JP7681008B2 - 乳児用フォーミュラ - Google Patents

Description

本発明は、感染症の発生の低減又は感染症の予防に使用するための、低減された量のタンパク質を含み、ヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を含む、高度加水分解された乳児用フォーミュラ（ｅＨＦ）及びアミノ酸ベースの乳児用フォーミュラ（ＡＡＦ）に関する。本フォーミュラは、牛乳タンパク質アレルギーを有する乳児に使用され得る。

牛乳タンパク質（Ｃｏｗ’ｓ ｍｉｌｋ ｐｒｏｔｅｉｎ、ＣＭＰ）は、乳児の食物アレルギーの主要な原因であり、世界中で２～３％の小児に影響を及ぼしている。ＣＭＰアレルギー（ＣＭＰＡ）を有する小児のほとんどは、２つ以上の症状を有する：５０～７０％は皮膚症状があり；５０～６０％は胃腸症状があり；２０～３０％は気道症状がある。１０％の小児では、重篤な生命を脅かす症状が現れることがある。（Ｎｕｔｔｅｎ，２０１８．ＥＭＪ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３（１），ｐｐ．５０－５９）。

生後数ヶ月の健康な乳児にとって、ヒトの母乳及び母乳栄養は栄養の最適な形態であると考えられている。母乳は、ＣＭＰＡを有する乳児に栄養を与えるためのゴールドスタンダードであり続けている。欧州小児栄養消化器肝臓学会（ＥＳＰＧＨＡＮ）は、母乳栄養乳児において、母親の食事から牛乳を完全に排除することがＣＭＰＡの最善の治療法であると推奨している（Ｋｏｌｅｔｚｋｏ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，２０１２．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，５５（２），ｐｐ．２２１－２２９）。

母乳栄養が不可能である場合は、特殊な乳児用フォーミュラが推奨される。ＥＳＰＧＨＡＮは、ＣＭＰＡを有する非母乳栄養乳児には、ＣＭＰＡを有する乳児に有効であることが証明されている高度加水分解タンパク質をベースとしたフォーミュラを使用することを推奨している。非常に重篤又は生命を脅かす症状を有する乳児では、アミノ酸ベースの乳児用フォーミュラ（ＡＡＦ）が、第一選択となり得る（Ｋｏｌｅｔｚｋｏ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，２０１２．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，５５（２），ｐｐ．２２１－２２９）。

高度加水分解された乳児用フォーミュラ（ｅＨＦｓ）及びＡＡＦは、完全なタンパク質フォーミュラ又はヒト母乳よりも低い窒素吸収率を有し得る（Ｒｉｇｏ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，１９９５．Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，４９，ｐｐ．Ｓ２６－３８）。したがって、乳児のニーズに対応するために、ｅＨＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．６～２．８ｇのタンパク質を含有し、ＡＡＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．８～３．１ｇのタンパク質を含有する（Ｂｏｒｓｃｈｅｌ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０１８．Ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ，１０（３），ｐ．２８９）。

しかしながら、高タンパク質の乳児用フォーミュラの摂取は、２歳齢の体重及びボディマス指数の増加、並びに、血漿必須アミノ酸、インスリン様成長因子－１、及びＣ－ペプチドの血中循環濃度の上昇と関連しており、これらは体重増加及び脂質生成活性を誘発するおそれがある。より低いタンパク質含有量は、その後の肥満のリスクを減少させ得る（Ｔｏｔｚａｕｅｒ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０１８．Ｏｂｅｓｉｔｙ，２６（７），ｐｐ．１２０３－１２１０）。

更に、ＣＭＰアレルギー（ＣＭＰＡ）を有する乳児は、感染症のリスクが高い場合がある。例えば、ＣＭＰＡを有する乳児は、気道感染症の有病率が高いことが知られている（Ｗｏｉｃｋａ－Ｋｏｌｅｊｗａ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，２０１６．Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ａｌｌｅｒｇｏｌｏｇｙ，３３（２），ｐ．１０９）。ＣＭＰＡはまた、小児期の反復性中耳炎と関連している（Ｊｕｎｔｔｉ，Ｈ．，Ａｃｔａ Ｏｔｏ－Ｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｉｃａ，１１９（８），ｐｐ．８６７－８７３）。

［発明の概要］
本発明者らは、驚くべきことに、ヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）である２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、低減された量のタンパク質を含み、タンパク質含有量がヒト母乳のものにより近いｅＨＦ及びＡＡＦが、ＣＭＰＡを有する乳児の適切な発育及び発達を支え、安全性及び耐容性があり、感染症の発生率を低減したことを見出した。

したがって、一態様では、本発明は、乳児における感染症の発生の低減又は乳児における感染症の予防に使用するための乳児用フォーミュラであって、該乳児用フォーミュラが高度加水分解された乳児用フォーミュラ（ｅＨＦ）又はアミノ酸ベースの乳児用フォーミュラ（ＡＡＦ）であり、該乳児用フォーミュラがタンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該ｅＨＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．４ｇ以下のタンパク質を含み、又は該ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．９ｇ以下のタンパク質を含み、該乳児用フォーミュラが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、乳児用フォーミュラを提供する。

別の関連する態様では、本発明は、乳児における感染症の発生を低減する又は乳児における感染症を予防する方法であって、該方法が乳児に乳児用フォーミュラを投与することを含み、該乳児用フォーミュラがｅＨＦ又はＡＡＦであり、該乳児用フォーミュラがタンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該ｅＨＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．４ｇ以下のタンパク質を含み、又は該ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．９ｇ以下のタンパク質を含み、該乳児用フォーミュラが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、方法を提供する。

別の態様では、本発明は、乳児における感染症の治療に使用するための乳児用フォーミュラであって、該乳児用フォーミュラがｅＨＦ又はＡＡＦであり、該乳児用フォーミュラがタンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該ｅＨＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．４ｇ以下のタンパク質を含み、又は該ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．９ｇ以下のタンパク質を含み、該乳児用フォーミュラが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、乳児用フォーミュラを提供する。

一態様では、本発明は、乳児における感染症の発生の低減又は乳児における感染症の予防に使用するためのＡＡＦであって、該ＡＡＦがタンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．８ｇ以下のタンパク質、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．７ｇ以下のタンパク質、より好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．６ｇ以下のタンパク質を含み、該ＡＡＦが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、ＡＡＦを提供する。好適には、ＡＡＦは、１００ｋｃａｌ当たり２．５ｇ以下のタンパク質を含み得る。

別の関連する態様では、本発明は、乳児における感染症の発生を低減する又は乳児における感染症を予防する方法であって、該方法が乳児にＡＡＦを投与することを含み、該ＡＡＦがタンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．８ｇ以下のタンパク質、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．７ｇ以下のタンパク質、より好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．６ｇ以下のタンパク質を含み、該ＡＡＦが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、方法を提供する。好適には、ＡＡＦは、１００ｋｃａｌ当たり２．５ｇ以下のタンパク質を含み得る。

別の関連する態様では、本発明は、乳児において感染症を治療する方法であって、該方法が乳児に乳児用フォーミュラを投与することを含み、該乳児用フォーミュラがｅＨＦ又はＡＡＦであり、該乳児用フォーミュラが、タンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり約２．４ｇ以下のタンパク質を含み、該乳児用フォーミュラが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、方法を提供する。

別の態様では、本発明は、乳児における感染症の治療に使用するためのＡＡＦであって、該ＡＡＦがタンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．９ｇ以下のタンパク質、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．８ｇ以下のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．７ｇ以下のタンパク質、より好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．６ｇ以下のタンパク質を含み、該ＡＡＦが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、ＡＡＦを提供する。好適には、ＡＡＦは、１００ｋｃａｌ当たり２．５ｇ以下のタンパク質を含み得る。

別の関連する態様では、本発明は、乳児において感染症を治療する方法であって、該方法が乳児にＡＡＦを投与することを含み、該ＡＡＦが、タンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、該ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり約２．９ｇ以下のタンパク質、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり約２．８ｇ以下のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．７ｇ以下のタンパク質、より好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．６ｇ以下のタンパク質を含み、該ＡＡＦが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、該脂質の約３０重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、方法を提供する。好適には、ＡＡＦは、１００ｋｃａｌ当たり２．５ｇ以下のタンパク質を含み得る。

好ましくは、乳児は、牛乳タンパク質アレルギーを有する。

感染症は、耳感染症、呼吸器感染症、胃腸感染症、及び／又は尿路感染症であり得る。好ましくは、感染症は、上気道感染症及び／又は下気道感染症などの呼吸器感染症である。好ましくは、感染症は、耳感染症、より好ましくは中耳感染症である。

乳児用フォーミュラは、２’ＦＬ及びＬＮｎＴを含み得る。乳児用フォーミュラは、０．５～３ｇ／Ｌ、０．８～１．５ｇ／Ｌ、若しくは約１ｇ／Ｌの２’ＦＬを含み得、好ましくは乳児用フォーミュラは、約１ｇ／Ｌの２’ＦＬを含み；及び／又は乳児用フォーミュラは、０．２～１ｇ／Ｌ、０．５～０．８ｇ／Ｌ、若しくは約０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含み得、好ましくは乳児用フォーミュラは、約０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含む。最も好ましくは、乳児用フォーミュラは、約１ｇ／Ｌの２’ＦＬ及び約０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含む。

乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．１～２．３ｇのタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．１５～２．２５ｇのタンパク質を含み得る。好ましくは、乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約２．２ｇのタンパク質を含む。

乳児用フォーミュラ中の脂質の約３０重量％以下、約２５重量％以下、２０重量％以下、１５重量％以下、１０重量％以下、５重量％以下、又は１重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）であり得る。好ましくは、乳児用フォーミュラは、添加されたＭＣＴを含まない。

乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり９～１４ｇの炭水化物及び／又は１００ｋｃａｌ当たり４．０～６．０ｇの脂質を含み得る。

一実施形態では、乳児用フォーミュラは、ｅＨＦである。一実施形態では、乳児用フォーミュラは、ＡＡＦである。好ましくは、乳児用フォーミュラは、ｅＨＦである。

ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、少なくとも約９９重量％、又は約１００重量％は、約３０００Ｄａ未満の分子量を有し得る。好ましくは、ｅＨＦ中には約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドはない。

ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、又は少なくとも約９９重量％は、約１５００Ｄａ未満の分子量を有し得る。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９９％は、約１５００Ｄａ未満の分子量を有する。

ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、又は少なくとも約９９重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有し得る。好ましくは、ペプチドの少なくとも９８重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有する。

ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、４５～５５重量％、又は５０～５４重量％は、ジペプチド及びトリペプチドであり得る。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの約５１～５３重量％、又はより好ましくは約５２重量％は、ジペプチド及びトリペプチドである。

ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、４５～５５重量％、又は５０～５４重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有し得る。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの約５１～５３重量％、又はより好ましくは約５２重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有する。

ｅＨＦ中のタンパク質の少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、又は約１００％は、ホエイタンパク質であり得る。好ましくは、タンパク質の供給源はホエイタンパク質である。

ｅＨＦは、遊離アミノ酸を含み得る。遊離アミノ酸は、アミノ酸の総重量に基づいて、５０重量％以下、４０重量％以下、３０重量％以下、又は２５重量％以下の濃度で存在し得る。好ましくは、遊離アミノ酸は、アミノ酸の総重量に基づいて、２０～２５重量％、２１～２３重量％、又は約２２重量％の濃度で存在する。

非劣性：１日当たりの体重増加 診察４での体重増加に対する治療効果。主要解析は、試験フォーミュラを与えた乳児の体重増加［ｇ／ｄ］が対照フォーミュラでの発育に対して非劣性であったことを示す。 オッズ比：呼吸器及び耳感染症 試験フォーミュラ（ＨＭＯ）又は対照フォーミュラを与えた群を比較した、下気道感染症（ＬＴＲＩ）、上気道感染症（ＵＴＲＩ）、及び中耳炎／中耳感染症（ＯＭ）のオッズ比。ＯＭの発生率は、Ｖ０～Ｖ４とＶ０～Ｖ６との間で試験フォーミュラを与えた群において有意に低かった。 相対リスク減少率：呼吸器及び耳感染症 試験フォーミュラを与えた乳児の、下気道感染症、上気道感染症、及び中耳感染症の相対リスク減少率。中耳感染症の相対リスク減少率は、試験フォーミュラを与えた群において有意であった。 オッズ比：薬剤使用（抗生物質、解熱剤） 試験フォーミュラ（ＨＭＯ）又は対照フォーミュラを与えた群を比較した、抗生物質及び解熱剤の使用についてのオッズ比。解熱剤の使用は、Ｖ４～Ｖ６の間で試験フォーミュラ群において有意に低かった。

次に、本発明の様々な好ましい特徴及び実施形態を、非限定的な実施例により記載する。

本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、別段の指示がない限り、複数の指示対象を含むことについて留意する必要がある。

本明細書で使用する場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ ｏｆ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」又は「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」と同義であり、他を包含し得るもの、すなわちオープンエンドであり、かつ追加の、列挙されていない構成、要素、又は工程を除外しない。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ ｏｆ）」はまた、用語「を含む（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」を含む。

本明細書で使用するとき、用語「約」は、およそ、ほぼ、概ね、又はその付近、を意味する。用語「約」が数値又は範囲と共に使用される場合、その値又は範囲は、記載された数値（複数可）の上方及び下方の境界を拡大することによって、その値又は範囲を修正する。一般に、用語「約」及び「ほぼ」は、本明細書では、規定された値（複数可）を１０％超える及び下回る数値（複数可）を調整するために使用される。

本明細書で論じられる刊行物は、単に本出願の出願日より前にそれらが開示されていたがために提供されている。本明細書において引用されるいかなる文献も、これらの刊行物が本明細書に添付の特許請求の範囲に対する先行技術を構成するものであると認めるものとして解釈されるべきではない。

本開示は、本明細書に開示される例示的な方法及び材料によって限定されず、本明細書に記載されるものと類似又は同等の任意の方法及び材料を、本開示の実施形態の実施又は試験に使用することができる。数値範囲は、その範囲を画定する数を含む。

乳児用フォーミュラ
「乳児用フォーミュラ」という用語は、生後１年の間の乳児の特定栄養用途食品であって、当該フォーミュラそのものが、前記カテゴリーに該当するヒトの栄養要件（２０１５年９月２５日の欧州委員会規則（ＥＵ）２０１６／１２７に定義される）を満たす、食品を指し得る。

本発明の乳児用フォーミュラは、高度加水分解された乳児用フォーミュラ（ｅＨＦ）又はアミノ酸ベースの乳児用フォーミュラ（ＡＡＦ）である。好ましくは、乳児用フォーミュラは、ｅＨＦである。

「高度加水分解された乳児用フォーミュラ」又は「ｅＨＦ」という用語は、高度加水分解タンパク質を含む乳児用フォーミュラを指し得る。ｅＨＦは、インタクトなＣＭＰを消化することができない、又はＣＭＰに対して不耐性若しくはアレルギーを有する乳児に対して完全栄養を提供する、低アレルギー性乳児用フォーミュラであり得る。

「アミノ酸ベースの乳児用フォーミュラ」又は「ＡＡＦ」という用語は、タンパク質の供給源として遊離アミノ酸のみを含む乳児用フォーミュラを指し得る。ＡＡＦは、検出可能なペプチドを含有しない場合がある。ＡＡＦは、食物タンパク質アレルギー及び／又は食物タンパク質不耐性を有する乳児に対して完全栄養を提供する低アレルギー性乳児用フォーミュラであり得る。例えば、ＡＡＦは、インタクトなＣＭＰを消化することができない、又はＣＭＰに対して不耐性若しくはアレルギーを有する、また複数の食品に対して極めて重篤な若しくは生命を脅かす症状及び／若しくは感作を有し得る、乳児に対して完全栄養を提供する低アレルギー性乳児用フォーミュラであり得る。

「低アレルギー性」組成物は、アレルギー反応を引き起こす可能性が低い組成物である。好適には、本発明の乳児用フォーミュラは、ＣＭＰＡを有する乳児の９０％超に耐容性がある。これは、米国小児科学会が提供するガイダンスに沿ったものである（Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，２０００．Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，１０６（２），ｐｐ．３４６－３４９）。好適には、本発明の乳児用フォーミュラは、ＣＭＰ特異的ＩｇＥ、例えばＣＭＰＡを有する対象のＩｇＥによって認識されるペプチドを含有し得ない。

乳児には乳児用フォーミュラのみを与えることができる、又は乳児用フォーミュラを、ヒト母乳を補完するものとして使用できる。

本発明の乳児用フォーミュラは、粉末又は液体の形態であり得る。

液体は、例えば、濃縮液体乳児用フォーミュラ又はレディ・トゥ・フィード乳児用フォーミュラであってもよい。乳児用フォーミュラは、再構成した乳児用フォーミュラ（すなわち、粉末形態から再構成した液体乳児用フォーミュラ）の形態であってもよい。濃縮液体乳児用フォーミュラは、好ましくは、例えば水を加えることによって、乳児に与えるのに好適な液体組成物に希釈することができる。

一実施形態では、乳児用フォーミュラは粉末形態である。粉末は、例えば水を加えることによって、乳児に与えるのに好適な液体組成物に再構成することができる。

乳児用フォーミュラは、指示通りに配合した場合、１００ｍＬ当たり約６０～７２ｋｃａｌのエネルギー密度を有し得る。好適には、乳児用フォーミュラは、指示通りに配合した場合、１００ｍＬ当たり約６０～７０ｋｃａｌのエネルギー密度を有し得る。

ヒトミルクオリゴ糖
本発明の乳児用フォーミュラは、１種以上のヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を含有する。

ヒト母乳には多くの種類のＨＭＯが見出される。それぞれのオリゴ糖は、グルコース、ガラクトース、シアル酸（Ｎ－アセチルノイラミン酸）、フコース、及び／又はＮ－アセチルグルコサミンの組み合わせをベースとし、それらの間に数多くの多様な結合を有するため、ヒト母乳には非常に多様なオリゴ糖が含まれており、これまでにかかる構造の１３０以上が特定されている。これらのオリゴ糖のほとんどすべては還元末端にラクトース残基を有し、非還元末端の末端位置にはシアル酸及び／又はフコース（存在する場合）が占める。ＨＭＯは、酸性（例えば、荷電シアル酸含有オリゴ糖）又は中性（例えば、フコシル化オリゴ糖）であり得る。

本発明の乳児用フォーミュラは、２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含む。

本発明の乳児用フォーミュラは、２’ＦＬを含んでもよい。いくつかの実施形態では、２’ＦＬ以外の種類のフコシル化オリゴ糖は存在しない、すなわち、本発明の乳児用フォーミュラは、フコシル化オリゴ糖として２’ＦＬのみを含む。

