JPH01143885A - 低分子量フミン酸塩画分の製造 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、低分子量フミン酸のアルカリ金属塩またはア
ンモニウム塩の画分の新規製法に関する。

〔従来の技術〕

湿原、泥炭、黄土またはフミン含有水中から得られるフ
ミン酸または一般的なフミンには、治療効果が認められ
る（　Ｚｉｅｃｈｍａｎｎ、　Ｔｈｅｒａｐｉｅｗｏｃ
ｈｅ２８（１９７８）、１１９９−１２１１参照）。

他方フミン酸もしくはその塩は非経腸的に有害であると
見なされ（Ｋｕｅｈｎｅｒｔ　ｅｔａｌ、、　Ａｒｃｈ
。

ｅｘｐｅｒ、　Ｙｅｔ、　ｍａｄ　５６　（１９８２）
、１６９−１７７）、従ってフミンは泥土浴では断念さ
れ、主に獣医学で使用されている。

西ドイツ特許出願第３７０７９０９．５号明細書には、
記載のフミン酸塩よりも非経腸的毒性が著るしく低く、
良好な治療効果を有するフミン酸アルカリの画分が記載
されている。この両分のフミン酸塩は、分散範囲３００
〜１５００ｇ１モルで平均相対的分子４１１０００ｇ１
モルを有する。

このフミン酸アルカリ画分は、フミン含有物質をアルカ
リ性またはアンモニア性水溶液中に懸濁させ、生じる懸
濁液から粗大固体を分離除去し、かつ遠心によって微細
固体および高分子量フミン酸塩を除去し、こうして得ら
れた溶液を中和し、かつ−値６．２〜７．２の範囲で緩
衝させ、再度遠心によりｍ製し、この溶液から低分子量
画分を分離することによって製造される。

この方法は、比較的経費がかかシ、時間がかかシ、フミ
ン酸塩の経済的な獲得にはあまシ適さない。さらに得ら
れる生成物は、ＦＪ４フ返されるβ−変化によって付加
的な不所望の塩を付随する。更に、−一移動によシフミ
ン物質の構造に変化が起こシ、かつそれに伴ない低分子
量画分の収量損失も起こシ得る。

〔発明が解決しようとする課題〕

従って、本発明の課題は、無害で低分子量のフミン酸塩
を製造し、この際そのフミン酸塩が可能な限シ付加塩を
付随せず、−一移動によシ影響されるフミン物質の変化
を充分にさける、簡単で経済的な製法を提供することで
ある。

〔課題を解決するための手段〕

この課題の解決は、請求項１から１１記載の低分子量フ
ミン酸塩画分の製法によシ行なわれる。

所望の低分子量フミン酸塩画分は、フミン含大規模工業
で、経済的に実施可能な方法で、フミン含有物質から獲
得できることが判明した。

３０〜１８０分の比較的短い後撹拌の後に、懸濁液の固
体を沈殿させることができ、この充分に固体不含の溶液
を、沈殿した物質からサイホン−でほぼすい上げるかま
たはデカンテーションによシ分離することができる。そ
の後この溶液を遠心し、かつ限外濾過する。無菌ですぐ
使用可能な作用物質溶液が、フミン酸塩含有率２〜１０
重１１ｔｓで得られる。この溶液は安定であシ、すなわ
ち、フミン酸塩溶液自体で認められる重合の意味におけ
る変化は、高められた温度での長時間貯蔵、の際にも観
察されない。

本発明によるフミン酸塩を得るための出発物質としては
、すべてのフミン含有物質、例えば泥炭、湿原上、湿炭
、黄土またはフミン含有水もしくはその腐植土であるこ
とができる。

フミン含有、有利にはフミン酸含有量最低５、最大５０
％のフミン高含有基質を水中に懸濁させ、および撹拌下
に、アルカリ作用物質を、反応混合物の一一値が６〜７
の間の範囲にあって、かつ決して７の値を上まわること
が−ないように１注意深く加える。有利な−−範８Ｆ１
６．３〜６．５である。

アルカリ作用物質としては、水酸化アルカリ、加水分解
によジアルカリ性反応をする弱酸とのアルカリ金属の塩
、フミンまたはアンそニアの水溶液、また直接反応混合
物に導入されたフミンまたはアンモニアを使用すること
ができる。

有利なアルカリ作用物質は、炭酸カリウムであり、これ
は１０％溶液で使用するのが有利である。

アルカリ作用物質の量は、反応混合物のβ値が７を上ま
わらない限り、厳密ではない。しかしながら、他方、で
きる限シ高収量を得るために、できる限シ多量のフミン
酸塩を溶液中に導入する試みがされた。

