JPH01193269A - 発酵培地中より単離された駆虫剤として活性のあるパラハークアミド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 パラハークアミド及びジヒドロパラハークアミドは既知
化合物であり、Ｙａｍａｚａｋｉ等によるＴｅｔｒａｈ
ｅｄｒｏｎ　　Ｌｅｔｔｅｒｓ、　２２〜１３５　１３
６（１９８１）に発表されている。パラハークアミドは
！ム・パラハークエイ　（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍａｒ
ａｈｅｒ　ｕｅｉ　）のカビ代謝産物であると記されて
いる。ジヒドロパラハークアミドは、パラハークアミド
の触媒水素添加により製造される。この化合物の用途に
ついての示唆はない。

本発明は、効果的な駆虫剤であるパラハークアミドに関
連する新規化合物、及び新しく単離された菌株芝土２ユ
立人・天土酉之ヱ之（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃｈａｒ
ｌｅｓｉｉ　）から得られるそれらの化合物の製造に関
連する。すなわち本発明の目的は、これらの化合物及び
その用途を記述することにある。本発明の別の目的は、
活性成分としてこれらの化合物を含有する組成物を記述
することにある。更に新規微生物、並びにそれから得ら
れる新規化合物の製造及び単離を記述する事も本発明の
目的である。

その他の目的については、以下の記述から明らかになろ
う。

パラハークアミドは次の構造を有する。

Ｈρ ■ ジヒドロパラハークアミドは以下の構造を有する。

−〇 パラハークアミドは、ペニシリウム・パラハークエイ　
（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕ＋＋＋　　　ａｒａｈｅｒ　ｕ
ｅｉ　）のカビ代謝産物として、標準的な発酵培養及び
単離法により単離された。パラハークアミドの分析及び
構造特性は、Ｙａｍａｚａｋｉ等によるＴｅｔｒａｈｅ
ｄｒｏｎ　　Ｌｅｔｔｅｒｓ　。

■、１３５−１３６　　（１９８１）に詳細に記載され
ている。

ジヒドロパラハークアミドは、パラハークアミドのパラ
ジウム−炭素を用いた触媒水素添加により製造する。ジ
ヒドロパラハークアミドの分析特性もＹａａｅａｚａｋ
ｉ等により報告されている。

本発明の新規化合物は、構造的にパラハークアミドに関
連しており、ペニシリウム・チャルレッ’ｙ　（Ｐｅｎ
ｉｃｉｌｌｉｕｍ　　ｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）からパラ
ハークアミドと共に単離される。

＜　Ｑ　’ｙ　”Ｆ　Ｌ　・チ　ルレーシ（ｒ’ｅｎｉ
ｃｉｌｌｉｕｍｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）、なる新規菌株
は、Ｍｅｒｃｋ　＆　Ｃｏ、の培養保存菌ＭＦ５１２３
として同定される。ＭＦ５１２３の形態的及び培養的特
性は以下のとおりである。

ＭＦ５１２３　の　ノ　旨 分生子柄は単純であるか、あるいは種々に分枝しており
、各分枝は渦巻状箒状体を持ち、分生子鎖は細長い緻密
な管を形成している。分生子柄壁は滑らか、もしくはほ
ぼ滑らかである。分生子はほとんど球状に近く、（１，
８ｍ〜２．４ｍ）わずかに粗雑である。

コロニーは白色、ビロード状で隆起しており、次第にク
リーム色の部位を持つ灰緑色となる。反対側は黄褐色及
びクリーム色である。培養が進むにつれ、好気的増殖で
は灰褐色〜褐色となり、黄褐色可溶性色素が培地中に拡
散する。

ジャガイモ・デキストロース寒　立ｌ コロニーは白色で、次第に灰褐色の平坦な顆粒状となる
。反対側は灰褐色である。

サブロー（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ）　・マルトース悴１コ
ロニーは白色で、次第に黄褐色ベクトルを持つ茶緑色の
隆起したビロード状になる。反対側は暗褐色。褐色可溶
性色素が寒天培地中に拡散する。

イースト　　　モルト　　　寒　１立ｌコロニーは白色
で、次第に黄色部位を持つ灰緑色の隆起したビロード状
になる。反対側は暗褐色で、緑は褐色である。

トウモロコシ夾　量立ｌ コロニーは白色で、次第に灰緑色の平坦な顆粒状となる
。反対側は黄色がかっている。培養が進むと緑色がかっ
た褐色となる。

に、　Ｂ、　Ｒａｐｅｒ及びＣ，ＴｈｏｍによるＡ　Ｍ
ａｎｕａｌ　ｏｆｔｈｅ　Ｐｅｎ１ｃｉｌｌｉａ中の培
養の記載及び既知の培養菌との比較によれば、本培養菌
は既知の種である二仝ｊりＬ立躯、−チ　ルレ・シ（Ｐ
ｅｎｉｃｉｌｌｉｕａ＋ｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）の新し
い株である事が示される。

ＭＦ５１２３、二三之１立ム・チ　ルレーシ（Ｐｅｎｉ
ｃｉｌｌｉｕ＋＋＋　　ｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）の試料
はアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（Ａ
＋＋＋ｅｒｉｃａｎＴｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１
１ｅｃｔｉｏｎ）　（メリーランド州２０８５２、ロッ
クビル、パークローンドライブ、１２３０１）の永久保
存菌株として寄託された。本菌株は受託番号ＡＴＣＣ２
０８４１を与えられた。

上述では本発明の化合物の製造に用いる事のできるペニ
シリウム・±土ｙ上工之（ＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕＩｌｃ
ｈａｒｌｅｓｉｉ　）の菌株ＭＦ５１２３について説明
している。しかしながら、本発明はまた上述の微生物の
変異株をも包含する。例えば天然での選択により得られ
た変異株、又は紫外線照射の如き電離照射あるいはニト
ロソグアニジンの如き化学的変異誘発剤等の処理を含む
変異誘発により生産された変異株もまた本発明の範囲に
含まれる。

上述のペニシリウム・チャルレッシ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌ
ｉｕｍｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）菌株ＭＦ、５１２３およ
びその変異株より単離される本発明の化合物は以下の構
造を有する。

化合物■ 化合物■ 化合物Ｖ 化合物■ 化合物■ 上に示す化合物の物理特性および分析特性は以下のとお
りである（図１〜６は、それぞれ化合物■〜■のＣＤ、
（１！中における４００ＭＨ２のプロトン核磁気共鳴ス
ペクトルである）： 化合物■ マススペクトル−゛−：分子式ＣｔｑＨ３３Ｎ３０４（
計算値：　４６３．２４７１、測定値：　４６３．２４
８８）　、特性イオンはｍ／２４９１　（Ｍ”）、４０
４．１３３及び１３５に観測される。

