JPH01191057A - 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法 - Google Patents
血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
(産業上の利用分野)
本発明は、血液試料中の白血球およびヘモグロビンを測
定するための試薬に関するものである。
定するための試薬に関するものである。
(従来の技術)
血液試料中の白血球数およびヘモグロビンを測定するこ
とは、白血病や貧血症等の臨床診断にとって極めて重要
である。白血球のうち好酸球な測定することはアレルギ
ー疾患の診断にとって重要である。
とは、白血病や貧血症等の臨床診断にとって極めて重要
である。白血球のうち好酸球な測定することはアレルギ
ー疾患の診断にとって重要である。
白血球数の測定においては、顕微鏡銭察による視算法が
基準の方法になっている。しかし、視算法においては、
特に好酸球の測定の場合、血液を希釈液(赤血球を溶血
させ、好酸球顆粒のみを染める酸性色°素を含む液であ
り、ヒンケルマン(Hlnkelman)液、ランドル
フ(Randolh)液などがある)で希釈し、計算板
上の好酸球を一個一個数える必要がある。そのため、非
常に手間と時間が必要である。
基準の方法になっている。しかし、視算法においては、
特に好酸球の測定の場合、血液を希釈液(赤血球を溶血
させ、好酸球顆粒のみを染める酸性色°素を含む液であ
り、ヒンケルマン(Hlnkelman)液、ランドル
フ(Randolh)液などがある)で希釈し、計算板
上の好酸球を一個一個数える必要がある。そのため、非
常に手間と時間が必要である。
ところで、血液試料中の白血球数の測定においては、自
動血液分析装置による方法も広(行われている。自動血
液分析装置による白血球数の測定は、赤血球溶解剤を添
加することにより血液試料中の赤血球を溶解させ、主と
して白血球のみが残った白血球測定用試料を炸裂するこ
とによって行われる。白血球測定用試料は、自動血液分
析装置内の検出部に設けられた細い通路または細孔を通
過させられる。このとき、−個一個の白血球に対応して
検出部で発生される電気的または光学的信号を検出する
ことにより白血球数がカウント(計数)される。
動血液分析装置による方法も広(行われている。自動血
液分析装置による白血球数の測定は、赤血球溶解剤を添
加することにより血液試料中の赤血球を溶解させ、主と
して白血球のみが残った白血球測定用試料を炸裂するこ
とによって行われる。白血球測定用試料は、自動血液分
析装置内の検出部に設けられた細い通路または細孔を通
過させられる。このとき、−個一個の白血球に対応して
検出部で発生される電気的または光学的信号を検出する
ことにより白血球数がカウント(計数)される。
また、近年では、得られる信号の強度の差によって白血
球をさらに顆粒球、単球、リンパ球などのクラスに分類
し、カウントする装置も実現されている。さらに、顆粒
球を好中球、好酸球、好塩基球に分類して、計数する装
置も実用化されている。この装置を用いれば、上記の視
算法よりも遥かに簡便に好酸球を測定することができる
。
球をさらに顆粒球、単球、リンパ球などのクラスに分類
し、カウントする装置も実現されている。さらに、顆粒
球を好中球、好酸球、好塩基球に分類して、計数する装
置も実用化されている。この装置を用いれば、上記の視
算法よりも遥かに簡便に好酸球を測定することができる
。
一方、ヘモグロビンの測定においては、血液中のヘモグ
ロビンを、フェリシアン化カリウムおよびシアンを含有
する溶解試薬の作用によりシアンメトヘモグロビン()
1tCN)に転化させ、!定波長の吸光度を測定する方
法(シアンメトヘモグロビン法)が−収約に行われてい
る。自動血液分析装置においても、上記白血球測定用試
料がヘモグロビン測定用試料としても、そのまま利用で
きることによりシアンメトヘモグロビン法または、それ
に準じた方法が採用されている。
ロビンを、フェリシアン化カリウムおよびシアンを含有
する溶解試薬の作用によりシアンメトヘモグロビン()
1tCN)に転化させ、!定波長の吸光度を測定する方
法(シアンメトヘモグロビン法)が−収約に行われてい
る。自動血液分析装置においても、上記白血球測定用試
料がヘモグロビン測定用試料としても、そのまま利用で
きることによりシアンメトヘモグロビン法または、それ
