JP6532063B2 - 細胞処理装置 - Google Patents

細胞処理装置 Download PDF

Info

Publication number
JP6532063B2
JP6532063B2 JP2017024511A JP2017024511A JP6532063B2 JP 6532063 B2 JP6532063 B2 JP 6532063B2 JP 2017024511 A JP2017024511 A JP 2017024511A JP 2017024511 A JP2017024511 A JP 2017024511A JP 6532063 B2 JP6532063 B2 JP 6532063B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
cell processing
unit
imaging
laser
processing chamber
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2017024511A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2018130038A (ja
Inventor
松本　潤一
潤一 松本
典弘 山岸
典弘 山岸
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kataoka Corp
Original Assignee
Kataoka Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kataoka Corp filed Critical Kataoka Corp
Priority to JP2017024511A priority Critical patent/JP6532063B2/ja
Priority to PCT/JP2017/033963 priority patent/WO2018146854A1/ja
Priority to CN201780086319.2A priority patent/CN110291186B/zh
Priority to US16/485,356 priority patent/US11499129B2/en
Priority to EP17896293.2A priority patent/EP3575390A4/en
Publication of JP2018130038A publication Critical patent/JP2018130038A/ja
Priority to JP2019090413A priority patent/JP6927595B2/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP6532063B2 publication Critical patent/JP6532063B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N13/00—Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/34—Internal compartments or partitions
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/48—Holding appliances; Racks; Supports
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/24—Recirculation of gas
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M31/00—Means for providing, directing, scattering or concentrating light
    • C12M31/10—Means for providing, directing, scattering or concentrating light by light emitting elements located inside the reactor, e.g. LED or OLED
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M39/00—Means for cleaning the apparatus or avoiding unwanted deposits of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M45/00—Means for pre-treatment of biological substances
    • C12M45/07—Means for pre-treatment of biological substances by electrical or electromagnetic forces
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/04—Closures and closing means
    • B01L2300/041—Connecting closures to device or container
    • B01L2300/043—Hinged closures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0627—Sensor or part of a sensor is integrated
    • B01L2300/0663—Whole sensors

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Electromagnetism (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)

