JPH01218518A - 植物組織培養方法 - Google Patents
植物組織培養方法Info
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- JPH01218518A JPH01218518A JP63040835A JP4083588A JPH01218518A JP H01218518 A JPH01218518 A JP H01218518A JP 63040835 A JP63040835 A JP 63040835A JP 4083588 A JP4083588 A JP 4083588A JP H01218518 A JPH01218518 A JP H01218518A
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- tissue culture
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は植物の組織片や培養細胞を特定の方法によって
組織培養することにより、種苗あるいは細胞を大量に増
殖する方法に関する。
組織培養することにより、種苗あるいは細胞を大量に増
殖する方法に関する。
キャベツ、トマト、ジャガイモ、アスパラガス、ニンジ
ン、ダイズ、タマネギなどの野菜類やイネは食用として
利用されており、またチューリップ、トレニア、鉄砲ユ
リ、ヤグルマギク、ルドベキアなどは園芸植物として鑑
賞用に愛好されている。
ン、ダイズ、タマネギなどの野菜類やイネは食用として
利用されており、またチューリップ、トレニア、鉄砲ユ
リ、ヤグルマギク、ルドベキアなどは園芸植物として鑑
賞用に愛好されている。
これらの植物の増殖は、従来、播種、球根分割、塊茎分
割などによって行なわれてきた。しかし、このような増
殖法は多くの人手と土地を必要とするばかりでなく、近
年ではウィルス病の蔓延により種苗の生育速度の低下や
花の品質低下が問題となっている。また、優良形質を持
つ品質を育成維持するためには、栄養繁殖を行なわせる
ことが有効である。これらの問題点を改良し、増殖効率
の向上を目的として近年植物組織培養技術を利用した方
法も報告されている（例えば特開昭５５−１５７３４号
公報）。組織培養技術による増殖は培養組織片、培養細
胞からの不定芽、不定胚、球根等の分化をへて達成され
、またこれらの分化は植物ホルモンであるオーキシンと
サイトカイニンの濃度比によって制御されていると考え
られてきた（例えばＡｎｎａｌｓ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ
、ｖｏｌ ４５＋３２１−３２７．１９８０年）。しか
し、植物ホルモンのみでは分化は起こらない植物種や分
化が起こったとしてもその頻度が非常に低い植物種も多
数存在し、より直接的かつ効果的な分化誘導方法の確立
が期待されている。また培養細胞は有用物質の生産等に
利用されているが、その増殖は植物ホルモンを用いるこ
とによって調節されており、より有効な増殖促進方法の
開発が期待されている。
割などによって行なわれてきた。しかし、このような増
殖法は多くの人手と土地を必要とするばかりでなく、近
年ではウィルス病の蔓延により種苗の生育速度の低下や
花の品質低下が問題となっている。また、優良形質を持
つ品質を育成維持するためには、栄養繁殖を行なわせる
ことが有効である。これらの問題点を改良し、増殖効率
の向上を目的として近年植物組織培養技術を利用した方
法も報告されている（例えば特開昭５５−１５７３４号
公報）。組織培養技術による増殖は培養組織片、培養細
胞からの不定芽、不定胚、球根等の分化をへて達成され
、またこれらの分化は植物ホルモンであるオーキシンと
サイトカイニンの濃度比によって制御されていると考え
られてきた（例えばＡｎｎａｌｓ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ
、ｖｏｌ ４５＋３２１−３２７．１９８０年）。しか
し、植物ホルモンのみでは分化は起こらない植物種や分
化が起こったとしてもその頻度が非常に低い植物種も多
数存在し、より直接的かつ効果的な分化誘導方法の確立
が期待されている。また培養細胞は有用物質の生産等に
利用されているが、その増殖は植物ホルモンを用いるこ
とによって調節されており、より有効な増殖促進方法の
開発が期待されている。
本発明者らは従来の植物の組織培養方法には前記しバ種
々の問題点のあることを認知した上で、従来法とは異な
る新規な方法によって植物を組織ｆ３ｆｉして該植物の
種苗を従来に比べて効率良く増殖する方法および培養細
胞の増殖を促進する方法について検討した。
々の問題点のあることを認知した上で、従来法とは異な
る新規な方法によって植物を組織ｆ３ｆｉして該植物の
種苗を従来に比べて効率良く増殖する方法および培養細
胞の増殖を促進する方法について検討した。
その結果、本発明者らは植物の細胞に作用して該植物の
不定芽、不定胚および球根の分化を促進させるとともに
、細胞の増殖を促進させる物質を見出し、これらの知見
を基にして植物の種苗もしくは細胞を効率良く増殖する
方法を見出した。すなわち本発明の方法によれば、植物
の組織片または培養細胞をプロティンキナーゼＣの活性
化剤を含む培地を用いて組織培養することを特徴とする
植物の組織培養方法が提供される。
不定芽、不定胚および球根の分化を促進させるとともに
、細胞の増殖を促進させる物質を見出し、これらの知見
を基にして植物の種苗もしくは細胞を効率良く増殖する
方法を見出した。すなわち本発明の方法によれば、植物
の組織片または培養細胞をプロティンキナーゼＣの活性
化剤を含む培地を用いて組織培養することを特徴とする
植物の組織培養方法が提供される。
本発明に係わる組織培養方法が適用できる植物は、特に
限定はされず、全ての植物に対して適用できる。
限定はされず、全ての植物に対して適用できる。
本発明が適用できる植物として具体的にはナス目、ケシ
目、セリ目、バラ目、ユリ目、キク目、フウロソウ目、
イネ目などに属する植物を例示できる。更に該植物とし
て、具体的には、山岸曙「植物系統分類゛の基礎」北隆
館、１９７４年に記載されている植物を例示でき、より
具体的にはナス目に属する植物としては、ナス、トマト
、ジャガイモ、タバコ等が、ケシ目に属する植物として
、キャベツ、ダイコン等が、セリ目に属する植物として
、ニンジン、パセリ等が、バラ目に属する植物として、
バラ、イチゴ、ダイズ等が、ユリ目に属する植物として
、タマネギ、チューリップ、鉄砲ユリ等が、キク目に属
する植物として、キク、ヤ゛グルマギク、ヒマワリ等が
、フウロソウ目に属する植物として、フウロソウ、アマ
等が、イネ目に属する植物として、イネ、トウモロコシ
等が示される０本発明に係わるこれらの植物の中でも好
ましい植物として具体的にはトマト、ナス、トレニア、
ニンジン、キャベツ、タマ゛ネギ、シソ、ダイズ、ヤグ
ルマギク、ルドベキア、鉄砲ユリ、チューリップ、アス
パ゛ラガス、アマ、イネ等番例示できる。
目、セリ目、バラ目、ユリ目、キク目、フウロソウ目、
イネ目などに属する植物を例示できる。更に該植物とし
て、具体的には、山岸曙「植物系統分類゛の基礎」北隆
館、１９７４年に記載されている植物を例示でき、より
具体的にはナス目に属する植物としては、ナス、トマト
、ジャガイモ、タバコ等が、ケシ目に属する植物として
、キャベツ、ダイコン等が、セリ目に属する植物として
、ニンジン、パセリ等が、バラ目に属する植物として、
バラ、イチゴ、ダイズ等が、ユリ目に属する植物として
、タマネギ、チューリップ、鉄砲ユリ等が、キク目に属
する植物として、キク、ヤ゛グルマギク、ヒマワリ等が
、フウロソウ目に属する植物として、フウロソウ、アマ
等が、イネ目に属する植物として、イネ、トウモロコシ
等が示される０本発明に係わるこれらの植物の中でも好
ましい植物として具体的にはトマト、ナス、トレニア、