’ＨＮＭＲスペクトル二図１参照 化合物■ マススペクトルデータ：分子式Ｃｚｓｌｌｚ、ＮＪ４（
計算値：　４７５．２４７１、測定値：　４７５．２４
７６）。特性イオンはｍ／２４９１　（Ｍ”）　、４１
６．１４５及び１４７に観測される。

’ＨＮＭＲスペクトル二図２参照 化合物■ マススペクトルデータ：分子式ＣｚｓＨｚＪｔＯｓ　（
計算値：　４９１．２４２０、測定値：　４９１．２４
３６）。特性イオンはｍ／２４９１　　（Ｍｌ　、４３
２．１６１及び１６３に観測される。

’ＨＮＭＲスペクトル：図３参照 化合物■ マススペクトル−゛−：分子式Ｃｚ！１ｂｓＮ、Ｏｎ　
（計算値：　４７７．２６２８、測定値：　４７７．２
６０２）。特性イオンはｍ／ｚ４７７　（Ｍ”）　、４
１８．１４７及び１４９に観測される。

’ＨＮＭＲスペク　ル二図４参；照 化合物■ マススペクトル−゛−：分子式ＣｚｓＨ＋５ＮｉＯｉ　
（計算値：　４６１．２６７Ｂ、測定値：　４６１．２
６６５）。特性イオンはｍ／２４９１　　（Ｍ”）、４
０２．１４７及び１４９に観測される。

’ＨＮＭＲスペク　ル二図５参照 化合物■ マススペクトルデータ：分子式Ｃｚ＊１Ｉ３ｓＮｓＯａ
　（計算値：　４７７．２６２Ｂ、測定値？　４７７．
２６１２）。特性イオンはｍ／ｚ４７７　（Ｍ”）　、
４１８．１６３及び１６５に観測される。

’ＨＮＭＲスペクトル二図６参照 本発明の新規化合物は、生産菌株ペニシリウム・チャル
レッシ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕａ＋　　ｃｈａｒｌｅｓ
ｉｉ　）　ＭＦ５１２３の攪拌液体培地又は固定した固
形培地中での好気的発酵により製造することができる。

栄養培地が液体培地の場合、パラバーｉアミドの製造工
程に用いるには、多くの抗生物質の製造に用いるのに適
しているような培地が適している。

このような栄養培地には、微生物により同化のできる炭
素及び窒素源、それに一般的に低レベルの無機塩が含ま
れる。加えて、発酵培地は、微生物の増殖及び目的化合
物の製造に必要な微量金属を含む事ができる。通常、こ
れらは栄養源として用いる事のできる炭素及び窒素の複
合栄養源中に十分な濃度で存在するが、必要な場合には
、もちろん培地中に別に加える事もできる。

−ｉに、例えば、デキストロース、シュークロース、マ
ルトース、ラクトース、グリセロール、トウモロコシ、
キビ、小麦、デキストラン、セレロース（ｃｅｒｅｌｏ
ｓｅ）　、）ウモロコシ粉、オード麦粉等の糖類及びデ
ンプン類のような成分は、栄養培地中で同化しうる望ま
しい炭素源である。培地中で利用される正確な炭素源の
量は、部分的には、培地中の他の成分に依存するが、−
Ｃ的には、培地重量の０．５〜９０重量％が望ましい事
が判明している。これらの炭素源は、それぞれ個々に用
いる事ができるし、このような炭素源を同じ培地中で混
合する事ができる。

イースト加水分解物、イースト自動分解物、イースト細
胞、）マドペースト、トウモロコシ粉、オート麦粉、大
豆粉、カゼイン加水分解物、イースト抽出物、トウモロ
コシ浸潤液、トウモロコシ、キビ、小麦、ジスチラース
・ソリューブルス、綿実粉、肉抽出物の如き種々の窒素
源は、本発明の化合物の製造において、ペニシリウム・
チャルレエ之（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　　ｃｈａｒｌ
ｅｓｉｉ　）　Ｍ　Ｆ　５１２３により容易に同化され
る。種々の窒素源は、培地重量の０．２〜９５％量の範
囲で単独または組合せて用いることができる。

培養培地中に加える事のできる栄養無機塩は、ナトリウ
ム、カリウム、マグネシウム、アンモニウム、カルシウ
ム、ホスフェート、サルフェート、クロライド、カルボ
ネート等のイオンを得る事のできる従来の塩である。さ
らに又、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、カドミ
ウム、亜鉛、銅などの如き微量金属も含まれる。

以下に示す培地及び実施例に示す培地は、用いる事ので
きる広範な種類の培地を単に例示するものであって、こ
れに限定して制限するものではない事に注意されたい。

以下のものは、ペニシリウム・チャルレッシ（Ｐｅｎｉ
ｃｉｌｌｉｕｍ　　ｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）　ＭＦ　５
１２３の株の増殖に適した培地の例である。

暗廼人 デキストロース　　　　　　　　　　　　　　１．０ｇ
可溶性デンプン　　　　　　　　　　　　　　１０．０
ｇ牛肉抽出物　　　　　　　　　　　　　　　　３．０
ｇイースト自動分解物（Ｙｅａｓｔ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ
。

Ｉｎｃ、、　Ｃ１１ｆｔｏｎ、　Ｎ、　Ｊ、から入手可
能なＡｓアルダミンｐＨ）　　　　　　　　　　　　　
　５．ＯｇＮＺアミン−Ｅ（Ｈｕｍｋｏ−Ｓｈｅｆｆ　
ｉｅｌｄ−Ｍｅｓｐｈｉｓ。

Ｔｅｎｎ、より入手可能なカゼイン加水分解物）　　　
　　　　　　　　　　　　　　５．０ｇＭｇ５Ｏａ　　
・７ＨｚＱ　　　　　　　　　Ｏ，０５ｇリン酸緩衝液
　　　　　　　　　　　　　　　２．０ｍｍｌＣａＣ０
ｚ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．５ｇ蒸
留水　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０００ｍ
　１ｐＨ７，０−７，２ ユ詠」ｌＬ１液 ＫＨ２ＰＯ４９１，０ｇ ＮａｚＨＰＯｓ　　　　　　　　　　　　　　　　９５
．０ｇ蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
０００ｅ＋　ｌ１ｐ８７．０ 相」Ｌ影・ トマトペースト　　　　　　　　　　　　　　２０．０
ｇ初生イースト　　　　　　　　　　　　　　　１０．
０ｇデキストリン（ＣＰＣデンプン）　　　　　　　　
　２０．ＯｇＣｏＣ１ｔ　　・６Ｈ！０　　　　　　　
０．００５ｇ蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　
　　１０００ｅ＋　ｌ１ｐＨ７，２−７，４ 暗並立 トウモロコシ粉　　　　　　　　　　　　　　２０．０
ｇジスチラース・ソリューブルス　　　　　　１０．０
ｇ大豆粉　　　　　　　　　　　　　　　　　１５．０
ｇクエン酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　４．
０ｇＣａＣ１ｔ　　’　２Ｈｚ０　　　　　　　　０．
５　ｇ−ＭｇＳＯ４・７Ｈｚ８　　　　　　　　　０．
１　ｇＣｏＣｉ　ｚ　　・６ｏｚｏ　　　　　　　　　
Ｏ，Ｏｌｒ　−ＦｅＳＯａ　　’　２１１ｇ０　　　　
　　　　　　　０．０１ｇポリグリコールＰ２Ｏ００（
ポリプロピレン　　　　２．５■グリコ一ルＭＷ　２０
００） 蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　　１０００Ｉ
１１ｐＨ６，５ 邦」Ｌリ ラクトース　　　　　　　　　　　　　　　２０．０ｇ
ジスチラース・ソリューブルス　　　　　　　１５．０
ｇ自動分解イースト（アルゾミンｐｉｆ）　　　　　　
　５．０ｇ蒸留水　　　　　　　　　　加えて１０００
ｍ　ｌにする。

