JP7159295B2 - 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体 - Google Patents

免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体 Download PDF

Info

Publication number
JP7159295B2
JP7159295B2 JP2020509090A JP2020509090A JP7159295B2 JP 7159295 B2 JP7159295 B2 JP 7159295B2 JP 2020509090 A JP2020509090 A JP 2020509090A JP 2020509090 A JP2020509090 A JP 2020509090A JP 7159295 B2 JP7159295 B2 JP 7159295B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
alkyl
group
antibody
compound
groups
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2020509090A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2020531472A (ja
Inventor
ヤム・ビー・ポウデル
サンジーブ・ギャングウォー
プラサンナ・シヴァプラカサム
ショシャナ・エル・ポージー
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bristol Myers Squibb Co
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of JP2020531472A publication Critical patent/JP2020531472A/ja
Priority to JP2022164019A priority Critical patent/JP7474820B2/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7159295B2 publication Critical patent/JP7159295B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/18—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 one oxygen and one nitrogen atom, e.g. guanine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6839—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting material from viruses
    • A61K47/6841—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting material from viruses the antibody targeting a RNA virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

関連出願の相互参照
(関連出願の相互参照)
本願は、３５Ｕ.Ｓ.Ｃ.§１１９(ｅ)のもとに、米国仮出願第６２／５４６,０９５号(２０１７年８月１６日出願)の優先権を主張し、その内容は引用により本明細書に援用される。
本開示は、トル様受容体７(「ＴＬＲ７」)アゴニストおよびそのコンジュゲート、ならびに前記アゴニストおよびそれらのコンジュゲートの製造および使用のための方法に関する。
トル様受容体(「ＴＬＲ」)は、病原体関連分子パターン(「ＰＡＭＰｓ」)を認識する細胞－表面受容体である。対応するＰＡＭＰの結合によりＴＬＲが活性化することにより、病原体感染の可能性が伝達され、免疫系が刺激され、感染に対抗する。ヒトは、１１個のＴＬＲ、即ちＴＬＲ１～ＴＬＲ１１を有している。
アゴニストによるＴＬＲの活性化(ＴＬＲ７が最も研究されているが)は、免疫応答を刺激することにより、実在の病原体感染以外の様々な症状を治療する際に、ワクチンおよび免疫治療剤の作用に対してアジュバンド効果を有し得る。
ＴＬＲ７は、一本鎖ＲＮＡウイルスと関連があるＰＡＭＰｓを認識する。その活性化により、Ｉ型インターフェロン、例えばＩＦＮαおよびＩＦＮβの分泌が誘導される(Lund et al. 2004)。ＴＬＲ７は、２つの結合部位、即ちｓｓＲＮＡ４０などの一本鎖ＲＮＡリガンドに対して１つの結合部位(Berghoefer et al. 2007)およびグアノシンに対して１つの結合部位(Zhang et al. 2016)を有する。
ＴＬＲ７は、１Ｈ－イミダゾ[４,５－ｃ]キノリン骨格をベースとするイミキモド、レシキモドおよびガルジキモドなどのグアノシン様合成アゴニストに結合して、活性化され得る。
Figure 0007159295000001
プテリジン分子骨格をベースとした合成ＴＬＲ７アゴニストもまた知られており、例として、第二相臨床試験中であるベサトリモドが挙げられる(Desai et al. 2015)。ベサトリモドの効力は、ＩＦＮ－α誘導を測定した場合に、対応するプリン－８－オン化合物の効力と比べて１００Ｘ未満であることが報告されている(Roethle et al. 2013)。
Figure 0007159295000002
その他の合成ＴＬＲ７アゴニストは、多くは、式(Ａ)：
Figure 0007159295000003
(式中、Ｒ、Ｒ'およびＲ''は、構造可変基であり、Ｒ''は、通常、非置換または置換された芳香環またはヘテロ芳香環を含有している)
に関するプリン様骨格をベースとしている。
プリン様骨格を有する生物活性分子、および線維症、炎症性疾患、癌または病原性感染などの症状を治療する際のその使用に関する開示物は、次のものを包含する：Akinbobuyi et al. 2015b and 2016；Barberis et al. 2012；Carson et al. 2014；Ding et al. 2016, 2017a, and 2017b；Graupe et al. 2015；Hashimoto et al. 2009；Holldack et al. 2012；Isobe et al. 2009a and 2012；Jin et al. 2017a and 2017b；Peterson 2014；Pryde 2010；and Seifert 2015。
基Ｒ''は、ピリジルであり得る：Bonfanti et al. 2015a and 2015b；Halcomb et al. 2015；Hirota et al. 2000；Isobe et al. 2000, 2002, 2004, 2006, 2009a, 2011, and 2012；Kasibhatla et al. 2007；Koga-Yamakawa et al. 2013；Musmuca et al. 2009；Nakamura 2012；Ogita et al. 2007；and Yu et al. 2013。
Ｂｏｎｆａｎｔｉら(２０１５ｂ)は、プリン基部分の２つの環に跨って、一つのマクロ環を形成するＴＬＲ７モジュレーターを開示している：
Figure 0007159295000004
ＴＬＲ７アゴニストは、パートナー分子、例えばリン脂質、ポリ(エチレングリコール)(「ＰＥＧ」)または別のＴＬＲ(一般的にはＴＬＲ２)と結合され得る。開示物の例としては、次のものを包含する：Carson et al. 2013, 2015, and 2016, Chan et al. 2009 and 2011, Lioux et al. 2016, Maj et al. 2015, Ban et al. 2017；Vernejoul et al. 2014, およびZurawski et al. 2012。抗体とのコンジュゲーションも開示されている：Akinbobuyi et al. 2013 and 2015a, and Gadd et al. 2015。コンジュゲーション部位は、高頻度で式(Ａ)のＲ''基である。
５Ｈ－ピロロ[３,２－ｄ]ピリミジンの母核をベースとしたＴＬＲ７アゴニストも開示されている(Cortez et al. 2017a and 2017b, McGowan et al. 2017, and Li et al. 2018を参照されたい)。
Ｊｅｎｓｅｎら(２０１５)は、ＴＬＲ７アゴニストを送達するために、カチオン性脂質ビヒクルの使用を開示している。
レシキミドなどの幾つかのＴＬＲ７アゴニストは、二重ＴＬＲ７／ＴＬＲ８アゴニストである(例えば、Beesu et al. 2017；Lioux et al. 2016；およびVernejoul et al. 2014を参照されたい)。
５Ｈ－ピロロ[３,２－ｄ]ピリミジンの母核をベースとしたＴＬＲ７アゴニストも開示されている(Cortez et al. 2017a and 2017b, McGowan et al. 2017, and Li et al. 2018を参照されたい)。
本明細書に引用した文献についての全ての引例は、第一著者または発明者および発行年により、本明細書末部に列挙される。
(発明の概要)
一態様において、本明細書は、式(Ｉ)：
Figure 0007159295000005
 ［式中、
Ｒ１は、(Ｃ１－Ｃ５アルキル)Ｏ、(Ｃ１－Ｃ２アルキル)Ｏ(ＣＨ２)２－３Ｏ、(Ｃ１－Ｃ５アルキル)Ｃ(＝Ｏ)Ｏ、(Ｃ１－Ｃ５アルキル)ＮＨ、(Ｃ１－Ｃ２アルキル)Ｏ(ＣＨ２)２－３ＮＨまたは(Ｃ１－Ｃ５アルキル)Ｃ(＝Ｏ)ＮＨであり；
Ｒ２は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ハロ、Ｏ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、ＣＮまたはＮＯ２であり；
Ｒ３は、Ｈ、Ｍｅまたは(ＣＨ２)ｘＲ４であり、式中の下付き文字ｘは、２、３または４であり；および
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ(Ｃ１－Ｃ５アルキル)、Ｎ(Ｃ１－Ｃ５アルキル)２、ＮＨ(Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル)、ＮＨ(Ｃ４－Ｃ８ビシクロアルキル)、ＮＨ(Ｃ６－Ｃ１０スピロシクロアルキル)、Ｎ(Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル)２、ＮＨ(ＣＨ２)１－３(アリール)、Ｎ((ＣＨ２)１－３(アリール))２、構造：
Figure 0007159295000006
 を有する環状アミン基、６員の芳香族基またはヘテロ芳香族基、あるいは５員のヘテロ芳香族基であり；
ここで、アルキル、シクロアルキル、ビシクロアルキル、スピロシクロアルキル、環状アミン、６員の芳香族基またはヘテロ芳香族基、あるいは５員のヘテロ芳香族基は、所望により、ＯＨ、ハロ、ＣＮ、(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、Ｏ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、Ｃ(＝Ｏ)(Ｍｅ)、ＳＯ２(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、Ｃ(＝Ｏ)(Ｅｔ)、ＮＨ２、ＮＨ(Ｍｅ)、Ｎ(Ｍｅ)２、ＮＨ(Ｅｔ)、Ｎ(Ｅｔ)２およびＮ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)２から選択された１以上の置換基で置換されていてもよく；および
シクロアルキル、ビシクロアルキル、スピロシクロアルキルまたは環状アミン基は、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)またはＮ(Ｂｏｃ)により置換されたＣＨ２基を有していてもよい］
の構造を有する化合物を提供する。
式(Ｉ)の化合物は、ＴＬＲ７アゴニストとしての活性を有しており、その結果、それらの幾つかは、目的の作用の標的組織または臓器への送達を標的化するためにコンジュゲートされ得る。即ち、それらは、免疫系の活性化により治療可能な症状の治療において使用され得る。
図１は、本発明の化合物を製造するための代表的なスキームを示す。 図２は、アゴニスト－リンカー化合物を製造するためのスキームを示す。 図３は、アゴニスト－リンカー化合物を製造するためのスキームを示す。 図４は、本発明の化合物のＴＬＲ７アゴニズム活性を示す代表図である。
発明の詳細な説明
(定義)
「抗体」は、抗体全体およびあらゆる抗原結合フラグメント(即ち、「抗原結合部分」)またはその単鎖変異体を意味する。抗体全体は、ジスルフィド結合により相互に連結された少なくとも２つの重鎖(Ｈ)および２つの軽鎖(Ｌ)を含むタンパク質である。各重鎖は、３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３を含む重鎖可変領域(ＶＨ)ならびに重鎖定常領域を含んでいる。各軽鎖は、１つのシングルドメインＣＬを含む軽鎖可変領域(ＶＬまたはＶｋ)および軽鎖定常領域を含む。ＶＨおよびＶＬ領域は、高度に保存されたフレームワーク領域(ＦＲ)と共に散在し得る超可変性領域、いわゆる相補性決定領域(ＣＤＲｓ)に更に細分化され得る。各々ＶＨおよびＶＬは、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲを含み、アミノ末端からカルボキシ末端へと次の順番で配置されている：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３およびＦＲ４。可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。定常領域は、宿主の組織または因子[例えば、エフェクター細胞などの免疫系の様々な細胞および古典的補体系の第一成分(Ｃｌｑ)]への抗体の結合を媒介し得る。抗体が、５ｘ１０－８Ｍ未満のＫＤ、より好ましくは１ｘ１０－８Ｍ未満のＫＤ、より好ましくはＫＤ、６ｘ１０－９Ｍ未満のＫＤ、より好ましくは３ｘ１０－９Ｍ未満のＫＤ、更により好ましくは２ｘ１０－９Ｍ未満のＫＤにて抗原Ｘに結合するならば、該抗体は、抗原Ｘに「特異的に結合する」といえる。抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体または好ましくはヒト抗体であり得る。重鎖定常領域を、グリコシル化の型またはその程度に影響を及ぼすように遺伝子設計して、抗体の半減期を延長させること、エフェクター細胞または補体系との相互作用を増強または低下させること、または別のある性質を調節することができる。遺伝子設計は、１以上のアミノ酸の置換、付加または削除によるか、あるドメインを別のイムノグロブリン型由来のドメインに置き換えるか、または前記組合せにより達成され得る。
抗体の「抗原結合フラグメント」および「抗原結合部分」(または、単純に「抗体部分」または「抗体フラグメント」)とは、抗原に特異的に結合する能力を保持する１以上の抗体フラグメントを意味する。抗体の抗原－結合機能は、完全長抗体のフラグメント、例えば(ｉ)Ｆａｂフラグメント、即ちＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価フラグメント；(ｉｉ)Ｆ(ａｂ')２フラグメント、即ちヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価フラグメント；(ｉｉｉ)主にヒンジ領域の部分を有するＦａｂであるＦａｂ'フラグメント(例えば、Abbas et al., Cellular and Molecular Immunology, 6th Ed., Saunders Elsevier 2007を参照されたい)；(ｉｖ)ＶＨおよびＣＨ１ドメインから成るＦｄフラグメント；(ｖ)抗体の１つのアームのＶＬおよびＶＨドメインから成るＦｖフラグメント；(ｖｉ)ＶＨドメインから成るｄＡｂフラグメント(Ward et al., (1989) Nature 341:544-546)；(ｖｉｉ)単離された相補性決定領域領域(ＣＤＲ)；および(ｖｉｉｉ)ナノボディ、すなわち１つの可変ドメインおよび２つの定常ドメインを含有する重鎖可変領域により発揮されることが示されている。好ましい抗原結合フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆ(ａｂ')２、Ｆａｂ'、ＦｖおよびＦｄフラグメントである。さらに、Ｆｖフラグメントの２つのドメインであるＶＬおよびＶＨは、別の遺伝子にコードされているが、組み換え手法を用いて、それらを合成リンカーにより連結させて、ＶＬおよびＶＨ領域が対になり一価の分子を形成する１つのタンパク質鎖(１本鎖Ｆｖ(ｓｃＦｖ)として知られる)として作製できる；例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426；およびHuston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883を参照されたい。このような１本鎖抗体もまた、用語、抗体の「抗原結合部位」に含まれる。
別段の記載が無ければ－例えば、配列表における線形の行上のナンバリングに関して－抗体の重鎖または軽鎖の可変領域(ＶＨまたはＶＬ)におけるアミノ酸の位置に関するナンバリングは、Ｋａｂａｔシステム(Kabat et al., "Sequences of Proteins of immunological interest, 5th ed., Pub. No. 91-3242, U.S. Dept. Health & HumanServices, NIH, Bethesda, Md., 1991, 以後「Ｋａｂａｔ」という)に従い、抗体の重鎖または軽鎖の定常領域(ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３またはＣＬ)におけるアミノ酸の位置に関するナンバリングは、Ｋａｂａｔに示されたようなＥＵインデックスに従う(Lazar et al., US 2008/0248028 A1を参照されたい；この開示内容は、出典明示により本明細書の一部に含まれる(例えば、この使用法など)。さらに、ImMunoGeneTics Information System(IMGT)は、そのウェブサイトにて"IMGT Scientific Chart：Correspondence between C Numberings"の表題にて、重鎖定常領域についてＥＵナンバリングシステムおよびＫａｂａｔナンバリングの対応を示している。
「単離された抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を意味する(例えば、抗原Ｘを特異的に結合する単離された抗体とは、抗原Ｘ以外の抗原を特異的に結合する抗体を実質的に含まない)。しかし、抗原Ｘを特異的に結合する単離された抗体は、他の抗原(例えば、別の種由来の抗原Ｘ分子)との交差反応性を有する。特定の実施態様において、単離された抗体は、ヒト抗原Ｘに特異的に結合し、別の(非ヒト)抗原Ｘの抗原とは交差反応しない。さらに、単離された抗体は、他の細胞物質および／または化学物質を実質的に含んでいない可能性がある。
「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」は、特定のエピトープについて１つの結合特異性および親和性を提示する単分子組成物である抗体分子の調製物を意味する。
「ヒト抗体」は、フレームワークおよびＣＤＲ領域(および定常領域、もし存在する場合)の双方が、ヒト生殖細胞系のイムノグロブリン配列から得られる可変領域を有する抗体を意味する。ヒト抗体は、後の修飾、例えば天然または合成の修飾を含み得る。ヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列イムノグロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基(例えば、インビトロでのランダムまたは部位特異的突然変異が導入される突然変異またはインビボでの体細胞突然変異)を包含し得る。しかし、「ヒト抗体」は、別の哺乳類の種、例えばマウスから得られたＣＤＲ配列がヒトのフレームワーク配列に組み込まれた抗体を含まない。
「ヒトモノクローナル抗体」は、フレームワークおよびＣＤＲ領域の両方が、ヒト生殖細胞系のイムノグロブリン配列から得られる可変領域を有する単結合特異性を提示する抗体を意味する。一実施態様において、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合されたヒト重鎖導入遺伝子および軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する遺伝子組み換え非ヒト動物、例えば、遺伝子組み換えマウスから得られたＢ細胞を包含するハイブリドーマにより提供される。
「脂肪族」とは、特定数の炭素原子(例えば、「Ｃ３脂肪族」、「Ｃ１－５脂肪族」、「Ｃ１－Ｃ５脂肪族」または「Ｃ１～Ｃ５脂肪族」のように、この後者３つのフレーズは、１～５個の炭素原子を有する脂肪族基と同義である)を有するか、または炭素原子の数が明確に特定されていない場合は、１～４個の炭素原子(不飽和脂肪族基の例では２～４個の炭素)を有する直鎖または分枝鎖の飽和または不飽和の非芳香族炭化水素基を意味する。同様に、Ｃ２－４アルケン、Ｃ４－Ｃ７脂環式化合物のような別の形式で炭素数を用いられることも理解される。同様に、「(ＣＨ２)１－３」などの用語は、下付き文字としての略記が１、２または３であって、前記単語が、ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２およびＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２を示すことは理解される。
「アルキル」とは、飽和脂肪族基を意味しており、炭素原子数を表すために同様の慣習が適用できる。例としては、Ｃ１－Ｃ４アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｔ－ブチル、１－ブチル、２－ブチルなどを包含するが、これに限定するものではない。「アルキレン」は、アルキル基の二価のカウンターパート、例えばＣＨ２ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２およびＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２を意味する。