に準じた方法が採用されている。
ところが、シアンメトヘモグロビン法においては毒物で
あるシアンを用いているため、試薬の取扱に危険が伴う
。また、測定後の廃液は1次亜塩素酸ナトリウムなどを
用いてシアンを分解した後に廃棄する必要があり、廃液
処理に煩わしさがある。
あるシアンを用いているため、試薬の取扱に危険が伴う
。また、測定後の廃液は1次亜塩素酸ナトリウムなどを
用いてシアンを分解した後に廃棄する必要があり、廃液
処理に煩わしさがある。
そのため、血液中のヘモグロビンなオキシヘモグロビン
(HbO2)に転化させ1%定波長の吸光度を測定する
方法(オキシヘモグロビン法)も行われるようになって
きている。オキシヘモグロビン法においては、シアンを
使用しないため、試薬の取扱に危険もなく、廃液処理に
煩わしさもない。
(HbO2)に転化させ1%定波長の吸光度を測定する
方法(オキシヘモグロビン法)も行われるようになって
きている。オキシヘモグロビン法においては、シアンを
使用しないため、試薬の取扱に危険もなく、廃液処理に
煩わしさもない。
(発明が解決しようとするジ1動
ところが−従来のオキシヘモグロビン法においては、溶
解試薬の作用により赤血球を溶血するのみならず白血球
をも極めて縮小化する。これは。
解試薬の作用により赤血球を溶血するのみならず白血球
をも極めて縮小化する。これは。
吸光度を測定する上では、白血球による散乱光の影響を
受けなくなるので好ましいが、同試薬を用いて白血球を
測定すること自体は不可能になる。
受けなくなるので好ましいが、同試薬を用いて白血球を
測定すること自体は不可能になる。
このため、オキシヘモグロビン法を採用した自動血液分
析装置においては、ヘモグロビン測定用試料および白血
球測定用試料を別々に作製し、それぞれヘモグロビン測
定用検出部および白血球測定用検出部において測定する
ようにしていた。
析装置においては、ヘモグロビン測定用試料および白血
球測定用試料を別々に作製し、それぞれヘモグロビン測
定用検出部および白血球測定用検出部において測定する
ようにしていた。
しかし、検出部が別々に必要になる上に、測定用試料を
作製するための流体系も二系列必要となる等のため、!
!e&が複雑となりコスト高になる。
作製するための流体系も二系列必要となる等のため、!
!e&が複雑となりコスト高になる。
なお、自動血液分析装置が好酸球測定用の検出部を持つ
場合には、同検出部でオキシヘモグロビン法によりヘモ
グロビンの測定が可能になれば、ヘモグロビン測定用の
検出部を別個に設ける必要が無くなり、装置構成が簡単
化できる。白血球数は、従来通り白血球測定用検出部で
測定すれば良い。
場合には、同検出部でオキシヘモグロビン法によりヘモ
グロビンの測定が可能になれば、ヘモグロビン測定用の
検出部を別個に設ける必要が無くなり、装置構成が簡単
化できる。白血球数は、従来通り白血球測定用検出部で
測定すれば良い。
ところが、白血球を分類して好酸球等を分類するための
検出部を備える自動血液分析装置においても、従来は、
白血球分類用試料(もしくは好酸球測定用試料)を用い
てヘモグロビンを測定することは不可能であった。
検出部を備える自動血液分析装置においても、従来は、
白血球分類用試料(もしくは好酸球測定用試料)を用い
てヘモグロビンを測定することは不可能であった。
そこで、オキシへそグロビン法を採用しながらも、同測
定用試料において白血球もしくはその中の好酸球も同時
に測定できるようにするための試薬が求められていた。
定用試料において白血球もしくはその中の好酸球も同時
に測定できるようにするための試薬が求められていた。
さらに、同試薬の使用によって白血球が他の顆粒球、単
球、リンパ球に分類され、計数できるようになれば、さ
らに有用である。
球、リンパ球に分類され、計数できるようになれば、さ
らに有用である。
また、この試薬をリンノゼ球と他の白血球とにあるいは
リンパ球および単球と他の白血球とに分類するのに使用
する場合は、nは10〜30の整数であり、Ro は炭
素数10〜20のアルキル、アルケニルまたはアルキニ
ルでアル。
リンパ球および単球と他の白血球とに分類するのに使用
する場合は、nは10〜30の整数であり、Ro は炭
素数10〜20のアルキル、アルケニルまたはアルキニ
ルでアル。
(話題を解決するための手段)
上記許題を克服するために1本発明は以下の成分(a)
および(b)を含有する水溶性混合物である血液中の白
