護（最終合成ペプチドアミド生成物でＸａａ_４と表記）を以下のようにして実現した。ペプチドをＸａａ_４から開始してアセンブルし、Ｘａａ_３、続いてＸａａ_２という具合に順次加えていき、最後にＸａａ_１を加えた。Ｘａａ_４に導入したジアミノ酸の側鎖保護基を、以下のようにして選択的に除去した。（ｉ）Ｎ−Ｄｄｅ基またはＮ−ｉｖＤｄｅ基を２〜４％ヒドラジン／ＤＭＦ溶液で除去した。Chabra, S. R., et al., Tetrahedron Lett. 39:1603-1606 (1998)およびRohwedder, B., et al., Tetrahedron Lett., 39:1175 (1998)を参照のこと。（ｉｉ）Ｎ−Ａｌｏｃ：ＣＨＣｌ_３／ＡｃＯＨ／ＮＭＭ（ｖ／ｖ／ｖ＝３７：２：１）中、３当量の（Ｐｈ_３Ｐ）_４Ｐｄで除去した。Kates, S. A., et al. in "Peptides Chemistry, Structure and Biology, Proc. 13^th American Peptide Symposium", Hodges, R. S. and Smith, J. A. (Eds), ESCOM, Leiden, 113-115 (1994)を参照のこと。

ペプチドをＢｏｃ保護法でアセンブルすると、Ｘａａ_４に導入されるジアミノ酸の側鎖保護基がＮ−Ｆｍｏｃであり、これを２０〜３０％ピペリジン／ＤＭＦ溶液で除去した。

レジン結合ペプチドのＸａａ_４におけるアミノ酸側鎖の末端窒素のイソプロピル化を以下のようにして実施した。脱保護後、Ｘａａ_４に遊離ω−アミノ官能基を有するレジン結合ペプチドを、ＴＭＯＦ中にてアセトンとＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３との混合物と反応させ、レジン結合Ｎω−イソプロピルペプチドを生成した。

レジン結合ペプチドのＸａａ_４におけるアミノ酸側鎖の末端窒素のモノメチル化：レジン結合Ｎω−メチルペプチドを合成するために、遊離ω−アミノ官能基をまず、ｏ−ニトロベンゼン−スルホニルクロリド（ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ；Biron, E.；Chatterjee, J.；Kessler, H. Optimized selective N-methylation of peptides on solid support. J. Pep. Sci. 12:213-219 (2006)で誘導体化した。次に、得られたスルホンアミドを、ＮＭＰ中にてジメチルスルフェートと１，８−ジアザ−ビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンとの混合物でメチル化した。続いて、ＮＭＰ中にてメルカプトエタノールと１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセン−７との混合物でｏ−ＮＢＳ保護基を除去した。

レジン結合ペプチドのＸａａ_４におけるアミノ酸側鎖の末端窒素のグアニル化：脱保護後、位置番号４に遊離ω−アミノ官能基を有するレジン結合ペプチドを、１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン塩酸塩(Bernatowicz, M. S., et al., J. Org. Chem. 57, 2497-2502 (1992)およびＤＩＥＡのＤＭＦ混合溶液と反応させ、レジン結合Ｎω−グアニジノペプチドを生成した。

リン酸トリエチルアンモニウム（ＴＥＡＰ）またはトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）緩衝液での分取ＨＰＬＣでペプチドを精製した。必要に応じて、従来のＨＰＬＣ法を用いて化合物を最後にトリフルオロアセテートまたは酢酸塩に変換した。純度が９７％を超える画分をプールし、凍結乾燥した。合成ペプチドの純度を分析用ＲＰ−ＨＰＬＣで判断した。

Waters 486調節式紫外吸光度検出器およびWaters 746データモジュールを用いたWaters 600マルチソルベント送液システムで、分析用ＲＰ−ＨＰＬＣを実施した。ペプチドのＨＰＬＣ分析については、Vydac C₁₈カラム（０．４６×２５ｃｍ、粒度５μｍ、細孔径３００Å）を流量２．０ｍｌ／分で用いて実施した。溶媒ＡおよびＢにはそれぞれ、０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液と０．１％ＴＦＡ／８０％ＡＣＮ／２０％Ｈ_２Ｏ溶液を使用した。保持時間（ｔ_Ｒ）は分単位とする。Waters 486調節式紫外吸光度検出器とServogor 120帯状チャート記録計を用いたWaters Prep LC 2000分取クロマトグラフシステムで、Vydac C₁₈分取カートリッジ（５×３０ｃｍ、粒度１５〜２０μｍ、細孔径３００Å）を流量１００ｍｌ／分で使用して、分取ＲＰ−ＨＰＬＣを実施した。緩衝液ＡおよびＢにはそれぞれ、０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液と０．１％ＴＦＡ／６０％ＡＣＮ／４０％Ｈ_２Ｏ溶液とを使用した。Phenomenex Synergi MAX-RP C₁₂カラム（２．０×１５０ｍｍ、粒度４μｍ、細孔径８０Å）を流量０．３ｍｌ／分で用いて、Hewlett Packard 1090 Liquid Chromatographにて４０℃で最終化合物のＨＰＬＣ分析を実施した。緩衝液ＡおよびＢにはそれぞれ、０．０１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液と０．０１％ＴＦＡ／７０％ＡＣＮ／３０％Ｈ_２Ｏ溶液とを使用した。エレクトロスプレー質量分析で合成ペプチドアミドの同一性を確認した。Finnigan LCQ質量分析計でＥＳＩ源を用いて質量スペクトルを記録した。

実施例１化合物（１）の合成：Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（δ−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号１）。
図１に示すスキームを参照のこと。アミノ酸誘導体には、Ｂｃｚ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨを使用した。ｐ−ニトロフェニルカーボネートWangレジン（５．０ｇ、４．４ｍｍｏｌ；Novabiochem）から開始して、完全保護レジン結合ペプチドを手作業で合成した。これをホモピペラジン（８．７ｇ、８７ｍｍｏｌ；Acros Organics）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液と室温にて一晩混合することで、ホモピペラジンをレジンに結合した。レジンをＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、ｉｎｖａｃｕｏにて乾燥させた。得られたホモピペラジンカルバメートWangレジン（５．１ｇ；ホモピペラジン−［カルバメートWangレジン］）をいくつかに分け、このうち１．５ｇ（１．３ｍｍｏｌ）を用いてペプチド合成を継続した。３倍過剰のアミノ酸誘導体を用いて、ＤＩＣ／ＨＯＢｔによるシングルカップリングを実施した。２５％ピペリジン／ＤＭＦ溶液でＦｍｏｃ基を除去した。ペプチド鎖伸長の完了時、４％ヒドラジン／ＤＭＦ溶液で３×３分間レジンを処理し、Ｄｄｅを除去した。レジンをＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、ｉｎｖａｃｕｏにて乾燥させた。得られたペプチドレジン（２．４ｇ；Ｂｃｚ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＤＬｅｕ−ＤＬｙｓ−ホモピペラジン−［カルバメートWangレジン］）を再度分けて、０．６ｇ（０．３ｍｍｏｌ）を以後の誘導体化（Ｎ−メチル化）に利用した。

Ｘａａ_４におけるＤ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基のメチル化を以下の３段階で実施した。（ｉ）［ｏ−ＮＢＳ保護］：まず、レジン結合ペプチド（０．３ｍｍｏｌ）をｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ（０．４ｇ、２ｍｍｏｌ）およびコリジン（０．７ｍｌ、５ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（７ｍｌ）溶液で室温にて３０分間処理した。次に、レジンをＮＭＰで洗浄した。（ｉｉ）［Ｎ−メチル化］：レジン結合ｏ−ＮＢＳ保護ペプチドを、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセン−７（０．５ｍｌ、３ｍｍｏｌ）およびジメチルスルフェート（１．０ｍｌ、１０ｍｍｏｌ；Aldrich）のＮＭＰ（７ｍｌ）溶液と、室温にて５分間反応させた。次に、レジンをＮＭＰで洗浄し、洗浄プロセスを１回繰り返した。（ｉｉｉ）［ｏ−ＮＢＳ脱保護］：ペプチドレジンを、メルカプトエタノール（０．７ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセン−７（０．８ｍｌ、５ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（７ｍｌ）溶液で室温にて５分間処理した。次に、レジンをＮＭＰで洗浄し、洗浄プロセスを１回繰り返した。

このようにして得られたＤ−ＬｙｓのＮ−メチル第２級アミンをＸａａ_４で保護するために、レジン結合メチル化ペプチドをＢｃｚ−ＯＳｕ（６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍｌ）溶液と反応させた。レジンをＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、ｉｎｖａｃｕｏにて乾燥させた。次に、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１５ｍｌ、ｖ／ｖ＝１：１）溶液で室温にて２時間処理して、ペプチドをレジンから切断した。さらに、レジンを濾過し、ＴＦＡで洗浄した。濾液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（０．３ｍｍｏｌ；Ｂｃｚ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｍｅ，Ｂｃｚ）−［ホモピペラジンアミド］）をジエチルエーテルで沈殿させた。

Ｃ末端でのホモピペラジンのグアニル化のために、上述のペプチド（０．３ｍｍｏｌ）を、１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン塩酸塩（０．４ｇ、３．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．５ｍｌ、６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍｌ）溶液で室温にて一晩処理した。酢酸とＨ_２Ｏを加えて反応を停止させ、この溶液を冷凍し、凍結乾燥機で乾燥させて、所望の保護ペプチドであるＢｃｚ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｍｅ，Ｚ）−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（０．６ｇ）を得た。

最後の脱保護／加水分解のために、上述のペプチド（０．６ｇ）を、ＴＭＳＯＴｆ／ＴＦＡ／ｍ−クレゾール混合物（１０ｍｌ、ｖ／ｖ／ｖ＝２：７：１）で室温にて２時間処理した。混合物を蒸発させ、粗ペプチド（０．６ｇ）をジエチルエーテルで沈殿させた。

精製のために、上記にて誘導した粗ペプチド（０．６ｇ）を０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液（５０ｍｌ）に溶解させ、この溶液をＨＰＬＣカラムに注入し、ＴＦＡ緩衝系（緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液およびＢ＝０．１％ＴＦＡ／６０％ＡＣＮ／４０％Ｈ_２Ｏ溶液）を用いて精製した。化合物を緩衝液Ｂの直線濃度勾配により、３０分かけて２５％Ｂから７５％Ｂまで、ｔ_Ｒ＝３７％Ｂで溶出した。純度が９７％を超える画分をプールし、冷凍し、凍結乾燥機で乾燥させて、精製ペプチドを白色の非晶質粉末（１５３ｍｇ）として得た。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１４．４１分間、純度９９．８％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６９２．５、実測値６９２．５。

実施例２：化合物（２）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号２）：
図２のスキームおよびBiron et al., Optimized selective N-methylation of peptides on solid support. J. Peptide Science 12:213-219 (2006)を参照のこと。アミノ酸誘導体には、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ−（４−Ｎ−Ｆｍｏｃ−ピペリジニル）カルボン酸を使用した。上述した化合物（１）の合成で説明したようにしてＨＰＬＣおよびＭＳ分析を実施した。

