JP7716498B2 - 積層フィルム、容器、細胞培養容器、細胞培養方法及び細胞培養用容器の製造方法 - Google Patents
積層フィルム、容器、細胞培養容器、細胞培養方法及び細胞培養用容器の製造方法Info
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Description
例えば、4-メチル-1-ペンテン重合体は、嵩高い官能基を有するため、他の熱可塑性ポリオレフィン積層フィルムに比べて密度が低い。このため、4-メチル-1-ペンテン重合体を含む積層フィルムは、酸素ガス、炭酸ガス等のガス透過性が高い。上記のような積層フィルムは、生鮮食品等の包装材などのガス透過性積層フィルムとして用いることができる。
例えば、特許文献1には、4-メチル-1-ペンテン系重合体99~70質量部と、ブテン-1系固体重合体1~30質量部とを含む4-メチル-1-ペンテン樹脂組成物を、結晶化度が25~35%の範囲となるようにフィルム状に成形した後、ヒートシール法によって袋状に成形してなる球根類用包装袋が記載されている。
しかし、密度が低い樹脂は融点が低い傾向にある。融点が低い樹脂を用いてフィルムを製造しようとしても、得られるフィルムが常温でべたつく、樹脂が形状を保持することができずにフィルム自体を製造することができない、得られるフィルムのヒートシール性が低い等の課題があった。つまり、融点が低い樹脂を用いて、製品としての品質が保持されたフィルムを製造することが困難であった。
以上のことから、融点が低い樹脂を用いて、ガス透過性に優れるフィルムを製造することが求められている。
<1> 融点が95℃~200℃である第一ポリオレフィン系樹脂を含む第一ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含む第二ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃~200℃である第三ポリオレフィン系樹脂を含む第三ポリオレフィン系樹脂層と、がこの順で積層され、酸素透過度が7500mL/m2・day・atm~85000mL/m2・day・atmである積層フィルム。
<2> 総厚みが15μm以上150μm未満である<1>に記載の積層フィルム。
<3> 前記第二ポリオレフィン系樹脂層は、JIS K 7112に準拠して測定される密度が、820kg/m3以上890kg/m3未満である<1>又は<2>に記載の積層フィルム。
<4> 前記第二ポリオレフィン系樹脂が、融点90℃未満のエチレンαオレフィン共重合体である<1>~<3>のいずれか1つに記載の積層フィルム。
<5> 前記第一ポリオレフィン系樹脂層及び前記第三ポリオレフィン系樹脂層は、それぞれ、JIS K 7112に準拠して測定される密度が900kg/m3以上980kg/m3以下である<1>~<4>のいずれか1つに記載の積層フィルム。
<6> 二酸化炭素透過度が35000mL/m2・day・atm~250000mL/m2・day・atmである<1>~<5>のいずれか1つに記載の積層フィルム。
<7> 前記第一ポリオレフィン系樹脂層及び前記第三ポリオレフィン系樹脂層の少なくとも一方は、厚みが5μm~100μmである<1>~<6>のいずれか1つに記載の積層フィルム。
<8> 前記第二ポリオレフィン系樹脂層は、厚みが5μm~100μmである<1>~<7>のいずれか1つに記載の積層フィルム。
<9> 第一ポリオレフィン系樹脂層及び第三ポリオレフィン系樹脂層の合計の厚みに対して、前記第二ポリオレフィン系樹脂層の厚み比が0.5~20.0である<1>~<8>のいずれか1つに記載の積層フィルム。
<10> 共押出インフレーションフィルム成型法、共押出キャストフィルム成型法、又は共押出ラミネーション成型法によって成形される<1>~<9>のいずれか1つに記載の積層フィルム。
<11> <1>~<10>のいずれか1つに記載の積層フィルムからなり、ヒートシールされている容器。
<12> <1>~<10>のいずれか1つに記載の積層フィルムを含む細胞培養容器。
<13> 前記積層フィルムを底部に含む<12>に記載の細胞培養容器。
<14> 前記積層フィルムの端部がヒートシールされて袋を形成している<12>又は<13>に記載の細胞培養容器。
<15> BS EN 556 - 1:2001に準拠して測定される医療機器の滅菌保証レベル(SAL)が、10-6以下である<14>に記載の細胞培養容器。
<16> <12>~<15>のいずれか1つに記載の細胞培養容器に細胞を封入し密閉する工程を含む細胞培養方法。
