JPH01176000A - 放射性医薬品とその調製用高分子化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は放射性医薬品とその調製用高分子化合物に関す
る。

（従来技術） アシアロ糖蛋白質受容体は、動物レクチンと呼ばれる分
子識別能を有する蛋白質の一種であり、動物細胞、特に
肝細胞に広く見出だされている。

・人肝細胞から単離されているアシアロ糖蛋白質受容体
は分子量約４万の単一なポリペプチドから構成されてお
り、糖鎖非還元末端にガラクトース残基を持つ糖蛋白質
（アシアロ糖蛋白質）を識別する受容体である。

アシアロ糖蛋白質受容体の生理学的な機能については不
明な点が多いが、肝細胞表面に存在する受容体は肝血流
中の糖蛋白質と結合して複合体を形成し、細胞内に取り
込まれた後、細胞内を輸送され、ライソゾームで解離す
ることから、糖蛋白質の代謝過程を担っていると信じら
れている。このため慢性肝炎、肝硬変、原発性肝ガン等
の肝疾患では、アシアロ糖蛋白質の血中濃度が上昇する
と言う現象が見られ、薬物投与によって作成した実験的
肝障害モデルでは肝臓のアシアロ糖蛋白質受容体の量が
低下する事実が認められている。

このことはアシアロ糖蛋白質様物質、すなわちアシアロ
糖蛋白質受容体指向性化合物を用いて、肝臓中のアシア
ロ糖蛋白質受容体の量及び質を評価することにより肝疾
患を診断することが可能であることを意味する。

（発明が解決しようとする問題点） 上記のような診断方法においては、放射性同位元素を用
いる核医学的手法が適しているが、従来標識に用いられ
てきた核種としては、ヨウ素元素の放射性同位体である
ｌ−１３１及びｌ−１２５放射性金属元素であるテクネ
チウム（Ｔｃ−９９ｍ）等が知られている。しかしなが
ら、ｒ−１３１や１−１２５は、物理学的半減期が長く
（８日及び６０日）、かつ生体内において酵素的に脱ヨ
ード化反応をうけ、目的臓器以外の組織に放射性被曝を
与えると共に、動態検査や定量的評価に誤差を与えるた
め、適当な核種とは言えない。

テクネチウム−９９ｍにはそのような欠点が認められな
いが、分子内にテクネチウムとキレート結合を形成しう
る配位子を持ち、結合部位を有するアシアロ糖蛋白質受
容体指向性化合物に限り有効である。例えば、ガラクト
ース結合血清アルブミン（以後ＮＧＡ（ネオガラクトア
ルブミン）と略す。）は分子内のシスティン、リジン、
グルタミン酸残基等を介してテクネチウムと結合するこ
とができる。しかしながら、その結合能や結合安定性は
必ずしも充分に満足出来るものではない。例えば代表的
な放射性金属であるテクネチウム−９９ｍを標識する場
合、標識化のため過テクネチウム塩と還元剤としての第
一スズ塩を組み合わせて使用するのが普通であるが、得
られた標識体のイン・ビトロ並びにイン・ビボにおける
安定性が充分でないため、不安定化に伴ってコロイド様
の二酸化テクネチウム（”ＩＩＩＴＣＯりを含む不純物
が生成する。この物質は肝臓の網内系に取り込まれるた
め、その存在はアシアロ糖蛋白質受容体の様相を評価し
えなくする。安定性を向上させるためには還元剤である
第一スズ塩の使用量を増加させればよいが、第一スズ塩
はテクネチウム標識が可能な弱酸性以上のｐＨ領域にお
いてコロイド化し、精確なイメージングを困難にする。

これを防ぐには、ＮＧＡを充分量加えてこれに遊離の第
一スズ塩を結合させればよいが、この結果放射性比濃度
を上げることが困難となる。このことはＮＧＡのような
受容体指向性化合物の場合、その使用量に制限があるこ
とを考えると、好ましいものではない。

（問題点を解決するための手段） 本発明者等は種々研究を重ねた結果、アシアロ糖蛋白質
受容体指向性化合物に２官能性配位子化合物を結合させ
た高分子化合物が放射性金属元素のキャリヤーとして有
用であり、かかるキャリヤーに放射性金属元素を結合さ
せた放射性金属元素結合高分子化合物は前記欠点が克服
された放射性医薬品として有用であることを見出だした
。

上記放射性金属元素結合高分子化合物は、放射性金属元
素と強固なキレート結合を形成する２官能性配位子を有
しており、イン・ビトロ及びイン・ビボのいずれにおい
ても安定であるため、高圧放射性医薬品を提供すること
が可能である。