２−クロロトリチルクロライドレジン（１．８ｇ、０．９ｍｍｏｌ；Peptide International）から開始して、完全保護レジン結合ペプチドを手作業で合成した。Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ−（４−Ｎ−Ｆｍｏｃ−ピペリジニル）カルボン酸の結合後、ペプチド鎖の伸長とＸａａ_４でのＤ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）のＤｄｅの脱保護を化合物（１）の合成で説明した手法で実施した。上記参照。得られたペプチドレジン（０．９ｍｍｏｌ；Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−（Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ−４−ピペリジニルカルボン酸）−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］）を分け、０．３ｍｍｏｌを以後の切断に利用した。次に、ペプチドレジン（０．３ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（１５ｍｌ、ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２．５：２．５）混合物で室温にて９０分間処理した。さらに、レジンを濾過し、ＴＦＡで洗浄した。濾液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（０．３ｍｍｏｌ；Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ）をジエチルエーテルで沈殿させた。

精製のために、粗ペプチド（０．３ｍｍｏｌ）を２％酢酸／Ｈ_２Ｏ（５０ｍｌ）溶液に溶解させ、この溶液をＨＰＬＣカラムに注入し、ＴＥＡＰ緩衝系をｐＨ５．２で用いて（緩衝液Ａ＝ＴＥＡＰ５．２およびＢ＝２０％ＴＥＡＰ５．２／８０％ＡＣＮ溶液）精製した。化合物を緩衝液Ｂの直線濃度勾配により、６０分かけて７％Ｂから３７％Ｂまで溶出した。純度が９５％を超える画分をプールし、得られた溶液を２容量の水で希釈した。次に、この希釈溶液をＨＰＬＣカラムに注入して塩交換を行い、ＴＦＡ緩衝系（緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液およびＢ＝０．１％ＴＦＡの８０％ＡＣＮ／２０％Ｈ_２Ｏ溶液）を用いて、緩衝液Ｂの直線濃度勾配により、２５分かけて２％Ｂから７５％Ｂまでさらに精製した。純度が９７％を超える画分をプールし、冷凍し、凍結乾燥機で乾燥させて、精製ペプチドを白色の非晶質粉末（９３ｍｇ）として得た。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１６．４３分間、純度９９．２％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６８０．４、実測値６８０．３。

以下のアミノ酸誘導体すなわち、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−４−アミノ−１−Ｆｍｏｃ−（ピペリジン）−４−カルボン酸で、図２に示したものと同様の反応スキームも利用して、化合物（２）を調製した。

２−クロロトリチルクロライドレジン（ＰＳ１％ＤＶＢ、５００ｇ、１ｍｅｑ／ｇ）から開始して、完全保護レジン結合ペプチドを手作業で合成した。ＤＭＦ、ＤＣＭ、ＤＩＥＡ（各２６０ｍＬ）の混合物を加え、レジンをＢｏｃ−４−アミノ−１−Ｆｍｏｃ−４−（ピペリジン）−４−カルボン酸（２８０ｇ、６００ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を４時間攪拌した後、ＭｅＯＨ（２５８ｍＬ）およびＤＩＥＡ（２５８ｍＬ）を加えてレジンを１時間キャップした。このレジンを単離し、ＤＭＦ（３×３Ｌ）で洗浄した。第１のアミノ酸を含有するレジンをピペリジン／ＤＭＦ溶液で処理（３５％を３×３Ｌ）し、ＤＭＦで洗浄（９×３Ｌ）し、ＨＯＢｔ（１５３ｇ）およびＤＩＥＡ（５１６ｍＬ）の共存下、ＤＣＭ／ＤＭＦ（５００ｍＬ／５００ｍＬ）中にて、攪拌しながら２．２５時間かけて、ＰｙＢＯＰ（５１９ｇ）を用いてＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（４７２ｇ）をカップリングした。ジペプチド含有レジンを単離し、ＤＭＦで洗浄（３×３．６Ｌ）した。ピペリジン／ＤＭＦ溶液で処理（３５％を３×３．６Ｌ）してＦｍｏｃ基を除去し、レジンをＤＭＦで洗浄（９×３．６Ｌ）し、ＤＣＭ／ＤＭＦ（５００ｍＬ／５００ｍＬ）中にて、攪拌しながら１時間、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３５４ｇ）、ＤＩＣ（１５７ｍＬ）およびＨＯＢｔ（１５４ｇ）で処理した。続いて、ＤＭＦで洗浄（３×４．１Ｌ）した後、ピペリジン／ＤＭＦ溶液（３５％を３×４．２Ｌ）でＦｍｏｃ基を切断し、さらにレジンをＤＭＦで洗浄（９×４．２Ｌ）して、レジン結合トリペプチドを得た。この物質を、ＤＣＭ／ＤＭＦ（５００ｍＬ／５００ｍＬ）中にて、攪拌しながらＦｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（３８７ｇ）、ＤＩＣ（１５７ｍＬ）およびＨＯＢｔ（１５３ｇ）で一晩処理した。レジンを単離し、ＤＭＦで洗浄（３×４．７Ｌ）した後、ピペリジン／ＤＭＦ溶液で処理（３５％を３×４．７Ｌ）して、Ｆｍｏｃ基を切断し、続いて再度ＤＭＦで洗浄（９×４．７Ｌ）した。テトラペプチド含有レジンを、ＤＣＭ／ＤＭＦ（５００ｍＬ／５００ｍＬ）中にて、攪拌しながら２．２５時間、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（３８９ｇ）、ＤＩＣ（１５７ｍＬ）およびＨＯＢｔ（１５４ｇ）で処理した。レジンを単離し、ＤＭＦで洗浄（３×５．２Ｌ）した後、ＤＭＦ中ピペリジン処理（３５％を３×５．２Ｌ）した。レジンを単離し、ＤＭＦ（９×５．２Ｌ）、ＤＣＭ（５×５．２Ｌ）で順次洗浄した。これを乾燥させて、レジンに結合した保護ペプチドの収率９０．４％を達成した。ＴＦＡ／水（４．５Ｌ、９５／５）を用いてペプチドをレジンから切断したが、これはＢｏｃ保護基も除去する役目を果たした。混合物を濾過し、濃縮（１／３）した後、ＭＴＢＥ（４２Ｌ）を加えて沈殿させた。固体を濾過により回収し、減圧下で蒸発させて粗ペプチドを得た。

精製のために、粗ペプチドを０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液に溶解させ、移動相として０．１％ＴＦＡ／水−ＡＣＮ勾配を用いて分取逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８）で精製した。純度が９５％を超える画分をプールし、濃縮し、凍結乾燥して、純粋なペプチド（＞９５．５％純粋）を得た。Ｄｏｗｅｘイオン交換樹脂を用いて、水で溶出してイオン交換を実施した。水性相を濾過し（０．２２μｍフィルタカプセル）、フリーズドライしてペプチドの酢酸塩を得た（全収率、７１．３％、＞９９％純粋）。

実施例３：化合物（３）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号１）：
後述するように、化合物（２）の合成時に調製したペプチドレジン：Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−（Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ−４−ピペリジニルカルボン酸）−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］０．３ｍｍｏｌを用いて合成を開始した。上記化合物（２）の合成で説明したようにして、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析も実施した。

Ｄ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基をＸａａ_４でメチル化するために、化合物（１）の合成で説明したような３段階からなる手法を利用した。上記の説明を参照のこと。続いて、レジン結合メチル化ペプチド（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−（Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ−４−ピペリジニルカルボン酸）−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］）をＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（１５ｍｌ、ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２．５：２．５）混合物で室温にて９０分間処理した。次に、レジンを濾過し、ＴＦＡで洗浄した。濾液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（０．３ｍｍｏｌ；Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノ−ピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ）をジエチルエーテルで沈殿させた。

化合物（２）の合成で説明したプロトコールを用いて、粗ペプチド（０．３ｍｍｏｌ）を分取ＨＰＬＣで精製した。上記参照。純度が９７％を超える画分をプールし、冷凍し、凍結乾燥機で乾燥させて、精製ペプチドを白色の非晶質粉末（１８５ｍｇ）として得た。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１６．９３分間、純度９９．２％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６９４．４、実測値６９４．４。

実施例４：化合物（４）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号２）：
アミノ酸誘導体には、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、Ｎ−（１−Ｆｍｏｃ−ピペリジン−４−イル）−Ｌ−プロリンを使用した。化合物（１）の合成で説明したようにして、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を実施した。上記の詳細な説明を参照のこと。ＤＩＣではなくＨＡＴＵ／ＤＩＥＡでカップリングを行ったこと以外、実質的に図２に示すようなスキームを利用した。

２−クロロトリチルクロライドレジン（３．２ｇ、２．４ｍｍｏｌ；NeoMPS）から開始して、完全保護レジン結合ペプチドを手作業で合成した。Ｎ−（１−Ｆｍｏｃ−ピペリジン−４−イル）−Ｌ−プロリン（２．０ｇ、４．８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３．３ｍｌ、１９．２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４０ｍｌ）およびＤＭＦ（１０ｍｌ）に入れた混合溶液で室温にて４時間処理して、第１のアミノ酸をレジンに結合した。レジンを３×ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＤＩＥＡ（ｖ／ｖ／ｖ＝１７：２：１）、さらに３×ＤＣＭで洗浄し、ｉｎｖａｃｕｏにて乾燥させた。得られたレジン（３．７ｇ；Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］）いくつかに分け、１．９ｇ（１．２ｍｍｏｌ）を使ってペプチド合成を継続した。３倍過剰のアミノ酸誘導体を用いるＨＡＴＵ／ＤＩＥＡでのシングルカップリングを実施した。２５％ピペリジン／ＤＭＦ溶液でＦｍｏｃ基を除去した。ペプチド鎖伸長の完了時、レジンを４％ヒドラジン／ＤＭＦ溶液で３分間ずつ３回処理し、Ｄｄｅを除去した。このレジンをＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、ｉｎｖａｃｕｏにて乾燥させた。得られたペプチドレジン（２．１ｇ；Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］）を再び分け、０．７ｇ（０．４ｍｍｏｌ）を以後の切断に利用した。ペプチドレジンをＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（１５ｍｌ、ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２．５：２．５）混合物で室温にて９０分間処理した。レジンを濾過し、ＴＦＡで洗浄した。濾液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（２２０ｍｇ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ）をジエチルエーテルで沈殿させた。

精製のために、上述の粗ペプチド（２２０ｍｇ）を０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液（５０ｍｌ）に溶解させ、この溶液をＨＰＬＣカラムに注入し、ＴＦＡ緩衝系（緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液およびＢ＝０．１％ＴＦＡ／６０％ＡＣＮ／４０％Ｈ_２Ｏ溶液）で精製した。化合物を緩衝液Ｂの直線濃度勾配により、２５分かけて２５％Ｂから７５％Ｂまで、ｔ_Ｒ＝４３％Ｂで溶出した。純度が９７％を超える画分をプールし、冷凍し、凍結乾燥機で乾燥させて、精製ペプチドを白色の非晶質粉末（８９ｍｇ）として得た。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１８．２２分間、純度９９．５％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７３４．５、実測値７３４．４。

実施例５：化合物（５）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｈａｒ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号３）：
上述の化合物（４）の合成時に調製した、ペプチド−レジン：Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］を開始材料として用いた。上記化合物（１）の合成で説明したようにして、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を実施した。

Ｄ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基をＸａａ_４でグアニル化するために、１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン塩酸塩（０．６ｇ、４．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．７ｍｌ、４．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍｌ）混合溶液で室温にて一晩、ペプチドレジン（０．７ｇ、０．４ｍｍｏｌ）を処理した。レジンをＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、ｉｎｖａｃｕｏにて乾燥させた。次に、ＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（１５ｍｌ、ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２．５：２．５）混合物で室温にて９０分間処理して、ペプチドをレジンから切断した。さらに、レジンを濾過し、ＴＦＡで洗浄した。濾液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（１７０ｍｇ；Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｈａｒ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ）をジエチルエーテルで沈殿させた。