<17> 融点が95℃~200℃である第一ポリオレフィン系樹脂を含む第一ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含む第二ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃~200℃である第三ポリオレフィン系樹脂を含む第三ポリオレフィン系樹脂層と、を共押出して積層フィルムを得る製膜工程を含む細胞培養用容器の製造方法。
<18> さらに、得られた前記積層フィルムの端部をヒートシールして袋を形成する製袋工程を含む<17>に記載の細胞培養用容器の製造方法。
<19> さらに、得られた前記袋にガンマ線を照射する工程を含む<18>に記載の細胞培養用容器の製造方法。
<20> 前記製膜工程において、インフレーション成形機を用いて積層フィルムを得る<17>~<19>のいずれか1つに記載の細胞培養用容器の製造方法。
本明細書中において、部材の「面」は、特に断りが無い限り、部材の「主面」を意味する。
本明細書において、「接着」は、「粘着」を包含する概念である。
本明細書において、「積層フィルム」は、一般的に「フィルム」と呼ばれているものだけでなく、一般的に「シート」と呼ばれているものをも包含する概念である。
本明細書において、組成物中の各成分の量について言及する場合、組成物中に各成分に該当する物質が複数存在する場合には、特に断らない限り、組成物中に存在する複数の物質の合計量を意味する。
本開示の積層フィルムは、融点が95℃~200℃である第一ポリオレフィン系樹脂を含む第一ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含む第二ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃~200℃である第三ポリオレフィン系樹脂を含む第三ポリオレフィン系樹脂層と、がこの順で積層され、酸素透過度が7500mL/m2・day・atm~85000mL/m2・day・atmである。
上述のとおり、ガス透過性に優れる観点から、密度が低い樹脂(例えば低密度のポリオレフィン系樹脂)を用いてフィルムを製造することが好ましいと考えられる。
しかし、密度が低い樹脂は融点が低い傾向にある。融点が低い樹脂を用いてフィルムを
製造しようとしても、樹脂が形状を保持することができずにフィルム自体を製造することができない等の課題があり、融点が低い樹脂を用いて、製品としての品質が保持されたフィルムを製造することが困難であった。
つまり、低融点(すなわち低密度)を有する第二ポリオレフィン系樹脂層を、高融点(すなわち高密度)を有する第一ポリオレフィン系樹脂層及び第三ポリオレフィン系樹脂層が挟むことで積層フィルムを形成している。
本開示の積層フィルムは、低融点(すなわち低密度)を有する第二ポリオレフィン系樹脂層を含むことでガス透過性に優れる。また、第二ポリオレフィン系樹脂層を、高融点(すなわち高密度)を有する第一ポリオレフィン系樹脂層及び第三ポリオレフィン系樹脂層が挟むことで、べたつきがなく、フィルムとしての形状を保持することができる。
(酸素透過度)
本開示の積層フィルムにおける酸素透過度は、7500mL/m2・day・atm~85000mL/m2・day・atmである。
本開示の積層フィルムにおける酸素透過度は、青果物、花卉、微生物等を長期的に保存する観点から、好ましくは7500mL/m2・day・atm~80000mL/m2・day・atmであり、より好ましくは10000mL/m2・day・atm~50000mL/m2・day・atmである。
本開示の積層フィルムにおける二酸化炭素透過度は、特に制限はない。
本開示の積層フィルムにおける二酸化炭素透過度は、青果物、花卉、微生物等を長期的に保存する観点から、好ましくは8000mL/m2・day・atm~250000mL/m2・day・atmであり、より好ましくは35000mL/m2・day・atm~250000mL/m2・day・atmであり、さらに好ましくは50000mL/m2・day・atm~230000mL/m2・day・atmであり、特に好ましくは50000mL/m2・day・atm~200000mL/m2・day・atmであり、より一層好ましくは50000mL/m2・day・atm~150000mL/m2・day・atmである。
本開示の積層フィルムにおける水素透過度は、特に制限はない。
本開示の積層フィルムにおける水素透過度は、水素分離膜、水素透過膜等の水素電池関連部材に好適に使用できる観点から、好ましくは10000mL/m2・day・atm~300000mL/m2・day・atmであり、より好ましくは50000mL/m2・day・atm~230000mL/m2・day・atmであり、さらに好ましくは50000mL/m2・day・atm~200000mL/m2・day・atmであり、特に好ましくは50000mL/m2・day・atm~150000mL/m2・day・atmである。