ｐＨ？、０ 里廼旦 トマトペースト　　　　　　　　　　　　　　４０．０
ｇオート麦粉　　　　　　　　　　　　　　　　１０．
０ｇ蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　　１００
０ｓ＋　１ｐＨ７，０ 培廼ヱ トウモロコシ浸潤液　　　　　　　　　　　１５．０ｇ
（ＮＨ４）ｚｓＯａ　　　　　　　　　　　４．０　ｇ
ＣａＣＯ＋　　　−、６，０ｇ 可溶性デンプン　　　　　　　　　　　　　　２０．０
ｇトウモロコシ粉　　　　　　　　　　　　　　１．０
ｇ大豆粉　　　　　　　　　　　　　　　　　　４．０
ｇグルコース　　　　　　　　　　　　　　　　５．Ｏ
ｇＫＨｚＰＯｔ　　　　　　　　　　　　Ｏ，３ｇラー
ド油　　　　　　　　　　　　　　　　　２．５ｇ蒸留
水　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０００ｍ　
１ｐＨ６，７ 培上旦 デキストロース　　　　　　　　　　　　　　１０．０
ｇアスパラギン　　　　　　　　　　　　　　　１．Ｏ
ｇＫＪＰＯａ　　　　　　　　　　　　Ｏ，１８ＭｇＳ
Ｏ４・７Ｈｚ０　　　　　　　　０．５　ｇイースト抽
出物　　　　　　　　　　　　　　０．５ｇオート麦粉
　　　　　　　　　　　　　　　１０．０ｇＣａＣ０，
３，０ｇ 微量元素混合物　　　　　　　　　　　　　１０．０ｍ
　ｌ蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０
００ｍ　１ｐＨ７，２に調節 微１元素星金立 ＦｅＳＯ４Ｈ７ＨＪ　　　　　　　　　　　　１０００
ｎｗ１０００ｎ・４ＨｚＯ１００ＯＩＷ ＣｕＣＩｔ　ｔ　　・２Ｈｚ０　　　　　　　　　　　
２５ｍｇＣａＣｌ　２　　・２ｆｌｚ０　　　　　　　
　　　１００１！ｔｌ＋ＢＯｓ　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　５６■（Ｎｉｌｓ）ＪｏｔＯｚｎ　’
　４ｔｌｚ０　　　　　　　１９ｍｇＺｎＳＯ４・７Ｈ
ｚ０　　　　　　　　　　　　２００ｍｇ蒸留水　　　
　　　　　　　　　　　　　　１０００ｍ　Ｒ苅１Ｌ辻 培地Ｇ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０１
００Ｏオート麦粉　　　　　　　　　　　　　　　　１
０ｇｐＨ７，２ づ丘］２川とも・チャルレッシ（Ｐ　ｅｎｉｃｉｌｌｉ
ｕｍｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）　Ｍ　Ｆ　５１２３を用い
る発酵は、温度が約２０”〜約４０℃で行う事ができる
。最適な結果を得るためには、約２０”〜約３０℃の範
囲で行うのが最も都合よい。このうちでも約２４゜−２
６℃が最も望ましい温度である０本発明の化合物を製造
するのに所望される栄養培地のｐＨは約３．０〜８．５
で変化させる事ができるが、望ましい範囲は約４．０〜
７．０である。

小規模発酵を都合よく行うには、望ましい量の栄養培地
を、既知の無菌法によりフラスコ中に入れ、＜＝＞”ｙ
Ｌ　・ｆ−ｐ−）ＬｔＬｚ　−’ｙ　（Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕＩｌｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）　Ｍ　Ｆ　５１２３
の胞子又は細胞生長菌体をフラスコ中に接種し、ゆる（
綿栓した後、回転振とう機上θ〜３００　ｒｐ＋ｓで約
２〜２１日間、約２５℃の定温で発酵させる。大規模に
行うには、攪拌機と、培養培地に通気する装置とを付け
た適当なタンク中で培養するのが望ましい。栄養培地は
タンク中で作製し、滅菌後、さ王２ユ立ム・±−］−−
υコ」七−：ｚ−Ｓど−（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　　
　ｃｈａｒｌｅｓｉｉ　　）　　ＭＦ５１２３の生長細
胞菌体を接種する。約２０°〜２８℃の範囲で、栄養培
地を撹拌及び／又は通気しながら５〜２０日間発酵を続
ける。通気の程度は、ファーメンタ−の大きさ、攪拌速
度等いくつかの因子に依存する。一般に、大型ファーメ
ンタ−では約９５〜３００ｒｐ＋＊で攪拌し、１分間に
約２〜２０立方フイート（ＣＦＭ）で通気する。

三三乞見立人・±上止ヱユ之（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｓ
＋ｃｈａｒｌｅｓｉｉ　’）　Ｍ　Ｆ　５１２３の発酵
は静置すなわち攪拌しない条件で固形培地中でも行う事
ができる。

固相での好気的発酵は、上述の水性液内発酵で用いたも
のと同じ炭素、窒素源及び無機塩を用いるが、主たる差
異は培地構成物中における含水量の違いである。固相発
酵では、水が３０〜８０重量％含有される。培地１リツ
トルあたり、固形成分を１０〜１００ｇ（１〜１０％ｗ
　／　ｖ　）用いる上述の液内発酵培地に比べて、固相
培地は固形成分を２０〜７０％ｗ　／　ｖ含有する。

固相発酵は培地の固形物に対する表面積の比を大きく保
ち、好気的に行うことができる。この方法は発酵トレイ
又はフラスコ中０．３〜８ｃＩｌの深さの培地を利用し
て容易に行う事ができる。培地を機械的に攪拌しないで
、このようにして増殖に必要な十分量の酸素の存在を確
保するのである。あるいは又、固相発酵は、固形培地の
中又は固形培地の上に通気するため無菌ガーゼを付けた
特殊トレー中で行う事ができる。場合により、固相発酵
は固（しまるフタをして行う事ができる。