精製のために、上述の粗ペプチド（１７０ｍｇ）を０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液（５０ｍｌ）に溶解させ、この溶液をＨＰＬＣカラムに注入し、ＴＦＡ緩衝系（緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液およびＢ＝０．１％ＴＦＡ／６０％ＡＣＮ／４０％Ｈ_２Ｏ溶液）を用いて精製した。化合物を緩衝液Ｂの直線濃度勾配により、２５分かけて２５％Ｂから７５％Ｂまで、ｔ_Ｒ＝４６％Ｂで溶出した。純度が９７％を超える画分をプールし、冷凍し、凍結乾燥させて、精製ペプチドを白色の非晶質粉末（８１ｍｇ）として得た。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１９．４２分間、純度１００％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７７６．５、実測値７７６．５。

実施例６：化合物（６）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号１）：
上述したようにして化合物（４）の合成時に調製した、ペプチドレジンすなわちＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］０．７ｇ（０．４ｍｍｏｌ）を用いて、合成を開始した。上記化合物（１）の合成で説明したようにして、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を実施した。この場合、図２に示すペプチドの段階的なアセンブリとの対比で、Ｘａａ_１−Ｘａａ_４ペプチドを事前合成してカップリングした。

Ｄ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基をＸａａ_４でメチル化するために、上記化合物（１）の合成で説明したような３段階からなる手法を利用した。続いて、レジン結合メチル化ペプチド（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］）をＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（１５ｍｌ、ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２．５：２．５）混合物で室温にて９０分間処理した。レジンを濾過し、ＴＦＡで洗浄した。濾液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（２００ｍｇ；Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｙｓ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ）をジエチルエーテルで沈殿させた。

精製のために、上述の粗ペプチド（２００ｍｇ）を０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液（５０ｍｌ）に溶解させ、この溶液をＨＰＬＣカラムに注入し、ＴＦＡ緩衝系（緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液およびＢ＝０．１％ＴＦＡ／６０％ＡＣＮ／４０％Ｈ_２Ｏ溶液）を用いて精製した。化合物を２５％から７５％緩衝液Ｂの直線濃度勾配により３０分間かけてｔ_Ｒ＝４２％Ｂで溶出した。純度が９７％を超える画分をプールし、冷凍し、凍結乾燥機で乾燥させて、精製ペプチドを白色の非晶質粉末（４１ｍｇ）として得た。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１８．６６分間、純度９８．１％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７４８．５、実測値７４８．５。

実施例７：化合物（７）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−［ホモピペラジンアミド］（配列番号４）：
アミノ酸誘導体には、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨを利用した。上述の化合物（１）の合成で説明したようにして、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を実施した。SYMPHONY Multiple Synthesizer (Protein Technology Inc.)で、化合物（１）の合成時に調製したホモピペラジンカルバメートWangレジン（０．３５ｍｍｏｌ；ホモピペラジン−［カルバメートWangレジン］）から開始して、完全保護レジン結合ペプチドを合成した。４倍過剰のアミノ酸誘導体を用いるＨＢＴＵ／ＤＩＥＡでのシングルカップリングを実施した。２５％ピペリジン／ＤＭＦ溶液でＦｍｏｃ基を除去した。自動合成の終了時、ペプチドレジン（Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−［ホモピペラジンアミド］）を手作業でのペプチド合成容器に移し、ＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ_２Ｏ（１５ｍｌ、ｖ／ｖ／ｖ＝９５：２．５：２．５）混合物で室温にて９０分間処理した。レジンを濾過し、ＴＦＡで洗浄した。濾液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（３８０ｍｇ；Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−［ホモピペラジンアミド］）をジエチルエーテルで沈殿させた。

精製のために、上述の粗ペプチド（３８０ｍｇ）を０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液（５０ｍｌ）に溶解させ、この溶液をＨＰＬＣカラムに注入し、ＴＦＡ緩衝系（緩衝液Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液およびＢ＝０．１％ＴＦＡ／６０％ＡＣＮ／４０％Ｈ_２Ｏ溶液）を用いて精製した。化合物を緩衝液Ｂの直線濃度勾配により、２５分かけて２５％Ｂから７５％Ｂまで、ｔ_Ｒ＝３６％Ｂで溶出した。純度が９７％を超える画分をプールし、冷凍し、凍結乾燥させて、精製ペプチドを白色の非晶質粉末（２２２ｍｇ）として得た。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１６．７５分間、純度１００％、２０分かけて２％Ｂから２２％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６６４．４、実測値６６４．５。

実施例８：化合物（８）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｈａｒ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸］−ＯＨ（配列番号３）：
２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジンへの結合時に、Ｎ−（１−Ｆｍｏｃ−ピペリジン−４−イル）−Ｌ−プロリンに代えてＮ−Ｂｏｃ−アミノ−（４−Ｎ−Ｆｍｏｃ−ピペリジニル）カルボン酸を用いたこと以外、基本的には化合物（５）の合成で上述した手法を用いて、この化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール１ｍｍｏｌで収率８５ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１７．８７分間、純度１００％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７２２．４、実測値７２２．５。

実施例９：化合物（９）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−ｉＰｒ）Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号５）：
上記化合物（２）の合成時に調製したペプチドレジンであるＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−（Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ−４−ピペリジニルカルボン酸）−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］）０．１５ｍｍｏｌから合成を開始した。Ｄ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基をＸａａ_４でイソプロピル化するために、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３ｍｍｏｌ）およびアセトン（６ｍｍｏｌ）のＴＭＯＦ（１０ｍＬ）混合溶液で、ペプチドレジンを室温にて４時間処理した。続く切断および精製ステップを、化合物（２）の合成で説明した手法を用いて実施した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、収率６７ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１９．２９分間、純度９８．４％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７２２．５、実測値７２２．５。

実施例１０：化合物（１０）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号６）：
図３のスキームを参照のこと。アミノ酸誘導体には、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、Ｎ−Ｆｍｏｃ−アミノ−（４−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペリジニル）カルボン酸を使用した。化合物（１）の合成で説明したようにしてＨＰＬＣおよびＭＳ分析を実施した。４−Ｆｍｏｃ−ヒドラジノベンゾイルAM NovaGelレジン（３ｍｍｏｌ；Novabiochem）から開始して、完全保護レジン結合ペプチドを手作業で合成した。開始レジンのＦｍｏｃ保護基をまず２５％ピペリジン／ＤＭＦ溶液で除去し、続いてＮ−Ｆｍｏｃ−アミノ−（４−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペリジニル）カルボン酸（７．５ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（７．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ混合溶液で室温にて一晩、レジンを処理した。以下の２段階で、結合アミノ酸のＦｍｏｃ基をｏ−ＮＢＳと入れ替えた：（ｉ）Ｆｍｏｃを２５％ピペリジン／ＤＭＦ溶液で除去。（ｉｉ）化合物（１）の合成で説明した手法によるｏ−ＮＢＳ保護。得られたペプチドレジン、Ｎ−ｏ−ＮＢＳ−アミノ−（４−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペリジニル）カルボン酸−［ヒドラジノベンゾイルAM NovaGelレジン］をいくつかに分け、１ｍｍｏｌを使ってペプチド合成を継続した。３倍過剰のアミノ酸誘導体を用いるＰｙＢＯＰ／ＤＩＥＡでのシングルカップリングを実施した。３０％ＴＦＡ／ＤＣＭ溶液でＢｏｃ基を除去した。ペプチド鎖伸長の完了時、レジンを２％ＤＢＵ／ＤＭＦ溶液で２×８分間処理してＦｍｏｃを除去した後、上記化合物（５）の合成で説明した手法でＤ−Ｄａｐのω−アミノ官能基をＸａａ_４でグアニル化した。化合物（１）の合成で説明した手法で、最終的なｏ−ＮＢＳ脱保護を実施した。

酸化的な切断のために、Ｃｕ（ＯＡｃ）_２（１ｍｍｏｌ）、ピリジン（４ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（２ｍｍｏｌ）を５％Ｈ_２Ｏに入れた混合物のＤＭＦ溶液と乾燥ペプチドレジンとを混合し、室温にて６時間、レジンに気泡が出るがままにしておいた。レジンを濾過し、ＤＭＦで洗浄し、濾液物をｉｎｖａｃｕｏで蒸発させた。残渣であるＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨを９５％ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ溶液で処理し、Ｂｏｃを除去した。溶液をｉｎｖａｃｕｏにて蒸発させ、粗ペプチド（１ｍｍｏｌ；Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ）をジエチルエーテルで沈殿させた。

化合物（２）の合成で説明したプロトコールを用いて、上述の粗ペプチドを精製した。精製ペプチドは、非晶質粉末（１６ｍｇ）であった。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１６．９７分間、純度９９．９％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６８０．４、実測値６８０．４。

実施例１１：化合物（１１）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｎａｒ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ（配列番号７）：
Ｘａａ_４でのアミノ酸誘導体のカップリングでＢｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨに代えてＢｏｃ−Ｄ−Ｄｂｕ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨを用いたこと以外、化合物（１０）の合成で説明した手法を用いて、この化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール１ｍｍｏｌで収率２３ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１７．１２分間、純度９９．２％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６９４．４、実測値６９４．５。

実施例１２：化合物（１２）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｄｂｕ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号８）：
上述したような化合物（４）の合成で説明した手法を用いて、この化合物を調製した。違いは、Ｘａａ_４でのアミノ酸誘導体のカップリングでＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄｂｕ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨをＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨに代えて用いたことである。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．４ｍｍｏｌで収率７ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１８．１５分間、純度９８．９％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７０６．４、実測値７０６．４。

実施例１３：化合物（１３）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｎａｒ−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号７）：
化合物（１２）の合成時に調製したペプチドレジン、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｄｂｕ−Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン−［２−Ｃｌ−Ｔｒｔレジン］０．４ｍｍｏｌから合成を開始した。上記化合物（５）の合成で説明した手法でＤ−Ｄｂｕのω−アミノ官能基をＸａａ_４でグアニル化した。続く切断および精製ステップを、化合物（１）の合成で説明した手法を用いて実施した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、収率７ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１８．６８分間、純度９７．３％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７４８．５、実測値７４８．５。

実施例１４：化合物（１４）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｄａｐ（アミジノ）−［Ｎ−（４−ピペリジニル）−Ｌ−プロリン］−ＯＨ（配列番号６）：
Ｘａａ_４でのアミノ酸誘導体のカップリングでＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨをＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄｂｕ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨに代えて用いたこと以外、化合物（１３）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．４ｍｍｏｌで収率１２ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１８．５５分間、純度９８．０％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７３４．４、実測値７３４．４。

実施例１５：化合物（１５）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号２）：
Ｘａａ_４でのＤ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基のメチル化をなくしたこと以外、化合物（１）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１４０ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１４．０２分間、純度９９．３％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６７８．４、実測値６７８．５。

実施例１６：化合物（１６）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｈａｒ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号３）：
グアニル化ステップをＸａａ_４でのＤ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基のメチル化に代えて用いたこと以外、化合物（１）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。グアニル化については、上記化合物（５）の合成で説明した手法で実施した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１７３ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１５．０５分間、純度９８．６％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７２０．５、実測値７２０．５。

実施例１７：化合物（１７）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（ε−ｉＰｒ）Ｄ−Ｌｙｓ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号５）：
イソプロピル化ステップをＸａａ_４でのＤ−Ｌｙｓのω−アミノ官能基のメチル化に代えて用いたこと以外、化合物（１）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。イソプロピル化については、化合物（９）の合成で説明した手法で実施した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率２３３ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１６．１６分間、純度９４．５％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７２０．５、実測値７２０．５。