ニンジン、キャベツ、タマ゛ネギ、シソ、ダイズ、ヤグ
ルマギク、ルドベキア、鉄砲ユリ、チューリップ、アス
パ゛ラガス、アマ、イネ等番例示できる。
本発明では植物の組織培養は該植物の組織片または培養
細胞を用いて行なうことができる。該組織培養片として
具抹的社は子葉、胚軸、茎頂、茎、葉、リン片、根、ま
たはその他の組織を小片に切断した植物の組織片を例示
することができ、これらの組織片は通常、植物を次亜塩
素酸ソーダやエチルアルコールによって殺菌した後に採
取して使用される。しかし、無菌的に栽培した植物を使
用する場合には、上記の殺菌操作は不用である。また、
無病、無ウィルスの植物の種苗を増殖する場合には、培
養材料として成長点近傍組織、成長点近傍組織から得ら
れた植物の前述した組織片などを用いることができる。
細胞を用いて行なうことができる。該組織培養片として
具抹的社は子葉、胚軸、茎頂、茎、葉、リン片、根、ま
たはその他の組織を小片に切断した植物の組織片を例示
することができ、これらの組織片は通常、植物を次亜塩
素酸ソーダやエチルアルコールによって殺菌した後に採
取して使用される。しかし、無菌的に栽培した植物を使
用する場合には、上記の殺菌操作は不用である。また、
無病、無ウィルスの植物の種苗を増殖する場合には、培
養材料として成長点近傍組織、成長点近傍組織から得ら
れた植物の前述した組織片などを用いることができる。
本発明の植物の組織培養において用いることのできる培
養細胞とは、前記組織片を公知の方法によってＭｉ繊培
養することによって得られるカルス組織を含めた未分化
の不定形細胞である。
養細胞とは、前記組織片を公知の方法によってＭｉ繊培
養することによって得られるカルス組織を含めた未分化
の不定形細胞である。
本発明において植物の組織片または細胞を組織培養して
植物の種苗を形成させ、あるいは細胞を増殖させるに当
たって以下に詳述する方法が採用される。
植物の種苗を形成させ、あるいは細胞を増殖させるに当
たって以下に詳述する方法が採用される。
本発明に係′わる組織培養方法では、植物の組織片また
は培養細胞を、プロティンキナーゼＣの活性化剤を含む
培地を用いて組織培養する方法が用いられる。ここでプ
ロティンキナーゼＣの活性化剤としては、ホルボールエ
ステルが例示され、その中でも特に、１２−０−テトラ
デカノイルホルボール、１３−アセテート（１２−０−
Ｔｅ ｔｒａｄｅｃａｎｏｙ Ｉｐｈｏｒｂｏ １１３
−ａｃｅｔａｔｅ＋以下ＴＰＡと略す）、もしくはホル
ボール−１２，１３−ジブチレート（Ｐｈｏｒｂｏｌ−
１２，１３−ｄｉｂｕ ｔｙｒａ ｔｅ以下ｐＢｔｚと
略す）が好ましく、これらの化合物はプロティンキナー
ゼＣを活性化することが知られている（例えばＪｏｕｒ
ｎａｌ ｏｆ ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ ｖｏｌ ２５７，７８４７−７８５１．１９８２年
）、ここで、プロティンキナーゼＣは特定の蛋白質をリ
ン酸化して活性化するが、本発明においては、この活性
化された細胞中の蛋白質が分化を促進するものと推定さ
れる。本発明ではこれらのホルボールエステルから選ば
れる少なくとも１種の化合物を添加した培地を用いて組
織培養する方法が用いられる。
は培養細胞を、プロティンキナーゼＣの活性化剤を含む
培地を用いて組織培養する方法が用いられる。ここでプ
ロティンキナーゼＣの活性化剤としては、ホルボールエ
ステルが例示され、その中でも特に、１２−０−テトラ
デカノイルホルボール、１３−アセテート（１２−０−
Ｔｅ ｔｒａｄｅｃａｎｏｙ Ｉｐｈｏｒｂｏ １１３
−ａｃｅｔａｔｅ＋以下ＴＰＡと略す）、もしくはホル
ボール−１２，１３−ジブチレート（Ｐｈｏｒｂｏｌ−
１２，１３−ｄｉｂｕ ｔｙｒａ ｔｅ以下ｐＢｔｚと
略す）が好ましく、これらの化合物はプロティンキナー
ゼＣを活性化することが知られている（例えばＪｏｕｒ
