JPH0121759B2 - - Google Patents
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- JPH0121759B2 JPH0121759B2 JP56174650A JP17465081A JPH0121759B2 JP H0121759 B2 JPH0121759 B2 JP H0121759B2 JP 56174650 A JP56174650 A JP 56174650A JP 17465081 A JP17465081 A JP 17465081A JP H0121759 B2 JPH0121759 B2 JP H0121759B2
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/06—Hydroxylating
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J53/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by condensation with a carbocyclic rings or by formation of an additional ring by means of a direct link between two ring carbon atoms, including carboxyclic rings fused to the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton are included in this class
- C07J53/002—Carbocyclic rings fused
- C07J53/004—3 membered carbocyclic rings
- C07J53/008—3 membered carbocyclic rings in position 15/16
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J71/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring
- C07J71/0005—Oxygen-containing hetero ring
- C07J71/001—Oxiranes
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Description
本発明は一般式（）：
〔式中Ｑは基
【式】または
【式】を表
わし、R1は水素原子、トリメチルアセチル基、
tert―ブチル―ジメチルシリル基、ジメチル―２
―（３―メチルブチル）―シリル基またはトリベ
ンジルシリル基を表わす〕の3β，7β―ジヒドロ
キシ―△5―ステロイドを製造するため、一般式
（）： 〔式中Ｑは前記のものを表わし、R2は水素原
原子または炭素原子２〜６個のアルカノイル基を
表わす〕の3β―ヒドロキシ―△5―ステロイドを
ボトリオジプロデイア・マロルム
（Botryodiplodia malorum）の培養菌を用いて
発酵させ、場合により一般式（）の得られた
3β，7β―ジヒドロキシ―△5―ステロイドをトリ
メチル酢酸無水物、tert―ブチル―ジメチルシリ
ルクロリド、ジメチル―２―（３―メチル―ブチ
ル）―シリルクロリドまたはトリベンジルシリル
クロリドと反応させることを特徴とする3β，7β
―ジヒドロキシステロイドの製造方法に関する。 一般式（）の3β，7β―ジヒドロキシ―△5―
ステロイドは、薬学的に有効なステロイドの部分
合成に重要な中間体である。 本発明方法によれば、７位が未置換の対応する
化合物からこれらの化合物を高収率で製造するこ
とができる。 本発明方法の第一反応工程は、ステロイドを培
養菌を用いて微生物学的にヒドロキシル化する際
に通常適用する条件下に実施する。まず一般に用
いられている予備試験において、最も好ましい発
酵条件、例えば最も好ましい培養基、適当な基質
溶媒若しくは懸濁剤、基質濃度、技術的条件、例
えば温度、通風、PH値及び最適生育時間の選択、
基質の添加並びに微生物の酵素との基質接触を分
析、特に薄層クロマトグラフイーにより測定す
る。その際、培養基１当り基質約100〜2000mg
の濃度を使用するのが有利であることが判つた。
PH値を５〜７の範囲の数値に調節するのが有利で
ある。培養温度は20〜40℃、好ましくは25〜35℃
の範囲である。通風のため、培養ブロス１当り
毎分空気0.5〜５を供給するのが有利である。
基質の変動を抽出試料の薄層クロマトグラフイー
分析により行うのが有利である。発酵時間は約20
〜80時間である。 発酵を行なつた後、発酵生成物を自体公知の方
法で単離する。単離は、例えば発酵バツチを水と
混和しない有機溶媒、例えば酢酸エチル、酢酸ブ
チルまたはメチルイソブチルケトンで抽出し、抽
出液を濃縮し、こうして得られた粗生成物を場合
によりクロマトグラフイー及び／または結晶化に
よつて精製することにより行なうことができる。 本発明方法の好ましい出発化合物は、置換基Ｒ
として水素原子、アセチル基、プロピオニル基ま
たはブチリル基を有する一般式（）の化合物で
ある。 一般式（）の△5―ステロイドが7β―位でヒ
ドロキシル化されることは意外である。それとい
うのは対応する△4―ステロイドがボルトリオジ
プロデイア・マロルムにより7α―位でヒドロキ
シル化されることが知られているからである（ヨ
ーロツパ特許出願第0014991号明細書）。 3β，7β―ジヒドロキシ―△5―ステロイドの３
―ヒドロキシ基の選択的保護が著しく困難である
ことは、古くから公知である（J.Amer.Chem.
Soc.74、1952、3310）。この化合物と、常法で立
体障害のあるヒドロキシ基の他に立体障害のない
ヒドロキシ基の選択的保護に使用する、例えばト
リメチルアセチルクロリドまたはトリフエニルク
ロロメタン―試薬との反応は、若干の試験が示す
ように、所望の結果を生じない。 一般式（）の化合物の3β―ヒドロキシ基の
選択的保護は意外にも、この物質をトリメチル酢
酸無水物と、好ましくは触媒として４―ジメチル
アミノピリジンまたは４―ピロリジノピリジンを
使用して反応させるか、またはこれらの化合物を
tert―ブチル―ジメチルシリルクロリド、ジメチ
ル―２―（３―メチル―ブチル）―シリルクロリ
ドまたはトリベンジルシリルクロリドと、好まし
くは有機塩基（ピリジン、イミダゾール、トリエ
チルアミン、４―ジメチルアミノ―ピリジン、ル
チジン、コリジン等）を使用して反応させる場合
に、成功する。 下記の実施例は本発明方法を詳述するものであ
り、また公知アンドロステロン―拮抗作用を有す
る6β，7β；15β，16β―ジメチレン―３―オキソ
―17α―プレグネ―４―エン―21，17―カルボラ
クトンの製造に対する本発明の生成物の産業上の
利用性を説明するものである。 Ａ 本発明による化合物の製造に関する実施例 例 １ １％の殿粉糖及び１％の大豆粉から成り、オー
トクレーブ中で120℃で30分滅菌し、PH6.2に調節
した栄養溶液500mlを入れた２のエルレンマイ
ヤーフラスコにボトリオジプロデイア・マロルム
（CBS13450）の菌株の斜面培養菌を接種し、回
転振盪機上で２1/2日振盪する。 この増殖培養菌を、121℃、1.1ゲージ圧で60分
間滅菌した、増殖培養と同じ組成の培地15を入
れた20の予備発酵槽に接種する。消泡剤として
シリコーンSHを添加して29℃で0.7ゲージ圧で送
風（15／分）及び撹拌（220回転／分）下に24
時間発芽させる。 その後、この培養菌0.9を無菌条件下で採取
し、予備発酵槽の培養と同じ組成の、上記のよう
に滅菌した培地14を入れた20の主発酵槽に接
種する。予備発酵の条件下で12時間の生長期の