血球数およびヘモグロビンの測定用試薬を提供する:(
a) 一般式 %式%) (ここで、R□ は炭素数6〜24のアルキルまたはア
ルケニルまたはアルキニル基;R2は整数) で表されるポリオキシエチレン系ノニオン界面活性剤お
よび (bl 水溶液の…を3〜11にする緩衝剤この試薬
を白血球のうち特に好酸球な測定するのに使用する場合
、緩衝剤の−は5〜11である。
および(b)を含有する水溶性混合物である血液中の白
血球数およびヘモグロビンの測定用試薬を提供する:(
a) 一般式 %式%) (ここで、R□ は炭素数6〜24のアルキルまたはア
ルケニルまたはアルキニル基;R2は整数) で表されるポリオキシエチレン系ノニオン界面活性剤お
よび (bl 水溶液の…を3〜11にする緩衝剤この試薬
を白血球のうち特に好酸球な測定するのに使用する場合
、緩衝剤の−は5〜11である。
(作用)
本発明の試薬を血液に添加すると、血液中の赤血球は瞬
時に溶血されヘモグロビンは、直ちにオキシヘモグロビ
ンに転化しヘモグロビンの測定が可能となる。また、赤
血球が溶血した後の赤血球ブーストや、血小板は自動血
液分析装置において白血球とは完全に識別できる程度ま
でに極小化される。
時に溶血されヘモグロビンは、直ちにオキシヘモグロビ
ンに転化しヘモグロビンの測定が可能となる。また、赤
血球が溶血した後の赤血球ブーストや、血小板は自動血
液分析装置において白血球とは完全に識別できる程度ま
でに極小化される。
一方、血液中の白血球は、上記試薬の添加後その大きさ
が徐々に縮小されるものの、所定時間中は自動血液分析
装置によって完全に検出できる程度の大きさに残ってい
る。したがって、その時間内に測定すれば、白血球数を
カウントすることが出来る。さらに、所定時間後には、
好酸球以外の白血球は全て裸核化きれ、好酸球のみが裸
核化されずに残るので自動血液分析装置によって好酸球
のみが完全に検出される。
が徐々に縮小されるものの、所定時間中は自動血液分析
装置によって完全に検出できる程度の大きさに残ってい
る。したがって、その時間内に測定すれば、白血球数を
カウントすることが出来る。さらに、所定時間後には、
好酸球以外の白血球は全て裸核化きれ、好酸球のみが裸
核化されずに残るので自動血液分析装置によって好酸球
のみが完全に検出される。
また、nが10〜30の整数であり、R1が炭素数10
〜20のアルキル、アルケニルまたはアルキニルである
本発明の試薬を添加して自動血液分析装置により分析し
た場合には、白血球がリンパ球と他の白血球とに、ある
いは、リンパ球と単球と他の白血球とに、検出信号の強
度差によって安定してクラス別けされる時間がある。そ
の時間内に測定を完了するようにすれば、白血球の分類
・計数が可能となる。
〜20のアルキル、アルケニルまたはアルキニルである
本発明の試薬を添加して自動血液分析装置により分析し
た場合には、白血球がリンパ球と他の白血球とに、ある
いは、リンパ球と単球と他の白血球とに、検出信号の強
度差によって安定してクラス別けされる時間がある。そ
の時間内に測定を完了するようにすれば、白血球の分類
・計数が可能となる。
なお1本発明の試薬により調製される試料の−が3〜1
1であれば、血液中の白血球数の測定および白血球の分
類・計数ならびにヘモグロビンの測定が可能であるが、
より良好に白血球を分類・計数するためには、pi(は
4〜9であることが好ましい。好酸球な測定するにはp
H5〜11である。
1であれば、血液中の白血球数の測定および白血球の分
類・計数ならびにヘモグロビンの測定が可能であるが、
より良好に白血球を分類・計数するためには、pi(は
4〜9であることが好ましい。好酸球な測定するにはp
H5〜11である。
(実施例)
本発明の試薬の一組成例およびその試薬による測定例を
下記実施例において示す。
下記実施例において示す。
実施例1
試薬組成
◎ポリエチレン系界面活性剤 0.490よ
、R35−0−(OH2CH20)□2−H◎緩衝剤 リン酸水素ナトリウム12水塩 0.28gNa
2HPO,−12H20 リン酸2水素カリウム 0.029K
H2PO。
、R35−0−(OH2CH20)□2−H◎緩衝剤 リン酸水素ナトリウム12水塩 0.28gNa
2HPO,−12H20 リン酸2水素カリウム 0.029K
H2PO。
◎浸透圧調整剤
塩化ナトリウム 0.37gaC
l ◎防腐剤 (2−ピリジルチオ−1−オキシド) 0.029ナ
トリウム ◎水 100.I