２’ＦＬは、酵素ベースの発酵技術（組換え酵素又は天然酵素）又は微生物発酵技術のいずれかを用いた、特定のフコシルトランスフェラーゼ及び／又はフコシダーゼを使用するバイオテクノロジー手段によって生成され得る。後者の場合、微生物が、それらの天然酵素及び基質のいずれかを発現する、又はそれぞれの基質及び酵素を生成するように操作され得る。あるいは、２’ＦＬは、ラクトース及び遊離フコースからの化学合成によって生成され得る。

本発明の乳児用フォーミュラは、ＬＮｎＴを含んでもよい。いくつかの実施形態では、ＬＮｎＴ以外の種類のＮ－アセチル化オリゴ糖は存在しない、すなわち、本発明の乳児用フォーミュラは、Ｎ－アセチル化オリゴ糖としてＬＮｎＴのみを含む。

ＬＮｎＴは、例えば米国特許第５，２８８，６３７号及び国際公開第９６／１００８６号に記載されているように、グリコシルトランスフェラーゼを使用して、ドナー部分からアクセプター部分への糖単位の酵素的な転移によって化学的に合成され得る。あるいは、ＬＮｎＴは、Ｗｒｏｄｎｉｇｇ，Ｔ．Ｍ．；Ｓｔｕｔｚ，Ａ．Ｅ．（１９９９）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．３８：８２７－８２８に記載されているように、遊離、又はオリゴ糖（例えば、ラクツロース）に結合したケトヘキソース（例えば、フルクトース）をＮ－アセチルヘキソサミン又はＮ－アセチルヘキソサミン含有オリゴ糖に化学変換することにより調製され得る。このようにして生成されたＮ－アセチル－ラクトサミンは、次いでアクセプター部分としてラクトースに転移し得る。

いくつかの実施形態では、本発明の乳児用フォーミュラは、２’ＦＬ及び／又はＬＮｎＴを含むオリゴ糖混合物を含む。好ましい実施形態では、本発明の乳児用フォーミュラは、２’ＦＬ及びＬＮｎＴを含むオリゴ糖混合物を含む。本発明の乳児用フォーミュラは、フコシル化オリゴ糖として２’ＦＬのみ及びＮ－アセチル化オリゴ糖としてＬＮｎＴのみを含み得る。

２’ＦＬは、本発明による乳児用フォーミュラ中に、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．５～３ｇ、例えば、０．８～１．５ｇの合計量（指示通りに配合した場合）で存在し得る。いくつかの実施形態では、２’－フコシルラクトースの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．８５～１．３ｇ、例えば、０．９～１．２５ｇ又は０．９～１．１ｇ又は１～１．２５ｇ又は１～１．２ｇ（指示通りに配合した場合）であり得る。好ましくは、乳児用フォーミュラ（指示通りに配合した場合）は、約１ｇ／Ｌの２’－フコシルラクトースを含む。

ＬＮｎＴは、本発明による乳児用フォーミュラ中に、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．２～１ｇ、例えば、０．５～０．８ｇの合計量（指示通りに配合した場合）で存在し得る。いくつかの実施形態では、ＬＮｎＴの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．５～０．７５ｇ又は０．５～０．７ｇ又は０．５～０．６ｇ（指示通りに配合した場合）であり得る。好ましくは、乳児用フォーミュラ（指示通りに配合した場合）は、約０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含む。

これらの異なる範囲は全て、一緒に組み合わせることができる。

したがって、本発明の一実施形態では、乳児用フォーミュラ（指示通りに配合した場合）は、２’ＦＬ及びＬＮｎＴを含み、
（ｉ）２’ＦＬの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．８～１．５ｇであり、及び／又は
（ｉｉ）ＬＮｎＴの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．５～０．８ｇである。

別の実施形態では、本発明の乳児用フォーミュラ（指示通りに配合した場合）は、２’ＦＬ及びＬＮｎＴを含み、
（ｉ）２’ＦＬの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．９～１．２５ｇであり、及び／又は
（ｉｉ）ＬＮｎＴの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．５～０．７ｇである。

別の実施形態では、本発明の乳児用フォーミュラ（指示通りに配合した場合）は、２’ＦＬ及びＬＮｎＴを含み、
（ｉ）２’ＦＬの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり１～１．２ｇであり、及び／又は
（ｉｉ）ＬＮｎＴの合計量は、乳児用フォーミュラ１Ｌ当たり０．５～０．６ｇである。

好ましい実施形態では、本発明の乳児用フォーミュラ（指示通りに配合した場合）は、約１ｇ／Ｌの２’ＦＬ及び約０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含む。

本発明の乳児用フォーミュラは、０．０７５～０．５ｇ／１００ｋｃａｌ、０．１～０．３ｇ／１００ｋｃａｌ、又は０．１２～０．２５ｇ／１００ｋｃａｌの２’ＦＬ、及び約０．０３～０．１５ｇ／１００ｋｃａｌ、０．０５～０．１２ｇ／１００ｋｃａｌ、又は０．０５～０．１ｇ／１００ｋｃａｌのＬＮｎＴを含み得る。好ましくは、本発明の乳児用フォーミュラは、約０．１５ｇ／１００ｋｃａｌの２’ＦＬ及び約０．０７５ｇ／１００ｋｃａｌのＬＮｎＴを含む。

本発明による乳児用フォーミュラに含まれる２’ＦＬ及びＬＮｎＴは、典型的には、２’ＦＬ：ＬＮｎＴの比が、２．０：０．５４～２．０：２．２６、例えば、２．０：０．７６～２．０：１．８又は２．０：０．８～２．０：１．４で存在する。特に有利な実施形態では、この比は、２．０：１又は約２．０：１である。

タンパク質
「タンパク質」という用語は、ペプチド及び遊離アミノ酸を含む。乳児用フォーミュラのタンパク質含有量は、当業者に既知の任意の方法によって計算され得る。好適には、タンパク質含有量は、窒素タンパク質換算法によって算出され得る。例えば、Ｍａｕｂｏｉｓ，Ｊ．Ｌ．ａｎｄ Ｌｏｒｉｅｎｔ，Ｄ．，２０１６．Ｄａｉｒｙ ｓｃｉｅｎｃｅ＆ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９６（１），ｐｐ．１５－２５に記載のとおりである。好ましくは、タンパク質含有量は、２０１５年９月２５日の欧州委員会規則（ＥＵ）２０１６／１２７に定義されるように、窒素含有量×６．２５として計算される。窒素含有量は、当業者に既知の任意の方法によって決定され得る。例えば、窒素含有量は、ケルダール法によって測定され得る。

タンパク質濃度
ｅＨＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．６～２．８ｇのタンパク質を含有し、ＡＡＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．８～３．１ｇのタンパク質を含有するものであり、重度の吸収不良を含む胃腸病変のある乳児、又は高い代謝率を補うためにタンパク質及びカロリーをより多く必要とする乳児のニーズに対応する。

本発明者らは、驚くべきことに、より低いタンパク質含有量を有するｅＨＦ又はＡＡＦが、アレルギー乳児の適切な発育及び発達をサポートし得ることを示した。更に、本発明者らは、驚くべきことに、本フォーミュラには安全性及び耐容性があることを示した。

したがって、本発明のｅＨＦは１００ｋｃａｌ当たり約２．４ｇ以下のタンパク質を含む、又は本発明のＡＡＦは１００ｋｃａｌ当たり約２．９ｇ以下のタンパク質、好ましくは１００ｋｃａｌ当たり２．８ｇ以下のタンパク質を含む。例えば、本発明の乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約２．３ｇ以下のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．２５ｇ以下のタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．２ｇ以下のタンパク質を含み得る。

好適には、乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約１．８ｇ以上のタンパク質を含む。例えば、本発明の乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約１．８６ｇ以上のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり１．９ｇ以上のタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０ｇ以上のタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．１ｇ以上のタンパク質を含み得る。好ましくは、乳児用フォーミュラは、現行ＥＵ規制（ＥＦＳＡ ＮＤＡ Ｐａｎｅｌ，２０１４．ＥＦＳＡ ｊｏｕｒｎａｌ，１２（７），３７６０）に沿って、１００ｋｃａｌ当たり約１．８６ｇ以上のタンパク質を含む。

本発明のｅＨＦは、１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり１．８６～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり１．９～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．３ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．１～２．３ｇのタンパク質、又は２．１５～２．２５ｇのタンパク質を含み得る。

本発明のＡＡＦは、１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．９ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり１．９～２．８ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．７ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．６ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．５ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．４ｇのタンパク質、１００ｋｃａｌ当たり２．１～２．３ｇのタンパク質、又は２．１５～２．２５ｇのタンパク質を含み得る。

好ましくは、本発明の乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．４ｇのタンパク質、例えば１００ｋｃａｌ当たり２．１～２．３ｇのタンパク質、又は１００ｋｃａｌ当たり２．１５～２．２５ｇのタンパク質を含む。

好ましくは、乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約２．２ｇのタンパク質を含む。

タンパク質の供給源
タンパク質の供給源は、乳児用フォーミュラにおける使用に好適な任意の供給源であり得る。好適には、タンパク質は牛乳タンパク質である。

高度加水分解／加水分解ホエイベースフォーミュラは高度加水分解／加水分解カゼインベースフォーミュラよりも嗜好性が高い場合があり、及び／又は対象はカゼインタンパク質にのみ感作される場合がある。したがって、好適には、タンパク質の約５０％超、約６０％超、約７０％超、約８０％超、約９０％超、又は約１００％がホエイタンパク質である。好ましくは、タンパク質の供給源はホエイタンパク質である。

ホエイタンパク質は、チーズの製造に由来するホエイであってよく、特に、レンネットによるカゼインの凝固により得られるものなどのスイートホエイ、酸によるカゼインの凝固又は発酵物の酸性化により得られる酸性ホエイ、あるいは更には酸による及びレンネットによる凝固により得られる混合ホエイであってよい。この原料は、イオン交換により及び／又は電気透析により脱塩された、脱塩乳清タンパク質（ＤＷＰ）として知られる乳清であり得る。