後、１％ツイーン80水溶液2250ml中の微粉状3β
―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―５―アン
ドロステン―17―オン30ｇの殺菌懸濁液を添加
し、更に撹拌し、通風する。発酵の進行を、試料
を採取し、メチルイソブチルケトンで抽出し、薄
層クロマトグラフイーにより分析することによつ
て管理する。48時間の接触時間後、基質の反応を
終了させる。遠心濾過機で遠心分離により培養液
から菌糸体を除去し、澄明な濾液を毎回10のメ
チルイソブチルケトンで３回抽出し、抽出液をメ
チルイソブチルケトンで同様に抽出した菌糸体の
抽出液と合する。回転蒸発器で溶液を濃縮した
後、引続き50℃の浴温で真空中で回転蒸発器中で
濃縮乾燥する。油状―結晶性残渣をイソプロピル
エーテルに取り、濾紙上で吸引濾過する。真空乾
燥器中で70℃で４時間乾燥した後、融点199〜202
℃の3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレ
ン―５―アンドロステン―17―オン23.6ｇが得ら
れる。 例 ２ 例１の条件下で3β―アセトキシ―15β，16β―
メチレン―５―アンドロステン―17―オン22.5ｇ
をボトリオジプロデイア・マロルムで発酵させ、
その際融点197〜200℃の3β，7β―ジヒドロキシ
―15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―
17―オン16.3ｇが得られる。 例 ３ 例１の条件下で3β―ヒドロキシ―15β，16β―
メチレン―17α―プレグネ―５―エン―21，17―
カルボラクトン22.5ｇをボトリオジプロデイア・
マロルムと共に温置し、その際融点173〜175℃の
3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン―
17α―プレグネ―５―エン―21，17―カルボラク
トンが得られる。 例 ４ ピリジン1460ml中の3β，7β―ジヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―17
―オン195ｇの溶液をピバリン酸無水物293ml及び
ジメチルアミノピリジン31ｇと混合する。室温で
72時間の反応時間後、粗生成物を氷水15で沈殿
させ、吸引濾過し、洗浄し、60℃で乾燥する。ア
セトンとジクロロメタンとの混合物から再結晶し
た後、7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―
3β―ピバロイルオキシ―５―アンドロステン―
17―オン185.4ｇが得られる。融点236℃〔α〕D＝
−45゜（クロロホルム）。 例 ５ ジメチルホルムアミド1000ml中の3β，7β―ジ
ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―５―アンド
ロステン―17―オン120ｇの溶液をイミダゾール
31ｇと混合し、−20℃に冷却する。これにジメチ
ルホルムアミド450ml中のtert―ブチル―ジメチ
ルクロロシラン63ｇを２時間以内に滴加し、１時
間更に撹拌する。反応生成物を塩化ナトリウム含
有水で沈殿させ、濾別し、水で洗浄し、塩化メチ
レンに溶かす。溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥
し、蒸発する。シリカゲルでヘキサンとアセトン
との混合物でクロマトグラフイー処理した後、
3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキシ）―
7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―５―ア
ンドロステン―17―オン128.8ｇが得られる。 例 ６ テトラヒドロフラン2.5及びピリジン250ml中
の3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―５―アンドロステン―17―オン100ｇの溶液を
―20℃に冷却し、１時間以内にジメチル―２―
（３―メチル―ブチル）―シリルクロリド88mlと
混合し、この温度で４時間撹拌する。その後、メ
タノール50mlと混合し、真空中で濃縮する。粗生
成物をシリカゲルで塩化メチレンとアセトンとの
混合物を用いてクロマトグラフイー処理する。油
状物として3β―〔ジメチル―２―（３―メチル
―ブチル）―シロキシ〕―7β―ヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―17
―オン98.5ｇが得られる。〔α〕D＝−36゜（クロロホ
ルム）。 例 ７ 塩化メチレン750ml中の3β，7β―ジヒドロキシ
―15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―
17―オン15.7ｇの溶液をトリエチルアミン９ml及
びジメチルアミノピリジン200mgと混合し、―20
℃に冷却する。これに30分以内に塩化メチレン10
ml中のトリベンジルシリルクロリド19.4ｇを滴加
する。−20℃で１時間、０℃で１時間撹拌し、塩
化メチレン希釈し、1N塩酸、飽和炭酸水素ナト
リウム溶液及び水で洗浄する。硫酸ナトリウム上
で乾燥した後、真空中で濃縮する。シリカゲルで
ヘキサンとアセトンとの混合物を用いてクロマト
グラフイーを行なつた後、3β―トリベンジルシ
リルオキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―５―アンドロステン―17―オン27.5ｇが得
られる。 例 ８ 3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―17α―プレグネ―５―エン―21，17―カルボラ
クトン16.0ｇをジメチルホルムアミド130mlに溶
かし、溶液をイミダゾール４ｇと混合し、−20℃
に冷却する。30分以内に、ジメチルホルムアミド
60ml中のtert―ブチルジメチルクロロシラン８ｇ
を滴加し、更に冷却しながら２時間撹拌する。反
応溶液を水中に注ぎ、沈殿した生成物を濾別し、
洗浄し、乾燥する。粗生成物をシリカゲルでアセ
トンとヘキサンとの混合物でクロマトグラフイー
する。収量：3β―（tert―ブチル―ジメチルシリ
ルオキシ）―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―17α―プレグネ―５―エン―21，17―カル
ボラクトン15.4ｇ。 Ｂ 本発明による化合物の産業上の利用性を示す
実施例 例 １ ａ トルエン1600ml中の7β―ヒドロキシ―15β，
16β―メチレン―3β―ピバロイルオキシ―５―
アンドロステン―17―オン160ｇの懸濁液を80
℃で、酸化バナジウム（）―アセチルアセト
ネート1.6ｇを添加した後、２時間以内にトル
エン475ml中の80％tert―ブチルヒドロペルオ
キシド160mlと混合する。冷却後、溶液を水で
洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で
蒸発する。５，6β―エポキシ―7β―ヒドロキ
シ―15β，16β―メチレン―3β―ピバロイルオ
キシ―5β―アンドロスタン―17―オンの収量
171ｇ。アセトンとヘキサンとの混合物から再
結晶した試料は220℃で融解する。〔α〕D＝−
12゜（クロロホルム）。 ｂ それぞれ340mlのジクロロメタン、四塩化炭
素及びピリジンから成る混合物中の５，6β―
エポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―3β―ピバロイルオキシ―5β―アンドロ
スタン―17―オン169ｇの溶液をトリフエニル
ホスフイン200ｇと混合し、室温で２時間撹拌
する。反応溶液を水で洗浄し、硫酸ナトリウム