「アルケニル」とは、少なくとも一つの炭素－炭素の二重結合を有する脂肪族基を意味しており、炭素原子数を表すために同様の慣習が適用できる。例としては、Ｃ２－Ｃ４アルケニル基は、エテニル(ビニル)、２－プロペニル(アリルまたはプロパ－２－エニル)、ｃｉｓ－１－プロペニル、ｔｒａｎｓ－１－プロペニル、Ｅ－(またはＺ－)２－ブテニル、３－ブテニル、１,３－ブタジエニル(ブタ－１,３－ジエニル)などを包含するが、これに限定されるものではない。
「アルキニル」とは、少なくとも一つの炭素－炭素三重結合を有する脂肪族基を意味しており、炭素原子数を表すために同様の慣習が適用できる。例としては、Ｃ２－Ｃ４アルキニル基は、エチニル(アセチレニル)、プロパルギル(プロパ－２－イニル)、１－プロピニル、ブタ－２－イニルなどを包含する。
「脂環式」とは、１～３個の環を有する飽和または不飽和の非芳香族炭化水素基を意味しており、各環は３～８個(好ましくは、３～６個)の炭素原子を有するものである。「シクロアルキル」は、各環が飽和である脂環式基を意味する。「シクロアルケニル」は、少なくとも一つの環が、少なくとも一つの炭素－炭素二重結合を有する脂環式基を意味する。「シクロアルキニル」は、少なくとも一つの環が、少なくとも一つの炭素－炭素三重結合を有する脂環式基を意味する。例としては、脂環式基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロオクチルおよびアダマンチルを包含するが、これに限定するものではない。好ましい脂環式基は、シクロアルキル基、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。「シクロアルキレン」は、シクロアルキル基の二価のカウンターパートを意味する。
「ヘテロ脂環式」は、少なくとも一つのその環において３個まで(好ましくは、１～２個)の炭素が、Ｎ、ＯまたはＳから独立して選択されるヘテロ原子により置換されている(このＮおよびＳは所望により酸化されていてもよく、かつＮが所望により四級化されてもよい)脂環式基を意味する。好ましい脂環式基は、５～６員である１つの環から成る。同様に、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクロアルケニル」および「ヘテロシクロアルキニル」とは、少なくとも一つのその環が上記のように修飾されているシクロアルキル、シクロアルケニルまたはシクロアルキニル基の各々を意味する。ヘテロ脂環式基の例は、アジリジニル、アゼチジニル、１,３－ジオキサニル、オキセタニル、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロチオピラニルスルホン、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、チオモルホリニルスルホン、１,３－ジオキソラニル、テトラヒドロ－１,１－ジオキソチエニル、１,４－ジオキサニル、チエタニルなどを包含する。「ヘテロシクロアルキレン」は、ヘテロシクロアルキルの二価のカウンターパートを意味する。
「アルコキシ」、「アリールオキシ」、「アルキルチオ」および「アリールチオ」は、－Ｏ(アルキル)、－Ｏ(アリール)、－Ｓ(アルキル)および－Ｓ(アリール)を各々意味する。この例は、各々メトキシ、フェノキシ、メチルチオおよびフェニルチオである。
「ハロゲン」または「ハロ」は、より狭義の意味が示されない限り、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
「アリール」は、単環、二環または三環系(好ましくは、単環式)を有する炭化水素基を意味し、ここで各環は、３～７個の炭素原子を有しており、少なくとも一つの環が芳香族である。該環系の環は、互いに縮合され得るか(ナフチルのように)、または互いに結合され得るか(ビフェニルのように)、非芳香族環(インダニルまたはシクロヘキシルフェニルのように)と縮合され得るか、または結合され得る。更なる例としては、アリール基は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントラセニルおよびアセナフチルを包含するが、これに限定するものではない。「アリーレン」は、アリール基の二価のカンウターパートを意味し、例えば１,２－フェニレン、１,３－フェニレンまたは１,４－フェニレンである。
「ヘテロアリール」は、各環が３～７個の炭素原子を有しており、かつ少なくとも一つの環が、Ｎ、ＯまたはＳから独立して選択される１～４個のヘテロ原子を含有する芳香族環(ここで、ＮおよびＳは、所望により酸化されていてもよく、Ｎは所望により四級化されてもよい)である単環、二環または三環系(好ましくは、５員～７員の単環)を有する基を意味する。芳香族環を含有する少なくとも一つのヘテロ原子は、別の環と縮合され得るか(ベンゾフラニルまたはテトラヒドロイソキノリルのように)、または別の環と直接結合され得る(フェニルピリジルまたは２－シクロペンチルピリジルなど)。更なる例としては、ヘテロアリール基は、ピロリル、フラニル、チオフェニル(チエニル)、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、Ｎ－オキソピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、シンノリニル、キノザリニル、ナフチリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フェノチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、ジベンゾチオフェニル、アクリジニルなどを包含する。「ヘテロアリーレン」は、ヘテロアリール基の二価のカウンターパートを意味する。
ある部分が置換されていてもよいことを、例えば「置換されていない、または置換されたＣ１－Ｃ５アルキル」または「所望により置換されていてもよいヘテロアリール」にあるような、「置換されていない、または置換された」または「所望により置換されていても」のフレーズを用いて示す場合、そのような部分は、１以上の、好ましくは１～５、より好ましくは１または２の、独立して選択される置換基を有し得る。置換基および置換パターンにより、置換基が結合する部分を考慮して当業者により選択され、化学的に安定で、かつ当該分野の技術および本明細書に記載した方法により合成できる化合物が提供される。好ましい実施態様において「置換されていない、または置換された」または「所望により置換されていてもよい」として、基が規定されている場合、かかる基は置換されていない。
「アリールアルキル(ヘテロ脂環式)アルキル」、「アリールアルケニル」、「アリールアルキニル」、「ビアリールアルキル」などは、場合により、アリール、ヘテロ脂環式、ビアリール基などで置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル基を意味し、この基は、場合により、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基でオープンな(満たされていない)原子価であってもよく、例えば、ベンジル、フェネチル、Ｎ－イミダゾイルエチル、Ｎ－モルホリノエチルなどでもよい。逆に、「アルキルアリール」、「アルケニルシクロアルキル」などは、アルキル、アルケニルなどの基で置換されたアリール、シクロアルキルなどの基を意味し、例えばメチルフェニル(トリル)またはアリルシクロヘキシルであり得る。「ヒドロキシアルキル」、「ハロアルキル」、「アルキルアリール」、「シアノアリール」などは、アルキル、アリールなどの基を意味し、場合により、１以上の同定された置換基(場合により、ヒドロキシル、ハロなどで)で置換されていてもよい。
例えば、許容され得る置換基は、アルキル(特に、メチルまたはエチル)、アルケニル(特に、アリル)、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、脂環式基、ヘテロ脂環式基、ハロ(特に、フルオロ)、ハロアルキル(特に、トリフルオロメチル)、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル(特に、ヒドロキシエチル)、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｏ(ハロアルキル)(特に、－ＯＣＦ３)、－Ｏ(シクロアルキル)、－Ｏ(ヘテロシクロアルキル)、－Ｏ(アリール)、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ(アルキル)、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｈ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＯＨ、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ２、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＯＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、アジド、－ＮＨ２、－ＮＨ(アルキル)、－Ｎ(アルキル)２、－ＮＨ(アリール)、－ＮＨ(ヒドロキシアルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｈ、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨ２、－ＯＳＯ２(アルキル)、－ＳＨ、－Ｓ(アルキル)、－Ｓ(アリール)、－Ｓ(シクロアルキル)、－Ｓ(＝Ｏ)アルキル、－ＳＯ２(アルキル)、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＳＯ２ＮＨ(アルキル)、－ＳＯ２Ｎ(アルキル)２などを包含するが、これに限定するものではない。
置換される基が脂肪族基である場合、好ましい置換基は、アリール、ヘテロアリール、脂環式基、ヘテロ脂環式基、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｏ(ハロアルキル)、－Ｏ(シクロアルキル)、－Ｏ(ヘテロシクロアルキル)、－Ｏ(アリール)、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ(アルキル)、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ(アルキル)、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＯＨ、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ２、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＯＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、アジド、－ＮＨ２、－ＮＨ(アルキル)、－Ｎ(アルキル)２、－ＮＨ(アリール)、－ＮＨ(ヒドロキシアルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｈ、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨ２、－ＯＳＯ２(アルキル)、－ＳＨ、－Ｓ(アルキル)、－Ｓ(アリール)、－Ｓ(＝Ｏ)アルキル、－Ｓ(シクロアルキル)、－ＳＯ２(アルキル)、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＳＯ２ＮＨ(アルキル)および－ＳＯ２Ｎ(アルキル)２を包含する。より好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ(アリール)、＝Ｏ、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、アジド、－ＮＨ２、－ＮＨ(アルキル)、－Ｎ(アルキル)２、－ＮＨ(アリール)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｈ、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２および－ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨ２である。特に好ましいものは、フェニル、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、Ｃ１－Ｃ４アルクオキシ、Ｏ(Ｃ２－Ｃ４アルキレン)ＯＨおよびＯ(Ｃ２－Ｃ４アルキレン)ハロである。
置換される基が、脂環式基、ヘテロ脂環式基、アリール基またはヘテロアリール基である場合、好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｏ(ハロアルキル)、－Ｏ(アリール)、－Ｏ(シクロアルキル)、－Ｏ(ヘテロシクロアルキル)、アルキルチオ、アリールチオ、－Ｃ(＝Ｏ)(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｈ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＯＨ、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ２、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＯＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、アジド、－ＮＨ２、－ＮＨ(アルキル)、－Ｎ(アルキル)２、－ＮＨ(アリール)、－ＮＨ(ヒドロキシアルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｈ、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨ２、－ＯＳＯ２(アルキル)、－ＳＨ、－Ｓ(アルキル)、－Ｓ(アリール)、－Ｓ(シクロアルキル)、－Ｓ(＝Ｏ)アルキル、－ＳＯ２(アルキル)、－ＳＯ２ＮＨ２、－ＳＯ２ＮＨ(アルキル)および－ＳＯ２Ｎ(アルキル)２である。より好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｈ、－ＣＯ２Ｈ、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＯＨ、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ２、－Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－Ｃ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＯＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｏ(ヒドロキシアルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＯＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２、－ＮＨ２、－ＮＨ(アルキル)、－Ｎ(アルキル)２、－ＮＨ(アリール)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｈ、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ２、－ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨ(アルキル)、－ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｎ(アルキル)２および－ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨ２である。特に好ましいものは、Ｃ１－Ｃ４アルキル、シアノ、ニトロ、ハロおよびＣ１－Ｃ４アルコキシである。
範囲が「Ｃ１－Ｃ５アルキル」または「５～１０％」のように記載されている場合、この範囲は、最初の例ではＣ１およびＣ５の通りに、また二番目の例では５％および１０％の通りに、その範囲のエンドポイントを包含する。
特定の立体異性体が、具体的に示されない限り(例えば、構造式において相応するキラル中心で太字または点線で書いた結合により、構造式においてＥまたはＺ配置を有するような二重結合の記載により、または立体化学を指定する命名法を用いて)、全ての立体異性体は、純粋な化合物ならびにその混合物として、本発明の範囲内に包含される。別段の記載が無ければ、個々のエナンチオマー、ジアステレオマー、幾何異性体ならびにその組合せおよび混合物の全てが、本発明に包含される。
当業者は、化合物が、互変異性体(例えば、ケトおよびエノール形態)、共鳴構造および双性イオン形体を有し得ること、またこれらが本明細書で使用される構造式に示されるものと等価であること、該構造式が、かかる互変異性体、共鳴構造体または双性イオン形体を包含することは理解されよう。
「医薬的に許容し得るエステル」は、インビボ(例えば、ヒトの体内で)で加水分解して、親化合物またはその塩を提供するか、またはそれ自体親化合物と同等の活性を有するエステルを意味する。適切なエステルは、Ｃ１－Ｃ５アルキル、Ｃ２－Ｃ５アルケニルまたはＣ２－Ｃ５アルキニルエステル、特にメチル、エチルまたはｎ－プロピルである。
「医薬的に許容される塩」は、医薬組成物として適切な化合物の塩を意味する。化合物が１以上の塩基性基を有する場合、該塩は、酸付加塩、例えば硫酸塩、ヒドロブロミド、酒石酸塩、メシル酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、パモ酸塩(エンボン酸塩)、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、塩酸塩、乳酸塩、硫酸メチル、フマル酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、ラクトビオン酸塩、スベリン酸塩、トシル酸塩などであってもよい。化合物が１以上の酸性基である場合、該塩は、塩、例えばカルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、アンモニウム塩、亜鉛塩、ピペラジン塩、トロメタミン塩、リチウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、4-フェニルシクロヘキシルアミン塩、ベンザチン塩、ナトリウム塩、テトラメチルアンモニウム塩などであり得る。多形結晶形態および溶媒和物は、本発明の範囲内に包含される。
本明細書の式ｅにおいて、結合に対して直角となる波線
Figure 0007159295000007
 または結合手の末端にあるアスタリスク(＊)は、共有結合部位を表している。例えば、式：
Figure 0007159295000008
 において、Ｒが、
Figure 0007159295000009
であるか、またはＲが、
Figure 0007159295000010
であるという記載は、
Figure 0007159295000011
を意味する。
本明細書の式において、芳香族環の２つの炭素原子の間を横切る結合手は、この結合手に結合された基が、環に当然存在している水素が除かれることにより利用できるようになる芳香族環のいずれかの位置に存在し得ることを意味する。例示すると、式：
Figure 0007159295000012
は、
Figure 0007159295000013
 を表す。
別の例においては、
Figure 0007159295000014
 は、
Figure 0007159295000015
 を表す。
通常、互変異性体構造は、一貫性かつ利便性のために、本明細書においてはエノール形態で示されている：
Figure 0007159295000016
当業者には、それらが等量のケト体となり得る、即ち２つの互変異性体平衡となることは理解されよう。
化合物
式(Ｉ)中のＲ１は、好ましくは、ｎ－ＢｕＯ、ｎ－ＢｕＮＨ、ＥｔＯ、ＭｅＯまたはＭｅＯＣＨ２ＣＨ２Ｏであり；より好ましくは、ｎ－ＢｕＯまたはＭｅＯＣＨ２ＣＨ２Ｏであり；最も好ましくｎ－ＢｕＯである。
式(Ｉ)中の(ＣＨ２)ｘＲ４の下付き文字ｘは、好ましくは２である。
式(Ｉ)および(Ｉａ)において、Ｒ４は、好ましくはＯＨ、Ｃｌ、
Figure 0007159295000017
 である。
適切な基Ｒ４、例えばビシクロアルキルおよびスピロシクロアルキルのその他の例示は、以下：
Figure 0007159295000018
 に示される。
一実施形態において、式Ｉの化合物は、式(Ｉａ)：
Figure 0007159295000019
 (式中、Ｒ１がｎ－ＢｕＯまたはＭｅＯＣＨ２ＣＨ２Ｏであり、好ましくはｎ－ＢｕＯである)
により示される。
式(Ｉａ)の化合物の例には、
Figure 0007159295000020
Figure 0007159295000021
 が包含される。
表Ａは、本明細書に開示した化合物についての生物学的活性データを示す。データ内の１セットは、本明細書の以下に記載したとおり、ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ(登録商標)ＴＬＲ７レポーターアッセイを用いるＴＬＲ７アゴニズム活性に関する。別のデータセットは、インターロイキン６(ＩＬ－６)、即ちＴＬＲ７経路に重要な役割を果たすサイトカインの誘導に関する。比較のために、レシキモド(Ｒｅｓｉｑｕｉｍｏｄ)、ベサトリモド(Ｖｅｓａｔｏｌｉｍｏｄ)、ガーディキモド(Ｇａｒｄｉｑｕｉｍｏｄ)および化合物Ｂ(ＣＡＳ Ｒｅｇ．Ｎｏ.２２６９０６－８４－９)の活性も示される。
Figure 0007159295000022
コンジュゲート
概要
本明細書に開示されたＴＬＲ７アゴニストは、局所投与またはターゲティング送達によるか、あるいはターゲティング基を含むコンジュゲートにより目的の作用部位に送達され得る。好ましくは、ターゲティング基とは、抗体またはその抗原結合部分であり、その抗原は目的とする作用付近に存在しており、例えば、目的とする作用部位が腫瘍(癌)であるならば腫瘍関連抗原である。好ましくは、腫瘍関連抗原は、正常細胞と比べると、癌細胞により特異的または過剰に発現される。腫瘍関連抗原は、癌細胞の表面に存在し得るか、その癌細胞周辺において癌細胞により分泌され得る。
