JP7300868B2

JP7300868B2 - 天然原料中の化合物由来のリン酸を含有する微生物培養素材

Info

Publication number: JP7300868B2
Application number: JP2019065317A
Authority: JP
Inventors: 雄典福田; 直人梶; 健一阿孫
Original assignee: Mitsubishi Corp Life Sciences Ltd
Current assignee: Mitsubishi Corp Life Sciences Ltd
Priority date: 2019-03-29
Filing date: 2019-03-29
Publication date: 2023-06-30
Anticipated expiration: 2039-03-29
Also published as: JP2020162465A

Description

本発明は、天然原料中の化合物由来のリン酸を含有する微生物培養素材に関する。

微生物培養には酵母エキスや畜肉エキスなどの天然培地が用いられている。一方これらの天然培地のみで微生物培養を実施するとあらゆる生命に不可欠なリン酸含量が少ないため微生物の増殖量が少ない。またリン酸を意図的に添加する場合は、天然培地とはならないという課題があった。そのため天然培地として用いることが出来るリン酸を含有する原料が求められていた。

特許文献１には食肉加工品の食感の改良するための、リン酸塩を高含有させた酵母エキスが開示されている。また、特許文献２および特許文献３には、豚骨からリン酸塩を抽出したエキスの製法が開示されている。

一方、従来の方法は、原料中に含まれるリン酸塩そのものを回収しエキス化したものであり、化合物中に存在するリン酸を回収しリン酸塩としてエキス化したものではなかった。

特開２０１５－６５８５８特開２０１１－７８３５６特開２００７－２２２０２０

本発明が解決しようとする課題は、生体中に存在するリン酸化合物からリン酸を抽出し、リン酸塩として回収しエキス化した微生物培養素材を提供することである。

本発明者らは、上記課題の解決につき鋭意研究の結果、天然素材由来の生体内に存在するリン酸化合物からリン酸を遊離させ、リン酸塩を含むエキスとして回収することによって、天然原料中の化合物由来のリン酸を含有する微生物培養素材が得られることを見出した。

すなわち、本発明は
（１）天然素材由来のリン酸塩を含有することを特徴とする微生物培養素材
(２) 原料が、畜肉、水産物、酵母、麹、細菌などの天然素材由来であることを特徴とする微生物培養素材
(３) 固形分当たりのリン酸含量が、３％以上であることを特徴とする微生物培養素材
（４）原料に酵素を作用させて生体内リン酸化合物からリン酸を遊離させる工程を含む、前記(１)～(３)の微生物培養素材の製造方法
に係るものである。

本発明によると、天然原料から抽出したエキスにフォスファターゼを含む酵素を反応させ、生体内のリン酸化合物からリン酸を遊離させることで天然の微生物培養素材を提供できる。

本発明の天然リン酸化合物由来の微生物培養素材は、天然原料エキスにフォスファターゼを作用させ、必要であれば遠心分離により不溶物を除去し濃縮、殺菌、乾燥することにより製造することが出来る。
またフォスファターゼで遊離したリン酸は乾燥物中では一般的には金属塩として存在するものである。

以下に本発明を詳細に説明する。
原料には、リン酸化合物が含まれていればいずれの天然原料であってもよく、例えば酵母エキス、畜肉エキス、ボーンエキス、水産エキス、麹エキス、細菌エキス等が挙げられる。
特にリン酸化合物を高含有する酵母や酵母エキスが好ましい。
エキスの製造法も、特に制限なく、複数の方法を組み合わせることもできる。例えば、酵母を培養し、該酵母菌体を集菌、洗浄した後、熱水抽出法、酵素抽出法、又は、酸、若しくはアルカリ抽出法、さらには、これらの組み合わせによる抽出方法などがあり、これらの製造法で得られたエキスを用いることができる。

酵母エキスの製造に用いられる酵母としては、パン酵母、ビール酵母（サッカロマイセス・セレビシエ）、トルラ酵母（キャンディダ・ユティリス）などを挙げることができ、中でも遊離リン酸の原料となるＲＮＡ含量が一般的に高いとされるトルラ酵母を用いることが望ましい。