Description

本発明は、細胞処理装置に関する。
近年、ｉＰＳ細胞（induced pluripotent stem cells）およびＥＳ細胞（embryonic stem cells）等の多能性細胞から目的の細胞、組織等を分化し、再生医療や創薬に利用することが試みられている。
前記多能性細胞の維持において、増殖した多能性細胞の一部が他の細胞に分化する場合がある。また、多能性細胞から、目的の細胞等への分化において、分化細胞の一部が、目的としていない細胞に分化する場合がある。
このような場合、目的の細胞以外の細胞等の除去または目的の細胞の取得は、人手で現在実施されている。しかしながら、この除去操作または取得操作は、例えば、顕微鏡下での実施が必要等の手間がかかる上に、作業者の技術レベルにより得られる細胞等の品質は大きく異なるという問題がある（特許文献１）。
特表２０１４−５０９１９２号公報
そこで、本発明は、細胞培養容器内の細胞を処理可能な細胞処理装置を提供することを目的とする。
前記目的を達成するために、本発明の細胞処理装置は、細胞処理装置であって、
第１領域、第２領域および第３領域を含み、
前記第１領域および前記第２領域は、連続して配置され、
前記第１領域は、細胞を処理する細胞処理室であり、
前記細胞処理室は、前記細胞処理室外から閉鎖可能であり、かつ細胞培養容器を配置する培養容器配置部を含み、
前記第２領域は、前記培養容器配置部に配置された細胞培養容器に対し、レーザを照射可能なレーザ照射手段を含み、
前記第３領域は、前記細胞処理装置内の少なくとも一つの手段を制御する制御部および前記細胞処理装置内の少なくとも一つの手段に電力を供給する電源供給部を含み、
前記培養容器配置部は、前記細胞処理室において、前記第２領域と隣接するように配置され、
前記培養容器配置部における前記第２領域との隣接部は、透光可能であることを特徴とする。
本発明の細胞処理装置によれば、細胞培養容器内の細胞を処理できる。
図１は、実施形態１における細胞処理装置の一例を示す斜視図である。 図２は、実施形態１の細胞処理装置における第１領域の一例を示す斜視図である。 図３は、図１におけるＩ−Ｉ方向からみた前記第１領域の断面図である。 図４において、（ａ）は、実施形態１の細胞処理装置における培養容器配置部の一例を示す分解斜視図であり、（ｂ）は、図４（ａ）におけるIII-III方向からみた断面図である。 図５は、実施形態１の細胞処理装置において、前記第１領域の外壁を外した場合の前記第１領域および循環手段の一例を示す斜視図である。 図６は、図１におけるII-II方向からみた前記第１領域の上部および前記循環手段の断面図である。 図７において、（ａ）は、実施形態１の細胞処理装置の第２領域の構成の一例を示す斜視図であり、（ｂ）は、前記第２領域の構成の他の例を示す斜視図である。 図８は、実施形態１の細胞処理装置の制御部の構成の一例を示すブロック図である。 図９は、実施形態１の細胞処理装置の他の例を示す斜視図である。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、開口部と、前記開口部を開閉可能な扉を含む。前記扉は、例えば、非透光性である。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、前記細胞処理室内で細胞処理に関連する作業を行なうための作業用の開口部および前記細胞処理室のメンテナンスが可能な開口部を含み、
前記作業用の開口部と、前記メンテナンスが可能な開口部とは、前記細胞処理室において、異なる場所に配置されている。
本発明の細胞処理装置において、前記作業用の開口部の開口面積は、例えば、前記メンテナンスが可能な開口部の開口面積より小さい。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、さらに、前記細胞処理室内を殺菌可能な殺菌手段を含み、
前記殺菌手段は、前記細胞処理室において、前記作業用の開口部側に配置されている。
本発明の細胞処理装置は、例えば、さらに、前記細胞処理室内の気体を循環させる循環手段を含み、
前記循環手段は、
前記細胞処理室内の気体を吸気する吸気部と、
前記吸気した気体の一部を前記細胞処理室内に供給する気体供給部と、
前記吸気した気体の残部を前記細胞処理室外に排気する排気部とを含む。
本発明の細胞処理装置において、前記排気部は、例えば、前記細胞処理装置の最上部に配置される。
本発明の細胞処理装置は、前記開口部を有する細胞処理装置において、
前記吸気部が、例えば、前記細胞処理室の前記開口部近傍に配置されている。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、外壁と内壁とを含み、
前記外壁と前記内壁との間に、前記吸気部と前記気体供給部および前記排気部とを接続する循環流路が配置される。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、さらに、前記細胞処理室内に投光可能な照明手段を含む。
本発明の細胞処理装置は、例えば、前記細胞処理室と前記第２領域との間において、気体の移動が抑制されている。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、さらに、吸引吐出手段および前記吸引吐出手段を移動させる吸引吐出移動手段を含み、
前記制御部は、前記吸引吐出手段による吸引吐出および前記吸引吐出移動手段による前記吸引吐出手段の移動を制御する吸引吐出制御部を含む。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、前記吸引吐出手段により吸引した吸引液を排液する排液容器を配置可能な排液容器配置部を含み、
前記細胞培養容器の配置面に対し略平行な平面における、前記吸引吐出移動手段の移動方向にそって、前記培養容器配置部および前記排液容器配置部が配置されている。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、
前記吸引吐出手段に着脱可能な先端部材が収容された先端部材収容容器を配置可能な収容容器配置部と、
前記先端部材を前記吸引吐出手段から脱離させる先端部材脱離手段とを含む。
本発明の細胞処理装置において、前記細胞処理室は、例えば、前記細胞処理室内を撮像可能な第１の撮像手段を含み、
前記制御部は、前記第１の撮像手段による前記細胞処理室内の撮像を制御する第１の撮像制御部を含む。
本発明の細胞処理装置において、前記第２領域は、例えば、前記培養容器配置部に配置された細胞培養容器内の細胞を撮像可能な第２の撮像手段を含み、
前記制御部は、前記第２の撮像手段による細胞の撮像を制御する第２の撮像制御部を含み、
前記第２の撮像手段は、複数の倍率で撮像可能である。
本発明の細胞処理装置において、前記レーザ照射手段は、例えば、レーザ光源およびレーザ出射部を含み、
前記レーザ光源は、前記第２領域において、他の手段が配置された領域以外の領域に配置される。
本発明の細胞処理装置において、前記第２領域は、例えば、
前記培養容器配置部に配置された細胞培養容器内の細胞を撮像可能な第２の撮像手段と、
前記レーザ照射手段を移動させるレーザ移動手段と、
前記第２の撮像手段を移動させる第２の撮像移動手段とを含み、
前記制御部は、
前記レーザ照射手段によるレーザ照射および前記レーザ移動手段による前記レーザ照射手段の移動を制御するレーザ制御部と、
前記第２の撮像手段による細胞の撮像および前記第２の撮像移動手段による前記第２の撮像手段の移動を制御する第２の撮像制御部を含み、
前記レーザ移動手段は、前記培養容器配置部の配置面に対し略平行な平面において、第１方向に前記レーザ照射手段を移動可能であり、
前記第２の撮像移動手段は、前記培養容器配置部の配置面に対し略平行な平面において、第１方向に前記第２の撮像手段を移動可能であり、
前記レーザ移動手段による前記レーザ照射手段の第１方向の移動と、前記第２の撮像移動手段による前記第２の撮像手段の第１方向の移動とが、同一直線上の移動である。
本発明の細胞処理装置において、前記レーザ移動手段は、例えば、前記レーザ照射手段を配置する台車および前記台車が移動し、かつ前記第１方向にそって配置された移動路を含み、
前記第２の撮像移動手段は、前記第２の撮像手段を配置する台車および前記台車が移動し、かつ前記第１方向にそって配置された移動路を含み、
前記レーザ移動手段の移動路と、前記第２の撮像移動手段の移動路は、同じである。
本発明の細胞処理装置において、前記レーザ移動手段は、例えば、さらに、前記培養容器配置部の配置面の略直交方向に前記レーザ照射手段を移動可能である。
本発明の細胞処理装置において、前記レーザ移動手段は、例えば、前記培養容器配置部の配置面に略平行な平面において、前記第１方向の略直交方向である第２方向に、前記レーザ照射手段を移動可能である。
本発明の細胞処理装置において、前記培養容器配置部の底面は、例えば、前記細胞培養容器を配置する凹部を含み、
前記凹部は、前記第２領域端側において、前記凹部の内側方向に突出する突出部を含み、
前記凹部の側面は、前記細胞処理室の内部から前記細胞処理室の外部方向に向かって狭まる逆テーパ状である。
本発明において、処理対象の細胞は、特に制限されず、細胞、細胞から構成される細胞塊、組織、臓器等でもよい。前記細胞は、例えば、培養細胞でもよいし、生体から単離した細胞でもよい。また、前記細胞塊、組織または臓器は、例えば、前記細胞から作製した細胞塊、組織または臓器でもよいし、生体から単離した細胞塊、組織または臓器でもよい。本発明の細胞処理装置は、例えば、前記細胞に代えて、細菌、真菌等の菌類を処理してもよい。この場合、本発明の細胞処理装置は、例えば、菌類処理装置ということもできる。
以下、本発明の細胞処理装置について、図面を参照して詳細に説明する。ただし、本発明は、以下の説明に限定されない。なお、以下の図１〜図９において、同一部分には、同一符号を付し、その説明を省略する場合がある。また、図面においては、説明の便宜上、各部の構造は適宜簡略化して示す場合があり、各部の寸法比等は、実際とは異なり、模式的に示す場合がある。
（実施形態１）
本実施形態は、細胞処理装置の一例である。図１〜図９に、本実施形態の細胞処理装置の構成の一例を示す。図１は、本実施形態の細胞処理装置の構成の一例を示す斜視図であり、図２は、本実施形態の細胞処理装置の第１領域の構成の一例を示す斜視図であり、図３は、図１におけるＩ−Ｉ方向からみた前記第１領域の断面図であり、図４において、（ａ）は、本実施形態の細胞処理装置における培養容器配置部の一例を示す分解斜視図であり、（ｂ）は、図４（ａ）におけるIII-III方向からみた断面図であり、図５は、前記第１領域の外壁を外した場合における前記第１領域および循環手段の斜視図であり、図６は、図１におけるII-II方向からみた前記第１領域の上部および前記循環手段の断面図であり、図７において、（ａ）は、本実施形態の細胞処理装置の第２領域の構成の一例を示す斜視図であり、（ｂ）は、前記第２領域の構成の他の例を示す斜視図であり、図８は、本実施形態の細胞処理装置における制御部の一例を示すブロック図であり、図９は、本実施形態の細胞処理装置の構成の他の例を示す斜視図である。
図１に示すように、本実施形態の細胞処理装置１００は、第１領域１と、第２領域３と、第３領域５と、循環手段７とを含み、第１領域１と、第２領域３と、第３領域５とが、この順番で上から下方向に連続して配置されている。本実施形態の細胞処理装置１００は、循環手段７を含むが、循環手段７は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。また、第１領域１、第２領域３および第３領域５の位置関係は、第１領域１と第２領域３とが連続（隣接）して配置されていればよく、第３領域５は、任意の位置に配置できる。第３領域５は、例えば、図９に示すように、第１領域１と第２領域３とは別個に配置してもよい。図９に示すように、第３領域５が、第１領域１および第２領域３と別個に配置されている場合、細胞処理装置１００は、例えば、細胞処理システムということもできる。前記細胞処理システムは、例えば、卓上型のシステムとしてもよい。第１領域１は、第２領域３の上部に配置されていることが好ましい。細胞培養容器１８４の上部から後述するレーザ照射手段３３によりレーザを照射する場合、レーザ照射手段３３の焦点位置を安定化させるために、細胞培養容器１８４内の培地内に、レーザ出射部３３２の出射口を配置する必要がある。しかしながら、この状態でレーザ照射を行なうと、前記培地の成分が、レーザ出射部３３２の出射口に固着する、焼き付く等の問題が生じ、レーザ出射部３３２の出射口に汚れが生じる。このため、本実施形態の細胞処理装置１００のように配置することで、例えば、後述するレーザ照射手段３３で、細胞培養容器１８４内の細胞を培養する際に、レーザ照射手段３３のレーザ出射口の汚れを抑制できる。したがって、本発明の細胞処理装置１００によれば、例えば、レーザ照射手段３３から出射されるレーザの出力を安定化することができ、効率よく細胞を処理できる。各領域の形成材料は、特に制限されず、例えば、ステンレス板、防錆処理された鉄板、真空成型、射出成型、圧空成型等による成型が可能な樹脂板等があげられる。各領域の形成材料は、後述する第２の撮像手段により、細胞培養容器１８４内の細胞をより明確に撮像できることから、非透光性の材料であることが好ましい。前記「非透光性」は、例えば、前記第２の撮像手段による撮像に影響を与える波長の光の透過を抑制することを意味する。前記第２の撮像手段が蛍光顕微鏡の場合、前記光の波長は、例えば、検出する蛍光に対応する波長があげられる。具体例として、前記非透光性の材料は、例えば、前述の各領域の形成材料等があげられる。各領域の大きさおよび形状は、特に制限されず、各領域内に配置する部材（手段）の大きさおよび形状に応じて適宜設定できる。本実施形態の細胞処理装置１００において、第１領域１と第２領域３とは、別個の筐体で構成し、第１領域１を構成する筐体および第２領域３を構成する筐体を隣接して配置しているが、これに限定されず、第１領域１と第２領域３とを１つの筐体で構成し、１つの筐体内で、第１領域１と第２領域３とを区分けすることで構成してもよい。本実施形態の細胞処理装置１００は、第１領域１および第２領域３を別個の筐体で構成することにより、例えば、細胞処理装置１００内の各部材のメンテナンスを容易に実施でき、また、細胞処理装置１００の組み立てが容易となる。