ｎａｌ ｏｆ ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ ｖｏｌ ２５７，７８４７−７８５１．１９８２年
）、ここで、プロティンキナーゼＣは特定の蛋白質をリ
ン酸化して活性化するが、本発明においては、この活性
化された細胞中の蛋白質が分化を促進するものと推定さ
れる。本発明ではこれらのホルボールエステルから選ば
れる少なくとも１種の化合物を添加した培地を用いて組
織培養する方法が用いられる。
該方法によれば植物の組織片又は培養細胞からの不定芽
、不定胚および球根の分化が著しく促進されるとともに
細胞の増殖も促進される。このような特定の化合物を添
加した培地を用いて組織培養を行なうと分化や増殖が促
進されるということは本発明者に係わる新規な知見であ
る。
、不定胚および球根の分化が著しく促進されるとともに
細胞の増殖も促進される。このような特定の化合物を添
加した培地を用いて組織培養を行なうと分化や増殖が促
進されるということは本発明者に係わる新規な知見であ
る。
本発明では前記したＴＰＡ等の特定の化合物を添加する
のに使用される培地は、無機成分および炭素源を必須成
分とし、これに植物ホルモン類、ビタミン類を添加し、
さらに必要に応じてアミノ酸類を添加した培地である。
のに使用される培地は、無機成分および炭素源を必須成
分とし、これに植物ホルモン類、ビタミン類を添加し、
さらに必要に応じてアミノ酸類を添加した培地である。
該培地の無機成分としては、窒素、リン、カリウム、ナ
トリウム、カルシウム、マグネシウム、イオウ、鉄、マ
ンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、ヨウ素、コ
バルト、銅等の元素を含む無機塩を挙げることができ、
具体的には硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸アンモ
ニウム、塩化アンモニウム、リン酸１水素カリウム、リ
ン酸２水素ナトリウム、硫酸マグネシウム、塩化マグネ
シウム、硫酸ナトリウム、硫酸第１鉄、硫酸第２鉄、硫
酸マンガン、硫酸銅、モリブデン酸アンモニウム、二酸
化モリブデン、モリブデン酸ナトリウム、ヨウ化カリウ
ム、硫酸亜鉛、ホウ酸、塩化コバルト等の化合物を例示
できる。
トリウム、カルシウム、マグネシウム、イオウ、鉄、マ
ンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、ヨウ素、コ
バルト、銅等の元素を含む無機塩を挙げることができ、
具体的には硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸アンモ
ニウム、塩化アンモニウム、リン酸１水素カリウム、リ
ン酸２水素ナトリウム、硫酸マグネシウム、塩化マグネ
シウム、硫酸ナトリウム、硫酸第１鉄、硫酸第２鉄、硫
酸マンガン、硫酸銅、モリブデン酸アンモニウム、二酸
化モリブデン、モリブデン酸ナトリウム、ヨウ化カリウ
ム、硫酸亜鉛、ホウ酸、塩化コバルト等の化合物を例示
できる。
該培地の炭素源としては、ショ糖等の炭水化物とその誘
導体、脂肪酸等の有機酸およびエタノール等の１級アル
コールなどを例示できる。
導体、脂肪酸等の有機酸およびエタノール等の１級アル
コールなどを例示できる。
該培地の植物ホルモン類としては、例えば、ナフタレン
酢酸（ＮＡＡ） 、インドール酢酸（ＩＡＡ）、ｐ−ク
ロロフェノキシ酢酸、２．４−ジクロロフェノキシ酢Ｍ
（２，４−Ｄ） 、インドール酪酸（■ＢＡ）およびこ
れらの誘導体等のオーキシン類およびベンジルアデニン
（ＢＡ） 、カイネチン、ゼアチン等のサイトカイニン
類を例示できる。
酢酸（ＮＡＡ） 、インドール酢酸（ＩＡＡ）、ｐ−ク
ロロフェノキシ酢酸、２．４−ジクロロフェノキシ酢Ｍ
（２，４−Ｄ） 、インドール酪酸（■ＢＡ）およびこ
れらの誘導体等のオーキシン類およびベンジルアデニン
（ＢＡ） 、カイネチン、ゼアチン等のサイトカイニン