一態様において、式(ＩＩ)：
Figure 0007159295000023
 [式中、Ｚは、ターゲティング基であり、Ｄは、本発明のアゴニストであり、－(ＸＤ)ａＣ(ＸＺ)ｂ－は、ＺおよびＤを連結するという理由から、それらをまとめて「リンカー基」または「リンカー」と称される。リンカー内にて、Ｃは、Ｄの目的とする生物学的作用部位または部位付近で開裂されるように設計された開裂可能な基である；ＸＤおよびＸＺは、ＤとＣおよびＣとＺを、夫々空間的に分離するスペーサー基(または「スペーサー」)である；下付き文字ａ、ｂおよびｃは、独立して、０または１(即ち、ＸＤ、ＸＺおよびＣの存在は任意である)である]
により示される本発明の化合物およびリガンドを含むコンジュゲートが提供される。下付き文字ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０(好ましくは、１、２、３または４)である。Ｄ、ＸＤ、Ｃ、ＸＺおよびＺは、より詳細に後述される。
抗原または受容体が存在している標的組織または細胞に結合することにより、Ｚは、その場所にコンジュゲートを導く。標的組織または細胞で基Ｃが開裂することで、Ｄを放出して、その効果を局所的に発揮させる。この方法において、Ｄの正確な送達が、目的の作用部位で達成されて、必要な投薬量を低下することができる。またＤは、通常、コンジュゲートされた状態では生物学的に不活性(または、かなり活性が低い)であるので、これによりオフターゲット作用を低減できる。
下付き文字ｍに示されるように、各Ｚは、結合に利用できる部位Ｚの数および用いる実験条件によって、１以上のＤとコンジュゲートできる。個々のＺが、Ｄの数までコンジュゲートされるが、コンジュゲートの調製物は、統計学的平均値を反映しているＤ：Ｚの非整数比として判定されることは当業者には理解されよう。この比は、置換比(「ＳＲ」)または薬剤－抗体比(「ＤＡＲ」)として示される。
ターゲティング基Ｚ
好ましくは、ターゲティング基Ｚは抗体である。便宜上かつ簡潔化のために、限定するものではないが、Ｚおよびそのコンジュゲートについての本明細書における詳細な説明は、それらが抗体であるという文脈で書かれているが、所望により変更して、Ｚの別のタイプをコンジュゲートし得ることも当業者には理解されよう。例えば、ターゲティング基として葉酸を含むコンジュゲートは、その表面上に葉酸受容体を有する細胞を標的とし得る(Leamon et al., Cancer Res. 2008, 68 (23), 9839)。同じ理由から、本明細書における詳細な説明は、主に、ＺとＤ(ｍ＝１)が１：１の比として記載されている。
本発明のコンジュゲートに使用され得る抗体は、以下の抗原を認識するものを包含する：メソテリン、前立腺特異的膜抗原(ＰＳＭＡ)、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ７０、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７Ｈ４(Ｏ８Ｅとしても知られる)、タンパク質チロシンキナーゼ７(ＰＴＫ７)、グリピカン－３、ＲＧ１、フコシル－ＧＭ１、ＣＴＬＡ－４およびＣＤ４４。抗体は、動物(例えば、マウス)の抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、または好ましくはヒト抗体であってもよい。抗体は、好ましくは、モノクローナル、特にモノクローナルヒト抗体である。前記抗原の幾つかに対するヒトモノクローナル抗体の製造は、Korman et al., US 8,609,816 B2 (2013；B7H4、08Eとしても知られる；特に、抗体2A7、1G11および2F9)；Rao-Naik et al., 8,097,703 B2 (2012；CD19；特に、抗体5G7、13F1、46E8、21D4、21D4a、47G4、27F3および3C10)；King et al., US 8,481,683 B2(2013；CD22；特に、抗体12C5、19A3、16F7および23C6)；Keler et al., US 7,387,776 B2 (2008；CD30；特に、抗体5F11、2H9および17G1)；Terrett et al., US 8,124,738 B2 (2012；CD70；特に、抗体2H5、10B4、8B5、18E7および69A7)；Korman et al., US 6,984,720 B1 (2006；CTLA-4；特に、抗体10D1、4B6および1E2)；Korman et al., US 8,008,449 B2 (2011；PD-1；特に、抗体17D8、2D3、4H1、5C4、4A11、7D3および5F4)；Huang et al., US 2009/0297438 A1 (2009；PSMA、特に、抗体1C3、2A10、2F5、2C6)；Cardarelli et al., US 7,875,278 B2 (2011；PSMA；特に、抗体4A3、7F12、8C12、8A11、16F9、2A10、2C6、2F5および1C3)；Terrett et al., US 8,222,375 B2 (2012；PTK7；特に、抗体3G8、4D5、12C6、12C6aおよび7C8)；Harkins et al., US 7,335,748 B2(2008；RG1；特に、抗体A、B、CおよびD)；Terrett et al., US 8,268,970 B2 (2012；メソテリン；特に、抗体3C10、6A4および7B1)；Xu et al., US 2010/0092484 A1 (2010；CD44；特に、抗体14G9.B8.B4、2D1.A3.D12および1A9.A6.B9)；Deshpande et al., US 8,258,266 B2 (2012；IP10；特に、抗体1D4、1E1、2G1、3C4、6A5、6A8、7C10、8F6、10A12、10A12Sおよび13C4)；Kuhne et al., US 8,450,464 B2 (2013；CXCR4；特に、抗体F7、F9、D1およびE2)；およびKorman et al., US 7,943,743 B2 (2011；PD-L1；特に、抗体3G10、12A4、10A5、5F8、10H10、1B12、7H1、11E6、12B7および13G4)；に開示され、これらの開示内容は、出典明示により本明細書に組み込まれる。好ましくは、前記抗体は、抗メソテリン抗体である。
抗体であることに加えて、Ｚはまた、抗体フラグメント(例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ'、Ｆ(ａｂ')２、ＦｄまたはＦｖ)または抗体擬体、例えばアフィボディ、ドメイン抗体(ｄＡｂ)、ナノボディ、ユニボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、バーサボディ(ｖｅｒｓａｂｏｄｙ)、デュオカリン、リポカリンまたはアビメールでもあり得る。
Ｚ上の異なる幾つかの反応基のいずれか１つは、例えばリジン残基内のε－アミノ基、ペンダント炭水化物基、アスパラギン酸またはグルタミン酸側鎖上のカルボン酸基、システイン－システインジスルフィド基およびシステインチオール基を含めたコンジュゲーション部位であり得る。コンジュゲーションに適切な抗体の反応基についてのレビューは、例えば、Garnett, Adv. Drug Delivery Rev. 2001, 53, 171-216およびDubowchik and Walker, Pharmacology & Therapeutics 1999, 83, 67-123を参照されたい、これらの開示内容は、出典明示により本明細書に組み込まれる。
殆どの抗体は、複数のリジン残基を有しており、リジンのε－アミノ基により、アミド、ウレア、チオウレアまたはカルバメート結合を介してコンジュゲートされ得る。
システイン側鎖中のチオール(－ＳＨ)基を用いて、いくつかの方法によりコンジュゲートを形成できる。前記チオール基は、この基とリンカー上のチオール基の間にジスルフィド結合を形成するために使用できる。別の方法は、リンカー上のマレイミド基へのマイケル付加反応である。
通常、抗体は、システイン残基を有しているが、それらの全てのシステインが鎖間または鎖内のジスルフィド結合に関与しており、遊離のチオール基は存在しない。遊離のチオール基を生成させるために、元々のジスルフィド基を還元することができる。例えば、Packard et al., Biochemistry 1986, 25, 3548；King et al., Cancer Res. 1994, 54, 6176；and Doronina et al., Nature, Biotechnol. 2003, 21, 778を参照されたい。あるいは、抗体を突然変異させることにより、システインを別のアミノ酸に代えて置き換えることにより、またはシステインをポリペプチド鎖中に導入することにより、遊離の－ＳＨ基を有するシステインを導入することができる。例えば、Eigenbrot et al., US 7,521,541 B2 (2009)；Chilkoti et al., Bioconjugate Chem. 1994, 5, 504；Urnovitz et al., US 4,698,420 (1987)；Stimmel et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 30445；Bam et al., US 7,311,902 B2 (2007)；Kuan et al., J. Biol. Chem. 1994, 269, 7610；Poon et al., J. Biol. Chem. 1995, 270, 8571；Junutula et al., Nature Biotechnology 2008, 26, 925 and Rajpal et al., US Provisional Application No. 62/270245, filed Dec. 21, 2015を参照されたい。また別の手法としては、システインは、重鎖または軽鎖のＣ末端に加えられる。例えば、Liu et al., US 8,865,875 B2 (2014)；Cumber et al., J. Immunol. 1992, 149, 120；King et al, Cancer Res. 1994, 54, 6176；Li et al., Bioconjugate Chem. 2002, 13, 985；Yang et al., Protein Engineering 2003, 16, 761；and Olafson et al., Protein Engineering Design & Selection 2004, 17, 21を参照されたい。このパラグラフに引用された文献の開示内容は、出典明示により本明細書の一部に組み込まれる。
リンカーおよびそれらの成分
上記の通り、リンカーは、３つまでの要素：開裂可能な基Ｃおよび任意のスペーサーＸＺおよびＸＤを含む。
基Ｃは、生理学的条件下において開裂できる。好ましくは、基Ｃは、コンジュゲートが血中で循環している間は比較的安定であるが、コンジュゲートが目的とするその作用部位に到達した時点で容易に開裂される。
好ましい基Ｃは、血清中のプロテアーゼによる開裂とは異なり、標的細胞内部のプロテアーゼにより選択的に開裂されるペプチドである。通常、該ペプチドは、１～２０個のアミノ酸、好ましくは１～６個のアミノ酸、より好ましくは２～３個のアミノ酸を含む。アミノ酸は、天然および／または非天然のα－アミノ酸であってもよい。天然アミノ酸は、遺伝子コードによりコードされたアミノ酸、加えてそれらから誘導されるアミノ酸、例えばヒドロキシプロリン、γ－カルボキシグルタメート、シトルリンおよびＯ－ホスホセリンである。この明細書において、用語「アミノ酸」とは、アミノ酸アナログおよびアミノ酸擬体も包含する。アナログとは、Ｒ基が天然アミノ酸の中に存在する基ではないこと以外、天然アミノ酸の一般構造Ｈ２Ｎ(Ｒ)ＣＨＣＯ２Ｈと同じ構造を有する化合物である。アナログの例示は、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニン－スルホキシドおよびメチオニンメチルスルホニウムが挙げられる。アミノ酸擬体は、α－アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、α－アミノ酸と類似した様式で機能する化合物である。アミノ酸は、遺伝子的にコードされたアミノ酸の「Ｌ」立体化学として、同様にエナンチオマーの「Ｄ」立体化学としても存在し得る。
好ましくは、Ｃは、プロテアーゼに対して開裂認識配列であるアミノ酸配列を含有する。多くの開裂認識配列は、当業者には知られている。例えば、Matayoshi et al. Science 247：954 (1990)；Dunn et al. Meth. Enzymol. 241：254 (1994)；Seidah et al. Meth. Enzymol. 244：175 (1994)；Thornberry, Meth. Enzymol. 244：615 (1994)；Weber et al. Meth. Enzymol. 244：595 (1994)；Smith et al. Meth. Enzymol. 244：412 (1994)；and Bouvier et al. Meth. Enzymol. 248：614 (1995)を参照されたい；これらの内容は、出典明示により、本明細書にその内容が組み込まれる。
基Ｃは、癌近傍において細胞外マトリックスに存在するプロテアーゼ、例えば、死亡癌細胞周辺で放出されたプロテアーゼまたは癌細胞により分泌された腫瘍関連プロテアーゼにより開裂されるように選択され得る。細胞外の腫瘍関連プロテアーゼの例は、プラスミン、マトリックスメタロプロテアーゼ(ＭＭＰ)、チメット(ｔｈｉｍｅｔ)オリゴペプチダーゼ(ＴＯＰ)およびＣＤ１０である。例えば、Trouet et al., US 7,402,556 B2 (2008)；Dubois et al., US 7,425,541 B2 (2008);およびBebbington et al., US 6,897,034 B2 (2005)を参照されたい。カテプシンＤは、通常、細胞内部に存在するリソソーマル酵素であるが、腫瘍環境内に存在することもあり、これはおそらく死亡癌細胞により放出されるのであろう。
酵素によるものとして設計されたコンジュゲートのために、Ｃは、好ましくは、カテプシンＢ、Ｃ、Ｄ、Ｈ、ＬおよびＳなどのプロテアーゼ、特にカテプシンＢによる開裂のために選択されたアミノ酸配列を含む。カテプシンＢの開裂可能なペプチドの例は、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｌｙｓ－Ｖａｌ－Ａｌａ、Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｌｙｓ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｇｌｙ、Ｖａｌ－ＧｌｎおよびＡｓｐ－Ｖａｌ－Ｃｉｔ(ここで、アミノ酸配列は、前後関係が別段明確に記載されていない限り、Ｈ２Ｎ－ＡＡ２－ＡＡ１－ＣＯ２Ｈのように、Ｎ－から－Ｃ方向に記載される)。Dubowchik et al., Biorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 3341；Dubowchik et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 3347;およびDubowchik et al., Bioconjugate Chem. 2002, 13, 855を参照されたい；これらの開示内容は、出典明示により本明細書の一部に組み込まれる。
ペプチジルリンカーを開裂するために利用し得る別の酵素は、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎで優先的に開裂するレグマイン、リソソーマルシステインプロテアーゼである。
一実施態様において、基Ｃは、２つのアミノ酸配列、－ＡＡ２－ＡＡ１－(式中、ＡＡ１はリジン、アルギニンまたはシトルリンであり、ＡＡ２はフェニルアラニン、バリン、アラニン、ロイシンまたはイソロイシンである)を含むペプチドである。別の実施態様において、Ｃは、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ａｌａ－Ｖａｌ、Ｖａｌ－Ａｌａ－Ｖａｌ、Ｌｙｓ－Ｌｙｓ、Ａｌａ－Ａｓｎ－Ｖａｌ、Ｖａｌ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ、Ｃｉｔ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ａｌａ－Ａｌａ－Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｃｉｔ、ＳｅｒおよびＧｌｕからなる群から選択される１～３つのアミノ酸の配列から構成される。より好ましくは、Ｃは前記基から選択される２～３つのアミノ酸ペプチドである。
１つのアミノ酸からなる開裂可能な基Ｃの製造および設計は、Ｃｈｅｎら(US 8,664,407 B2(2014))に開示されており、これらの開示内容は、出典明示により本明細書に組み込まれる。
基Ｃは、ＺまたはＤに直接結合され得る；即ち、スペーサーＸＺまたはＸＤは、場合により非存在であり得る。
存在する場合、スペーサーＸＺは、ＣおよびＺの間の空間的分離を提供して、前者が後者による抗原結合と立体的に干渉するか、または後者が前者の開裂を立体的に干渉することを防ぐ。さらに、スペーサーＸＺを用いて、コンジュゲートに高い溶解性または低い凝集性という特性を与えることができる。スペーサーＸＺは、あらゆる数の組合せでアセンブルされ得る１以上のモジュラーセグメントを含み得る。スペーサーＸＺとして適切なセグメントの例は、以下：
Figure 0007159295000024
(ここで、下付き文字ｇは、０または１であり、下付き文字ｈは、１～２４であり、好ましくは２～４である)
およびその組合せである。これらのセグメントを、下記に図示したように合わせることもできる：
Figure 0007159295000025
スペーサーＸＤは、もし存在するならば、ＣおよびＤの間の空間的分離を提供して、後者が、前者の開裂と立体的または電気的に干渉することを防ぐ。スペーサーＸＤは、追加の分子量および化学的官能基をコンジュゲートに導入するようにも役立ち得る。一般的には、追加の質量および官能基は、コンジュゲートの血清半減期およびその他の特性に影響を及ぼす。このように、スペーサー基の適正な選択により、コンジュゲートの血清半減期を調節することができる。スペーサーＸＤもまた、スペーサーＸＺについて上記したものと同様に、モジュラーセグメントからアセンブルされ得る。
スペーサーＸＺおよび／またはＸＤは、存在している場合、各々ＺとＣの間またはＤとＣの間に、好ましくは４～２５個の原子、より好ましくは４～２０個の原子の直線状の間隔を提供する。
リンカーは、抗体および薬剤の共有結合に加えて、別の機能を果たし得る。例えば、リンカーは、ポリ(エチレングリコール)(「ＰＥＧ」)基を含有し得る。コンジュゲーション工程には、通常、水性媒体中での薬剤－リンカーおよび抗体のカップリング工程が含まれるので、ＰＥＧ基の多くは、薬剤－リンカーの水溶性を増強する。また、ＰＥＧ基は、溶解度を増強し得るか、または得られるＡＤＣの凝集を減少し得る。ＰＥＧ基が存在する場合、ＰＥＧ基は、スペーサーＸＺまたはＸＤ、あるいは両方のいずれかに組み込まれ得る。ＰＥＧ基中のリピート単位数は、２～２０、好ましくは４～１０であり得る。
スペーサーＸＺまたはＸＤ、あるいは両方のいずれかは、自己崩壊基を含み得る。自己崩壊基とは、(１)Ｃ、およびＺまたはＤのいずれかに結合される基、かつ(２)基Ｃからの開裂により、場合によってはＺまたはＤからの開裂により、自己崩壊基自体の結合を開裂させる反応経路が開始されるような構造を有する基である。言い換えると、ＺまたはＤとは遠い部位(基Ｃからの開裂)での反応は、ＸＺ－ＺまたはＸＤ－Ｄの結合を同じ様に開裂させる。自己崩壊基の存在は、スペーサーＸＤの場合には望まれる。この理由は、コンジュゲートの開裂後に、スペーサーＸＤまたはその部分がＤとの結合を維持していた場合、Ｄの生物学的活性が損なわれる可能性があるためである。自己崩壊基の使用は、特に、開裂可能な基Ｃがポリペプチドである場合に必要であり、この場合、ペプチド開裂と立体的または電気的な干渉からＤを保護するために、自己崩壊基は、通常、ポリペプチドに隣接して置かれる。
Ｄのヒドロキシル基またはアミノ基に結合された自己崩壊基(ｉ)－(ｖ)の例を、以下に示す：
Figure 0007159295000026
自己崩壊基は、点線ａおよびｂ(または点線ｂおよびｃ)の間にある構造であり、隣接する構造的特徴は文脈に示される。自己崩壊基(ｉ)および(ｖ)は、Ｄ－ＮＨ２(即ち、コンジュゲーションはアミノ基を介する)と結合され、一方で自己崩壊基(ｉｉ)、(ｉｉｉ)および(ｉｖ)は、Ｄ－ＯＨ(即ち、コンジュゲーションは、ヒドロキシル基またはカルボキシル基による)と結合される。酵素[構造(ｉ)－(ｖ)の例においてはペプチダーゼ、および構造(ｖｉ)の例においてはβ－グルクロニダーゼ]による点線ｂで結合がの開裂により、点線ａで結合の開裂をもたらす自己崩壊の反応経路が開始され、その結果、この場合はＤ－ＯＨまたはＤ－ＮＨ２の放出へと至る。例として、構造(ｉ)～(ｉｖ)についての自己崩壊メカニズムを、以下に示す：
Figure 0007159295000027
言い換えれば、自己崩壊基の一部分にて、最初の化学結合の開裂がおこり、自己崩壊基の異なる部分で、第二の化学結合(自己崩壊基と薬剤とを連結する結合)の開裂へと至る工程経路が順に開始されて、薬剤が放出される。