ホエイタンパク質の供給源は、カゼイノ－グリコマクロペプチド（ＣＧＭＰ）が完全に又は部分的に除去されたスイートホエイであり得る。このホエイは、変性スイートホエイ（ＭＳＷ）と呼ばれる。スイートホエイからＣＧＭＰを除去すると、スレオニン及びトリプトファン含有量がヒト母乳に近いタンパク質材料が得られる。スイートホエイからのＣＧＭＰの除去プロセスは、欧州特許第８８０９０２号に記載されている。

ホエイタンパク質はＤＷＰ及びＭＳＷの混合物であってよい。

いくつかの実施形態では、乳児用フォーミュラ中のカゼインの量は検出不可能であり、例えば、０．２ｍｇ／ｋｇ未満である。カゼインの量は、当業者に既知の任意の方法によって決定され得る。

加水分解度
ｅＨＦでは、タンパク質は「高度加水分解され」、その結果、ｅＨＦはＣＭＰＡを有する乳児の９０％超に耐容され得る。

タンパク質加水分解物は、非タンパク質窒素を全窒素で除算した値×１００を指すＮＰＮ／ＴＮ％で特徴付けられる加水分解の程度を有し得る。非タンパク質窒素は、トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）などの試薬と自由に反応するアミノ窒素を指す。ＮＰＮ／ＴＮ％は、当業者に既知の任意の方法によって決定され得る。例えば、ＮＰＮ／ＴＮ％は、Ａｄｌｅｒ－Ｎｉｓｓｅｎ（Ａｄｌｅｒ－Ｎｉｓｓｅｎ，Ｊ．（１９７９）Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．２７：１２５６－１２６２）に記載の通りに測定され得る。好適には、タンパク質は、９０％超、９５％超、又は９８％超のＮＰＮ／ＴＮ％を有し得る。

加水分解の程度はまた、加水分解度によって決定され得る。「加水分解度」（ＤＨ）は、タンパク質加水分解物中の切断されたペプチド結合の割合として定義され、当業者に既知の任意の方法によって決定され得る。好適には、加水分解度は、ｐＨスタット、トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）、ｏ－フタルジアルデヒド（ＯＰＡ）、トリクロロ酢酸可溶性窒素（ＳＮ－ＴＣＡ）、又はホルモール滴定法によって決定される。（Ｒｕｔｈｅｒｆｕｒｄ，Ｓ．Ｍ．，２０１０．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＡＯＡＣ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，９３（５），ｐｐ．１５１５－１５２２）。タンパク質の加水分解度（ＤＨ）は、９０超、９５超、又は９８超であり得る。

加水分解の程度はまた、ペプチド分子量分布によって決定され得る。ペプチド分子量分布は、高性能サイズ排除クロマトグラフィーによって、任意にＵＶ検出器を用いて（ＨＰＳＥＣ／ＵＶ）決定され得る（Ｊｏｈｎｓ，Ｐ．Ｗ．，ｅｔ ａｌ．，２０１１．Ｆｏｏｄ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１２５（３），ｐｐ．１０４１－１０５０）。例えば、ペプチド分子量分布は、２０５ｎｍ、２１４ｎｍ、又は２２０ｎｍで決定されたＨＰＳＥＣピーク面積ベースの推定値であり得る。好適には、ペプチド分子量分布がＨＰＳＥＣ／ＵＶによって決定される場合、特定の分子量を有する「ペプチドの重量パーセント」は、２０５ｎｍ、２１４ｎｍ、又は２２０ｎｍで決定された分子量を有する「総ピーク面積の百分率としてのピーク面積の分率」によって推定され得る。好適には、加水分解の程度は、国際公開第２０１６／１５６０７７号に記載されている方法によって決定され得る。あるいは、ペプチド分子量分布は、当業者に既知の任意の方法、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム－ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）によって決定され得る（Ｃｈａｕｖｅａｕ，Ａ．，ｅｔ ａｌ．，２０１６．Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ａｌｌｅｒｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２７（５），ｐｐ．５４１－５４３）。

理論的には、細胞膜結合型ＩｇＥと結合するためには、ペプチドは約１５００Ｄａ（約１５アミノ酸）を超えるサイズである必要があり、ＩｇＥ分子を架橋して免疫反応を誘導するためには、約３０００Ｄａ（約３０アミノ酸）を超えるサイズである必要がある（Ｎｕｔｔｅｎ，２０１８．ＥＭＪ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３（１），ｐｐ．５０－５９）。

したがって、好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、少なくとも約９９重量％、又は約１００重量％は、約３０００Ｄａ未満の分子量を有する。ｅＨＦ中には約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドは存在し得ない。

したがって、好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、少なくとも約９９重量％、又は約１００重量％は、約１５００Ｄａ未満の分子量を有する。好ましくは、ペプチドの少なくとも９９重量％は、約１５００Ｄａ未満の分子量を有する。ｅＨＦ中には約１５００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドは有り得ない。

好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９８重量％、又は少なくとも約９９重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有する。より好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも９５重量％又は９８重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有する。

好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９０重量％、又は少なくとも約９５重量％は、約１０００Ｄａ未満の分子量を有する。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約９５重量％は、約１０００Ｄａ未満の分子量を有する。

好ましくは、本発明のｅＨＦは、約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドを有しておらず、ペプチドの少なくとも約９５重量％、約１２００Ｄａ未満の分子量を有する。

ジペプチド及びトリペプチドの割合が高いと、腸機能障害のある患者でも窒素（タンパク質）吸収が改善され得る。ＰＥＰＴ１は、低分子ペプチド（例えば、ジペプチド及びトリペプチド）の吸収を促進する専用の輸送経路である。生後数週間においては、腸のＰＥＰＴ１は栄養摂取に重要であり、その後は離乳後の食移行に重要である。

したがって、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、又は少なくとも約５０重量％は、ジペプチド及びトリペプチドであり得る。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、４５～５５重量％、又は５０～５４重量％は、ジペプチド及びトリペプチドである。より好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの約５１～５３重量％、又はより好ましくは約５２重量％は、ジペプチド及びトリペプチドである。

好適には、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、又は少なくとも約５０重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有する。好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、４５～５５重量％、又は５０～５４重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有する。より好ましくは、ｅＨＦ中のペプチドの約５１～５３重量％、又は最も好ましくは、約５２重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有する。

ｅＨＦ中のペプチドは、３００Ｄａ～３７０Ｄａ、好ましくは３２０Ｄａ～３６０Ｄａの分子量中央値を有し得る。

主要な牛乳アレルゲンとしては、α－ラクトアルブミン（ａＬＡ）、β－ラクトグロブリン（ｂＬＧ）、及びウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）が認識されている。

したがって、好適には、ｅＨＦは、検出不可能なａＬＡ含有量、例えば、約０．０１０ｍｇ／ｋｇ以下のａＬＡを有し得、ｅＨＦは、検出不可能なｂＬＧ含有量、例えば、約０．０１０ｍｇ／ｋｇ以下のｂＬＧを有し得、及び／又はｅＨＦは、検出不可能なＢＳＡ含有量、例えば、約０．０１０ｍｇ／ｋｇ以下のＢＳＡを有し得る。好ましくは、本発明のｅＨＦは、検出可能な量のａＬＡ、ｂＬＧ、及びＢＳＡを含まない。ａＬＡ、ｂＬＧ、及びＢＳＡの含有量は、当業者に既知の任意の方法、例えばＥＬＩＳＡによって決定され得る。

好ましい実施形態では、本発明のｅＨＦは、約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドを有しておらず；ペプチドの少なくとも約９５重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有し；任意に、ペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、若しくは４５～５５重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有し、及び／又はジペプチド若しくはトリペプチドであり；本発明のｅＨＦは、約１ｇ／Ｌの２’－フコシルラクトース及び約０．５ｇ／Ｌのラクト－Ｎ－ネオテトラオース、並びに／又は約０．１５ｇ／１００ｋｃａｌの２’－フコシルラクトース及び約０．０７５ｇ／１００ｋｃａｌのラクト－Ｎ－ネオテトラオースを含み；また、ｅＨＦは添加されたＭＣＴを含まない。

加水分解方法
本発明の乳児用フォーミュラに使用するためのタンパク質は、当該技術分野において既知の任意の好適な方法によって加水分解され得る。例えば、タンパク質は、例えばプロテアーゼを使用して酵素加水分解され得る。例えば、タンパク質は、アルカラーゼを使用して加水分解され得る（例えば、約１～１５重量％の酵素：基質比で、約１～１０時間の持続時間）。温度は、約４０℃～６０℃の範囲、例えば、約５５℃であり得る。反応時間は、例えば、１～１０時間であり得、加水分解を開始する前のｐＨ値は、例えば、６～９、好ましくは６．５～８．５、より好ましくは７．０～８．０の範囲内にあり得る。

加水分解プロセスには、ブタ酵素、特にブタ膵臓酵素が使用され得る。例えば、国際公開第９３０４５９３（Ａ１）号は、トリプシン及びキモトリプシンを使用した加水分解プロセスについて開示している。このプロセスには２ステップの加水分解反応が含まれており、プロセス間には、最終的な加水分解物を、インタクトなアレルゲン性タンパク質を実質的に含まないものにすることを担保すべく熱変性ステップが含まれている。これらの方法に使用されるトリプシン及びキモトリプシンは、ブタ膵臓抽出物により製造される調製物である。