本発明の要旨は、 ２官能性配位子化合物（１）とアシアロ糖蛋白質受容体
指向性化合物（２）を化学結合させて成る高分子化合物
（Ａ）、 該高分子化合物（Ａ）に放射性金属元素（３）をキレー
ト結合させて成る放射性金属元素結合高分子化合物（Ｂ
）、 前記高分子化合物（Ａ）を含む放射性医薬品調製用組成
物（Ｃ）、及び 前記放射性金属元素結合高分子化合物（Ｂ）を含む放射
性医薬品（Ｄ） に存する。

上記高分子化合物（Ａ）及び放射性金属元素結合高分子
化合物（Ｂ）は文献未載の新規物質であり、アシアロ糖
蛋白質受容体を含む臓器の描出、アシアロ糖蛋白質受容
体の量及び質に変化を来す疾患の検出、アシアロ糖蛋白
質受容体の動態検査等の核医学的用途に適した放射性医
薬品を提供することができるものである。また、アシア
ロ糖蛋白質受容体は主として肝細胞に存在するものであ
るから、従来品とは異なった診断能力を有する肝イメー
ジング剤を提供することが出来る。

（作用） 上記２官能性配位子化合物（１）としては、放射性金属
元素（３）に対して強固なキレート結合を形成し得る２
官能性配位子を有し、かつ比較的緩和な条件下でアシア
ロ糖蛋白質受容体指向性化合物（２）と反応し得る官能
基（例えばアミノ基、カルボキシル基、ホルミル基、チ
オール括）を有するものが使用される。その具体例とし
ては、式％式％ で表されるジエチレントリアミン五酢酸サイクリック酸
無水物、式 で表されるエチレンジアミン四酢酸すクシンイミドエス
テル、式 ％式％ （式中、Ｒ１及びＲ１はそれぞれ水素、Ｃ７〜Ｃ３アル
キルまたはフェニルを示す。）で表される３−アミノメ
チレン−２，４−ペンタンジオン−ビス（チオセミカル
バゾン）誘導体、式 ％式％ （式中、Ｒ１及びＲ１はそれぞれ水素またはＣｌ−０３
アルキル、ｎはθ〜３の整数を示す。）で表される１−
（ｐ−アミノアルキル）フェニルプロパン−１゜２−ジ
オン−ビス（チオセミカルバゾン）誘導体、デフェロキ
サミン、式 ％式％ （式中、ＲＩ””’　Ｒｓは水素または０１〜Ｃ３アル
キルを示す。）で表される２−プロピオンアルデヒド−
ビス（チオセミカルバゾン）誘導体などが挙げられる。

なお、そのもの自体はアシアロ糖蛋白質受容体指向性化
合物（２）と結合することができる官能基を有していな
くとも、容易にアミノ基、カルボキシル基、アルデヒド
基、チオール基等の官能基を導入し得る基または構造を
有してい°る場合は、放射性金属元素を捕捉する性質を
有する限り、２官能性配位子化合物（１）として使用す
ることかできる。例えばジメルカプトアセチルエチレン
ジアミン（Ｆ　ｒｉｔｚｂｅｒｇ等：　Ｊ、Ｎｕｃｌ、
Ｍｅｄ、、　２３．９１７（１９８２））及びビスアミ
ノエタンチオール（ｐ　ｒｉｔｚｂｅｒｇ等：　Ｊ、Ｎ
ｕｃｌ、Ｍｅｄ、、　２５．９１６（１９８４））に代
表されるＮ　ｔ　Ｓ　ｔリガンド、サイクラン（Ｋｅｉ
ｒｉｎｇ等：Ｊ。

Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ、、　２３．９１７（１９８２））に
代表されるＮ４リガンド、Ｎ、Ｎ’−ビス（２−ヒドロ
キシエチル）エチレンジアミン（Ｗａｇｎｅｒ　Ｊｒ、
等：　Ｐ　ｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅ　Ｉ　ｎｔ
ｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｓｙｍｐｏｓｉｕ＋ｎ　ｏｎ　
Ｔｅｃｈｎｅ−ｔｉｕｍ　ｉｎ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　
ａｎｄ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ。

Ｐａｄｏｖａ、　　Ｉ　ｔａｌｙ、　１６１頁（１９８
２））に代表されるＮ２０．リガンドなどが挙げられる
。

また、２官能性配位子化合物（１）は、複数個の反応性
基を有する高分子化合物（１ａ）に対しその少なくとも
１個の反応性基が残るように先に例、示したような２官
能性配位子化合物を化学結合させて得られたもの（以下
「高分子化２官能性配位子化合物」と言う。）であって
もよい。