y・atm~250000mL/m2・day・atmであり、水素透過度が10000mL/m2・day・atm~300000mL/m2・day・atmであることが好ましい。
例えば、積層フィルムの酸素透過度(単位:mL/m2・day・atm)、二酸化炭素透過度(単位:mL/m2・day・atm)及び水素透過度(単位:mL/m2・day・atm)は、下記の条件により測定することができる。
検出器;ガスクロマト方式
試験気体;各種ガス(二酸化炭素、酸素又は水素)
測定温度;23℃
透過面積;35mmφ
第一ポリオレフィン系樹脂層は、融点が95℃~200℃である第一ポリオレフィン系樹脂を含む。
本開示の積層フィルムは、第一ポリオレフィン系樹脂層を含むことで、フィルムとしての形状を保持することができる。また、べたつきを抑えることができる。
本開示の積層フィルムは、第一ポリオレフィン系樹脂層と後述の第三ポリオレフィン系樹脂層とを含むことで、ヒートシール性に優れる。
これにより、ヒートシールした場合のヒートシール強度に優れる。
上記の観点から、第一ポリオレフィン系樹脂は、融点が95℃~200℃であることが好ましく、100℃~190℃であることがより好ましく、110℃~180℃であることがさらに好ましい。
第一ポリオレフィン系樹脂層の密度が900kg/m3以上であることで、得られる積層フィルムがフィルムとしての形状を保持することができる。
第一ポリオレフィン系樹脂層の密度が980kg/m3未満であることで、得られる積層フィルムがヒートシール性に優れる。
上記の観点から、第一ポリオレフィン系樹脂層は、JIS K 7112(1999年)に準拠して測定される密度が、905kg/m3以上950kg/m3以下であること
がより好ましく、910kg/m3以上930kg/m3以下であることがさらに好ましい。
例えば、第一ポリオレフィン系樹脂としては、エチレン単独重合体、プロピレン単独重合体、α-オレフィン共重合体等が挙げられる。
エチレン-α-オレフィン共重合体としては、例えば、エチレンと、プロピレン、1-ブテン、1-ヘキセン及び1-オクテンからなる群より選択される1つ以上のモノマーとの共重合体が挙げられる。
第一ポリオレフィン系樹脂は、1種を単独で用いてもよく、2種以上を併用してもよい。
不飽和カルボン酸変性エチレン-α-オレフィン共重合体に使用されるエチレン-α-オレフィン共重合体は、例えば、エチレンと炭素数3~20のα-オレフィンとの共重合体であってもよい。
炭素数3~20のα-オレフィンとしては、プロピレン、1-ブテン、1-ヘキセン、1-オクテン、1-デセン、1-ドデセン、1-テトラデセン、1-ヘキサデセン、1-オクタデセン及び1-エイコセンを挙げることができる。
上記の中でも、接着強度の観点から、炭素数3~20のα-オレフィンとしては、プロピレン、1-ブテン、1-ヘキセン又は1-オクテンであることが好ましく、1-ブテン、1-ヘキセン又は1-オクテンであることがより好ましい。
上記不飽和カルボン酸の誘導体としては、例えば、不飽和カルボン酸の酸無水物、イミド、アミド、エステル等が挙げられる。
上記の中でも、変性に用いられる不飽和カルボン酸としては、不飽和カルボン酸又はその酸無水物が好ましく、マレイン酸、マレイン酸無水物、ナジック酸、及びナジック酸無水物がより好ましい。
上記不飽和カルボン酸又はその誘導体をグラフトモノマーとして、グラフト共重合を行って変性物を製造する方法としては、従来公知の方法を用いることができる。
例えば、エチレン-α-オレフィン共重合体を溶融させグラフトモノマーを添加してグラフト共重合させる溶融変性法、あるいはエチレン-α-オレフィン共重合体を溶媒に溶解させグラフトモノマーを添加してグラフト共重合させる溶液変性法等を用いることができる。
ラジカル開始剤の含有量は、ベースポリマーであるエチレン-α-オレフィン共重合体100質量部に対して、0.001質量部~2質量部の範囲であってもよい。
エチレン-不飽和カルボン酸系共重合体は、エチレン由来の構造単位と不飽和カルボン酸由来の構造単位とを含む共重合体である。
本開示におけるエチレン-不飽和カルボン酸系共重合体は、エチレンと不飽和カルボン酸との共重合体であってもよいし、エチレンと不飽和カルボン酸とその他のモノマーとの共重合体であってもよいし、エチレン重合体を不飽和カルボン酸で変性した重合体であってもよい。
