JPH012575A - 固定化生体触媒環境の殺菌法 - Google Patents
固定化生体触媒環境の殺菌法Info
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- JPH012575A JPH012575A JP62-154825A JP15482587A JPH012575A JP H012575 A JPH012575 A JP H012575A JP 15482587 A JP15482587 A JP 15482587A JP H012575 A JPH012575 A JP H012575A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の背景〕
技術分野゛
本発明は、固定化生体触媒環境の殺菌法に関する。さら
に具体的には、本発明は、固定化生体触媒を含む液体中
の雑菌を固定化生体触媒を破壊することなく殺滅する選
択的殺菌法に関する。
に具体的には、本発明は、固定化生体触媒を含む液体中
の雑菌を固定化生体触媒を破壊することなく殺滅する選
択的殺菌法に関する。
先行技術
微生物菌体や酵素を適当な担体（通常は、水性ゲルや多
孔質ガラス）に固定してこれらの生体の触媒能を持たせ
たものは固定化生体触媒として知られていて、そのよう
な固定化生体触媒を非生体触媒と同様に使用して生化学
反応を行なわせる方法は今後の発展が期待される所謂バ
イオテクノロジーの一つである。固定化生体触媒を使用
する反応装置はバイオリアクターと呼ばれており、バイ
オリアクターその′ものおよびそれを使用する生化学反
応は、既に多くの綜説が出されていて周知である。
孔質ガラス）に固定してこれらの生体の触媒能を持たせ
たものは固定化生体触媒として知られていて、そのよう
な固定化生体触媒を非生体触媒と同様に使用して生化学
反応を行なわせる方法は今後の発展が期待される所謂バ
イオテクノロジーの一つである。固定化生体触媒を使用
する反応装置はバイオリアクターと呼ばれており、バイ
オリアクターその′ものおよびそれを使用する生化学反
応は、既に多くの綜説が出されていて周知である。
微生物菌体又は酵素を固定化して、回分的あるいは連続
的に反応を行なわせる場合に最も留意しなければいけな
い要因の一つは、雑菌汚染の防止である。固定化菌体又
は酵素を使用する場合は長期間連続運転することが前提
条件となるのが通例であるので、−度雑菌汚染が生じる
と連続運転に深刻な影響を与えることになる。
的に反応を行なわせる場合に最も留意しなければいけな
い要因の一つは、雑菌汚染の防止である。固定化菌体又
は酵素を使用する場合は長期間連続運転することが前提
条件となるのが通例であるので、−度雑菌汚染が生じる
と連続運転に深刻な影響を与えることになる。
このため重要なこととしては、微生物菌体又は酵素を無
菌的に固定化したり、雑菌だけを選択的に殺菌できるこ
とが必要であり、様々の雑菌汚染防止のための方法が考
えられている。具体的な例としては、（１）密閉タンク
内で無菌的に酵母をアルギン酸カルシウムに固定化する
（文献１）、 。
菌的に固定化したり、雑菌だけを選択的に殺菌できるこ
とが必要であり、様々の雑菌汚染防止のための方法が考
えられている。具体的な例としては、（１）密閉タンク
内で無菌的に酵母をアルギン酸カルシウムに固定化する
（文献１）、 。
（２）曲硫酸塩あるいは抗生物質等を供給液中に添加す
る（文献２．３）、（３）耐熱性の微生物あるいは酵素
を使用する（文献４．５）、ことがあげ′られる。しか
し、これらは雑菌汚染を防止するために多大な設備や作
業を要したり、生成物が食品等の様な場合には採用でき
なかったり、必ずしも耐熱性の微生物や酵素が得られな
い、というような欠点がある。
