JPH01165382A - 遺伝子の発現制御方法 - Google Patents
遺伝子の発現制御方法Info
- Publication number
- JPH01165382A JPH01165382A JP62320113A JP32011387A JPH01165382A JP H01165382 A JPH01165382 A JP H01165382A JP 62320113 A JP62320113 A JP 62320113A JP 32011387 A JP32011387 A JP 32011387A JP H01165382 A JPH01165382 A JP H01165382A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- expression
- glucose
- coli
- gene
- tac
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6456—Plasminogen activators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は遺伝子組換技術を用いて目的とする蛋白質を大
腸菌に生産させる方法に″関し、詳しくはトリプトファ
ンプロモーター、ラクトースオペレーターを調節遺伝子
系（以下この調節遺伝子系をｔａｎと呼ぶ）として有す
る遺伝子群の発現を制御する方法に関するものである。
腸菌に生産させる方法に″関し、詳しくはトリプトファ
ンプロモーター、ラクトースオペレーターを調節遺伝子
系（以下この調節遺伝子系をｔａｎと呼ぶ）として有す
る遺伝子群の発現を制御する方法に関するものである。
（発明の背景）
ｔａｏは、トリプトファンプロモーターとラクトースオ
ペレーターのハイプリ、ド調節遺伝子系であり、その下
流に存在する遺伝子を強力に発現させることで知られて
いる。
ペレーターのハイプリ、ド調節遺伝子系であり、その下
流に存在する遺伝子を強力に発現させることで知られて
いる。
ｔａａに、目的とする蛋白質をコードする遺伝子を結合
させた遺伝子配列を含むビヒクルで形質転換された大腸
菌では、ｔａｃの強力な発現力のため属目的蛋白質は自
然状態よりも遥かに、または自然状態では生産されるこ
とのない異種蛋白質として大量に生産される。
させた遺伝子配列を含むビヒクルで形質転換された大腸
菌では、ｔａｃの強力な発現力のため属目的蛋白質は自
然状態よりも遥かに、または自然状態では生産されるこ
とのない異種蛋白質として大量に生産される。
目的とする蛋白質がその生産と同時に培地中に分泌され
るものであれば問題はないが、培地中に分泌されない、
すなわち大腸菌内に蓄積されて、例えば沈殿顆粒を生じ
る性質を持つ異種蛋白質である場合には、その生産に関
係して大腸菌の生育が著しく阻害されるという問題が生
じる。
るものであれば問題はないが、培地中に分泌されない、
すなわち大腸菌内に蓄積されて、例えば沈殿顆粒を生じ
る性質を持つ異種蛋白質である場合には、その生産に関
係して大腸菌の生育が著しく阻害されるという問題が生
じる。
この問題を解決するためには、目的蛋白質の生産すなわ
ち目的蛋白質をコードする遺伝子の発現を抑制した状態
で組換大腸菌の培養を行い、菌体量を増加させた後にこ
の抑制状態を解除する操作が要求される。
ち目的蛋白質をコードする遺伝子の発現を抑制した状態
で組換大腸菌の培養を行い、菌体量を増加させた後にこ
の抑制状態を解除する操作が要求される。
ｔａｃは、大腸菌が自然の状態で生産するラクトース調
節遺伝子系のりグレ、サー蛋白により抑制される。しか
し、通常の大腸菌が生産するラクトース調節遺伝子系の
りプレアサ−蛋白は、本来、大腸菌が自然に有するラク
トース調節遺伝子系の抑制のために微量に生産されるも
のであり、組換大腸菌におい【導入されたｔａｏの発現
を抑制するには不十分である。
節遺伝子系のりグレ、サー蛋白により抑制される。しか
し、通常の大腸菌が生産するラクトース調節遺伝子系の
りプレアサ−蛋白は、本来、大腸菌が自然に有するラク
トース調節遺伝子系の抑制のために微量に生産されるも
のであり、組換大腸菌におい【導入されたｔａｏの発現
を抑制するには不十分である。
通常の大腸菌ではラクトース調節遺伝子系の発現を抑制
