JPH01217264A - 薬剤耐性解除抗癌剤感受性試験の方法 - Google Patents
薬剤耐性解除抗癌剤感受性試験の方法Info
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- JPH01217264A JPH01217264A JP4357488A JP4357488A JPH01217264A JP H01217264 A JPH01217264 A JP H01217264A JP 4357488 A JP4357488 A JP 4357488A JP 4357488 A JP4357488 A JP 4357488A JP H01217264 A JPH01217264 A JP H01217264A
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕 医療および獣医臨床における検
査。薬品の開発。
査。薬品の開発。
〔原理および解決しようとする問題点〕癌の薬剤に対す
る感受性は一つ一つ異なっており、陽性率は２０係前後
にとどまっている。
る感受性は一つ一つ異なっており、陽性率は２０係前後
にとどまっている。
なおかつ抗癌剤は毒性が強い。−人一人の患者に最も最
適な薬剤を選び出すには抗癌剤感受性試験が必要である
。さらに癌にはいずれの抗癌剤にも抵抗を示す多剤耐性
細胞が存在する。これを解決するには耐性の解除が必要
である。
適な薬剤を選び出すには抗癌剤感受性試験が必要である
。さらに癌にはいずれの抗癌剤にも抵抗を示す多剤耐性
細胞が存在する。これを解決するには耐性の解除が必要
である。
抗癌剤の効果増強をなしうる物質の探索が行なわれ、い
くつかの薬物に増感効果のあることが明らかとなってき
た。例えばテトラサイクリンは癌細胞の薬剤耐性を一部
克服し、各種抗癌剤の効果を増強する作用を有する。耐
性解除感受性試験法はこの二つの原理を組合せ効果のあ
る薬物をみつけだす方法である。
くつかの薬物に増感効果のあることが明らかとなってき
た。例えばテトラサイクリンは癌細胞の薬剤耐性を一部
克服し、各種抗癌剤の効果を増強する作用を有する。耐
性解除感受性試験法はこの二つの原理を組合せ効果のあ
る薬物をみつけだす方法である。
従来は耐性の解除を行わず感受性試験を行っていた。し
たがって薬剤の陽性率は低かった。
たがって薬剤の陽性率は低かった。
対象は骨肉腫、卵巣癌、肺癌、消化器癌など。
この方法は以下の４段階の組合せから成立している。
（イ）癌の微小細胞集塊の作製。
癌組織をテフロンシートの上におき、カミソリで軽く叩
いて切る（図面１−１．２．３）。
いて切る（図面１−１．２．３）。
細切した癌組織と繊維性結合組織をメツシュによりふる
い分ける（図面１−４．．５）。さらに遠心沈澱をする
ことにより、微小細胞集塊と壊死および脂肪部分を分け
る（図面１−６）。
い分ける（図面１−４．．５）。さらに遠心沈澱をする
ことにより、微小細胞集塊と壊死および脂肪部分を分け
る（図面１−６）。
（ロ）薬剤の種類と調整。
一定量の薬剤と組織培養液を混合しだ液体、あるいはそ
れらを凍結または凍結乾燥した粉末を試験管内に入れた
ものを常備しておく（図面２）。抗癌剤はマイトマイシ
ンＣ（０，２μｆ／ｍｅ）、プレオマイシン（１μｉＰ
／ｍ／？）など１８剤を用いている。もちろん新しい薬
物も試験できる。
れらを凍結または凍結乾燥した粉末を試験管内に入れた
ものを常備しておく（図面２）。抗癌剤はマイトマイシ
ンＣ（０，２μｆ／ｍｅ）、プレオマイシン（１μｉＰ
／ｍ／？）など１８剤を用いている。もちろん新しい薬
物も試験できる。
（ハ）耐性解除薬剤と微小細胞集塊との反応耐性解除薬
剤の一つとしてテトラサイクリンを例にとる。テトラサ
イクリン５μｙ／コを加えた培養液４ｍｌ中に上記の癌
細胞集塊を入れ、３７℃で１時間前接触させる（図面
２−１）。そして洗浄する。オキシテトラサイクリンお
よびクロラムフェニコールも使用できる。既知あるいは
新しい物質に増感作用があるか否かの試験もできる。
剤の一つとしてテトラサイクリンを例にとる。テトラサ
イクリン５μｙ／コを加えた培養液４ｍｌ中に上記の癌
細胞集塊を入れ、３７℃で１時間前接触させる（図面
２−１）。そして洗浄する。オキシテトラサイクリンお
よびクロラムフェニコールも使用できる。既知あるいは
新しい物質に増感作用があるか否かの試験もできる。
（ニ）抗癌剤と癌細胞の接触。
抗癌剤を加えた培養液０．４ ｖｔｌ中に癌細胞２−Ｌ
ｏｗ／＋を入れ、３７℃で３−１０時間反応させる。対
照として薬剤を加えないものを置く（図面 ２−２）。
ｏｗ／＋を入れ、３７℃で３−１０時間反応させる。対
照として薬剤を加えないものを置く（図面 ２−２）。
（ホ）細胞塗抹標本の作製。
培養後の微小細胞集塊を子牛血清中に入れ、１ ｖｔｌ
の注射筒に２３ゲージのカテラン針をつけたもので５−
１０回パンピングをして分散する（図面 ３−１．２，
３）。分散した細胞の浮遊液を遠心し、沈渣をパスツー
ルピペットでスライドグラス上に塗抹し、乾燥後、固定
し、染色後、封入して細胞塗抹標本とする（図面 ３−
４．５）。この標本を顕微鏡で観察し、退行性変化を示