Ll上記組成の試薬を用いて血液を250倍に希釈し、
pH7,5、浸透圧160m05m、 液温26℃の
条件化で、試薬添加後13秒から測定を開始し、6秒間
白面球を測定した結果を第1図に示す。
l ◎防腐剤 (2−ピリジルチオ−1−オキシド) 0.029ナ
トリウム ◎水 100.I
Ll上記組成の試薬を用いて血液を250倍に希釈し、
pH7,5、浸透圧160m05m、 液温26℃の
条件化で、試薬添加後13秒から測定を開始し、6秒間
白面球を測定した結果を第1図に示す。
第1図に示す二次元分布図の横軸はDC法で測定したと
きの相対信号強度を表し、縦軸はRF法で測定したとき
の相対信号強度を表している。
きの相対信号強度を表し、縦軸はRF法で測定したとき
の相対信号強度を表している。
DC法とは1粒子がこれと導電率を異にする流体媒質中
に懸濁された試料を細い電流通路に通過させ1粒子と流
体媒質との導電率の相違に起因する電流の変化を検出す
る方法である。このDC法においては、検出される信号
の大きさは、はぼ粒子の体積に比例している。
に懸濁された試料を細い電流通路に通過させ1粒子と流
体媒質との導電率の相違に起因する電流の変化を検出す
る方法である。このDC法においては、検出される信号
の大きさは、はぼ粒子の体積に比例している。
一方、RF法とは1粒子がこれと訪電率を異にする流体
媒質中に@濁された試料を流体通路に通過させ1通路の
狭隘部分において通路を挟んで互いに近接し対向して設
けられた対をなす電極の間を粒子が通過する際に粒子と
流体媒質との酵電率の相違に起因する電極間の電気イン
ピーダンス変化を検出する方法である。このRF法にお
いては。
媒質中に@濁された試料を流体通路に通過させ1通路の
狭隘部分において通路を挟んで互いに近接し対向して設
けられた対をなす電極の間を粒子が通過する際に粒子と
流体媒質との酵電率の相違に起因する電極間の電気イン
ピーダンス変化を検出する方法である。このRF法にお
いては。
検出される信号の大きさは1粒子の大きさ情報に加えて
粒子の構造および粒子を構成する材料の性質による情報
をも反映している。
粒子の構造および粒子を構成する材料の性質による情報
をも反映している。
第1図中の各点は、上記DC法およびRF法により測定
したとき、それぞれのDC信号強度とRF信号強度を示
した各細胞に対応している。
したとき、それぞれのDC信号強度とRF信号強度を示
した各細胞に対応している。
第1図に示されるように、白血球はa、b、cの三つの
集団に分画される。aは顆粒球、bは単球、Cはリンパ
球の集団である。各集団がそれぞれ顆粒球、単球、リン
パ球であることは、それぞれの出血球種を分離した試料
を測定すること、および視算法との相関試験により確認
された。図中dで示される集団は赤血球のゴーストであ
る。また、顆粒球、単球、リンパ球の集団に含まれる細
胞数の総和は、従来の視算法によりカウントされた白血
球数と一致した。
集団に分画される。aは顆粒球、bは単球、Cはリンパ
球の集団である。各集団がそれぞれ顆粒球、単球、リン
パ球であることは、それぞれの出血球種を分離した試料
を測定すること、および視算法との相関試験により確認
された。図中dで示される集団は赤血球のゴーストであ
る。また、顆粒球、単球、リンパ球の集団に含まれる細
胞数の総和は、従来の視算法によりカウントされた白血
球数と一致した。
以上の結果より1本発明の試薬により血液中の白血球数
を測定できることおよび白血球中の顆粒球、単球、97
2球を分類・計数できることが示された。
を測定できることおよび白血球中の顆粒球、単球、97
2球を分類・計数できることが示された。
なお1本実施例では、DC法およびRF法と呼ばれる電
気的検出方法により測定したが、光学的検出方法により
測定することも可能である。また。
気的検出方法により測定したが、光学的検出方法により
測定することも可能である。また。
9779球数のみが知りたいときには、白血球を簡易的
にリンパ球とその他の白血球とに分類すれば良い。
にリンパ球とその他の白血球とに分類すれば良い。
次に、上記組成の試薬により上記白血球の測定を行った
試料と同一の試料の吸収曲線を測定した例を第2図に示
す。第2図の横軸は波長を、縦軸は吸光度を表す。吸収
曲線の極大を示す波長(541nm+ 576nm)
および極小を示す波長(510nml 560 nm
)は、三輪史部編:血液検査、臨床検査技術全書、第3
巻、46〜52頁。
