JPH0117672B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、かわらたけ属、まつおおじ属、ひら
たけ属、えのきたけ属等の担子菌の培養方法に関
する。 近年、医薬品や食用子実体生産の目的で担子菌
類の人工培養が行なわれており、担子菌の培養に
関しても多くの研究がなされているが、いずれの
場合も培養には比較的長期間の日数を要し短時日
に多量の収量が得られない問題があつた。 本発明者等は、担子菌の収量を短時日であげる
ために各種の培地についての研究を行つた結果、
蔗糖の原糖を製造する際等に生じる廃糖蜜を製造
する際に副生する精糖蜜に燐酸塩等を加えたもの
に少量の尿素を加えて加熱した培地を使用すると
担子菌の収量を飛躍的に上げうる事を見出して本
発明を完成した。 即ち、本発明の担子菌の培養方法は、廃糖蜜、
無機塩類及び上記廃糖蜜中の糖分１グラウ当たり
１〜５mgの尿素を含む廃糖蜜培地を、加熱滅菌し
て用いる事を特徴とするものである。 本発明に係る培地の糖の濃度は、通常菌糸体の
成長しやすい３〜15％（重量％）とするが、流加
式培養法による場合は、濃厚な状態で培養槽中に
添加せられ、培養槽中では菌糸生長の闘値以上の
糖濃度で培養が行われる故、糖濃度については限
定されない。尿素の廃糖蜜中の全糖糖分に対する
量は、糖分（全糖）１ｇに対して１mg以上である
事が必要で、１mg未満では窒素源としての尿素が
不足して本発明の効果を得る事が出来ない。 尿素添加量の上限については特に限定の必要は
ないが、尿素量が全糖１ｇに対し１mg以上では担
子菌の菌体収量は尿素添加量に対し比例的に増加
するが、全糖１ｇに対し尿素の量が20mgを超える
と菌糸体の収量はほぼ一定となり、それ以上の尿
素を加えても不経済となるだけであまり意味がな
い。従つて多くの場合全糖１ｇ当り20〜50mg程度
で十分である。 次に本発明に係る培地の製法例を示す。 廃糖蜜40重量部に水60重量部を加え100℃に30
分間蒸煮した後放冷し、廃糖蜜中の不溶成分を擬
集させ、これを珪藻土等を用いて過し清澄な廃
糖蜜液を得る。過廃糖蜜液はその一部をとり、
レーンエーノン法やソモギ法の如き糖分分析法を
用いてその全糖を分析する。そして、廃糖蜜溶液
を５％〜15％の濃度に稀釈して培地を作る。この
際に次の無機塩類を次の割合で培地に加える。即
ち、培地１に対し（廃糖蜜中の糖30〜150ｇ）、
燐酸１カリ1.0ｇ、結晶硫酸マグネシウム（７水
塩）0.5ｇ及び結晶塩化カルシウム0.5ｇを加え、
水は水道水を用いる。この培地に対し尿素を、廃
糖蜜中の糖分１グラム当たり１〜50mgとなるよう
に糖濃度に応じて30〜150mg以上、好ましくは0.5
ｇ〜6.0ｇを加え、PH5.0に調整して液体培地を得
る。 このようにして得られた液体培地に寒天15〜25
ｇを添加して固型倍地となすことができる。 本発明の培養方法には液体培地又は固型培地の
いずれも用いることができる。 本発明は、上記製法例の如くして得られる培地
を常法、たとえば加圧下100℃以上、好ましくは
120℃程度で20分程度加熱滅菌した後、これに担
子菌を接種して培養を行うものである。 本発明では培地の加熱滅菌に際し廃糖蜜と尿素
が共存する事が必要で、廃糖蜜と尿素を別々に殺
菌して培地として混合して用いたのでは効果が少
い。この事は廃糖蜜中の何等かの成分と尿素が加
熱により反応して担子菌の成長を促進する何等か
の物質を生成している事を示唆するものである。 かくして得られた本発明に係る培地を用いて担
子菌の培養を行なえば、その菌体収量は、従来公
知のグルコーズ・イーストエキス・ポリペプトン
培地（吉田培地：醗酵協会誌Vol24、No.７、239
〜304）、モルトエキストラクト培地、コーンステ
イーブリカー培地、グルコーズ・イーストエキス
培地（特公昭55−32355号）、ペツフアー培地、マ
イヤーズ培地に比較して1.5倍から５倍にも達す
る。 以下実施例をあげて本発明を説明する。 実施例 １ フイリピン産の原糖由来の廃糖蜜400重量部に
水600重量部を加え95℃に30分間加熱後冷却し、
珪藻土により過を行う。過廃糖蜜液の全糖を
ソモギ法により蔗糖として測定し次の組成の培地
を作成する。 廃糖蜜液（培地）中の全糖（糖分） 50ｇ／ KH₂PO₄ １ｇ／ MgSO₄7H₂O 0.5ｇ／ CaCl₂2H₂O 0.5ｇ／ 尿 素 1.5ｇ／ この培地を500mlの振蕩フラスコ８個にそれぞ
れ100mlずつ分注し、120℃で20分間滅菌する。こ
れらの本発明に係る培地に、別に試験管中で吉田
培地10mlを用いて培養したしいたけ、ひらたけ、
しろきくらげ及びえのきたけの４種の担子菌の菌
糸を各種それぞれフラスコ２個宛接種し、各種一
つずつを25℃で８日間及び他の一つずつを25℃で
14日間振盪培養した。培養終了後、菌糸体収量を
105℃による乾燥重量で求めた。 比較例 １ 比較例として、従来から担子菌の培養に適する
とされている以下に示す組成の吉田培地（以下、
GPY培地と略記する）を作り、実施例１と同様
に500mlの振盪フラスコ８個に、このGPY培地を
100ml宛分注し、実施例１で用いた４種の担子菌
を同様に接種し、実施例１と同時に同一条件で培
養した。 グルコーズ 50ｇ／ ポリペプトン 2.5ｇ／ イーストエキス 2.5ｇ／ KH₂PO₄ 1.0ｇ／ MgSO₄結晶 0.5ｇ／ CaCl₂結晶 0.5ｇ／ 微量塩混液 20ml／ PH 5.0 実施例１及び比較例１の結果を第一表に表示す
る。

