JPH01108976A - 生きた細胞または微生物を粘稠な液体と混合する方法 - Google Patents
生きた細胞または微生物を粘稠な液体と混合する方法Info
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- JPH01108976A JPH01108976A JP63236656A JP23665688A JPH01108976A JP H01108976 A JPH01108976 A JP H01108976A JP 63236656 A JP63236656 A JP 63236656A JP 23665688 A JP23665688 A JP 23665688A JP H01108976 A JPH01108976 A JP H01108976A
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M27/00—Means for mixing, agitating or circulating fluids in the vessel
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
ある種の目的にとって、生きた細胞または微生物を粘稠
な液体と均質に混合することが必要でありうる。かかる
目的には例えば細胞または微生物のマイクロカプセル化
がある。かかる混合物を製造するにはこれまで特別な設
計のダイナミックミキサーが使用されてきた。しかしな
がらダイナミックミキサーの使用は生物学的系の不活化
を招来しうるいくつかの重大な欠点と関わりがある。ダ
イナミック攪拌器を使用すると、特に剪断力が生ずるこ
とが原因で細胞および微生物に物理的に強い応力がかか
る。生じた剪断力はそれぞれの液体の粘度が増大するに
伴い高まる。禮拌器による応力を限界内に保つには、比
較的弱く攪拌するが、またそのことにより混合が不完全
になるかまたは生物学的系を非生理学的環境に比較的長
時間滞留させることになる。さらに１明確かつ完全に系
を均質罠混合するにはすべての知られた欠点を伴ったま
ま不連続操作を行うことが必要なこともありうる。
な液体と均質に混合することが必要でありうる。かかる
目的には例えば細胞または微生物のマイクロカプセル化
がある。かかる混合物を製造するにはこれまで特別な設
計のダイナミックミキサーが使用されてきた。しかしな
がらダイナミックミキサーの使用は生物学的系の不活化
を招来しうるいくつかの重大な欠点と関わりがある。ダ
イナミック攪拌器を使用すると、特に剪断力が生ずるこ
とが原因で細胞および微生物に物理的に強い応力がかか
る。生じた剪断力はそれぞれの液体の粘度が増大するに
伴い高まる。禮拌器による応力を限界内に保つには、比
較的弱く攪拌するが、またそのことにより混合が不完全
になるかまたは生物学的系を非生理学的環境に比較的長
時間滞留させることになる。さらに１明確かつ完全に系
を均質罠混合するにはすべての知られた欠点を伴ったま
ま不連続操作を行うことが必要なこともありうる。
生きた細胞または微生物を粘稠な液体と混合するための
改良された方法を提供しようとする試みから、スタティ
ックミキサーがこの目的に優れて適することが見出され
た。これは驚くべきことである、なぜならスタティック
ミキサーが使用される場合は、特に粘稠な液体が流れる
際にスタティックミキサー中に圧力低下が生ずるゆえに
生物学的な系の損傷が起り得るからである。
改良された方法を提供しようとする試みから、スタティ
ックミキサーがこの目的に優れて適することが見出され
た。これは驚くべきことである、なぜならスタティック
ミキサーが使用される場合は、特に粘稠な液体が流れる
際にスタティックミキサー中に圧力低下が生ずるゆえに
生物学的な系の損傷が起り得るからである。
それゆえ本発明は生きた細胞または微生物を粘稠な液体
と混合するととＫより粘稠な液体中における生きた細胞
または微生物の均質な分散系を製造するに当たり、スタ
ティックミキサーを使用して混合することからなる方法
に関する。
と混合するととＫより粘稠な液体中における生きた細胞
または微生物の均質な分散系を製造するに当たり、スタ
ティックミキサーを使用して混合することからなる方法
に関する。
本発明による混合法はダイナミックミキサーの使用に比
較して以下の長所を有する、すなわち−低い応力下に完
全に混合するのに要する滞留時間が比較的短いこと（実
施例１参照）、−生物学的系に及ばず剪断応力が低いこ
と、−攪拌器その他によるエネルギーの導入がないこと
、 一場合により潤滑および／またはシールを必要とする可
動部分が装置中に含まれないこと、お □よび 一密閉（場合により無菌）系における操作がより容易に
達成されうろこと、 である。
較して以下の長所を有する、すなわち−低い応力下に完
全に混合するのに要する滞留時間が比較的短いこと（実
施例１参照）、−生物学的系に及ばず剪断応力が低いこ
と、−攪拌器その他によるエネルギーの導入がないこと
、 一場合により潤滑および／またはシールを必要とする可
動部分が装置中に含まれないこと、お □よび 一密閉（場合により無菌）系における操作がより容易に
達成されうろこと、 である。
本発明による方法を用いて任意の生きた細胞または微生
物を任意の粘稠な液体と混合することができる。生きた
細胞および微生物の好ましい例をあげれば、 例えば抗体産生性細胞のようなハイブリＰ−マ細胞、 例えば生産性植物細胞のような植物細胞、例えば大腸菌
および乳酸菌のような細菌細胞、側光ばペニシリウム（