第１領域１は、その前面（図１において手前側）に作業用の開口部１１ａを含み、またその側面にメンテナンスが可能な開口部１１ｂを含む。開口部１１ａは、第１領域１内の細胞処理室内で細胞処理に関連する作業を行なうための開口部である。開口部１１ｂは、前記細胞処理室のメンテナンスが可能な開口部である。開口部１１ａの開口面積は、例えば、メンテナンス作業が容易になることから、開口部１１ｂの開口面積より小さいことが好ましい。開口部１１ａならびに開口部１１ｂの大きさおよび数は、特に制限されず、例えば、安全キャビネットにおける作業用の開口部およびメンテナンスが可能な開口部の大きさおよび数を参照できる。具体例として、開口部１１ａならびに開口部１１ｂの大きさおよび数は、例えば、ＥＮ規格であるＥＮ１２４６９：２０００で特定される安全キャビネットの規格を参照できる。開口部１１ｂの数は、特に制限されず、任意の数とできるが、例えば、メンテナンスがより容易となることから、２以上が好ましい。第１領域１における開口部１１ａおよび開口部１１ｂの配置箇所は、特に制限されず、任意の場所とできるが、開口部１１ａと開口部１１ｂとは、第１領域１の異なる場所（例えば、異なる側面）に配置することが好ましい。本実施形態において、開口部１１ｂは、細胞処理装置１００内のメンテナンスを容易に行うことを主目的としたが、他の目的でも使用してもよい。本実施形態の細胞処理装置１００は、例えば、開口部１１ｂから内部の各部材の動き等を観察可能とすることで、細胞処理装置１００にトラブルが発生した場合に不具合箇所を直接観察でき、対応策を検討することができる。
第１領域１の前面の壁は、外壁および内壁を有する二重壁となっており、扉１２ａは、前記外壁と前記内壁との間の空間に配置されたレールを昇降することにより、開口部１１ａの開口を開閉する。開口部１１ｂは、その開口を、前記開口を覆う扉１２ｂの着脱により開閉可能である。開口部１１ｂは、例えば、前記細胞処理室内で細胞の処理を行なう際に、その開口が扉１２ｂに封止されていることが好ましい。これにより、例えば、細胞処理装置１００外の気体およびそれに含まれる埃の前記細胞処理室内への流入を防止できる。本実施形態の細胞処理装置１００において、開口部１１ａおよびその扉１２ａ、ならびに開口部１１ｂおよびその扉１２ｂは、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよいし、いずれかの開口部およびその扉のみを含んでもよい。また、第１領域１の壁は、二重壁でもよいし、一重壁でもよいが、他の部材を内部に配置することで、細胞処理装置１００の大きさを小さくできることから前者が好ましい。また、第１領域１の壁が一重壁の場合、扉１２ａは、例えば、扉１２ｂのように第１領域１の外部に配置される。前記扉の開閉の形式は、特に制限されず、例えば、扉１２ａのように昇降式でもよいし、扉１２ｂのように外付け式でもよいし、その他の形式でもよい。前記その他の形式は、例えば、観音開き式、アコーディオン式、引き扉式等があげられる。前記扉の形成材料は、特に制限されず、例えば、前述の各領域の形成材料を援用でき、非透光性の材料が好ましい。
図２に示すように、本実施形態の細胞処理装置１００の第１領域１の内部は、細胞を処理する細胞処理室であり、扉１２ａ、１２ｂを閉めることにより閉鎖可能である、すなわち開閉可能である。前記細胞処理室は、吸引吐出移動手段であるＸＹステージ１３ａおよびアーム１３ｂと、吸引吐出手段１４と、光源１５と、排液容器配置部１６ａと、収容容器配置部１７ａと、培養容器配置部１８と、回収容器配置部１９ａとを含む。本実施形態において、前記細胞処理室は、ＸＹステージ１３ａ、アーム１３ｂ、吸引吐出手段１４、光源１５、排液容器配置部１６ａ、収容容器配置部１７ａ、および回収容器配置部１９ａを含むが、いずれも任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよく、また、いずれか１つを含んでもよいし、２つ以上を含んでもよい。ＸＹステージ１３ａは、前記細胞処理室の底面に配置されており、矢印Ｘ方向および矢印Ｙ方向に移動可能なように配置されている。ＸＹステージ１３ａの上部には、一対のアームを含むアーム１３ｂが配置されている。アーム１３ｂの一方のアーム先端部分には、吸引吐出手段１４が、その吸引吐出口を下方向に向けて配置されている。また、アーム１３ｂの他方のアーム先端部分には、光源１５が、下方向に光を投光（照射）可能なように配置されている。排液容器配置部１６ａ、収容容器配置部１７ａ、培養容器配置部１８、および回収容器配置部１９ａは、前記細胞処理室の底面において、ＸＹステージ１３ａの矢印Ｘ方向の移動方向にそって、この順番で配置されている。排液容器配置部１６ａには、先端部材脱離手段１６ｃを有する排液容器１６ｂが配置され、収容容器配置部１７ａには、収容容器１７ｂが配置され、回収容器配置部１９ａには、回収容器１９ｂが配置されている。
本実施形態の細胞処理装置１００は、吸引吐出移動手段として、ＸＹステージ１３ａおよびアーム１３ｂを設けているが、前記吸引吐出移動手段は、これに限定されず、吸引吐出手段１４を移動可能であればよく、例えば、公知の移動手段が使用できる。前記吸引吐出移動手段の移動方向は、特に制限されず、例えば、１方向（例えば、矢印Ｙ方向）に移動可能でもよいし、２方向（例えば、矢印ＸおよびＹ方向）に移動可能でもよいし、３方向（例えば、矢印Ｘ、ＹおよびＺ方向）に移動可能でもよい。２方向の場合、第１方向が、第２方向と平行でなければよく、好ましくは、前記第１方向が、前記第２方向と略直交または直交する。この場合、前記第１方向および前記第２方向を含む平面は、培養容器配置部１８の配置面に略平行な平面であることが好ましい。また、３方向の場合、第３の方向は、例えば、前記第１方向および前記２方向を含む平面と交差すればよく、好ましくは、前記第１方向および前記２方向を含む平面と略直交または直交する。本実施形態において、ＸＹステージ１３ａは、例えば、リニアモータ台車などを介して、対象物を矢印Ｘ方向および矢印Ｙ方向に沿って高速かつ精密に移動可能な公知のものである。アーム１３ｂは、上下方向（矢印Ｚ方向）に伸縮可能であるが、アーム１３ｂは、固定されていてもよい。後者の場合、前記吸引吐出移動手段は、前記細胞処理室の底面に対して略平行方向な平面上のみにおいて、すなわち、図２において、矢印Ｘおよび矢印Ｙ方向のみに、吸引吐出手段１４を移動可能である。
吸引吐出手段１４は、例えば、細胞培養容器１８４内の培地、細胞等を吸引および吐出する。吸引吐出手段１４は、例えば、その吸引吐出口側に、後述する先端部材を装着して使用する。吸引吐出手段１４は、特に制限されず、例えば、公知の吸引吐出手段が利用でき、具体例として、電動ピペッタ、電動シリンジポンプ等があげられる。
光源１５は、例えば、培養容器配置部１８の上部から培養容器配置部１８に向かって、光を照射する。光源１５は、例えば、後述する第２の撮像手段として、位相差顕微鏡等の光学顕微鏡を使用する際に併用することが好ましい。光源１５が照射する光は、例えば、可視光である。光源１５は、特に制限されず、例えば、キセノン光源、ＬＥＤ（light emitting diode）照明、レーザーダイオード（ＬＤ）等の公知の光源があげられる。本実施形態において、光源１５は、前記吸引吐出移動手段のアーム１３ｂに配置され、吸引吐出手段１４の移動と同期して移動するが、吸引吐出手段１４と非同期して移動してもよい。具体例として、光源１５は、例えば、前記吸引吐出移動手段とは異なる、光源１５を移動可能な光源移動手段に配置されてもよい。この場合、後述する制御部５１は、光源移動手段の移動を制御する光源移動制御手段を含んでもよい。前記光源移動手段の移動方向は、例えば、前記吸引吐出手段の移動方向の説明を援用できる。
排液容器配置部１６ａは、吸引吐出手段１４により吸引した吸引液を排液する排液容器１６ｂを配置可能な領域である。本実施形態において、排液容器配置部１６ａには、排液容器１６ｂが配置されているが、排液容器１６ｂは、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。本実施形態において、排液容器１６ｂは、上部開口の箱であり、収容容器配置部１７ａ側の壁が上方向に伸びており、その上端に、半円状の凹部（切り欠き）として形成されている先端部材脱離手段１６ｃを含む、前記細胞処理室の底面に対して略平行方向な壁（上面）を有する。排液容器１６ｂは、吸引吐出手段１４から脱離した先端部材を回収可能であることから、例えば、先端部材回収容器ということもでき、また、排液容器配置部１６ａは、先端部材回収容器配置部ということもできる。先端部材脱離手段１６ｃは、排液容器１６ｂに形成されているが、別個に配置されてもよい。また、先端部材脱離手段１６ｃは、吸引吐出手段１４の近傍、具体的には、吸引吐出手段１４が配置されている前記吸引吐出移動手段に配置されてもよい。
収容容器配置部１７ａは、吸引吐出手段１４に着脱可能な先端部材が収容された収容容器１７ｂを配置可能な領域である。本実施形態において、収容容器配置部１７ａには、収容容器１７ｂが配置されているが、収容容器１７ｂは、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。前記先端部材は、特に制限されず、吸引吐出手段１４により吸引された液体を内部に貯留可能な部材であればよく、例えば、吸引吐出手段１４がピペッタの場合、チップがあげられる。収容容器１７ｂは、例えば、前記チップが収容されたラックがあげられる。本実施形態の細胞処理装置１００は、先端部材脱離手段１６ｃおよび収容容器配置部１７ａを含むことで、細胞培養容器１８４内の培地、細胞等を吸引および吐出する際の移動を簡素化（短く）できる。
回収容器配置部１９ａは、吸引吐出手段１４により回収した細胞を含む吸引液を回収する回収容器１９ｂを配置可能な領域である。本実施形態において、回収容器配置部１９ａには、回収容器１９ｂが配置されているが、回収容器１９ｂは、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。回収容器１９ｂは、例えば、公知のディッシュ、フラスコ等の培養容器等があげられる。
本実施形態において、前記細胞処理室の底面には、培養容器配置部１８の配置面、すなわち、前記細胞処理室の底面に対して略平行方向な平面において、ＸＹステージ１３ａの長軸方向（矢印Ｘ方向）の移動方向にそって、排液容器配置部１６ａ、収容容器配置部１７ａ、培養容器配置部１８、および回収容器配置部１９ａが、この順番で配置されているが、各配置部は、前記長軸方向にそって配置されていなくてもよく、また、この順序で配置されていなくてもよい。本実施形態において、排液容器配置部１６ａ、収容容器配置部１７ａ、培養容器配置部１８、および回収容器配置部１９ａが、前述の順序で配置されていることにより、例えば、吸引吐出手段１４の移動を直線的にでき、細胞培養容器１８４内の培地、細胞等を吸引および吐出する際の移動を簡素化（短く）できる。
また、図３に示すように、本実施形態の細胞処理装置１００の前記細胞処理室の前面側の壁には、開口部１１ａの上部に、第１のカメラ２０、照明灯２１ａ、２１ｂおよび殺菌灯２２を含む。第１のカメラ２０の矢印Ｘ方向の両側には、照明灯２１ａ、２１ｂが配置されており、また、上部には、殺菌灯２２が配置されている。
本実施形態において、第１の撮像手段として、カメラ２０を設けているが、前記第１の撮像手段は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。また、前記第１の撮像手段は、カメラに限定されず、前記細胞処理室内を撮像可能であればよい。前記第１の撮像手段は、特に制限されず、顕微鏡、カメラ等の公知の撮像手段が使用でき、また公知の撮像手段と、ＣＣＤやＣＭＯＳ（Complementary MOS）等の固体撮像素子（イメージセンサ）とを組合せたものでもよい。本実施形態において、カメラ２０は、前記細胞処理室内の前面の壁に配置されているが、カメラ２０の位置は、特に制限されず、任意の位置とでき、前記細胞処理室内の広い範囲を撮像可能なように配置することが好ましい。具体的には、本実施形態の細胞処理装置１００のように、前記細胞処理室において、培養容器配置部１８の奥側（図２において左上側）に、吸引吐出移動手段であるＸＹステージ１３ａおよびアーム１３ｂと吸引吐出手段１４とが配置されている場合、前記細胞処理室内の広い範囲を撮像可能であることから、前記細胞処理室の手前側（図２において右下側）に配置することが好ましい。前記第１の撮像手段は、複数の倍率（例えば、異なる倍率）で撮像可能なことが好ましいが、１つの倍率で撮像可能であってもよい。前記倍率は、例えば、撮像倍率を意味する。具体例として、カメラ２０は、例えば、複数の倍率（例えば、異なる倍率）のレンズを含む。前記第１の撮像手段は、例えば、光学ズーム、デジタルズーム等が可能であってもよい。本実施形態の細胞処理装置１００はカメラ２０を含むことで、例えば、前記細胞処理室内の作業を確認可能であり、作業の確実性が向上する。前記細胞処理室内に配置される第１の撮像手段の数は、特に制限されず、１つでもよいし、複数でもよい。