複数個の反応性基を有する高分子化合物（１ａ）として
は、ペント−サン、ヘキソ−サン、ポリグリコサミン、
ポリウロン酸、グリコサミノグリカン、グリコサミノグ
リカン、ヘテロヘキソーサミンなどのポリサッカライド
誘導体、より具体的にはアミロース、アミロペクチン、
デキストラン、セルロース、イヌリン、ペクチン酸、プ
ルラン誘導体などが使用される。その他、ポリアクロレ
イン誘導体、ポリサッカライド誘導体、ポリアミン誘導
体（特にポリリジンポリイミン誘導体）なども同様に使
用することができる。なお、これらは単体であってもよ
く、混合物や脱水縮合物であってもよい。

高分子化合物（Ａ）を製造するには、２官能性配位子化
合物（１）とアシアロ糖蛋白質受容体指向性化合物（２
）とを自体常套の手段で反応させて直接結合させるか、
もしくは適当な架橋剤を介して結合させ、透析法、塩析
法、ゲルろ適法、イオン交換クロマトグラフ法、電気泳
動法など自体常套の手段により精製すればよい。アシア
ロ糖蛋白質受容体指向性化合物（２）１分子当たりに結
合させる２官能性配位子化合物（１）の分子数は、アシ
アロ糖蛋白質受容体指向性化合物（２）が生理活性を失
わない限りにおいて制限はないが、通常、３０分子また
はそれ以下が望ましい。２官能性配位子化合物（１）と
して高分子化２官能性配位子化合物を使用する場合には
、通常、１０分子またはそれ以下であってもよい。

ここで言うアシアロ糖蛋白質受容体指向性化合物（２）
とは、生体内のアシアロ糖蛋白質受容体に対して結合親
和性を有する化合物を意味し、具体例としてはアシアロ
糖蛋白質（例えばＮＧＡアシアロオロソムコイド、アシ
アロフェツイン、アジアロセルロプラスミン、アシアロ
ハプトグロビン）、ガラクトース結合ポリリジン、ガラ
クトース結合ポリグロコサミンなどが挙げられる。

次に２官能性配位子化合物（１）としてジエチレントリ
アミン五酢酸サイクリック酸無水物（以下「ＤＴＰＡ酸
無水物」と略す。）を使用する場合を例に挙げ、これと
ＮＧＡ（２）との結合体（すなわち高分子化合物（Ａ）
）を製造する場合の好ましい手法を説明する。すなわち
、人血清アルブミン（以下ｒＨ９ＡＪと略す。）（市販
の注射用人血清アルブミン製剤を使用）にリン酸緩衝液
及びＤＴＰＡ酸無水物を加え、室温で数分間撹拌する。

これにホウ酸緩衝液を加え、ｐＨを調整してＤＴＰＡ−
Ｈ９Ａ溶液を得る。

別にシアノメチルチオガラクトースにナトリウムメトキ
サイドのメタノール溶液を加え、室温で数１０時間反応
させた後、メタノールを蒸発させて２−イミノメトキシ
−１−チオガラクトースを得る。これに上記ＤＴＰＡ−
Ｈ９Ａ溶液を加え、室温に２４時間放置する。酢酸を加
えて反応を停止し、ｐ）ｌを調整してＤＴＰＡ−ＮＧＡ
溶液を得る。

このようにして製造されたＤＴＰＡ−ＮＧＡ（ジエチレ
ントリアミン五酢酸結合ネオガラクトアルブミン）は次
の化学構造を有するものと考えられる： （ガラクトース）ｎ　−（Ｉ　Ｓ　Ａ）　−（Ｄ　Ｔ　
Ｐ　Ａ）ｍ（ただし、ｍとｎはそれぞれ１〜５０の整数
であり、ｍ＋ｎは２〜５０の整数である。）高分子化合
物（Ａ）は放射性医薬品調製用キャリヤーとして有用な
ものである。すなわち、高分子化合物（Ａ）には、放射
性金属元素（３）と強固なキレート結合をする２官能性
配位子化合物（１）が導入されており、これにより放射
性金属元素（３）を捕捉することができる。従って、こ
れまで放射性金属元素（３）で標識しえなかったアシア
ロ糖蛋白質受容体指向性化合物（２）も安定に標識でき
るようになった。