類を例示できる。
該培地のビタミン類としては、ビオチン、チアミン（ビ
タミンＢ、）、ピリドキシン（ビタミンＢｂ）、パント
テン酸カルシウム、アスコルビン酸（ビタミンＣ）、イ
ノシトール、ニコチン酸、ニコチン酸アミドおよびリボ
フラビン（ビタミンＢｚ）などを例示できる。
タミンＢ、）、ピリドキシン（ビタミンＢｂ）、パント
テン酸カルシウム、アスコルビン酸（ビタミンＣ）、イ
ノシトール、ニコチン酸、ニコチン酸アミドおよびリボ
フラビン（ビタミンＢｚ）などを例示できる。
該培地のアミノ酸類としては、例えばグリシン、アラニ
ン、グルタミン、グルタミン酸、システィン、フェニー
ルアラニン、プロリンおよびリジンなどを例示できる。
ン、グルタミン、グルタミン酸、システィン、フェニー
ルアラニン、プロリンおよびリジンなどを例示できる。
本発明の前記培地は、通常は、前記無機成分を約０．１
μＨないし約１００１１Ｍ、前記炭素源を約１ｇ／！な
いし約１００ｇ／ｊ！、前記植物ホルモン類を約０．０
１ｍｇ／ Ｅないし約１０ｍｇ／ １．、前記ビタミン
類を約０．１■／ｌないし約１５抛ｇ／ｌおよび前記ア
ミノ酸類をＯないし約１ｇ／２含ませて使用されること
が望ましい。
μＨないし約１００１１Ｍ、前記炭素源を約１ｇ／！な
いし約１００ｇ／ｊ！、前記植物ホルモン類を約０．０
１ｍｇ／ Ｅないし約１０ｍｇ／ １．、前記ビタミン
類を約０．１■／ｌないし約１５抛ｇ／ｌおよび前記ア
ミノ酸類をＯないし約１ｇ／２含ませて使用されること
が望ましい。
本発明に係わる組織培養に用いられる前記培地として具
体的には、従来から知られている植物の組織培養に用い
られている培地、例えば、ムラシゲ・スクーグ（’６２
） （Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓｋｏｏｇ）の培地、
リンスマイヤー・スクーグ（ＲＭ−１９６５） （Ｌｉ
ｎｓｍａｉｅｒ＆ Ｓｋｏｏｇ ）の培地、ホワイト
（’６３） （Ｗｈｉｔｅ ）の培地、ガンボルグ（Ｇ
ａｍｂｏｒｇ ）のＢ−５培地、三井のＭ−９培地、ニ
ッチ・ニッチ（Ｎｉｔｓｃｈ ＆ Ｎ１ｔｓｃｈ）の培
地等に前記した炭素源および植物ホルモンを添加し、更
に必要に応じて前記したビタミン類、アミノ酸類を添加
して調製される培地を例示できるが、本発明ではこの中
でも特にエッチ・エッチ、リンスマイヤー・スクーグ又
はムラシゲ・スクーグの培地を用いて調製される培地が
好ましい。なお、上記した従来公知の培地の組成に関し
ては、例えば、原田、駒嶺著の「植物細胞組織培養ｊ
ｐ３９０〜ｐ３９１、理工学社、１９７９年に記載され
ている。
体的には、従来から知られている植物の組織培養に用い
られている培地、例えば、ムラシゲ・スクーグ（’６２
） （Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓｋｏｏｇ）の培地、
リンスマイヤー・スクーグ（ＲＭ−１９６５） （Ｌｉ
ｎｓｍａｉｅｒ＆ Ｓｋｏｏｇ ）の培地、ホワイト
（’６３） （Ｗｈｉｔｅ ）の培地、ガンボルグ（Ｇ
ａｍｂｏｒｇ ）のＢ−５培地、三井のＭ−９培地、ニ
ッチ・ニッチ（Ｎｉｔｓｃｈ ＆ Ｎ１ｔｓｃｈ）の培
地等に前記した炭素源および植物ホルモンを添加し、更
に必要に応じて前記したビタミン類、アミノ酸類を添加
して調製される培地を例示できるが、本発明ではこの中
でも特にエッチ・エッチ、リンスマイヤー・スクーグ又
はムラシゲ・スクーグの培地を用いて調製される培地が
好ましい。なお、上記した従来公知の培地の組成に関し
ては、例えば、原田、駒嶺著の「植物細胞組織培養ｊ
ｐ３９０〜ｐ３９１、理工学社、１９７９年に記載され
ている。
本発明で使用できる前記培地は液体培地又は寒天を通常
０．５〜１．５％もしくはゲルライトを通常０．２〜０
．４％含有させた固形培地である。
０．５〜１．５％もしくはゲルライトを通常０．２〜０
．４％含有させた固形培地である。