本実施形態において、照明手段として、照明灯２１ａ、２１ｂを設けているが、前記照明手段は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。また、前記照明手段は、照明灯に限定されず、前記細胞処理室内に投光（照明）可能あればよい。前記照明手段は、特に制限されず、例えば、蛍光灯、ＬＥＤ灯等の公知の照明が使用できる。本実施形態において、照明灯２１ａ、２１ｂは、前記細胞処理室内の前面の壁に配置されているが、照明灯２１ａ、２１ｂの位置は、特に制限されず、任意の位置とでき、前記細胞処理室内の広い範囲に投光可能、すなわち、前記細胞処理室内に影ができにくいように配置することが好ましい。具体的には、本実施形態の細胞処理装置１００のように、前記細胞処理室において、培養容器配置部１８の奥側（図２において左上側）に、吸引吐出移動手段であるＸＹステージ１３ａおよびアーム１３ｂと吸引吐出手段１４とが配置されている場合、前記細胞処理室内の広い範囲に投光可能であることから、前記細胞処理室の手前側（図２において右下側）に配置することが好ましい。本実施形態の細胞処理装置１００は照明灯２１ａ、２１ｂを含むことで、例えば、前記細胞処理室内の作業を確認可能であり、作業の確実性が向上する。前記細胞処理室内に配置される照明手段の数は、特に制限されず、１つでもよいし、複数でもよい。
本実施形態において、殺菌手段として、殺菌灯２２を設けているが、前記殺菌手段は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。また、前記殺菌手段は、殺菌灯に限定されず、前記細胞処理室内、特に、培養容器配置部１８周囲を殺菌可能あればよい。前記殺菌手段は、特に制限されず、例えば、殺菌灯、紫外ＬＥＤ灯等の公知の殺菌手段が使用できる。本実施形態において、殺菌灯２２は、前記細胞処理室内の前面の壁に配置されているが、殺菌灯２２の位置は、特に制限されず、任意の位置とできる。殺菌灯２２の位置は、例えば、細胞処理装置１００外の埃等は、開口部１１ａ、１１ｂから流入することから、開口部１１ａ、１１ｂ近傍を殺菌可能に配置されていることが好ましい。具体的には、本実施形態の細胞処理装置１００のように、前記細胞処理室の前面側の壁に、開口部１１ａが設けられている場合、前記細胞処理室の前面側の壁において、開口部１１ａの上部に前記殺菌手段を配置することが好ましい。本実施形態の細胞処理装置１００のように、前記細胞処理室の側面側の壁に、開口部１１ｂが設けられている場合、前記細胞処理室の側面側の壁において、開口部１１ｂの上部に前記殺菌手段を配置することが好ましい。また、細胞処理装置１００が前記照明手段および前記殺菌手段を含む場合、両者を前記細胞処理室の同じ壁、例えば、開口部１１ａが設けられている壁に配置することが好ましい。この場合、前記殺菌手段を、前記照明手段の上方に設けることが好ましい。本実施形態の細胞処理装置１００は殺菌灯２２を含むことで、例えば、前記細胞処理室内の清浄性が向上する。前記細胞処理室内に配置される殺菌手段の数は、特に制限されず、１つでもよいし、複数でもよい。
本実施形態の第１領域１において、前記細胞処理室の大きさ、形状、構造等は、例えば、前記安全キャビネットの大きさ、形状、構造等を参照でき、具体例として、前述のＥＮ１２４６９：２０００で特定される安全キャビネットの規格を参照できる。
図４に示すように、本実施形態の細胞処理装置１００の培養容器配置部１８は、上蓋１８１および底部１８２を含み、上蓋１８１は、底部１８２に着脱可能に装着される。本実施形態において、培養容器配置部１８は、上蓋１８１および底部１８２を含む箱であり、その内部に細胞培養容器１８４が配置されているが、培養容器配置部１８は、これに限定されず、細胞培養容器１８４を配置可能であり、前記細胞処理室において第２領域３と隣接するように配置され、かつ培養容器配置部１８における第２領域３との隣接部（図４において、底板１８６）が透光可能であればよい。前記「透光」は、例えば、第２領域３のレーザ照射手段３３から照射されるレーザが透過することを意味する。また、第２領域３が後述する第２の撮像手段を含む場合、前記第２の撮像手段が、底板１８６を介して撮像可能であることを意味する。上蓋１８１は、細胞培養容器１８４に対して、光源１５から光を照射可能なように、透光領域１８３が設けられている。透光領域１８３は、例えば、透明なガラス板、アクリル板等から形成される。底部１８２は、底壁１８５および透光性の底板１８６を含む。透光性の底板１８６は、例えば、透明なガラス板、アクリル板等から形成される。底板１８６は、第２領域３と隣接している。このため、培養容器配置部１８の第２領域３との隣接部、すなわち、底板１８６は、前記細胞処理室の壁の一部を形成しているということもできる。底板１８６と前記細胞処理室の壁との接触部は、例えば、パッキン、シール材等の封止部材で封止されていることが好ましい。これにより、例えば、第２領域３内の気体およびそれに含まれる埃等が培養容器配置部１８および前記細胞処理室に流入することを防止できる。底壁１８５は、４つの細胞培養容器１８４をそれぞれ配置可能な、４つの凹部１８７を含み、各凹部１８７の側面は、前記細胞処理室の内部から前記細胞処理室の外部方向（図４（ｂ）において、上から下方向）に向かって狭まる逆テーパ状である。また、各凹部１８７は、その底板１８６端側において、凹部１８７の内側方向に突出する突出部１８８を含む。細胞培養容器１８４は、その底部端が、突出部１８８と接触する。本実施形態の細胞処理装置１００において、底壁１８５は、４つの凹部１８７を有するが、底壁１８５が有する凹部１８７の数は、これに限定されず、配置する細胞培養容器１８４の数に応じて適宜設定できる。凹部１８７の大きさは、配置する細胞培養容器１８４の大きさに応じて適宜設定できる。本実施形態の培養容器配置部１８は、凹部１８７が上述の構造を有することで、例えば、細胞培養容器１８４の側面の形状によらず、培養容器配置部１８に細胞培養容器１８４を配置可能となる。本実施形態の細胞処理装置１００において、底壁１８５は、その底面の壁と、その側面の壁とが一体形成されているが、底壁１８５は、これに限定されず、それぞれを別部材としてもよい。底壁１８５を別部材で構成することにより、例えば、異なる数および大きさの凹部１８７を有する、複数の底壁１８５の底面の壁の部材を準備しておくことができる。これにより、例えば、細胞培養容器１８４の大きさおよび数に応じて、細胞培養容器１８４の配置に適した大きさおよび数を有する底壁１８５の底面の壁の部材に取替えることができ、細胞培養容器１８４を好適に配置することができる。
細胞培養容器１８４は、特に制限されず、例えば、細胞培養に用いられる公知のディッシュ、フラスコ等の培養容器があげられる。細胞培養容器１８４の形成材料は、特に制限されず、例えば、後述するレーザ照射手段３３により照射されるレーザを透過する材料があげられ、具体例として、レーザを透過するプラスチック、ガラス等があげられる。プラスチックは、例えば、ポリスチレン系ポリマー、アクリル系ポリマー（ポリメタクリル酸メチル（ＰＭＭＡ）等）、ポリビニルピリジン系ポリマー（ポリ（４−ビニルピリジン）、４−ビニルピリジン−スチレン共重合体等）、シリコーン系ポリマー（ポリジメチルシロキサン等）、ポリオレフィン系ポリマー（ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン等）、ポリエステル系ポリマー（ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）等）、ポリカーボネート系ポリマー、エポキシ系ポリマー等があげられる。
細胞培養容器１８４は、例えば、後述するレーザ照射手段３３からレーザが照射される側の面（図４において、下側）に、前記レーザを吸収する色素構造（発色団）を含むポリマー、またはレーザを吸収し酸性物質を発生する光酸発生剤により形成されるレーザ吸収層を含むことが好ましい。前記色素構造および光酸発生剤は、例えば、特許６０３３９８０号公報の説明を援用できる。細胞培養容器１８４は、前記レーザ吸収層を含むことで、例えば、後述するレーザ照射手段３３でレーザを照射した際に、前記レーザのエネルギーを熱、酸等に変換し、前記レーザ吸収層の上部に存在する細胞を死滅、遊離等させることができる。
培養容器配置部１８は、例えば、さらに細胞培養容器１８４の温度を調整する温度調整手段を含んでもよい。前記温度調整手段を含むことにより、細胞培養容器１８４内の細胞を処理する間の培養条件を一定にでき、例えば、細胞処理時の細胞へのダメージを低減できる。前記温度調整手段は、例えば、ヒータ等の加温手段があげられる。
培養容器配置部１８は、例えば、さらに細胞培養容器１８４内の培地のｐＨを調整するｐＨ調整手段を含んでもよい。前記ｐＨ調整手段を含むことにより、細胞培養容器１８４内の細胞を処理する間の培養条件を一定にでき、例えば、細胞処理時の細胞へのダメージを低減できる。前記ｐＨ調整手段としては、例えば、二酸化炭素濃度調整手段等があげられ、具体例として、二酸化炭素ボンベ、細胞処理装置１００外の二酸化炭素供給手段と接続する接続部等があげられる。
図５および６に示すように、本実施形態の細胞処理装置１００において、循環手段７は、吸気部７１と、循環流路７２と、気体供給部７３と、排気部７４とを含む。これにより、循環手段７は、前記細胞処理室内の気体を循環させる。
吸気部７１は、前記細胞処理室内の気体を吸気する。吸気部７１は、前記細胞処理室内の気体に代えて、または加えて細胞処理装置１００外の気体を吸気してもよい。本実施形態において、吸気部７１は、前記細胞処理室の開口部１１ａの近傍（例えば、直下）に配置されている。具体的には、吸気部７１は、その上面に複数の開口（例えば、スリット）が形成されており（図示せず）、前記開口が開口部１１ａと連通するように、開口部１１ａの下側に配置されている。このように、前記細胞処理室の開口部１１ａの近傍に吸気部７１を配置することで、例えば、扉１２ａを開き、作業者が前記細胞処理室内で作業をする際に、細胞処理装置１００外の気体およびそれに含まれる埃等が前記細胞処理室内に流入することを防止できる。吸気部７１は、開口部１１ａに代えて、または加えて開口部１１ｂの近傍に配置されてもよい。吸気部７１は、例えば、ファン等の送風手段により前記細胞処理室内の気体を吸気してもよい。
循環流路７２は、吸気部７１と気体供給部７３および排気部７４とを接続する。本実施形態において、循環流路７２は、前記外壁と前記内壁との間の空間および第１領域１の上部に配置されている。循環流路７２は、例えば、中空の筒である。また、循環流路７２は、その一端が吸気部７１と連通し、その他端が、気体供給部７３および排気部７４と連通している。本実施形態の細胞処理装置１００のように、循環流路７２を、前記外壁と前記内壁との間の空間に配置することで、例えば、細胞処理装置１００の大きさを小さくできる。また、本実施形態において、循環手段７は、循環流路７２を含むが、循環流路７２はあってもよいし、なくてもよい。後者の場合、吸気部７１は、例えば、気体供給部７３および排気部７４と直接的に接続している。循環流路７２は、例えば、ファン等の送風手段により、吸気部７１により吸気された気体を、気体供給部７３および排気部７４に送風してもよい。
循環流路７２が前記送風手段を含む場合、前記送風手段は、吸気部７１、気体供給部７３、または排気部７４の近傍に配置してもよいし、これらの中央部等のその他の位置に配置してもよいが、吸気部７１からの吸気がよくなり、例えば、後述する気体供給部７３により生じるダウンフローと比較して、埃等が前記細胞処理室内に流入することをより効果的に防止できることから、吸気部７１の近傍に配置することが好ましい。前記送風手段が吸気部７１の近傍に配置される場合、前記送風手段は、例えば、第２領域３または第３領域５に配置されることが好ましい。具体例として、本実施形態の細胞処理装置１００において、循環流路７２が、さらに前記送風手段を含む場合、前記送風手段は、第２領域３または第３領域５内において、手前側（図１における左下側）、すなわち、吸気部７１の下側に配置されている。そして、この場合、循環流路７２は、吸気部７１と前記送風手段の吸気側とを接続し、かつ前記送風手段の送風側と気体供給部７３および排気部７４とを接続する。すなわち、循環流路７２は、第２領域３、または第２領域３および第３領域５と、前記外壁と前記内壁との間の空間と、第１領域１の上部とに配置されている。
気体供給部７３は、吸気部７１が吸気した気体の一部を前記細胞処理室内に供給する。本実施形態において、気体供給部７３は、第１領域１の上端と、吸気部７１より吸気した気体を前記細胞処理室内に供給可能なように連通されている。気体供給部７３は、例えば、ファン等の送風手段により気体を前記細胞処理室内に供給してもよい。また、気体供給部７３は、例えば、気体清浄化手段を含んでもよい。この場合、気体供給部７３から前記細胞処理室内に供給される気体は、前記気体清浄化手段を通過する。前記気体清浄化手段を含むことにより、例えば、埃等が前記細胞処理室内に流入することを防止できる。前記気体清浄化手段は、例えば、ＨＥＰＡフィルタ（High Efficiency Particulate Air Filter）、ＵＬＰＡフィルタ（Ultra Low Penetration Air Filter）等の微粒子捕集用フィルタ等があげられる。本実施形態の細胞処理装置１００は、前記細胞処理室の上部において気体供給部７３と接続していることにより、例えば、気体供給部７３からの送風によりダウンフローが生じ、これにより開口部１１ａから埃等が前記細胞処理室内に流入することをより効果的に防止できる。