国際公開第２０１６１５６０７７（Ａ１）号は、乳ベースのタンパク性材料を、微生物由来アルカリセリンプロテアーゼと、ブロメライン、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）由来のプロテアーゼ、及びバシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）由来のプロテアーゼの組み合わせとにより加水分解することを含む、乳タンパク質加水分解物の調製プロセスについて開示している。

遊離アミノ酸
本発明の乳児用フォーミュラは、遊離アミノ酸を含み得る。

遊離アミノ酸のレベルは、乳児栄養に十分なアミノ酸プロファイル、特に栄養規制（例えば、欧州委員会指令２００６／１４１／ＥＣ）を満たすアミノ酸プロファイルを提供するように選択され得る。

例えば、遊離アミノ酸は、ペプチドに含まれるアミノ酸を補完するために本発明のｅＨＦに組み込まれ得る。

ＡＡＦでは、乳児用フォーミュラのタンパク質含有量は、遊離アミノ酸によって提供される。

本発明の乳児用フォーミュラに使用するための遊離アミノ酸の例としては、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、チロシン、スレオニン、トリプトファン、バリン、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、プロリン、セリン、カルニチン、タウリン、及びそれらの混合物が挙げられる。

したがって、好適には、ｅＨＦ中の遊離アミノ酸は、アミノ酸の総重量に基づいて、５０重量％以下、４０重量％以下、３０重量％以下、又は２５重量％以下の濃度で存在し得る。好ましくは、ｅＨＦは、アミノ酸の総重量に基づいて、２５重量％以下の遊離アミノ酸を含む。より好ましくは、ｅＨＦ中の遊離アミノ酸は、アミノ酸の総重量に基づいて、２０～２５重量％、２１～２３重量％、又は約２２重量％の濃度で存在する。

遊離アミノ酸含有量は、当業者に既知の任意の方法によって決定され得る。好適には、遊離アミノ酸含有量は、イオン交換クロマトグラフィーによる水性サンプル抽出物中に存在する遊離アミノ基の分離及びニンヒドリン試薬によるポストカラム誘導体化後の光検出によって得られ得る。総アミノ酸含有量は、窒素下、６ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ中での試験部分の加水分解によって、及び上記のようにイオン交換クロマトグラフィーによる個々のアミノ酸の分離によって得られ得る。

好ましい実施形態では、本発明のｅＨＦは、約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドを有しておらず；ペプチドの少なくとも９５重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有し；任意に、ペプチドの少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、若しくは４５～５５重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有し、及び／又はジペプチド若しくはトリペプチドであり、及び／又はアミノ酸の総重量に基づいて２０～２５重量％、２１～２３重量％、若しくは約２２重量％であり；本発明のｅＨＦは、約１ｇ／Ｌの２’－フコシルラクトース及び約０．５ｇ／Ｌのラクト－Ｎ－ネオテトラオース、並びに／又は約０．１５ｇ／１００ｋｃａｌの２’－フコシルラクトース及び約０．０７５ｇ／１００ｋｃａｌのラクト－Ｎ－ネオテトラオースを含み；また、ｅＨＦは添加されたＭＣＴを含まない。

炭水化物
本発明の乳児用フォーミュラの炭水化物含有量は、好ましくは、１００ｋｃａｌ当たり９～１４ｇの範囲の炭水化物である。

炭水化物は、乳児用フォーミュラにおける使用に好適な任意の炭水化物であり得る。

本発明の乳児用フォーミュラに使用するための炭水化物の例としては、ラクトース、サッカロース、マルトデキストリン、及びデンプンが挙げられる。炭水化物の混合物を使用してもよい。

一実施形態では、炭水化物含有量は、マルトデキストリンを含む。一実施形態では、総炭水化物含有量の少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、又は少なくとも約７０重量％は、マルトデキストリンである。

一実施形態では、炭水化物含有量は、ラクトースを含む。一実施形態では、総炭水化物含有量の少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、又は少なくとも約７０重量％は、ラクトースである。

一実施形態では、炭水化物は、ラクトース及びマルトデキストリンを含む。

脂質
本発明の乳児用フォーミュラの脂質含有量は、好ましくは、１００ｋｃａｌ当たり４．０～６．０ｇの範囲の脂質である。

脂質は、乳児用フォーミュラにおける使用に好適な任意のリピッド又は脂質であり得る。

本発明の乳児用フォーミュラに使用するための脂質の例としては、ヒマワリ油、低エルカ酸菜種油、ベニバナ油、キャノーラ油、オリーブ油、ココナッツ油、パーム核油、大豆油、魚油、パームオレイン、高オレイン酸ヒマワリ油、及び高オレイン酸ベニバナ油、及び長鎖多価不飽和脂肪酸を含有する微生物発酵油（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｉｌ）が挙げられる。

脂質はまた、パームオレイン、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、及び脂肪酸（例えば、アラキドン酸、リノール酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキサエン酸、リノレン酸、オレイン酸、ラウリン酸、カプリン酸、カプリル酸、カプロン酸など）のエステルなどの油に由来する画分の形態であり得る。

更なる脂質の例としては、構造化脂質（すなわち、構造を変化させるための化学的又は酵素的な修飾を受けた脂質）が挙げられる。好ましくは、構造化脂質は、ｓｎ２構造化脂質であり、例えば、トリグリセリドのｓｎ２位にパルミチン酸を有する割合が高められているトリグリセリドが含まれる。構造化脂質は、添加してもよく、又は含めなくてもよい。

あらかじめ形成されたアラキドン酸（ＡＲＡ）及び／又はドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を多量に含有する、魚油又は微生物油などの油を添加してもよい。

ジホモ－γ－リノレン酸、アラキドン酸（ＡＲＡ）、エイコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などの長鎖多価不飽和脂肪酸を添加してもよい。

乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり２～２０ｍｇのＡＲＡ、１００ｋｃａｌ当たり５～１５のＡＲＡ、若しくは１００ｋｃａｌ当たり約１０ｍｇのＡＲＡ及び／又は１００ｋｃａｌ当たり２～２０ｍｇのＤＨＡ、１００ｋｃａｌ当たり５～１５のＤＨＡ、若しくは１００ｋｃａｌ当たり約１０ｍｇのＤＨＡを含み得る。好ましくは、乳児用フォーミュラは、１００ｋｃａｌ当たり約１０ｍｇのＡＲＡ及び１００ｋｃａｌ当たり約１０ｍｇのＤＨＡを含む。

中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）
高濃度のＭＣＴは、早期の体重増加を損なう可能性がある。ＭＣＴは蓄積されず、脂質の蓄積をサポートしない。例えば、Ｂｏｒｓｃｈｅｌらは、ＭＣＴを含まないフォーミュラを与えた乳児は、ＭＣＴ由来の脂質を５０％含有するフォーミュラを与えた乳児よりも、１～５６日の間に体重が有意に増加したと報告している（Ｂｏｒｓｃｈｅｌ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０１８．Ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ，１０（３），ｐ．２８９）。

したがって、本発明の乳児用フォーミュラにおいて脂質の約３０重量％以下は中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）であり得る。

いくつかの実施形態では、脂質の約２５重量％以下、２０重量％以下、１５重量％以下、１０重量％以下、５重量％以下、４重量％以下、３重量％以下、２重量％以下、１重量％以下、０．５重量％以下、又は０．１重量％以下は、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である。

いくつかの実施形態では、脂質の０～３０重量％、０～２５重量％、０～２０重量％、０～１５重量％、０～１０重量％、０～５重量％、０～４重量％、０～３重量％、０～２重量％、０～１重量％、０～０．５重量％、又は０～０．１重量％は、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である。

好ましくは、乳児用フォーミュラは、添加されたＭＣＴを含まない。好適には、脂質の約０重量％はＭＣＴであり、及び／又は乳児用フォーミュラは検出可能なＭＣＴを含まない。好適には、乳児用フォーミュラは、ＭＣＴを含まない。

好ましい実施形態では、本発明のｅＨＦは、約３０００Ｄａ以上のサイズの検出可能なペプチドを有しておらず、ペプチドの少なくとも約９５重量％は、約１２００Ｄａ未満の分子量を有し；ペプチドの４５～５５重量％は、２４０～６００Ｄａの分子量を有し；遊離アミノ酸は、アミノ酸の総重量に基づいて２０～２５重量％の濃度で存在し；ｅＨＦは、添加されたＭＣＴを含まない。

更なる成分
本発明の乳児用フォーミュラはまた、好ましくは、毎日の食事に必須と考えられるあらゆるビタミン及びミネラルを、栄養に有意な量で含有する。特定のビタミン及びミネラルには最小必要量が確立されている。

本発明の乳児用フォーミュラに使用するためのビタミン、ミネラル、及びその他の栄養素の例としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、葉酸、イノシトール、ナイアシン、ビオチン、パントテン酸、コリン、カルシウム、リン、ヨウ素、鉄、マグネシウム、銅、亜鉛、マンガン、塩素、カリウム、ナトリウム、セレン、クロム、モリブデン、タウリン、及びＬ－カルニチンが挙げられる。ミネラルは、通常、その塩形態で添加される。

本発明の乳児用フォーミュラは、１種以上のカロテノイドを含み得る。

本発明の乳児用フォーミュラはまた、少なくとも１種のプロバイオティクスを含み得る。「プロバイオティクス」という用語は、宿主の健康又はウェル・ビーイングに有益な効果を有する微生物細胞の調製物又は微生物細胞の成分を指す。具体的には、プロバイオティクスは、腸内バリア機能を改善することができる。