なお、２官能性配位子化合物（１）として前記高分子化
２官能性配位子化合物を使用した場合、これには複数個
の２官能性配位子が存在するから、これにより複数個の
放射性金属元素（３）を捕捉することができ、安定で比
放射能が非常に高い放射性医薬品を得ることができる。

放射性医薬品調製用キャリヤーとしての高分子化合物（
Ａ）は溶液の形で保存されてもよいが、通常は凍結乾燥
法、低温減圧蒸留法などにより粉末状態に変換して保存
され、用に臨み無菌水、生理食塩水、壊耐液などに溶解
される。粉末状態または溶解後の高分子化合物（Ａ）に
は、必要に応じ医薬的に許容し得る溶解補助剤（例えば
有機溶媒）、ｐ）（調節剤（例えば酸、塩基、緩衝剤）
、安定剤（例えばアスコルビン酸）、保存剤（例えば安
息香酸壬トリウム）、等張網（例えば塩化ナトリウム）
などや放射性金属元素（３）の原子価状態を調整するた
めの還元剤や酸化剤が配合されてもよい。

上記した放射性金属元素（３）としては、放射能を有す
る金属元素であって、核医学的手法に適した物理的特性
、化学的特性を有し、しかも２官能性配位子化合物（１
）の配位子構造により容易に捕捉され得るものが使用さ
れる。その具体例としては、ガリウム−６７、ガリウム
−６８、タリウム−２０１、インジウム−１１１，テク
ネチウム−９９ｍ１亜鉛−６２、銅−６２等が挙げられ
る。

これらは通常、塩、特に水溶性塩の形で使用され、水性
媒体中において、高分子化合物（Ａ）と接触せしめてそ
の標識化を行う。ただし、放射性金属元素（３）が安定
なキレート錯体を形成し得る原子価状態にある場合には
（例えばガリウム−６７、インジウム−１１１）、反応
系に他の試剤を存在せしめる必要はないが、安定なキレ
ート錯体を形成するために原子価状態を変化させる必要
がある場合には（例えばテクネチウム−９９ｍ）、反応
系に還元剤または酸化剤を存在せしめる必要がある。

還元剤の例としては２価の第一スズ塩（例えばハロゲン
化スズ、硫酸スズ、硝酸スズ、酢酸スズ、クエン酸スズ
）が挙げられる。酸化剤の具体例としては、過酸化水素
などがある。

例えば放射性金属元素（３）としてテクネチウム−９９
ｍを使用する場合、高分子化合物（Ａ）を水性媒体中還
元剤としての第一スズの存在下、過テクネチウム酸イオ
ンの形でテクネチウム−９９ｍで処理することによって
テクネチウム−９９ｍ標識高分子化合物（Ｂ）を調整す
ることができる。上記調製に際し、各試剤の混合順序に
ついて格別の制限はないが、通常、水性媒体中で最初に
第一スズ塩と過テクネチウム酸イオンを混合することは
避けた方が望ましい。

このようにして得られた放射性金属元素結合高分子化合
物（Ｂ）が放射性医薬品として有用であるためには、核
医学的適用目的に充分な放射能量と放射性濃度を有する
ことが必要である。例えば、放射性金属元素（３）とし
てテクネチウム−９９ｍを使用した場合、投与時に約０
．５〜５　、０　ｔｔｔＱ当たり、０．１〜５０’ｘＣ
ｉの放射能濃度を有することが望ましい。また、このよ
うな放射性金属元素結合高分子化合物（Ｂ）は調製後直
ちに投与されてもよいが、好ましくは調製後適当時間保
存に耐えうる程度の安定性を有することが望ましい。な
おまた、放射能金属元素結合高分子化合物（Ｂ）には、
必要に応じｐＨ調節剤（例えば酸、アルカリ、緩衝剤）
、安定剤（例えばアスコルビン酸）、等張化剤（例えば
塩化ナトリウム）などが配合されてもよい。