しだ細胞の割合を数えて陽性薬剤の判定をする。
の注射筒に２３ゲージのカテラン針をつけたもので５−
１０回パンピングをして分散する（図面 ３−１．２，
３）。分散した細胞の浮遊液を遠心し、沈渣をパスツー
ルピペットでスライドグラス上に塗抹し、乾燥後、固定
し、染色後、封入して細胞塗抹標本とする（図面 ３−
４．５）。この標本を顕微鏡で観察し、退行性変化を示
しだ細胞の割合を数えて陽性薬剤の判定をする。
結果は、テトラサイクリン単剤では通常変化が見られな
いが、時に核内のクロマチン構造の変化がみられ、その
変化はひび割れとして観察される。これは抗癌剤、放射
線増感剤、ホルモンあるいはビタミンによる変化とは異
なっている。通常抗癌剤の効果の見られない種類の細胞
に変化がみられる。
いが、時に核内のクロマチン構造の変化がみられ、その
変化はひび割れとして観察される。これは抗癌剤、放射
線増感剤、ホルモンあるいはビタミンによる変化とは異
なっている。通常抗癌剤の効果の見られない種類の細胞
に変化がみられる。
テトラサイクリンと抗癌剤を併用した場合、その変化は
抗癌剤が入ると増強され核の断裂・崩壊像がみられる。
抗癌剤が入ると増強され核の断裂・崩壊像がみられる。
併用により１つの細胞の破壊の程度が増し、破壊された
細胞の割合が増し、全体の症例における陽性率があがる
。
細胞の割合が増し、全体の症例における陽性率があがる
。
併用効果としては相乗効果である。
本発明はこのような簡単な材料と方法で、今まで薬がき
かないとされてきた消化器癌や治療後再発の抵抗型癌に
対して耐性の解除を行い、短時間のうちに効果のある薬
剤の選択を可能にし、治療の道を開いたものである。
かないとされてきた消化器癌や治療後再発の抵抗型癌に
対して耐性の解除を行い、短時間のうちに効果のある薬
剤の選択を可能にし、治療の道を開いたものである。
第１図は、癌の微小細胞集塊の作製に用いる材料。１は
カミソリホルダー、２はカミソリ、３はテフロンシート
。４，５および６は微小細胞集塊とその他の成分をふる
い分ける材料。４はメソシー、５はシャーレ、６は遠心
管。 第２図は、薬剤と組織培養液の混合液。１は耐性解除薬
剤と組織培養液の混合液。２は抗癌剤と組織培養液の混
合液。 第３図は、細胞塗抹標本作製のだめの材料。 １は注射筒、２はカテラン針、３は試験管、４はスライ
ドグラス、５はパスツールピペッ ト 。
カミソリホルダー、２はカミソリ、３はテフロンシート
。４，５および６は微小細胞集塊とその他の成分をふる
い分ける材料。４はメソシー、５はシャーレ、６は遠心
管。 第２図は、薬剤と組織培養液の混合液。１は耐性解除薬
剤と組織培養液の混合液。２は抗癌剤と組織培養液の混
合液。 第３図は、細胞塗抹標本作製のだめの材料。 １は注射筒、２はカテラン針、３は試験管、４はスライ
ドグラス、５はパスツールピペッ ト 。
Claims (1)
- 増感剤で癌細胞の薬剤耐性を解除し、同時にあるいはそ
の後、抗癌剤と癌細胞を反応させその影響を核の形態変
化を指標として判定する試験管内抗癌剤感受性試験の方
法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4357488A JPH01217264A (ja) | 1988-02-26 | 1988-02-26 | 薬剤耐性解除抗癌剤感受性試験の方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4357488A JPH01217264A (ja) | 1988-02-26 | 1988-02-26 | 薬剤耐性解除抗癌剤感受性試験の方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01217264A true JPH01217264A (ja) | 1989-08-30 |
Family
ID=12667520
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4357488A Pending JPH01217264A (ja) | 1988-02-26 | 1988-02-26 | 薬剤耐性解除抗癌剤感受性試験の方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01217264A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05323652A (ja) * | 1992-05-15 | 1993-12-07 | Shin Etsu Chem Co Ltd | 静電荷像現像剤 |
-
1988
- 1988-02-26 JP JP4357488A patent/JPH01217264A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05323652A (ja) * | 1992-05-15 | 1993-12-07 | Shin Etsu Chem Co Ltd | 静電荷像現像剤 |
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