JPH01101463A - 流れ遅延ポリマーを伴う免疫アッセイフィルター及びそのフィルターを有する試験装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、水溶液のフィルター通過時間を遅延させるの
に有効なフィルター及び該フィルターを使用している試
験装置に関する。本発明のフィルターは生物学的液体の
免疫アッセイを行うための装置に特に適している。

（従来の技術） 妊娠及び／又は伝染病の免疫アッセイを行うための使い
捨ての装置が供給されてきた。米国特許第３．８８８．
６２９号には、そのような例が開示されている。それら
の装置には、フィルターを通過する液体を集めるための
下部室と反応を行う上部室とを隔てるフィルターが存在
している。抗原もしくは抗体からなる試薬は、各々抗体
もしくは抗原とフィルター付近で反応して複合体を生成
しその複合体がフィルター上に残るように上部室に用意
されていることもある。溶媒は未反応の遊離抗原及び抗
体と共にフィルターを通過する。最も好ましくは、フィ
ルターの孔径は、実施される免疫アッセイにおいて生成
する複合体のみをフィルター上に濾別できるように作ら
れている。

そのような装置の製造段階において、ある問題が存在し
ている。理想的には、試薬はフィルターの上側の表面上
に塗布することに裏って上部室に適用される。しかし、
そのフィルターは非複合体型の試薬を含む液体を通過す
るように設計されている。試薬を早く乾燥しようとして
、乾燥温度を上げ過ぎると試薬は変性してしまう。ゆえ
に、フィルター表面に試薬を残そうとして（もしくは僅
かに上側の表面に浸透している状態にしようとして）溶
媒を乾燥しても乾燥が終わる前に試薬溶液がフィルター
を通過してしまう。従って、かかる試薬を被覆物（オー
バーコート）として適用することは不可能であった。

米国特許第４，５８７，１０２号は、好ましくは５０な
いし９０％の空隙率を有する多孔質繊維の積層からなる
試験エレメントを開示している。時間遅延層は検出層（
ｃｏｌ、１２）に積層されている。

その層は１もしくは２種類の水溶性ポリマーからなって
おり、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリデン、
もしくはカルボキシメチルセルロースであっても良い。

その量は厚みで２ないし５０ミクロン（ｃｏｌ、Ｉ３）
であると述べられている。かかる量の水溶性ポリマーか
ら約２．２ｇ／ｍ２ないし約５５ｇ／ｍ”の間の乾燥し
た被覆がつくられる。

どの程度の誘導時間が達成されるか、また、乾燥温度が
何等かの問題を生じるかどうかについては何も記載され
ていない。

本発明の目的は、試薬をフィルター上で乾燥でき、しか
も最終的に液体のフィルター通過を可能にするフィルタ
ーを提供することにある。

（発明の構成） 本発明の一態様によれば、本発明の目的は免疫アッセイ
における水性溶媒から選択された物質を濾過できる時間
遅延フィルターによって達成される。そのフィルターは
、溶媒は通過するが、前記物質はフィルター上に保持す
るように作られた孔を有する膜、及び約６ｍｍの高さの
水圧（水頭圧）と同等の圧力の液体圧力に対して、室温
での膜の誘導時間を少なくとも約３０秒な・いし約３０
０秒にするのに有効な基型（タイプ）、分子量及び単位
面積当たり乾燥固体被覆量を有する前記膜の表面及び内
部に存在する少なくとも１種類の水溶性ポリマーからな
る時間遅延フィルターである。

本発明の第二の態様によれば、本発明の目的は上部反応
室、下部液体収集室及び前記２室を分離しているフィル
ターからなる使い捨て反応試験装置により達成される。

前記フィルターは、溶媒は通過するが、前記物質はフィ
ルター上に保持するように作られた孔を有する膜、及び
約６ｍｍの高さの水圧と同等の圧力の液体圧力に対して
、室温での膜の誘導時間を少なくとも約３０秒ないし約
３００秒にするのに有効な基型、分子量及び単位面積当
たり乾燥固体被覆量を有する、前記膜の表面及び内部に
存在する少なくとも１８１類の水溶性ポリマーからなる
なることを特徴としている。