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）およびアスペルギルス（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）のようなストレプトミセス科およ
び菌類、および 例えばパン酵母のような酵母、 である。
物を任意の粘稠な液体と混合することができる。生きた
細胞および微生物の好ましい例をあげれば、 例えば抗体産生性細胞のようなハイブリＰ−マ細胞、 例えば生産性植物細胞のような植物細胞、例えば大腸菌
および乳酸菌のような細菌細胞、側光ばペニシリウム（
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）およびアスペルギルス（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）のようなストレプトミセス科およ
び菌類、および 例えばパン酵母のような酵母、 である。
特に好ましいのは抗体産生性細胞、生産性植物細胞、大
腸菌およびパン酵母、特に抗体産生性細胞および生産性
植物細胞である。
腸菌およびパン酵母、特に抗体産生性細胞および生産性
植物細胞である。
粘稠な液体は好ましくは粘度約α００２〜１０ｈ、８．
特に好ましくは約０．００５〜Ｉ Ｐａ、ｓ＊特に約０
．０１〜０．６Ｐａ、ｓを有する。生きた細胞または微
生物はその系の損傷を招来しない任意の所望の液体と混
合され５る。この方法は前記した生物学的系をポリマー
溶液と混合するのに特に重要である。
特に好ましくは約０．００５〜Ｉ Ｐａ、ｓ＊特に約０
．０１〜０．６Ｐａ、ｓを有する。生きた細胞または微
生物はその系の損傷を招来しない任意の所望の液体と混
合され５る。この方法は前記した生物学的系をポリマー
溶液と混合するのに特に重要である。
本発明による方法に適する混合部材は任意の所望の三次
元構造を固有にとることができる。
元構造を固有にとることができる。
好ましい混合部材の三次元構造は例えばスイス国、ＣＨ
−８４０１Ｗｉｎｔ、ｅｒｔｈｕｒのＧｅｂｒｕｄｅｒ
ＳｕｌｚｅｒＡｋｔｉｅｎｇｅａｅｌｌａｃｈａｆｔ
社により供給される”）８ｕｌｚｅｒＳＭＸスタティッ
クミキサーのよ５な、相互に係合しかつ交叉するクエブ
の骨組の形態である。
−８４０１Ｗｉｎｔ、ｅｒｔｈｕｒのＧｅｂｒｕｄｅｒ
ＳｕｌｚｅｒＡｋｔｉｅｎｇｅａｅｌｌａｃｈａｆｔ
社により供給される”）８ｕｌｚｅｒＳＭＸスタティッ
クミキサーのよ５な、相互に係合しかつ交叉するクエブ
の骨組の形態である。
任意の所望の数の混合部材を同じＩ・ウジングまたは別
のハウジングの中に平行して連結するととができる。原
則的には、同様に任意の所望の数の混合部材が連続して
連結されるが、しかしながら好ましい混合部材数は１ス
タティックミキサー当り１〜１０個、特に好ましくは２
〜６個、特に４個である。
のハウジングの中に平行して連結するととができる。原
則的には、同様に任意の所望の数の混合部材が連続して
連結されるが、しかしながら好ましい混合部材数は１ス
タティックミキサー当り１〜１０個、特に好ましくは２
〜６個、特に４個である。
混合すべき物質がスタティックミキサー中を流れる速度
は広い範囲にわたり変動されうる。
は広い範囲にわたり変動されうる。
生物学的系に及ぼされる応力を最小限に抑制するために
実質的に層流となる流速が好ましい。
実質的に層流となる流速が好ましい。
この速度は三次元構造およびスタティックミキサーの寸
法の如何による。
法の如何による。
本発明による方法が実施される装置は、例えば図面に概
要を示す構成を有しうる。貯留器３中の溶媒懸濁液中た
存在する生きた細胞または微生物および貯留器４中の粘
稠な液体がポンプ１および２により導入管路を通ってス
タティックミキサー５中にポンプ送りされる。懸濁用の
溶媒は任意のものでよく、細胞または微生物にとって好
都合な添加物、例えば栄養添加物等を場合により含有す
る水が好ましい。系全体または混合部材（（資）のみが
図面に示されるように温度調節装置６を備えていること
が重要である。
要を示す構成を有しうる。貯留器３中の溶媒懸濁液中た
存在する生きた細胞または微生物および貯留器４中の粘
稠な液体がポンプ１および２により導入管路を通ってス
タティックミキサー５中にポンプ送りされる。懸濁用の
溶媒は任意のものでよく、細胞または微生物にとって好
都合な添加物、例えば栄養添加物等を場合により含有す
る水が好ましい。系全体または混合部材（（資）のみが
図面に示されるように温度調節装置６を備えていること
が重要である。
ミキサーに流れたのちに得られる混合物は任意の方法で
運搬されて以後の使用に用いられる。
運搬されて以後の使用に用いられる。
以下の実施例により本発明をより詳しく説明する。
実施例 １
３重量％のλ−カラゲーニン溶液（ＳｉｇｍａＣｈｅｍ
ｉａ ＧｍｂＨ製、ミュンヘン）３０ｄを繻動ポンプに
よりスタティックミキサー中に毎分８５０μｊｏデンプ
送出速度で供給する。培地（ウシ胎児血清を含有するダ
ルベツコ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏｌｓ ）培地）３０ｗＬｌ
をポンプ送出速度毎分８５０μｌで第２の端動ポンプか
らミキサー中に供給する。用いられるスタティックミキ
サーは４個の混合部材を有する（（）ｅｂｒｕｄｅｒ
５ｕｌｚｅｒ ＡＧ社製、ＤＮＡ ８ＭＸミキサー）。
ｉａ ＧｍｂＨ製、ミュンヘン）３０ｄを繻動ポンプに
よりスタティックミキサー中に毎分８５０μｊｏデンプ
送出速度で供給する。培地（ウシ胎児血清を含有するダ
ルベツコ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏｌｓ ）培地）３０ｗＬｌ