従って本発明によれば、アルカリ作用物質の最適量を決
定するために、２つの迅速な方法が開発される：フミン
含有物質を脱イオン水中に懸濁する前に予め乾燥させ（
８０〜８５℃の乾燥様中で８〜１２時間の乾燥によって
）、その後微細粉にし、混合する。これによりできる限
シ均一な標準化使用物質が得られる。

この使用物質の１００ｇの多数試料を、ここで１２０〜
１４０℃で約１３〜２０時間、強く乾燥させ、残った残
分を乾燥量として測定する。

この乾燥物質の固体金ｔは、使用フミン含有物質の種類
によっで、標準化使用物質の５０〜７５　チの範囲にあ
る。本発明では、乾燥物質１００１０、アルカリ作用物
質５０〜１００ｍモルを使用する。

第２の可能性は、標準化使用物質試料の滴定にある。こ
の際、最終転移点がｐ）１７の前に達するのに必要なア
ルカリ量を測定する。これは、製造工程で使用すべきア
ルカリ量である。このアルカリ量の何倍にも相当する量
を、最も正確な−−ｇ４整下に、脱イオン水中の標準化
使用物質の懸濁液に装入する。その後、一定一値が生じ
るまでなお約１７ｓ〜３時間後撹拌する。これは６．６
〜６．５の範囲にあることが有利である。

次いで、約１〜２時間沈殿させ、かつ上澄の濃い茶色の
溶液から注意深く沈澱泥を分離する。

このようにして得られた、充分に固体不含の４液から、
８０００〜１　ｏｏｏｏｘｇまでの遠心によシさらに不
溶分を分離する。その後このように泄明化された溶液を
、フィルターの細孔範囲が５００００〜１００００００
ダルトンの限外濾過に供する。

得られる溶液は、低分子量のフミン酸塩含有ｆｋ２〜１
０重量％を有する。これは直接使用できるか、−または
水の注意深い除去によって、例えば凍結乾燥によシ残留
水分最低４チの固体になるまで乾燥することができる。

これは本発明による方法のもう１つの利点であシ、この
方法で低分子量フミン酸塩は中間分子量フミン酸塩をま
ったく含有しない。

なお少量の中間分子微分を含有する古い方法で製造され
九低分子量のフミン酸塩は、単によシ高濃度にまで濃縮
することができるが、さらに脱水すると（最も注意した
方法でも）不可逆的に破壊される。

本発明によ）得られる、残留水分４慢を有する固体もし
くは濃水溶液は安定である。

安定化調整の際に、１２／１２時間間隔で５６／４℃の
６０日日間式負荷の後、パラメーター含有量、−β値、
レドックス電圧およびマイクロ透析試験（Ｍｉｋｒｏｄ
ｉａｌｙａｅｔｅｇｔ）の変化はこの不規則変動にわた
シ確認されない。

大体の分子量の測定のために、溶液の試料を電気泳動に
かける。電気泳動の移動速度から、こうして製造された
７ミン酸塩に関して、分散範囲３００〜１５００で、平
均分子量１０００が測定される。

毒性試験では、得られた低分子量のフミン酸塩は低毒性
であることが判る。他方、これは同様にすでに観察され
た治療効果を、殊に創傷の治療の際に示すことが判った
。

従って、これは治療薬として、殊に創傷の治療における
治療薬として好適ゼある。

しかしながら、水溶液は多くの用途には不適当であシ、
作用物質を無水にすることが必要である。

西ドイツ特許出願第５７　０９　５５５．５号明細書に
は、低分子量７ミン酸塩の無水の適応形の製法が記載さ
れておシ、この方法ではこのフミン酸塩の水溶液を０．
２〜５倍量の無機担持剤と混合し、得られる混合物を乾
燥する。この方法は本発明による製法に組み入れること
ができる。無機担持剤としては、酸化アルミニウム、二
酸化チタン、二酸化珪素、殊に高分散性ケイ酸または粘
土、殊にモンモリロナイトまたはベントナイトを、限外
濾過で得られる溶液と直接練和し、得られる物質を乾燥
させる。溶液の乾燥含分に対して無機担持剤１０〜１０
０チを溶液と混合し、かつ生じた懸濁液を薄層蒸発器（
Ｄｕｅｎｎａｃｈｉｃｈｔｖｅｒｄａｍｐｆｅｒ）で乾
燥させるのが好都合であると判明した。貯蔵可能で流動
性の粉末が得られ、これは、単独または粉末としての助
剤と共に、スプレーまたは無水の軟膏として使用できる
。