上で乾燥し、真空中で濃縮乾燥する。残分をエ
タノール310mlと共に撹拌し、濾過する。フイ
ルターケーキをエタノール175mlで洗浄し、真
空中で乾燥する。7α―クロロ―５，6β―エポ
キシ―15β，16β―メチレン―3β―ピバロイル
オキシ―5β―アンドロスタン―17―オン139.2
ｇが得られる。アセトンとヘキサンとの混合物
から再結晶した分析試料は228℃の融点を有す
る。〔α〕D＝−100゜（クロロホルム）。 ｃ 酢酸500ml及びテトラヒドロフラン800ml中の
7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，16β―
メチレン―3β―ピバロイルオキシ―7β―アン
ドロスタン―17―オン196ｇの溶液に70℃で亜
鉛末392ｇを30分間隔で２回にわけて混合し、
この温度で１時間撹拌する。冷却後、亜鉛をセ
ライト上で濾去し、塩化メチレン５で洗浄す
る。合した濾液を水1.5と混合し、撹拌しな
がら固体の炭酸水素ナトリウムを添加して中和
する。引続き、有機相を水で洗浄し、硫酸ナト
リウム上で乾燥し、真空中で濃縮する。得られ
た固体を酢酸エステルと摩擦することによつて
融点243℃の５―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―3β―ピバロイルオキシ―5β―アンドロ
スト―６―エン―17―オン134.7ｇが得られる。 ｄ ５―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―3β
―ピバロイルオキシ―5β―アンドロスト―６
―エン―17―オン134ｇをテトラヒドロフラン
1340ml及びメタノール670ml中に溶かし、粉末
水酸化カリウム40ｇ及び過塩素酸ナトリウム13
ｇと混合する。2.5時間後、水８中に撹拌混
入し、20％硫酸で中和し、沈殿した固体を濾別
する。塩化メチレンに溶かし、硫酸ナトリウム
で乾燥した後、真空中で濃縮する。得られた固
体を酢酸エステルと摩擦することによつて、融
点198℃の3β，５―ジヒドロキシ―15β，16β―
メチレン―5β―アンドロスト―６―エン―17
―オン99.8ｇが得られる。 ｅ エチレングリコールジメチルエーテル520ml
中の3β，５―ジヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―5β―アンドロスト―６―エン―17―オ
ン26ｇの溶液を亜鉛―銅78ｇ及び沃化メチレン
69mlと共に80℃で４時間撹拌する。引続き、塩
化メチレンで希釈し、飽和塩化アンモニウム溶
液及び水で洗浄し、乾燥し、蒸発する。残分を
シリカゲルでクロマトグラフイーする。融点
205.5〜207℃の3β，５―ジヒドロキシ―6β，
7β；15β，16β―ジメチレン―5β―アンドロス
タン―17―オン16.3ｇが得られる。 ｆ 3β，５―ジヒドロキシ―6β，7β；15β，16β
―ジメチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン25.1ｇをテトラヒドロフラン500mlに溶かす。
０℃に冷却しながらアルゴン雰囲気下でこの溶
液にカリウムメチラート75.5ｇを加え、引続き
撹拌しながら、テトラヒドロフラン104mlに溶
かしたプロパルギルアルコール50.4mlを滴加す
る。反応混合物を０℃で20時間撹拌し、氷水中
に注ぐ。希釈した硫酸で中和した後、生じた沈
殿を濾別し、乾燥する。粗生成物をシリカゲル
でクロマトグラフイーする。融点202〜203℃
（アセトン）の17α―（３―ヒドロキシ―１―
プロピニル）―6β，7β；15β，16β―ジメチレ
ン―5β―アンドロスタン―3β，５，17β―トリ
オール25ｇが得られる。 ｇ 17α―（３―ヒドロキシ―１―プロピニル）
―6β，7β；15β，16β―ジメチレン―5β―アン
ドロスタン―3β，５，17β―トリオール24.5ｇ
をテトラヒドロフラン250ml及びメタノール125
ml中でパラジウム黒（10％）3.75ｇ及びピリジ
ン0.5mlの存在で２当量の水素が吸収されるま
で水素添加する。触媒を濾去し、蒸発する。
17α―（３―ヒドロキシプロピル）―6β，7β；
15β，16β―ジメチレン―5β―アンドロスタン
―3β，５，17β―トリオール24.7ｇが得られ、
これを更に精製することなく次の工程に使用す
る。 ｈ ピリジン247ml中の17α―（３―ヒドロキシ
プロピル）―6β，7β；15β，16β―ジメチレン
―5β―アンドロスタン―3β，５，17βトリオー
ル24.7ｇの溶液を水247ml及びピリジン494mlの
酸化クロム（）74.1ｇの溶液と混合し、50℃
で16時間撹拌する。その後、塩化メチレンで希
釈し、水で洗浄し、乾燥し、蒸発する。残分を
シリカゲルでクロマトグラフイーする。ジ―イ
ソプロピルエーテルとアセトンとの混合物から
再結晶した後、融点196.5〜197.5℃の6β，7β；
15β，16β―ジメチレン―３―オキソ―17α―プ
レグネ―４―エン―21，17―カルボラクトン
14.5ｇが得られる。 例 ２ ａ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―５―アンドロステン―17―オン128ｇをトル
エン750mlに溶かし、80℃で酸化バナジウム
（）―アセチルアセトネート500mgと混合す
る。これにtert―ブチル―ヒドロペルオキシド
溶液460ml（80％tert―ブチル―ヒドロペルオ
キシド100ml及びトルエン400mlから成る）を滴
加し、この温度で1.5時間放置する。冷却後、
水及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸
ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発する。融
点189℃の3β―（tert―ブチル―ジメチルシリ
ルオキシ）―５，6β―エポキシ―7β―ヒドロ
キシ―15β，16β―メチレン―5β―アンドロス
タン―17―オン126.5ｇが得られる。〔α〕D＝−
8.8゜（クロロホルム）。 ｂ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―５，６―エポキシ―7β―ヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―5β―アンドロスタン―
17―オン126ｇを塩化メチレン600ml、四塩化炭
素600ml及びピリジン300mlの混合物中に溶か
し、トリフエニルホスフイン193.8ｇと共に2.5
時間撹拌する。引続き、水で洗浄し、硫酸ナト
リウム上で乾燥し、真空中で濃縮する。ヘキサ
ンとアセトンとの混合物を用いてシリカゲルで
クロマトグラフイーを行なつた後、融点155.5
℃の3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，
16β―メチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン117.4ｇが得られる。〔α〕D＝−87゜（クロロホ
ルム）。 ｃ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，
16β―メチレン―5β―デアンドロスタン―17―
オン142ｇをテトラヒドロフラン400ml及びメタ
ノール400ml中に溶かし、８％硫酸1000mlと共
に室温で撹拌する。引続きエーテルで希釈し、
飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び水で洗浄し、
硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮す
る。得られた固体をジイソプロピルエーテルと
共に摩擦することにより融点173℃の7α―クロ