排気部７４は、吸気部７１が吸気した気体の残部を前記細胞処理室外、具体的には、細胞処理装置１００外に排気する。本実施形態において、排気部７４は、吸気部７１より吸気した気体を細胞処理装置１００の外部に排気可能なように、細胞処理装置１００の上端（最上部）に配置されている。このように排気部７４を細胞処理装置１００の最上部に設けることにより、例えば、細胞処理装置１００の大きさを小さくでき、かつ排気によって舞い上がった埃が、前記細胞処理室内に流入することを防止できる。排気部７４は、例えば、ファン等の送風手段により気体を細胞処理装置１００の外部に排気してもよい。また、排気部７４は、例えば、前記気体清浄化手段を含んでもよい。この場合、排気部７４から細胞処理装置１００外に排出される気体は、前記気体清浄化手段を通過する。前記気体清浄化手段を含むことにより、例えば、前記細胞処理室内で生じた微粒子等の細胞処理装置１００外への流出を防止できる。
本実施形態の循環手段７において、各部の大きさ、形状、構造等は、例えば、前記安全キャビネットの大きさ、形状、構造等を参照でき、具体例として、前述のＥＮ１２４６９：２０００で特定される安全キャビネットの規格を参照できる。
図７（ａ）に示すように、本実施形態の細胞処理装置１００において、第２領域３は、第２のＸＹステージ３１、３種類の異なる倍率の対物レンズ３２１ａ〜ｃを有する顕微鏡３２およびレーザ照射手段３３を含む。本実施形態の細胞処理装置１００は、ＸＹステージ３１および顕微鏡３２を含むが、ＸＹステージ３１および顕微鏡３２は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよく、またいずれか一方を含んでもよい。ＸＹステージ３１は、培養容器配置部１８の配置面、すなわち、前記細胞処理室の底面と略平行な第２領域３の底面に配置されている。ＸＹステージ３１において、矢印Ｙ方向の共通のレール（移動路）上には、２つの矢印Ｘ方向のレールが、前記共通のレール上を移動可能に配置されている。前記２つの矢印Ｘ方向のレール上には、それぞれ、台車３１１ａ、３１１ｂがレールを移動可能なように配置されている。レーザ照射手段３３は、レーザ光源３３１、レーザ出射部３３２および光ファイバ３３３を含む。ＸＹステージ３１の上部には、顕微鏡３２が、その対物レンズ３２１ａ〜ｃを上方向（矢印Ｚ方向）に向けて台車３１１ｂに、また、レーザ照射手段３３のレーザ出射部３３２のレーザ出射口を上方向（矢印Ｚ方向）に向けて、台車３１１ａに配置されている。台車３１１ａは、上下方向（矢印Ｚ方向）に昇降可能である。レーザ光源３３１は、第２領域３において、ＸＹステージ３１の可動範囲と重ならない領域において、第２領域３の底面に配置されている。光ファイバ３３３は、その一端がレーザ光源３３１と、その他端がレーザ出射部３３２と、接続している。
本実施形態の細胞処理装置１００は、レーザ移動手段および第２の撮像移動手段として、ＸＹステージ３１を設けているが、前記レーザ移動手段および前記第２の撮像移動手段は、これに限定されず、それぞれ、レーザ照射手段３３および後述する第２の撮像手段を移動可能であればよく、例えば、公知の移動手段が使用できる。また、本実施形態において、前記レーザ移動手段および前記第２の撮像移動手段は、矢印Ｘ方向（第１方向）のレールを共有しているが、前記レーザ移動手段および前記第２の撮像移動手段は、独立していてもよい。具体例として、図７（ｂ）に示すように、第２領域３の底面に、前記レーザ移動手段は、例えば、ＸＹステージ３１ａとして配置され、前記第２の撮像移動手段は、ＸＹステージ３１ｂとして配置されてもよい。前記レーザ移動手段および前記第２の撮像移動手段の移動方向は、特に制限されず、例えば、１方向（例えば、矢印Ｙ方向）に移動可能でもよいし、２方向（例えば、矢印Ｘおよび矢印Ｙ方向）に移動可能でもよいし、３方向（例えば、矢印Ｘ、ＹおよびＺ方向）に移動可能でもよい。２方向の場合、第１方向が、第２方向と平行でなければよく、好ましくは、前記第１方向が、前記第２方向と略直交または直交する。この場合、前記第１方向および前記第２方向を含む平面は、培養容器配置部１８の配置面に略平行な平面であることが好ましい。また、３方向の場合、第３の方向は、例えば、前記第１方向および前記２方向を含む平面と交差すればよく、好ましくは、前記第１方向および前記２方向を含む平面と略直交または直交する。前記レーザ移動手段が、例えば、培養容器配置部１８の配置面、すなわち、細胞培養容器１８４の底面に対し、略直交方向に、レーザ移動手段３３を移動可能な場合、前記レーザ移動手段は、後述するスポット径を調整可能である。この場合、前記レーザ移動手段は、例えば、後述するスポット径調整手段を兼ねる。本実施形態において、ＸＹステージ３１は、例えば、リニアモータ台車などを介して、対象物を矢印Ｘ方向および矢印Ｙ方向に沿って高速かつ精密に移動可能な公知のものである。
前記レーザ移動手段および前記第２の撮像移動手段は、本実施形態のＸＹステージ３１のように、培養容器配置部１８の配置面に対し略平行な平面において、それぞれ、第１方向（例えば、図７（ａ）における矢印Ｙ方向）に、レーザ照射手段３３および前記第２の撮像手段を移動可能であり、かつ前記レーザ移動手段によるレーザ照射手段３３の第１方向の移動と、前記第２の撮像移動手段による第２の撮像手段の第１方向の移動とが、同一直線上であることが好ましい。このように、同一直線上で、レーザ照射手段３３および前記第２の撮像手段が移動することで、例えば、細胞培養容器１８４内の細胞を前記第２の撮像手段で撮像後、レーザ照射手段３３で処理する等の細胞処理を行なう際に各手段の移動回数を低減でき、処理時間を低減できる。また、本実施形態のＸＹステージ３１のように、前記レーザ移動手段は、レーザ照射手段３３を配置する台車３１１ａおよび台車３１１ａが移動し、かつ前記第１方向にそって配置された移動路（レール）を含み、前記第２の撮像移動手段は、前記第２の撮像手段を配置する台車３１１ｂおよび台車３１１ｂが移動し、かつ前記第１方向にそって配置された移動路（レール）を含み、前記レーザ移動手段の移動路と、前記第２の撮像手段の移動路が同じであることが好ましい。このように構成することにより、前記第２の撮像手段で撮像後、レーザ照射手段３３で処理する等の細胞処理を行なう際に各手段の移動回数をさらに低減でき、処理時間をさらに低減できる。
本実施形態の細胞処理装置１００は、前記第２の撮像手段として、３種類の倍率の対物レンズ３２１ａ〜ｃを有する顕微鏡３２が設けられているが、これに限定されず、培養容器配置部１８に配置された細胞培養容器１８４内の細胞を撮像可能であればよい。前記第２の撮像手段は、特に制限されず、顕微鏡、カメラ等の公知の撮像手段が使用でき、また公知の撮像手段と、ＣＣＤやＣＭＯＳ（Complementary MOS）等の固体撮像素子（イメージセンサ）とを組合せたものでもよい。前記顕微鏡は、例えば、位相差顕微鏡、蛍光顕微鏡等の光学顕微鏡があげられる。前記顕微鏡は、例えば、前記位相差顕微鏡および前記蛍光顕微鏡の両者の機能を有してもよい。前記第２の撮像手段は、例えば、複数の倍率で撮像可能であることが好ましいが、１つの倍率で撮像可能でもよい。具体例として、前記第２の撮像手段が顕微鏡の場合、前記顕微鏡は、複数の倍率（例えば、異なる倍率）の対物レンズを含むことが好ましい。本実施形態において、対物レンズ３２１ａ〜ｃの倍率は、例えば、それぞれ、２倍、４倍および８倍である。前記第２の撮像手段は、例えば、光学ズーム、デジタルズーム等が可能であってもよい。また、本実施形態の細胞処理装置１００のように、前記第１の撮像手段および前記第２の撮像手段を含む場合、細胞培養容器１８４内の細胞をより明確に撮像できることから、前記第２の撮像手段の倍率は、前記第１の撮像手段の倍率より高倍率であることが好ましい。
本実施形態の細胞処理装置１００において、レーザ照射手段３３は、レーザ光源３３１、レーザ出射部３３２および光ファイバ３３３を含むが、レーザ照射手段３３は、これに限定されず、培養容器配置部１８に配置された細胞培養容器１８４にレーザを照射可能であればよい。レーザ照射手段３３は、例えば、レーザ光源３３１を含み、レーザ光源３３１から直接的に細胞培養容器１８４にレーザを照射してもよい。また、レーザ光源３３１のレーザをレーザ出射部３３２に導光する場合、光ファイバ３３３に代えて、ミラー、ＭＥＭＳ（Micro Electro Mechanical Systems）等の導光手段を用いて、導光してもよいが、第２領域３内におけるレーザ光源３３１の配置を自由に設定でき、例えば、第２領域３において、前記レーザ移動手段、前記第２の撮像手段、および前記第２の撮像移動手段等の他の手段が配置されておらず、また他の手段の可動範囲と重ならない領域にレーザ光源３３１を配置することで、細胞処理装置１００の大きさを小さくでき、かつ他の導光手段と比較して細胞処理装置１００の重量を低減できることから、光ファイバ３３３が好ましい。
レーザ光源３３１は、例えば、連続波レーザまたはパルスレーザを発振する装置である。レーザ光源３３１は、例えば、連続波に近い、パルス幅の長い高周波レーザでもよい。レーザ光源３３１から発振されるレーザの出力は、特に制限されず、例えば、処理および細胞に応じて、適宜決定できる。レーザ光源３３１が発振するレーザの波長は、特に制限されず、例えば、４０５ｎｍ、４５０ｎｍ、５２０ｎｍ、５３２ｎｍ、８０８ｎｍ等の可視光レーザ、赤外線レーザ等があげられる。前述のように、細胞培養容器１８４にレーザ吸収層を設けている場合、レーザ光源３３１は、例えば、前記レーザ吸収層が吸収可能な波長を発振する。レーザ光源３３１は、細胞への影響を抑制できることから、波長が３８０ｎｍより長いレーザを発振することが好ましい。具体例として、レーザ光源３３１は、波長が４０５ｎｍ近傍にある最大出力５Ｗの連続波ダイオードレーザがあげられる。
レーザ照射手段３３がレーザ出射部３３２を含む場合、前記レーザ移動手段は、レーザ出射部３３２を移動させることが好ましい。また、前記レーザ移動手段がレーザ出射部３３２を上下方向（図７において、矢印Ｚ方向）に移動させる場合、レーザ出射部３３２のレーザ出射口が、前記細胞処理室の底面、好ましくは、培養容器配置部１８の底面と接触しないように移動させることが好ましい。具体例として、前記レーザ移動手段は、レーザ出射部３３２のレーザ出射口を、培養容器配置部１８の底面を基準として、１ｍｍ以内に接近しないように移動させることが好ましい。このような範囲で、前記レーザ移動手段がレーザ出射部３３２を移動させることにより、例えば、レーザ出射部３３２と培養容器配置部１８の底面との接触で生じる、培養容器配置部１８に配置された細胞培養容器１８４内の培地の揺れを防止できる。
本実施形態において、前記第２の撮像移動手段である顕微鏡３２は、手前側（図７において、左下側）に配置され、レーザ照射手段３３は、奥側（図７において、右上側）に配置されている。ただし、前記第２の撮像移動手段およびレーザ照射手段３３との位置関係は、これに限定されず、例えば、前記第２の撮像移動手段を奥側に配置し、レーザ照射手段３３を手前側に配置してもよい。一般的に顕微鏡等の前記第２の撮像手段は、レーザ照射手段３３と比較して、その体積が大きい。このため、第１領域１において培養容器配置部１８が手前側に配置されている場合、前記第２の撮像移動手段を奥側に配置し、レーザ照射手段３３は、手前側に配置することで、細胞処理装置１００の大きさを小さくすることができる。
本実施形態の細胞処理装置１００は、さらに、前記レーザが被照射物の被照射部に形成するスポットの径を調整するスポット径調整手段を含んでもよい。前記スポット径は、前記レーザと前記被照射物との接触部におけるレーザのビーム径を意味する。前記スポット径は、例えば、レーザ照射手段３３のレーザ集光レンズおよびコリメータレンズ（コリメーションレンズ）の少なくとも一方の切替え、またはレーザ照射手段３３と前記被照射物との距離を変更することにより、調整できる。前者の場合、レーザ照射手段３３は、例えば、複数のレンズを含み、前記スポット径調整手段は、前記レンズを変更することにより、前記スポットの径を調整することが好ましい。前記複数のレンズは、例えば、複数の集光レンズでもよいし、複数のコリメータレンズでもよし、１以上の集光レンズと１以上のコリメータレンズとの組合せでもよい。前記複数の集光レンズは、例えば、互いに異なる焦点距離を有する。前記複数のコリメータレンズは、例えば、互いに異なる焦点距離を有する。前記レンズの変更は、例えば、手動で行なってもよいし、後述するスポット径調整制御部により、変更されてもよい。後者の場合、例えば、レンズの変更手段を含み、前記変更手段により、レンズが変更される。また、前記スポット径調整手段が距離を変更する場合、前記スポット径調整手段は、レーザ照射手段３３と、前記被照射物との距離を調整することにより、前記スポットの径を調整することが好ましい。レーザ照射手段３３と、前記被照射物との距離は、例えば、培養容器配置部１８の配置面、すなわち、細胞培養容器１８４の底面に対し、略直交方向の距離を意味する。また、レーザ照射手段３３がレーザ出射部３３２を含む場合、レーザ照射手段３３と、前記被照射物との距離は、レーザ出射部３３２と、前記被照射物との距離を意味する。レーザ照射手段３３と、前記被照射物との距離は、例えば、前記レーザ移動手段により調整できる。具体例として、前記レーザ移動手段による矢印Ｚ方向の移動により、前記被照射物である細胞培養容器１８４の底面との距離を調整できる。本実施形態の細胞処理装置１００において、前記レーザ移動手段であるＸＹステージ３１の台車３１１ａは、上下方向（矢印Ｚ方向）に昇降可能である。このため、本実施形態におけるレーザ移動手段は、例えば、スポット径調整手段ということもできる。前記スポット径調整手段は、例えば、小さいスポット径が好ましい細胞処理を実施する場合、例えば、細胞塊の分割、特定領域の細胞または細胞塊の切り出し等を実施する場合、スポット径を小さく調整する。また、前記スポット径調整手段は、例えば、大きいスポット径が好ましい細胞処理を実施する場合、例えば、特定領域の細胞の死滅等を実施する場合、スポット径を大きく調整する。前記スポット径の大きさは、特に制限されず、例えば、細胞処理の種類、細胞の大きさ等に応じて、適宜設定できる。本実施形態の細胞処理装置１００はスポット径調整手段を含むことで、例えば、細胞に対して行なう処理によりスポット径を適切な大きさに調整することができ、迅速に細胞処理を実施できる。また、適切な大きさのスポット径に調整できるため、例えば、処理を行なわない細胞への影響を低減することができる。