をポンプ送出速度毎分８５０μｌで第２の端動ポンプか
らミキサー中に供給する。用いられるスタティックミキ
サーは４個の混合部材を有する（（）ｅｂｒｕｄｅｒ
５ｕｌｚｅｒ ＡＧ社製、ＤＮＡ ８ＭＸミキサー）。
かくして調製された懸濁液を分光光度計中７５０ ｎｍ
で分析して均質性に関して検査する。
で分析して均質性に関して検査する。
ダイナミックミキサーの場合の数分間に比較してミキサ
ー系中にたったの約２０秒間滞留しただけであるのＫこ
の測定された値は他の混合系で得られた値に匹敵する。
ー系中にたったの約２０秒間滞留しただけであるのＫこ
の測定された値は他の混合系で得られた値に匹敵する。
実施例 ２
３重量％のλ−カラゲーニン溶液３０−を端動ポンプに
より毎分８５０μｌの送出速度で供給する。細胞１０５
個／ｄなる細胞密度を有する培地３０ｄを第２の繻動ポ
ンプを用いて毎分８５０μｌの送出速度でミキサーに供
給する。
より毎分８５０μｌの送出速度で供給する。細胞１０５
個／ｄなる細胞密度を有する培地３０ｄを第２の繻動ポ
ンプを用いて毎分８５０μｌの送出速度でミキサーに供
給する。
用いられたミキサーは４個の混合部材を含有する（Ｇｅ
ｂｒｉｉｄｅｒ ５ｕｌｚｅｒ社のＤＮＡ ８ＭＸミキ
サー）。
ｂｒｉｉｄｅｒ ５ｕｌｚｅｒ社のＤＮＡ ８ＭＸミキ
サー）。
かくして調製された懸濁液を滴下ユニットな通過させて
微小滴となし、これらをポリベース（ビニルイミダゾリ
ウムメトクロライドとビニルピロリｒンとの共重合体）
と接触させる。生成するカプセルは約３０個の細胞を含
有しておりそして均一である。顕微鏡による検査ならび
に長時間観察では何ら細胞の損傷は検出されない。
微小滴となし、これらをポリベース（ビニルイミダゾリ
ウムメトクロライドとビニルピロリｒンとの共重合体）
と接触させる。生成するカプセルは約３０個の細胞を含
有しておりそして均一である。顕微鏡による検査ならび
に長時間観察では何ら細胞の損傷は検出されない。
添付図面は本発明に用いられる装置の概略を示す。図中
１および２はポンプ、３および４は貯留器、５はスタテ
ィックミキサー、セして６は温度調節装置を示す。 特許出願人 ヘキスト・アクチェンゲゼルシャフト外
２名
１および２はポンプ、３および４は貯留器、５はスタテ
ィックミキサー、セして６は温度調節装置を示す。 特許出願人 ヘキスト・アクチェンゲゼルシャフト外
２名
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）生きた細胞または微生物を粘稠な液体と混合するこ
とにより粘稠な液体中における生きた細胞または微生物
の均質な分散系を製造するに当たり、スタティックミキ
サーを使用して混合することからなる方法。 ２）粘稠な液体が粘度約０．００２〜１０Ｐａ．ｓ、好
ましくは約０．００５〜１Ｐａ．ｓ、特に約０．０１〜
０．６Ｐａ．ｓを有することからなる請求項１記載の方
法。 ３）粘稠な液体がポリマー溶液であることからなる請求
項１または２記載の方法。 ４）スタティックミキサーが１〜１０個、好ましくは２
〜６個、特に４個の混合部材を有することからなる請求
項１〜３のいずれかに記載の方法。 ５）混合が層流で行われることからなる請求項１〜４の
いずれかに記載の方法。 ６）請求項１〜５のいずれかに記載の方法を用いて製造
された、生きた細胞または微生物と粘稠な液体との混合
物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3732370.9 | 1987-09-25 | ||
| DE19873732370 DE3732370A1 (de) | 1987-09-25 | 1987-09-25 | Verfahren zur vermischung von lebenden zellen oder mikroorganismen mit einer viskosen fluessigkeit und mischungen, die nach diesem verfahren hergestellt wurden |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01108976A true JPH01108976A (ja) | 1989-04-26 |
Family
ID=6336889
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63236656A Pending JPH01108976A (ja) | 1987-09-25 | 1988-09-22 | 生きた細胞または微生物を粘稠な液体と混合する方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0308947A3 (ja) |
| JP (1) | JPH01108976A (ja) |
| DE (1) | DE3732370A1 (ja) |
| DK (1) | DK530988A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08287583A (ja) * | 1995-04-13 | 1996-11-01 | Internatl Business Mach Corp <Ibm> | ディスク駆動装置の電力管理システムおよび方法 |
| JP2000173152A (ja) * | 1998-11-27 | 2000-06-23 | Internatl Business Mach Corp <Ibm> | 消費エネルギー低減方法 |