本発明を、好ましい実施態様と関連させながら説明する
。即ち、好ましい実施態様とは免疫アッセイにおいて抗
体−抗原複合体を濾別する使い捨て反応試験装置が使用
される場合、抗体もしくは抗原からなる試薬が表面被覆
（オーバーコート）としてフィルター表面に予め適用さ
れている態様である。更に、本発明は、前述の水頭圧に
対して室温での誘導時間が少なくとも約３０秒ないし約
３００秒であることが必要ないかなる種類の粒子も濾別
すことができる時間遅延フィルターをどのような装置に
も提供できる。

ここで用いられる“誘導時間”とはフィルター９の上側
表面にある水頭圧で負荷された液体がフィルターの下側
まで浸透するために掛かる時間を意味している。フィル
ターの浸透における遅延時間は膜上に被覆された水溶性
ポリマーの性質と量の関数となる。この遅延時間は勿論
ポリマーの再溶解によって引き起こされている。誘導時
間は試薬が水性のオーバーコートとして適用され、そし
てフィルターを全く通過することなく乾燥できる程度に
長くなければならず、同時に、使用者が装置を使用でき
る程度に十分短く、即ち、適当な時間の間に試験液体が
フィルターを通過しなければならない。誘導時間は、免
疫試薬と被験液体を十分反応させるだけインキュベーシ
ョンできなければならない。

最小の誘導時間はオーバーコートされた試薬を乾燥する
ときの温度の関数にもなっ、ていることが分かった。し
かし、そのような試薬の殆どが温度感受性であるので、
乾燥温度は約５０℃以下でなくてはならない。このため
、好適な未乾燥被覆に対する乾燥時間は約３０秒となり
、フィルターの誘導時間は少なくとも約３０秒はなくて
はならないことになる。

最大の誘導時間に関しては、５分が使用者が耐え得る待
ち時間の限界である。しかし、最も好ましくは、誘導時
間は約２００秒を越えてはならない。好ましい時間が２
００秒以下である理由は：ａ）使用者の誘導時間は装置
の第２の湿潤（被験液の適用）及び最初のオーバーコー
トの適用（試薬の適用）の合計であり、そしてｂ）第２
の湿潤の誘導時間は第１の湿潤よりも僅かに長い。従っ
て、約２００秒以下という最も好ましい誘導時間を有す
るフィルターであっても、使用者が実際に使用したとき
の誘導時間はそれよりも僅かに長いかもしれないという
事実を考慮しておかなければならない。

第１図を参照すると、本発明に従って製造された装Ｒ１
０は、上部反応室１２、下部液体収集室１４、及び２つ
の室の間に配置された膜１６を有している。例えばレッ
ジ２０のような適当な手段が膜１６をその位置に固定す
るのに用いられている。１もしくはそれ以上の水溶性ポ
リマーがフィルター膜１６の上及び浸透した状態で１も
しくはそれ以上の層２６として被覆されている。（その
ような層２６は膜１６に浸透していても良く、上記のよ
うに別個の層として現れないぐらいに膜部分に浸透して
いても良い（図には示されていない）。）吸収性物質３
０は室１４内に備えられている膜１６の下側表面３２に
接触している。適当な吸収物質であればどのような吸収
物質も使用できる。

液体による加圧を防ぐために室１４内の空気を大気中に
′排気するために、開口３６が用意されている。蝶番付
きの蓋４０のような適当な蓋が開口３６用に備えられて
いる。または、スライド式蓋（図示されていない）も使
用することができる。

もし、膜１６上で単に１回だ枦けのインキュベーション
が必要ならば、被覆層２６が流れを適切に遅延させるの
で、蓋４０は取り除くことができる。しかし、複数のイ
ンキュベーション段階が必要ならば、蓋４０は必要であ
る。。

実際の使用においては、第１図に示されるような装置３
組、即ち、一つは患者のサンプルを、もう一つは陽性対
照を、最後の一つは陰性の対照を試験するために使用で
きるように装置３！Ｉを同時に使うことが望ましいこと
が分かった。もし、３組全てに誘導時間が必要ならば、
３組各々のフィルターは好ましくはここで述べたように
処理されていなければならない。