本実施形態の細胞処理装置１００が前記スポット径調整手段を含む場合、後述する制御部が、前記スポット径調整手段による前記スポットの径の調整を制御するスポット径調整制御部を含むことが好ましい。
本実施形態の細胞処理装置１００において、前記細胞処理室と第２領域３との間において、気体の移動が抑制されていることが好ましい。前記気体の移動の抑制は、例えば、前記細胞処理室における第２領域３との隣接部を、前述のパッキン、シール材等の封止部材で封止することにより実施できる。このように気体の移動を抑制することで、例えば、前記気体に含まれる埃の前記細胞処理室内への流入を防止できる。
本実施形態の細胞処理装置１００において、第３領域５は、制御部５１および電源供給部５２を含む。図８に示すように、制御部５１は、パーソナルコンピュータ、サーバコンピュータ、ワークステーション等と類似する構成を含む。図８に示すように、制御部５１は、中央演算装置（ＣＰＵ）５１ａ、メインメモリ５１ｂ、補助記憶デバイス５１ｃ、ビデオコーデック５１ｄ、Ｉ／Ｏインターフェイス５１ｅ等を含み、これらがコントローラ（システムコントローラ、Ｉ／Ｏコントローラ等）５１ｆにより制御され、連携動作する。補助記憶デバイス５１ｃは、フラッシュメモリ、ハードディスクドライブ等の記憶手段があげられる。ビデオコーデック５１ｄは、ＣＰＵ５１ａより受けた描画指示をもとに表示する画面を生成し、その画面信号を、例えば、細胞処理装置１００外の表示装置等に向けて送信するＧＰＵ（Graphics Processing Unit）、画面および画像のデータを一時的に記憶しておくビデオメモリ等を含む。Ｉ／Ｏ（input-output）インターフェイス５１ｅは、第１のＸＹステージ１３ａおよびアーム１３ｂ（吸引吐出移動手段）、吸引吐出手段１４、カメラ２０（第１の撮像手段）、第２のＸＹステージ３１（レーザ移動手段および第２の撮像移動手段）、顕微鏡３２（第２の撮像手段）、レーザ照射手段３３等と通信可能に接続してこれらを制御するためのデバイスである。Ｉ／Ｏインターフェイス５１ｅは、サーボドライバ（サーボコントローラ）を含んでもよい。また、Ｉ／Ｏインターフェイス５１ｅは、例えば、細胞処理装置１００外の入力装置と接続してもよい。表示装置は、映像により出力するモニター（例えば、液晶ディスプレイ（ＬＣＤ）、ブラウン管（ＣＲＴ）ディスプレイ等の各種画像表示装置等）等があげられる。入力装置８は、作業者が手指で操作可能なタッチパネル、トラックパッド、マウス等のポインティングデバイス、キーボード、押下ボタン等があげられる。
制御部５１が実行するプログラムは、補助記憶デバイス５１ｃに記憶されている。前記プログラムは、実行時にメインメモリ５１ｂに読み込まれ、ＣＰＵ５１ａによって解読される。そして、制御部５１は、プログラムに従い、各部材を制御する。
本実施形態において、制御部５１は、レーザ制御部、吸引吐出制御部、第１の撮像制御部、および第２の撮像制御部を含むが、前記レーザ制御部、前記吸引吐出制御部、前記第１の撮像制御部、および前記第２の撮像制御部は、任意の構成であり、あってもよいし、なくてもよい。本実施形態の細胞処理装置１００において、制御部５１は、前記レーザ制御部、前記吸引吐出制御部、前記第１の撮像制御部、および前記第２の撮像制御部等の機能を有することで、例えば、各部材に制御部を個別に設ける必要がなく、細胞処理装置を小型化できる。ただし、本発明はこれに限定されず、例えば、制御部５１の負荷を軽減するために、各部材に制御部を設け、制御部５１と各部材の制御部とを協働させて、各部材を制御させてもよい。具体例として、レーザ発振等の制御は、例えば、各部材に設けられた制御部で制御し、レーザ照射手段３３の移動は、例えば、制御部５１に制御させてもよい。また、制御部５１は、１つの半導体素子で構成してもよいし、複数の半導体素子をワンパッケージ化したチップとしてもよいし、複数の半導体素子を基板上に設けた構成としてもよい。
本実施形態において、前記レーザ制御部は、レーザ照射手段３３によるレーザ照射ならびに前記レーザ移動手段であるＸＹステージ３１および台車３１１ａによるレーザ照射手段３３のレーザ出射部３３２の移動を制御するが、前記レーザ制御部は、いずれか一方を制御してもよい。
本実施形態において、前記吸引吐出制御部は、吸引吐出手段１４による吸引吐出ならびに前記吸引吐出移動手段であるＸＹステージ１３ａおよびアーム１３ｂによる吸引吐出手段１４の移動を制御するが、前記吸引吐出制御部は、いずれか一方を制御してもよい。
本実施形態において、前記第１の撮像制御部は、前記第１の撮像手段であるカメラ２０による前記細胞処理室内の撮像を制御する。
本実施形態において、前記第２の撮像制御部は、前記第２の撮像手段である顕微鏡３２による細胞の撮像ならびに前記第２の撮像移動手段であるＸＹステージ３１および台車３１１ｂによる顕微鏡３２の移動を制御するが、前記レーザ制御部は、いずれか一方を制御してもよい。
電源供給部５２は、特に制限されず、公知の電源を使用できる。電源供給部５２は、例えば、レーザ照射手段３３、前記レーザ移動制御手段、前記第１の撮像手段、前記第２の撮像手段、前記第２の撮像移動手段、吸引吐出手段１４、前記吸引吐出移動手段、循環手段７、照明手段、殺菌手段、制御部５１等の電力により稼働する部材（手段）に電力を供給する。このため、電源供給部５２は、例えば、前記電力により稼働する部材（手段）と、電気的に接続されている。電源供給部５２は、例えば、１００Ｖの電圧で電力を供給する。これにより、例えば、一般的な電力環境においても、細胞処理装置１００が使用可能となる。本実施形態の細胞処理装置１００は、全体の電源供給を、電源供給部５２に担わせることによって、各部材にそれぞれ、個別に電源供給部を設けなくてもよいので、例えば、細胞処理装置１００の小型化や軽量化を実現することができる。ただし、本発明はこれに限定されず、例えば、各手段の少なくとも一つに専用の電源供給部を設けてもよい。
本実施形態の細胞処理装置１００は、さらに、第３領域５に、通信部（図示せず）を設けてもよい。前記通信部は、例えば、有線もしくは無線により、パーソナルコンピュータ、移動体通信機器等の外部の機器とデータの送受信機能またはインターネット等との接続機能を有する。前記通信部は、例えば、既存の通信モジュール等があげられる。このように通信部を設けることで、外部と細胞処理装置１００を接続できるようになるため、例えば、外部から細胞処理装置１００を操作すること、または外部からのデータを細胞処理装置１００が受信することができる。また、細胞処理装置１００内のデータを、例えば、外部から接続することで閲覧可能とすることができる。
つぎに、本実施形態の細胞処理装置１００を用いた細胞の処理および処理された細胞の回収について、例をあげて説明する。
まず、殺菌灯２２を消灯し、照明灯２１ａ、２１ｂを点灯させる。また、前記第１の撮像制御部により、カメラ２０を起動させ、前記細胞処理室内の撮像を開始する。カメラ２０により撮像された前記細胞処理室内の画像は、例えば、制御部５１を介して、前記表示装置に出力される。つぎに、循環手段７を稼働させ、前記細胞処理室内の気体を循環させる。さらに、作業者が、開口部１１ａの扉１２ａを開け、培養容器配置部１８に細胞培養容器１８４を配置し、また、回収容器配置部１９ａに回収容器１９ｂを配置する。細胞培養容器１８４の底面には、前記レーザ吸収層が形成されている。前記配置後、前記作業者は、開口部１１ａの扉１２ａを閉じる。
つぎに、前記第２の撮像制御部により、ＸＹステージ３１および台車３１１ｂが移動するよう制御され、顕微鏡３２が、細胞培養容器１８４の底面の下側に移動する。また、前記吸引吐出制御部により、ＸＹステージ１３ａが移動するように制御され、光源１５が、細胞培養容器１８４の上面の上部、すなわち、培養容器配置部１８の上部に移動する。そして、顕微鏡３２により、細胞培養容器１８４内の細胞が撮像される。顕微鏡３２による撮像は、例えば、処理対象の細胞の大きさに応じて、異なる倍率の対物レンズ３２１ａ〜ｃを用いて複数回行なわれる。顕微鏡３２により撮像される画像は、例えば、位相差顕微鏡により撮像された位相差顕微鏡画像、蛍光顕微鏡により撮像された蛍光顕微鏡画像等があげられる。前記撮像された画像は、例えば、制御部５１を介して、前記表示装置に出力される。
作業者が、例えば、前記撮像された画像に基づき、処理対象の細胞領域（例えば、回収する細胞領域）を前記入力装置により指定すると、前記レーザ制御部により、ＸＹステージ３１および台車３１１ａが移動するように制御され、レーザ出射部３３２は、細胞培養容器１８４の底面の下側において、前記処理対象の細胞領域の周囲の細胞にレーザを照射可能な位置に移動する。そして、前記レーザ制御部により、レーザ光源３３１が、レーザを発振するように制御される。発振されたレーザは、光ファイバ３３３により導光され、レーザ出射部３３２から照射される。また、前記レーザ照射とともに、前記レーザ制御部により、ＸＹステージ３１および台車３１１ａが、前記処理対象の細胞の周囲を移動する。この際に、前記処理対象の細胞領域の周囲の細胞の大きさに応じて、台車３１１ａを昇降させることで、前記スポット径の大きさを適切な大きさに調整し、前記処理対象の細胞領域内の細胞に影響が出ないようにする。照射されたレーザは、細胞培養容器１８４の底面に形成された前記レーザ吸収層に吸収され、前記レーザ吸収層から生じる熱等により、前記処理対象の細胞の周囲の細胞を死滅させる。これにより、前記処理対象の細胞領域を切り出すことができる。
つぎに、前記吸引吐出制御部により、ＸＹステージ１３ａが移動するように制御され、吸引吐出手段１４が、収容容器１７ｂの上部に移動する。前記吸引吐出制御部により、アーム１３ｂが降下および上昇するように制御され、吸引吐出手段１４の吸引吐出口側に、前記先端部材であるチップが装着される。さらに、前記吸引吐出制御部により、ＸＹステージ１３ａが移動するように制御され、吸引吐出手段１４は、細胞培養容器１８４の上部において、前記処理対象の細胞領域の上部に移動する。前記吸引吐出制御部により、アーム１３ｂが降下するように制御され、前記チップの開口を前記処理対象の細胞領域の近傍に配置する。この状態で、前記吸引吐出制御部により、吸引吐出手段１４が吸引するように制御され、前記処理対象の細胞領域の細胞を周囲の培地とともに前記チップ内に吸引する。
さらに、前記吸引吐出制御部により、アーム１３ｂが上昇し、かつ、ＸＹステージ１３ａが移動するように制御され、吸引吐出手段１４は、回収容器１９ｂの上部に移動する。また、前記吸引吐出制御部により、アーム１３ｂが降下するように制御され、回収容器１９ｂの内部に前記チップの開口が移動する。この状態で、前記吸引吐出制御部により、吸引吐出手段１４が吐出するように制御され、前記チップ内の前記処理対象の細胞領域の細胞を含む培地を、回収容器１９ｂ内に吐出する。
前記吐出後、前記吸引吐出制御部により、アーム１３ｂが上昇し、かつ、ＸＹステージ１３ａが移動するように制御され、吸引吐出手段１４は、排液容器１６ｂの上部に移動する。さらに、前記吸引吐出制御部により、アーム１３ｂが降下し、かつ、ＸＹステージ１３ａが移動するように制御され、前記チップの上側端を、排液容器１６ｂに設けられた上面の凹部である先端部材脱離手段１６ｃに引っかける。この状態で、前記吸引吐出制御部により、アーム１３ｂが上昇するように制御され、吸引吐出手段１４から前記チップが脱離する。
そして、作業者が、開口部１１ａの扉１２ａを開け、培養容器配置部１８から細胞培養容器１８４を回収し、また、回収容器配置部１９ａから回収容器１９ｂを回収する。このようにすることで、実施形態の細胞処理装置１００により、細胞の処理および処理された細胞の回収を実施できる。
本実施形態の細胞処理装置１００によれば、細胞培養容器１８４の細胞に対し、例えば、選別、回収等の処理を簡易に実施できる。また、本実施形態の細胞処理装置１００は、作業者自身ではなく、レーザ照射手段により細胞を処理するため、例えば、作業者の技術レベルによる影響を受けない。このため、例えば、処理後に得られる細胞の品質が、安定する。
以上、実施形態を参照して本発明を説明したが、本発明は、上記実施形態に限定されるものではない。本発明の構成や詳細には、本発明のスコープ内で当業者が理解しうる様々な変更をすることができる。
本発明の細胞処理装置によれば、細胞培養容器内の細胞を処理できる。このため、本発明は、例えば、品質の安定した細胞を多量に使用する再生医療、創薬等の分野において、極めて有用である。
１００ 細胞処理装置
１ 第１領域
１１ａ、１１ｂ 開口部
１２ａ、１２ｂ 扉
１３ａ 第１のＸＹステージ
１３ｂ アーム
１４ 吸引吐出手段
１５ 光源
１６ａ 排液容器配置部
１６ｂ 排液容器
１６ｃ 先端部材脱離手段
１７ａ 収容容器配置部
１７ｂ 収容容器
１８ 培養容器配置部
１８１ 上蓋
１８２ 底部
１８３ 透光領域
１８４ 細胞培養容器
１８５ 底壁
１８６ 底板
１８７ 凹部
１８８ 突出部
１９ａ 回収容器配置部
１９ｂ 回収容器
３ 第２領域
３１ 第２のＸＹステージ
３１１ａ、３１１ｂ 台車
３２ 顕微鏡
３２１ａ、３２１ｂ、３２１ｃ 対物レンズ
３３ レーザ照射手段
３３１ レーザ光源
３３２ レーザ出射部
３３３ 光ファイバ
５ 第３領域
５１ 制御部
５１ａ ＣＰＵ
５１ｂ メインメモリ
５１ｃ 補助記憶デバイス
５１ｄ ビデオコーデック
５１ｅ Ｉ／Ｏインターフェイス
５１ｆ コントローラ
５２ 電源供給部
７ 循環手段
７１ 吸気部
７２ 循環流路
７３ 気体供給部
７４ 排気部