幾つかの例において、自己崩壊基は、構造(ｖｉｉ)に示されるように、縦一列に用いられ得る。そのような場合、点線ｃでの開裂により、点線ｂとｃとの間の１,６－排除反応により、基の自己崩壊が始まり、その後に環化排除反応により点線ａとｂとの間に基の自己崩壊がおこる。自己崩壊基に関する更なる開示については、Carl et al., J. Med. Chem. 1981, 24, 479；Carl et al., WO 81/01145 (1981)；Dubowchik et al., Pharmacology & Therapeutics 1999, 83, 67；Firestone et al., US 6,214,345 B1 (2001)；Toki et al., J. Org. Chem. 2002, 67, 1866；Doronina et al., Nature Biotechnology 2003, 21, 778(erratum, p. 941)；Boyd et al., US 7,691,962 B2；Boyd et al., US 2008/0279868 A1；Sufi et al., WO 2008/083312 A2；Feng, US 7,375,078 B2；Jeffrey et al., US 8,039,273；およびSenter et al., US 2003/0096743 A1を参照されたい；これらの開示内容は、出典明示により本明細書に組み込まれる。
別の実施態様において、ＺおよびＤは、開裂出来ないリンカーにより結合される(即ち、Ｃは存在しない)。Ｄの代謝により、最終的には、リンカーをＤの生物学的活性と干渉しない小分子の付加基にまで分解される。
コンジュゲーション技術
本明細書において開示されたＴＬＲ７アゴニストのコンジュゲートは、好ましくは、Ｄおよびリンカー(ＸＤ)ａ(Ｃ)ｃ(ＸＺ)ｂ(式中、ＸＤ、Ｃ、ＸＺ、ａ、ｂおよびｃは、式(ＩＩ)に定義された通りである)を含む化合物を最初に製造して、
式(ＩＩＩ)：
Figure 0007159295000028
 (式中、Ｒ３１は、Ｚ上の相補的官能基と反応するために適切な官能基である)
により示される薬剤－リンカー化合物を形成して、コンジュゲートを形成することにより製造される。適切な基Ｒ３１の例は、アミノ、アジド、チオール、シクロオクチン、
Figure 0007159295000029
 (式中、Ｒ３２は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、メシレートまたはトシレートであり、Ｒ３３は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｆ、ＯＨ、－Ｏ－Ｎ－スクシンイミジル、－Ｏ－(４－ニトロフェニル)、－Ｏ－ペンタフルオロフェニルまたは－Ｏ－テトラフルオロフェニルである)
が包含される。適切な基：Ｄ－(ＸＤ)ａＣ(ＸＺ)ｂ－Ｒ３１を製造するために広く使用できる化学的手法は、Ng et al., US 7,087,600 B2 (2006)；Ng et al., US 6,989,452 B2 (2006)；Ng et al., US 7,129,261 B2 (2006)；Ng et al., WO 02/096910 A1；Boyd et al., US 7,691,962 B2；Chen et al., US 7,517,903 B2 (2009)；Gangwar et al., US 7,714,016 B2 (2010)；Boyd et al., US 2008/0279868 A1；Gangwar et al., US 7,847,105 B2 (2010)；Gangwar et al., US 7,968,586 B2 (2011)；Sufi et al., US 8,461,117 B2 (2013)；およびChen et al., US 8,664,407 B2 (2014)に開示されており、これらの開示内容は、出典明示によりその内容は本明細書に組み込まれる。
好ましい反応性官能基－Ｒ３１は、－ＮＨ２、－ＯＨ、－ＣＯ２Ｈ、－ＳＨ、マレイミド、シクロオクチン、アジド(－Ｎ３)、ヒドロキシルアミノ(－ＯＮＨ２)またはＮ－ヒドロキシスクシンイミドである。特に好ましい官能基－Ｒ３１は、
Figure 0007159295000030
 である。
－ＯＨ基は、抗体上のカルボキシ基(例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸側鎖上の)とエステル化され得る。
－ＣＯ２Ｈ基は、－ＯＨ基とエステル化され得るか、または抗体上のアミノ基(例えば、リジン側鎖上で)とアミド化され得る。
Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド基は、官能基的に活性化されたカルボキシル基であり、アミノ基(例えば、リジンからの)との反応により好都合にアミド化され得る。
マレイミド基は、マイケル付加反応において、抗体上の－ＳＨ基(例えば、システインによるか、またはスルフィドリル官能基を導入するような抗体の化学修飾による)とコンジュゲートされ得る。
抗体がコンジュゲーションに利用できるシステイン－ＳＨを有しない場合、リジン残基の側鎖内のε－アミノ基を、２－イミノチオランまたはＮ－スクシンイミジル－３－(２－ピリジルジチオ)プロピオネート(「ＳＰＤＰ」)と反応させて、遊離チオール(－ＳＨ)基を導入して、いわばシステイン代用物を作出することができる。チオール基を、マレイミドまたは他の求核試薬アクセプター基と反応させて、コンジュゲーションを行うことができる。２－イミノチオランを用いた場合のこのメカニズムを下記に示した。
Figure 0007159295000031
通常、抗体あたりに２～３つのチオールのチオール化レベルが達成される。代表的な方法については、Cong et al., US 8,980,824 B2 (2015)を参照されたい；出典明示により、その内容は本明細書に組み込まれる。
逆の配置では、抗体Ｚを、Ｎ－スクシンイミジル ４－(マレイミドメチル)－シクロヘキサンカルボキシレート(「ＳＭＣＣ」)またはそのスルホン化バリアントであるスルホ－ＳＭＣＣ(これらの両方は、Sigma-Aldrichから購入できる)で修飾して、それらにマレイミド基を導入することができる。その後、コンジュゲーションを、リンカー上の－ＳＨ基を有する薬剤-リンカー化合物を用いて行い得る。
別のコンジュゲーション方法は、銅不含の「クリック・ケミストリー」を用いるものであり、アジド基が直線状シクロオクチンと付加環化して、１,２,３－トリアゾール環を形成する。例えば、Agard et al., J. Amer. Chem. Soc. 2004, 126, 15046；Best, Biochemistry 2009, 48, 6571を参照されたい；この開示内容は、出典明示により本明細書に組み込まれる。アジドは、抗体上に存在していても、あるいは逆に、薬剤－リンカー基上のシクロオクチンに存在していてもよい。好ましいシクロオクチン基は、ジベンゾシクロオクチン(ＤＩＢＯ)である。ＤＩＢＯ基を有する様々な試薬は、Invitrogen/Molecular Probes, Eugene, Oregonから購入できる。この反応は、例としてクリック・ケミストリー・コンジュゲーションを以下に示したもので、この反応では、ＤＩＢＯ基は、抗体(Ａｂ)：
Figure 0007159295000032
 に結合されている。
また別のコンジュゲーション技術は、非天然アミノ酸を抗体に導入することを含んでおり、この非天然アミノ酸は、薬剤基中の反応性官能基とのコンジュゲーションのための官能基を提供する。例えば、非天然アミノ酸であるｐ－アセチルフェニルアラニンは、Tian et al.,WO 2008/030612 A2(2008)に教示された通り、抗体または他のポリペプチドに導入され得る。ｐ－アセチルフェニルアラニン内のケトン基は、リンカー－薬剤基上のヒドロキシルアミノ基とオキシムを形成することによるコンジュゲーション基として存在し得る。あるいは、非天然アミノ酸であるｐ－アジドフェニルアラニンを、抗体に組み込んで、上記に説明したようにクリック・ケミストリーによるコンジュゲーションのためのアジド官能基を提供できる。非天然アミノ酸もまた、Goerke et al., US 2010/0093024 A1 (2010) and Goerke et al., Biotechnol. Bioeng. 2009, 102 (2), 400-416に教示されている通り、細胞不含法を用いて抗体または他のポリペプチド中に組み込まれ得る。前記開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。即ち、一実施態様において、コンジュゲートを作成するために使用される抗体は、非天然アミノ酸により置き換えられた１以上のアミノ酸を有しており、これは、好ましくは、ｐ－アセチルフェニルアラニンまたはｐ－アジドフェニルアラニン、より好ましくは、ｐ－アセチルフェニルアラニンである。
また別のコンジュゲーション技術は、酵素トランスグルタミナーゼ(好ましくは、Streptomyces mobaraensis由来のバクテリアトランスグルタミナーゼまたはＢＴＧ)を使用する技術である(Jeger et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2010, 49, 9995)。ＢＴＧは、グルタミンの側鎖のカルボキサミド(アミンアクセプター)およびアルキレンアミノ基(アミンドナー)(例えば、リジンまたは５－アミノ－ｎ－ペンチル基のε－アミノ基であり得る)との間にアミド結合を形成する。典型的なコンジュゲーション反応において、グルタミン残基は、抗体上に存在しており、一方でアルキレンアミノ基は、下記に示したようなリンカー－薬剤基上に存在する：
Figure 0007159295000033
ポリペプチド鎖上のグルタミン残基の位置は、ＢＴＧ媒介性のアミド基転移への感受性に対して大きな影響を及ぼす。抗体上のグルタミン残基は、通常ＢＴＧ基質ではない。しかし、抗体が脱グリコシル化されれば[該グリコシル化部位は、重鎖のアスパラギン２９７(Ｎ２９７；ＥＵインデックスによるナンバリング、Kabat et al., "Sequences of proteins of immunological interest." 5th ed., Pub. No. 91-3242, U.S. Dept. Health & Human Services, NIH, Bethesda, Md., 1991；以後「Ｋａｂａｔ」に記載した通り)である]、グルタミン２９５(Ｑ２９５)付近がＢＴＧ感受性となる。抗体は、ＰＮＧａｓｅ Ｆ(ペプチド-Ｎ-グリコシダーゼＦ)を用いる処理により、酵素的に脱グリコシル化され得る。あるいは、定常領域にＮ２９７Ａ突然変異を導入することにより、Ｎ２９７グリコシル化部位を排除して、グリコシドを含まずに抗体を合成できる。さらに、Ｎ２９７Ｑ置換は、グリコシル化を排除するのみならず、アミンアクセプターでもある第二のグルタミン残基を(位置２９７で)誘導できることも判っている。そのため、一実施態様において、抗体は脱グリコシル化される。別の実施態様において、抗体はＮ２９７Ｑ置換を有する。合成後の修飾またはＮ２９７Ａ突然変異の導入による脱グリコシル化によって、２つのＢＴＧ反応性グルタミン残基／抗体(重鎖あたりに１ヶ所、２９５位置で)が生成されるが、一方で、Ｎ２９７Ｑ置換を有する抗体は、４つのＢＴＧ－反応性グルタミン残基(重鎖あたりに２ヶ所、位置２９５および２９７で)を有することは当業者には理解されるであろう。
抗体は、グルタミン含有ペプチドまたは「タグ(ｔａｇ)」(例えば、Pons et al., US 2013/0230543 A1(2013)およびRao-Naik et al., WO 2016/144608 A1教示されている通り)を抗体に導入することにより、ＢＴＧ媒介性のコンジュゲーションに感受性となり得る。
補完的手法において、ＢＴＧの基質特異性は、Rao-Naik et al., WO 2017/059158 A1 (2017)に教示された通り、そのアミノ酸配列を改変することにより、非修飾抗体中のグルタミン２９５と反応できるように変わり得る。
一方で、最も広く利用可能なバクテリアのトランスグルタミナーゼは、S. mobaraensis由来のものであるが、多少異なる基質特異性を有するその他のバクテリア由来のトランスグルタミナーゼも、例えばStreptoverticillium ladakanum由来のトランスグルタミナーゼなども検討され得る(Hu et al., US 2009/0318349 A1 (2009), US 2010/0099610 A1 (2010)およびUS 2010/0087371 A1 (2010))。
第一級または第二級アルキルアミンを有する本発明のアゴニストは、特に、該アミンがリンカーに結合するための官能基を提供するため、コンジュゲートに使用するために適切である。かかるＴＬＲ７アゴニスト-リンカー化合物の例は、化合物１２であって、これは酵素的に開裂可能なリンカーを含有する。図２は、化合物１２を製造し得るスキームを示す。
Figure 0007159295000034
非酵素的に開裂可能なリンカーを含有するＴＬＲ７アゴニスト－リンカー化合物の例は、化合物１４である。図３は、化合物１４を合成するためのスキームを示す。
Figure 0007159295000035
化合物１２および１４はどちらも、第一級アルキルアミノ基を含有しており、これによりトランスグルタミナーゼを用いてコンジュゲーションすることが可能である。適切なコンジュゲーション方法は、下記の実施例に記述される。
コンジュゲーションは、Levary et al., PLoS One 2011, 6(4), e18342；Proft, Biotechnol. Lett. 2010, 32, 1-10；Ploegh et al., WO 2010/087994 A2 (2010);およびMao et al., WO 2005/051976 A2(2005)に教示される通り、酵素ソルターゼＡを用いても実施され得る。ソルターゼＡの認識モチーフ(通常ＬＰＸＴＧであって、Ｘは任意の天然アミノ酸である)は、リガンドＺに存在していてもよく、また求核性アクセプターモチーフ(通常、ＧＧＧ)は、式(ＩＩＩ)中の基Ｒ３１であってもよい；あるいは、その逆であってもよい。
ＴＬＲ７アゴニストコンジュゲート
前記技術を用いて、ＴＬＲ７アゴニストコンジュゲート、例えば下記に示されるコンジュゲートが、製造され得る：
Figure 0007159295000036
(式中、ｍは、１、２、３または４であり、Ａｂは抗体である)。
ペグ化
ポリ(エチレングリコール)(ＰＥＧ)鎖および薬剤(「ＰＥＧ化」)の結合により、後者の薬物動態特性を改善することができる。薬剤の循環半減期は、時には一桁以上も増長されると同時に、目的とする治療効果を達成するのに必要な投薬量を低下することができる。また、ＰＥＧ化により、薬剤の代謝分解を減らし、その免疫原性を低下させることもできる。概要として、Kolate et al., J. Controlled Release 2014, 192, 167を参照されたい。
当初ＰＥＧ化は生物製剤に適用された。２０１６年の時点では、１０以上のＰＥＧ化生物製剤が承認されていた(Turecek et al., J. Pharmaceutical Sci. 2016, 105, 460.)。最近では、生物製剤に対するこのコンセプトの適用が成功したことが刺激となって、低分子薬のペグ化が注目されている。前記した利点に加えて、ＰＥＧ化低分子薬は、溶解度を増加させて、毒性効果を低下させ得る(Li et al. Prog. Plymer Sci. 2013, 38, 421)。
本明細書に開示された化合物は、ＰＥＧ化され得る；即ち、共有結合されるポリ(エチレングリコール)基を有する。化合物が、脂肪族ヒドロキシルまたは脂肪族第一級または第二級アミン、例えば化合物Ｉａ－０１またはＩａ－０２(矢印)の場合に、化合物は、従来技術を利用して、カルボキシ含有ＰＥＧ分子、エステル、アミド、カーボネートまたはカルバメート基(例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ＨＡＴＵ、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステルなど)を介してＰＥＧ化され得る。医薬分子をＰＥＧ化するための様々な別の方法は、Alconcel et al., Polymer Chem. 2011, 2, 1442に開示されており、この開示内容は、出典明示によりその内容を本明細書の一部に組み込まれる。
Figure 0007159295000037
必要であれば、本明細書に開示されたＴＬＲ７アゴニストを、自己崩壊基を含む酵素的に開裂可能なリンカーを介してＰＥＧ化して、所望の様式にて非ＰＥＧ化アゴニストを放出させることができる。さらに、ＰＥＧ含有分子が、タンパク質に結合するための適切な官能基、例えばアミンを持っている場合は、ＰＥＧ化は、抗体などのタンパク質とのコンジュゲーションと組み合わすことができる。このタンパク質は、更なる治療的機能を提供できるか、または、このタンパク質が抗体であれば、ターゲティング機能を提供できる。これらの概念は、以下の反応手順に示され、ＴＬＲ７－ＮＨ－Ｒは、一般的に、ＴＬＲ７アゴニスト：
Figure 0007159295000038
上記した反応手順において、バリン－シトルリン(Ｖａｌ－Ｃｉｔ)ジペプチドは、自己崩壊スペーサーとして機能するｐ－アミノベンジルオキシカルボニル(ＰＡＢＣ)基を有する酵素カテプシンＢにより開裂され得る。コンジュゲーションのための官能基はアミン基であり、Ｆｍｏｃ基により一時的に保護される。コンジュゲーションは、アシルアクセプターとして作用するグルタミン(Ｇｌｎ)側鎖を有する酵素トランスグルタミナーゼにより実施される。下付き文字ｘは、ＰＥＧのリピート単位数を示しているが、以下に説明するようにＰＥＧ化の目的に依って大きく変わり得る。ある目的のためには、ｘは比較的小さい数、例えば２、４、８、１２または２４であり得る。別の目的のためには、ｘは大きい数、例えば約４５～約９１０である。
この手順が例示であって、当業者には周知のその他の要因－ペプチド、自己崩壊基、コンジュゲーション方法、ＰＥＧの長さなど－を用い得ることは、当業者には理解されよう。上記の手順は、ＰＥＧ化およびコンジュゲーションを組み合わせるが、ＰＥＧ化はコンジュゲーションを必要としない(または必要としてもよい)ことは当業者には理解されよう。
化合物Ｉａ－０２の場合のように、化合物に脂肪族ヒドロキシル基または脂肪族の第一級または第二級アミンが無い場合、化合物は芳香族アミン(矢印)で更にＰＥＧ化されることができる。この部位でＰＥＧ化するための方法は、Zarraga,US 2017/0166384 A1(2007)に開示されており、この開示内容は、出典明示により本明細書の一部に組み込まれる。
Figure 0007159295000039
ある実施態様において、一つの分子内に連結された複数のＰＥＧ化されたアゴニストを有することが望まれ得る。例えば、４つのＰＥＧ化アームを、ペンタエリトリトール(Ｃ(ＣＨ２ＯＨ)４)で構築することができ、ＴＬＲ７アゴニストは、各ＰＥＧ化アームに結合され得る(Gao et al., US 2013/0028857 A1(2013)を参照されたい；この開示内容は、出典明示により、その内容を本明細書の一部として組み込まれる。
薬物動態を改変するために、一般的には、ＰＥＧ基は、約２ｋＤａ(約４５の－(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)－リピート単位に相当する)～約４０ｋＤａ(約９１０の－(ＣＨ２ＣＨ２Ｏ)－リピート単位に対応する)の間、より好ましくは約５ｋＤａ～約２０ｋＤａの間の式量を有するものが好ましい。即ち、上記式中の下付き文字ｘの範囲は、約４５～約９１０である。ＰＥＧ組成物は１００％同質ではなく、むしろ分子量の分布を提示することは理解されよう。即ち、参照として、例えば「２０ｋＤａ ＰＥＧ」とは、２０ｋＤａの平均分子量を有するＰＥＧを意味する。
ＰＥＧ化は、アゴニストの溶解度を改善するために使用され得ることもできる。そのような例には、短いＰＥＧ鎖(例えば、２、４、８、１２または２４のリピート単位を含むもの)が、使用され得る。
本発明の実施は、以下の実施例を参照してさらに理解され得る；その内容は、説明を目的としており、限定を意味するものではない。
実施例１－ＴＬＲ７アゴニストの合成
本実施例および図１は、本発明の化合物の合成に関する。
化合物１(ＣＡＳ Ｒｅｇ.Ｎｏ.２３８１４－１２－２；１.８ｇ，１１.０３ｍｍｏｌ)／ＭｅＯＨ(２０ｍＬ)の懸濁液を、塩化チオニル(２.４１６ｍＬ，３３.１ｍｍｏｌ)で処理して、０℃で滴加した。反応混合物を、６０℃で１時間加熱して、この反応が完了したことはＬＣＭＳにより示された。溶媒を、ロータリーエバポレーターを用いて蒸発させて、粗製エステル２を次工程に進めた。ＬＣＭＳ ＥＳＩ：Ｃ８Ｈ７Ｎ３Ｏ２としての計算値＝１７８.０５(Ｍ＋Ｈ＋)；実測値：１７８.０(Ｍ＋Ｈ＋)．
エステル２(１.９５４ｇ，１１.０３ｍｍｏｌ)、２－ブロモエタン－１－オール(２.７６ｇ，２２.０６ｍｍｏｌ)および炭酸カリウム(２.２８７ｇ，１６.５５ｍｍｏｌ)の混合物を、Ｎ,Ｎ－ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)中にて終夜６０℃で加熱した。ＬＣＭＳにより、２つの生成物、位置異性体３および４の形成が示された。固体混合物を濾過して、ＤＭＦを、Ｖ－１０エバポレーターで蒸発させて、粗生成物混合物を得て、これをさらなる精製をせずに次工程に進めた。
ＤＭＦ(１０ｍＬ)中の位置異性体３および４の混合物(２.４４０ｇ，１１.０３ｍｍｏｌ)を、ｔ－ブチルジメチルシリルクロリド(ＴＢＳＣｌ，１.９９５ｇ，１３.２４ｍｍｏｌ)、次いでイミダゾール(１.５０２ｇ，２２.０６ｍｍｏｌ)で処理して、２時間攪拌した。ＬＣＭＳは、反応の完了を示した。この反応混合物を、ＥｔＯＡｃ／飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で後処理した。粗生成物を、８０ｇシリカゲルカラムを用いて、０～５０％ＥＴＯＡｃ／ヘキサンで溶出するＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ(登録商標)装置で精製して、位置異性体５(０.９ｇ，２.６８ｍｍｏｌ，２４.３２％収率)および６(１.０ｇ，２.９８ｍｍｏｌ，２７.０％収率)を得た。位置異性体を、ベンジルメチレンおよび芳香族環上の近傍のプロトンの間のＮＯＥを用いて決定した。ＬＣＭＳ ＥＳＩ：Ｃ１６Ｈ２５Ｎ３Ｏ２Ｓｉについての計算値＝３３６.１６(Ｍ＋Ｈ＋)；実測値：３３６.１(Ｍ＋Ｈ＋)．
ＩＳＣＯ装置を用いて分離した後に、位置異性体５(０.９ｇ，２.６８ｍｍｏｌ)／ＴＨＦ(１０ｍＬ)の溶液を、０℃で、Ｒｅｄ－Ａｌ(２.１８１ｍＬ，６.７１ｍｍｏｌ)で処理して、３０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより、反応の完了が示された。反応を、ＭｅＯＨをゆっくりと添加することによりクエンチして、ＥｔＯＡｃ／塩水で後処理した。粗生成物７を次工程にそのまま使用した。