そのような装置３個を組み合わせて使用するときは、フ
ィルターは次のように機能する。一つの装置において、
患者のサンプル中にもし抗原が存在するならばその抗原
は、ユーザーによって添加された抗体（標識されている
こともある）と複合体を形成し、その複合体はフィルタ
ーを通過できなくなる。もし、抗原が存在しないならば
、全ての標識された抗体はインキュベーション時間経過
後にフィルターを通過し、フィルター上に検出されるこ
とはない。第２装置においては、既知量の抗原（合成物
された抗原でも良い）が装置に供給される、そしてユー
ザーによって抗体が添加されたとき、複合体が形成され
、フィルター上に残留し検出可能となって陽性対照とな
る。第３の装置においては、例えば非常に高い塩濃度の
ために反応室内に存在するＮ−アセチルグルコサミンの
ような特定の抗複合体形成試薬の効果が阻害され、その
ため複合体が生じるような不適当な試験条件でない限り
複合体の形成は起こらない。この装置での検出値を陰性
の対照として用いる。

亀 膜１６は生物学的に不活性な材質であって薄くて微小孔
を有するものであれば何でも良い。材質は対象となって
いる免疫反応性物もしくはその受容体と反応しないもの
が好ましい。例えば、ガラス、セラミック、繊維、合成
及び天然ポリマー並びにこの技術分野で知られているそ
の他のものを含む材質がある。最も好ましい材質はセル
ロースエステル、ポリアミド及びポリエステルである。

その中でも、ナイロンのようなポリアミドが最も好まし
い。

膜の構造は多孔質であって、濾過、アッセイもしくはそ
の他の類似用途のいずれであっても使用しようとする目
的に応じて適当な大きさの孔を有していなければならな
い。免疫アッセイの凝集反応において膜構造体を用いた
好適な実施態様において、孔は流体及び未凝集の物質を
通過させるが、凝集した物質は通過させない。言い換！
れば、被覆後の膜の孔は、試薬及び未凝集もしくは複合
体を形成していない粒子を通過させるのに十分な大きさ
でなければならず、しかし、凝集したもしくは複合体形
成した粒子を通過させるほど大き過ぎてはならない。凝
集アッセイに使用するためには、膜の孔の平均的な大き
さは、そこで使用される凝集試薬の平均直径の少なくと
も約５倍であり、好ましくは約６倍ないし約１５倍であ
る。更に詳細には、一般に膜の平均的な孔の大きさは約
１０マイクロメーター以下であり、好ましくは孔の９０
％が横方向の平均長さにおいて５マイクロメーター以下
である。（ここで用いられる孔の大きさとは、孔の長手
方向に対して横方向の長さとして測定されている。もし
、孔が円筒状の形ならば、その横方向の長さは直径とな
る。） 本発明に使用できる膜が、多くの販売元より市販されて
いる。例えば、グレン・コーヴ工、ニュ。

−ヨーク（Ｇｌｅｎ　Ｃｏｖｅ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）
のボール・バイオメゾイカ／Ｌ−プロダクト・コープ（
Ｐａｌｌ　ＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＰｒｏｄｕｃｔｓ　Ｃ
ｏｒｐ、）から市販されているようなポリアミド原料が
ある。実用的な膜としては、バイオダインＡ　（ＢＩＯ
ＤＹＮＥ　Ａ’）もしくはウルチポア（ＵＬＴＩＦＯＲ
）Ｎ−６６として前記の企業が製造、販売いしているナ
イロン６６微小孔膜がある。酢酸セルロースの膜も市販
されている。そのような膜は特定の用途に応じて所望の
形にすることができる。

微小孔膜は後で述べる処理に先立って、１もしくはそれ
以上の水溶性タンパク質または炭水化物で予備被覆する
ことが好ましい。一般には、１種類だけのタンパク質ま
たは炭水化物をその上に被覆する。その場合用いるタン
パク質および／または炭水化物はｐｌが５．０以上にな
らないように選択する。