ロ―５，6β―エポキシ―3β―ヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―5β―アンドロスタン―
17―オン108ｇが得られる。 ｄ 7α―クロロ―５，6β―エポキシ―3β―ヒド
ロキシ―15β，16β―メチレン―5β―アンドロ
スタン―17―オン107.5ｇを酢酸500ml及びテト
ラヒドロフラン500mlに溶かし、亜鉛末324ｇを
３回に分けて添加した後室温で16時間撹拌す
る。引続き、亜鉛を濾去し、濾液を塩化メチレ
ン希釈し、炭酸水素ナトリウム溶液及び水で洗
浄する。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、真空
中で濃縮する。得られた固体を酢酸エステルと
共に摩擦した後、融点196℃の3β，５―ジヒド
ロキシ―15β，16β―メチレン―5β―アンドロ
スト―６―エン―17―オン91.5ｇが得られる。 例 ３ ａ 740ml中の3β〔ジメチル―２―（３―メチル
―ブチル）―シリルオキシ〕―7β―ヒドロキ
シ―15β，16B―メチレン―５―アンドロステ
ン―17―オン133ｇの溶液を80℃で酸化バナジ
ウム（）―アセチルアセトネート624mgと混
合する。これにtert―ブチルヒドロペルオキシ
ド溶液470ml（80％tert―ブチルヒドロペルオ
キシド94ml及びトルエン390mlから成る）を２
時間以内に滴加する。溶液を室温で１時間撹拌
する。冷却後、水及び飽和塩化ナトリウム溶液
で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中
で蒸発する。油状物として3β―〔ジメチル―
２―（３―メチル―ブチル）―シリルオキシ〕
―５，6β―エポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，
16β―メチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン135ｇが得られる。〔α〕D＝−16゜（クロロホル
ム） ｂ 3β〔ジメチル―２―（３―メチル―ブチル）
―シリルオキシ〕―５，6β―エポキシ―15β，
16B―メチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン134ｇを塩化メチレン1200ml、四塩化炭素
1200ml及びピリジン600mlの混合物に溶かす。
溶液をトラフエニルホスフイン140ｇと混合し、
室温で３時間撹拌する。引続き、水で洗浄し、
硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮す
る。ヘキサンとアセトンとの混合物を用いてシ
リカゲルでクロマトグラフイーを行なつた後、
7α―クロロ―3β〔ジメチル―２（３―メチル―
ブチル―シリルオキシ〕―５，6β―エポキシ
―15β，16B―メチレン―5β―アンドロスタン
―17―オン126.4ｇが油状物として得られる。
〔α〕D＝−72゜（クロロホルム）。 ｃ テトラヒドロフラン500mlとメタノール500ml
との混合物中の7α―クロロ―3β―〔ジメチル
―２―（３―メチル―ブチル）―シリルオキ
シ〕―５，6β―エポキシ―15β，16B―メチレ
ン―5β―アンドロスタン―17―オン107ｇの溶
液を８％硫酸100mlと混合し、室温で撹拌する。
引続き、エーテルで希釈し、飽和炭酸水素ナト
リウム溶液及び水で洗浄し、硫酸ナトリウム上
で乾燥し、真空中で濃縮する。得られた固体を
ジイソプロピルエーテルと摩擦することによつ
て融点173.5℃の7α―クロロ―５，6β―エポキ
シ―3β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―
5β―アンドロスタン―17―オン74.5ｇが得られ
る。 例 ４ ａ 3β―トリベンジルシリルオキシ―7β―ヒド
ロキシ―15β，16β―メチレン―５―アンドロ
ステン―17―オン24ｇ―をトルエン50mlに溶か
し、塩化バナジウム（）―アセチルアセトネ
ート500mgと混合し、80℃に加熱する。これに
tert―ブチルヒドロペルオキシド溶液75ml（ト
ルエン100ml中の80％tert―ブチルヒドロペル
オキシド10ml）を滴加し、この温度で1.5時間
放置する。冷却後、水及び飽和塩化ナトリウム
溶液を洗浄し、乾燥し、真空中で蒸発する。
3β―トリベンジルシリルオキシ―５，6β―エ
ポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレ
ン―5β―アンドロスタン―17―オン24.5ｇが得
られる。 ｂ 3β―トリベンジルシリルオキシ―５，6β―
エポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―5β―アンドロスタン―17―オン24ｇを
塩化メチレン250ml、四塩化炭素250ml及びピリ
ジン125mlの混合物に溶かし、トリフエニルホ
スフイン24ｇと共に３時間撹拌する。引続き、
水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空
中で濃縮する。ヘキサンとアセトンとの混合物
を用いてシリカゲルでクロマトグラフイーを行
なつた後、3β―トリベンジルシリルオキシ―
7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，16β―
メチレン―5β―アンドロスタン―17―オン19.8
ｇが得られる。 ｃ 3β―トリベンジルシリルオキシ―7α―クロ
ロ―５，6β―エポキシ―15β，16β―メチレン
―5β―アンドロスタン―17―オン19ｇをテト
ラヒドロフラン50ml及びメタノール50mlに溶か
し、８％硫酸15mlと共に室温で２時間撹拌す
る。引続き、エーテルで希釈し、飽和炭酸水素
ナトリウム溶液及び水で洗浄し、硫酸ナトリウ
ム上で乾燥し、真空中で濃縮する。得られた固
体をジイソプロピルエーーテルと摩擦すること
により融点172℃の7α―クロロ―５，6β―エポ
キシ―3β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―5β―アンドロスタン―17―オン8.7ｇが得ら
れる。 例 ５ ａ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―17α―プレグネ―５―エン―21，17―カルボ
ラクトン15.0ｇを例2a）〜例2d）により3β，５
―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン―5β，
17の―プレグネ―６―エン―21，17―カルボラ
クトンに変える。収量：10.3ｇ、融点236℃。 ｂ 3β，５―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレ
ン―3β，17α―プレグネ―６―エン―21，17―
カルボラクトン５ｇをテトラヒドロフラン100
mlに溶かし、亜鉛―銅15ｇと混合する。これに
７時間以内に、温度が30℃を越えないように沃
化メチレン13.2mlを滴加し、室温で更に10時間
撹拌する。金属を除去するため、セライト上で
濾過し、濾液を塩化メチレンで希釈し、飽和炭
酸アンモニウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウ
ム上で乾燥し、真空中で濃縮する。残分をシリ
カゲルでクロマトグラフイーする。油状物とし
て3β，５―ジヒドロキシ―6β，7β；15β，16β
―ジメチレン―5β，17α―プレグナン―21，17
―カルボラクトン4.4ｇが得られる。 ｃ 3β，５―ジヒドロキシ―6β，7β；15β，16β
―ジメチレン―5β，17α―プレグナン―21，17
―カルボラクトン2.8ｇをピリジン28mlに溶か