生成物７(２.９６ｇ，９.６３ｍｍｏｌ)／ジクロロメタン(ＤＣＭ，２０ｍＬ)溶液を、トリフェニルホスフィン(２.７８ｇ，１０.５９ｍｍｏｌ)で処理して、０℃に冷却した。Ｎ－ブロモスクシンイミド(ＮＢＳ，１.８８５ｇ，１０.５９ｍｍｏｌ)を、ゆっくりと加えて、冷浴を外して、３０分間攪拌して、その後にＬＣＭＳにより、反応の完了が示された。溶媒をエバポレートして、粗生成物を、８０ｇゴールドカラムを用いて０～５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出するＩＳＣＯ装置で精製して、目的の化合物８を無色ペースト状物として得た。ＬＣＭＳ ＥＳＩ：Ｃ１５Ｈ２４ＢｒＮ３ＯＳｉについての計算値＝３７１.０８(Ｍ＋Ｈ＋)；実測値：３７２.０(Ｍ＋Ｈ＋)．
化合物９(ＣＡＳ Ｒｅｇ.Ｎｏ.４７３９３０－５１－７，１.５７７ｇ，７.６１ｍｍｏｌ)の溶液を、炭酸セシウム(２.７３ｇ，８.３７ｍｍｏｌ)、次いで化合物８(３.１ｇ，８.３７ｍｍｏｌ)で処理して、６０℃で１時間加熱した後に、ＬＣＭＳにより反応の完了が示された。炭酸セシウムを濾去して、反応混合物を、ＥｔＯＡｃ(５０ｍＬ)で希釈して、３回水で洗った。生成物を濃縮して、１２０ｇシリカゲルのゴールドカラムを用いて、０～５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出するＩＳＣＯカラムで精製して、目的の化合物１０を白色固体として得た。ＬＣＭＳ ＥＳＩ：Ｃ２４Ｈ３６Ｎ８ＯＳｉについての計算値＝４９５.６(Ｍ－Ｈ＋)；実測値：４９５.２(Ｍ－Ｈ＋)．
ＣＨＣｌ３(１０ｍＬ)／ＴＨＦ(５ｍｌ)中の化合物１０(１.２７ｇ，２.５６ｍｍｏｌ)および酢酸ナトリウム(１.０４９ｇ，１２.７８ｍｍｏｌ)の溶液を、０℃に冷却して、反応が完了するまで臭素(０.２６３ｍＬ，５.１１ｍｍｏｌ)でゆっくりと処理した。反応を、１０％亜硫酸水素ナトリウム水溶液によりクエンチして、ＥｔＯＡｃで抽出した。粗乾燥臭素化生成物を、さらなる精製をせずに次工程に用いた。
ＭｅＯＨ(１０ｍＬ)中で粗臭素化生成物(１４７４ｍｇ，２.５６ｍｍｏｌ)およびリチウムメタノレート(９７２ｍｇ，２５.６ｍｍｏｌ)の溶液を、６０℃で終夜加熱した後、ＬＣＭＳにより臭素の置き換えが示された。ＭｅＯＨをエバポレートして、得られるスラリーを、ＨＣｌ水溶液(４.２７ｍＬ，２５.６ｍｍｏｌ)で処理して、６０℃で２時間加熱して、その後ＬＣＭＳにより反応の完了が示された。反応混合物を、ＮａＯＨ水溶液をゆっくりと添加して中和して、得られる濾液を水で洗った。固体を乾燥させて、粗生成物Ｉａ－０１を、黄色みを帯びた固体を得た。粗生成物を、０～５０％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ(０.１％ギ酸)で溶出するＳｈｉｍａｄｚｕ ｐｒｅｐ ＨＰＬＣ(ｘＢｒｉｄｇｅ ＰｒｅｐＣ１８ ５μｍ １９ｘ１５０ｍｍ ｃｏｌｕｍｎを用いる)で精製して、生成物含有画分を収集し、溶媒をＶ－１０エバポレーターを用いて蒸発させて、目的の化合物Ｉａ－０１を無色ペースト状物として得た。ＬＣＭＳ ＥＳＩ：Ｃ１８Ｈ２２Ｎ８Ｏ３についての計算値＝３９７.４(Ｍ－Ｈ＋)，実測値：３９７.２(Ｍ－Ｈ＋)．
化合物Ｉａ－０１(３０ｍｇ，０.０７５ｍｍｏｌ)の溶液を、塩化チオニル(１０.９９μＬ，０.１５１ｍｍｏｌ)で処理して、１時間超音波処理して、その後ＬＣＭＳにより反応の完了が示された。溶媒を、Ｖ－１０エバポレーターを用いてエバポレートして、粗生成物を、０～５０％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ(０.１％ギ酸)で溶出するＳｈｉｍａｄｚｕ ｐｒｅｐ ＨＰＬＣ(ｘＢｒｉｄｇｅ ＰｒｅｐＣ１８ ５μｍ １９ｘ１５０ｍｍｃｏｌｕｍｎを用いる)で精製して、生成物含有画分を収集して、溶媒を、Ｖ－１０エバポレーターを用いてエバポレートして、目的の化合物Ｉａ－０２を無色ペースト状物として得た。ＬＣＭＳ ＥＳＩ：Ｃ１８Ｈ２１ＣｌＮ８Ｏ２についての計算値＝４１５.８(Ｍ－Ｈ＋)，実測値：４１５.２(Ｍ－Ｈ＋)．
化合物Ｉａ－０２(０.０３１ｇ，０.０７５ｍｍｏｌ)／ＤＭＦ(０.５ｍＬ)の溶液を、シクロブタンアミン(０.０２７ｇ，０.３７５ｍｍｏｌ)で処理して、７０℃で２時間加熱した。ＬＣＭＳにより、反応の完了が示された。粗生成物を、０～５０％ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ(０.１％ギ酸)で溶出するＳｈｉｍａｄｚｕ ｐｒｅｐ ＨＰＬＣ(ｘＢｒｉｄｇｅ ＰｒｅｐＣ１８ ５μｍ １９ｘ１５０ｍｍ ｃｏｌｕｍｎを用いる)で精製して、生成物含有画分を収集して、溶媒を、Ｖ－１０エバポレーターを用いてエバポレートして、目的の生成物Ｉａ－０５を無色ペースト状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.84 - 7.73 (m, 1H), 7.45 (dd, J = 8.7, 1.5 Hz, 1H), 6.44 - 6.38 (m, 2H), 4.96 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 4.59 (q, J = 5.9 Hz, 2H), 4.08 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.12 - 2.97 (m, 1H), 2.87 (td, J = 6.3, 2.1 Hz, 2H), 1.98 - 1.87 (m, 2H), 1.54 (dt, J = 8.1, 6.3 Hz, 2H), 1.51 - 1.35 (m, 4H), 1.29 (qd, J = 7.4, 4.5 Hz, 2H), 0.82 (td, J = 7.3, 5.3 Hz, 3H). ＬＣＭＳ ＥＳＩ：Ｃ２２Ｈ２Ｎ９Ｏ２についての計算値＝４５０．５(Ｍ－Ｈ＋)；実測値：４５０.２(Ｍ－Ｈ＋).
一般的に前記方法に従うが、シクロブタンアミンの代りに様々なアミンを用いて、以下の表Ｂに記載した通り、式(Ｉ)の更なる化合物を製造した：
Figure 0007159295000040
式(Ｉ)の化合物(Ｒ３がＨまたはＭｅである)を、必要な変更を加えて、前記した技術を適用して、
Figure 0007159295000041
 の各々で化合物９をアルキル化することにより製造した。
実施例２－ＴＬＲ７アゴニスト活性アッセイ
本実施例は、本明細書に開示した化合物のＴＬＲ７アゴニスト活性をアッセイするための方法を記述するものである。
ヒトＴＬＲ７分泌型胎児アルカリホスファターゼ(ＳＥＡＰ)リポーター転移遺伝子を担持する改変型ヒト胎児腎臓のブルー細胞(ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ(登録商標)ＴＬＲ細胞；Invivogen)を、非選択的培養培地[１０％ウシ胎児血清(Sigma)を加えたＤＭＥＭ高グルコース(Invitrogen)]に懸濁した。ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ(登録商標)ＴＬＲ７細胞を、３８４ウェルの組織培養プレート(１５,０００細胞／ウェル)の各ウェルに加えて、３７℃で５％ＣＯ２にて１６～１８時間インキュベートした。化合物(１００ｎｌ)を、ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ(登録商標)ＴＬＲ細胞を含有するウェルに分配して、処理済み細胞を、３７℃で５％ＣＯ２にてインキュベートした。１８時間処理後に、１０μｌの新たに調整したＱｕａｎｔｉ－Ｂｌｕｅ(登録商標)試薬(Invivogen)を各ウェルに加えて、３０分間(３７℃，５％ＣＯ２)インキュベートして、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー(ＯＤ＝６２０ｎｍ)を用いてＳＥＡＰレベルを測定した。半数効果濃度(ＥＣ５０；アッセイのベースラインと最大反応値の間の半分の反応強度を誘導した化合物濃度)を計算した。
図４は、本発明の化合物(Ｉａ－０１)について、上記のようにして得られたデータを示す代表図である。
実施例３－ＩＬ－６誘導アッセイ
本実施例は、本明細書に開示された化合物によるインターロイキン６の誘導をアッセイするための方法を記述したものである。
ＤＭＳＯ中で希釈した化合物を、ＥＣＨＯアコースティック液体分注技術(２５ｎＬ／ウェル)を用いて透明なＶ底の３８４ウェルプレートの個々のウェル(Matrix Technologies)に移した。ヒト全血試料(２５ｕＬ)を、ＣｙＢｉｏ ＦｅｌｉＸ液体分注器を用いて各ウェルに加えた。プレートを３分間プレートシェーカー上で振盪した後、反応混合物を、３７℃で２０時間インキュベートした。Ｂａｓｅｌ ＲＰＭＩ １６４０培地(Ｌ－グルタミンを加えた)を各ウェル(２５ｕＬ／ウェル)に加えて、次いで遠心分離(４５０ｘｇ，５分間，周囲温度)により、各試料から溶出した血漿を得た。処理済血漿試料(３ｕＬ)を、次にＦｅｌｉＸ液体分注器を用いて白色の浅底３８４ウェル ＰｒｏｘｉＰｌａｔｅ(Perkin Elmer)の個々のウェルに移して、それらのインターロイキン６のレベルを、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ(PerkinElmer；説明書に従う)を用いて実測した。データ分析用ソフトウェアを用いて、化合物ＥＣ５０値を決定した(ベースラインは、平均ＤＭＳＯ値を用いて決定し、１００％の誘導は試験した最大濃度の参照化合物の値を用いて決定した)。ＥＣ５０は、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ(登録商標)などのソフトウェアを用いて決定し得る。
実施例４－トランスグルタミナーゼ媒介性コンジュゲーション
以下の方法を、アゴニスト－リンカー化合物(リンカーは、アミンドナーとして作用できるアミン基を有する)に関するトランスグルタミナーゼ媒介性コンジュゲーションのために用い得る。抗体は、トランスグルタミナーゼ反応性グルタミン、例えばＮ２９７ＡまたはＮ２９７Ｑ置換を有する抗体であり得る。コンジュゲーションは、抗体：酵素の５：１のモル比にて組み換えバクテリアトランスグルタミナーゼにより行われる。コンジュゲーションは、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ緩衝液(ｐＨ８.０)中において終夜３７℃でインキュベートした標準的プロトコールを用いて行われる。得られるコンジュゲートを、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ(ｐＨ８.０)を用いて事前平衡化したタンパク質Ａカラムで精製した。コンジュゲートを、０.１Ｍ ナトリウムクエン酸塩緩衝液(ｐＨ３.５)で溶出した。溶出画分を、１Ｍ Ｔｒｉｓ(ｐＨ９.０)で中和した。コンジュゲートを、２０ｍｇ／ｍＬソルビトール、１０ｍｇ／ｍＬグリシン(ｐＨ５.０)中で製造され得る。
当業者は、本実施例における条件および方法は、例示であり、限定するものではないこと、そのバリエーションまたはコンジュゲーションのための別の手法は当分野では既知であり、また本発明に使用できることは理解されよう。
前記した本発明の詳細な説明は、主に、または専ら本発明の特定の部分または態様に関連する文章を包含する。これは、明確化のため、または便宜上のためであって、特定の態様は、その態様が開示されている文章だけに関連しておらず、本明細書の開示は、様々な文章に存在する情報についての全ての適切な組み合わせを含むことを理解されたい。同様に、本明細書の様々な図および記載は、本発明の特定の実施態様に関連しているが、特定の態様が特定の図または実施態様の文章に開示されている場合、そのような特徴も、別の図または実施態様の文脈において、別の態様を組み合わせるか、または本発明において、適切な範囲に使用され得ることは理解されよう。
さらに、本発明は、ある好ましい実施態様に関して特に記載されているが、本発明は、かかる好ましい実施態様に限定するものではない。むしろ、発明の範囲は、添付の特許請求の範囲により規定される。
引用文献
第一著者(または発明者)および本明細書より過去の日付により省略形式で引用された以下の参考文献に対する全引用文献を以下に示します。これらの各参考文献は、参照によりすべての目的のために本明細書に組み込まれる。
Akinbobuyi et al., ACS 2013 69th Southwest Regional Meeting, Abstract SWRM-70, "Synthesis and evaluation of purine-based toll-like receptor 7 agonists and their 抗体 conjugates."
Akinbobuyi et al., ACS 2015 Joint Southeastern/Southwest Regional Meeting, Abstract 392, "Synthesis of functionalized purine analogs for 抗体 conjugation" [2015a].
Akinbobuyi et al., Tetrahedron Lett. 2015, 56, 458, "Facile syntheses of functionalized toll-like receptor 7 agonists" [2015b].
Akinbobuyi et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2016, 26, 4246, "Synthesis and immunostimulatory activity of substituted TLR7 agonists."
Barberis et al., US 2012/0003298 A1 (2012).
Beesu et al., J. Med. Chem. 2017, 60, 2084, "Identification of High-Potency Human TLR8 and Dual TLR7/TLR8 Agonists in Pyrimidine-2,4-diamines."
Berghoefer et al., J. Immunol. 2007, 178, 4072, "Natural and Synthetic TLR7 Ligands Inhibit CpG-A- and CpG-C-Oligodeoxynucleotide-Induced IFN-α Production."
Bonfanti et al., US 2014/0323441 A1 (2015) [2015a].
Bonfanti et al., US 2015/0299221 A1 (2015) [2015b].
Carson et al., US 2013/0202629 A1 (2013).
Carson et al., US 8,729,088 B2 (2014).
Carson et al., US 9,050,376 B2 (2015).
Carson et al., US 2016/0199499 A1 (2016).
Chan et al., Bioconjugate Chem. 2009, 20, 1194, "Synthesis and Immunological Characterization of Toll-Like Receptor 7 Agonistic Conjugates."
Chan et al., Bioconjugate Chem. 2011, 22, 445, "Synthesis and Characterization of PEGylated Toll Like Receptor 7 Ligands."
Cortez et al., US 2017/0044168 A1 (2017). [2017a].
Cortez et al., US 2017/0121421 A1 (2017). [2017b].
Desai et al., US 9,127,006 B2 (2015).
Ding et al., WO 2016/107536 A1 (2016).
Ding et al., US 2017/0273983 A1 (2017) [2017a].
Ding et al., WO 2017/076346 A1 (2017) [2017b].
Gadd et al., Bioconjugate Chem. 2015, 26, 1743, "Targeted Activation of Toll-Like Receptors: Conjugation of a Toll-Like Receptor 7 Agonist to a Monoclonal Antibody Maintains Antigen Binding and Specificity."
Graupe et al., US 8,993,755 B2 (2015).
Halcomb et al., US 9,161,934 B2 (2015).
Hashimoto et al., US 2009/0118263 A1 (2009).
Hirota et al., US 6,028,076 (2000).
Holldack et al., US 2012/0083473 A1 (2012).
Isobe et al., US 6,376,501 B1 (2002).
Isobe et al., JP 2004137157 (2004).
Isobe et al., J. Med. Chem. 2006, 49 (6), 2088, "Synthesis and Biological Evaluation of Novel 9-Substituted-8-Hydroxyadenine Derivatives as Potent Interferon Inducers."
Isobe et al., US 7,521,454 B2 (2009) [2009a].
Isobe et al., US 2009/0105212 A1 (2009) [2009b].
Isobe et al., US 2011/0028715 A1 (2011).
Isobe et al., US 8,148,371 B2 (2012).
Jensen et al., WO 2015/036044 A1 (2015).
Kasibhatla et al., US 7,241,890 B2 (2007).
Koga-Yamakawa et al., Int. J. Cancer 2013, 132 (3), 580, "Intratracheal and oral administration of SM-276001: A selective TLR7 agonist, leads to antitumor efficacy in primary and metastatic models of cancer."
Li et al., US 9,902,730 B2 (2018).
Lioux et al., US 9,295,732 B2 (2016).
Lund et al., Proc. Nat’l Acad. Sci (USA) 2004, 101 (15), 5598, "Recognition of single-stranded RNA viruses by Toll-like receptor 7."
Maj et al., US 9,173,935 B2 (2015).
McGowan et al., J. Med. Chem. 2017, 60, 6137, "Identification and Optimization of Pyrrolo[3,2-d]pyrimidine Toll-like Receptor 7 (TLR7) Selective Agonists for the Treatment of Hepatitis B."
Musmuca et al., J. Chem. Information & Modeling 2009, 49 (7), 1777, "Small-Molecule Interferon Inducers. Toward the Comprehension of the MolecularDeterminants through Ligand-Based Approaches."
Ogita et al., US 2007/0225303 A1 (2007).
Peterson, Rachel; Honor Program Thesis, "Synthesis of Sulfur and Amino-8-Substituted Adenine Derivatives as TLR7 Agonists," Baylor University (2014).
Pryde, US 7,642,350 B2 (2010).
Roethle et al., J. Med. Chem 2013, 56, 7324, "Identification and Optimization of Pteridinone Toll-like Receptor 7 (TLR7) Agonists for the Oral Treatment of Viral Hepatitis."
Seifert, Zacharie; Master of Science Thesis, "Synthesis and Evaluation of 8-Substituted Adenine Derivatives as Toll-like Receptor 7 Agonists," Baylor University (2015).
Vernejoul et al., US 2014/0141033 A1 (2014).
Yu et al., PLoS One 2013, 8 (3), e56514, "Toll-Like Receptor 7 Agonists: Chemical Feature Based Pharmacophore Identification and Molecular Docking Studies."
Zhang et al., Immunity 2016, 45, 737, "Structural Analysis Reveals that Toll-like Receptor 7 Is a Dual Receptor for Guanosine and Single-Stranded RNA."
Zurawski et al., US 2012/0231023 A1 (2012).