試料と同一の試料の吸収曲線を測定した例を第2図に示
す。第2図の横軸は波長を、縦軸は吸光度を表す。吸収
曲線の極大を示す波長(541nm+ 576nm)
および極小を示す波長(510nml 560 nm
)は、三輪史部編:血液検査、臨床検査技術全書、第3
巻、46〜52頁。
1976年等の文献に記載されているオキシヘモグロビ
ンの吸収波長と一致する。したがって1本発明の試薬の
添加により、血液中のヘモグロビンはオキシヘモグロビ
ンに転化されていることが確認された。
ンの吸収波長と一致する。したがって1本発明の試薬の
添加により、血液中のヘモグロビンはオキシヘモグロビ
ンに転化されていることが確認された。
なお1本’jvIII列では試薬添加後13秒から白血
球の測定を開始したが、ヘモグロビンの測定は試薬添加
直後から可能である。シアンメトヘモグロビンでは転化
に3〜5分掛かることに比べると格段に短い時間で測定
が完了出来る。また、白血球を分類せずに白血球数のみ
を測定する場合には。
球の測定を開始したが、ヘモグロビンの測定は試薬添加
直後から可能である。シアンメトヘモグロビンでは転化
に3〜5分掛かることに比べると格段に短い時間で測定
が完了出来る。また、白血球を分類せずに白血球数のみ
を測定する場合には。
液温等の条件を適宜選べば、試薬添加後1秒目から白血
球の測定を開始できる。
球の測定を開始できる。
実施例2
試薬組成
◎ポリエチレン系界面活性剤
C□6H33−0−(OH20H20)14−H1,3
gC□8H35−0−(OH20H20)□3−HO,
17g◎緩衝剤 リン酸水素ナトリウム12水塩 4.0fNa2
HPO4−12H20 ◎浸透圧調整剤 塩化ナトリウム 0.4gNa(
fL ◎防腐剤 (2−ピリジルチオ−1−オキシド) 0.029ナ
トリウム ◎水 100−上
記組成の試薬を用いて血液を250倍に希釈し、p14
7.5.i透圧160 m05m 、液温40℃の条件
子で、試薬添加後50秒から測定を開始し。
gC□8H35−0−(OH20H20)□3−HO,
17g◎緩衝剤 リン酸水素ナトリウム12水塩 4.0fNa2
HPO4−12H20 ◎浸透圧調整剤 塩化ナトリウム 0.4gNa(
fL ◎防腐剤 (2−ピリジルチオ−1−オキシド) 0.029ナ
トリウム ◎水 100−上
記組成の試薬を用いて血液を250倍に希釈し、p14
7.5.i透圧160 m05m 、液温40℃の条件
子で、試薬添加後50秒から測定を開始し。
6秒間好酸球を測定した結果を第3図に示す。
第3図の横軸は前述のDC法で測定したときの相対信号
強度を表している。縦軸は各DC信号強度を有する細胞
の度数を表している。
強度を表している。縦軸は各DC信号強度を有する細胞
の度数を表している。
第3図中にAで示される点線は、好酸球と他の細胞とを
分離するための閾値レベルを表すものである。点線Aの
右方の集団は好酸球であり、この集団に含まれる細胞数
を数えることにより、好酸球数が求められる。点線Aの
左方の集団は赤血球のゴーストおよび好酸球以外の白血
球が裸核化されたものである。
分離するための閾値レベルを表すものである。点線Aの
右方の集団は好酸球であり、この集団に含まれる細胞数
を数えることにより、好酸球数が求められる。点線Aの
左方の集団は赤血球のゴーストおよび好酸球以外の白血
球が裸核化されたものである。
第4図は、上記の様にして求めた好酸球数と。
従来法である視界性により求めた好酸球数との相関を示
した図である。第4図の横軸(X軸)は。
した図である。第4図の横軸(X軸)は。
視界性により一検体あたり500個の細胞を計数し、そ
のうち好酸球であると識別された細胞の比率(%)を表
している。縦軸(Y軸)は1本発明の試薬を用いて上記
の様に自動血液分析装置によって好酸球数を計数し、自
動血液分析装置による公知の方法で計数された白血球数
に対する上記好酸球数の比率(チ虚求めたものを表して
いる。測定検体数は105である。相関計数は0.94
53、回帰直線はY−0,9149X1.0651であ
った。
のうち好酸球であると識別された細胞の比率(%)を表
している。縦軸(Y軸)は1本発明の試薬を用いて上記
の様に自動血液分析装置によって好酸球数を計数し、自
動血液分析装置による公知の方法で計数された白血球数
に対する上記好酸球数の比率(チ虚求めたものを表して
いる。測定検体数は105である。相関計数は0.94
53、回帰直線はY−0,9149X1.0651であ