本発明では前記した培地に添加されるホルボールエステ
ル等のプロティンキナーゼＣの活性化剤の培地における
濃度は、通常０．００１ｕＭ ／ｌ〜０．１ａｎ／Ｉ！
、好ましくは０．１〜１０μＭ／ｆの範囲にある。
ル等のプロティンキナーゼＣの活性化剤の培地における
濃度は、通常０．００１ｕＭ ／ｌ〜０．１ａｎ／Ｉ！
、好ましくは０．１〜１０μＭ／ｆの範囲にある。
本発明では前記した植物の組織片又は培養細胞は、本出
願人に係わる特開昭６１−２８５９２８号と同様に酸素
含有気体を通気させた液体培地を用いて組織培養するこ
ともできる。
願人に係わる特開昭６１−２８５９２８号と同様に酸素
含有気体を通気させた液体培地を用いて組織培養するこ
ともできる。
本発明の方法によれば、植物の組織片又は培養細胞から
不定芽、不定胚、子球（小球根）などを効率良く多量に
得ることができる。この点について更に言及すると、本
発明の方法によって得られる不定芽、不炬胚、これを発
根させ植物体とした′後細断して組織片とし、また子球
も同様に切断して、これらを更に本発明に係わる前記し
た培養方法によって組織培養し、種苗を大量に増殖する
ことができる。なお、本発明で得られた植物は通常の栽
培を行なうと、性質が一定で健全な植物に成長させるこ
とができる。
不定芽、不定胚、子球（小球根）などを効率良く多量に
得ることができる。この点について更に言及すると、本
発明の方法によって得られる不定芽、不炬胚、これを発
根させ植物体とした′後細断して組織片とし、また子球
も同様に切断して、これらを更に本発明に係わる前記し
た培養方法によって組織培養し、種苗を大量に増殖する
ことができる。なお、本発明で得られた植物は通常の栽
培を行なうと、性質が一定で健全な植物に成長させるこ
とができる。
また本発明の方法によれば、培養細胞の増殖を著しく促
進することができる。従って物質生産等に利用される培
養細胞を大量に得ることができる。
進することができる。従って物質生産等に利用される培
養細胞を大量に得ることができる。
以下、実施例を用いて本発明の構成および効果を具体的
に説明する。
に説明する。
実施例 １〜２
無菌的に育成した鉄砲ユリの球根からリン片を採取して
幅２■の切片とした後に、ショＩ！４％、ナフタレン酢
１ｆｔ０．１μＨ１ベンジルアデニン０．１μＨ１およ
び本発明に係わる特定の化合物としてＴＰＡおよびｐＢ
ｔｚから選ばれる化合物を表１に示した濃度で含有する
ｐＨ５，７の無菌のムラシゲ・スクーグ（１９６２年）
の固形培地（ゲルライト濃度０．２％）を調製し、これ
に先の鉄砲ユリのリン片切片を置床して、２５℃で明所
で５週間培養したところ切片当りの球根の分化数として
表１に示す結果を得た。いずれも処理した試料では分化
して得られる球根数は比較例１に比べて増加した。
幅２■の切片とした後に、ショＩ！４％、ナフタレン酢
１ｆｔ０．１μＨ１ベンジルアデニン０．１μＨ１およ
び本発明に係わる特定の化合物としてＴＰＡおよびｐＢ
ｔｚから選ばれる化合物を表１に示した濃度で含有する
ｐＨ５，７の無菌のムラシゲ・スクーグ（１９６２年）
の固形培地（ゲルライト濃度０．２％）を調製し、これ
に先の鉄砲ユリのリン片切片を置床して、２５℃で明所
で５週間培養したところ切片当りの球根の分化数として
表１に示す結果を得た。いずれも処理した試料では分化
して得られる球根数は比較例１に比べて増加した。
比較例 １
実施例１において培地として本発明に係わる特定の化合
物を含有しない以外は該実施例と同様にして鉄砲ユリの
リン片切片を組織培養した結果を表１に示した。
物を含有しない以外は該実施例と同様にして鉄砲ユリの
リン片切片を組織培養した結果を表１に示した。
実施例 ３〜６
実施例１及び２において、材料として、タマネギリン片
切片、チューリップリン片切片を用いる以外は該実施例
と同様にして組織培養した結果を表１に示した。いずれ
も処理した試料では分化した球根数は比較例２〜３に比
べて増加した。