る（文献２．３）、（３）耐熱性の微生物あるいは酵素
を使用する（文献４．５）、ことがあげ′られる。しか
し、これらは雑菌汚染を防止するために多大な設備や作
業を要したり、生成物が食品等の様な場合には採用でき
なかったり、必ずしも耐熱性の微生物や酵素が得られな
い、というような欠点がある。
ところで、微生物の殺菌法として、高圧電場パルス印加
による方法が知られている。高圧電場パルスの印加によ
る殺菌の作用は、高圧電場パルスの液体中でのｉ加によ
り発生する衝撃波あるいは電場によることが知られてお
り、発生した衝撃波あるいは電場により微生物に対して
物理的なダメージ（例えば細胞膜や細胞壁の破損）が与
えられるためであると考えられている。
による方法が知られている。高圧電場パルスの印加によ
る殺菌の作用は、高圧電場パルスの液体中でのｉ加によ
り発生する衝撃波あるいは電場によることが知られてお
り、発生した衝撃波あるいは電場により微生物に対して
物理的なダメージ（例えば細胞膜や細胞壁の破損）が与
えられるためであると考えられている。
要旨
本発明は上記の点に解決を与えて固定化生体触媒を含む
液体中で液体中の雑菌を選択的に殺菌することを目的と
し、固定化生体触媒存在下のこの液体に高圧電場パルス
を印加することによってこの目的を達成しようとするも
のである。
液体中で液体中の雑菌を選択的に殺菌することを目的と
し、固定化生体触媒存在下のこの液体に高圧電場パルス
を印加することによってこの目的を達成しようとするも
のである。
従って、本発明による固定化生体触媒を含む液体の殺菌
法は、固定化生体触媒を含む液体に高圧電場パルスを印
加すること、を特徴とするものである。
法は、固定化生体触媒を含む液体に高圧電場パルスを印
加すること、を特徴とするものである。
効果
本発明の殺菌方法によれば、固定化生体触媒を含む液体
において、固定化生体触媒を損傷させることなく、即ち
、固定化微生物の場合には固定化された微生物を死滅さ
せることなく、又固定化酵素の場合には固定化された酵
素の活性を低下させることなく、簡便に液体中の雑菌を
殺菌できる。
において、固定化生体触媒を損傷させることなく、即ち
、固定化微生物の場合には固定化された微生物を死滅さ
せることなく、又固定化酵素の場合には固定化された酵
素の活性を低下させることなく、簡便に液体中の雑菌を
殺菌できる。
又、固定化生体触媒を含む液体に与える影響（化学変化
等）も小さい。従って、固定化生体触媒を使用する場合
に従来より最も重要な問題であつた雑菌汚染を防止する
ことが可能となった。さらに、食品等の分野で固定化生
体触媒を使用する場合は、殺菌剤の残留性、反応液の変
質等の安全性の問題から雑菌汚染防止法が確立されてい
なかったが、この分野でもａ効に本発明は利用可能であ
る。
等）も小さい。従って、固定化生体触媒を使用する場合
に従来より最も重要な問題であつた雑菌汚染を防止する
ことが可能となった。さらに、食品等の分野で固定化生
体触媒を使用する場合は、殺菌剤の残留性、反応液の変
質等の安全性の問題から雑菌汚染防止法が確立されてい
なかったが、この分野でもａ効に本発明は利用可能であ
る。
本発明によってこのような選択的殺菌が可能であるとい
うことは思いがけなかったことというべきである。何故
ならば、高圧電場パルス印加による殺菌が液体中に発生
した衝撃波あるいは電場による微生物の物理的ダメージ
によるものであることは前記した通りであるところ、こ
のような衝撃波あるいは電場はそこに存在する固定化生
体に対しても働くと解すことが可能だからである。けだ
し、固定化生体触媒が触媒として作用するものである限
り、この生体は固定化担体中に存在していても基質溶液
と接触しているのであって、そのような状態に在る以上
、該生体は外周液体に発生した衝撃波あるいは電場の影