| JP2007515392A (ja) * | 2003-04-10 | 2007-06-14 | ピーアール ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド | エマルジョンベースの微粒子の製造のための方法 |
| US8871269B2 (en) | 2003-07-15 | 2014-10-28 | Evonik Corporation | Method for the preparation of controlled release formulations |
| US8900636B2 (en) | 2003-07-23 | 2014-12-02 | Evonik Corporation | Controlled release compositions |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE69121144T3 (de) * | 1990-06-11 | 2004-04-22 | Dsm N.V. | Stabilisierung von Hefekreme |
| US5837529A (en) * | 1994-10-17 | 1998-11-17 | Genzyme Corporation | Method for lysing cells |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE58568B1 (en) * | 1984-11-15 | 1993-10-06 | Suiker Unie | Method and device for the carrying out of a microbiological or enzymatic process |
-
1987
- 1987-09-25 DE DE19873732370 patent/DE3732370A1/de active Granted
-
1988
- 1988-09-22 JP JP63236656A patent/JPH01108976A/ja active Pending
- 1988-09-23 DK DK530988A patent/DK530988A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-09-23 EP EP19880115633 patent/EP0308947A3/de not_active Withdrawn
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08287583A (ja) * | 1995-04-13 | 1996-11-01 | Internatl Business Mach Corp <Ibm> | ディスク駆動装置の電力管理システムおよび方法 |
| JP2000173152A (ja) * | 1998-11-27 | 2000-06-23 | Internatl Business Mach Corp <Ibm> | 消費エネルギー低減方法 |
| JP2007515392A (ja) * | 2003-04-10 | 2007-06-14 | ピーアール ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド | エマルジョンベースの微粒子の製造のための方法 |
| JP2010120948A (ja) * | 2003-04-10 | 2010-06-03 | Pr Pharmaceuticals Inc | エマルジョンベースの微粒子の製造のための方法 |
| JP2013136591A (ja) * | 2003-04-10 | 2013-07-11 | Pr Pharmaceuticals Inc | エマルジョンベースの微粒子の製造のための方法 |
| US8916196B2 (en) | 2003-04-10 | 2014-12-23 | Evonik Corporation | Method for the production of emulsion-based microparticles |
| US10272044B2 (en) | 2003-04-10 | 2019-04-30 | Evonik Corporation | Method for the production of emulsion-based microparticles |
| US8871269B2 (en) | 2003-07-15 | 2014-10-28 | Evonik Corporation | Method for the preparation of controlled release formulations |
| US8900636B2 (en) | 2003-07-23 | 2014-12-02 | Evonik Corporation | Controlled release compositions |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3732370A1 (de) | 1989-04-06 |
| DK530988D0 (da) | 1988-09-23 |
| DE3732370C2 (ja) | 1990-02-08 |
| DK530988A (da) | 1989-03-26 |
| EP0308947A2 (de) | 1989-03-29 |
| EP0308947A3 (de) | 1990-09-05 |
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