【表】 実施例 ２ 実施例１と同様に調整した培地100mlを300c.c.の
三角フラスコに入れ同様に滅菌後、この本発明に
係る培地に、別にGPY倍地10mlに培養したかわ
らたけを接種し、25℃で28日間静置培養した。培
地終了後、菌体を分離し乾燥重量を求めた。 比較例 ２ 比較例１と同様のGPY培地及びGPY培地のポ
リペプトン2.5ｇ／に換えてイーストエキス５
ｇ／を加えた点で異るGY培地を作り、実施例
２と同様にかわらたけを接種し、25℃に28日間静
置培養を行なつた。培養終了後、菌体を分離し乾
燥重量を求めた。 実施例２及び比較例２の結果を第２表に表示す
る。

【表】 実施例 ３ 実施例１と同様に作成した本発明に係る培地に
しいたけを同様に接種し、実施例１の条件で25℃
に14日間振盪培養した。 比較例 ３ 尿素150mgを最初から培地中には加えず10mlの
水に溶解しておき、廃糖蜜培地とは別に滅菌して
から担子菌の接種時廃糖蜜培地に加える以外は実
施例３と同様に作成した培地にしいたけを同様に
接種し、実施例３と同時に同一条件で培養した。 実施例３及び比較例３の結果を第３表に示す。

【表】 実施例 ４ 尿素量が培地100ml中それぞれ０ml、５mg、10
mg、20mg、50mg、100mg、200mg、500mgである以
外は実施例１と同様である培地100ml（全糖５ｇ
含有）を500mlの振盪フラスコにそれぞれ注入し、
実施例１と同様に滅菌する。これらにしいたけを
実施例１と同様に接種し、25℃に14日間振盪培養
を行つた。菌体収量は第４表に示す通りである。

【表】 実施例 ５ 実施例１と同様に調整した廃糖蜜液から全糖濃
度10％、尿素0.17％、KH₂PO₄1％、MgSO₄・
7H₂O0.5％、CaCl₂・2H₂O0.5％の培地を作りPH
５に調整する、この培地６を12容のジヤーフ
アーメンターに仕込み常法により120℃で30分間
の滅菌を行う。これに実施例１と同様の方法で振
盪培養したしいたけ600mlを接種し、25℃、PH５、
通気毎分５、回転数800rpm／minで培養を行
う。14日間培養後、菌体を過し、真空乾燥を行
つて乾燥菌体を得る。 比較例 ５ GPY培地６を作り、実施例１と同一のジヤ
ーフアーメンターで、比較例１と同様な方法で
GPY培地で振盪培養したしいたけ600mlを接種
し、実施例５と同様に28日間培養し菌体を得る。 実施例５と比較例５の結果を第５表に示す。

【表】 実施例 ６ 糖蜜源として大日本製糖製日の出蜜（国産の精
製糖由来の廃糖蜜）を用いることが異るだけで他
は実史例１と同一の方法により作つた、振盪フラ
スコ中の本発明に係る培地100mlに、しいたけ、
ひらたけ、えのきたけを実施例１と同様に接種
し、25℃で12日間振盪培養した。培養終了後、菌
体重量を105℃による乾燥重量で求めた。 比較例 ６ 培地としてGY培地を用い、他は実施例６と全
く同様に操作した。 実施例６及び比較例６の結果を第６表に表示す
る。

【表】 以上、実施例及び比較例により本発明の効果が
立証される。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 廃糖蜜、無機塩類及び上記廃糖蜜中の全糖１
   グラム当たり１〜50mgの尿素を含む廃糖蜜培地
   を、加熱殺菌して用いる事を特徴とする担子菌の
   培養方法。