好ましいプロバイオティクスは、全体として安全で、Ｌ（＋）乳酸生成培養物であり、最大２４ヶ月間安定かつ有効なままであることが要求される製品に対して許容可能な保存期間を有するものである。

本発明の乳児用フォーミュラに使用するためのプロバイオティクス微生物の例としては、サッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、デバロマイセス属（Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）、及びトルロプシス属（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）などの酵母、並びにビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、メリソコッカス属（Ｍｅｌｉｓｓｏｃｏｃｃｕｓ）、プロピオニバクテリウム属（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｕｍ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｏｃｏｃｃｕｓ）、バシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ミクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、リューコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、ワイセラ属（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）、アエロコッカス属（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、オエノコッカス属（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）、及びラクトバシラス属（ＬａｃｔｏＢａｃｉｌｌｕｓ）などの酵母が挙げられる。

好適なプロバイオティクス微生物の具体例は、サッカロマイセス・セレビシエ、バチルス・コアグランス、バチルス・リケニフォルミス、バチルス・スブチリス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロコッカス・フェカリス、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバシラス・アリメンタリウス、ラクトバシラス・カゼイ亜種カゼイ、ラクトバチルス・カゼイ・シロタ、ラクトバチルス・カルバタス、ラクトバシラス・デルブリッキー亜種ラクティス、ラクトバチルス・ファルシミナス、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・ジョンソニ、ラクトバチルス・ラムノーサス（ラクトバチルスＧＧ）、ラクトバチルス・サケ、ラクトバチルス・ラクティス、ミクロコッカス・バリアンス、ペディオコッカス・アシディラクティシ、ペディオコッカス・ペントサス、ペディオコッカス・アシディラクティシ、ペディオコッカス・ハロフィルス、ストレプトコッカス・フェカリス、ストレプトコッカス・サーモフィルス、スタフィロコッカス・カルノーシス及びスタフィロコッカス・キシローサスである。

本発明の乳児用フォーミュラはまた、プレバイオティクス、ラクトフェリン、食物繊維、ヌクレオチド、ヌクレオシドなどの、有益な効果を有し得る他の物質を含有してもよい。

感染症の発生の低減、予防、及び治療
本発明の乳児用フォーミュラは、乳児において、感染症の発生を低減するために、及び／又は感染症を予防するために使用され得る。

本発明の乳児用フォーミュラはまた、乳児において感染症を治療するために使用され得る。

本明細書で使用される場合、感染症の「発生を低減する」とは、乳児用フォーミュラが感染症の可能性及び／又は感染症に関連する少なくとも１つの症状を低減させることを意味する。

本明細書で使用される場合、感染症を「予防する」とは、乳児が、まだ感染症に感染していないこと、及び／又は感染症のいかなる症状も示していないこと、並びに乳児用フォーミュラが、感染症を予防すること、及び／又は感染症に関連する少なくとも１つの症状を予防することを意味する。

本明細書で使用される場合、感染症の「治療」とは、乳児が感染症を有し、乳児用フォーミュラが、感染症に関連する少なくとも１つの症状を軽減、低減、若しくは改善し、並びに／又は感染症を遅らせる、低減する、若しくは排除することを意味する。

「乳児」という用語は、１２ヶ月齢未満の小児を指し、例えば、生後０ヶ月～６ヶ月の小児を指す。好ましくは、乳児は、牛乳タンパク質アレルギーを有する。

一態様では、本発明は、乳児における感染症の発生を低減する、予防する、又は治療する方法であって、乳児に本発明による乳児用フォーミュラを投与することを含む、方法を提供する。別の態様では、本発明は、乳児における感染症の発生の低減、予防、又は治療に使用するための、本発明による乳児用フォーミュラを提供する。

本明細書で使用される場合、「感染症」は、ウイルス、細菌、真菌、寄生虫、及び節足動物を含む任意の病原体による、乳児の身体組織への侵入を指す。好ましくは、感染症は、細菌又はウイルス感染症である。感染症は、耳感染症、呼吸器感染症、胃腸感染症、及び／又は尿路感染症であり得る。好ましくは、感染症は、呼吸器感染症及び／又は耳感染症である。最も好ましくは、感染症は、耳感染症である。

耳感染症は、外耳感染症、中耳感染症、及び／又は内耳感染症であり得る。好ましくは、耳感染症は中耳感染症（中耳炎）である。中耳炎（ＯＭ）は、最も一般的な小児感染症のうちの１つであり、小児が医師の診察を受ける主な原因であり、先進国において小児が抗生物質を服用したり、又は手術を受けたりする最も多い理由となっている。肺炎レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、及び無莢膜型インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）は、ＯＭを引き起こす主要な細菌病原体である。ウイルスは、単独で又は細菌共病原体（ｃｏ－ｐａｔｈｏｇｅｎ）と共に、ＯＭを増加させる原因となる。ウイルス性ＯＭには多くの呼吸器ウイルスが寄与するものの、最も頻繁には呼吸器合胞体ウイルス又はライノウイルスによって引き起こされている（Ｒｏｖｅｒｓ，Ｍ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２００４．Ｏｔｉｔｉｓ ｍｅｄｉａ．Ｔｈｅ ｌａｎｃｅｔ，３６３（９４０７），ｐｐ．４６５－４７３）。

耳感染症には、急性ＯＭ（ＡＯＭ）又は滲出液を伴うＯＭ（ＯＭＥ）があり得、これらは一連のＯＭの異なる段階である。ＡＯＭは、耳痛又は耳の引っ張り、耳漏、発熱、又は易刺激性などの中耳における炎症の１つ以上の徴候又は症状の急速な発症と併せて中耳滲出液（ＭＥＥ）が存在するものとして定義される。ＯＭＥは、急性感染症の徴候又は症状を伴わないＭＥＥとして定義される。一部の小児は、難聴、易刺激性、巧緻性運動障害、又は睡眠障害を含む非感染性の不快感を示す（Ｒｏｖｅｒｓ，Ｍ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２００４．Ｏｔｉｔｉｓ ｍｅｄｉａ．Ｔｈｅ ｌａｎｃｅｔ，３６３（９４０７），ｐｐ．４６５－４７３）。

したがって、本発明の乳児用フォーミュラは、ＡＯＭの発生を低減するため、予防するため、又は治療するために使用することができる。別の実施形態では、本発明のフォーミュラは、ＯＭＥの発生を低減するため、予防するため、又は治療するために使用することができる。別の実施形態では、本発明のフォーミュラは、ＭＥＥ、耳痛又は耳の引っ張り、耳漏、発熱、易刺激性、難聴、巧緻性運動障害、又は睡眠障害の発生を低減するため、予防するため、又は治療するために使用することができる。

いくつかの実施形態では、感染症は、呼吸器感染症である。呼吸器感染症による疾患負荷は、他のどの疾患原因のものよりも大きいと考えられている。２００２年には、５歳未満の小児の死亡率の１８％が呼吸器感染症によるものであった。呼吸器感染症は、上気道感染症（ＵＲＴＩ）及び／又は下気道感染症（ＬＲＴＩ）であり得る（Ｔｒｅｇｏｎｉｎｇ，Ｊ．Ｓ．ａｎｄ Ｓｃｈｗａｒｚｅ，Ｊ．，２０１０．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｒｅｖｉｅｗｓ，２３（１），ｐｐ．７４－９８）。

ＵＲＴＩは、以下の臨床症状を特徴とし得る：鼻（鼻水、鼻づまり、鼻をかむこと、黄色の分泌物、血性分泌物、くしゃみ）；及び／又は咽頭（咽の掻痒感、咽頭痛、嗄声）；これに発熱（３８℃超）及び／又は耳炎が伴う。

ＬＲＴＩは、以下の臨床症状を特徴とし得る：肺炎（肺炎のエピソードは、咳嗽又は呼吸困難として報告される病気として定義され得る）；及び／又は気管支（咳嗽及び／又は分泌物及び／又は黄色の分泌物）。

したがって、本発明の乳児用フォーミュラは、ＵＲＴＩ及び／若しくはＬＲＴＩ感染症、並びに／又は鼻水、鼻づまり、鼻をかむこと、黄色の分泌物、血性分泌物、くしゃみ、咽の掻痒感、咽頭痛、嗄声、発熱、耳炎、肺炎、若しくは気管支炎の１つ以上の発生を低減するため、予防するため、又は治療するために使用することができる。

本発明の乳児用フォーミュラは、本明細書に記載の感染症、例えば、ＬＴＲＩ、ＵＴＲＩ、及び／又はＯＭを発症する乳児のリスクを低減し得る。

乳児の感染症発症の発生を低減することは、本発明による乳児用フォーミュラを投与した場合に、実施例で用いた対照フォーミュラのような従来の乳児用フォーミュラを投与した場合と比較して、乳児が感染症を発症するリスクが低減されることを意味し得る。

一実施形態では、感染症のリスクは、乳児用フォーミュラが乳児に初めて投与されたとき（Ｖ０）から、乳児用フォーミュラが乳児に初めて投与されてから６ヶ月後（Ｖ６）まで、好ましくは例えば、Ｖ０から乳児用フォーミュラが４ヶ月以上投与されたとき、乳児用フォーミュラが乳児に初めて投与されてから４ヶ月後（Ｖ４）まで低減され得る。感染症のリスクはまた、Ｖ４からＶ６まで低減され得る。

本発明の乳児用フォーミュラは、併用薬としての解熱剤及び／又は抗生物質の使用を低減し得る（例えば、乳児用フォーミュラの投与期間中及び／又は投与期間の後）。本明細書で使用される場合、「解熱剤」は、熱を下げる、当業者に周知である物質である。本明細書で使用される場合、「抗生物質」は、いくつかのタイプの細菌感染症を治療又は予防するために使用される、当業者に周知である物質である。