った。
図中の直線は1回帰直線を表す。上記のように。
従来法との相関は良好であり1本発明の試薬により好酸
球が測定できることが確認された。
球が測定できることが確認された。
なお、本実施例では、DC法と呼ばれる電気的検出方法
により測定したが、その他の電気的検出方法あるいは光
学的検出方法により測定することも可能である。
により測定したが、その他の電気的検出方法あるいは光
学的検出方法により測定することも可能である。
次に、上記組成の試薬により上記好酸球の測定を行った
試料と同一の試料の吸収曲線を測定した例も第2図に示
すとおりである。
試料と同一の試料の吸収曲線を測定した例も第2図に示
すとおりである。
なお1本実施例では試薬添加後50秒から好酸球の測定
を開始したが、ヘモグロビンの測定は試薬添加直後から
可能である。シアンメトヘモグロビンでは転化に3〜5
分掛かることに比べると格段に短い時間で測定が完了出
来る。また、測定用試料の−を高くするほど、より速く
好酸球以外の白血球な裸核化させることができ、好酸球
測定開始までの時間もさらに短縮化できる。なお、好酸
球測定開始が可能となる時間は液温によっても変化する
。
を開始したが、ヘモグロビンの測定は試薬添加直後から
可能である。シアンメトヘモグロビンでは転化に3〜5
分掛かることに比べると格段に短い時間で測定が完了出
来る。また、測定用試料の−を高くするほど、より速く
好酸球以外の白血球な裸核化させることができ、好酸球
測定開始までの時間もさらに短縮化できる。なお、好酸
球測定開始が可能となる時間は液温によっても変化する
。
(発明の効果)
本発明の試薬によって、血液中の白血球数およびヘモグ
ロビンを同一測定用試料によって同時に測定することが
可能になった。しかも、ヘモグロビンはオキシヘモグロ
ビン法により測定されるので、試薬の取扱や測定後の廃
液の処理に危険や煩わしさかない。
ロビンを同一測定用試料によって同時に測定することが
可能になった。しかも、ヘモグロビンはオキシヘモグロ
ビン法により測定されるので、試薬の取扱や測定後の廃
液の処理に危険や煩わしさかない。
また1本発明の試薬によって、血液中の白血球の分類・
計数およびオキシヘモグロビン法によるヘモグロビンの
測定を同一測定用試料によって同時に行うことが可能に
なった。
計数およびオキシヘモグロビン法によるヘモグロビンの
測定を同一測定用試料によって同時に行うことが可能に
なった。
さらに1本発明の試薬によれば、試薬添加後直ちにヘモ
グロビンの測定が可能となり、添加後数秒ないし士数秒
で白血球の測定が可能となるので。
グロビンの測定が可能となり、添加後数秒ないし士数秒
で白血球の測定が可能となるので。
自動血液分析装置による測定の高速化に貢献できる。
【図面の簡単な説明】
第1図は、実施例における白血球の分類結果を示す二次
元分布図である。 第2図は、実m例におけるヘモグロビンの吸収曲線を示
す図である。 なお、第1図における符号aないしbは次の意味を有す
る。 a:顆粒球 b:単球 C:リンノ(球 d:赤血球ゴースト 第3図は、実施例における好酸球の測定結果を示す分布
図である。図中Aは好酸球と他の細胞とt分離するため
の問直しはルを示す点線である。 第4図は、実施例における好酸球の測定結果と従来法(
視界性)による測定結果との相関を示す図である。 (外4名) 第1図 第3図 Ev東外勇白血兼 手続補正書 1.事件の表示 昭和65年特許願第 16735 号2、発明の名称 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および
方法 6、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 名 称 東亜医用電子株式会社 4、代理人 5、補正の対象 明細書の〔特許請求の範囲〕と〔発明の詳細な説明〕の
欄(別紙) (1)特許請求の範囲を次のように訂正する。 ro) (a) 一般式 %式% (ここで、R1は炭素数6〜24のアルキルまたはアル
ケニルまたはアルF^基;&は−〇−1で表されるポリ
オキシエチレン系ノニオン界面活性剤および (b)水溶液のpHを3〜11にする緩衝剤を含有する
水溶性混合物である血液中の白血球数およびヘモグロビ
ンの測定用試薬。 (2)水溶液のpHを5〜11にする緩衝剤を含有する
特許請求の範囲第1項の試薬。 (3)nが10〜30の整数であり、R1が炭素数10