更に、残留水分４〜８％の含有量まで乾燥された低分子
量フミン酸塩画分を、市販の糖、デンプンもしくは変性
デンプンと共に摩砕形で安定で流動性の適用形にするこ
ともできる。作用物質重量に対して糖もしくはデンプン
含量２０〜２００％が有意義である。単独でまたは他の
助剤と共に相応する薬剤形で、有利には粉剤としてスプ
レー、軟膏または粘着性ペーストとして使用できる貯蔵
安定性で流動性の粉末が得られる。

〔実施例〕

例　　１ 腐植泥２０ｋｇを、乾燥８機中、８０℃で１２時間乾燥
させ、引続きミキサー中で１〜３Ｍ大の一粒子に粉砕し
、均質化および標準化する。

標準化腐植泥の１ｇ−試料を蒸留水中に懸濁させ、Ｎａ
ＯＨＯ，１モルで滴定するが、この際−一変化を電位差
測定で測定する。ＮａＯＨ（０−１そル）６．９　ｍＡ
！の場合、終点が−６〜６．５の範囲に観察される。従
って１ｇ当クシ苛性ソーダ溶液０．６９モルがこの標準
化フミン含有生成物に対する最適アルカリ量とみなされ
る。

撹拌容器内で、標準化腐植泥１０ｋｇを蒸留水１００ぶ
中に懸濁させる。撹拌下にガス状ＮＨＩＳ１１７ｇを懸
濁液に除々に導入する。この工程の間、連続的に調整さ
れる懸濁液の一一値は、最初の３．９から定常的に６．
３まで上昇する。遅くともこの値の時点から、アンモニ
アの流入を、−値が６．３〜６．５の範囲にあるように
、すなわち添加されるアルカリ作用物質の量が、同じ時
間で複合フミンの中和の際に消費される量に相当するよ
うに調整する。

７０分後に終結するＮＨ，−添加の後に、さらＶｃ１時
間後撹拌する。その後撹拌を中止する。

懸濁された固体は泥として容器の底に沈澱する。

上澄の褐色溶液を傾しやし、直接、セパレーター中で９
０００ｘｇで遠心する。こうして得られた精製溶液を、
細孔１０００００〜２５００００Ｄの限外濾過器を用い
て限外濾過する。平均分子量１０００および分散範囲３
００〜１５００のフミン酸アンモニウム画分２．１　％
を含有する暗褐色の溶液が得られる。

例　　２ 治療±２０ｋｇを、乾燥機内で８０°Ｃで１２時間予備
乾燥させ、引続きミキサー中で粉砕して１〜５　ｒａｔ
ｓ大の粒子にし、均質化し、標準化する。

標準化治療上の試料１００ｇを、１６０°Ｃで１６時間
激しく乾燥させ、引続き重量損失を測定する。この結果
固体含有１６９重１１％が測定された。

撹拌容器内で、標準化治療±１０に９を蒸留水１００−
ｅ中に懸濁させ、この際…値を３．５に調節する。撹拌
下および絶えず懸濁液の…値の調整の下に、１０％に２
ＣＯ３−溶液７，６３０．９’（Ｋ２ＣＯ３５−５２０
ｍモルまたはに２ＣＯ＊　８０　ｍ　−ｒニル／激しく
乾燥された治療±１００ｇに相当）を、−値７ｆ：上ま
わらないように懸濁液に除々に装入する。

６０分後に終結するＫｓＣＯ３−添加の後にさらに１時
間撹拌し、この際一定のβ値６．５に調節する。その後
撹拌を中止する。；−濁された固体は、泥として容器の
底に沈澱する。上澄みの褐色の＃液を傾しやし、直接、
セパレーター中で９０００ｘｇで遠心する。こうして得
られた精製溶液を細孔＠１０００００〜２５００００ダ
ルトンの限外濾過器を用いて限外濾過する。平均分子１
ｔ１０００および分散範囲３００〜１５００の７ミン酸
カリウム画分３．２％を含有する暗褐色の溶液が得られ
る。

例　　３ 例２で得られたフミン酸カリウム溶液５Ｊ中に、二酸化
チタン粉末５２ｇを懸濁させ、得られる懸濁液を、薄層
蒸発器を用いて連続的に蒸発乾個させる。１３０℃まで
安定で、かつ水との接触時に作用物質が再び溶出する、
灰色で流動性の生成物が得られる。