実施例１８：化合物（１８）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号６）：
Ｘａａ_４でのアミノ酸誘導体のカップリングでＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨをＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨに代えて用いたこと以外、化合物（１６）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１５５ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１４．４４分間、純度９９．１％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６７８．４、実測値６７８．５。

実施例１９：化合物（１９）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号６）：
Ｘａａ_３でのアミノ酸誘導体のカップリングでＦｍｏｃ−Ｄ−Ｎｌｅ−ＯＨをＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨに代えて用いたこと以外、上記化合物（１８）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１９０ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１４．６９分間、純度９８．９％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６７８．２、実測値６７８．５。

実施例２０：化合物（２０）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ホモピペラジンアミド］（配列番号６）：
Ｃ末端でのホモピペラジンのグアニル化をなくしたこと以外、上記化合物（１８）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１７２ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１３．８４分間、純度９９．１％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６３６．４、実測値６３６．５。

実施例２１：化合物（２１）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｎｌｅ−（β−アミジノ）Ｄ−Ｄａｐ−［ホモピペラジンアミド］（配列番号６）：
Ｃ末端でのホモピペラジンのグアニル化をなくしたこと以外、化合物（１９）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１４９ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１４．０６分間、純度９８．５％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６３６．４、実測値６３６．５。

実施例２２：化合物（２２）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｄｂｕ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号８）：
Ｘａａ_４でのアミノ酸誘導体のカップリングでＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄｂｕ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨをＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨに代えて用いたこと以外、化合物（１５）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１５２ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１４．０３分間、純度９８．１％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６５０．４、実測値６５０．５。

実施例２３：化合物（２３）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｎａｒ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号７）：
Ｘａａ_４でのアミノ酸誘導体のカップリングでＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄｂｕ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨをＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨに代えて用いたこと以外、化合物（１６）の合成で説明した手法で、化合物を調製した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率２２７ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１４．３７分間、純度９９．３％、２０分かけて５％Ｂから２５％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量６６４．４、実測値６６４．５。

実施例２４：化合物（２４）の合成
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−［４−アミジノホモピペラジンアミド］（配列番号４）：
上述の化合物（７）の合成で説明した手法で合成したＢｃｚ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−［ホモピペラジンアミド］のＣ末端で、ホモピペラジンをグアニル化して、化合物を調製した。続く切断および精製を、上記化合物（１）の合成で説明した手法で実施した。最終精製ペプチド：非晶質粉末、合成スケール０．３ｍｍｏｌで収率１０２ｍｇ。ＨＰＬＣ分析：ｔ_Ｒ＝１７．３４分間、純度９８．４％、２０分かけて２％Ｂから２２％Ｂまでの勾配；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ^＋）：予測分子イオン質量７０６．５、実測値７０６．５。

実施例２５：化合物（２５）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［２，８−ジアザスピロ［４，５］デカン−１−オンアミド］（配列番号２）：
これらの合成については、図４に示すスキームを用いて実施した。後述する中間体が、図４に示す中間体に相当する。Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ中間体Ｉ−１（７．９６ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）、Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＢｎｐ−ＴｓＯＨ中間体Ｉ−２（１１．８０ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（４．４６ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（８．５３ｇ、６６．０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２５０ｍＬ）懸濁液を氷水浴で冷却した中に、ＥＤＣＩ（６．３３ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）を４回に分けて５分間隔で２０分かけて添加した。この懸濁液を開始温度である０℃から室温まで一晩攪拌した。ＴＨＦを蒸発させた後、残渣を酢酸エチルに溶解させ、１０％クエン酸、飽和ＮａＨＣＯ_３、水で順次洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下にて蒸発させた。残渣をＤＣＭに溶解させ、シリカゲルプラグに通し、２０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出した。溶離液を蒸発させ、純粋な生成物であるＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＢｎすなわち中間体Ｉ−３（１２．４０ｇ、８８％）を、透明な油として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４６９（Ｍ＋Ｈ）。

中間体Ｉ−３（１２．４０ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解させた。ＴＦＡ（２５ｍＬ）を加え、溶液を室温にて２時間攪拌した。ＤＣＭおよびＴＦＡを蒸発させた後、残渣をトルエンと一緒に２回共沸し、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−ＯＢｎのＴＦＡ塩すなわち中間体Ｉ−４を得た。この粗ジペプチドをＴＨＦに懸濁させ、これに、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ（６．３６ｇ、２４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（４．０４ｇ、２６．４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（８．７ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。ＥＤＣＩ（６．３３ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を４回に分けて５分間隔で２０分かけて添加した。この懸濁液を０℃から室温まで一晩攪拌した。ＴＨＦを蒸発させた後、残渣を酢酸エチルに溶解させ、１０％クエン酸、飽和ＮａＨＣＯ_３、水で順次洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下にて蒸発させた。残渣を４００ｍＬアセトン／ヘキサン（１：３）から再結晶化させ、純粋な生成物９．１ｇを得た。母液を蒸発させ、再度アセトン／ヘキサン（１：３）から再結晶化させて、生成物２．０ｇを得た。総収率は１１．１ｇ（２ステップで６８％）であった。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６１６（Ｍ＋Ｈ）。

窒素フラッシュしたフラスコに、パラジウム炭素湿体（１．８ｇ）およびＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＢｎすなわち中間体Ｉ−５（１１．１ｇ、１８．０５ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍＬ）溶液を加えた。この混合物を水素バルーン下にて一晩攪拌した。セライトでの濾過後、メタノールを減圧下で蒸発させた。残渣をアセトン（２０ｍＬ）に溶解させ、１ＮのＨＣｌを２５ｍＬ含む水５００ｍＬに、強く攪拌しながらゆっくりと加えた。濾過により、純粋な生成物であるＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−ＯＨすなわち中間体Ｉ−６を９．４ｇ（９９％）得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５２６（Ｍ＋Ｈ）。

中間体Ｉ−６（２．０６ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）、Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＡｌｌ塩酸塩（１．２６ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．７ｍｌ、９．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に、ＴＢＴＵ（１．５６ｇ、４．８８ｍｍｏｌ）を０℃で３回に分けて１５分間かけて加えた。開始温度である０℃から室温まで一晩攪拌した後、ＤＭＦを高真空下にて蒸発させた。粗反応混合物は４００ｍｌ氷水中の沈殿物であり、これを濾過して沈殿物であるＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＡｌｌ中間体Ｉ−７（２．６０ｇ）を回収し、それ以上精製することなく次のステップで利用した。

中間体Ｉ−７（２．６０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（７５ｍＬ）溶液に、ピロリジン（１．１ｍｌ、１３．３ｍｍｏｌ）およびパラジウムテトラキス（トリフェニルホスフィン）（４００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温にて３時間攪拌し、蒸発乾固させた。残渣を３０％ＭｅＣＮ／水対９０％ＭｅＣＮ／水の逆相カラムクロマトグラフィで精製し、アセトニトリル／水の蒸発後に純粋な酸である中間体Ｉ−８（２．０ｇ、８０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７５４（Ｍ＋Ｈ）。

上記の酸、中間体Ｉ−８（１５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、アミンＨＮＲ_ａＲ_ｂ、２，８−ジアザスピロ［４，５］デカン−１−オン（５７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１７５ｕｌ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＨＢＴＵ（１１３ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。開始温度である０℃から室温まで一晩攪拌した後、ＤＭＦを減圧下で蒸発させた。残渣を、４ＮのＨＣｌと一緒に１，４−ジオキサン（２．０ｍＬ）中で室温にて１時間攪拌した。ジオキサンを除去した後、残渣を水に溶解させ、３０分かけて１０％ＭｅＣＮ／水から６０％ＭｅＣＮ／水までの勾配で、逆相カラムクロマトグラフィを用いて精製し、溶媒の蒸発後に純粋な生成物である化合物（２５）（１０８ｍｇ、２ステップで収率７８％）を得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６９０（Ｍ＋Ｈ）。

実施例２６：化合物（２６）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［２−メチル−２，８−ジアザスピロ［４，５］デカン−１−オンアミド］（配列番号２）：
最終的なアミドカップリングステップで用いるアミン（図４のスキームでのＨＮＲ_ａＲ_ｂ）を２，８−ジアザスピロ［４，５］デカン−１−オンではなく２−メチル−２，８−ジアザスピロ［４，５］デカン−１−オンとしたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（２６）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７０４（Ｍ＋Ｈ）。

実施例２７：化合物（２７）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１，３，８−トリアザスピロ［４，５］デカン−２，４−ジオンアミド］（配列番号２）：
最終ステップでアミン１，３，８−トリアザスピロ［４，５］デカン−２，４−ジオンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（２７）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７０５（Ｍ＋Ｈ）。

実施例２８：化合物（２８）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［５−クロロ−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２（３）Ｈ−オンアミド］（配列番号２）：
アミン５−クロロ−１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２（３）Ｈ−オンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（２８）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３９４。

実施例２９：化合物（２９）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［モルホリノ（ピペリジン−４−イル）メタノンアミド］（配列番号２）：
アミンモルホリノ（ピペリジン−４−イル）メタノンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（２９）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６６。

実施例３０：化合物（３０）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４−フェニル−１−（ピペリジン−イル−１Ｈ−イミダゾール−２（３Ｈ）−オンアミド］（配列番号２）：
アミン４−フェニル−１−（ピペリジン−イル−１Ｈ−イミダゾール−２（３Ｈ）−オンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３０）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７７９（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３１：化合物（３１）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４−（３，５−ジメチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イル）ピペリジンアミド］（配列番号２）：
アミン４−（３，５−ジメチル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イル）ピペリジンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３１）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７１６（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３２：化合物（３２）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１−（ピペリジン−４−イル）インドリン−２−オンアミド］（配列番号２）：
アミン１−（ピペリジン−４−イル）インドリン−２−オンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３２）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７５２（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３３：化合物（３３）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１−フェニル−１，３，８−トリアザスピロ［４．５］デカン−４−オンアミド］（配列番号２）：
アミン１−フェニル−１，３，８−トリアザスピロ［４．５］デカン−４−オンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３３）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７６７（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３４：化合物（３４）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−イルメタナミンアミド］（配列番号２）：
アミンイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−イルメタナミンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３４）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６８３（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３５：化合物（３５）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［（５−メチルピラジン−２−イル）メチルアミンアミド］（配列番号２）：
最終ステップでアミン（５−メチルピラジン−２−イル）メタナミンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３５）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６５９（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３６：化合物（３６）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２（３Ｈ）−オンアミド］（配列番号２）：
アミン１−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２（３Ｈ）−オンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３６）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７５３（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３７：化合物（３７）の合成：
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンアミド］（配列番号２）：
アミン４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジンを用いたこと以外、基本的には上記化合物２５で説明したようにして、化合物（３７）を調製した。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６５９（Ｍ＋Ｈ）。

実施例３８：合成ペプチドアミド１〜２４の構造の確認
表Ｉに、各化合物の分子イオンの計算で求めた分子量ＭＨ^＋と、質量分析で測定した実際の分子量を示す。また、各化合物の合成で用いた合成相のタイプ（固相または混合）と、合成で用いたレジンのタイプ（２−クロロトリチル「２−Ｃｌ−Ｔｒｔ」レジン、ヒドラジノベンゾイル「ヒドラジン」レジンまたはｐ−ニトロフェニル−カーボネート(Wang)「カーボネート」レジンのいずれか）も示す。各化合物を合成するための関連の合成スキームを示す図の番号を一番右の欄に示す。