本発明者らは、驚くべきことに、本発明による乳児用フォーミュラが併用薬の量を低減させたことを示した。例えば、本発明による乳児用フォーミュラは、併用薬として使用される解熱剤の量を低減し得る。本発明による乳児用フォーミュラはまた、併用薬として使用される抗生物質の量を低減し得る。

したがって、別の態様では、本発明は、乳児が使用する解熱剤の量を低減する方法であって、乳児に本発明による乳児用フォーミュラを投与することを含む、方法を提供する。別の態様では、本発明は、乳児が使用する解熱剤の量の低減に使用するための、本発明による乳児用フォーミュラを提供する。

本発明による乳児用フォーミュラの使用は、好ましくは、実施例で使用される対照フォーミュラなどの従来の乳児用フォーミュラの使用と比較して必要な薬剤（例えば、解熱剤）の量を低減する。

牛乳タンパク質アレルギー及び肥満
感染症の予防、その発生の低減、又はその治療に加えて、本発明の乳児用フォーミュラは、乳児における肥満を予防し得、及び／又は乳児における肥満のリスクを低減し得、及び／又は乳児における牛乳タンパク質アレルギーを予防し得る。

したがって、好ましい態様では、本発明は、（ｉ）乳児における感染症の予防、その発生の低減、又はその治療と、（ｉｉ）乳児における肥満の予防／治療、及び／又は乳児における肥満のリスクの低減との両方に使用するための本発明による乳児用フォーミュラを提供する。更に、乳児用フォーミュラは、牛乳タンパク質アレルギー（ＣＭＰＡ）及び／又はＣＭＰＡの１つ以上の症状の治療及び／又は予防において使用され得る。

ＣＭＰアレルギー（ＣＭＰＡ）を有する小児のほとんどは、２つ以上の症状を有する：５０～７０％は皮膚症状があり；５０～６０％は胃腸症状があり；２０～３０％は気道症状がある。１０％の小児では、重篤な生命を脅かす症状が現れることがある。（Ｎｕｔｔｅｎ，２０１８．ＥＭＪ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３（１），ｐｐ．５０－５９）。

皮膚症状としては、蕁麻疹、アトピー性湿疹、及び血管性浮腫が挙げられ得る。胃腸症状としては、嚥下障害、頻繁な吐き戻し、疝痛、腹痛、嘔吐、食欲不振、拒食、下痢（腸内タンパク質の喪失又は出血を伴う又は伴わないもの）、便秘（肛囲発疹を伴う又は伴わないもの）、発育不良、潜血（ｏｃｃｕｌｔ ｂｌｏｏｄ ｌｏｓｓ）、及び鉄欠乏性貧血が挙げられ得る。呼吸器症状としては、鼻水、喘鳴、及び慢性咳嗽が挙げられ得る。他の全身症状としては、重篤な代謝性アシドーシス、嘔吐、及び下痢（食物蛋白誘発胃腸炎）を伴うアナフィラキシー及びショック様症状が挙げられる。これらの症状は、典型的には、感染症、薬物摂取、又は他の原因とは無関係である（Ｋｏｌｅｔｚｋｏ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，２０１２．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，５５（２），ｐｐ．２２１－２２９）。

ＣＭＰＡを有する乳児は、例えば、胃腸症状に起因して、より高いレベルのタンパク質を必要とし得る。したがって、ｅＨＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．６～２．８ｇのタンパク質を含有し、ＡＡＦは、典型的には、１００ｋｃａｌ当たり２．８～３．１ｇのタンパク質を含有するものであり、重度の吸収不良を含む胃腸病変のある乳児又は高い代謝率を補うためにタンパク質及びカロリーをより多く必要とする乳児のニーズに対応する。

しかしながら、高タンパク質の乳児用フォーミュラの摂取は、２歳齢の体重及びボディマス指数の増加、並びに、血漿必須アミノ酸、インスリン様成長因子－１、及びＣ－ペプチドの血中濃度の上昇と関連しており、これらは体重増加及び脂質生成活性を誘発するおそれがある。より低いタンパク質含有量は、その後の肥満のリスクを減少させ得る（Ｔｏｔｚａｕｅｒ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０１８．Ｏｂｅｓｉｔｙ，２６（７），ｐｐ．１２０３－１２１０）。

例えば、欧州小児肥満プロジェクト（ＣＨＯＰ）では、高いタンパク質レベルを含有する乳児用フォーミュラを与えられた乳児は、より低いタンパク質レベルを含有する乳児用フォーミュラを与えられた乳児よりも、生後１年間に体重が増加し、６歳時のＢＭＩ及び肥満のリスクが高いことが示されている（Ｔｏｔｚａｕｅｒ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，２０１８．Ｏｂｅｓｉｔｙ，２６（７），ｐｐ．１２０３－１２１０）。

本発明者らは、驚くべきことに、本発明の乳児用フォーミュラは、アレルギー乳児の適切な発育及び発達をサポートすることを示した。更に、本乳児用フォーミュラは安全性及び耐容性があった。

製造方法
本発明の乳児用フォーミュラは、任意の好適な方法で調製することができる。

例えば、本乳児用フォーミュラは、加水分解タンパク質の供給源、炭水化物の供給源、及び脂質の供給源を、適切な割合で一緒にブレンドすることによって調製することができる。更に乳化剤を使用する場合、この時点で含めることができる。この時点でビタミン及びミネラルを添加してもよいが、通常、ビタミンは熱分解を避けるために後で添加する。任意の親油性ビタミン及び乳化剤などをブレンド前に脂質の供給源に溶解することができる。次いで、水、好ましくは逆浸透処理した水を混合して、液体混合物を形成することができる。市販の液化装置を用いて液体混合物を形成することができる。次いで、液体混合物を均質化してもよい。

次いで、液体混合物を熱処理して、細菌含有量を低減することができる。この熱処理は、例えば、蒸気注入によって、又はオートクレーブ若しくは熱交換器、例えば、プレート熱交換器を使用して行うことができる。

次いで、液体混合物を冷却、及び／又は均質化してもよい。均質化した混合物のｐＨ及び固形分含有量は、この時点で調整することができる。

次いで、均質化した混合物を、噴霧乾燥機又は凍結乾燥機などの好適な乾燥装置に移し、粉末に変換することができる。乳児用液体フォーミュラが好ましい場合、均質化された混合物を滅菌し、次いで適切な容器に無菌充填してもよく、又は最初に容器に充填し、次いでレトルト処理してもよい。

次に、実施例により本発明を更に説明するが、これらの実施例は、当業者が本発明を実施するのに役立てるために提供することを意味するものであり、本発明の範囲を限定することを決して意図するものではない。

実施例１－高度加水分解された乳児用フォーミュラの例示
以下は、本発明による高度加水分解された乳児用フォーミュラの例示である。本発明のｅＨＦは、好ましくは、毎日の食事に必須と考えられるあらゆる栄養素、ビタミン、及びミネラルを、栄養に有意な量で含有する。特定の栄養素、ビタミン、及びミネラルには最小必要量が確立されている。

実施例２－タンパク質含有量を減らして高度加水分解された乳児用フォーミュラの安全性及び有効性。

試験デザイン
タンパク質含有量を減らして高度加水分解された乳児用フォーミュラの安全性及び有効性を、フォーミュラを与えた２つの並行群の、対照二重盲検無作為化多施設共同での介入臨床試験において調査した。

臨床試験の目的は、牛乳タンパク質アレルギー（ＣＭＰＡ）の乳児に、タンパク質レベルを減らした新規なｅＨＦ（Ａｌｔｈｅｒａ ２．２）に２種類のヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）を添加したもの（試験フォーミュラ）を与えて、ＨＭＯを含まない市販のｅＨＦ（Ａｌｔｈｅｒａ ２．５）（対照フォーミュラ）を与えられた乳児と同等に発育することを示すことであった。市販のｅＨＦは、現在、特定医療目的用食品として承認されている（規制（ＥＵ）２０１６／１２８）。試験の主要評価項目は、登録時から４ヶ月のフォローアップまでの１日当たりの体重増加であり、登録時の年齢枠は０～６ヶ月齢とした（非劣性デザイン）。

他の目的として、ＣＭＰＡ乳児が試験フォーミュラを摂取することで、（ｉ）薬剤の使用と、耳感染症、下気道感染症などの感染症のリスク／罹患率とを減少させるかどうか、（ｉｉ）耐容性があり、年齢に応じた発育を可能にするかどうか、そして（ｉｉｉ）医療費を低減するかどうかを評価することも含まれた。したがって、試験の副次的評価項目は以下の通りである：（１）年齢別体重、年齢別身長、年齢別頭囲のＺスコア（ＷＨＯ発育基準）を含む他の発育パラメータにおける変化；（２）安全性（有害事象及び重篤な有害効果の発生率）；及び（３）対象となる事象（感染症の発生率、薬剤の使用）。

試験対象集団は、標準的な臨床診療に従って医師がＣＭＰＡと診断し、選択基準ごとに少なくとも２つの症状を有する満期産乳児であった。４ヶ月間の試験フォーミュラ摂取を完了する１３０人の乳児が必要であった。