エチレン-不飽和カルボン酸系共重合体としては、エチレン-不飽和カルボン酸2元共重合体及びそのアイオノマー、エチレン-不飽和カルボン酸-不飽和カルボン酸エステル3元共重合体及びそのアイオノマー、エチレン-不飽和カルボン酸エステル2元共重合体
が挙げられ、層間接着強度及びヒートシール強度の観点から、エチレン-不飽和カルボン酸-不飽和カルボン酸エステル3元共重合体及びそのアイオノマーが好ましい。
これらの中でも、耐熱性に優れ高温加工ができる観点から、アクリル酸エチル、メタクリル酸、メタクリル酸メチル、及び酢酸ビニルからなる群から選ばれる少なくとも1種が好ましく、アクリル酸エチル、メタクリル酸及びメタクリル酸メチルからなる群から選ばれる少なくとも1つがより好ましい。
EEAにおいて、アクリル酸エチルの含有量は、成形性と層間接着強度の観点から、10質量%~40質量%であってもよく、好ましくは15質量%~30質量%である。
またメルトフローレート(ASTM D1238に準拠、温度190℃、荷重2.16kgによる測定)は、成形性と層間接着強度の観点から、5g/10分~50g/10分であってもよく、好ましくは10g/10分~30g/10分である。
エチレン-メタクリル酸共重合体において、メタクリル酸の含有量は、成形性と層間接着強度の観点から、10質量%~40質量%であってもよく、好ましくは3質量%~10質量%である。
またメルトフローレート(ASTM D1238に準拠、温度190℃、荷重2.16kgによる測定)は、成形性と層間接着強度の観点から、5g/10分~100g/10分であってもよく、好ましくは10g/10分~80g/10分である。
市販品としては、三井・ダウポリケミカル社製のニュクレル(登録商標)などが挙げられる。
エチレン-酢酸ビニル共重合体(EVAともいう)は、エチレンと酢酸ビニルとの共重合体である。
また、シラン変性エチレン-酢酸ビニル共重合体(シラン変性EVAともいう)は、EVAを変性させて得られる化合物である。
EVAは、密度が、930kg/m3~980kg/m3の範囲であることが好ましい。
EVAは、190℃、2.16kg荷重でのメルトフローレート(MFR)が、0.8g/10分~30g/10分であることが好ましい。
エチレン-酢酸ビニル共重合体としては、従来公知の方法で得られた製造したものを適宜用いてもよく、市販のものを用いてもよい。
しい。
上記不飽和炭化水素基としては、例えば、ビニル基、アリル基、(メタ)アクリル基等が挙げられ、アルコキシ基としては、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ブトキシ基等が挙げられる。
上記シラン化合物としては、例えば、不飽和炭化水素基がビニル基であり、アルコキシ基がメトキシ基又はエトキシ基である、ビニルトリメトキシシラン、ビニルトリエトキシシランが好ましい。
例えば、シラン変性EVAは、押出機中でEVAに、シラン化合物及びラジカル発生剤を添加し、ラジカル発生剤の熱分解開始温度以上の温度及び時間で溶融混練した後、ペレット化することにより得ることができる。
ラジカル発生剤の含有量は、EVAの種類、シラン化合物の使用量によって適宜調整すればよい。
例えば、ラジカル発生剤の含有量は、EVA100質量部に対して、0.01質量部~5.0質量部であることが好ましい。
また、上記シラン化合物間の重合を抑制するため、メルカプタン等の反応禁止剤を添加してもよい。
第二ポリオレフィン系樹脂層は、融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含む。
本開示の積層フィルムは、第二ポリオレフィン系樹脂層を含むことで、ガス透過性を向上させることができる。
また、本開示の積層フィルムは、第二ポリオレフィン系樹脂層を含むことで、低温に対する耐性(低温特性ともいう)に優れる。例えば、本開示の積層フィルムを用いて細胞等の内容物を冷蔵保存又は冷凍保存する場合、低温でのクラック、層間剥離等が抑制される。
い。
上記の観点から、第二ポリオレフィン系樹脂は、融点が90℃以下であることが好ましく、85℃以下であることがより好ましい。
第二ポリオレフィン系樹脂層の密度が800kg/m3以上であることで、得られる積層フィルムがフィルムとしての形状を保持することができる。
第二ポリオレフィン系樹脂層の密度が900kg/m3未満であることで、得られる積層フィルムがガス透過性に優れる。
上記の観点から、第二ポリオレフィン系樹脂層は、JIS K 7112(1999年)に準拠して測定される密度が、820kg/m3以上890kg/m3以下であることがより好ましく、830kg/m3以上890kg/m3以下であることがより好ましく、850kg/m3以上888kg/m3以下であることがさらに好ましい。