実施例３９：Ｒ_１．Ｇ１細胞における内在性マウスκ−オピオイド受容体の刺激によるｃＡＭＰ生成の阻害
ホルスコリン刺激アデニル酸シクラーゼ活性の阻害を測定し、合成ペプチドアミドのκ−オピオイド受容体アゴニストとしての力価を求めた。Ｒ_１．Ｇ１細胞（κ−オピオイド受容体のみを発現し、他のオピオイド受容体サブタイプは発現しないマウス胸腺腫細胞系）をまず、ホルスコリン（ｃＡＭＰ誘導用）プラス合成ペプチドアミドに試験濃度で曝露した。インキュベーション後、曝露Ｒ_１．Ｇ１細胞のｃＡＭＰ濃度を時間分解蛍光共鳴エネルギ移動（ＴＲ−ＦＲＥＴ）ベースのｃＡＭＰイムノアッセイ（LANCE（商標）、Perkin Elmer）で求めた。詳しい方法は、下記のとおりである。

マウスＲ_１．Ｇ１細胞(ATCC, Manassas, VA)を、１０％ウマ血清および２％ｇlutaMax(Invitrogen, Carlsbad. CA)を含有する高グルコース−ＤＭＥＭ（ダルベッコ変法イーグル培地、Cellgro, Herndon, VA）にて、抗生物質を加えずに懸濁液で増殖した。実験の日、細胞を室温にて１，０００ｒｐｍで５分間スピンした後、ＨＢＳＳ（ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩溶液、Invitrogen, Carlsbad, CA）で１回洗浄した。次に、細胞を再度スピンし、刺激緩衝液（０．０５％ＦＡＦ−ＢＳＡ（脂肪酸不含ウシ血清アルブミン、Roche Applied Science, Indianapolis, IN）加ＨＢＳＳ、５ｍＭＨＥＰＥＳ）に再懸濁させて１ｍｌあたり細胞が２百万個になるようにした。続いて、LANCE（商標）ｃＡＭＰイムノアッセイキットに同梱されていた抗体を製造業者の指示に従って細胞に加えた後、ホルスコリンの入ったウェルにウェル１つあたり１２，０００個の細胞を加えて、あらかじめ定められた一定の最終濃度（一般に約２．５ｕＭ）および試験対象の合成ペプチドアミドの事前に求めておいた量になるようにした。力価を求めるための濃度範囲で合成ペプチドアミドを試験した。合成ペプチドアミドプラスホルスコリンを用いて、室温にて約２０分間細胞を培養した。インキュベーション後、LANCE（商標）キットに同梱されていた検出ミックス１２ｕｌを加えて細胞を溶解した後、室温にて１時間インキュベーションした。３３０〜３８０ｎｍの励起フィルタ、６６５ｎｍの放出フィルタ、ダイクロイックミラー３８０およびＺ＝１ｍｍを用いて、時間分解蛍光を読み取った。このアッセイでのｃＡＭＰ濃度の標準曲線から、各ウェルに存在するｃＡＭＰの量を求めることができた。被験細胞のｃＡＭＰ濃度に対する合成ペプチドアミド濃度をプロットして曲線を生成し、４パラメータ曲線フィッティングアルゴリズムを用いて非線形回帰に適用し、ＥＣ_５０すなわち、合成ペプチドアミドによるｃＡＭＰ生成の最大抑制の５０％を達成するのに必要な合成ペプチドアミドの濃度を計算した。合成ペプチドアミド化合物（１）〜（３６）についてこのアッセイで得られたＥＣ_５０値を表ＩＩに示す。

実施例４０：ヒトκオピオイド受容体に対する合成ペプチドアミドの力価
Fugene6 (Roche Molecular Biochemicals)トランスフェクション試薬とＤＮＡコンストラクトとを３．３対１の比で用いて、１００ｍｍのシャーレに入れたヒト胎児由来腎臓細胞（ＨＥＫ−２９３細胞、ATCC, Manassas, VA）をトランスフェクトした。トランスフェクションには、以下のＤＮＡコンストラクトを使用した。（ｉ）ヒトκオピオイド受容体用の発現ベクター、（ｉｉ）ヒトキメラＧ−タンパク質用の発現ベクター、（ｉｉｉ）カルシウム感受性転写因子ＮＦＡＴによってルシフェラーゼ発現が誘導されるルシフェラーゼレポーターコンストラクト。

ヒトκオピオイド受容体を含む発現ベクターを以下のようにして構築した。ヒトＯＰＲＫ１遺伝子をヒト後根神経節全ＲＮＡからＰＣＲでクローニングし、遺伝子を発現ベクターｐｃＤＮＡ３(Invitrogen, Carlsbad, CA)に挿入してヒトＯＰＲＫ１哺乳類発現ベクターｐｃＤＮＡ３−ｈＯＰＲＫ１を構築した。

ヒトキメラＧ−タンパク質発現ベクターを構築するために、最初にＰＣＲでヒトＧαｑの最後の５アミノ酸をＧαｉの最後の５アミノ酸の配列で置き換えて、キメラＧ−タンパク質Ｇαｑｉ５を構築した。このヒトＧαｑｉ５遺伝子にアミノ酸位置６６で第２の変異を導入し、部位特異的変異誘発によってグリシン（Ｇ）をアスパラギン酸（Ｄ）に置換した。続いて、この遺伝子を哺乳類発現ベクターｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ(Invitrogen)にサブクローニングし、ヒトキメラＧ−タンパク質発現ベクターｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ−ｈＧＮＡｑ−Ｇ６６Ｄ−ｉ５を得た。

ルシフェラーゼレポーター遺伝子コンストラクトを調製するために、ＴＲＥ（１２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート−応答配列）の３つのコピーとＮＦＡＴ（活性化Ｔ細胞核内因子）の３つのコピーとを含む合成応答エレメントをｃ−ｆｏｓミニマルプロモーターの上流に取り込んだ。この応答エレメント・プロモーターカセットをルシフェラーゼレポーター遺伝子ベクターｐＧＬ３−ベーシック(Promega)に挿入し、ルシフェラーゼレポーター遺伝子プラスミドコンストラクトｐＧＬ３ｂ−３ＴＲＥ−３ＮＦＡＴ−ｃｆｏｓ−Ｌｕｃを構築した。

各プレートの細胞のトランスフェクション混合物には、６マイクログラムのｐｃＤＮＡ３−ｈＯＰＲＫ１と、６マイクログラムのｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ−ｈＧＮＡｑ−Ｇ６６Ｄ−ｉ５と、０．６マイクログラムのｐＧＬ３ｂ−３ＴＲＥ−３ＮＦＡＴ−ｃｆｏｓ−Ｌｕｃとが含まれていた。５％ＣＯ_２を含有する湿った雰囲気にて細胞を３７℃で１日培養した後、トランスフェクションして、不透明な９６ウェルのプレートに１ウェルあたり培地１００マイクロリットルで４５，０００個の細胞を蒔いた。翌日、被験化合物と基準化合物とを個々のウェルの細胞に加えた。ある濃度範囲の被験化合物を一組のウェルに加え、同様の濃度範囲の基準化合物を対照ウェルの組に加えた。次に、細胞を３７℃で５時間培養した。インキュベーション終了時、ルシフェラーゼ基質（ＡＭＰ（２２ｕｇ／ｍｌ）、ＡＴＰ（１．１ｍｇ／ｍｌ）、ジチオスレイトール（３．８５ｍｇ／ｍｌ）、ＨＥＰＥＳ（５０ｍＭ最終濃度）、ＥＤＴＡ（０．２ｍｇ／ｍｌ）、トリトンＮ−１０１（４ｕｌ／ｍｌ）、フェニル酢酸（４５ｕｇ／ｍｌ）、シュウ酸（８．５ｕｇ／ｍｌ）、ルシフェリン（２８ｕｇ／ｍｌ）、ｐＨ７．８）を含有する検出ミックス１００マイクロリットルを加えて細胞を溶解した。プレートを封止し、３０分以内に蛍光を読み取った。各化合物の濃度を１秒あたりの蛍光カウント（ｃｐｓ）に対してプロットし、得られた応答曲線を、４パラメータ曲線フィッティングアルゴリズムを用いて非線形回帰に適用し、ＥＣ_５０（ルシフェラーゼ活性の最大増加の５０％を達成するのに必要な化合物濃度）と薬効（アシマドリン（ＥＭＤ−６１７５３：Joshi et al., 2000, J. Neurosci. 20(15): 5874-9を参照のこと）またはＵ−６９５９３（Heidbreder et al., 1999, Brain Res. 616(1-2): 335-8を参照のこと）などの周知のいずれかのκオピオイド受容体アゴニストによる完全誘導と比較した最大活性化の割合）を計算した。

表ＩＩに、本発明に従って合成し、マウスκオピオイド受容体（ｍＫＯＲ）で試験した一例としての化合物を用いてｃＡＭＰ阻害アッセイで得られたＥＣ_５０値を、上述した方法によるヒトκオピオイド受容体（ｈＫＯＲ）での結果の確認内容(confirmatory replication)と一緒に示す。

本発明の合成ペプチドアミドのヒトμオピオイド受容体に対する力価を同様のアッセイで試験した。試験した各化合物、ヒトμオピオイド受容体でのＥＣ_５０が１ｕＭ以上であった。

実施例４１：合成ペプチドアミドの膜透過性
培養内で分化するヒト結腸腺癌細胞系に、Ｃａｃｏ−２細胞系があり、ヒト小腸の上皮層のモデル化に用いられている。標準アッセイでＣａｃｏ−２のＴＣ７サブクローンを用いる膜透過アッセイで本発明の化合物を試験した(Cerep, Seattle, WA)。簡単に説明すると、９６ウェルのポリカーボネート膜フィルタで培養した細胞単層膜で頂側膜側から側底膜側へ（Ａ−Ｂ）の方向で、見かけの透過係数（Ｐ_ａｐｐ）を求めた。

濃度１０ｕＭ、ｐＨ６．５、１％ＤＭＳＯ中にて、レシピエント側をｐＨ７．４に保って化合物を試験した。アッセイプレートを、静かに振盪しながら３７℃で６０分間培養した。時刻０の時点ではドナー側から、インキュベーション時間の終了時にはドナー側とレシピエント側の両方から試料を採取した。試料をＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。次に、レシピエント側の化合物の出現速度に基づいてＰ_ａｐｐ値（１０^−６ｃｍ／秒で表される）を計算した。Ｐ_ａｐｐの計算には、以下の式を用いた。

式中、Ｐ_ａｐｐは見かけの透過性であり；Ｓは膜表面積、Ｃ_０は時刻０のドナー濃度、ｄＱ／ｄｔは時間あたりの薬剤輸送量である。４種類の基準化合物（ラベタロール、プロプラノロール、ラニチジン、ビンブラスチン）を同時に試験し、アッセイの有効性を保証するとともに、末梢に作用するκオピオイドであることを意味するアシマドリンも試験した。結果を表ＩＩＩにあげておく。

このタイプのアッセイで透過性の低い化合物は、ｉｎｖｉｖｏで血液脳関門を通過する可能性が低いと考えられる。受動的透過性の高さがＣＮＳ作用薬剤の重要な特徴のひとつであるように思われるためである(Mahar Doan et al. Passive permeability and P-glycoprotein-mediated efflux differentiate central nervous system (CNS) and non-CNS marketed drugs. J Pharmacol Exp Ther. 2002;303:1029-37)。

実施例４２：シトクロムＰ_４５０オキシダーゼの阻害
本発明の合成ペプチドアミド化合物による、シトクロムＰ_４５０オキシダーゼアイソザイムＣＹＰ１Ａ、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６およびＣＹＰ３Ａ４の阻害を、Cerep (Seattle, WA)によって実施される以下の方法で判断した。