（実施例） 以下に実施例を示し、本発明を更に具体的に説明する。

実施例１ ＮＧＡ−ＤＴＰＡ結合体を含む組成物の製造：ＨＳＡ注
射液（２０％）５０ｊ＋Ｃをとり、０　、１　ｘＱリン
酸緩衝液（ｐＨ８，０）１１７ｘＣを加え、マグネチッ
クスターラーで撹拌しながらＤＴＰＡ酸無水物５２１２
１９を加える。４℃で約５分間反応させ、０．０５ＩＩ
１１２の試料を採取した後、ＩＮ水酸化ナトリウム１０
ｍ＋２と０．６Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ８、５）２３＊Ｑ
を加え、ｐＨを調整する。試料０．０５ｉ（！について
は、これに０．１Ｍクエン酸緩衝液０　、１　ｘＱを加
えて混合し、この液０．１１をとり、予め１ｍＭ塩化イ
ンジウム０．３ＭＱ、２ｍＣ１／ｘ（ｌ塩化インジウム
（ｌ　ｌ　ｌ　Ｉｎ　）液０．４＋（，０，１Ｍクエン
酸緩衝液０　、６　ｘＱの入ったバイアルに加え、３０
分間室温で放置する。更に１ｍＭジエチレントリアミン
五酢酸（Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ）溶液０　、３　ｙｘ（ｌを加
えた後、下記条件の電気泳動法によりＨ９Ａ−ＤＴＰＡ
−”’Ｉｎと遊離の１１１Ｉｎ−ＤＴＰＡを分離し、そ
れぞれの放射能を計測する。

支　持　体：　セルロ゛−スアセテート膜泳動緩衝液：
　　０．０６Ｍバルビタール緩衝液（ｐＨ８，６） 泳動条件：　　１ｍＡ／Ｃｘ　　３０分間ここで得られ
た結果を次式で計算し、ＨＳＡＩ分子当たりのＤＴＰＡ
の結合率（Ｐ）を算出した。

ここでＷはバイアルに加えたＨＳＡの＊９ｆｆｉ、Ａは
ＨＳＡ−ＤＴＰＡ−”’Ｉｎの割合（％）を示す。

上記反応条件で得られる結合率は約５であった。

これとは別にシアノメチル−チオガラクトースｉｏ９を
ナシ型フラスコにとり、乾燥メタノール２５０ｉＱを加
え、５０℃で溶解する。これにナトリウムメトキサイド
２７０ｍ９を加え、室温で４８時間反応させた後、メタ
ノールを減圧蒸発させ、これに先にｐＨ８整したｌ５Ａ
−ＤＴＰＡを加え、４℃で一夜反応させてＮＧＡ−ＤＴ
ＰＡを得る。

このＮＧＡ−ＤＴＰＡは次の条件の高速液体クロマトグ
ラフィー法により精製する。

カ　ラ　ム：　東洋ソーダ製ＴＳＫ−３０００ＳＷカラ
ム（０，７５Ｘ　６０ｃｍ’） 溶　出　液：　　０．ＩＭＭ化ナトリウム溶液溶出速度
：　　０．７５酎／分 上記操作のうち、結合率の測定以外はすべて無菌的に行
うほか、使用する器具類はすべて１８０℃４時間の加熱
処理によるパイロジエンバーンするか、もしくは注射用
蒸留水で洗浄した後、オートクレーブで滅菌して用いた
。また緩衝液は注射用蒸留水を用いて調製し、メンブラ
ンフィルタ−を用いたろ過滅菌法により滅菌して用いた
。カラムは次亜塩素酸ナトリウム溶液で洗浄した後、０
１１Ｍ塩化ナトリウム溶液で平衡化した。ここで得た精
製ＮＧＡ−ＤＴＰＡは０．１Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ６
，０）で希釈し、ｌπ９／Ｒ（ｌの濃度とした後、メン
ブランフィルタ−でろ過しながら１ｘｉｉづつ無菌バイ
アルに分注し、目的とする組成物を得た。

実施例２ ＮＧＡ−ＤＴＰＡ−”’Ｉｎ注射液の製造及び性質： 実施例１で得た組成物を含むバイアルに市販の塩化イン
ジウム（＋＋＋Ｉｎ）注射液（２ｍｃ　ｉ／ｘｉ２）　
１　。

０１を加え、目的とする注射液を得た。以上の操作は無
菌的に行う。

ここで得られた注射液２５μｇをとり、下記条件の高速
液体クロマトグラフィー法で分析したところ、２量体の
存在率は１％、未反応のＤＴＰＡは検出限界以下であっ
た。また、主成分の保持時間は約２５分であり、別に得
た検量線から計算するとその平均分子量は約７５，００
０であった。

カ　ラ　ム：　東洋ソーダ製ＴＳＫ−３０００ＳＷ（０
，７５ｘ　６０ｃｔ） 溶　出　液　０．１Ｍ塩塩化ナトリウム溶液溶出度　０
．７５ｘ（１／分 また、標識体３８０μ９をＳＤ系雌ラットの尾静脈より
投与し、投与後の経時的な体内分布挙動を観察した。結
果を第１図に示す。また、対照としてｌ！３１標識ＮＧ
Ａの結果を第２図に示す。その比較から明らかなように
、”Ｉ−ＮＧＡは肝臓のアシアロ糖蛋白質受容体を介し
て取り込まれた後、肝臓内で脱ヨード化反応をうけ、こ
こで生成した遊離のヨードは胃に集積したり、速やかに
尿中に排せつされるが、ＮＧＡ−ＤＴＰＡ−”’Ｉｎは
肝臓より主として腸管内に排せつされ、アシアロ糖蛋白
質受容体を介しての代謝の様相を示している。