例１および２で得られた溶液（１）および（２）を用い
て、次に記載の試験を実施し、結果を記載する。

毒性： 実験動物へ１％！液を注射する際に１次のＬＤ５ｏ値が
得られる。

腹腔内　　　　　１２９２ＣＴ！Ｖｋｇ）　　１１５６
（Ｔｎ９Ａｇ）皮下　　　　　８５３　　　　７８４ 靜注　　　　　６７６　　　　７２２ 安定性： １２／１２時間間隔で５６／４℃の６０日日間式負荷の
後の安定化調整の際に、パラメーター含有量、−β値、
しｒツクスミ圧およびマイクロ透析試験の変化は、不規
則変動にわたシ確認されない。

治療効果ニ トリデシン処理の後Ｊ＠濁液にされたＬ−細胞（マウス
線維芽細胞）の培養液に低分子量のフミン酸アルカリ５
０　ｐｐｍ　（例１および２からの溶液）を加える。

この培養液を３７℃、市販の培地の使用下に４８時間培
養する。

これと平行して、比較試験としてフミン酸アルカリ不含
の培養液を同じ条件で培養する。その後両培養液中の生
細胞の数を測定する。低分子量のフミン酸アルカリを加
えた培養液中の生細胞の数は、比較培養液中のよりも３
０チ高い。

創傷の治療： ２ｘ１０のヌードマウスに、最上部上皮層のみで皮膚禎
瘍（Ｍｉｋｒｏｄｅｒｍａｔｏｍ）　９面傷を約５０朋
２の大きさで負わせる。これらのマウス１０匹それぞれ
において、傷に１％溶液（例１および２からの）で濡ら
す。他のマウスは未治療のままにする。

７日間の一察時間の間に次のことが観察できる：未治療
のマウスに比べて治療された実験動物ではｌの面積が早
急に減少、 傷は早期に乾燥し、 肉芽が早期発生し、 傷は早期に浄化される。

全体的に、完治は対照動物よ＃）２〜３日早く観察する
ことができる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、低分子量フミン酸塩画分を製造するため、フミン含
   有物質水性懸濁液に、撹拌下にアルカリ作用物質をｐＨ
   値が７を上まわらないように装入し、この懸濁液をｐＨ
   値が一定するまでさらに撹拌し、その後沈殿させ、さら
   に充分に固体不含の溶液を分離し、その後遠心し、この
   際に得られる澄明溶液を限外濾過することを特徴とする
   、低分子量フミン酸塩画分の製法。 ２、フミン含有物質を懸濁前に予め乾燥する、請求項１
   記載の方法。 ３、アルカリ作用物質として水酸化アルカリ、炭酸アル
   カリまたはアンモニアを使用する、請求項１および２記
   載の方法。 ４、アルカリ作用物質として炭酸カリウムを使用する、
   請求項１から３までのいずれか１項記載の方法。 ５、ｐＨ６．３〜６．５の範囲の一定ｐＨ値に調節する
   、請求項１から４までのいずれか１項記載の方法。 ６、装入されるアルカリ作用物質量は、アルカリ作用物
   質５０〜１００ｍモル／フミン含有物質乾燥量１００ｇ
   の範囲にある、請求項１から４までのいずれか１項記載
   の方法。 ７、分離され、充分に固体不含の溶液を８０００〜１０
   ０００ｘｇで遠心する、請求項１から６までのいずれか
   １項記載の方法。 ８、限外濾過を５００００〜１００００００ダルトンの
   細孔範囲で実施する、請求項１から７までのいずれか１
   項記載の方法。 ９、限外濾過で得られた溶液に、溶液の固体含有量に対
   して１０〜１００重量％の無機担持剤を加え、乾燥させ
   て流動性物質にする、請求項１から８までのいずれか１
   項記載の方法。 １０、無機担持剤として二酸化チタン粉末を使用する、
   請求項９記載の方法。 １１、限外濾過で得られた溶液を、乾燥させて残留水分
   ４〜８％の固体物質にし、その後自体公知の方法により
   、砂糖、デンプンまたは変性デンプンと共に摩砕して流
   動性物質にする、請求項１から８までのいずれか１項記
   載の方法。 １２、請求項９又は１１記載の方法で製造された流動性
   物質よりなる創傷治療剤。 １３、請求項９又は１１記載の方法で製造された流動性
   物質の粉末、スプレー、軟膏または粘着ペーストである
   、請求項１２記載の薬剤。