Claims (9)

  1. 式(Ｉ)：
    Figure 0007159295000042
     ［式中、
    Ｒ１は、(Ｃ１－Ｃ５アルキル)Ｏ、(Ｃ１－Ｃ２アルキル)Ｏ(ＣＨ２)２－３Ｏ、(Ｃ１－Ｃ５アルキル)Ｃ(＝Ｏ)Ｏ、(Ｃ１－Ｃ５アルキル)ＮＨ、(Ｃ１－Ｃ２アルキル)Ｏ(ＣＨ２)２－３ＮＨまたは(Ｃ１－Ｃ５アルキル)Ｃ(＝Ｏ)ＮＨであり；
    Ｒ２は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ハロ、Ｏ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、ＣＮまたはＮＯ２であり；
    Ｒ３は、Ｈ、Ｍｅまたは(ＣＨ２)ｘＲ４であり、式中の下付き文字ｘは、２、３または４であり；および
    Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨ(Ｃ１－Ｃ５アルキル)、Ｎ(Ｃ１－Ｃ５アルキル)２、ＮＨ(Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル)、ＮＨ(Ｃ４－Ｃ８ビシクロアルキル)、ＮＨ(Ｃ６－Ｃ１０スピロシクロアルキル)、Ｎ(Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル)２、ＮＨ(ＣＨ２)１－３(アリール)、Ｎ((ＣＨ２)１－３(アリール))２、構造：
    Figure 0007159295000043
    を有する環状アミン基、６員の芳香族基またはヘテロ芳香族基、あるいは５員のヘテロ芳香族基であり；
    ここで、アルキル、シクロアルキル、ビシクロアルキル、スピロシクロアルキル、環状アミン、６員の芳香族基またはヘテロ芳香族基、あるいは５員のヘテロ芳香族基は、所望により、ＯＨ、ハロ、ＣＮ、(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、Ｏ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、Ｃ(＝Ｏ)(Ｍｅ)、ＳＯ２(Ｃ１－Ｃ３アルキル)、Ｃ(＝Ｏ)(Ｅｔ)、ＮＨ２、ＮＨ(Ｍｅ)、Ｎ(Ｍｅ)２、ＮＨ(Ｅｔ)、Ｎ(Ｅｔ)２およびＮ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)２から選択された１以上の置換基で置換されていてもよく；および
    シクロアルキル、ビシクロアルキル、スピロアルキルまたは環状アミン基は、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、Ｎ(Ｃ１－Ｃ３アルキル)またはＮ(Ｂｏｃ)により置換されたＣＨ２基を有していてもよい］
    の構造を有する、化合物。
  2. Ｒ１が、ｎ－ＢｕＯまたはＭｅＯＣＨ２ＣＨ２Ｏであり、Ｒ４がＯＨ、Ｃｌ、
    Figure 0007159295000044
    である、請求項１記載の化合物。
  3. 式(Ｉａ)：
    Figure 0007159295000045
     により示される構造を有する、請求項１記載の化合物。
  4. Ｒ１が、ｎ－ＢｕＯまたはＭｅＯＣＨ２ＣＨ２Ｏであり、Ｒ４が、ＯＨ、Ｃｌ、
    Figure 0007159295000046
     である、請求項３記載の化合物。
  5. Ｒ１が、ｎ－ＢｕＯである、請求項４記載の化合物。
  6. Figure 0007159295000047
    Figure 0007159295000048
    からなる群から選択される、請求項１記載の化合物。
  7. 抗体とコンジュゲートされる、請求項１記載の化合物。
  8. ２ｋＤａ～４０ｋＤａの大きさのポリ(エチレングリコール)基と共有結合される、請求項１記載の化合物。
  9. トル様受容体７の活性化により治療できる症状を治療するための、請求項１記載の化合物。
JP2020509090A 2017-08-16 2018-08-16 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体 Active JP7159295B2 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022164019A JP7474820B2 (ja) 2017-08-16 2022-10-12 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762546095P 2017-08-16 2017-08-16
US62/546,095 2017-08-16
PCT/US2018/000310 WO2019036023A1 (en) 2017-08-16 2018-08-16 6-AMINO-7,9-DIHYDRO-8H-PURIN-8-ONE DERIVATIVES AS IMMUNOSTIMULANT TOLL (TLR7) RECEPTOR 7 AGONISTS