実施例３ ＮＧＡ−ＤＴＰＡ−（Ｓｎ）結合体を含む組成物の製造
： 実施例１で得たＮＧＡ−ＤＴＰＡを生理食塩水で希釈し
、１５ｘｖ／ｘＱとする。次に塩化第一スズとアスコル
ビン酸をそれぞれ０．４ｍＭ５１．５ｍＭになるように
加え、塩酸液でｐＨを３〜５に調整する。ｐＨを調整し
たＮＧＡ−ＤＴＰＡ−（Ｓｎ）液はメンブランフィルタ
−でろ過しながら無菌バイアルに１ｘＱづつ分注し、目
的とする組成物を得た。

以上の操作はすべて無菌的に行った。

実施例４ ＮＧＡ−ＤＴＰＡ−（Ｓｎ）−”ｍＴｃ注射液の製造及
び性質： 実施例３で得た組成物を含むバイアルに標識時５０ｍＣ
１／ｘ１２の過テクネチウム酸ナトリウム注射液１ｚ（
ｌを加え、ＮＧＡ−ＤＴＰＡ−（Ｓｎ）−”ｍＴＣ注射
液を得た。以上の操作は無菌的に行う。

ここで得られた標識体について、実施例２で示した雌ラ
ットにおける体内分布の挙動を調べた。

結果を第３図に示す。この結果から明らかなように、Ｎ
ＧＡ−ＤＴＰＡ−（Ｓｎ）−”ｉＴｃは速やかに肝臓に
取り込まれた後、主に腸管より排せつされ、体内での安
定な挙動が示された。また、標識後１時間、４時間及び
２４時間後における標識率を測定するために実施例１で
示した電気泳動法により分析を行った。結果を第１表に
示す。この結果からＮＧＡ−ＤＴＰＡ−（Ｓｎ）−”ｍ
ＴｃはＤＴＰＡを介さないで直接標識したＮＧＡ−ＤＴ
ＰＡ（Ｓｎ）−”ｉＴｃに比べ、明らかに安定で標識率
のよい放射性医薬品であることがわかる。

第１表 実施例５ Ｐｏｌｙ−Ｌｙｓ（ＤＴＰＡ、Ｇａ１）結合体を含む組
成物の製造ニー 平均分子量８，０００のポリリジン臭酸塩（Ｐｏｌｙ−
１、ｙｓ）７７Ｒ９をとり、２酎の０．２Ｍホウ酸緩衝
液（ｐＨ８，５）に溶解した。この溶液にマグネックス
ターラーで撹拌しながらジエチレントリアミン五酢酸サ
イクリック酸無水物（ＣＡＤＴＰＡ）２５ｍ９を加える
。室温で５分間撹拌して反応させた後、２Ｎ水酸化ナト
リウム溶液適量を加え、さらに０２Ｍホウ酸緩衝液（ｐ
Ｈ８，５）１屑ｇを加えてｐ）ｌを調整した。・サンプ
ル液０　、１　＊Ｑをとり、これに０゜１Ｍクエン酸緩
衝液０．２酎と２ｎ＋Ｃｉ／ｘｆ２塩化インジウム（１
１１１ｎ）液０　、１　ｒｔｔＱを加え、３０分間放置
し、標識化する。この標識体につき電気泳動法によりＰ
ｏ１ｙ−Ｌｙｓ−ＤＴＰＡ−Ｉｎと未反応のＤＴＰＡ−
Ｉｎを分離定量し、Ｐｏ１ｙ−Ｌｙｓ１分子に結合して
いるＤＴＰＡの分子数を計算したところ、約３分子であ
った。

これとは別に２９のシアノメチル−チオガラクトースを
５０ｍ１２ナシ型フラスコに入れ、さらにメタノール５
０ｘ１２とナトリウムメトキサイド５４１９を加え、室
温で４８時間反応させる。反応後メタノールを減圧蒸発
させ、これに先に準備したｌ）Ｈ調整Ｐｏ１ｙ　−Ｌｙ
ｓ　−Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａを全量加え、３５〜４０℃で１．
５時間反応させてＰ　ｏｌｙ　−Ｌ　ｙｓ（Ｄ　ＴＰＡ
、Ｇａ１）を得る。