し、ピリジン28ml及び水14ml中の酸化クロム
（）15ｇの溶液と混合し、50℃で16時間撹拌
する。冷却後、塩化メチレンで希釈し、水で洗
浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で
濃縮する。残分をシリカゲルでクロマトグラフ
イーする。融点198〜198.5℃の6β，7β；15β，
16β―ジメチレン―３―オキソ―17α―プレグ
ネ―４―エン―21，17―カルボラクトン2.3ｇ
が得られる。
tert―ブチル―ジメチルシリル基、ジメチル―２
―（３―メチルブチル）―シリル基またはトリベ
ンジルシリル基を表わす〕の3β，7β―ジヒドロ
キシ―△5―ステロイドを製造するため、一般式
（）： 〔式中Ｑは前記のものを表わし、R2は水素原
原子または炭素原子２〜６個のアルカノイル基を
表わす〕の3β―ヒドロキシ―△5―ステロイドを
ボトリオジプロデイア・マロルム
（Botryodiplodia malorum）の培養菌を用いて
発酵させ、場合により一般式（）の得られた
3β，7β―ジヒドロキシ―△5―ステロイドをトリ
メチル酢酸無水物、tert―ブチル―ジメチルシリ
ルクロリド、ジメチル―２―（３―メチル―ブチ
ル）―シリルクロリドまたはトリベンジルシリル
クロリドと反応させることを特徴とする3β，7β
―ジヒドロキシステロイドの製造方法に関する。 一般式（）の3β，7β―ジヒドロキシ―△5―
ステロイドは、薬学的に有効なステロイドの部分
合成に重要な中間体である。 本発明方法によれば、７位が未置換の対応する
化合物からこれらの化合物を高収率で製造するこ
とができる。 本発明方法の第一反応工程は、ステロイドを培
養菌を用いて微生物学的にヒドロキシル化する際
に通常適用する条件下に実施する。まず一般に用
いられている予備試験において、最も好ましい発
酵条件、例えば最も好ましい培養基、適当な基質
溶媒若しくは懸濁剤、基質濃度、技術的条件、例
えば温度、通風、PH値及び最適生育時間の選択、
基質の添加並びに微生物の酵素との基質接触を分
析、特に薄層クロマトグラフイーにより測定す
る。その際、培養基１当り基質約100〜2000mg
の濃度を使用するのが有利であることが判つた。
PH値を５〜７の範囲の数値に調節するのが有利で
ある。培養温度は20〜40℃、好ましくは25〜35℃
の範囲である。通風のため、培養ブロス１当り
毎分空気0.5〜５を供給するのが有利である。
基質の変動を抽出試料の薄層クロマトグラフイー
分析により行うのが有利である。発酵時間は約20
〜80時間である。 発酵を行なつた後、発酵生成物を自体公知の方
法で単離する。単離は、例えば発酵バツチを水と
混和しない有機溶媒、例えば酢酸エチル、酢酸ブ
チルまたはメチルイソブチルケトンで抽出し、抽
出液を濃縮し、こうして得られた粗生成物を場合
によりクロマトグラフイー及び／または結晶化に
よつて精製することにより行なうことができる。 本発明方法の好ましい出発化合物は、置換基Ｒ
として水素原子、アセチル基、プロピオニル基ま
たはブチリル基を有する一般式（）の化合物で
ある。 一般式（）の△5―ステロイドが7β―位でヒ
ドロキシル化されることは意外である。それとい
うのは対応する△4―ステロイドがボルトリオジ
プロデイア・マロルムにより7α―位でヒドロキ
シル化されることが知られているからである（ヨ
ーロツパ特許出願第0014991号明細書）。 3β，7β―ジヒドロキシ―△5―ステロイドの３
―ヒドロキシ基の選択的保護が著しく困難である
ことは、古くから公知である（J.Amer.Chem.
Soc.74、1952、3310）。この化合物と、常法で立
体障害のあるヒドロキシ基の他に立体障害のない
ヒドロキシ基の選択的保護に使用する、例えばト
リメチルアセチルクロリドまたはトリフエニルク
ロロメタン―試薬との反応は、若干の試験が示す
ように、所望の結果を生じない。 一般式（）の化合物の3β―ヒドロキシ基の
選択的保護は意外にも、この物質をトリメチル酢
酸無水物と、好ましくは触媒として４―ジメチル
アミノピリジンまたは４―ピロリジノピリジンを
使用して反応させるか、またはこれらの化合物を
tert―ブチル―ジメチルシリルクロリド、ジメチ
ル―２―（３―メチル―ブチル）―シリルクロリ
ドまたはトリベンジルシリルクロリドと、好まし
くは有機塩基（ピリジン、イミダゾール、トリエ
チルアミン、４―ジメチルアミノ―ピリジン、ル
チジン、コリジン等）を使用して反応させる場合
に、成功する。 下記の実施例は本発明方法を詳述するものであ
り、また公知アンドロステロン―拮抗作用を有す
る6β，7β；15β，16β―ジメチレン―３―オキソ
―17α―プレグネ―４―エン―21，17―カルボラ
クトンの製造に対する本発明の生成物の産業上の
利用性を説明するものである。 Ａ 本発明による化合物の製造に関する実施例 例 １ １％の殿粉糖及び１％の大豆粉から成り、オー
トクレーブ中で120℃で30分滅菌し、PH6.2に調節
した栄養溶液500mlを入れた２のエルレンマイ
ヤーフラスコにボトリオジプロデイア・マロルム
（CBS13450）の菌株の斜面培養菌を接種し、回
転振盪機上で２1/2日振盪する。 この増殖培養菌を、121℃、1.1ゲージ圧で60分
間滅菌した、増殖培養と同じ組成の培地15を入
れた20の予備発酵槽に接種する。消泡剤として
シリコーンSHを添加して29℃で0.7ゲージ圧で送
風（15／分）及び撹拌（220回転／分）下に24
時間発芽させる。 その後、この培養菌0.9を無菌条件下で採取
し、予備発酵槽の培養と同じ組成の、上記のよう
に滅菌した培地14を入れた20の主発酵槽に接
種する。予備発酵の条件下で12時間の生長期の
後、１％ツイーン80水溶液2250ml中の微粉状3β
―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―５―アン
ドロステン―17―オン30ｇの殺菌懸濁液を添加
し、更に撹拌し、通風する。発酵の進行を、試料
を採取し、メチルイソブチルケトンで抽出し、薄
層クロマトグラフイーにより分析することによつ
て管理する。48時間の接触時間後、基質の反応を
終了させる。遠心濾過機で遠心分離により培養液
から菌糸体を除去し、澄明な濾液を毎回10のメ
チルイソブチルケトンで３回抽出し、抽出液をメ
チルイソブチルケトンで同様に抽出した菌糸体の
抽出液と合する。回転蒸発器で溶液を濃縮した
後、引続き50℃の浴温で真空中で回転蒸発器中で
濃縮乾燥する。油状―結晶性残渣をイソプロピル
エーテルに取り、濾紙上で吸引濾過する。真空乾
燥器中で70℃で４時間乾燥した後、融点199〜202
℃の3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレ
ン―５―アンドロステン―17―オン23.6ｇが得ら
れる。 例 ２ 例１の条件下で3β―アセトキシ―15β，16β―
メチレン―５―アンドロステン―17―オン22.5ｇ
をボトリオジプロデイア・マロルムで発酵させ、
その際融点197〜200℃の3β，7β―ジヒドロキシ
―15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―
17―オン16.3ｇが得られる。 例 ３ 例１の条件下で3β―ヒドロキシ―15β，16β―
メチレン―17α―プレグネ―５―エン―21，17―
カルボラクトン22.5ｇをボトリオジプロデイア・
マロルムと共に温置し、その際融点173〜175℃の
3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン―
17α―プレグネ―５―エン―21，17―カルボラク
トンが得られる。 例 ４ ピリジン1460ml中の3β，7β―ジヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―17