するりブレアサ−蛋白は、ムｃ工と呼ばれる遺伝子によ
りコードされているが、前述した様な理由から、目的異
種蛋白質の発現ＶＣｔａａを用いる場合にはＬａａ工に
比べ１０倍以上のリプレッサー蛋白を生産するｔｈａ工
ｑと呼ばれる遺伝子を有する変異株を用いる必要がある
。
するりブレアサ−蛋白は、ムｃ工と呼ばれる遺伝子によ
りコードされているが、前述した様な理由から、目的異
種蛋白質の発現ＶＣｔａａを用いる場合にはＬａａ工に
比べ１０倍以上のリプレッサー蛋白を生産するｔｈａ工
ｑと呼ばれる遺伝子を有する変異株を用いる必要がある
。
ｔａａの抑制状態の解除は、前述したｔａａ工ｑからの
リプレッサー蛋白がラクトースオペレーターに結合する
のを妨害してやれば良いが、通常の大腸菌に比べ１０倍
以上のりグレ、サー蛋白を生産する変異株では、イソプ
ロピル−β−Ｄ−チオガラクトビ２ノシド（以下工Ｐ？
Ｇと略す）等の化学物質を添加する必要がある。
リプレッサー蛋白がラクトースオペレーターに結合する
のを妨害してやれば良いが、通常の大腸菌に比べ１０倍
以上のりグレ、サー蛋白を生産する変異株では、イソプ
ロピル−β−Ｄ−チオガラクトビ２ノシド（以下工Ｐ？
Ｇと略す）等の化学物質を添加する必要がある。
以上の様に、目的蛋白質の生産性という側面では調節遺
伝子系としてｔａｃを用いることが望ましいが、反面、
目的蛋白質が異種蛋白質である場合にはＬｈａＮ”を有
する大腸菌変異株の使用と、工ＰＴＧの添加という操作
が必要となる。本発明者らは、以上の様な背景から研究
を重ねた結果、グルコース、フルクトースの存在がｔａ
ｃの発現を抑制する（ ｔａｃの発現は目的蛋白質をコ
ードする遺伝子の発現、すなわち目的蛋白質の発現を意
味する）ことを見い出し、本発明を完成させた。すなわ
ち本発明は、少なくともトリプトファンプロモーター、
ラクトースオペレーター及びこれら調節遺伝子系の下流
に異種蛋白質をコードする遺伝子を含むビヒクルで形質
転換された大腸菌をグルコース及び／またはフルクトー
スを含む培地で培養することを特徴とする遺伝子の発現
制御方法を提供するものであり、以下詳細に説明する。
伝子系としてｔａｃを用いることが望ましいが、反面、
目的蛋白質が異種蛋白質である場合にはＬｈａＮ”を有
する大腸菌変異株の使用と、工ＰＴＧの添加という操作
が必要となる。本発明者らは、以上の様な背景から研究
を重ねた結果、グルコース、フルクトースの存在がｔａ
ｃの発現を抑制する（ ｔａｃの発現は目的蛋白質をコ
ードする遺伝子の発現、すなわち目的蛋白質の発現を意
味する）ことを見い出し、本発明を完成させた。すなわ
ち本発明は、少なくともトリプトファンプロモーター、
ラクトースオペレーター及びこれら調節遺伝子系の下流
に異種蛋白質をコードする遺伝子を含むビヒクルで形質
転換された大腸菌をグルコース及び／またはフルクトー
スを含む培地で培養することを特徴とする遺伝子の発現
制御方法を提供するものであり、以下詳細に説明する。
（発明の構成）
グルコース、フルクトースのｔａａに対スル発現抑制効
果についてのメカニズムは明らかではない。
果についてのメカニズムは明らかではない。
本発明は、異種蛋白質をコードする遺伝子として、大腸
菌内で発現した後、培地中に分泌されずに蓄積される可
溶性、不溶性の蛋白質、例えば組織グラスミノゲンアク
ティベータ、ヒト成長ホルモン、インスリン、グロウロ
キナーゼ、ウシ血清アルブミン等をコードする遺伝子を
ｔａｃに結合させた遺伝子配列を含むビヒクルで形質転
換させた大腸菌の培養に適用される。
菌内で発現した後、培地中に分泌されずに蓄積される可
溶性、不溶性の蛋白質、例えば組織グラスミノゲンアク
ティベータ、ヒト成長ホルモン、インスリン、グロウロ
キナーゼ、ウシ血清アルブミン等をコードする遺伝子を
ｔａｃに結合させた遺伝子配列を含むビヒクルで形質転
換させた大腸菌の培養に適用される。
ビヒクルとしては、大腸菌を形質転換できるもので、ｔ
ａｃ工ｑを導入されていないものであれば、何ら制限は
なく、例えばＩＪｏｌｅｃｕｌａｒ Ｏｌｏｎｉｎｇ
（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａ
ｔｏｒｙ １９８２年）ベクターＤＮＡ （講談社１９
８６年）等の文献を参照すれば良い。遺伝子配列の構築
及びビヒクル中への導入については、公知の技Ｗ／ＩＶ