このＰｏ１ｙ−Ｌｙｓ（ＤＴＰＡ、Ｇａ１）を次の条件
のゲルろ過クロマトグラフィー法により精製した。

ゲ　ル　：セルロファインＧＣ−２５次（カラム　２．
２ｃｘｘ　５０ｃｍ） 溶出液　：　０．１Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ５，７）上
記操作はすべて無菌的に行うほか、使用する器具類はす
べて１８０℃、４時間の加熱処理によるパイロジエンバ
ーンするか、もしくは注射用蒸留水で洗浄した後、オー
トクレーブで滅菌して用いた。また、緩衝液は注射用蒸
留水を用いて調製し、メンブランフィルタ−を用いてろ
過滅菌法により滅菌して用いた。カラムは次亜塩素酸ナ
トリラム溶液で洗浄した後、０．１Ｍ塩化ナトリウム溶
液で平衡化した。

ここで得た精製Ｐｏ１ｙ−Ｌｙｓ（ＤＴＰＡ、Ｇａ１）
を濃度が１１１９／ＲＱになるように０．１Ｍクエン酸
緩衝ｉ’１ｌｔ（ｐＨ５，７）で希釈し、メンブランフ
ィルタ−でろ過しながらｌＲＯづつ無菌バイアルに分注
し、目的とする組成物を得た。

Ｘ１鯉１ Ｐｏｌｙ−Ｌｙｓ（ＤＴＰＡ、Ｇａ１）−”’Ｉ　ｎ注
射液の製造及び性質ニー 実施例５で得た組成物を含むバイアルに市販の塩化イン
ジウム（＋＋＋１ｎ）注射液（２ｍＣｉ）　１．０ｘＱ
を加え、目的とする注射液を得た。以上の操作は無菌的
に行う。

ここで得られた標識体（３８０μ９）についてＳＤ系雌
ラットにおける体内分布挙動を調べた（尾静脈より投与
）。第２表に示す結果から明らかなように、Ｐｏ１ｙ−
Ｌｙｓ（ＤＴＰＡ、Ｇａ１）−”ｌＩｎは投与早期に肝
臓のアシアロ糖蛋白質受容体を介して肝臓に取り込まれ
た後、徐々に排せつされる。

従って、本島はアシアロ糖蛋白質受容体の評価に有望な
薬剤であることが理解できる。

第２表　Ｐｏ１ｙ−ＬｙｓＣＤＴＰＡ、Ｇａ１）−”’
Ｉｎ注射液のラットにおける体内分布挙動 実施例７ Ｎ　Ｇ　Ａ　−Ａｏ＋ｙｌｏｓｅ（Ｄ　Ｆ　Ｏ）結合体
を含む組成物の製造：− デフェロキサミン（以下ＤＦＯと略す。）１５１９を０
．０３Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７、０）　１　ｘＱに溶か
し、これにトリエチルアミン３．２μＱを加え、室温で
約５分間撹拌する。これに、水に溶解したジアルデヒド
アミロース（２５ｘｖ／　ｘＱ）　１　ｚＱを加え、室
温で３０分間撹拌した。この溶液をＡ液とする。

別にシアノメチル−チオガラクトース１９をナシ型フラ
スコにとり、乾燥メタノール２５ａ＋＋２を加え、５０
℃で溶解する。これにナトリウムメトキサイド２７ｊＩ
９を加え、室温で４８時間反応させた後、メタノールを
減圧蒸発させる。次に人血清アルブミン１ｇを含む０．
２Ｍホウ酸緩衝液２０１１１２を加え、４°Ｃで一夜反
応させてＮＧＡ溶液を得る。この溶液をＢ液とする。Ｂ
液２．ＩＱにＡ液２ｘＱを加え、室温で約６時間撹拌し
て反応させた後、水酸化ホウ酸ナトリウム１　、５　ｍ
ｇを加え、約１時間室温で撹拌しながら還元した。反応
液は１Ｍ塩化ナトリウム溶液に対して透析し、更に０．
０３Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７、０）を溶出液としてセフ
ァクリルＳ−２００（カラム直径２　、２　ｃｍ、長さ
５０ｃｍ）を用いたカラムクロマトグラフィー法により
ＮＧＡ−ＡＩＩ＋ｙｌｏｓｅ（Ｄ　Ｆ　Ｏ）を精製する
。