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2022164019A Division JP7474820B2 (ja) 2017-08-16 2022-10-12 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2020531472A JP2020531472A (ja) 2020-11-05
JP7159295B2 true JP7159295B2 (ja) 2022-10-24

Family

ID=63713994

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2020509090A Active JP7159295B2 (ja) 2017-08-16 2018-08-16 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体
JP2022164019A Active JP7474820B2 (ja) 2017-08-16 2022-10-12 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2022164019A Active JP7474820B2 (ja) 2017-08-16 2022-10-12 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体

Country Status (9)

Country Link
US (3) US10472361B2 (ja)
EP (1) EP3668872B1 (ja)
JP (2) JP7159295B2 (ja)
KR (1) KR20200041912A (ja)
CN (1) CN111032657B (ja)
AR (1) AR112414A1 (ja)
ES (1) ES2908984T3 (ja)
TW (1) TW201920180A (ja)
WO (1) WO2019036023A1 (ja)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102726248B1 (ko) 2016-07-07 2024-11-05 더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티 항체-애쥬번트 접합체
US10472361B2 (en) * 2017-08-16 2019-11-12 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a benzotriazole moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
WO2019209811A1 (en) 2018-04-24 2019-10-31 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic toll-like receptor 7 (tlr7) agonists
US11554120B2 (en) 2018-08-03 2023-01-17 Bristol-Myers Squibb Company 1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (TLR7) agonists and methods and uses therefor
ES2943474T3 (es) 2018-11-30 2023-06-13 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpo que comprende una extensión carboxiterminal de una cadena ligera que contiene glutamina, conjugados del mismo, y métodos y usos
KR20210102334A (ko) 2018-12-12 2021-08-19 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 트랜스글루타미나제 접합을 위해 변형된 항체, 그의 접합체, 및 방법 및 용도
JP7287708B2 (ja) 2019-02-08 2023-06-06 プロジェニア インコーポレイテッド Ｔｏｌｌ－ｌｉｋｅ受容体７または８アゴニストとコレステロールの結合体およびその用途
AU2020241686A1 (en) 2019-03-15 2021-11-04 Bolt Biotherapeutics, Inc. Immunoconjugates targeting HER2
JP2023512204A (ja) 2020-01-27 2023-03-24 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー トール様受容体７（ＴＬＲ７）アゴニストとしての１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｄ］ピリミジン化合物
KR20220132589A (ko) 2020-01-27 2022-09-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물
US20230144824A1 (en) 2020-01-27 2023-05-11 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
US20230131192A1 (en) 2020-01-27 2023-04-27 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
US20230348468A1 (en) * 2020-01-27 2023-11-02 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
US12485123B2 (en) 2020-01-27 2025-12-02 Bristol-Myers Squibb Company 1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (TLR7) agonists
KR20220132601A (ko) * 2020-01-27 2022-09-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물
WO2021154663A1 (en) 2020-01-27 2021-08-05 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
CN115151546A (zh) * 2020-01-27 2022-10-04 百时美施贵宝公司 作为Toll样受体7(TLR7)激动剂的C3-取代的1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶化合物
JP7811014B2 (ja) 2020-03-02 2026-02-04 プロジェニア インコーポレイテッド 病原菌外壁成分基盤の生病原体模倣ナノ粒子及びその製造方法
JP2023536954A (ja) 2020-08-04 2023-08-30 プロジェニア インコーポレイテッド 活性化部位が一時的に不活性化したトール様受容体７または８作用薬と機能性薬物の結合体およびその用途
US20230355750A1 (en) 2020-08-04 2023-11-09 Progeneer Inc. Kinetically acting adjuvant ensemble
CN116322751A (zh) 2020-08-04 2023-06-23 蛋白科技先锋 包含能够动力学控制的佐剂的mRNA疫苗
CN114315861A (zh) * 2020-09-27 2022-04-12 上海维申医药有限公司 大环tlr7激动剂、其制备方法、药物组合物及其用途
CA3196221A1 (en) 2020-10-21 2022-04-28 Univerza V Ljubljani Conjugated tlr7 and nod2 agonists
WO2025040743A1 (en) 2023-08-22 2025-02-27 Univerza V Ljubljani Conjugated tlr7 and rig-i agonists
WO2025093657A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Univerza V Ljubljani Conjugated tlr7 and tlr4 agonists