―オン195ｇの溶液をピバリン酸無水物293ml及び
ジメチルアミノピリジン31ｇと混合する。室温で
72時間の反応時間後、粗生成物を氷水15で沈殿
させ、吸引濾過し、洗浄し、60℃で乾燥する。ア
セトンとジクロロメタンとの混合物から再結晶し
た後、7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―
3β―ピバロイルオキシ―５―アンドロステン―
17―オン185.4ｇが得られる。融点236℃〔α〕D＝
−45゜（クロロホルム）。 例 ５ ジメチルホルムアミド1000ml中の3β，7β―ジ
ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―５―アンド
ロステン―17―オン120ｇの溶液をイミダゾール
31ｇと混合し、−20℃に冷却する。これにジメチ
ルホルムアミド450ml中のtert―ブチル―ジメチ
ルクロロシラン63ｇを２時間以内に滴加し、１時
間更に撹拌する。反応生成物を塩化ナトリウム含
有水で沈殿させ、濾別し、水で洗浄し、塩化メチ
レンに溶かす。溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥
し、蒸発する。シリカゲルでヘキサンとアセトン
との混合物でクロマトグラフイー処理した後、
3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキシ）―
7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―５―ア
ンドロステン―17―オン128.8ｇが得られる。 例 ６ テトラヒドロフラン2.5及びピリジン250ml中
の3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―５―アンドロステン―17―オン100ｇの溶液を
―20℃に冷却し、１時間以内にジメチル―２―
（３―メチル―ブチル）―シリルクロリド88mlと
混合し、この温度で４時間撹拌する。その後、メ
タノール50mlと混合し、真空中で濃縮する。粗生
成物をシリカゲルで塩化メチレンとアセトンとの
混合物を用いてクロマトグラフイー処理する。油
状物として3β―〔ジメチル―２―（３―メチル
―ブチル）―シロキシ〕―7β―ヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―17
―オン98.5ｇが得られる。〔α〕D＝−36゜（クロロホ
ルム）。 例 ７ 塩化メチレン750ml中の3β，7β―ジヒドロキシ
―15β，16β―メチレン―５―アンドロステン―
17―オン15.7ｇの溶液をトリエチルアミン９ml及
びジメチルアミノピリジン200mgと混合し、―20
℃に冷却する。これに30分以内に塩化メチレン10
ml中のトリベンジルシリルクロリド19.4ｇを滴加
する。−20℃で１時間、０℃で１時間撹拌し、塩
化メチレン希釈し、1N塩酸、飽和炭酸水素ナト
リウム溶液及び水で洗浄する。硫酸ナトリウム上
で乾燥した後、真空中で濃縮する。シリカゲルで
ヘキサンとアセトンとの混合物を用いてクロマト
グラフイーを行なつた後、3β―トリベンジルシ
リルオキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―５―アンドロステン―17―オン27.5ｇが得
られる。 例 ８ 3β，7β―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―17α―プレグネ―５―エン―21，17―カルボラ
クトン16.0ｇをジメチルホルムアミド130mlに溶
かし、溶液をイミダゾール４ｇと混合し、−20℃
に冷却する。30分以内に、ジメチルホルムアミド
60ml中のtert―ブチルジメチルクロロシラン８ｇ
を滴加し、更に冷却しながら２時間撹拌する。反
応溶液を水中に注ぎ、沈殿した生成物を濾別し、
洗浄し、乾燥する。粗生成物をシリカゲルでアセ
トンとヘキサンとの混合物でクロマトグラフイー
する。収量：3β―（tert―ブチル―ジメチルシリ
ルオキシ）―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―17α―プレグネ―５―エン―21，17―カル
ボラクトン15.4ｇ。 Ｂ 本発明による化合物の産業上の利用性を示す
実施例 例 １ ａ トルエン1600ml中の7β―ヒドロキシ―15β，
16β―メチレン―3β―ピバロイルオキシ―５―
アンドロステン―17―オン160ｇの懸濁液を80
℃で、酸化バナジウム（）―アセチルアセト
ネート1.6ｇを添加した後、２時間以内にトル
エン475ml中の80％tert―ブチルヒドロペルオ
キシド160mlと混合する。冷却後、溶液を水で
洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で
蒸発する。５，6β―エポキシ―7β―ヒドロキ
シ―15β，16β―メチレン―3β―ピバロイルオ
キシ―5β―アンドロスタン―17―オンの収量
171ｇ。アセトンとヘキサンとの混合物から再
結晶した試料は220℃で融解する。〔α〕D＝−
12゜（クロロホルム）。 ｂ それぞれ340mlのジクロロメタン、四塩化炭
素及びピリジンから成る混合物中の５，6β―
エポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―3β―ピバロイルオキシ―5β―アンドロ
スタン―17―オン169ｇの溶液をトリフエニル
ホスフイン200ｇと混合し、室温で２時間撹拌
する。反応溶液を水で洗浄し、硫酸ナトリウム
上で乾燥し、真空中で濃縮乾燥する。残分をエ
タノール310mlと共に撹拌し、濾過する。フイ
ルターケーキをエタノール175mlで洗浄し、真
空中で乾燥する。7α―クロロ―５，6β―エポ
キシ―15β，16β―メチレン―3β―ピバロイル
オキシ―5β―アンドロスタン―17―オン139.2
ｇが得られる。アセトンとヘキサンとの混合物
から再結晶した分析試料は228℃の融点を有す
る。〔α〕D＝−100゜（クロロホルム）。 ｃ 酢酸500ml及びテトラヒドロフラン800ml中の
7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，16β―
メチレン―3β―ピバロイルオキシ―7β―アン
ドロスタン―17―オン196ｇの溶液に70℃で亜
鉛末392ｇを30分間隔で２回にわけて混合し、
この温度で１時間撹拌する。冷却後、亜鉛をセ
ライト上で濾去し、塩化メチレン５で洗浄す
る。合した濾液を水1.5と混合し、撹拌しな
がら固体の炭酸水素ナトリウムを添加して中和
する。引続き、有機相を水で洗浄し、硫酸ナト
リウム上で乾燥し、真空中で濃縮する。得られ
た固体を酢酸エステルと摩擦することによつて
融点243℃の５―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―3β―ピバロイルオキシ―5β―アンドロ
スト―６―エン―17―オン134.7ｇが得られる。 ｄ ５―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―3β
―ピバロイルオキシ―5β―アンドロスト―６
―エン―17―オン134ｇをテトラヒドロフラン
1340ml及びメタノール670ml中に溶かし、粉末
水酸化カリウム40ｇ及び過塩素酸ナトリウム13
ｇと混合する。2.5時間後、水８中に撹拌混
入し、20％硫酸で中和し、沈殿した固体を濾別
する。塩化メチレンに溶かし、硫酸ナトリウム
で乾燥した後、真空中で濃縮する。得られた固
体を酢酸エステルと摩擦することによつて、融
点198℃の3β，５―ジヒドロキシ―15β，16β―
メチレン―5β―アンドロスト―６―エン―17
―オン99.8ｇが得られる。 ｅ エチレングリコールジメチルエーテル520ml