ｐＩという用語は、分子の電荷がゼロとなるようにプラ
スとマイナスの電荷の数が等しくなっているときのｐＨ
として用いられている。

有用なタンパクとしては、スクシニル化カゼインのよう
なカゼイン誘導体（例えば、カゼインのアシル化、アル
キル化もしくはスルフォニル化によって得られる誘導体
）、スクシニル化牛血清アルブミン、及びスクシニル化
コラーゲンならびに当業者には容易に分かるようなその
他のマイナスの大きな電荷を有するタンパクまたは炭水
化物がある。これらの原料は、利用できるアミン基を有
しているタンパクを適当な条件下でそのアミン基をカル
ボキシル、アル、キルカルボキシルもしくはスルフォニ
ル基にそれぞれ変換するアシノコ化、アルキル化もしく
はスルフォニル化によって容易に調製される。有益なア
シル化剤は、特に限定はされないが、ジカルボン酸無水
物、ポリカルボン酸無水物、それらのハロゲン化物およ
びそれらのエステルのような米国特許第４，５９１，５
７１号（クポヤマら、１９８６年５月２７日発行）に記
載されているものを含んでいる。琥珀酸無水物はアシル
化剤として非常に好適である。

上記のタンパクもしくは炭水化物を修飾するのに有益な
アルキル化及びスルフォニル化剤は、特に限定はされな
いが、ブロム酢酸、クロル酢酸、フルオロニトロベンゼ
ン、ブロムマロン酸、ブロムプロピオン酸、ｍ−（クロ
ルスルフォニル）安息香酸及びｐ−（クロルスルフォニ
ル）安息香酸等がある。ブロム酢酸が最も好適である。

有用な炭水化物としては、水溶性のセルロース誘導体が
ある。代表的な化合物はカルボキシメチルセルロース、
カルボキシエチルセルロース、および当業者にとって明
らかなその他のものである。

これらの原料は市販されており、また既知の合成手法に
よって容易に調製することもができる。

好ましい予備被覆の原料は、スクシニル化カゼイン、カ
ルボキシメチルセルロース、スクシニル化牛血清アルブ
ミン、及びスクシニル化コラーゲンを含んでいる。スク
シニル化カゼインは最も好適である。

膜構造体は、室温でタンパクもしくは炭水化物の溶液を
膜通過させる方法によって、所望の形をした微小孔膜と
適当なタンパクもしくは炭水化物の水溶液とを接触させ
て調製される。ある場合には、接触に先立ってその溶液
を数分間４０℃まで加熱することは有益であるかもしれ
ない。溶液中に存在するタンパクもしくは炭水化物の総
量は、膜の孔を実質的に減少させることなく膜全体の被
覆を提供するのに十分な量である。言い換えれば、予備
被覆は膜の表面を完全に覆わなければならないが、その
被覆は望ましくないほどに孔をふさがない程度に十分薄
くなければならない。即ち、被覆に先立って元来存在し
ていた膜の孔の少なくとも５０％が予備被覆の後で残っ
ていなければならない。このような結果を達成するのに
必要なタンパクもしくは炭水化物の量は膜の多孔度、溶
液の粘度及び平均孔径に依存して変化するが、一般的に
は少なくとも約２５ｍｇ／ａｍ’である。膜の予備被覆
の後には、タンパクもしくは炭水化物は被覆溶液中に非
常に僅かしか残っていない。

水溶性被覆 層２６は、適当な分子量及び単位面積当たり固体被覆量
を有するように選択された少なくとも１種類の水溶性ポ
リマーからなっている。そのようなポリマーの好適なも
のは、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、
それらのコポリマー、カルボキシルメチルセルロ−ス ルセルロース リ（アクリル酸）、ポリアクリルアミド、及びポリ（ニ
レレンゲリコール）からなる群から選択される。コポリ
マーの有用な例としては、アクリルアミドとＮ−ビニル
−２−ピロリドン５０　：　５０もしくは９０：１０（
モル比）のコポリマー、及びアクリルアミドとアクリル
酸の類似のコポリマーがある。（ここで用いられる“ポ
リビニルアルコール”は少なくとも７５％が加水分解さ
れているものを意味している。加水分解の実際の程度は
重要ではないと考えられる。） 分子量に関しては、もし水溶性ポリマーがその乾燥固体
被覆量について調整されているならば、どのような分子
量でも使用できる。即ち、ポリビニルアルコールは２０
００ダルトンの分子量でうまくいくことが分かった。分
子量がそれ以下である原料はもはやポリマーとは見なさ
れない。有用なＭｗ（平均分子量）は約３６０，０００
ダルトンまでであるこが分かった。層２６は１もしくは
それ以上め被覆として適用され、それらは被覆中に乾燥
される。