生体内のリン酸化合物としては例えばＲＮＡ、ＤＮＡ、リン脂質、リン酸化糖、リン酸化タンパク、リン酸化ペプチド、リン酸化アミノ酸、ポリリン酸、ヌクレオチドなどであり、リン酸を遊離させる酵素であれば特に制限なく使用できる。例えば、新日本化学工業社製のスミチームＰＭの場合、酵母抽出物をｐＨ３～７、望ましくはｐＨ４～５に調整し、２０～７５℃、望ましくは３０～５０℃で、酵母抽出物のＲＮＡ含量１００重量％に対して０．０５～２％、望ましくは０．１～１．５％添加し、１～８時間、望ましくは２～５時間反応させる。酵素反応終了後は例えば水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、水酸化マグネシウムなどでｐＨ５～１０、好ましくはｐＨ７～９、更に好ましくはｐＨ７．５～８．５に調整する。

このようにして得られる本発明の微生物培養素材には、固形分当たりのリン酸が、３重量％以上、好ましくは６重量％以上含まれる。本発明において、リン酸はモリブデンブルー法によって測定することが出来る。モリブデンブルー法は、吸光度式水質測定器ｐｈｏｔｏＬａｂ７６００型（セントラル科学株式会社）によって測定することが出来る。

以下、実施例を挙げて、本発明を詳細に説明する。但し、本発明は、以下の様態に限定されるものではない。なお、リン酸の測定は、前段に記載の方法で行った。

＜実施例１＞
キャンディダ・ユティリスＣｓ７５２９株（ＦＥＲＭＰ－３３４０）１０％菌体懸濁液１０００ｍＬを沸騰水中で１５分間熱水抽出した後、遠心分離により菌体残渣を除去し、上澄液を得た。この上澄液をｐＨ５．５に調整し、市販のリボヌクレアーゼとしてヌクレアーゼ「アマノＧ」（天野エンザイム社製）をＲＮＡ１００重量％に対して１．５％添加し、７０℃で４時間反応させた。続いて得られた液をｐＨ４．０に調整し、市販のフォスファターゼとしてスミチームＰＭ（新日本化学社製）を初発のＲＮＡ含量１００重量％に対して１．５％添加し、３５℃で３時間反応させた。反応後の酵母エキスをｐＨ８．０に調整し、１００℃で１５分間失活後、スプレードライした。得られた酵母エキスの遊離リン酸含量は９．８重量％であった。

＜比較例１＞
実施例１の上澄液をｐＨ５．５に調整して実施例１と同様にヌクレアーゼ「アマノＧ」を作用させた後、酵母エキスを１００℃で１５分間失活後、スプレードライした。得られた酵母エキスの遊離リン酸含量は０．３重量％であった。

＜実施例２＞微生物増殖試験
塩化ナトリウム（和光純薬工業製）１ｇ、トリプトン（ナカライテスク製）１g、実施例１で得られた酵母エキス０．２５ｇを水道水で溶解し１００ｍｌとした溶解液を１２１℃、１５分間電気オートクレーブで滅菌処理をした。前述の溶解液４mlを滅菌済試験管に入れ、１×１０６ CFU /ml に調整されたBacillus Subtilis ATCC6633 を１０μｌ添加し、シリコン栓で密閉したものを３７℃で１２００時間培養した。培養中のO.D値を経過時間毎にバイオフォトレコーダーで測定した。

＜比較例２＞
実施例２において、実施例１で得られた酵母エキスを添加しないこと以外は、実施例２と同様に行った。

＜比較例３＞
実施例２において、実施例１で得られた酵母エキスの代わりに比較例１で得られた酵母エキスを添加したこと以外は、実施例２と同様に行った。

実施例２、比較例２、３で得られた６００、８００、１０００、１２００時間後O.D値をそれぞれプロットしたグラフを図１に示した。

以上説明してきたように、本発明の微生物培養素材を用いることで微生物増殖効果が期待できる。また本発明は天然原料のリン酸化合物を起源としているため安全である。

微生物増殖試験

Claims

酵母または麹中の化合物由来のリン酸を含有する微生物培養素材の製造方法であって、酵母または麹に酵素を作用させて生体内リン酸化合物からリン酸を遊離させる工程を含む、該微生物培養素材の固形分当たりのリン酸含量が３重量％以上であることを特徴とする微生物培養素材の製造方法。