大規模な培地による発酵は、培地の量を段階的に増すこ
とで行う事ができ、そしてその全ての段階が同一の型式
（すなわち液内又は固相）である必要はない。液体培地
で初期発酵した後、これを大規模な固形培地中に移すの
が望ましい事が判明した。

本発明の新規化合物は、ぺ三乞工立ム・チャルレッシ（
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　　ｃｈａｒｌｅｓｉｉ　）　
ＭＦ５１２３の発酵終了時に主として菌体中に見い出さ
れ、以下に示すように、それから取出し分離することが
できる。

発酵培地全体からの新規化合物の分離及び回収は、溶媒
抽出と種々のクロマトグラフィー手法及び溶媒系を用い
たクロマトグラフィー分画とにより行われる。

本発明の化合物は、水にわずかに溶け、有機溶媒にはよ
く溶ける。発酵培地から本化合物を回収するのに、この
性質を都合よく利用できる。すなわち回収法の１つとし
て、発酵培地全体を等体積の有機溶媒と混合する。どん
な有機溶媒を用いてもよいが、酢酸エチル、メチレンク
ロライド、クロロホルムの如き水と混合しない溶媒を用
いるのが良い。一般に、最高の回収率を得るためには何
回も抽出する事が望ましい。溶媒は、本発明の化合物の
みならず、本発明の化合物に見られる駆虫活性がない、
他の物質をも取り出す。溶媒が水と混合しない場合、層
を分離し、有機溶媒を減圧上留去する。残渣を好ましく
はシリカゲルをつめたクロマトグラフィーカラムの上に
置く。カラムは目的化合物及びいくかの不純物を保持す
るが、多くの不純物、特に無極性不純物は通過させる。

カラムをメチレンクロライド又はクロロホルムの°如き
緩和な極性打機溶媒で洗浄して不純物を更に除く０次に
メチレンクロライド又はクロロホルムと、他の有機溶媒
（アセトン、メタノール、エタノール等が望ましい）と
の混合液で洗浄する。溶媒を留去し、残渣を更に、シリ
カゲル、酸化アルミニウム、イオン交換樹脂、デキスト
ランゲルなどをクロマトグラフ媒体として用いたカラム
クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、カキ取
り分取薄層クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラ
フィーなどでクロマトグラフ処理する。溶離液としては
、種々の溶媒及びその混合液を用いる。

本発明の化合物の検出及び単離に、薄層クロマトグラフ
ィー、高速液体クロマトグラフィー、カキ取り分取薄層
クロマトグラフィーを用いる事ができる。上述の方法の
みならず当業者間に知られた他の方法を用いて、本発明
の化合物を含む精製組成物が得られる。

意外にも本発明の化合物は、ヒト、動物及び植物に寄生
する寄生虫、特に駆虫、外部寄生虫、昆虫及びダニに対
し、効力ある内部及び外部駆虫剤である事が判明した。

寄生虫症とされている病気又は病気群は駆虫として知ら
れる寄生虫が動物宿主に寄生するのが原因である。寄生
虫症は、豚、羊、馬、牛、ヤギ、イヌ、ネコ、ニワトリ
の如き家畜において流行し、重大な経済問題となってい
る。駆虫のうち、線虫として知られている寄生虫は、種
々の動物で、広範に、時にははげしい感染をひき起こす
、上述の動物に寄生する最も一般的な線虫の属は、ヘモ
ン（Ｐａｒａｓｃａｒｉｓ）である、これらのうちネマ
トジル’；ｌ　（Ｎｅ＋ｗａｔｏｄｉｒｕｓ　）　、と
ニル（泊匹山）及びエソフ　ゴス　ムム（更じ」１」四
見鮪μ」−）の如き特定の線虫は、主として腸管を攻撃
し、ヘモン２五（Ｈａｅｓｏｎｃｈｕｓ）及び左２ｊソ
し１区ヱ（動力圧（ｌ堕）の如き線虫は背中に寄生する
。更に、ジクチオカウルス（■■Ｕ■虹旦）の如き線虫
は肺に見い出される。他の寄生虫は心臓及び血管、皮下
及びリンパ組織の如き体の他の組織あるいは器官に寄生
す巷、寄生虫症として知られる寄生虫感染は、貧・血、
栄養失調、衰弱、体重減少、腸管壁や他の組織及び器官
のはげしい損傷などを引き起こし、治療しないでいると
、感染宿主が死亡する事もある。

本発明の化合物は、これら寄生虫に対して予想外に高い
駆虫活性があり、加えて、イヌにおける乏旦ヱ土１１ヱ
（Ｄｉｒｏｆｉｌａｒｉａ　）　　；げっ歯頚におけ（
Ａｓ　１ｃｕｌｕｒｉｓ　）　　；ダニ、チーズ虫、シ
ラミ、ノミ、クロバエの如き動物及び鳥類の前足外部寄
生虫：ヒツジにおける。少］仁丈ｊＪＪｌ　（ｕ１旦り
並、）　；かむ昆虫；及びネコにおける旦爽テ上ヱＩ（
Ｈｏｄｅｒｕｍａ　ｓ　、）　、ウマにおけるガストロ
フィ土久（釦■皿吐旦旦）、げっ歯頚における久±上ブ
旦Ｉ（愈に世口」ム）の如き移動性直翅目虫の幼虫、に
対しても活性がある事が判明した。

本発明の化合物は又、ヒトに感染する寄生虫に対しても
有効である。ヒトの胃腸管に寄生する最も一般的な寄生
虫の属は、アンシロストマ（勧９山ｔｓｔｏｍａ　）　
、ネカトール（Ｎｅｃａｔｏｒ　）　、ヱ及び工ｌ孟且
且立ス（Ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ）である。血中又は他の
組織及び胃腸管の外側の器官で発見される他の医薬的に
重要な寄生虫の属は、ブｆ２ユヱ（Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉ
ａ）　、プルギア（紅皿ｎ）　、オンコセ）Ｌｔ左（Ｏ
ｎｃｈｏｃｅｒｃａ）　、旦ヱ（皿、ドークヌクルＺ　
（Ｄｒａｃｕｎｕｃｕｌｕｓ）の如き糸状虫、ストロン
ギロＡｊｌ入（Ｓｔｒｏｎ　　１ｏｉｄｅｓ　）　、上
ユ土生立（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ　）の如き腸内寄生
虫の腸外期のものである０本発明の化合物は、ヒトに寄
生する前足寄生虫、かむ昆虫及びヒトを煩ｈｌｌ（する
双翅害虫に対しても有効である。

本発明の化合物は、ゴキプ’Ｊ　、）立孟立■（」１堕
１０−技工）゛、衣服に付く蛾、天主土孟Ｉ（■赳虹り
肚、）、カーペット甲虫、１！ｌり２ｄ３工ｄ　（Ａｔ
ｔａ　ｅｎｕｓ　ｓ　、　）　、及ヒイエバエ、ニスカ
・上／Ｉ’　７ｆｈ　（Ｍｕｓｃａ　　ｄｏｍｅｓｔｉ
ｃａ　）の如き家庭の害虫に対しても活性がある。