例えば、第二ポリオレフィン系樹脂としては、上述の第一ポリオレフィン系樹脂と同様に、エチレン単独重合体、プロピレン単独重合体、α-オレフィン共重合体等が挙げられる。
第二ポリオレフィン系樹脂におけるエチレン単独重合体、プロピレン単独重合体及びα-オレフィン共重合体の具体例、具体的態様、好ましい態様等の詳細は、第一ポリオレフィン系樹脂の項に記載のエチレン単独重合体、プロピレン単独重合体及びα-オレフィン共重合体の具体例、具体的態様、好ましい態様等の詳細と同様である。
エチレン単独重合体、及び、エチレンと1-ブテンとの共重合体であるエチレン・1-ブテン共重合体からなる群から選択される少なくとも1つであることがより好ましい。
第二ポリオレフィン系樹脂は、融点90℃未満のエチレンαオレフィン共重合体であることが好ましい。
第三ポリオレフィン系樹脂層は、融点が95℃~200℃である第三ポリオレフィン系樹脂を含む。
本開示の積層フィルムは、第三ポリオレフィン系樹脂層を含むことで、フィルムとしての形状を保持することができる。また、べたつきを抑えることができる。
本開示における第三ポリオレフィン系樹脂と本開示における第一ポリオレフィン系樹脂とは、同じ樹脂であってもよく異なる樹脂であってもよいが、同じ樹脂であることが好ましい。
これにより、ヒートシールした場合のヒートシール強度に優れる。
上記の観点から、第三ポリオレフィン系樹脂は、融点が95℃~200℃であることが好ましく、100℃~190℃であることがより好ましく、110℃~180℃であることがさらに好ましい。
第三ポリオレフィン系樹脂層の密度が900kg/m3以上であることで、得られる積層フィルムがフィルムとしての形状を保持することができる。
第三ポリオレフィン系樹脂層の密度が980kg/m3未満であることで、得られる積層フィルムがヒートシール性に優れる。
上記の観点から、第三ポリオレフィン系樹脂層は、JIS K 7112(1999年)に準拠して測定される密度が、905kg/m3以上950kg/m3以下であることがより好ましく、910kg/m3以上930kg/m3以下であることがさらに好ましい。
例えば、第三ポリオレフィン系樹脂としては、上述の第一ポリオレフィン系樹脂と同様に、エチレン単独重合体、プロピレン単独重合体、α-オレフィン共重合体等が挙げられる。
第三ポリオレフィン系樹脂におけるエチレン単独重合体、プロピレン単独重合体及びα-オレフィン共重合体の具体例、具体的態様、好ましい態様等の詳細は、第一ポリオレフィン系樹脂の項に記載のエチレン単独重合体、プロピレン単独重合体及びα-オレフィン共重合体の具体例、具体的態様、好ましい態様等の詳細と同様である。
つまり、第一ポリオレフィン系樹脂層及び第三ポリオレフィン系樹脂層の両方が、JIS K 7112に準拠して測定される密度が900kg/m3以上980kg/m3以下であることがより好ましい。
第一ポリオレフィン系樹脂層及び第三ポリオレフィン系樹脂層の両方は、厚みが5μm~100μmであることがより好ましい。
厚み比(第二/第一・第三)が上記範囲内であることで、得られる積層フィルムにおいてガス透過性及びフィルムとしての形状保持性がバランスよく調整される。
上記の観点から、厚み比(第二/第一・第三)は、0.7~10.0であることがより好ましく、1.0~5.0であることがさらに好ましい。
本開示における第一ポリオレフィン系樹脂~第三ポリオレフィン系樹脂が同じ樹脂であることで、リサイクル性に優れる。
本開示の積層フィルムの製造方法は、特に限定されるものではなく、例えば、本開示の積層フィルムの構成成分として含まれる各層が界面付近で混ざり合うことで接着し、積層フィルムが形成される方法が好ましい。
このような方法としては、例えば、溶融させた樹脂を積層する共押出法、予め形成された樹脂積層フィルムを熱融着させる熱融着法等が挙げられる。
これらの方法の中でも、各層における層間接着強度がより高く、層間剥離がより生じ難い積層フィルムを形成することができる観点から、溶融させた樹脂を積層する共押出法がより好ましい。
表面処理を行うことで、より優れた層間接着強度を得ることができる。
表面処理としては、例えば、コロナ処理、オゾン処理等が挙げられる。
コロナ処理は、例えば、コロナマスター(例えば、信光電気計社製のPS-10S)等を用いて行なうことができる。
オゾン処理は、UVオゾンクリーナー(例えば、日本レーザー電子株式会社製のUV42)を用いて行うことができる。