切片、チューリップリン片切片を用いる以外は該実施例
と同様にして組織培養した結果を表１に示した。いずれ
も処理した試料では分化した球根数は比較例２〜３に比
べて増加した。
比較例 ２〜３
実施例３〜６において、培地として本発明に係わる特定
の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にしてタマ
ネギリン片切片、チューリップリン片切片を組織培養し
た結果を表１に示した。
の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にしてタマ
ネギリン片切片、チューリップリン片切片を組織培養し
た結果を表１に示した。
実施例°７〜２２
実施例１及び２において、材料としてトマトカルス細胞
、トレニア胚輪切片、アスパラガス茎切片、ナス胚輪切
片、シソ葉切片、ヤグルマギク胚輪切片、ルドベキア葉
切片、アマ茎切片を用いる以外は該実施例と同様にして
組織培養し、表２に示す結果を得た。いずれも処理した
試料では分化する不定芽数は比較例４〜１１に比べて増
加した。
、トレニア胚輪切片、アスパラガス茎切片、ナス胚輪切
片、シソ葉切片、ヤグルマギク胚輪切片、ルドベキア葉
切片、アマ茎切片を用いる以外は該実施例と同様にして
組織培養し、表２に示す結果を得た。いずれも処理した
試料では分化する不定芽数は比較例４〜１１に比べて増
加した。
比較例 ４〜１１
実施例７〜２２において、培地として本発明に係わる特
定の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にしてト
マトカルス細胞、トレニア胚輪切片、アルパラガス茎切
片、ナス胚輪切片、シソ葉切片、ヤグルマギク胚輪切片
、ルドベキア葉切片、アマ茎切片を組織培養した結果を
表２に示した。
定の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にしてト
マトカルス細胞、トレニア胚輪切片、アルパラガス茎切
片、ナス胚輪切片、シソ葉切片、ヤグルマギク胚輪切片
、ルドベキア葉切片、アマ茎切片を組織培養した結果を
表２に示した。
実施例 ２３〜２９
実施例１及び２において、材料としキャベツカルス細胞
、ダイズカルス細胞、イネカルス細胞、ニンジン胚輪切
片を用いる以外は該実施例と同様にし組織培養した結果
、表３に示す結果を得た。
、ダイズカルス細胞、イネカルス細胞、ニンジン胚輪切
片を用いる以外は該実施例と同様にし組織培養した結果
、表３に示す結果を得た。
いずれも処理した試料では分化する不定胚数も比較例１
２〜１５に比べて増加した。
２〜１５に比べて増加した。
比較例 １２〜１５
実施例２３〜２９において、培地として本発明に係わる
特定の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にして
キャベツカルス細胞、ダイズカルス細胞、イネカルス細
胞、ニンジン胚軸切片を組織培養した結果を表３に示し
た。
特定の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にして
キャベツカルス細胞、ダイズカルス細胞、イネカルス細
胞、ニンジン胚軸切片を組織培養した結果を表３に示し
た。
実施例 ３０〜３３
実施例１及び２において、材料としてダイズカルス細胞
、タバコカルス細胞を用いる以外は該実施例と同様にし
て４週間組織培養した結果、カルス細胞の増殖率として
表４に示す結果を得た。いずれも処理した試料では増殖
率は比較例１６〜１７に比べて増加した。
、タバコカルス細胞を用いる以外は該実施例と同様にし
て４週間組織培養した結果、カルス細胞の増殖率として
表４に示す結果を得た。いずれも処理した試料では増殖
率は比較例１６〜１７に比べて増加した。
増殖率は、培養開始前の細胞の生重量と培養終了後の細
胞の生重量との比を百分率で示した。
胞の生重量との比を百分率で示した。
比較例 １６〜１７