最も重要なことは、選択されたポリマーと固体成分が前
述の範囲に入る誘導時間を提供することである。次の段
階で被覆される試薬（図には示されていない）が膜１６
を通過する前に、試薬を適用し、乾燥するための最小限
の時間が必要である。

免疫学的試薬を乾燥するための最高温度は約５０°Ｃで
あることが分かった。次の段階での被覆（オーバーコー
ト）にそのような乾燥温度が用いられると、層２６の誘
導時間は３０秒程度で十分である。しかし、もし乾燥温
度を４０℃に下げると、その場合には誘導時間は少なく
とも６０秒が必要である。

明らかなことであるが、ポリマーの実用的な単位面積当
たり固体被覆量は、選択されるポリマー並びに膜の孔径
及び空隙率によって変化する。以下の実施例は実用的な
量を示している。単に２．２ｇ　／　ｍ　”ないし５５
　ｇ　／　ｍ　２の間で被覆量を選択することは、層２
６が適切な誘導時間を有した状態で提供されることを保
証しないことを示すために比較例も含まれている。それ
どころか、与えられた原料及び与えられた分子量に応じ
て被覆量の適切な選択が必要であり、次に示される試験
及び実施例から明らかになるであろう。

現： 与えられたポリマーが得られた固体被覆量で実用的ある
かどうか確認するために、次の試験を行った。

スクシニル化カゼインで前処理されたもしくは前処理さ
れていない前記のような膜を候補のポリマーで被覆する
。被覆された膜は、ウニプリル（Ｗｅ’ｂｒｉｌ）線吸
収材（厚みは限定されない）と３つ穴ホルダーに固定さ
れる。Ｏ，１ＭＮａＣ１を含んでいるｐＨ７，０の０．
０５Ｍリン酸緩衝液もしくはｐＨ８，６の０．１Ｍグリ
シン緩衝液のどちらかに０．０１％レサザリン（Ｒｅｓ
ｓｘａｒｉｎ）染料溶液５００μＣを溶かした溶液を木
頭圧約６ｍｍとなるように中央の穴に入れる。誘導時間
は、真下の吸収材に流れ込み始めるのに必要な時間であ
り、染料の色から容易に分かる。

実施例 以下の実施例は、本発明の範囲を更に明らかにしている
。以下の実施例において、゛ナイロンディスク″はポー
ル・バイオメディカル・コープから入手できる公称３．
０もしくは５．０μｍの孔径のウルチポアＮ−６６とい
う商標の４７ｍｍのナイロンディスクであった。ナイロ
ンの“ロール”は、ウルチポアＮ−６６の商標でポール
・バイオメディカル・コープから入手できる孔径公称５
．０μｍ幅３０　ｃ　ｍのロールを幅１２．５ｃｍに切
ったものであった。いずれの場合も膜の空隙率は約７５
％ないし約８５％であって、９０％の孔の孔径は５．０
ｐｍより小さいかもしくは等しい。これらの膜はスクシ
ニル化カゼインで予備被覆されていなかった。その理由
は、そのような被覆は、前述のように膜ｄ多孔性に重大
な影響を与えないからである。ゆえに、単純化のために
予備被覆工程は削除した。試験は、膜を前述のような候
補の水溶性ポリマーで被覆すること、及びその膜を前の
“試験゛′で述べたホルダーに固定し吸収材に付ける・
ことによって行った。染料溶液が“試験”・で述べられ
たように適用された。

実施例１−３ 表１に列挙寄れているポリマーの被覆が機械装置によっ
てロール材に約３００ｃｍ／分の早さで適用された。被
覆は４０°０で乾燥され、リン酸緩衝液を用いて前述の
ように誘導時間が試験された。