本開示の積層フィルムは、例えば、テープ、粘着テープ、マスキングテープ、マスキング積層フィルム、仮着性積層フィルム、鮮度保持用包装積層フィルム、プラスチック封筒、イージーオープン包装袋、自動包装積層フィルム、ショッピングバック、スタンディングバック、液体積層フィルム容器、透明包装箱、建材、貼合用積層フィルム、農業用積層フィルム、食品包装資材、果物包装資材、花卉包装資材、電子部品包装資材、機械部品包装資材、穀物包装資材、魚介類等の水産物包装資材、医療用積層フィルム、医療用テープ、植物細胞培養用パック、種苗保管育成用パック、動物細胞培養用パック、二酸化炭素分離膜、水素分離膜、酸素付加膜等として幅広く使用することができる。
本開示の容器は、本開示の積層フィルムからなり、ヒートシールされている。
容器としては、内部に収容物を収容することができるものであれば、形状等に特に制限はない。容器の形状は、例えば、袋状であってもよい。
上記の中でも、容器としては、細胞培養容器が好ましい。
本開示の細胞培養容器は、本開示の積層フィルムを含む。
本開示の積層フィルムは、低融点のポリオレフィン系樹脂を含み、ガス透過性に優れる。そのため、本開示の積層フィルムを含む細胞培養容器もまた、ガス透過性に優れる。これによって、細胞培養中であっても、内部の酸素濃度を良好に維持することができる。
従来であれば、例えば、細胞培養の途中に、定期的に酸素を容器内部に注入する等の方法によって、容器内部の酸素濃度を維持していた。本開示の細胞培養容器は、優れたガス透過性を示すことから、定期的に酸素を容器内部に注入することを必ずしも要しないと推測される。
本開示の細胞培養容器は、本開示の積層フィルムからなっていてもよく、本開示の積層フィルムを一部に含んでいてもよい。
本開示の細胞培養容器は、本開示の積層フィルムを底部に含むことが好ましい。
本開示の細胞培養容器は、積層フィルムの端部がヒートシールされて袋を形成していることが好ましい。
本開示の細胞培養容器は、密封できる形状であることが好ましい。
例えば、積層フィルムの端部がヒートシールされて袋を形成している培養容器が、サンプルを出し入れするための出入口を含んでいてもよい。
SALが、上記範囲内である場合、容器内部に生育可能な微生物が存在しない状態であると考えられ、無菌性に優れることを示す。
本開示の細胞培養方法は、本開示の細胞培養容器に細胞を封入し密閉する工程を含む。
上述の通り、本開示の細胞培養容器は、優れたガス透過性を示すことから、定期的に酸素を容器内部に注入することを必ずしも要しないと推測される。そのため、本開示の細胞培養容器に細胞を封入し密閉する工程が完了すれば、その後に定期的に酸素を容器内部に注入することなく細胞を培養することができると考えられる。
本開示の細胞培養用容器の製造方法は、融点が95℃~200℃である第一ポリオレフィン系樹脂を含む第一ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含む第二ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃~200℃である第三ポリオレフィン系樹脂を含む第三ポリオレフィン系樹脂層と、を共押出して積層フィルムを得る製膜工程を含む。
インフレーション成形の成形条件としては、適宜選択することができる。
成形条件としては、例えば、下記の条件であってもよい。
~成形条件~
成形機:3層インフレーション成形機(アルピネ社製:50mmφ押出機3台)
ダイス:225mmφ(径)、3.5mm(リップ幅)
エアーリング:2ギャップタイプ
成形温度:200℃
押出し量:(第1層(最外層):5.3kg/hr、第2層(中間層):10.2/hr、第3層(最内層):5.3kg/hr)
引取速度:10m/min
ヒートシール温度としては、100℃~200℃であることが好ましく、110℃~170℃であることがより好ましく、120℃~150℃であることがさらに好ましい。
積層フィルムを2枚準備し、積層フィルムの面々同士を対向させて、ヒートシール温度140℃、圧力0.2MPa、シール時間1秒間、シールバーの幅5mm幅で端部をヒートシールした後、放熱する。
ガンマ線を照射することで、袋内部を滅菌することができるため、細胞培養用容器としての品質に優れる。
また、
ガンマ線の吸収線量は、5kGy~50kGyが好ましく、細胞培養容器の医療機器の滅菌保証レベル(SAL)が、10-6以下となるまで行うことが好ましい。
[ポリオレフィン]
LLDPE:C6-直鎖状低密度ポリエチレン共重合体(プライムポリマー社製エボリューSP2020、融点116℃、密度916kg/m3)
PO1:直鎖状低密度ポリエチレン共重合体(ダウ・ケミカル日本株式会社製アフィニティー(登録商標)VP 8770G1、融点82℃、密度886kg/m3)
PO2:エチレン・ブテン共重合体(三井化学株式会社製タフマー(登録商標)DF640、融点50℃以下、密度864kg/m3)