シトクロムＰ_４５０ＣＹＰ１Ａアッセイでは、１０ｕＭの被験化合物、１ｕＭのエトキシレゾルフィン、１．３ｍＭのＮＡＤＰ、３．３ｍＭのグルコース−６−ホスフェート、０．４Ｕ／ｍｌのグルコース−６−ホスフェート脱水素酵素を用いて、ヒト肝臓ミクロソーム（０．２ｍｇ／ｍｌタンパク質）を３７℃で１５分間培養した。被験化合物が存在しないと、基質として添加したエトキシレゾフフィンがレゾルフィンに酸化され、ＣＹＰアイソザイムのインヒビターの共存下、生成されるレゾルフィンの量が減少する。基準インヒビターにはフラフィリンを利用した。

１０ｕＭの被験化合物、１０ｕＭのトルブタミド、１．３ｍＭのＮＡＤＰ、３．３ｍＭのグルコース−６−ホスフェート、０．４Ｕ／ｍｌのグルコース−６−ホスフェート脱水素酵素を用いて、ヒト肝臓ミクロソーム（０．２ｍｇ／ｍｌタンパク質）を含有するシトクロムＰ_４５０ＣＹＰ２Ｃ９アッセイ反応混合物を３７℃で１５分間培養した。被験化合物が存在しないと、トルブタミドが４−ヒドロキシトルブタミドに酸化され、ＣＹＰアイソザイムのインヒビターの共存下、生成される４−ヒドロキシトルブタミドの量が減少する。基準インヒビターにはスルファフェナゾール（ＩＣ_５０：０．３５ｕＭ）を用いた。

シトクロムＰ_４５０ＣＹＰ２Ｃ１９アッセイでは、１０ｕＭの被験化合物、１０ｕＭのオメプラゾール、１．３ｍＭのＮＡＤＰ、３．３ｍＭのグルコース−６−ホスフェート、０．４Ｕ／ｍｌのグルコース−６−ホスフェート脱水素酵素を用いて、ヒト肝臓ミクロソーム（０．２ｍｇ／ｍｌタンパク質）を３７℃で１５分間培養した。被験化合物が存在しないと、オメプラゾールが５−ヒドロキシ−オメプラゾールに酸化され、ＣＹＰアイソザイムのインヒビターの共存下、生成される５−ヒドロキシ−オメプラゾールの量が減少する。基準インヒビターにはオキシブチニン（ＩＣ_５０：７．１ｕＭ）を用いた。

１０ｕＭの被験化合物、５ｕＭのデキストロメトルファン、１．３ｍＭのＮＡＤＰ、３．３ｍＭのグルコース−６−ホスフェート、０．４Ｕ／ｍｌのグルコース−６−ホスフェート脱水素酵素を用いて，ヒト肝臓ミクロソーム（０．２ｍｇ／ｍｌタンパク質）を含有するシトクロムＰ_４５０ＣＹＰ２Ｄ６アッセイ反応物を３７℃で１５分間培養した。被験化合物が存在しないと、デキストロメトルファンが酸化され、ＣＹＰアイソザイムのインヒビターの共存下、酸化生成物の量が減少する。基準インヒビターにはキニジン（ＩＣ_５０：０．０９３ｕＭ）を用いた。

シトクロムＰ_４５０ＣＹＰ２Ｃ１９アッセイのために、１０ｕＭの被験化合物、５ｕＭのミダゾラム、１．３ｍＭのＮＡＤＰ、３．３ｍＭのグルコース−６−ホスフェート、０．４Ｕ／ｍｌのグルコース−６−ホスフェート脱水素酵素を用いて、ヒト肝臓ミクロソーム（０．２ｍｇ／ｍｌ）を３７℃で２０分間培養した。被験化合物が存在しないと、ミダゾラムが酸化され、組換えアイソザイムのインヒビターの共存下、酸化生成物の量が減少する。酸化生成物は、ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分離後の曲線下の面積から求める。基準インヒビターにはケトコナゾール（ＩＣ_５０：０．５５ｕＭ）を用いた。

各アッセイでは、（１−被験化合物の共存下での試料中の生成物量）を、未処理アイソザイムを含む試料中の生成物の量で割った比を１００倍して、シトクロムＰ_４５０ＣＹＰＰ_４５０アイソザイムの阻害率を求めた。二重アッセイの結果（残っているＣＹＰ活性の割合で表示）を表ＩＶにあげておく。

実施例４３：ヒト肝臓ミクロソームに対する化合物（２）の安定性
ヒト肝臓由来のミクロソーム（最終濃度０．３ｍｇ／ｍＬタンパク質）の０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）溶液とＮＡＤＰＨ再生系（１ｍＭのＮＡＤＰ、５ｍＭのグルコース−６−ホスフェート、１単位／ｍＬのグルコース−６−ホスフェート脱水素酵素）とを３７℃でプレインキュベートした上で、基質、化合物（２）を加えて最終基質濃度１μＭ、最終メタノール濃度０．６％になるようにした。０分と６０分の時点でアリコートを取り出した。同容量の５０／５０アセトニトリル／メタノールを加え、試料を遠心処理し、０分と６０分の時点の試料から生成したピーク面積を比較するタンデム質量分析を併用したＨＰＬＣで、上清に残っている化合物量を測定した。二重試料によって、ヒト肝臓ミクロソームを用いる６０分のインキュベーション後に、９６％および１１８％の化合物（２）が残っていることが明らかになった。

実施例４４：ラットでの化合物（２）の薬物動態
化合物（２）の脳と血漿での濃度比を求めるために、内頸静脈カテーテルを挿入した意識のあるラット６匹に、３ｍｇ／ｋｇのペプチドを内頸静脈カテーテルに５分間点滴して投与した。点滴開始の３０分後、６０分後、１８０分後に、各時点でラット２匹ずつから末端心穿刺によって血液試料を採取し、全脳をすみやかに取り出した。血漿を遠心処理して単離した。タンデム液体クロマトグラフィ質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を用いて、ラットの血漿および脳における薬剤濃度を定量化した。結果を図５に示す。

実施例４５：マウスおよびカニクイザルでの化合物（６）の薬物動態
合成ペプチドアミド化合物を皮下注射によりＩＣＲマウス（ｎ＝６、オス、体重２３〜３７ｇ、Charles River, Wilmington, MA）に単回ボーラス投与し、注射の５分後、１０分後、１５分後、２０分後、３０分後、６０分後、９０分後、１２０分後、１８０分後に血漿試料を採取した。１ｍｇ／ｋｇ用量の化合物（６）をＩＣＲマウスに皮下注射後に得られた結果を図６に示す。最大血漿濃度に達した後に血漿濃度が５０％落ちるまでに必要な時間として、この研究での「半減期」を求めた。最も遅い消失フェーズの消失速度定数に基づく、コンピュータで求めた消失半減期は、さらに長くなるものと思われる。以下の表Ｖを参照のこと。

実施例４６：サルでの合成ペプチドアミド化合物の薬物動態
３〜７歳で体重３〜５キログラムのオスのサルすなわち、Macaca fascicularis（SNBL USA, Ltd., Everett, WA、系統発生学的および生理学的の両方で人間の近縁種である、研究目的で繁殖したカニクイザル）に試料を投与した。試料の投与は、腕または脚の表在静脈（上腕または伏在静脈など）に対して、０．９％注射用生理食塩水ＵＳＰ(Baxter Healthcare, Deerfield, Ill.)にて以下のようにして実施した。試験対象となる本発明の化合物（６）４ｍｇを含有する試料を２ｍｌの０．９％注射用生理食塩水で調製した。用量２ｍｌを被験動物に静脈内ボーラス投与し、個々の動物の体重に応じて用量約０．４〜０．６５ｍｇ／ｋｇになるようにした。注射の２分後、５分後、１０分後、１５分後、３０分後、さらには１時間後、２時間後、４時間後に、末梢静脈からの静脈穿刺により血液試料０．６ｍｌを採取した。リチウムヘパリンを入れて事前に冷却しておいたガラス製試験管に試料を入れ、すみやかに氷冷した。２〜８℃にて２，０００ｇで１５分間の遠心処理後に血漿を回収した。各試料の血漿層をポリプロピレン管に移し、アッセイを行うまで−６０℃以下で冷凍保存した。

解凍血漿のアリコート１００マイクロリットルを、適切な内部標準（この場合、周知の標準合成ペプチドアミド化合物）を０．１％ＴＦＡに入れた４００ｎｇ／ｍｌの溶液５マイクロリットルでスパイクし、１００マイクロリットルの０．１％ＴＦＡ／アセトニトリル溶液でタンパク質を沈殿させた。試料を１０００×ｇで５分間遠心処理し、上清をＬＣ−ＭＳで分析した。このＬＣ−ＭＳ分析については、Surveyor HPLCシステム(Thermo Electron Corporation, Waltham, Massachusetts, USA)にインタフェースしたFinnigan LCQ Deca質量分析計で実施した。ＨＰＬＣ分析については、２．１×１５０ｍｍのＣ１８逆相カラムで、０．０１％ＴＦＡ／水溶液での０．０１％ＴＦＡ／アセトニトリル溶液の勾配を用いて実施した。質量検出については、選択反応検出モード（ＳＲＭ）で実施した。

同一の内部標準を用いて、ブランクのカニクイザル血漿分析物の較正曲線に対して定量化を行った。データ解析と薬物動態学的パラメータの抽出は、PK Solution 2.0プログラム(Summit Research Services, Ashland, Ohio, USA)を使って行った。以下の表Ｖに、化合物（６）をＩＣＲマウスに皮下注射した場合の半減期と、この化合物をカニクイザルに静脈内ボーラス投与した場合の半減期を示す。

０．５６ｍｇ／ｋｇの静脈内ボーラス投与後のカニクイザル血漿中での化合物（３）の持続性を図７に示す。

実施例４７：マウスでの酢酸ライジングアッセイ
この試験では、内臓痛またはｐＨ感受性侵害受容器の活性化に関連する痛みに対して鎮痛活性を呈する化合物を特定する［Barber and Gottschlich (1986) Med. Res. Rev. 12: 525-562；Ramabadran and Bansinath (1986) Pharm. Res. 3: 263-270を参照のこと］。希酢酸溶液を腹腔内投与すると、マウスにライジング挙動が生じる。ライジングとは、前肢の伸びと体の伸びを伴う腹筋の収縮として定義される。被験化合物が存在する場合と存在しない場合とで観察されたライジング数をカウントし、化合物の鎮痛活性を求める。

ライジングアッセイを実施する日ごとに、（被験化合物を注射用量から除外したこと以外は）被験群と同様に処理した溶媒剤対照群のマウス（ｎ＝６〜８）を常に含むようにして、この群における平均総ライジング数を、同じ日に被験化合物を投与した他のすべてのマウスに対する痛みの受容の減少率０％の絶対基準点として利用した。具体的には、被験化合物を投与した各マウスの総ライジング数を、以下の式により痛みの受容の減少率（％）に換算した。

式中、Ｗ_ｖは溶媒剤処理した群での平均ライジング数であり、Ｗ_ｃは化合物処理したマウスでのライジング数である。２パラメータでのヒルの方程式（別名Ｅｍａｘモデル）を用いてデータを分析した。ここで、Ｅｍａｘを１００％抗痛覚（すなわち、酢酸投与後１５分間ライジングが生じない）と仮定する。