その結果は表２に示されている。

表１　試験ポリマー 乾燥固体 分子量１）　溶液の　被覆量 一剋−ポリマー　　　　　ダルトン　”１１１％　　（
ｇ／ｍ”）実施例　ポリビニルアルコール　１１０００
〜　Ｈ，６４１，２１商標“ピノール−２０５”と　３
１０００してエアープロダクト から入手 してエアープロダクト から入手 実施例　カッ１ポキシメチルセル　〜２５００００　３
．＋１３　　４．３４３　　ロース商標”ＣＭＣ−７Ｍ
”、！ｌ：してヘルクルスから 入手 比較例　ポリビニルピロリドン　３６００００　１２．
８　　１７．１１　　商標名に−９０としてＧＡＰ から入手 比較例　カルボキシメチルセル　〜２５００’００　３
．０３　　６．５２２　　ロース商標“ＣＭＣ−７Ｍ”
と してヘルクルスから 入手　− １３表中の分子量は製造元での測定による。

表２　誘導時間 例　　　　　　　誘導時間（秒） 実施例１　　　　　　約５０ 実施例２　　　　　　６６ 実施例３　　　　　　４０〜６５ 比較例１６ 比較例２　　　　　　＞６００ 実施例２と比較例１、実施例３と比較例２をそれぞれ比
較することは有益である。前者の組において、乾燥固体
被覆量（１９，５と１７．１）は大きな差はないが：比
較例１は、おそらく使用したポリマーの違いのために誘
導時間が短すぎた。−方、実施例３と比較例２の比較゛
において、乾燥固体被覆量の５０％の増加が誘導時間を
１０倍にすることから分かるように、同種類あポリマー
であっても、僅かな乾燥固体被覆量の差が大きな違いを
生じることが分かった。

実施例４−５（複数被覆） これらの実施例では、２種類以上の水溶性ポリマーが適
用されている。膜はナイロンロールから切り取られ、そ
して被覆の間の乾燥は表３に示され温度で行われた。染
料はグリシン緩衝液を用いて適用された。

その結果は表４に示されている。′全流通時間”とは、
サンプル全部がフィルターを通過する時間である。誘導
時間と全流通時間の差は、サンプル流体が下にある吸収
材が濡らし始めてからフィルターを完全に通過するまで
にかかる時間である。

表３　試験ポリマー 乾燥固体　乾燥 分子量　　溶液の　被覆量　　温度 実施例　第１層−カルボ＊シＪ　　−２５０１１００Ｌ
４１　　３Ｊ６　　５０４　　チルセルロース商標 °“ＣＭＣ−７Ｍ”としてヘラク レスから入手 第２層−ポリビニルビ　４００００　　２１．１　　３
７．５　　　５０ロリドン（イーストマ ンコダックから入手） 実施例　第１層−カルポキシメ　〜２５００００　　１
４１　　３．８６　　　Ｓ。

５　　チルセルロース商標 “ＣＭＣ−７Ｍ”としてヘラク レスから入手 第２層−ポリビニルビ　３６００１１０　　１１６　　
１５．５　　　３２０リドン（Ｋ−９０） 比較例　第１層−力ルポキシ）　　＝２５００（ｌｉｔ
　　　１４１　　３．４”　　　５０３　　チルセルロ
ース商標 ”ＣＭＣ−７１１１”としてヘラク レスから入手 第２層−ポリビニルビ　３６００００　　１１６　　１
５．５　　　３２０リドン（Ｋ−９０） 比較例　第１層−力ルボキシＪ　　２５００００　　２
．４１　　３．１６　　５０４　　チルセルロース商標 “ＣＭＣ−７Ｎ”としてヘラク 、　　　ルスから入手 第２層−ポリビニルビ　３５００００　　１Ｌ６”’１
５．５　　　３２０リドン（Ｋ〜９０） 第３層−ポリビニルア　＋１０（ｔｏ〜　　１９．６　
　７〜９３２ルコール商標“ピノール　３１０００ −２０５”としてエアーグロ ダクタから入手 ２）これは実施例５よりも小さくなる、なぜならば積層
された未乾燥被覆は厚みが小さくなるからである。

表４　誘導時間 例　　　誘導時間（秒”）　ｍ流通時間（秒）実施例４
　　３０−４５　　　　　　ＴＯ−８５８８例５　　５
５−６５　　　　　１３０−１５５比較例３　　５７５
−７００　　　　　（６３５１００）比較例４　　６１
０−７００　　　　　（６７５−７１１５）３′時間に
幅があるのは、繰り返して試験した６ないし８個のサン
プルのついて一定の値ではなかったからである。。