本発明の化合物は又、上１立ム■ （Ｔｒｉｂｏｌｉｕｍ　ｓ　、　）　、ｅ、２７”　、
ｔ　　（Ｔｅｎｅｂｒｉｏ　ｓ　、）の如き保存穀物の
害虫、アブラムシ、アシルチオ之２主ｆｌ（紅■国ｎ旦
戸並」ム）の如き農業植物の害虫、イナゴの如き移動性
直翅目、及び植物組織中に住む昆虫の幼虫に対しても有
効である。

本発明の化合物は、農業において重要な、土壌線虫及び
／ｌｌ二Ｌツしすｉ　（Ｍｅｌｏｉｄｏ　　ｎｅ　ｓ　
、　）の如き植物寄生虫の制御のための線虫撲滅剤とし
て有効である。

これらの化合物は、カプセル、丸薬又は錠剤の如き単位
投与形あるいは哺乳動物用の駆虫薬として使用される液
剤どして経口投与できる。液剤は一般には、ベントナイ
トの如き懸濁剤及び湿潤剤等の成分と共に、活性成分を
通常は水中に含む溶液、懸濁液又は分散液である。一般
には、液剤は又、消泡剤を含む。溶剤製剤は、一般に活
性成分を約０．００１〜０．５重量％含有する。好まし
くは０．０１〜０．１重量％含有する。カプセル及び丸
剤は、デンプン、タルク、ステアリン酸マグネシウム又
はリン酸二カルシウムの如き担体賦形剤と、活性成分と
を混合して含有する。

乾燥した固形の単位投与形で本発明の化合物を投与する
のが望ましい場合は、所望な量の活性化合物を含むカプ
セル、九剤、又は錠剤を通常用いる。これらの投与形は
、適当な微粉希釈剤、充てん剤、崩壊剤及び／又は、デ
ンプン、乳糖、タルク、ステアリン酸マグネシウム、植
物ゴムの如き結合剤を活性成分と均一によく混合して製
造する。

このような単位投与製剤は、治療する動物宿主の種類、
感染の度合及び型、及び宿主の体重の如き因子に依存し
て、全体量及び駆虫剤の含量を広く変化させる事ができ
る。

活性化合物を動物飼料により投与する場合、飼料中によ
（分散させるか、飼料の上面にふりかけるか又は、粒状
にして最終飼料に加えるかあるいは場合により別個に与
える。あるいは別に、本発明の駆虫剤は、例えば活性成
分を液体担体中に溶解又は分散させて管腔内、筋肉内、
気管内、又は皮下注射により、非経口的に投与できる。

非経口投与には、活性成分は、適用できる賦形剤と混合
するのが望ましい。この場合、ピーナツ油、綿実油等の
植物油の取り合わせが望ましい。ツルケタール、グリセ
ロールフォーマルを用いた有機調製物の如き他の非経口
用賦形薬及び水性非経口用薬剤も用いられる。活性化合
物は、投与するための非経口用賦形剤中に溶解又は懸濁
させる。このような剤形は一般に活性成分をｏ、　ｏ　
ｏ　ｓ〜５重量％含有する。

本発明の駆虫剤は主として寄生虫症の治療及び／又は予
防に用いるが、例えば家畜又はニワトリにおけるダニ、
シラミ、ノミ、チーズ虫及びその他のかむ昆虫の如き前
足寄生虫等の他の寄生虫に起因する病気の予防及び治療
に有効である。これらは又、ヒトを含む他の動物に起き
る寄生虫病の治療にも有効である。最高の結果を得るた
めに用いる最適な量は、もちろん用いた特定化合物、治
療する動物種、寄生虫感染又は侵入の型及び程度に依存
する。一般に本発明の新規化合物を、１〜５日のような
比較的短期間に、全量を１回で又は分散して、動物の体
重１　ｋｇあたり、約０．００１〜１０■経口投与する
と良い結果が得られる。本発明の好適な化合物を用い、
１回の投与で体重１　ｋｇあたり約０．０２５〜０．５
　ｆｆ１ｒを動物に投与すると、優秀な寄生虫の制御が
できる。再感染を防ぐためには、くり返しの治療が必要
な場合があり、それは寄生虫の種類、用いた農業方法に
依存する。これらの物質を動物に投与する方法は家畜病
治療で、当業者間において良く知られている。

ここに記述する化合物を動物飼料の一成分として投与し
たり、飲料水中に溶解又は懸濁させて投与すれば、−又
は二以上の活性化合物が不活性担体又は希釈剤中によく
分散した組成物が得られる。

不活性担体とは、駆虫薬と反応せず、動物に安全に投与
できるものをいう、飼料として投与するための担体は、
動物飼料の成分である事が望ましい。

好適な組成物としては、活性成分が比較的多量に含まれ
、動物に直接食べさせるか又は、直接あるいは中間希釈
又は配合段階の後に飼料に加えるのに適した飼料プレミ
ックス又は飼料添加剤である。このような組成物に適し
た典型的担体又は希釈剤は例えば、ジスチラース・ドラ
イド・グレインズ、トウモロコシ粉、カンキツ頻粉、発
酵残渣、カキ殻ひき粉、小麦ふすま、糖蜜可溶成分、ト
ウモ°ロコシ穂軸粉、食用豆粉飼料、大豆荒びき粉、石
灰石粉砕物等である。活性化合物は、粉砕、攪拌、製粉
又は転摩などの方法により担体中によく分散される。活
性成分を約０．ＯＱ５〜２．０重量％含有する組成物は
、飼料プレミックスとして特に適している。動物に直接
与える飼料添加剤は活性成分を約０．０００２〜０．３
重量％含有する。

このような添加剤は最終飼料が寄生虫病の治療及び制御
に適した活性化合物の濃度になるように動物飼料に加え
る。活性化合物の好適な濃度は上述の因子のみならず、
用いる個々の化合物に依存して変化するけれども、本発
明の化合物は、一般に、望ましい駆虫効果を得るために
、飼料中に０．００００１〜０．００２％濃度で与える
。

本発明の化合物を用いる場合、個々の化合物を製造し、
そのままの形で用いる事もできるし、個々の化合物の混
合、あるいは、本発明の化合物とは関連性のない他の活
性化合物と混合して用いる事ができる。

本発明の化合物は、又は、成長中もしくは保存中の収穫
物に損傷を与える農業害虫を撲滅するのにも有効である
。本化合物は、スプレー、ダスティング、エマルジョン
等の既知の方法を用い、このような農業害虫から、成長
中又は保存中の収穫物を防御するのに適用する。