中の3β，５―ジヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―5β―アンドロスト―６―エン―17―オ
ン26ｇの溶液を亜鉛―銅78ｇ及び沃化メチレン
69mlと共に80℃で４時間撹拌する。引続き、塩
化メチレンで希釈し、飽和塩化アンモニウム溶
液及び水で洗浄し、乾燥し、蒸発する。残分を
シリカゲルでクロマトグラフイーする。融点
205.5〜207℃の3β，５―ジヒドロキシ―6β，
7β；15β，16β―ジメチレン―5β―アンドロス
タン―17―オン16.3ｇが得られる。 ｆ 3β，５―ジヒドロキシ―6β，7β；15β，16β
―ジメチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン25.1ｇをテトラヒドロフラン500mlに溶かす。
０℃に冷却しながらアルゴン雰囲気下でこの溶
液にカリウムメチラート75.5ｇを加え、引続き
撹拌しながら、テトラヒドロフラン104mlに溶
かしたプロパルギルアルコール50.4mlを滴加す
る。反応混合物を０℃で20時間撹拌し、氷水中
に注ぐ。希釈した硫酸で中和した後、生じた沈
殿を濾別し、乾燥する。粗生成物をシリカゲル
でクロマトグラフイーする。融点202〜203℃
（アセトン）の17α―（３―ヒドロキシ―１―
プロピニル）―6β，7β；15β，16β―ジメチレ
ン―5β―アンドロスタン―3β，５，17β―トリ
オール25ｇが得られる。 ｇ 17α―（３―ヒドロキシ―１―プロピニル）
―6β，7β；15β，16β―ジメチレン―5β―アン
ドロスタン―3β，５，17β―トリオール24.5ｇ
をテトラヒドロフラン250ml及びメタノール125
ml中でパラジウム黒（10％）3.75ｇ及びピリジ
ン0.5mlの存在で２当量の水素が吸収されるま
で水素添加する。触媒を濾去し、蒸発する。
17α―（３―ヒドロキシプロピル）―6β，7β；
15β，16β―ジメチレン―5β―アンドロスタン
―3β，５，17β―トリオール24.7ｇが得られ、
これを更に精製することなく次の工程に使用す
る。 ｈ ピリジン247ml中の17α―（３―ヒドロキシ
プロピル）―6β，7β；15β，16β―ジメチレン
―5β―アンドロスタン―3β，５，17βトリオー
ル24.7ｇの溶液を水247ml及びピリジン494mlの
酸化クロム（）74.1ｇの溶液と混合し、50℃
で16時間撹拌する。その後、塩化メチレンで希
釈し、水で洗浄し、乾燥し、蒸発する。残分を
シリカゲルでクロマトグラフイーする。ジ―イ
ソプロピルエーテルとアセトンとの混合物から
再結晶した後、融点196.5〜197.5℃の6β，7β；
15β，16β―ジメチレン―３―オキソ―17α―プ
レグネ―４―エン―21，17―カルボラクトン
14.5ｇが得られる。 例 ２ ａ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―５―アンドロステン―17―オン128ｇをトル
エン750mlに溶かし、80℃で酸化バナジウム
（）―アセチルアセトネート500mgと混合す
る。これにtert―ブチル―ヒドロペルオキシド
溶液460ml（80％tert―ブチル―ヒドロペルオ
キシド100ml及びトルエン400mlから成る）を滴
加し、この温度で1.5時間放置する。冷却後、
水及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸
ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発する。融
点189℃の3β―（tert―ブチル―ジメチルシリ
ルオキシ）―５，6β―エポキシ―7β―ヒドロ
キシ―15β，16β―メチレン―5β―アンドロス
タン―17―オン126.5ｇが得られる。〔α〕D＝−
8.8゜（クロロホルム）。 ｂ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―５，６―エポキシ―7β―ヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―5β―アンドロスタン―
17―オン126ｇを塩化メチレン600ml、四塩化炭
素600ml及びピリジン300mlの混合物中に溶か
し、トリフエニルホスフイン193.8ｇと共に2.5
時間撹拌する。引続き、水で洗浄し、硫酸ナト
リウム上で乾燥し、真空中で濃縮する。ヘキサ
ンとアセトンとの混合物を用いてシリカゲルで
クロマトグラフイーを行なつた後、融点155.5
℃の3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，
16β―メチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン117.4ｇが得られる。〔α〕D＝−87゜（クロロホ
ルム）。 ｃ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，
16β―メチレン―5β―デアンドロスタン―17―
オン142ｇをテトラヒドロフラン400ml及びメタ
ノール400ml中に溶かし、８％硫酸1000mlと共
に室温で撹拌する。引続きエーテルで希釈し、
飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び水で洗浄し、
硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮す
る。得られた固体をジイソプロピルエーテルと
共に摩擦することにより融点173℃の7α―クロ
ロ―５，6β―エポキシ―3β―ヒドロキシ―
15β，16β―メチレン―5β―アンドロスタン―
17―オン108ｇが得られる。 ｄ 7α―クロロ―５，6β―エポキシ―3β―ヒド
ロキシ―15β，16β―メチレン―5β―アンドロ
スタン―17―オン107.5ｇを酢酸500ml及びテト
ラヒドロフラン500mlに溶かし、亜鉛末324ｇを
３回に分けて添加した後室温で16時間撹拌す
る。引続き、亜鉛を濾去し、濾液を塩化メチレ
ン希釈し、炭酸水素ナトリウム溶液及び水で洗
浄する。硫酸ナトリウム上で乾燥した後、真空
中で濃縮する。得られた固体を酢酸エステルと
共に摩擦した後、融点196℃の3β，５―ジヒド
ロキシ―15β，16β―メチレン―5β―アンドロ
スト―６―エン―17―オン91.5ｇが得られる。 例 ３ ａ 740ml中の3β〔ジメチル―２―（３―メチル
―ブチル）―シリルオキシ〕―7β―ヒドロキ
シ―15β，16B―メチレン―５―アンドロステ
ン―17―オン133ｇの溶液を80℃で酸化バナジ
ウム（）―アセチルアセトネート624mgと混
合する。これにtert―ブチルヒドロペルオキシ
ド溶液470ml（80％tert―ブチルヒドロペルオ
キシド94ml及びトルエン390mlから成る）を２
時間以内に滴加する。溶液を室温で１時間撹拌
する。冷却後、水及び飽和塩化ナトリウム溶液
で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中
で蒸発する。油状物として3β―〔ジメチル―
２―（３―メチル―ブチル）―シリルオキシ〕
―５，6β―エポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，
16β―メチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン135ｇが得られる。〔α〕D＝−16゜（クロロホル
ム） ｂ 3β〔ジメチル―２―（３―メチル―ブチル）
―シリルオキシ〕―５，6β―エポキシ―15β，
16B―メチレン―5β―アンドロスタン―17―オ
ン134ｇを塩化メチレン1200ml、四塩化炭素
1200ml及びピリジン600mlの混合物に溶かす。