上記操作はすべて無菌的に行うほか、使用する器具類は
すべて１８０℃、４時間の加熱処理によるパイロジエン
バーンするか、もしくは注射用蒸留水で洗浄した後、オ
ートクレーブで滅菌して用いた。また、緩衝液は注射用
蒸留水を用いて調製し、メンブランフィルタ−を用いて
ろ過滅菌法により滅菌したものを使用した。カラムは次
亜塩素酸ナトリウム溶液で洗浄した後、０．１Ｍ塩化ナ
トリウム溶液で平衡化した。

ここで得た精製ＮＧＡ−Ａｍｙｌｏｓｅ（ＤＰＯ）は、
０．０３Ｍリン酸緩衝液で希釈して１ｙｇ／ｍＱとし、
メンブランフィルタ−でろ過しながらｔｘＱづつ無菌バ
イアルに分注し、目的とする組成物を得た。

上記結合体のＤＦＯ及びＡｍｙｌｏｓｅ量は電気泳動法
により分析した。すなわち、前記還元反応終了後の反応
液の一部にクエン酸ガリウム（＠　７　Ｇ　ａ　）注射
液１ｍｃｉを加えて標識し、これを試料とした。

電気泳動法により分析されたＮ　Ｇ　Ａ　−Ａ　ｍｙｌ
ｏｓｅ（ＤＦ　Ｏ）−”Ｇａ、Ａｍｙｌｏｓｅ（Ｄ　Ｆ
　Ｏ）−”Ｇａ、Ｄ　Ｆ　０１１？Ｇａの値から本例で
得られた結合体中におけるＮＧＡＩ分子当たりのＤＦ’
Ｏの分子数は１１゜５個、Ａｍｙｌｏｓｅの分子数は０
．７個と算出された。

実施例８ ＮＧＡ−Ａｍｙｌｏｓｅ（ＤＦＯ）−８７Ｇａ注射液の
製造及び性質ニー 実施例７で得た組成物を含むバイアルにクエン酸ガリウ
ム（＠　７　Ｇ　ａ）注射液２ｍＣ１を加え、ＮＧ’Ａ
”Ａｍｙｌｏｓｅ（ＤＦＯ）　−８７Ｇａ注射液を得た
。以上の操作は無菌的に行う。ここで得られた標識体に
ついて電気泳動法で標識率を算出したところ、標識体以
外の放射能ピークは認められず、高純度の放射性医薬品
であることか示された。

（発明の効果） 本発明において、アシアロ糖蛋白質受容体指向性化合物
には、放射性金属元素と容易かつ強固にキレート結合を
形成し得る２官能性配位子が導入されているから、これ
を放射性金属元素と接触させた場合、該放射性金属元素
が強固に結合した放射性医薬品を容易に得ることができ
る。

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図及び第３図はそれぞれ’　ｌ　ｌ　Ｉｎ
−ＤＴＰＡ−ＮＧＡ、　１！３ｒ　−ＮＧＡ及び”ｍＴ
ｃ−ＤＴＰＡ−ＮＧＡの雌ラットにおける体内分布挙動
を示すグラフである。 図面中、ＬＩＶは肝臓、ＦＥｃ糞、ＬＩＴは大腸、ＵＲ
Ｎは尿、Ｓｌ子は小腸、ＢＬＤは血液、ＳＴＭは胃を示
す。 特許出願人　日本メジフィジックス株式会社代理人　弁
理士　青　山　葆　はが１名第１図 注入後１７）ｖＦＩＪＩ　（Ｆｇｔ） 第２図 注入後の時間（時）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、２官能性配位子化合物（１）とアシアロ糖蛋白質受
   容体指向性化合物（２）を化学結合させて成る高分子化
   合物（Ａ）。 ２、２官能性配位子化合物（１）とアシアロ糖蛋白質受
   容体指向性化合物（２）を化学結合させて成る高分子化
   合物（Ａ）に放射性金属元素（３）をキレート結合させ
   て成る放射性金属元素結合高分子化合物（Ｂ）。 ３、２官能性配位子化合物（１）とアシアロ糖蛋白質受
   容体指向性化合物（２）を化学結合させて成る高分子化
   合物（Ａ）を含む放射性医薬品調製用組成物（Ｃ）。 ４、２官能性配位子化合物（１）とアシアロ糖蛋白質受
   容体指向性化合物（２）を化学結合させて成る高分子化
   合物（Ａ）に放射性金属元素（３）をキレート結合させ
   て成る放射性金属元素結合高分子化合物（Ｂ）を含む放
   射性医薬品（Ｄ）。