実施例５と比較例３の比較は有益な示唆を含んでいる。

後者は、ポリビニルアルコールの被覆量１９．６ｇ／ｍ
”を余分に含んでいること以外は前者と同一である。そ
のことは誘導時間を最大時間である３００秒を越えさせ
るのに十分である。

実施例６−７（グリセロールが加えられた複数液１と これらの実施例において使用された原料は、実施例４及
び５の場合と僅かに異なり、そして更にカールを最小に
するためにグリセロールを添加した。被覆はスクシニル
化カゼイン処理を行っていないナイロンのロールに同様
の被覆装置によって行った。また、その結果を表６に示
す。

表５　試験ポリマー 乾燥固体　乾燥 分子量　　溶液の　被覆量　　温度 −然一　　　ポリマー　　　　　ダルトン　重量％　　
（ｇ／ｍリ　　ｐ−実施例　第４層−ポリビニルビ　４
０００Ｇ　　　４１．６　　５５．２　　２６．５６　
　ロリドン（Ｋ−３０ＸＧＡＦか ら入手）に４．２重量％の グリセロールを添加 第２層−ポリビニルビ　３６００００　　１２．８　　
１３．７　　２６．５０リドン（Ｋ−９０）に１．３５ 重量％グリセロールを 添加 実施例　第１層−実施例６の　　４００００　　　７．
１　　　　　　２６．５７　　　Ｋ−９０及びに−３０
の混合物　　　　　　Ｋ−９０に２．８重量％のグリセ
　３６０００Ｇ　　　２０．６０−ルを添加　　　　　
　　　　　Ｋ−３０３６，７第２層−実施例６の　　３
６００００　　１２．８　　１３．７　　２６．５に−
９０に１．３５重量％グリ セロールを添加 表６　誘導時間 例　　　誘導時間（秒）　全流通時間（秒）実施例６　
　１４５　　　　　　、　１６２実施例７　　１７５　
　　　　　　１９０実施例４−５と実施例６−７を比較
すると実施例６−７が優れていることが分かる。その理
由は、−旦下側までの濡れが起こると、液体全部の通過
に４０秒（実施例４）もしく“は８０秒（実施例５）必
要な実施例４−５に比較して実施例６−７ではその後の
流速が早くなる（１５ないし２０秒）からである。

（発明の効果） 本発明の技術的に有利な点は、試薬を含むオーバーコー
トをフィルターから試薬が流出するこ七なくフィルター
の上側表面に適用し、乾燥できるような、時間遅延フィ
ルター及びそれを有する試験装置を提供できることであ
る。

更に、本発明の技術的に有利な点は、ユーザーが選択し
た液体を約５分を大きく越えない時間でフィルターを通
過させることのできるフィルター及び装置を提供するこ
とである。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明に従って製造された装置の縦断面図・
である。 ＩＯ・・・装置、１２・・・上部反応室、１４・・・流
体収集室、１６・・・フィルター膜、２６・・・水溶性
フィルター層、 ３６・・・排気口

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、免疫アッセイにおいて水溶液から選択された物質を
   濾過するための時間遅延フィルターであって： 溶媒は通過するが、前記物質はフィルター上に残留する
   ように作られた孔を有する膜：及び約６ｍｍの高さの水
   圧と同等の圧力の液体圧力に対して、室温での膜の誘導
   時間を少なくとも約３０秒ないし約３００秒にするのに
   有効な基型（タイプ）、分子量及び乾燥固体被覆量を有
   する、前記膜の表面及び内部に存在する少なくとも１種
   類の水溶性ポリマー； からなる時間遅延フィルター。 ２、上部反応室、下部液体収集室及び前記２室を分離し
   ているフィルターからなる反応試験装置において： 前記フィルターが、 溶媒は通過するが、前記物質はフィルター上に残留する
   ように作られた孔を有する膜；及び約６ｍｍの高さの水
   圧と同等の圧力の液体圧力に対して、室温での膜の誘導
   時間を少なくとも約３０秒ないし約３００秒にするのに
   有効な基型（タイプ）、分子量及び乾燥固体被覆量を有
   する、前記膜の表面及び内部に存在する少なくとも１種
   類の水溶性ポリマー； からなることを特徴とする反応試験装置。