溶液をトラフエニルホスフイン140ｇと混合し、
室温で３時間撹拌する。引続き、水で洗浄し、
硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮す
る。ヘキサンとアセトンとの混合物を用いてシ
リカゲルでクロマトグラフイーを行なつた後、
7α―クロロ―3β〔ジメチル―２（３―メチル―
ブチル―シリルオキシ〕―５，6β―エポキシ
―15β，16B―メチレン―5β―アンドロスタン
―17―オン126.4ｇが油状物として得られる。
〔α〕D＝−72゜（クロロホルム）。 ｃ テトラヒドロフラン500mlとメタノール500ml
との混合物中の7α―クロロ―3β―〔ジメチル
―２―（３―メチル―ブチル）―シリルオキ
シ〕―５，6β―エポキシ―15β，16B―メチレ
ン―5β―アンドロスタン―17―オン107ｇの溶
液を８％硫酸100mlと混合し、室温で撹拌する。
引続き、エーテルで希釈し、飽和炭酸水素ナト
リウム溶液及び水で洗浄し、硫酸ナトリウム上
で乾燥し、真空中で濃縮する。得られた固体を
ジイソプロピルエーテルと摩擦することによつ
て融点173.5℃の7α―クロロ―５，6β―エポキ
シ―3β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン―
5β―アンドロスタン―17―オン74.5ｇが得られ
る。 例 ４ ａ 3β―トリベンジルシリルオキシ―7β―ヒド
ロキシ―15β，16β―メチレン―５―アンドロ
ステン―17―オン24ｇ―をトルエン50mlに溶か
し、塩化バナジウム（）―アセチルアセトネ
ート500mgと混合し、80℃に加熱する。これに
tert―ブチルヒドロペルオキシド溶液75ml（ト
ルエン100ml中の80％tert―ブチルヒドロペル
オキシド10ml）を滴加し、この温度で1.5時間
放置する。冷却後、水及び飽和塩化ナトリウム
溶液を洗浄し、乾燥し、真空中で蒸発する。
3β―トリベンジルシリルオキシ―５，6β―エ
ポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレ
ン―5β―アンドロスタン―17―オン24.5ｇが得
られる。 ｂ 3β―トリベンジルシリルオキシ―５，6β―
エポキシ―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチ
レン―5β―アンドロスタン―17―オン24ｇを
塩化メチレン250ml、四塩化炭素250ml及びピリ
ジン125mlの混合物に溶かし、トリフエニルホ
スフイン24ｇと共に３時間撹拌する。引続き、
水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空
中で濃縮する。ヘキサンとアセトンとの混合物
を用いてシリカゲルでクロマトグラフイーを行
なつた後、3β―トリベンジルシリルオキシ―
7α―クロロ―５，6β―エポキシ―15β，16β―
メチレン―5β―アンドロスタン―17―オン19.8
ｇが得られる。 ｃ 3β―トリベンジルシリルオキシ―7α―クロ
ロ―５，6β―エポキシ―15β，16β―メチレン
―5β―アンドロスタン―17―オン19ｇをテト
ラヒドロフラン50ml及びメタノール50mlに溶か
し、８％硫酸15mlと共に室温で２時間撹拌す
る。引続き、エーテルで希釈し、飽和炭酸水素
ナトリウム溶液及び水で洗浄し、硫酸ナトリウ
ム上で乾燥し、真空中で濃縮する。得られた固
体をジイソプロピルエーーテルと摩擦すること
により融点172℃の7α―クロロ―５，6β―エポ
キシ―3β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―5β―アンドロスタン―17―オン8.7ｇが得ら
れる。 例 ５ ａ 3β―（tert―ブチル―ジメチルシリルオキ
シ）―7β―ヒドロキシ―15β，16β―メチレン
―17α―プレグネ―５―エン―21，17―カルボ
ラクトン15.0ｇを例2a）〜例2d）により3β，５
―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレン―5β，
17の―プレグネ―６―エン―21，17―カルボラ
クトンに変える。収量：10.3ｇ、融点236℃。 ｂ 3β，５―ジヒドロキシ―15β，16β―メチレ
ン―3β，17α―プレグネ―６―エン―21，17―
カルボラクトン５ｇをテトラヒドロフラン100
mlに溶かし、亜鉛―銅15ｇと混合する。これに
７時間以内に、温度が30℃を越えないように沃
化メチレン13.2mlを滴加し、室温で更に10時間
撹拌する。金属を除去するため、セライト上で
濾過し、濾液を塩化メチレンで希釈し、飽和炭
酸アンモニウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウ
ム上で乾燥し、真空中で濃縮する。残分をシリ
カゲルでクロマトグラフイーする。油状物とし
て3β，５―ジヒドロキシ―6β，7β；15β，16β
―ジメチレン―5β，17α―プレグナン―21，17
―カルボラクトン4.4ｇが得られる。 ｃ 3β，５―ジヒドロキシ―6β，7β；15β，16β
―ジメチレン―5β，17α―プレグナン―21，17
―カルボラクトン2.8ｇをピリジン28mlに溶か
し、ピリジン28ml及び水14ml中の酸化クロム
（）15ｇの溶液と混合し、50℃で16時間撹拌
する。冷却後、塩化メチレンで希釈し、水で洗
浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で
濃縮する。残分をシリカゲルでクロマトグラフ
イーする。融点198〜198.5℃の6β，7β；15β，
16β―ジメチレン―３―オキソ―17α―プレグ
ネ―４―エン―21，17―カルボラクトン2.3ｇ
が得られる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 一般式（）： 〔式中Ｑは基【式】または【式】を表 わし、R1は水素原子、トリメチルアセチル基、
tert―ブチル―ジメチルシリル基、ジメチル―２
―（３―メチルブチル）―シリル基またはトリベ
ンジルシリル基を表わす〕の3β，7β―ジヒドロ
キシ―△5―ステロイドを製造するため、一般式
（）： 〔式中Ｑは前記のものを表わし、R2は水素原
子または炭素原子２〜６個のアルカノイル基を表
わす〕の3β―ヒドロキシ―△5―ステロイドをボ
トリオジプロデイア・マロルム
（Botryodiplodia malorum）の培養菌を用いて
発酵させ、場合により一般式（）の得られた
3β，7β―ジヒドロキシ―△5―ステロイドをトリ
メチル酢酸無水物、tert―ブチル―ジメチルシリ
ルクロリド、ジメチル―２―（３―メチル―ブチ
ル）―シリルクロリドまたはトリベンジルシリル
クロリドと反応させることを特徴とする3β，7β
―ジヒドロキシステロイドの製造方法。 ２ ボトリオジプロデイア・マロルム
（CBS13450）の培養菌を用いて発酵を実施する
特許請求の範囲第１項記載の3β，7β―ジヒドロ
キシステロイドの製造方法。
Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|---|---|
| DE19803042136 DE3042136A1 (de) | 1980-11-03 | 1980-11-03 | Verfahren zur herstellung von 3 (beta), 7 (beta) -dihydroxy- (delta) (pfeil hoch)5(pfeil hoch) -steroiden |
Publications (2)
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|---|---|
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