以下の実施例は本発明をより十分理解するために例示す
るものであり、本発明をこれに限定するものと解釈すべ
きではない。

大止桝土 ５０ｒａｌの培地１を含む、ジャマ板を付けないエーレ
ンマイヤーフラスコ中に接種するため、３．５ｇの土壌
及び乾燥培養菌ＭＦ　５１２３　（ＡＴＣＣ２０８４１
）を含む１８Ｘ１５０ｍ試験管の５％を用いた。回転振
とう機（５０回転）上、２１２ｒｐｍにて、２８℃で３
日間インキュベートした後、増殖物の２ｍｌを吸引して
取り培地２を含む２５０ｍ１のエーレンマイヤーフラス
コに移した。この後、撹拌せずに２５℃で７日間インキ
ュベートした。７日後、各フラスコに１５ｍ１の無菌蒸
留水を加えた。次に回転振とう機上で１６Ｏｒｐｍにて
攪拌下、７日間、２５℃で更にインキュベートを続けた
。

実施±１ １０％グリセロール中に入れた培養菌ＭＦ５１２３（Ａ
ＴＣＣ２０８４１）の凍結増殖物２．０　ｔａ　１容量
を、５０ｖａｌの培地Ｉを含む、ジャマ板を付けないエ
ーレンマイヤーフラスコに接種するために用いた。回転
振とう機（５ｃｍ行程）上、２１２ｒｐｍにて振とうし
２８℃で３日間インキュベートした後、培地２を含む２
５０＋Ｉｌのエーレンマイヤーフラスコに、吸引して取
った増殖菌を２麟ｌ移した。接種後、培地２を攪拌せず
に２５℃で７日間インキュベートした。７日間インキュ
ベート後、１５ｍｌの無菌蒸留水を各フラスコに加えた
。次に回転振とう機上１６０ｒｐｍにて攪拌下、更に９
日間２５℃でインキュベートを続けた。

ス」１汁ｌ １０％グリセロール中に入れた培養菌ＭＦ５１２３（Ａ
ＴＣＣ２０８４１）の凍結増殖物’ｌ、　Ｑ　ｍ　１容
量を５０ｍｌの培地１を含む、ジャマ板を付けないエー
レンマイヤーフラスコに接種するために用いた。回転振
とう機（５ｃＩ１１行程）上、２１２ｒｐｍにて振とう
し、２８℃で３日間インキュベートした後、増殖菌を２
１Ｉ１１吸引して取り、培地２を含ム２５０ＩｌｌＮの
エーレンマイヤーフラスコ中に移した。接種後、培地２
を攪拌せず２５℃で７日間インキュベートした。

暗主−１ トウモロコシ浸出液　　　　　　　　　　　５．０ｇト
マトペースト　　　　　　　　　　　　　４０．０ｇオ
ート麦粉　　　　　　　　　　　　　　１０．０ｇグル
コース　　　　　　　　　　　　　　　１０．０ｇ微量
元素混合液　　　　　　　　　　　　１０．（ｌｓｍ！
蒸留水　　　　　　　　　全量を１０００ｍ　ｌにする
量ｐＨ６，８ 微量元素混合液 Ｆｅ５Ｏｎ　　’７Ｈｇ０　　　　　　　１．０ｇＭｎ
５Ｏｎ　　・４Ｈｚ０　　　　　　　１．０ｇＣｕＣ１
ｚ　　・２Ｏｇ０　　　　　　２５．ＯＮＣａＣ１ｚ　
　　　　　　　　　　　　　　、　　０．１ｇ（ＮＨ４
）ＪｏＯ２４・４Ｈｚ０　　　　　　　　　　１９．０
１１ｇＺｎ５Ｏｎ　　・７１１ｚＯ０，２ｇ 蒸留水　　　　　　　　　全量を１０００ｍ　ｌにする
量培血−又 ２５０Ｉｌｌｌエーレンマイヤーフラスコ当りの量トウ
モロコシ　　　　　　　　　　　　　　１０．０ｇイー
スト抽出物　　　　　　　　　　　　　０．５ｇ酒石酸
ナトリウム　　　　　　　　　　　　　０．１ｇＦｅ５
Ｏａ　　・７Ｈｚ０　　　　　　　　０．０１ｇＬ−シ
スティン　　　　　　　　　　　　　　０．１ｇグリセ
ロール　　　　　　　　　　　　　０．５ｍ１ＣｏＣｌ
　ｚ　・６）１ｚ８　　　　　　０．００２ｇ蒸留水　
　　　　　　　　　　　　　　　１５．（１ｗｌオート
クレーブ　　１５ポンド圧、１２１℃、２０分間次に蒸
留水　　　　　　　　　　　　　　１０．Ｏｔｓ　１再
びオートクレーブ　１５ポンド圧、１２１”Ｃｌ２Ｏ分
間皇施貫生 １６個の、実施例３で得た２５０１ＩＩＩｌエーレンマ
イヤーフラスコ中の７日間固形培地発酵物を合併し、酢
酸エチルでｌＮずつ３回抽出した。この３種の抽出物の
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ　Ｌ　Ｃ）による分
析では抽出ｌ及び２ではパラハークアミドをそれぞれ４
３０■及び１３０■含有している事が判明した。抽出３
では４曙含有しているのみであり、この抽出液は除外し
た。抽出ｌ及び２を合併し、硫酸ナトリウムで乾燥した
。

乾燥抽出液を濃縮して油状残渣を得た。残渣にメタノー
ルを加えて４ｃａｌとした。あらかじめメタノールで平
衡化した、セファデックスＬＨ−２０の２００ｔａｌカ
ラムにて、クロマトグラフィーを行った。メタノールを
流出液とし、流速３１１／分にて、４０ｍｌを取り、続
いてＩＩＩＩｌずつ６１の両分に分取した。ＨＰＬＣ分
析では、両分１０〜１６がバラハークアミドを含有して
いる事が判明した（Ｒｔ＝７．９分）。両分１０〜１６
を合併し濃縮して油状残渣を得た。残渣を５：５：０．
５ｖ　／　ｖ　／　ｖ　　ヘキサン：メチレンクロライ
ド；メタノールに溶かして１３．５＋＋ｊ！とじた。あ
らかじめ、同じ溶媒系で平衡化したＥ、　Ｍｅｒｃｋシ
リカゲル６０（粒径０．０４〜０．０６３龍）の５００
ｔｍｌカラムにて、流速１０ＩｌｌｌＺ分でこの溶液を
クロマトグラフ処理した。初めに２００ｒａｌ取った後
、８ｍｌずつ３１５の両分に分取した。Ｔ、Ｌ、Ｃ分析
に基づき以下のように両分を合併した。百分１５０−１
７９；１８０−１９９；２００−２３９；２４０−２７
０及び２７１−３１５をそれぞれ合併し、それぞれＡ−
Ｅと名づけた。試料ＣとＤを合併し、これを濃縮乾燥し
Ｆと名づけた。試料Ｆを２ｍｌのメタノールに溶かし、
濾過した。濾液をＷｈａｔｗ＋ａｎ　Ｍａｇｎｕ＋１１
２００　Ｄ　Ｓ　−３，２，２Ｘ２５ｃｍカラムを用い
た分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーで精製した。この場
合、６Ｂ／３２　　ｙ／ｖ　　メタノール／水の固定溶
媒系で流速１０ｍＡ！／分にて流出させ、室温で行った
。０．０５　＊＊の溶液通過長のセルを付け１．２８Ａ
ＵＦＳにセットしたＧ１１ｓｏｎモデル１１６ＵＶ検出
器を用いて通過流出液をモニターした。検出器のシグナ
ルは５ｐｅｃｔｒａ−ＰｈｙｓｉｃｓＳ　Ｐ　４１００
　Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｏｒでモニタ
ーした。３０の両分を取り、ＵＶ記録に基づいて画分１
６−１８を合併した０合併した両分を濃縮し、２０５、
４■の純パラハークアミド、構造式■を得た。