選択基準は、以下の通りとした。
１．満期産乳児（３７週間≦在胎≦４２週間）；
２．２５００ｇ≦出生体重≦４５００ｇ；
３．乳児の親（国の規制により必要な場合は両方の親）又は法定代理人（ＬＡＲ）の書面によるインフォームド・コンセントを得ていること；
４．生後６ヶ月までの乳児；
５．登録時にフォーミュラのみを与えられている者、又は母乳栄養をしているＣＭＰＡ乳児の母親で、登録前にフォーミュラのみを与えることを自主的に選択した者：並びに
６．標準的な臨床診療に従って医師がＣＭＰＡと診断した（かつ、高度加水分解乳又はアミノ酸乳児用フォーミュラで未治療である）乳児で、以下の症状のうち少なくとも２つが存在する者－泣く、吐き戻し、液状便又は便秘、アトピー性皮膚病変、蕁麻疹又は呼吸器症状。陽性ＩｇＥ血液試験、皮膚プリック試験、パッチ試験、又は食物負荷試験のいずれかに基づく診断の場合、上記のうち、１つのみの症状が存在すればよい。

除外基準は、以下の通りとした。
１．発育に影響を及ぼし得る先天性疾患又は先天異常。
２．ＣＭＰＡによるものではないことが実証された慢性吸収不良。
３．登録前にＣＭＰＡ以外の重大な出生前及び／又は出生後の重篤な疾患（治験責任医師の医学的判断による）。
４．未成年の親（両親）。
５．両親又は介護者が試験の手順を遵守することが期待できない乳児。
６．現在、別の臨床試験に参加している、又は生まれてから参加したことがある。

試験フォーミュラ及び対照フォーミュラを以下に示す。

試験フォーミュラ及び対照フォーミュラにおいて、
・ペプチドの９９重量％超は３０００Ｄａ未満の分子量であった。
・ペプチドの９５重量％超は１２００Ｄａ未満の分子量であった。
・ペプチドの約５２重量％はジペプチド及びトリペプチド（６００～２４０Ｄａの分子量のペプチド）であった。
・総アミノ酸の約２２．４重量％は、試験フォーミュラ及び対照フォーミュラ中の遊離アミノ酸であった。
・検出可能なβ－ラクトグロブリンはなかった（すなわち、β－ラクトグロブリン含有量は０．０１ｍｇ／ｋｇ未満であった）。
・検出可能なカゼインはなかった（すなわち、カゼイン含有量は０．２ｍｇ／ｋｇ未満であった）。

両方のフォーミュラは粉末形態であり、缶の製品ラベルに印刷されている説明に従って、乳児が体重、年齢、及び食欲に適した量を経口摂取できるように調製した。

乳児には、最低でもベースライン後４ヶ月まで（主要試験期間）、そして医療処方に従って乳児が必要とする期間（最長で１２ヶ月齢まで）、試験フォーミュラを与えた。

乳児が必要とする１日当たりの摂取量は、年齢、体重、及び食欲によって異なった。製品は乳児に自由に与えられるが、親又は介護者はラベルに印刷された１日に与えるべき適切な摂取量に関するガイドラインに従った、及び／又は試験担当者からの助言を受けた。

乳児は、最大７回の試験診察を受けた：ベースライン（登録時）、ベースラインから４ヶ月後まで毎月（＋１、＋２、＋３、＋４ヶ月）、ベースラインから６ヶ月後。乳児が１２ヶ月齢に達する時に、更に１回の最終診察が計画される。

無作為化は、試験フォーミュラ群当たり１：１の比率であり、Ｍｅｄｉｄａｔａ Ｂａｌａｎｃｅにおける最小化により実施した。層別化は、登録時の年齢（０～６０日、６１～１２０日、１２０日超）、性別、分娩様式（経膣分娩又は帝王切開）により行われた。双子が登録されている場合は、同じフォーミュラに無作為化した。

試験結果
試験は、試験フォーミュラがアレルギー乳児の適切な発育及び発達をサポートし、安全性及び耐容性があったことを示した。

主要解析では、最初の４ヶ月間の治療にわたって、試験フォーミュラを与えられた乳児が、対照フォーミュラを与えられた乳児に対して発育が非劣性であるかどうかを評価した。治療差及び片側同時９７．５％信頼区間は、混合モデルにより実施した。体重（ｋｇ）は、年齢（月齢）、治療、性別、年齢＊治療、年齢＊性別の関数としてモデル化した。モデルは、隣接する診察における転帰について、自己相関タイプＩ構造を持つ分散共分散行列を仮定した。計算された差は、６３日目［（１４＋１１２）／２］の治療効果の推定に用いられた。０．０３０５の除数を使用して、推定値をｋｇ／月からｇ／日に換算した。体重、身長、及び頭囲、便性状、行動パターン、及び医療資源の利用を含む、主要副次解析を行った。

タンパク質含有量を減らした、ＨＭＯを含む試験フォーミュラを与えた乳児は、ＷＨＯ発育基準に沿った正常な発育を達成した。具体的には、主要解析は、試験フォーミュラを与えた乳児の体重増加［ｇ／ｄ］が対照フォーミュラの場合の発育に対して非劣性であったことを示した（図１）。４ヶ月のフォローアップまでのどの時点でも、身体測定パラメータのいずれにおいても有意差はなかった。

試験及び対照フォーミュラの安全性プロファイルは同様であった。中耳炎／中耳感染症の発生率は、Ｖ０～Ｖ４とＶ０～Ｖ６との間で試験フォーミュラを与えた群において有意に低かった（図３）。

下気道感染症及び上気道感染症においても、有意ではない相対リスク減少率が見られた（図３）。解熱剤の使用は、Ｖ４～Ｖ６の試験フォーミュラ群において有意に低かった（図４）。

実施例３－アミノ酸ベースの乳児用フォーミュラの例示
以下は、本発明によるアミノ酸ベースの乳児用フォーミュラの例示である。本発明のＡＡＦは、好ましくは、毎日の食事に必須と考えられるあらゆる栄養素、ビタミン、及びミネラルを、栄養に有意な量で含有する。特定の栄養素、ビタミン、及びミネラルには最小必要量が確立されている。

上記明細書で言及した全ての刊行物は、本明細書に参照により組み込まれる。開示された本発明の方法、細胞、組成物、及び使用の、本発明の範囲及び趣旨から逸脱することのない様々な修正及び変更が、当業者には明白であろう。本発明は、特定の好ましい実施形態に関連して開示されているが、特許請求される本発明は、このような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解されたい。実際、当業者には自明であり、本発明を実施するために開示された様式の種々の改変は以下の特許請求の範囲の範囲内であることを意図している。

Claims (22)

1. 乳児における感染症の発生の低減又は乳児における感染症の予防に使用するための乳児用フォーミュラであって、前記乳児用フォーミュラが、高度加水分解された乳児用フォーミュラ（ｅＨＦ）又はアミノ酸ベースの乳児用フォーミュラ（ＡＡＦ）であり、前記乳児用フォーミュラが、タンパク質、炭水化物、及び脂質を含み、前記ｅＨＦが１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．４ｇのタンパク質を含み、又は前記ＡＡＦが１００ｋｃａｌ当たり１．８～２．９ｇのタンパク質を含み、前記乳児用フォーミュラが、更に２’－フコシルラクトース（２’ＦＬ）及び／又はラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）を含み、前記脂質の０～３０重量％が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）であり、
   前記乳児が、牛乳タンパク質アレルギーを有する、乳児用フォーミュラ。
2. 前記乳児用フォーミュラが、２’ＦＬ及びＬＮｎＴを含む、請求項１に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
3. 前記乳児用フォーミュラが０．５～３ｇ／Ｌ、０．８～１．５ｇ／Ｌ、又は１ｇ／Ｌの２’ＦＬを含む、請求項１又は２に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
4. 前記乳児用フォーミュラが１ｇ／Ｌの２’ＦＬを含む、請求項３に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
5. 前記乳児用フォーミュラが０．２～１ｇ／Ｌ、０．５～０．８ｇ／Ｌ、又は０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
6. 前記乳児用フォーミュラが０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含む、請求項５に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
7. 前記乳児用フォーミュラが１ｇ／Ｌの２’ＦＬ及び０．５ｇ／ＬのＬＮｎＴを含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
8. 前記乳児用フォーミュラがｅＨＦであり、前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．４ｇのタンパク質を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
9. 前記乳児用フォーミュラがｅＨＦであり、前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり２．１～２．３ｇのタンパク質を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
10. 前記乳児用フォーミュラがｅＨＦであり、前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり２．１５～２．２５ｇのタンパク質を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
11. 前記乳児用フォーミュラがＡＡＦであり、前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり１．９～２．８ｇのタンパク質を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
12. 前記乳児用フォーミュラがＡＡＦであり、前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．７ｇのタンパク質を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
13. 前記乳児用フォーミュラがＡＡＦであり、前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり２．０～２．６ｇ又は２．０～２．４ｇのタンパク質を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
14. 前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり２．２ｇのタンパク質を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
15. 前記乳児用フォーミュラ中の前記脂質の２５重量％以下、２０重量％以下、１５重量％以下、１０重量％以下、５重量％以下、又は１重量％以下が中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
16. 前記乳児用フォーミュラが、添加されたＭＣＴを含まない、請求項１～１５のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
17. 前記乳児用フォーミュラが、１００ｋｃａｌ当たり９～１４ｇの炭水化物及び／又は１００ｋｃａｌ当たり４．０～６．０ｇの脂質を含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
18. 前記感染症が、耳感染症、呼吸器感染症、胃腸感染症、及び／又は尿路感染症である、請求項１～１７のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
19. 前記感染症が、呼吸器感染症である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
20. 前記感染症が、上気道感染症及び／又は下気道感染症である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
21. 前記感染症が、耳感染症である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。
22. 前記感染症が中耳感染症である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の使用のための乳児用フォーミュラ。

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