Ｃ従えば良い。大腸菌としては、ｔ＆ｃ工ｑを持たない
、ｔａｃ工通常株を用いれば良く、例えばＭｏ１ｅｃｕ
ｌａｒ Ｏｌｏｎｉｇ （Ｏｏ：ＬａＢｐｒｉｎｇ Ｈ
ａｒｂｏｒ ］１．＋ａｂｏｒａｔｏｒｙ １９８２年
）等の文献を参照すれば良い。
ａｃ工ｑを導入されていないものであれば、何ら制限は
なく、例えばＩＪｏｌｅｃｕｌａｒ Ｏｌｏｎｉｎｇ
（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａ
ｔｏｒｙ １９８２年）ベクターＤＮＡ （講談社１９
８６年）等の文献を参照すれば良い。遺伝子配列の構築
及びビヒクル中への導入については、公知の技Ｗ／ＩＶ
Ｃ従えば良い。大腸菌としては、ｔ＆ｃ工ｑを持たない
、ｔａｃ工通常株を用いれば良く、例えばＭｏ１ｅｃｕ
ｌａｒ Ｏｌｏｎｉｇ （Ｏｏ：ＬａＢｐｒｉｎｇ Ｈ
ａｒｂｏｒ ］１．＋ａｂｏｒａｔｏｒｙ １９８２年
）等の文献を参照すれば良い。
グルコース、フルクトースの添加量としては、通常は使
用する大腸菌の使用する培地中での指数的増殖の末期で
消費される程度で良いが、実施者の都合によっては希望
する菌体量に大腸菌が増殖した時に消費される量であっ
ても良い。グルコース。
用する大腸菌の使用する培地中での指数的増殖の末期で
消費される程度で良いが、実施者の都合によっては希望
する菌体量に大腸菌が増殖した時に消費される量であっ
ても良い。グルコース。
フルクトースは単独でも、あるいは両者を併用しても良
い。グルコース、フルクトースの添加量を決定するＫは
、それらが存在した場合の組換大腸菌では目的異種蛋白
質の発現は抑制されていることから、通常の形質転換さ
れていない大腸菌を培養したときのグルコース、フルク
トースの消費と菌体増殖の関係、さらには、後に述べる
使用する培地中の他の炭素源との関係を考慮すればよい
。
い。グルコース、フルクトースの添加量を決定するＫは
、それらが存在した場合の組換大腸菌では目的異種蛋白
質の発現は抑制されていることから、通常の形質転換さ
れていない大腸菌を培養したときのグルコース、フルク
トースの消費と菌体増殖の関係、さらには、後に述べる
使用する培地中の他の炭素源との関係を考慮すればよい
。
培地は、通常の大腸菌の培養に使用される培地同様、大
腸菌の生育のために十分な炭素源、窒素源及び金属イオ
ン等を含んでいれば良い。ｔａａの発現を抑制するグル
コース、フルクトースが消費された後、ｔａｏが発現し
た場合において、大腸菌が目的とする異種蛋白質を生産
するのに必要な炭はグルコース、フルクトース以外の糖
あるいはグリセロール等の解糖系の中間体、酢酸１．ピ
ルビン酸等のＴＯＡ回路の中間体等、分解されてラクト
ース、グルコース、フルクトースを生じない物を用いれ
ば良い。前述したグルコース、フルク） −スの添加量
及びこれら炭素源の選択は、添加するラクトース、フル
クトースとの使用する大腸菌による消費速度の差を考慮
して行えば良い。例えば、グルコース、フルクトースと
比較して、これらが共存するときには消費されない炭素
源、あるいは圧到的に消費速度の遅い炭素源の組み合わ
せ、例えばグルコースとグリセロール等による培養では
、ｔａｃを制限するグルコースが消費された後、大腸菌
は異種蛋白質を生産しつつ、グリセロールな消費するた
め、組み合わせとして好ましく、さらにはグルコースの
添加量はこの大腸菌を前述した様にグルコースのみを炭
素源として培養したときの菌体増殖の様式とその消費量
をもとに決定すれば良い。本発明ではグルコースとグリ
セロール等の組み合わせが好ましいが、例えば事情によ
りグルコース、フルクトースよりも大腸菌による消費速
度が圧到的に大きな炭素源を用いるときＫは、グルコー
ス、フルクトースが消費された時点でこれら炭素源を培
地に添加すれば良い。
腸菌の生育のために十分な炭素源、窒素源及び金属イオ
ン等を含んでいれば良い。ｔａａの発現を抑制するグル
コース、フルクトースが消費された後、ｔａｏが発現し
た場合において、大腸菌が目的とする異種蛋白質を生産
するのに必要な炭はグルコース、フルクトース以外の糖
あるいはグリセロール等の解糖系の中間体、酢酸１．ピ
ルビン酸等のＴＯＡ回路の中間体等、分解されてラクト
ース、グルコース、フルクトースを生じない物を用いれ
ば良い。前述したグルコース、フルク） −スの添加量
及びこれら炭素源の選択は、添加するラクトース、フル