<実施例1>
表1に記載のポリオレフィンを用い、下記成形条件でインフレーションフィルム成形法を行い、厚み30μm、幅600mmの3層の積層フィルムを製造した。積層フィルムにおいて、第一ポリオレフィン系樹脂層(第1PO層ともいう)、第二ポリオレフィン系樹脂層(第2PO層ともいう)及び第三ポリオレフィン系樹脂層(第3PO層ともいう)の厚み比(第1PO層:第2PO層:第3PO層)は、表1に記載の通りである。
成形機:3層インフレーション成形機(アルピネ社製:50mmφ押出機3台)
ダイス:225mmφ(径)、3.5mm(リップ幅)
エアーリング:2ギャップタイプ
成形温度:200℃
押出し量:(第1PO層(最外層):5.3kg/hr、第2PO層(中間層):10.2/hr、第3PO層(最内層):5.3kg/hr)
引取速度:10m/min
第1PO層、第2PO層、及び第3PO層の各押出し量を、4.3kg/hr、12.2kg/hr、及び4.3kg/hrに変更した以外は、実施例1と同様にして3層の積層フィルムを製造した。
積層フィルムにおいて、厚み比(第1PO層:第2PO層:第3PO層)は、表1に記載の通りである。
第1PO層、第2PO層、及び第3PO層の各押出し量を、3.1kg/hr、14.6kg/hr、及び3.1kg/hrに変更したこと以外は、実施例1と同様にして3層の積層フィルムを製造した。
積層フィルムにおいて、厚み比(第1PO層:第2PO層:第3PO層)は、表1に記載の通りである。
表1に記載のポリオレフィンを用い、下記成形条件でキャストフィルム成形法を行い、厚み30μm、幅720mmの3層の積層フィルムを製造した。積層フィルムにおいて、第1PO層、第2PO層及び第3PO層の厚み比(第1PO層:第2PO層:第3PO層)は、表1に記載の通りである。
成形機;Tダイ付き50mmφ多層キャストフィルム成型機(住友重機機械モダン株式会社製:50mmφ押出機、40mmφ押出機2台)
シリンダー温度;200℃
チルロール温度;18℃
引取り速度:30m/min
実施例3で得られた積層フィルムを用いて、長方形形状に積層フィルムを裁断し、1辺に導入ポート及び導出ポートを設け、長方形上の積層フィルムの周囲の端部を140℃で5mm幅ヒートシールし、容量が1000mLの細胞培養バッグを作製した。
得られた細胞培養バッグにガンマ線を照射し、BS EN 556 - 1:2001に準拠して測定される医療機器の滅菌保証レベル(SAL)が、10-6以下であることを確認した。滅菌した細胞培養バッグは、変色等確認されず良好な外観であった。
表1に記載のポリオレフィンを用い、第2PO層及び第3PO層を設けなかったこと以外は、実施例1と同様にして第1PO層のみを有する単層フィルムを製造した。
表1に記載のポリオレフィンを用い、第1PO層及び第3PO層を設けなかったこと以外は、実施例1と同様にして第2PO層のみを有する単層フィルムを製造しようと試みた。
しかし、べたつきがありフィルム化することができなかった。そのため、第2PO層のみを有する単層フィルムを製造することができなかった。
(ガス透過度)
積層フィルムの酸素透過度(単位:mL/m2・day・atm)、二酸化炭素透過度(単位:mL/m2・day・atm)及び水素透過度(単位:mL/m2・day・atm)は、下記の条件により測定する。
二酸化炭素透過度が70000mL/m2・day・atm以上であり、酸素透過度が20000mL/m2・day・atm以上であり、かつ、水素透過度が10000mL/m2・day・atm以上である場合、積層フィルムはガス透過性に優れることを意味する。
検出器;ガスクロマト方式
試験気体;各種ガス(二酸化炭素、酸素又は水素)
測定温度;23℃
透過面積;35mmφ
下記の方法により、フィルムのヒートシール性を評価した。
フィルムを2枚準備し、フィルムの面々同士を対向させて、ヒートシール温度140℃、圧力0.2MPa、シール時間1秒間、シールバーの幅5mm幅でヒートシールした後、放熱した。次いでヒートシールにより得られた試験体から15mm幅の試験片を切り取り、クロスへッドスピード300mm/分でヒートシール部を剥離させた際の剥離強度を測定し、その数値をヒートシール強度としてヒートシール性を評価した。
~評価基準~
A:5N/15mm以上
B:5N/15mm未満
テスター産業株式会社製のゲルボフレックステスターを使用し、各実施例及び比較例で得られたフィルムから210mm幅、297mm長さの試験片を切り出し、4℃の雰囲気下で、屈曲角度440度、屈曲速度40回/分で、1000回の屈曲試験を行った。その後、試験片で袋をつくり、三菱ガス化学株式会社製のエージレスシールチェックでピンホール数を測定し、下記評価基準に従って評価した。