〜20のアルキルまたはアルケニルまたはアルキニル基
である特許請求の範囲第1項の試薬。」(2)明細書を
次のように訂正する。 頁 行 誤 正616
〜末 また、・・・・・・である。 (削除)(6
)明細書7頁下から5行目と下から4行目との間に下記
を挿入する。 「また、この試薬をリンパ球と他の白血球とにあるいは
11ンパ球および単球と他の白血球とに分類するのに使
用する場合は、nは10〜30の整数であり、R1は炭
素数10〜20のアルキル、アルケニルまたはアルキニ
ルである。」 以 上
元分布図である。 第2図は、実m例におけるヘモグロビンの吸収曲線を示
す図である。 なお、第1図における符号aないしbは次の意味を有す
る。 a:顆粒球 b:単球 C:リンノ(球 d:赤血球ゴースト 第3図は、実施例における好酸球の測定結果を示す分布
図である。図中Aは好酸球と他の細胞とt分離するため
の問直しはルを示す点線である。 第4図は、実施例における好酸球の測定結果と従来法(
視界性)による測定結果との相関を示す図である。 (外4名) 第1図 第3図 Ev東外勇白血兼 手続補正書 1.事件の表示 昭和65年特許願第 16735 号2、発明の名称 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および
方法 6、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 名 称 東亜医用電子株式会社 4、代理人 5、補正の対象 明細書の〔特許請求の範囲〕と〔発明の詳細な説明〕の
欄(別紙) (1)特許請求の範囲を次のように訂正する。 ro) (a) 一般式 %式% (ここで、R1は炭素数6〜24のアルキルまたはアル
ケニルまたはアルF^基;&は−〇−1で表されるポリ
オキシエチレン系ノニオン界面活性剤および (b)水溶液のpHを3〜11にする緩衝剤を含有する
水溶性混合物である血液中の白血球数およびヘモグロビ
ンの測定用試薬。 (2)水溶液のpHを5〜11にする緩衝剤を含有する
特許請求の範囲第1項の試薬。 (3)nが10〜30の整数であり、R1が炭素数10
〜20のアルキルまたはアルケニルまたはアルキニル基
である特許請求の範囲第1項の試薬。」(2)明細書を
次のように訂正する。 頁 行 誤 正616
〜末 また、・・・・・・である。 (削除)(6
)明細書7頁下から5行目と下から4行目との間に下記
を挿入する。 「また、この試薬をリンパ球と他の白血球とにあるいは
11ンパ球および単球と他の白血球とに分類するのに使
用する場合は、nは10〜30の整数であり、R1は炭
素数10〜20のアルキル、アルケニルまたはアルキニ
ルである。」 以 上
Claims (3)
- (1)(a)一般式 R_1−R_2−(CH_2CH_2O)_n−H(こ
こで、R_1は炭素数6〜24のアルキルまたはアルケ
ニルまたはアルキニル基;R_2は−O−、▲数式、化
学式、表等があります▼または−COO−;nは6〜5
0の整数)で表されるポリオキシエチレン系ノニオン界
面活性剤および (b)水溶液のpHを3〜11にする緩衝剤を含有する
水溶性混合物である血液中の白血球数およびヘモグロビ
ンの測定用試薬。 - (2)水溶液のpHを5〜11にする緩衝剤を含有する
特許請求の範囲第1項の試薬。 - (3)nが10〜30の整数であり、R_1が炭素数1
0〜20のアルキルまたはアルケニルまたはアルキニル
基である特許請求の範囲第1項の試薬。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63016735A JP2619900B2 (ja) | 1988-01-27 | 1988-01-27 | 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法 |
| US07/266,860 US5116539A (en) | 1988-01-27 | 1988-11-03 | Reagent and method for measuring leukocytes and hemoglobin in blood |
| DE3853671T DE3853671T2 (de) | 1988-01-27 | 1988-11-04 | Reagens und Verfahren zur Messung von Leukozyten und Hämoglobin im Blut. |