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004029054A1 (ja) 2002-09-27 2004-04-08 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited 新規アデニン化合物及びその用途
JP2007505933A (ja) 2003-09-18 2007-03-15 コンフォーマ・セラピューティクス・コーポレイション Ｈｓｐ９０インヒビターとしての新規なヘテロ環化合物
JP2012517428A (ja) 2009-02-11 2012-08-02 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア Ｔｏｌｌ様レセプター調節因子および疾患の処置
JP2013525431A (ja) 2010-04-30 2013-06-20 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 合成ｔｌｒ７アゴニストのリン脂質結合体の使用
EP2674170A1 (en) 2012-06-15 2013-12-18 Cayla Novel compositions of TLR7 and/or TLR8 agonists conjugated to lipids

Family Cites Families (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1981001145A1 (en) 1979-10-18 1981-04-30 Univ Illinois Hydrolytic enzyme-activatible pro-drugs
US4698420A (en) 1985-02-25 1987-10-06 Xoma Corporation Antibody hybrid molecules and process for their preparation
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
ATE283855T1 (de) 1996-07-03 2004-12-15 Sumitomo Pharma Neue purinderivate
TW572758B (en) 1997-12-22 2004-01-21 Sumitomo Pharma Type 2 helper T cell-selective immune response inhibitors comprising purine derivatives
US7425541B2 (en) 1998-12-11 2008-09-16 Medarex, Inc. Enzyme-cleavable prodrug compounds
IL148079A0 (en) 1999-08-24 2002-09-12 Medarex Inc Human ctla-4 antibodies and compositions containing the same
WO2002015700A1 (en) 2000-08-24 2002-02-28 Coulter Pharmaceutical, Inc. Prodrugs activated by plasmin and their use in cancer chemotherapy
US7157465B2 (en) 2001-04-17 2007-01-02 Dainippon Simitomo Pharma Co., Ltd. Adenine derivatives
US7129261B2 (en) 2001-05-31 2006-10-31 Medarex, Inc. Cytotoxic agents
DE60239679D1 (de) 2001-06-11 2011-05-19 Medarex Inc Methode für die ausarbeitung von cd10-aktivierten prodrug-verbindungen
US7091186B2 (en) 2001-09-24 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. p-Amidobenzylethers in drug delivery agents
US7241890B2 (en) 2001-10-30 2007-07-10 Conforma Therapeutics Corporation Purine analogs having HSP90-inhibiting activity
EP1471938A4 (en) 2002-01-09 2008-03-05 Medarex Inc HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST CD30
JP2004137157A (ja) 2002-10-16 2004-05-13 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd 新規アデニン誘導体を有効成分として含有する医薬
ATE459647T1 (de) 2003-04-15 2010-03-15 Glaxosmithkline Llc Humane il-18 substitutionsmutanten und deren konjugate
GT200400138A (es) 2003-07-22 2005-03-22 Anticuerpos rgi y uso de los mismos.
WO2005051976A2 (en) 2003-11-20 2005-06-09 Ansata Therapeutics, Inc. Protein and peptide ligation processes and one-step purification processes
RS53984B1 (sr) 2003-12-10 2015-10-30 E. R. Squibb & Sons L.L.C. Ip-10 antitela i njihove upotrebe
EP1718667B1 (en) 2004-02-23 2013-01-09 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
EP1737890A2 (en) 2004-03-24 2007-01-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
US20070225303A1 (en) 2004-03-26 2007-09-27 Haruhisa Ogita 8-Oxoadenine Compound
JP4806680B2 (ja) 2004-05-19 2011-11-02 メダレックス インコーポレイテッド 自己犠牲リンカー及び薬剤複合体
RU2402548C2 (ru) 2004-05-19 2010-10-27 Медарекс, Инк. Химические линкеры и их конъюгаты
KR101270829B1 (ko) 2004-09-23 2013-06-07 제넨테크, 인크. 시스테인 유전자조작 항체 및 접합체
BRPI0607796A2 (pt) 2005-02-18 2009-06-13 Medarex Inc composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, processo para preparação e uso do mesmo, e, composição farmacêutica
NZ556661A (en) 2005-02-18 2010-10-29 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to prostate specific membrance antigen (PSMA)
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
EP1888587A1 (en) 2005-05-04 2008-02-20 Pfizer Limited 2-amido-6-amino-8-oxopurine derivatives as toll-like receptor modulators for the treatment of cancer and viral infections, such as hepatitis c
RU2494107C2 (ru) 2005-05-09 2013-09-27 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. Моноклональные антитела человека к белку программируемой смерти 1 (pd-1) и способы лечения рака с использованием анти-pd-1-антител самостоятельно или в комбинации с другими иммунотерапевтическими средствами
CN104356236B (zh) 2005-07-01 2020-07-03 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
HUE035853T2 (en) 2005-07-18 2018-05-28 Seattle Genetics Inc Beta-glucuronide-linker-drug conjugates
WO2007034917A1 (ja) 2005-09-22 2007-03-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規なアデニン化合物
EP1939202A4 (en) 2005-09-22 2010-06-16 Dainippon Sumitomo Pharma Co NEW ADENINE CONNECTION
BRPI0617546A2 (pt) 2005-09-26 2011-07-26 Medarex Inc conjugado de fÁrmaco-anticorpo, formulaÇço farmacÊutica, mÉtodo para matar uma cÉlula de tumor, mÉtodo para retardar ou interromper o crescimento de um tumor em um sujeito mamÍfero e composto
CA2623236A1 (en) 2005-09-26 2007-04-05 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to cd70
SI1940789T1 (sl) 2005-10-26 2012-03-30 Medarex Inc Postopki in spojine za pripravo cc analogov
CA2627190A1 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
AU2006321553B2 (en) 2005-12-08 2012-03-08 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human monoclonal antibodies to O8E
EA017812B1 (ru) 2005-12-08 2013-03-29 Медарекс, Инк. Выделенное моноклональное антитело или его антигенсвязывающий участок, которые связываются с протеинтирозинкиназой 7 ( ptk7) человека, и их применение
DK2035554T3 (da) 2006-06-29 2013-06-17 Univ Leland Stanford Junior Celle-fri syntese af proteiner indeholdende ikke-naturlige aminosyrer
JP2010500886A (ja) 2006-08-18 2010-01-14 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アーゲー 改善された特異性を有するトランスグルタミナーゼ変異体
EP2064316B1 (en) 2006-09-08 2012-01-25 Ambrx, Inc. Site specific incorporation of non-natural amino acids by vertebrate cells
KR101722261B1 (ko) 2006-10-02 2017-04-03 메다렉스, 엘.엘.시. Ｃｘｃｒ4에 결합하는 인간 항체 및 이의 용도
KR101552735B1 (ko) 2006-12-01 2015-09-14 메다렉스, 엘.엘.시. 씨디22에 결합하는 인간 항체 및 이의 용도
UY30776A1 (es) 2006-12-21 2008-07-03 Medarex Inc Anticuerpos cd44
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 梅達雷克斯有限責任公司 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
ES2552471T3 (es) 2007-02-07 2015-11-30 The Regents Of The University Of California Conjugados de agonistas de TLR sintéticos y usos de los mismos
CA2678514A1 (en) 2007-02-21 2008-08-28 Medarex, Inc. Chemical linkers with single amino acids and conjugates thereof
KR20090123857A (ko) 2007-02-22 2009-12-02 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 특이성이 개선된 트랜스글루타미나아제 변이체
AR065784A1 (es) 2007-03-20 2009-07-01 Dainippon Sumitomo Pharma Co Derivados de 8-oxo adenina,medicamentos que los contienen y usos como agentes terapeuticos para enfermedades alergicas, antivirales o antibacterianas.
CA2691444C (en) 2007-06-29 2016-06-14 Gilead Sciences, Inc. Purine derivatives and their use as modulators of toll-like receptor 7
EP2185188B1 (en) 2007-08-22 2014-08-06 Medarex, L.L.C. Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions
CA2700860C (en) 2007-10-01 2016-07-19 Jonathan A. Terrett Human antibodies that bind mesothelin, and uses thereof
ES2467108T3 (es) 2008-12-09 2014-06-11 Gilead Sciences, Inc. Moduladores de receptores tipo toll
WO2010087994A2 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Whitehead Institute For Biomedical Research Methods for ligation and uses thereof
US8962652B2 (en) 2009-10-22 2015-02-24 Gilead Sciences, Inc. Derivatives of purine or deazapurine useful for the treatment of (inter alia) viral infections
WO2011134669A1 (en) 2010-04-30 2011-11-03 Telormedix Sa Methods for inducing an immune response
NZ603155A (en) 2010-04-30 2014-06-27 Telormedix Sa Phospholipid drug analogs
US20120083473A1 (en) 2010-09-21 2012-04-05 Johanna Holldack Treatment of conditions by toll-like receptor modulators
US9676871B2 (en) 2010-11-05 2017-06-13 Pfizer Inc. Engineered polypeptide conjugates and methods for making thereof using transglutaminase
TW201247706A (en) 2011-03-08 2012-12-01 Baylor Res Inst Novel vaccine adjuvants based on targeting adjuvants to antibodies directly to antigen-presenting cells
JP2014521687A (ja) 2011-07-29 2014-08-28 セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド 体液性および細胞傷害性ｔリンパ球（ｃｔｌ）免疫応答を生成する合成ナノキャリア
RS57851B1 (sr) 2011-11-09 2018-12-31 Janssen Sciences Ireland Uc Purinski derivati za tretman viralnih infekcija
CA2874800C (en) 2012-07-13 2021-04-06 Janssen R&D Ireland Macrocyclic purines for the treatment of viral infections
EP2732825B1 (en) 2012-11-19 2015-07-01 Invivogen Conjugates of a TLR7 and/or TLR8 agonist and a TLR2 agonist
RS56169B1 (sr) 2013-02-14 2017-11-30 Bristol Myers Squibb Co Jedinjenja tubulisina, metode pripreme i primena
US9295732B2 (en) 2013-02-22 2016-03-29 Invivogen Conjugated TLR7 and/or TLR8 and TLR2 polycationic agonists
EP3033089A2 (en) 2013-08-16 2016-06-22 The Regents of The University of California Uses of phospholipid conjugates of synthetic tlr7 agonists
WO2015036044A1 (en) 2013-09-13 2015-03-19 Telormedix Sa Cationic lipid vehicles for delivery of tlr7 agonists for specific targeting of human cd14+ monocytes in whole blood
JP6484253B2 (ja) 2014-05-01 2019-03-13 ノバルティス アーゲー Ｔｏｌｌ様受容体７アゴニストとしての化合物および組成物
EA032487B1 (ru) 2014-05-01 2019-06-28 Новартис Аг Соединения и композиции в качестве агонистов toll-подобного рецептора 7
HUE054672T2 (hu) 2014-08-15 2021-09-28 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd TLR7 agonistaként alkalmazott pirrolopirimidin vegyületek
CN105732635A (zh) 2014-12-29 2016-07-06 南京明德新药研发股份有限公司 一类Toll样受体7激动剂
CN107406496A (zh) 2015-03-10 2017-11-28 百时美施贵宝公司 可通过转谷氨酰胺酶缀合的抗体和由其制备的缀合物
CN108472386A (zh) 2015-10-02 2018-08-31 百时美施贵宝公司 用于缀合抗体的转谷氨酰胺酶变体
TN2018000112A1 (en) 2015-10-29 2019-10-04 Novartis Ag Antibody conjugates comprising toll-like receptor agonist
CA3004173C (en) 2015-11-05 2020-07-14 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. 7-(thiazol-5-yl)pyrrolopyrimidine compound as tlr7 agonist
WO2017100557A1 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Graphic Packaging International, Inc. Container with absorption features
US10472361B2 (en) * 2017-08-16 2019-11-12 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a benzotriazole moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004029054A1 (ja) 2002-09-27 2004-04-08 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited 新規アデニン化合物及びその用途
JP2007505933A (ja) 2003-09-18 2007-03-15 コンフォーマ・セラピューティクス・コーポレイション Ｈｓｐ９０インヒビターとしての新規なヘテロ環化合物
JP2012517428A (ja) 2009-02-11 2012-08-02 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア Ｔｏｌｌ様レセプター調節因子および疾患の処置
JP2013525431A (ja) 2010-04-30 2013-06-20 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 合成ｔｌｒ７アゴニストのリン脂質結合体の使用
EP2674170A1 (en) 2012-06-15 2013-12-18 Cayla Novel compositions of TLR7 and/or TLR8 agonists conjugated to lipids

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J. Med. Chem.，2006年，49，2088-2095

Also Published As

Publication number Publication date
EP3668872B1 (en) 2022-02-23
US20200024279A1 (en) 2020-01-23
JP7474820B2 (ja) 2024-04-25
KR20200041912A (ko) 2020-04-22
CN111032657B (zh) 2024-03-29
US10941145B2 (en) 2021-03-09
WO2019036023A1 (en) 2019-02-21
JP2023011643A (ja) 2023-01-24
JP2020531472A (ja) 2020-11-05
EP3668872A1 (en) 2020-06-24
US10472361B2 (en) 2019-11-12
US20200291028A1 (en) 2020-09-17
TW201920180A (zh) 2019-06-01
ES2908984T3 (es) 2022-05-04
AR112414A1 (es) 2019-10-23
US20190055243A1 (en) 2019-02-21
US10696676B2 (en) 2020-06-30
CN111032657A (zh) 2020-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7474820B2 (ja) 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体
JP7228570B2 (ja) 免疫刺激物質トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体
JP7228571B2 (ja) 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての６－アミノ―７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体
JP7194170B2 (ja) 三環式基を有するトル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニスト、そのコンジュゲート、ならびにそれらの方法および使用
JP2023113786A (ja) トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20210812

A977 Report on retrieval

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007

Effective date: 20220804

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20220913

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20221012

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7159295

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250