Claims (24)

  1. 細胞処理装置であって、
    第１領域、第２領域および第３領域を含み、
    前記第１領域および前記第２領域は、連続して配置され、
    前記第１領域は、細胞を処理する細胞処理室であり、
    前記細胞処理室は、前記細胞処理室外から閉鎖可能であり、かつ細胞培養容器を配置する培養容器配置部を含み、
    前記第２領域は、
    前記培養容器配置部に配置された細胞培養容器に対し、レーザを照射可能なレーザ照射手段と、
    前記培養容器配置部に配置された細胞培養容器内の細胞を撮像可能な第２の撮像手段と、
    前記レーザ照射手段を移動させるレーザ移動手段と、
    前記第２の撮像手段を移動させる第２の撮像移動手段とを含み、
    前記第３領域は、前記細胞処理装置内の少なくとも一つの手段を制御する制御部および前記細胞処理装置内の少なくとも一つの手段に電力を供給する電源供給部を含み、
    前記培養容器配置部は、前記細胞処理室において、前記第２領域と隣接するように配置され、
    前記培養容器配置部における前記第２領域との隣接部は、透光可能であり、
    前記制御部は、
    前記レーザ照射手段によるレーザ照射および前記レーザ移動手段による前記レーザ照射手段の移動を制御するレーザ制御部と、
    前記第２の撮像手段による細胞の撮像および前記第２の撮像移動手段による前記第２の撮像手段の移動を制御する第２の撮像制御部とを含み、
    前記レーザ照射手段および前記第２の撮像手段は、独立したユニットとして構成されていることを特徴とする、細胞処理装置。
  2. 前記細胞処理室は、開口部と、前記開口部を開閉可能な扉を含む、請求項１記載の細胞処理装置。
  3. 前記扉は、非透光性である、請求項２記載の細胞処理装置。
  4. 前記細胞処理室は、前記細胞処理室内で細胞処理に関連する作業を行なうための作業用の開口部および前記細胞処理室のメンテナンスが可能な開口部を含み、
    前記作業用の開口部と、前記メンテナンスが可能な開口部とは、前記細胞処理室において、異なる場所に配置されている、請求項２または３記載の細胞処理装置。
  5. 前記作業用の開口部の開口面積は、前記メンテナンスが可能な開口部の開口面積より小さい、請求項４記載の細胞処理装置。
  6. 前記細胞処理室は、さらに、前記細胞処理室内を殺菌可能な殺菌手段を含み、
    前記殺菌手段は、前記細胞処理室において、前記作業用の開口部側に配置されている、請求項４または５記載の細胞処理装置。
  7. さらに、前記細胞処理室内の気体を循環させる循環手段を含み、
    前記循環手段は、
    前記細胞処理室内の気体を吸気する吸気部と、
    前記吸気した気体の一部を前記細胞処理室内に供給する気体供給部と、
    前記吸気した気体の残部を前記細胞処理室外に排気する排気部とを含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  8. 前記排気部は、前記細胞処理装置の最上部に配置される、請求項７記載の細胞処理装置。
  9. 請求項２から６のいずれか一項に記載の細胞処理装置において、
    前記吸気部は、前記細胞処理室の前記開口部近傍に配置されている、請求項７または８記載の細胞処理装置。
  10. 前記細胞処理室は、外壁と内壁とを含み、
    前記外壁と前記内壁との間に、前記吸気部と前記気体供給部および前記排気部とを接続する循環流路が配置される、請求項７から９のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  11. 前記細胞処理室は、さらに、前記細胞処理室内に投光可能な照明手段を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の細胞処理室。
  12. 前記細胞処理室と前記第２領域との間において、気体の移動が抑制されている、請求項１から１１のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  13. 前記細胞処理室は、さらに、吸引吐出手段および前記吸引吐出手段を移動させる吸引吐出移動手段を含み、
    前記制御部は、前記吸引吐出手段による吸引吐出および前記吸引吐出移動手段による前記吸引吐出手段の移動を制御する吸引吐出制御部を含む、請求項１から１２のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  14. 前記細胞処理室は、前記吸引吐出手段により吸引した吸引液を排液する排液容器を配置可能な排液容器配置部を含み、
    前記細胞培養容器の配置面に対し略平行な平面における、前記吸引吐出移動手段の移動方向にそって、前記培養容器配置部および前記排液容器配置部が配置されている、請求項１３記載の細胞処理装置。
  15. 前記細胞処理室は、
    前記吸引吐出手段に着脱可能な先端部材が収容された先端部材収容容器を配置可能な収容容器配置部と、
    前記先端部材を前記吸引吐出手段から脱離させる先端部材脱離手段とを含む、請求項１３または１４記載の細胞処理装置。
  16. 前記細胞処理室は、前記細胞処理室内を撮像可能な第１の撮像手段を含み、
    前記制御部は、前記第１の撮像手段による前記細胞処理室内の撮像を制御する第１の撮像制御部を含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  17. 前記第２の撮像手段は、複数の倍率で撮像可能である、請求項１から１６のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  18. 前記レーザ照射手段は、レーザ光源およびレーザ出射部を含み、
    前記レーザ光源は、前記第２領域において、他の手段が配置された領域以外の領域に配置される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  19. 前記レーザ移動手段は、前記培養容器配置部の配置面に対し略平行な平面において、第１方向に前記レーザ照射手段を移動可能であり、
    前記第２の撮像移動手段は、前記培養容器配置部の配置面に対し略平行な平面において、第１方向に前記第２の撮像手段を移動可能であり、
    前記レーザ移動手段による前記レーザ照射手段の第１方向の移動と、前記第２の撮像移動手段による前記第２の撮像手段の第１方向の移動とが、同一直線上の移動である、請求項１から１８のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  20. 前記レーザ移動手段は、前記レーザ照射手段を配置する台車および前記台車が移動し、かつ前記第１方向にそって配置された移動路を含み、
    前記第２の撮像移動手段は、前記第２の撮像手段を配置する台車および前記台車が移動し、かつ前記第１方向にそって配置された移動路を含み、
    前記レーザ移動手段の移動路と、前記第２の撮像移動手段の移動路は、同じである、請求項１から１９のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  21. 前記レーザ移動手段は、さらに、前記培養容器配置部の配置面の略直交方向に前記レーザ照射手段を移動可能である、請求項１から２０のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  22. 前記レーザ移動手段は、前記培養容器配置部の配置面に略平行な平面において、前記第１方向の略直交方向である第２方向に、前記レーザ照射手段を移動可能である、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  23. 前記培養容器配置部の底面は、前記細胞培養容器を配置する凹部を含み、
    前記凹部は、前記第２領域端側において、前記凹部の内側方向に突出する突出部を含み、
    前記凹部の側面は、前記細胞処理室の内部から前記細胞処理室の外部方向に向かって狭まる逆テーパ状である、請求項１から２２のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
  24. 前記レーザ移動手段および前記第２の撮像移動手段は、それぞれ、独立して、前記レーザ照射手段および前記第２の撮像手段を移動可能である、請求項１から２３のいずれか一項に記載の細胞処理装置。
JP2017024511A 2017-02-13 2017-02-13 細胞処理装置 Active JP6532063B2 (ja)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2017024511A JP6532063B2 (ja) 2017-02-13 2017-02-13 細胞処理装置
PCT/JP2017/033963 WO2018146854A1 (ja) 2017-02-13 2017-09-20 細胞処理装置
CN201780086319.2A CN110291186B (zh) 2017-02-13 2017-09-20 细胞处理装置
US16/485,356 US11499129B2 (en) 2017-02-13 2017-09-20 Cell treatment apparatus
EP17896293.2A EP3575390A4 (en) 2017-02-13 2017-09-20 CELL TREATMENT DEVICE
JP2019090413A JP6927595B2 (ja) 2017-02-13 2019-05-13 細胞処理装置