| EP88118403A EP0325710B1 (en) | 1988-01-27 | 1988-11-04 | Reagent and method for measuring leukocytes and hemoglobin in blood |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63016735A JP2619900B2 (ja) | 1988-01-27 | 1988-01-27 | 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01191057A true JPH01191057A (ja) | 1989-08-01 |
| JP2619900B2 JP2619900B2 (ja) | 1997-06-11 |
Family
ID=11924526
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63016735A Expired - Lifetime JP2619900B2 (ja) | 1988-01-27 | 1988-01-27 | 血液中の白血球およびヘモグロビンの測定用試薬および方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5116539A (ja) |
| EP (1) | EP0325710B1 (ja) |
| JP (1) | JP2619900B2 (ja) |
| DE (1) | DE3853671T2 (ja) |
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| US5242832A (en) * | 1990-03-01 | 1993-09-07 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Reagent for measurement of leukocytes and hemoglobin in blood |
| JP2565844B2 (ja) * | 1992-02-07 | 1996-12-18 | アボツト・ラボラトリーズ | 細胞溶解処理条件下で異種細胞集団を正確に計数し,感受性に関する格付けを行う方法 |
| EP0749583B1 (en) * | 1994-03-11 | 2002-08-28 | Abbott Laboratories | Cyanide-free reagent and method for the determination of hemoglobin |
| JP3467310B2 (ja) * | 1994-04-21 | 2003-11-17 | シスメックス株式会社 | 白血球分析用試薬及び白血球の分類方法 |
| US5610076A (en) * | 1994-04-29 | 1997-03-11 | Alteon Inc. | Method for detecting hemoglobin advanced glycosylation endproducts |
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| JP3324050B2 (ja) * | 1994-10-31 | 2002-09-17 | 日本光電工業株式会社 | 白血球分類用試薬および白血球分類方法 |
| US5691204A (en) * | 1995-04-21 | 1997-11-25 | Abbott Laboratories | Compositions and methods for the rapid analysis of reticulocytes |
| US5639630A (en) * | 1995-05-16 | 1997-06-17 | Bayer Corporation | Method and reagent composition for performing leukocyte differential counts on fresh and aged whole blood samples, based on intrinsic peroxidase activity of leukocytes |
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