クトースとの使用する大腸菌による消費速度の差を考慮
して行えば良い。例えば、グルコース、フルクトースと
比較して、これらが共存するときには消費されない炭素
源、あるいは圧到的に消費速度の遅い炭素源の組み合わ
せ、例えばグルコースとグリセロール等による培養では
、ｔａｃを制限するグルコースが消費された後、大腸菌
は異種蛋白質を生産しつつ、グリセロールな消費するた
め、組み合わせとして好ましく、さらにはグルコースの
添加量はこの大腸菌を前述した様にグルコースのみを炭
素源として培養したときの菌体増殖の様式とその消費量
をもとに決定すれば良い。本発明ではグルコースとグリ
セロール等の組み合わせが好ましいが、例えば事情によ
りグルコース、フルクトースよりも大腸菌による消費速
度が圧到的に大きな炭素源を用いるときＫは、グルコー
ス、フルクトースが消費された時点でこれら炭素源を培
地に添加すれば良い。
ら
本発明合６知見では、炭素源としてグルコース及びグリ
セロールを用いた場合のｔｉｃの制限が解除された時の
培地１を中の菌体乾燥重量（り）：Ａと培地１を当りに
植菌された菌体乾燥重量（９）：Ｂの差、すなわち培地
１を中の菌体の増殖量と培地１を中に添加したグルコー
ス量（９）：ａの間には、Ｏ／（Ａ−Ｂ）＝２〜３とい
５関係があった。通常、植菌される菌体の濃度は指数増
殖末期の菌体濃度、あるいは希望される菌体濃度と比べ
て極めて微量であることから、このグルコースとグリセ
ロールを炭素源として用いる場合、グルコースの添加量
は希望する菌体の増殖量の２〜３倍が好ましいと言える
。
セロールを用いた場合のｔｉｃの制限が解除された時の
培地１を中の菌体乾燥重量（り）：Ａと培地１を当りに
植菌された菌体乾燥重量（９）：Ｂの差、すなわち培地
１を中の菌体の増殖量と培地１を中に添加したグルコー
ス量（９）：ａの間には、Ｏ／（Ａ−Ｂ）＝２〜３とい
５関係があった。通常、植菌される菌体の濃度は指数増
殖末期の菌体濃度、あるいは希望される菌体濃度と比べ
て極めて微量であることから、このグルコースとグリセ
ロールを炭素源として用いる場合、グルコースの添加量
は希望する菌体の増殖量の２〜３倍が好ましいと言える
。
本発明では、培養における他の条件、例えば培養温度、
培養液ｐ）ｉ等は公知の技術に従えば良い。
培養液ｐ）ｉ等は公知の技術に従えば良い。
（発明の効果）
本発明により、強力な発現力を持つｔａａを、その発現
を抑制するために従来必要であったｔａａ工ｑを有する
ｔａｃ４ｑ変異株以外でも使用することが可能となる。
を抑制するために従来必要であったｔａａ工ｑを有する
ｔａｃ４ｑ変異株以外でも使用することが可能となる。
しかも、従来必要であった大腸菌を十分に生育させた後
、工ＰＴＧ等の発現誘導剤を添加する操作も、大腸菌が
生育した時点で消費されるような量のグルコース及び／
またはフルクトースをあらかじめ決定して添加しておく
ことで省略することができる。
、工ＰＴＧ等の発現誘導剤を添加する操作も、大腸菌が
生育した時点で消費されるような量のグルコース及び／
またはフルクトースをあらかじめ決定して添加しておく
ことで省略することができる。
以下本発明をさらに詳細に説明するため実施例を示すが
、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
（実施例）
実施例１
プロウロキナーゼをコードする遺伝子をｔａｃに結合さ
せた遺伝子配列を含むプラスミド（工業技術院微生物工
業技術研究所に８１８８号。
せた遺伝子配列を含むプラスミド（工業技術院微生物工
業技術研究所に８１８８号。
８３４１号として寄託済み）で形質転換されたｔａｃ工
ｑを持たない大腸菌を１％グリセロール、２％酵母エキ
ス、ＩＩＬ７％Ｎ％１’！ＰＱ、 、α５ ％ ＫＨ，
ＰＯ，。
ｑを持たない大腸菌を１％グリセロール、２％酵母エキ
ス、ＩＩＬ７％Ｎ％１’！ＰＱ、 、α５ ％ ＫＨ，
ＰＯ，。
α１％ＱＯｔ、α０５％Ｎａ０ｔ、 ５０ ｍＭ Ｍｇ
５Ｏ，。
５Ｏ，。
３０ｍＭ０ａ０４．（ＬＯ５％アンピシリン（％は重量
／培地１ｔを示す）を含む培地に乾燥重量で約１０６９
／ｌの割合で植菌した。培地にはさらに上記成分以外に
菌体が乾燥重量で約２９／ｌになった時に消費される様
に５ｇ７ｔ、すなわち１５％のグルコースを添加した。
／培地１ｔを示す）を含む培地に乾燥重量で約１０６９