~評価基準~
A:ピンホールが50個/m2未満であった。
B:ピンホールが50個/m2以上であった。
を含む第三ポリオレフィン系樹脂層と、がこの順で積層されている積層フィルムを用いた実施例は、第2PO層に低融点のポリオレフィン系樹脂を含み、ガス透過性に優れていた。
一方、単層フィルムであり、融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含まない比較例1は、低融点のポリオレフィン系樹脂を含まず、ガス透過性に劣っていた。
融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を用いて単層フィルムの製造を試みた比較例2は、単層フィルムを製造することができなかった。
本明細書に記載された全ての文献、特許出願、及び技術規格は、個々の文献、特許出願、及び技術規格が参照により取り込まれることが具体的かつ個々に記された場合と同程度に、本明細書に参照により取り込まれる。
Claims (20)
- 融点が95℃~200℃である第一ポリオレフィン系樹脂を含む第一ポリオレフィン系樹脂層と、
融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含む第二ポリオレフィン系樹脂層と、
融点が95℃~200℃である第三ポリオレフィン系樹脂を含む第三ポリオレフィン系樹脂層と、
がこの順で積層され、
酸素透過度が7500mL/m2・day・atm~85000mL/m2・day・atmである積層フィルム。 - 総厚みが15μm以上150μm未満である請求項1に記載の積層フィルム。
- 前記第二ポリオレフィン系樹脂層は、JIS K 7112に準拠して測定される密度が、820kg/m3以上890kg/m3以下である請求項1に記載の積層フィルム。
- 前記第二ポリオレフィン系樹脂が、融点90℃未満のエチレンαオレフィン共重合体である請求項1に記載の積層フィルム。
- 前記第一ポリオレフィン系樹脂層及び前記第三ポリオレフィン系樹脂層は、それぞれ、JIS K 7112に準拠して測定される密度が900kg/m3以上980kg/m3以下である請求項1に記載の積層フィルム。
- 二酸化炭素透過度が35000mL/m2・day・atm~250000mL/m2・day・atmである請求項1に記載の積層フィルム。
- 前記第一ポリオレフィン系樹脂層及び前記第三ポリオレフィン系樹脂層の少なくとも一方は、厚みが5μm~100μmである請求項1に記載の積層フィルム。
- 前記第二ポリオレフィン系樹脂層は、厚みが5μm~100μmである請求項1に記載の積層フィルム。
- 第一ポリオレフィン系樹脂層及び第三ポリオレフィン系樹脂層の合計の厚みに対して、前記第二ポリオレフィン系樹脂層の厚み比が0.5~20.0である請求項1に記載の積層フィルム。
- 共押出インフレーションフィルム成型法、共押出キャストフィルム成型法、又は共押出ラミネーション成型法によって成形される請求項1に記載の積層フィルム。
- 請求項1~請求項10のいずれか1項に記載の積層フィルムからなり、ヒートシールされている容器。
- 請求項1に記載の積層フィルムを含む細胞培養容器。
- 前記積層フィルムを底部に含む請求項12に記載の細胞培養容器。
- 前記積層フィルムの端部がヒートシールされて袋を形成している請求項12に記載の細胞培養容器。
- BS EN 556 - 1:2001に準拠して測定される医療機器の滅菌保証レベル(SAL)が、10-6以下である請求項14に記載の細胞培養容器。
- 請求項12~請求項15のいずれか1項に記載の細胞培養容器に細胞を封入し密閉する工程を含む細胞培養方法。
- 融点が95℃~200℃である第一ポリオレフィン系樹脂を含む第一ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃未満である第二ポリオレフィン系樹脂を含む第二ポリオレフィン系樹脂層と、融点が95℃~200℃である第三ポリオレフィン系樹脂を含む第三ポリオレフィン系樹脂層と、を共押出して積層フィルムを得る製膜工程を含む細胞培養用容器の製造方法。
- さらに、得られた前記積層フィルムの端部をヒートシールして袋を形成する製袋工程を含む請求項17に記載の細胞培養用容器の製造方法。
- さらに、得られた前記袋にガンマ線を照射する工程を含む請求項18に記載の細胞培養用容器の製造方法。
- 前記製膜工程において、インフレーション成形機を用いて積層フィルムを得る請求項17に記載の細胞培養用容器の製造方法。
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