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2017024511A JP6532063B2 (ja) 2017-02-13 2017-02-13 細胞処理装置

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2019090413A Division JP6927595B2 (ja) 2017-02-13 2019-05-13 細胞処理装置

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2018130038A JP2018130038A (ja) 2018-08-23
JP6532063B2 true JP6532063B2 (ja) 2019-06-19

Family

ID=63107944

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017024511A Active JP6532063B2 (ja) 2017-02-13 2017-02-13 細胞処理装置

Country Status (5)

Country Link
US (1) US11499129B2 (ja)
EP (1) EP3575390A4 (ja)
JP (1) JP6532063B2 (ja)
CN (1) CN110291186B (ja)
WO (1) WO2018146854A1 (ja)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3931545A4 (en) 2019-02-27 2023-01-04 Synthego Corporation CELL CULTURE LASER PHOTOABLATION
CN113136326A (zh) * 2021-06-01 2021-07-20 赵昳 一种细胞加力装置
CN113717849A (zh) * 2021-09-28 2021-11-30 四川大学 一种可使用激光照射的便捷式培养箱
KR20250023735A (ko) * 2023-08-10 2025-02-18 (주)식중독실험기자재개발연구소 혐기성 미생물 배양장치

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4301252A (en) * 1980-04-04 1981-11-17 Baker Fraser L Controlled environment incubator for light microscopy
GB2095335B (en) 1981-03-20 1984-05-31 Rolls Royce Gas turbine engine air intake system
JP2669192B2 (ja) * 1991-05-31 1997-10-27 株式会社島津製作所 光圧力式セルソータ
JP2930182B2 (ja) 1995-06-20 1999-08-03 松下電器産業株式会社 神経細胞活動測定用２次元センサ及びこれを用いた測定装置
US6033396A (en) 1995-11-06 2000-03-07 Huang; David Apparatus and method for performing laser thermal keratoplasty with minimized regression
US5792427A (en) * 1996-02-09 1998-08-11 Forma Scientific, Inc. Controlled atmosphere incubator
US6753161B2 (en) 1997-03-27 2004-06-22 Oncosis Llc Optoinjection methods
US5874266A (en) 1997-03-27 1999-02-23 Palsson; Bernhard O. Targeted system for removing tumor cells from cell populations
JP2001029359A (ja) 1999-07-23 2001-02-06 Topcon Corp レーザ手術装置
WO2001040454A1 (en) * 1999-11-30 2001-06-07 Oncosis Method and apparatus for selectively targeting specific cells within a cell population
US7193706B2 (en) 2000-08-02 2007-03-20 Arizona Board Of Regents, Acting On Behalf Of Arizona State University Computer interfaced scanning fluorescence lifetime microscope applied to directed evolution
EP2363828A1 (en) 2000-10-24 2011-09-07 Cyntellect, Inc. Device for selectively targeting cells within a three-dimensional specimen
JP4283109B2 (ja) * 2001-07-18 2009-06-24 アイアールエム エルエルシー 高スループットのインキュベーション装置
US7264966B2 (en) 2002-01-23 2007-09-04 Olympus Optical Co., Ltd. Method of isolating cell or sample to be analyzed in cell
JP3820227B2 (ja) 2002-01-23 2006-09-13 オリンパス株式会社 細胞単離方法
JP2004113153A (ja) * 2002-09-27 2004-04-15 Sanyo Electric Co Ltd Ｃｏ２インキュベータ
US20040077073A1 (en) 2002-10-18 2004-04-22 Melvin Schindler Methods and apparatus for interactive micromanipulation of biological materials
JP4245984B2 (ja) * 2003-05-30 2009-04-02 オリンパス株式会社 培養処理装置および自動培養装置
US20050095578A1 (en) 2003-10-31 2005-05-05 Koller Manfred R. Method and apparatus for cell permeabilization
US7425426B2 (en) 2004-03-15 2008-09-16 Cyntellect, Inc. Methods for purification of cells based on product secretion
DE102004023262B8 (de) * 2004-05-11 2013-01-17 Carl Zeiss Microimaging Gmbh Verfahren zur Bearbeitung einer Masse mittels Laserbestrahlung und Steuersystem
JP2005333889A (ja) 2004-05-27 2005-12-08 Cybox Co Ltd 細胞壊死方法及び細胞壊死装置
US20050276456A1 (en) 2004-05-27 2005-12-15 Toshiyuki Yamato Cell-operating device
KR101286216B1 (ko) 2004-09-01 2013-07-15 퍼킨엘머 싱가포르 피티이 리미티드 샘플을 분석하는 방법 및 이를 위한 장치
CN101208426A (zh) * 2005-02-18 2008-06-25 阿不赛斯株式会社 细胞分离的方法与设备
JP2009195110A (ja) * 2008-02-19 2009-09-03 Nikon Corp 細胞処理装置および細胞処理方法
JP5293733B2 (ja) 2008-02-28 2013-09-18 株式会社ニコン 顕微鏡装置および細胞培養装置
JP5416965B2 (ja) * 2008-12-26 2014-02-12 パナソニックヘルスケア株式会社 Ｃｏ２インキュベータ
EP2554657B1 (en) * 2010-04-02 2019-02-20 National Institute of Advanced Industrial Science And Technology Method for separating cells, cell culture medium, and device for separating cells
FI20115057A7 (fi) 2011-01-21 2012-07-22 Wallac Oy Menetelmä ja laite yhden tai useamman näytealueen leikkaamiseksi näytteen kantajasta
WO2012112620A1 (en) 2011-02-14 2012-08-23 International Stem Cell Corporation Methods and compositions of producing patient-specific multipotent neuronal stem cells
CN103502425A (zh) 2011-04-11 2014-01-08 学校法人东邦大学 细胞粘附性光控制基材
KR101460853B1 (ko) 2012-04-12 2014-11-19 연세대학교 산학협력단 근적외선에 의한 세포의 선택적 탈착, 패턴 및 수확 방법
JP5563637B2 (ja) 2012-09-26 2014-07-30 株式会社太平環境科学センター 自動細菌検査方法
CN203663257U (zh) 2013-12-27 2014-06-25 深圳先进技术研究院 光热和光动力治疗装置
JP6090891B1 (ja) 2015-06-01 2017-03-08 株式会社片岡製作所 細胞処理方法、レーザ加工機、細胞培養容器
JP6680479B2 (ja) 2015-06-29 2020-04-15 株式会社片岡製作所 細胞処理方法、レーザ加工機
JP6571430B2 (ja) 2015-07-21 2019-09-04 サンデン・オートモーティブクライメイトシステム株式会社 車両用空気調和装置
EP3418710B1 (en) 2016-02-19 2022-08-24 Nikon Corporation Sample preparation method and sample preparation device
JP6033980B1 (ja) 2016-06-01 2016-11-30 株式会社片岡製作所 細胞処理システム
JP2018038335A (ja) 2016-09-08 2018-03-15 シンフォニアテクノロジー株式会社 細胞培養方法、当該細胞培養方法によって培養された目的細胞、及び、細胞培養装置

Also Published As

Publication number Publication date
CN110291186B (zh) 2023-08-22
EP3575390A1 (en) 2019-12-04
CN110291186A (zh) 2019-09-27
US11499129B2 (en) 2022-11-15
US20200024562A1 (en) 2020-01-23
JP2018130038A (ja) 2018-08-23
EP3575390A4 (en) 2020-12-30
WO2018146854A1 (ja) 2018-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6527273B2 (ja) 位相差観察装置および細胞処理装置
JP6532063B2 (ja) 細胞処理装置
US11560540B2 (en) Cell treatment apparatus and method for treating cells with lasers
WO2005059091A1 (ja) 細胞培養装置
JP6541160B2 (ja) 細胞処理装置および対象物の処理方法
WO2019064984A1 (ja) 位相差観察装置および細胞処理装置
JP4845450B2 (ja) 麻酔ケース
JP2020005553A (ja) インキュベーションシステム及びインキュベータ
JP6927595B2 (ja) 細胞処理装置
JP6927596B2 (ja) 細胞処理装置および対象物の処理方法
JP7219390B2 (ja) 細胞観察装置
JP6262343B2 (ja) 対象物の移動装置
US11603514B2 (en) Cell treatment apparatus
US20230140027A1 (en) Cell-culturing instrument-machining device

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20181213

A871 Explanation of circumstances concerning accelerated examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871

Effective date: 20181213

A975 Report on accelerated examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005

Effective date: 20181227

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20190122

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20190319

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20190416

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20190514

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 6532063

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250