体重２３〜３７グラムのオスのＩＣＲマウスの体重を計測し、SANI-CHIPS齧歯類用床敷を底に薄く敷いた個別の観察チャンバ（通常は４０００ｍｌ容のガラスビーカー）に入れた。被験化合物の活性および力価を求めるため、酢酸溶液投与の１５分前または１８０分前に、用量の異なる化合物溶液または溶媒剤を頸背部に皮下注射した。化合物または溶媒対照の投与後、マウスを個々の観察チャンバに戻し、酢酸溶液の腹腔内投与に備えた。１５分後または３時間後、化合物の送達と酢酸注射との間に各実験で規定した時間間隔に従って、０．６％（ｖ／ｖ）酢酸溶液１０ｍｌ／ｋｇに相当する用量を右下腹部に注射した。注射直後、マウスをその観察チャンバに戻し、ライジング数の記録をすみやかに開始した。酢酸注射の時点から開始して１５分間にわたってライジング数をカウントし、５分間ずつ３回にわけて（０〜５分、５〜１０分、１０〜１５分）データを集めた。

データをＥＤ_５０とヒル係数で示した。ＥＤ_５０については、平均（ｓｅｍ）の平均±標準誤差（ＥＤ_５０＋／−ｓｅｍ）またはｔスコアを用いる９５％信頼区間（９５％ＣＩ）での幾何平均のいずれかで表す。ヒル係数は、マウスから得た値から算出した算術平均±ｓｅｍとして表したものである。化合物（２）の結果を図８（黒い丸）に示す。

用量応答分析を行うために、式：％ＭＰＥ＝（（試験スコア−溶媒剤−処理スコア）／（０−溶媒剤−処理スコア））×１００を用いて生データを％最大可能性効果（％ＭＰＥ）に換算した。１要因ANOVAと、これに続くダネットの事後検定によって、生データを分析した。線形回帰分析によって、過敏症の５０％減弱（ＥＤ_５０）を引き起こす用量を求めた。化合物については静脈経路で投与した。これらの実験の結果を表ＶＩにまとめておく。

上述したように０．０１、０．０３、０．１、０．３ｍｇ／ｋｇを静脈内投与して、マウスの酢酸ライジングモデルでの化合物（２）の用量応答を生成した。上述の方法を用いて、図９に示すように、０．０１ｍｇ／ｋｇから０．３ｍｇ／ｋｇの用量範囲について、化合物（２）の線形用量応答関係を求めた。

実施例４８：皮下注射後の化合物による鎮静を測定するためのマウスにおける歩行運動の阻害（歩行運動低下アッセイ）
鎮静活性を呈する化合物は、試験チャンバ内のマウスの自然な歩行運動を阻害する。被験化合物の潜在的な鎮静作用を求めるには、被験化合物または溶媒対照の投与後の歩行運動低下の度合いを判断し、この目的で設計された特別な装置(Opto-Varimex Activity Meter)と比較すればよい。各実験の開始時、各々のマウスの体重を計測し、検査をして健康状態が良好であると判断した。被験化合物の活性および力価を求めるため、データ収集を開始する１５分前または１８０分前に、用量の異なる化合物溶液または溶媒剤を皮下注射した。皮下注射はマウスの頸背部に対して行い、注射針が正しく入るように「テント」形につまんだ。注射後、Opto-Varimex Activity Meter装置内のPlexiglasボックス（４３ｃｍ×４３ｃｍ）にマウスを個々に入れた。マウスを装置に入れる前に、SANI-CHIPS齧歯類用床敷をPlexiglasボックスの底に薄く敷き、快適な環境を用意しておいた。続いて、各Opto-Varimex Activity Meter装置の電源を入れ、ATM3 Auto-Track Systemによるデータの取得を開始した。データを処理し、実施例４７のライジングアッセイのデータについて説明したものと同じようにして結果を表した。

実施例４９：合成ペプチドアミド（３）の鎮痛作用対鎮静作用
化合物による酢酸ライジングの阻害は、鎮痛作用（抗侵害受容作用とも呼ばれる）を示す１つの指標である。同様に、化合物を投与することで生じる歩行運動の減少を、その一般的な鎮静作用を示す尺度として利用することができる。

実施例３４にて説明し、図８（黒い丸）に示したように、ＩＲＣマウスでの酢酸ライジングアッセイで求めたＥＤ_５０は、合成ペプチドアミド（３）を皮下送達した場合で５２ｕｇ／ｋｇであった。実施例３５で説明したような歩行運動アッセイの阻害時に求めたＥＤ_５０値は、同一の合成ペプチドアミドを皮下投与した場合で２６８５ｕｇ／ｋｇであった。図８（黒い四角）を参照のこと。鎮静作用に対する鎮痛作用の治療可能比は、鎮静作用を得るのに必要なＥＤ_５０のほうが鎮痛作用を得るのに必要なＥＤ_５０よりも何倍も高い。よって、化合物（３）は、割合が（２６８５／５２）すなわち、５１．６倍になる。よって、化合物（３）の治療可能比は約５２倍である。

実施例５０：脊髄神経結紮（ＳＮＬ）モデル
ＳＮＬモデル(Kim and Chung 1992)を利用して、慢性神経因性疼痛を誘導した。ラットをイソフルランで麻酔し、左Ｌ５横突起を取り出し、Ｌ５とＬ６の脊髄神経を６−０号の絹縫合糸でしっかりと結紮した。体の中は縫合、外側はステープルで創を閉じた。曲げ剛性の異なる（０．４、０．７、１．２、２．０、３．６、５．５、８．５、１５ｇ）８本のSemmes-Weinsteinフィラメント(Stoelting, Wood Dale, IL, USA)を用いて、アップダウン法(Chaplan et al. 1994)で、非侵害性機械的感受性について、ＳＮＬ、ベースライン、受傷後および治療後１４日の値を評価した。孔をあけた金属製のプラットフォームにラットを載せ、最低でも試験前に３０分間かけて周囲の環境に馴化させた。各治療群での各前肢の平均と平均の標準誤差（ＳＥＭ）を求めた。この刺激は通常、有痛性であるとはみなされないため、この試験で傷害によって応答性に有意な増加が認められた場合は、これを機械的異痛の尺度とする。線形回帰分析によって、機械的過敏反応の５０％減弱（ＥＤ_５０）を引き起こす用量を求めた。化合物（２）については静脈経路で投与した。これらの実験の結果を図１０にまとめておく。このモデルで化合物（２）のＥＤ_５０を計算で求めたところ、０．３８ｍｇ／ｋｇであった（０．３１〜０．４５；９５％信頼区間）。

実施例５１：化合物（２）、（３）および（４）で誘導する眼の痛覚消失
眼の痛覚消失を、５容量の被験化合物を試験濃度で５０マイクロリットルずつ生理食塩水に入れたものを、２０分以内に未処理のNew Zealand系アルビノウサギの右眼に点眼することにより評価した。被験化合物を最後に点眼してから１５分後、各ウサギの処理眼に１０ｍｇ／ｍｌカプサイシン（３３ｍＭ）３０マイクロリットルを単回点眼投与した。カプサイシンは、角膜痛を誘導することが知られている。透明定規を利用して、処理眼と未処理眼についてミリメートル単位で測定される眼裂を測定することで、角膜痛を評価した。この動物モデルでは、カプサイシン点眼後の眼裂の大きさの減少が、眼の痛みの度合いを示す指標となる。よって、被験化合物での処理後に眼裂の大きさの回復（増大）が観察された場合は、これをカプサイシンによる眼の痛みが軽減されている尺度とする。

これらの評価については、被験化合物での処理前（試験前）、カプサイシンの点眼直前、カプサイシンの点眼１分後、５分後、１０分後、１５分後、２０分後、２５分後、３０分後、４０分後、５０分後、６０分後に実施した。本発明のκオピオイドアゴニストを事前に点眼したウサギへのカプサイシン点眼後ならびに、局所麻酔作用下で標準濃度のジルチアゼムすなわちベンゾジアゼピン系カルシウムチャネルブロッカーを事前点眼した後、１０〜３０分の時間について平均した（制御率(percent of control)として表される未処理の眼に対する）眼裂測定値の平均を表ＶＩＩに示す。Gonzalez et al., (1993) Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 34: 3329-3335を参照のこと。

実施例５２：カプサイシンで誘導する眼の痛みにおける化合物（２）の用量反応
未処理のNew Zealand系アルビノウサギの右眼に何通りかの濃度で点眼した化合物（２）で誘導した眼の痛覚消失を、上述したようにして評価した。全身活性対照としてのモルヒネ（非選択的オピオイドアゴニスト）１０ｍｇ／ｍｌで誘導した痛覚消失ならびに、同一実験にて同一条件下での外用活性対照としての１０ｍＭのジルチアゼムと、結果を比較した。以下の表ＶＩＩＩに累積結果を示す。

実施例５３：ラット膵炎モデルにおける化合物（２）の作用
１００％エタノールに溶解させた二塩化ジブチルスズ(DBTC, Aldrich Milwaukee, WI)を用量８ｍｇ／ｋｇでイソフルランを麻酔下（２〜３リットル／分、麻酔されるまでは４％／ｖｏｌ、続いて最後まで２．５％／ｖｏｌにてラットに静脈内投与して、慢性の膵臓炎症を誘導した。対照動物には、同一容量の溶媒剤（１００％エタノール）を単独で投与した。較正したvon Freyフィラメント（４ｇ）を用いて、ラット腹部への圧刺激に対する腹部の感受性を判断して、膵炎の痛みを評価した。吊した金網のケージにラットを入れ、試験前に３０分間馴化させた。腹部の激しい逃避、腹部の部分を舐める、あるいは、全身の逃避で応答を示した。１回の試験でvon Freyフィラメントでの刺激を１０秒ごとに１０回行い、動物が反応をやめて比較的静止した位置に戻れるようにする。各試験での逃避反応が生じる頻度の平均を１０回の印加の反応数で表す。膵臓に炎症のないラットは一般に、von Freyフィラメントでの圧刺激に対する逃避頻度が０〜１である。ＤＢＴＣ投与後、薬理学的操作の前に動物を６日間かけて回復させた。十分な腹部過敏症を示していない動物（すなわち、可能性のある１０匹のうち正の応答が５未満であったラット）を研究から除外した。

（可能性のある１０匹のうち）腹部圧刺激後の正の応答数を各時点で記録した。データについては、対応するそれぞれの時点での各投与群の平均逃避数（±ＳＥＭ）として提示する。用量反応分析を行うために、式：％ＭＰＥ＝（（試験スコア−ＤＢＴＣ後スコア）／（ＤＢＴＣ前スコア−ＤＢＴＣ後スコア））×１００を用いて生データを％最大可能性効果（％ＭＰＥ）に換算した。繰り返し測定する２要因ANOVAで続いて、ボンフェローニ事後検定で生データを分析した。線形回帰分析によって、過敏症の５０％減弱（ＥＤ_５０）を引き起こす用量を求めた。化合物については腹腔内経路で投与した。これらの実験の結果を図１１にまとめておく。このモデルで化合物（２）のＥＤ_５０を計算で求めたところ、０．０３ｍｇ／ｋｇであった（０．００６〜０．１４；９５％信頼区間）。

化合物（２）（１ｍｇ／ｋｇ）の薬効が末梢κオピオイド受容体の活性化によるものであるか否かを判断するために、化合物（２）での処置前に、選択的κオピオイド受容体アンタゴニストであるｎｏｒ−ＢＮＩ（１ｍｇ／ｋｇ）または、血液脳関門を通過しない非選択的オピオイド受容体アンタゴニストであるナロキソンメチオジド（１０ｍｇ／ｋｇ）のいずれかで、８匹のラットからなる群を前処理した。これらの研究の結果を図１２にまとめておく。