大ｌ炭工 実施例４における試料Ａを濃縮乾燥し残渣を０．２ｎ＋
ｊ！のメタノールに溶かした。Ｗｈａｔｍａｎ　Ｍａｇ
ｎｕｍ２００ＤＳ−３，２，２Ｘ　２５　Ｃｍカラムを
用いた分取ＨＰＬＣクロマトグラフィーにて、室温で、
これを精製した。この場合、６５／３５　　ｖ／ｖメタ
ノール／水の溶媒系で、流速９．９ｍｌ／分にて流出さ
せた。１龍の溶液通過長のセルを付け、０．３２ＡＵＦ
ＳにセントしたＬａｂｏｒａｔｏｒｙ　ＤａｔａＣｏｎ
ｔｒｏｌ　５ｐｅｃｔｒｏ　Ｍｏｎ１ｔｏｒ　Ｕ　Ｕ　
Ｖ検出器で２２６ｎａ＋にて流出液をモニターした。検
出器のシグナルは５ｐｅｃｔｒａ−Ｐｈｙｓｉｃｓ　　
Ｓ　Ｐ　４１００　　ＣｏｍｐｕｔｉｎｇＩｎ　ｔｅｇ
ｒａ　ｔｏｒでモニターした。流出３５分間はこれとい
ったＵＶビークが検出されなかった。そこで溶媒系を１
００％メタノールに変え、同じ流速で流出を続けた。単
一の主ピークが観察され、単一画分Ｂとした。いくつか
の第２群の主ピークが観察され単一画分Ｃとした。

画分Ｂを濃縮乾燥し、残渣を０．２　ｔａ　ｌのメタノ
ールに溶かした。Ｗｈａｔｍａｎ　Ｍａｇｎｕｍ　２０
０　Ｄ　Ｓ　−３，２，２Ｘ２５Ｃ１ｌカラムを用い、
室温で、この溶液を分取ＨＰＬＣにて精製した。この場
合、６８／３２　　ｖ／ｖ　　メタノール／水の溶媒系
で、流速１０＋ｗｊ！／分にて流出し、上述の如くモニ
ターした。２０画分に分取した。画分１４を濃縮乾燥し
、残渣１．５９■をＤとした。

百分Ｃを濃縮乾燥し、残渣を０．２Ｉ１１のメタノール
に溶かした。　Ｗｈａｔ＋ｓａｎ　Ｍａｇｎｕｗ＋　２
００　Ｄ　Ｓ　−３カラムを用い、室温にて、この溶液
を分取ＨＰＬＣで精製した。この場合、７０／３０　　
ｙ／ｖ　　メタノール／水の溶媒系で、流速１０ｒａｌ
１分にて流出し、上述の如くモニターした。２５両分に
分取した。画分１６を濃縮乾燥し、残渣０．７■をＥと
した。画分１８を濃縮し、残渣２．１■をＦとした。

１料ＯＳＥ、ＦをＮＭＲ及びマススペクトル分析した。

試料りは構造式■と同定した。

試料Ｅは構造式Ｖと同定した。

試料Ｆは構造式■と同定した。

案蓋班１ 固相発酵、凍結ＭＦ−５１２３（ＡＴＣＣ２０８４１）
バイアル内容物を５４＋ｗｆの培地ｌを入れた２５〇−
ｌフラスコ中に入れて、回転振とう機上、２２０ｒｐｍ
で４８時間２８℃にて攪拌し、接種菌を作製した０発酵
後、１０１ｍ１の発酵培地を８００ａｌｌの培地１を入
れた２リツトルフラスコ中に入れ、回転振とう機上、２
００ｒｐ−で４８時間２８℃にて攪拌した。

粉砕トウモロコシ以外の培地３の全ての成分を３．５１
の蒸留水中に溶かし、溶液を３　ｋｇの粉砕トウモロコ
シと、ＳＯＸ７５Ｘ５ｃｍのフィルタートレー中で混合
して生産培地を製造した。トレーを、カバーせずに、１
２１℃で２０分滅菌した。トレー中の含有物を攪拌し、
同じ大きさのトレーを、先のトレーの上にフタとしてか
ぶせ、テープで固くとめた。フタをしたトレーを更に１
２１℃で２０分オートクレーブにかけた。オートクレー
ブ中からトレーを出し、接種部数時間冷却した。冷却後
、Ｉｆの接種菌を接種した。培地を無菌スパーチルで混
合して接種菌を均一に分散させた。フタをトレーにしっ
かりテープでとめ、固形培地中、攪拌せずに２５℃で数
日間発酵した。

同じ方法で上述の固相発酵をくり返したが、この場合、
カバーせずに滅菌後、２．０リツトルの蒸留水をトレー
に加えた。

培地　３（固相生産培地） 物質　　　　　　　　　　　　　　　濃度（ｇ／トレー
）粉砕トウモロコシ（Ａｇｗａｙ）　　　　　　　　　
３０００．０イースト抽出物　　　　　　　　　　　　
　１５０．０酒石酸ナトリウム　　　　　　　　　　　
　　３０．０ＦｅＳＯ４’　７Ｌｏ　　　　　　　　　
　　３．０ＣｏＣ１ｚ　　・６１（ｚｏ　　　　　　　
　　　Ｏ，６し一システィン　　　　　　　　　　　　
　　　３０．０グリセロール　　　　　　　　　　　　
　１５０．０ｐＨ−調節せず 裏施舅工 実施例７から得た３　ｋｇの固相トレー培養物及び実施
例３から得たそれぞれ８０ｇの固相培養物を含むフラス
コ２０本の内容物を、それぞれ、酢酸エチルで、フラス
コ１本あたり２　Ｘ　６００ｎｌ及びトレーあたり２×
４リツトルにて抽出した。抽出液を合併し、これをＡと
して５℃で保存した°。