／ｌの割合で植菌した。培地にはさらに上記成分以外に
菌体が乾燥重量で約２９／ｌになった時に消費される様
に５ｇ７ｔ、すなわち１５％のグルコースを添加した。
３０℃にて培養する過程で、菌体量、グルコース残留量
９見現したプロウロキナーゼ量を測定した。グルコース
の残留量は、イエロースプリングインストラメンツ社製
Ｓｕｇａｒ Ａｎａｌｙｚｅｒ ＹＳ工２５Ａ を用
いて、プロウロキナーゼ量は、菌体破砕後、特開昭５９
−１６１３２１号に示された方法によって可溶化。
９見現したプロウロキナーゼ量を測定した。グルコース
の残留量は、イエロースプリングインストラメンツ社製
Ｓｕｇａｒ Ａｎａｌｙｚｅｒ ＹＳ工２５Ａ を用
いて、プロウロキナーゼ量は、菌体破砕後、特開昭５９
−１６１３２１号に示された方法によって可溶化。
再活性化を行ったグロウロキナーゼをプラスミン処理し
て得られるウロキナーゼの活性により示した。閘、ウロ
キナーゼの活性測定は、合成基質Ｓ−２４４４（第一化
学薬品社製）を用い、Ｔ−Ｋｏｈｎ。
て得られるウロキナーゼの活性により示した。閘、ウロ
キナーゼの活性測定は、合成基質Ｓ−２４４４（第一化
学薬品社製）を用い、Ｔ−Ｋｏｈｎ。
らの方法（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、 ６２８．１
９８４年）に従って測定し６００ ｎｍでの濁度当りの
活性で示した。
９８４年）に従って測定し６００ ｎｍでの濁度当りの
活性で示した。
図１．は、実施例１の結果を示すものである。グロウロ
キナーゼの発現は、グルコースが培地中に残留している
間、はとんど観察されない。
キナーゼの発現は、グルコースが培地中に残留している
間、はとんど観察されない。
Claims (1)
- （１）少なくともトリプトファンプロモーター、ラクト
ースオペレーター及びこれら調節遺伝子系の下流に異種
蛋白質をコードする遺伝子を含むビヒクルで形質転換さ
れた大腸菌をグルコース及び／またはフルクトースを含
む培地で培養することを特徴とする遺伝子の発現制御方
法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62320113A JPH01165382A (ja) | 1987-12-19 | 1987-12-19 | 遺伝子の発現制御方法 |
| EP88120914A EP0326691A1 (en) | 1987-12-19 | 1988-12-14 | Method of controlling genetic expression |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62320113A JPH01165382A (ja) | 1987-12-19 | 1987-12-19 | 遺伝子の発現制御方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01165382A true JPH01165382A (ja) | 1989-06-29 |
Family
ID=18117842
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62320113A Pending JPH01165382A (ja) | 1987-12-19 | 1987-12-19 | 遺伝子の発現制御方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0326691A1 (ja) |
| JP (1) | JPH01165382A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2019176770A (ja) * | 2018-03-30 | 2019-10-17 | 三井化学株式会社 | 微生物を増殖させる方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0227993A (ja) * | 1988-07-15 | 1990-01-30 | Nippon Shinyaku Co Ltd | ｈＥＧＦの製法 |
-
1987
- 1987-12-19 JP JP62320113A patent/JPH01165382A/ja active Pending