実施例３０〜３３において、培地として本発明に係わる
特定の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にして
ダイズカルス細胞、タバコカルス細胞を組織培養した結
果を表４に示した。
特定の化合物を含有しない以外は該実施例と同様にして
ダイズカルス細胞、タバコカルス細胞を組織培養した結
果を表４に示した。
（本頁以下余白）
表 １
（本頁以下余白）
表 ２
表 ３
表 ４
〔発明の効果〕
本発明の植物の組織培養方法を用いれば、植物の組織片
又は培養細胞から従来法に比べて効率良く種苗あるいは
細胞を増殖することができる。
又は培養細胞から従来法に比べて効率良く種苗あるいは
細胞を増殖することができる。
出願人 三井石油化学工業株式会社
代理人 弁理士 平 木 祐 輔
Claims (3)
- （１）植物の組織片または培養細胞をプロテインキナー
ゼＣの活性化剤を含む培地を用いて組織培養することを
特徴とする植物の組織培養方法。 - （２）プロテインキナーゼＣの活性化剤がホルボールエ
ステルである請求項１記載の方法。 - （３）ホルボールエステルが１２−ｏ−テトラデカノイ
ルホルボール１３−アセテートもしくはホルボール−１
２，１３−ジブチレートである請求項２記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63040835A JPH01218518A (ja) | 1988-02-25 | 1988-02-25 | 植物組織培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63040835A JPH01218518A (ja) | 1988-02-25 | 1988-02-25 | 植物組織培養方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01218518A true JPH01218518A (ja) | 1989-08-31 |
Family
ID=12591688
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63040835A Pending JPH01218518A (ja) | 1988-02-25 | 1988-02-25 | 植物組織培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01218518A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103477901A (zh) * | 2013-07-29 | 2014-01-01 | 广西植物组培苗有限公司 | 一种毛葡萄组培苗营养杯假植基质及假植方法 |
| CN104025839A (zh) * | 2014-05-19 | 2014-09-10 | 梁晓 | 一种颠茄高产种植方法 |
-
1988
- 1988-02-25 JP JP63040835A patent/JPH01218518A/ja active Pending
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| FEDRATION OF EUROPEAN BIOCHEMICAL SOCIETIES=1986 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103477901A (zh) * | 2013-07-29 | 2014-01-01 | 广西植物组培苗有限公司 | 一种毛葡萄组培苗营养杯假植基质及假植方法 |
| CN104025839A (zh) * | 2014-05-19 | 2014-09-10 | 梁晓 | 一种颠茄高产种植方法 |
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