トレー中の３　ｋｇ固形培地培養物及び、各フラスコに
８０ｇの固形培地培養物を含む２０本のフラスコ内容物
を酢酸エチルで抽出し、抽出液を合併してＢとした。　
　　′ 試料Ａ、Ｂを合併し、２６℃で減圧濃縮して８００ｃａ
ｌとした。濃縮物を、更に高真空下で４０℃水浴中濃縮
して、３０　（ｌｅｊ！とした。油状濃縮物に３００ｙ
ａｌのメタノールを加えると沈澱ができ、これを１夜、
５℃で放置した。沈澱を濾過し、２００ｖａｌのメタノ
ールで洗浄した。濾液とメタノール洗浄液を合併して８
００ｎ＋Ｉ！得、これをＣとした。試料ＣのＨＰＬＣ分
析では、４．３ｇのパラハークアミド及び他の関連化合
物の存在を示した。試料Ｃを減圧濃縮してメタノールを
除き、最終的に２００ｃａｌとした。本濃縮物に、２０
０ｎｌのアセトニトリルを加え、Ｄとした。

溶液りを１×４００Ｉｌｌのヘキサンで抽出し、次に３
×３００ＩＩ１１のヘキサンで抽出した。アセトニトリ
ル層、３１ＯＩＩＩｌ中３．９ｇのパラハークアミド及
び関連化合物の存在をＨＰＬＣ分析で確認した。アセト
ニトリル溶液を濃縮乾燥しＥとした。

ヘキサン抽出液は廃棄した。

実隻炭工 実施例８の試料Ｅをｌ：ｌメチレンクロライド／酢酸エ
チルに溶かして１８０ｎｌにした。溶液を、あらかじめ
酢酸エチルで平衡化したシリカゲル（Ｇｒａｃｅ）の４
リツトルカラムにて、カラムクロマトグラフィーで精製
した。クロマトグラフィーは、酢酸エチルで、流速２０
０ｍ１／分にて流出させて行い、５つの４リツトル画分
、次に２４×５００ｖｓｌの両分を分取した。画分３〜
９は、１．９５ｇのパラハークアミドを含有し、これを
Ｆとした。百分２は、色の強い両分で、かなりの量のパ
ラハークアミドを含有していた。これを濃縮乾燥して、
再びクロマトグラフィーに供した。残渣をＧとし、ｌ：
ｌメチレンクロライド：酢酸エチルに溶かし１８０ｗ＋
ｊｌにした。これを上の如くクロマトグラフィーで精製
した。５つの４リツトル画分、次に２４　Ｘ　５００＋
ｓ１の画分を分取した。

画分４−１７はパラハークアミド及び関連化合物を含有
しており、これを合併してＨとした。試料Ｆ及びＨを合
併した。合併した百分のＨＰ　Ｌ　Ｃ分析から、４ｇの
パラハークアミドが含有される事が判明した。合併した
試料を濃縮し、９．５ｇの固形物を一得、これをＪとし
た。

尖見桝土工 実施例９の試料Ｊを３＝１、メタノール：メチレンクロ
ライドに溶かし１１（Ｊｓｌにした。あらかじめメタノ
ールで平衡化した５　ｃｍ　Ｘ　２　ｍのセファデック
スＬＨ２０カラム上に上述の溶液を置き、メタノールに
て、流速２０ｍ１／分で流出させてクロマトグラフィー
を行い、２０Ｉｌｌ１画分ずつ分取した。画分をＴＬＣ
及びＨＰＬＣで分析し、パラハークアミド及び他の関連
物質が百分１５５〜１８６に存在する事が判明した。両
分１５５〜１６４を合併しＡとした。両分１６５〜１７
５を合併しＢとした。更に両分１７６−１８６を合併し
Ｃとした。試料Ａ及びＢを各々濃縮乾燥し、残渣を２０
１１１１の冷却酢酸エチルで摩砕した。これを濾過し、
固形物を取りＤとし、濾液を合併してＥとした。

犬１」１Ｌ上 実施例１０の試料りを８０ＩＩ１１の２：ｌへキサン：
アセトンに溶かし、４０ｔａｌｌずつ２回に分けて、あ
らかじめ２：１、ヘキサン：アセトンで平衡化させたシ
リカゲル（Ｇｒａｃｅ）にて、クロマトグラフィーを行
った。溶液の半分は１リツトルのシリカゲル、残りの半
分は７００ｒａｌのシリカゲルでクロマトグラフィーを
行った。両者のクロマトグラフィーを行う場合、２：１
、ヘキサン：アセトンで流速２０＋ｎｊ！／分で流出さ
せ、２５ｍ１ずつ分画した。それぞれのカラムからの画
分１５３−２２０．１４３−２３０に全量３．５ｇのバ
ラハークアミド（１）が含有していた。前者のカラムの
両分７６−１２４、及び後者のカラムの百分６５−８５
に、１８０■の化合物■が含有していた。前者のカラム
の画分１３２−１４４及び後者のカラムの百分１２０−
１３８に１２ｎｗの化合物■が含有していた。

実施±上Ｉ 実施例１Ｏの試料Ｅを１０ＩＩ＋１の１：１ヘキサン：
アセトンに溶かし、あらかじめ２：ｌ、ヘキサン：アセ
トンで平衡化させた１　２０ｍｌのシリカゲル（Ｇｒａ
ｃｅ）カラムを用い、同じ溶媒系で、流速６ＩｌｌｌＺ
分で流出させ、１２ｎ＋１ずつ分画するクロマトグラフ
ィーにて精製した０画分２３及び２４に化合物■が２８
■含有している事が判明した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。 ２、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。 ３、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。 ４、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。 ５、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。 ６、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物。 ７、同化できる炭素源、窒素源及び無機塩を含有する培
   地中で生産菌株、￥ペニシリウム￥￥チャルレッシ￥（
   ￥Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ￥　￥ｃｈａｒｌｅｓｉｉ￥
   ）ＭＦ５１２３（ＡＴＣＣ２０８４１）を発酵培養する
   事を特徴とする、請求項１〜６に包括される化合物の製
   造法。 ８、対象あるいは寄生虫に感染した対象に、効果的な量
   の、請求項１〜６に包括される化合物１種類以上を投与
   する事を特徴とする、内部及び外部寄生虫感染の予防及
   び治療法。 ９、動物体重１ｋｇあたり、活性成分０．００１〜１０
   ｍｇを経口で動物に投与する事を特徴とする請求項８の
   方法。 １０、不活性担体及び１種以上の請求項１〜６に包括さ
   れる化合物を含有する事を特徴とする内的及び外的寄生
   虫感染の予防及び治療に有益な組成物。 １１、飲用処方物であり、活性成分を０．００１〜０．
   ５重量％含有する請求項１０の組成物。 １２、最終飼料処方物であり、活性成分を０．００００
   １〜０．０００２重量％含有する請求項１０の組成物。 １３、活性成分を０．００５〜２重量％含有する飼料プ
   レミックスである請求項１０の組成物。 １４、活性成分を０．０００２〜０．５重量％含有する
   飼料添加物である請求項１０の組成物。 １５、活性成分を０．００５〜５重量％含有する非経口
   用処方物である請求項１０の組成物。