-
1988
- 1988-12-14 EP EP88120914A patent/EP0326691A1/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2019176770A (ja) * | 2018-03-30 | 2019-10-17 | 三井化学株式会社 | 微生物を増殖させる方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0326691A1 (en) | 1989-08-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lim et al. | Production characteristics of interferon-α using an L-arabinose promoter system in a high-cell-density culture | |
| Malekian et al. | High-yield production of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in E. coli BL21 (DE3) by an auto-induction strategy | |
| CA2141439C (en) | Method for highly purifying human serum albumin | |
| JPH01165382A (ja) | 遺伝子の発現制御方法 | |
| JPH022376A (ja) | 酵素前駆体型ヒトプロテインｃの発現のためのベクターおよび化合物 | |
| CN110093336B (zh) | 一种稳定的胰蛋白酶及其制备方法 | |
| WO2026026211A1 (zh) | 一种BaP4H突变体及其应用 | |
| EP0208486B1 (en) | Process for producing tissue plasminogen activator | |
| CA2022487C (en) | Optimized fermentation processes for the preparation of foreign proteins in e.coli | |
| AU777408B2 (en) | Production of pancreatic procarboxy-peptidase B, isoforms and muteins thereof, and their use | |
| JPH0310693A (ja) | 蛋白質の製造方法 | |
| US20050203020A1 (en) | Recombinant protein containing serum albumin multimer | |
| CN116426546A (zh) | 重组胆固醇氧化酶及其制备方法和应用 | |
| KR102639552B1 (ko) | 구리염을 이용한 재조합 혈장 단백질의 생산 방법 | |
| AU653178B2 (en) | Method of improving the yield of heterologous proteins produced by streptomyces lividans | |
| JP2007528221A (ja) | 酵素および調製法 | |
| JP5114201B2 (ja) | 組み換えカルボキシペプチダーゼｂ | |
| JPH022390A (ja) | 新規なヒト顆粒球マクロファージコロニー刺激因子 | |
| JP3023008B2 (ja) | プロテア−ゼインヒビタ−遺伝子 | |
| CN121021673A (zh) | 一种提高重组人ⅲ型胶原蛋白羟化率的方法 | |
| CN114437953A (zh) | 一种制备重组人奥克纤溶酶原的制备方法 | |
| CN120400111A (zh) | 一种片段插入与点突变组合突变提高胰蛋白酶催化效率的方法 | |
| CN118272473A (zh) | 一种大肠杆菌表达纤连蛋白的培养方法 | |
| JPS63145297A (ja) | タンパク質の精製方法 | |
| JPH0284195A (ja) | 天然型ヒトアポリポプロテインｅ様蛋白質の産生方法 |