実施例５４：マウスにおける掻痒モデル
１０匹（１つの例では１１匹）のオスのSwiss Websterマウス（２５〜３０ｇ）を用いた。各マウスの体重を計測し、矩形の観察箱に別々に入れて少なくとも１時間かけて馴化させた。マウスの尾を温水に３０秒間浸して尾静脈を拡張させ、続いて溶媒剤（生理食塩水）または化合物（２）（遊離塩基０．０１ｍｇ、０．０３ｍｇ、０．１０ｍｇ、０．３０ｍｇ／ｋｇ）を静脈注射した。１５分後、各マウスにＧＮＴＩジヒドロクロライド(Tocris)（０．３０ｍｇ／ｋｇ；０．２５ｍｌ／２５ｇ）または化合物４８／８０(Sigma)（０．１０ｍｌの生理食塩水中、５０μｇ）を首の後ろに皮下投与した。マウスをペアで（場合によっては３匹で）観察し、首を後肢で引っ掻く動きの回数を３０分間数えた。化合物（２）によって生じる引っ掻きの平均阻害率をプロットし、線形回帰分析によって５０％阻害に関連する用量を得た(PharmProTools)。これらの実験の結果を表ＩＸにまとめておく。

本明細書に引用した各米国特許および特許出願公開公報の明細書ならびに、参考文献の本文について、その全体を本明細書に援用する。これらの参考文献のうち、１つまたは複数に記載された定義または説明が、本明細書における対応の定義または説明と矛盾する場合は、本明細書に開示の定義または説明が想定される。

本明細書に記載の例は例示目的のものにすぎず、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本発明の完全な範囲については、当業者であれば自明であろう。

Claims

式

（式中、
Ｘａａ_１は、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、（Ａ）（Ａ’）（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｉｃ、Ｄ−ｔｅｒｔ−ロイシン、Ｄ−ネオペンチルグリシン、Ｄ−フェニルグリシン、Ｄ−ホモフェニルアラニンおよびβ−（Ｅ）Ｄ−Ａｌａからなる群から選択され、各（Ａ）および各（Ａ’）は、−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＮＯ_２、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＮおよび−ＣＯＮＨ_２からなる群から独立に選択されるフェニル環置換基であり、各（Ｅ）は、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル、チエニルおよびチアゾリルからなる群から独立に選択され、
Ｘａａ_２は、（Ａ）（Ａ’）Ｄ−Ｐｈｅ、３，４−ジクロロ−Ｄ−Ｐｈｅ、（Ａ）（Ａ’）（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｐｈｅ、Ｄ−１Ｎａｌ、Ｄ−２Ｎａｌ、Ｄ−Ｔｙｒ、（Ｅ）Ｄ−ＡｌａおよびＤ−Ｔｒｐからなる群から選択され、
Ｘａａ_３は、Ｄ−Ｎｌｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、（Ｅ）Ｄ−Ａｌａ、Ｄ−Ｌｅｕ、（α−Ｍｅ）Ｄ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｈｌｅ、Ｄ−ＶａｌおよびＤ−Ｍｅｔからなる群から選択され、
Ｘａａ_４は、（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｎａｒ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｈａｒ、ζ−（Ｂ）Ｄ−Ｈｌｙｓ、Ｄ−Ｄａｐ、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ａｍｆ、アミジノ−Ｄ−Ａｍｆ、γ−（Ｂ）_２Ｄ−Ｄｂｕ、δ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎ、Ｄ−２−アミノ−３（４−ピペリジル）プロピオン酸、Ｄ−２−アミノ−３（２−アミノピロリジル）プロピオン酸、Ｄ−α−アミノ−β−アミジノプロピオン酸、α−アミノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α，４−ジアミノシクロヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α，４−ジアミノシクロヘキサン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−メチルアミノシクロ−ヘキサン酢酸、ｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−メチルアミノシクロヘキサン酢酸、α−アミノ−１−アミジノ−４−ピペリジン酢酸、ｃｉｓ−α−アミノ−４−グアニジノシクロヘキサン酢酸およびｔｒａｎｓ−α−アミノ−４−グアニジノシクロヘキサン酢酸からなる群から選択され、各（Ｂ）は、ＨおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群から独立に選択され、（Ｂ’）は、Ｈまたは（α−Ｍｅ）であり、
Ｗは、
ヌル（ただし、Ｗがヌルである場合、ＹはＮである）、
ｂが０、１、２、３、４、５または６である−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｂ−、および
ｃが２または３である−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｃ−Ｏ−（ただし、ＹはＣである）
からなる群から選択され、
部分

は、置換されていてもよい４から８員環の複素環部分であり、式中、前記環部分の環ヘテロ原子はいずれもＮであり、式中、ＹおよびＺは各々独立に、ＣまたはＮであり、ただし、当該環部分が、６員環、７員環または８員環である場合、ＹとＺとは少なくとも２個の環原子で隔てられ、ただし、当該環部分がＮである単一の環ヘテロ原子を有する場合、当該環部分は非芳香族であり、
ＶはＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、ｅは０または１であり、式中、ｅが０である場合、Ｖはヌルであり、Ｒ_１およびＲ_２は、同一または異なる環原子に直接に結合され、
（ｉ）Ｒ_１が、−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、アミジノ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、アリール、置換されていてもよいヘテロシクリル、Ｐｒｏ−アミド、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＲ’、−ＳＯ_２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＨＣＯＲ’、ＯＲ’およびＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’からなる群から選択され、前記置換されていてもよいヘテロシクリルは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨおよびアミジノからなる群から独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよく、式中、Ｒ’およびＲ’’は各々独立に、−Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル、アリールまたはヘテロシクリルであるか、Ｒ’とＲ’’の組み合わせで、４員環から８員環の環を形成し、この環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、−Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨおよびアミジノからなる群から独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよく、Ｒ_２は、−Ｈ、アミジノ、単一または二重のＣ_１〜Ｃ_６アルキル置換アミジノ、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＨＣＯＲ’、−ＳＯ_２ＮＲ’Ｒ’’および−ＣＯＯＨからなる群から選択されるか、
（ｉｉ）Ｒ_１およびＲ_２が一緒になって、Ｙ・Ｚ含有環部分の単一の環原子に結合された、置換されていてもよい４員環から９員環の複素単環式または二環式の環部分を形成可能であるか、
（ｉｉｉ）Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の単一の環原子と一緒になって、置換されていてもよい４員環から８員環の複素環部分を形成してスピロ構造を形成可能であるか、
（ｉｖ）Ｒ_１およびＲ_２が、Ｙ・Ｚ含有環部分の２個またはそれよりも多くの隣接する環原子と一緒になって、Ｙ・Ｚ含有環部分に融合された、置換されていてもよい４員環から９員環の複素単環式または二環式の環部分を形成可能であり、
式中、Ｒ_１およびＲ_２を含む、前記置換されていてもよい４員環、５員環、６員環、７員環、８員環および９員環の複素環部分は各々、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ、置換されていてもよいフェニル、オキソ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｆ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨおよびアミジノからなる群から独立に選択される置換基で単一置換または二重置換されていてもよく、
ただし、Ｙ・Ｚ含有環部分が単一の環ヘテロ原子を有する６員環または７員環であり、かつ、ｅが０である場合、Ｒ_１は−ＯＨではなく、Ｒ_１およびＲ_２はともに−Ｈであることはなく、
ただし、Ｙ・Ｚ含有環部分が２個の環ヘテロ原子を有する６員環であり、ＹおよびＺがともにＮであり、Ｗがヌルである場合、−（Ｖ）_ｅＲ_１Ｒ_２はＺ以外の環原子に結合され、ｅが０であれば、Ｒ_１およびＲ_２はともに−Ｈであることはなく、
最後に、ただし、Ｘａａ_３がＤ−Ｎｌｅである場合、Ｘａａ_４は（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇではなく、Ｘａａ_３がＤ−Ｌｅｕまたは（αＭｅ）Ｄ−Ｌｅｕである場合、Ｘａａ_４はδ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎではない）
で表される合成ペプチドアミドあるいは、その立体異性体、立体異性体混合物、薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、酸性塩水和物またはＮ−オキシド。
Ｘａａ_４が、（Ｂ）_２Ｄ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｌｙｓ、（Ｂ）_２Ｄ−Ｈａｒ、ζ−（Ｂ）Ｄ−Ｈｌｙｓ、Ｄ−Ｄａｐ、ε−（Ｂ）Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（Ｂ）_２−Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ａｍｆ、アミジノ−Ｄ−Ａｍｆ、γ−（Ｂ）_２Ｄ−Ｄｂｕおよびδ−（Ｂ）_２α−（Ｂ’）Ｄ−Ｏｒｎからなる群から選択される、請求項１に記載の合成ペプチドアミド。
Ｘａａ_３がＤ−ＮｌｅおよびＤ−Ｌｅｕからなる群から選択される、請求項１または２に記載の合成ペプチドアミド。
Ｘａａ_３がＤ−Ｌｅｕであり、Ｘａａ_４が、Ｄ−Ａｒｇ、Ｄ−Ｎａｒ、Ｄ−Ｈａｒ、Ｄ−Ｌｙｓ、ε−（イソプロピル）−Ｄ−Ｌｙｓおよびε−（メチル）−Ｄ−Ｌｙｓからなる群から選択される、請求項３に記載の合成ペプチドアミド。
Ｘａａ_１−Ｘａａ_２がＤ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の合成ペプチドアミド。
Ｗがヌルである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の合成ペプチドアミド。
ＹがＮであり、ＺがＣである、請求項６に記載の合成ペプチドアミド。
Ｙ・Ｚ含有環部分が、単一の環ヘテロ原子を含む６員環の飽和環である、請求項７に記載の合成ペプチドアミド。
ＹおよびＺがともにＮであり、Ｙ・Ｚ含有環部分の唯一の環ヘテロ原子である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の合成ペプチドアミド。
ｅが０である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の合成ペプチドアミド。
Ｒ_１およびＲ_２が同一の環原子に結合される、請求項１０に記載の合成ペプチドアミド。
Ｒ_１が、−Ｈ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル、アミジノ、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル置換アミジノ、ジヒドロイミダゾール、Ｄ−Ｐｒｏ、Ｄ−ＰｒｏアミドまたはＣＯＮＨ_２であり、Ｒ_２が、Ｈ、−ＣＯＯＨまたはＣ_１〜Ｃ_３アルキルである、請求項１０または１１に記載の合成ペプチドアミド。
部分

が、

からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の合成ペプチドアミド。
化合物（２）

Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｙｓ−［ω（４−アミノピペリジン−４−カルボン酸）］−ＯＨ
の構造を有する、請求項１に記載の合成ペプチドアミド。
有効量の請求項１〜１４のいずれか一項に記載の合成ペプチドアミドと、薬学的に許容される賦形剤または担体とを含む、医薬組成物。
哺乳類における、κオピオイド受容体関連疾患または症状の治療または予防のための薬剤の製造のための、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の合成ペプチドアミドの使用。
κオピオイド受容体関連症状が、痛み、炎症、掻痒症、浮腫、低ナトリウム血症、低カリウム血症、腸閉塞、咳および緑内障からなる群から選択される、請求項１６に記載の使用。
痛みが、神経因性疼痛、体性痛、内臓痛および皮膚痛からなる群から選択される、請求項１７に記載の使用。
痛みが、関節痛、腎臓結石痛、子宮痙攣、月経困難症、子宮内膜症、消化不良、手術後の痛み、医療処置後の痛み、眼の痛み、耳の痛み、癌の突出痛およびＧＩ機能障害に関連した痛みからなる群から選択される、請求項１７に記載の使用。
手術が、骨盤腹腔鏡手術、卵管結紮、子宮摘出および胆嚢摘出である、請求項１９に記載の使用。