響を該外周液体中に存在する雑菌と同様に受けざるを得
ないと解されるからである。
うことは思いがけなかったことというべきである。何故
ならば、高圧電場パルス印加による殺菌が液体中に発生
した衝撃波あるいは電場による微生物の物理的ダメージ
によるものであることは前記した通りであるところ、こ
のような衝撃波あるいは電場はそこに存在する固定化生
体に対しても働くと解すことが可能だからである。けだ
し、固定化生体触媒が触媒として作用するものである限
り、この生体は固定化担体中に存在していても基質溶液
と接触しているのであって、そのような状態に在る以上
、該生体は外周液体に発生した衝撃波あるいは電場の影
響を該外周液体中に存在する雑菌と同様に受けざるを得
ないと解されるからである。
本発明は固定化生体触媒を含む液体中に高圧電場パルス
を印加することを特徴とする固定化生体触媒を含む液体
の殺菌方法である。
を印加することを特徴とする固定化生体触媒を含む液体
の殺菌方法である。
固定化生体触媒
本発明でいう固定化生体触媒の生体触媒とは、生体自身
（たとえば、微生物、動植物細胞、葉緑体、ミトコンド
リア等）又は生体由来の産物であって触媒として機能す
るもの、を意味する。固定化生体触媒の具体例として、
固定化微生物（例えば、固定化酵母や固定化乳酸菌）及
び固定化酵素（例えば固定化プルラナーゼ）が挙げられ
る。その固定化方法については公知であり、制限されな
い。固定化方法の例としては、アルギン酸塩、に−カラ
ギーナン等の包括法、多孔性泡ガラス等の吸着法等が挙
げられる。又固定化生体触媒の形状や大きさについても
特に制限されない。
（たとえば、微生物、動植物細胞、葉緑体、ミトコンド
リア等）又は生体由来の産物であって触媒として機能す
るもの、を意味する。固定化生体触媒の具体例として、
固定化微生物（例えば、固定化酵母や固定化乳酸菌）及
び固定化酵素（例えば固定化プルラナーゼ）が挙げられ
る。その固定化方法については公知であり、制限されな
い。固定化方法の例としては、アルギン酸塩、に−カラ
ギーナン等の包括法、多孔性泡ガラス等の吸着法等が挙
げられる。又固定化生体触媒の形状や大きさについても
特に制限されない。
本発明の殺菌対象は、このような固定化生体触媒を含む
液体である。この場合の液体は、この固定化生体触媒に
よって生起ないし促進させようとする生化学反応に関連
するあらゆる液体ないし酸体成分でありうる。また、液
体の導電率については特に制限されない。具体的には、
反応に使用する水あるいはこの生体触媒の反応基質を含
む溶液、たとえば生体触媒が酵母である場合の麦芽？Ｌ
、ブドー搾２１等である。本発明は、固定化酵母を使用
するビールの製造の為の麦芽汁の殺菌に自゛用である。
液体である。この場合の液体は、この固定化生体触媒に
よって生起ないし促進させようとする生化学反応に関連
するあらゆる液体ないし酸体成分でありうる。また、液
体の導電率については特に制限されない。具体的には、
反応に使用する水あるいはこの生体触媒の反応基質を含
む溶液、たとえば生体触媒が酵母である場合の麦芽？Ｌ
、ブドー搾２１等である。本発明は、固定化酵母を使用
するビールの製造の為の麦芽汁の殺菌に自゛用である。
高圧電場パルスの印加／殺菌
上記固定化生体触媒を含む液体に高圧電場パルスを印加
することにより、固定化生体触媒を損傷（固定化微生物
の場合は、固定化された微生物の死滅、固定化酵素の場
合には、固定化された酵素の失活）することなく、該液
体中の雑菌を死滅させる。高圧電場パルスの印加は、固
定化生体触媒を含む液体中に浸漬させた電極に、所定の
電界強度になる様に、放電スイッチを用いて高電圧を印
加させることによって行なうことがふつうである。
することにより、固定化生体触媒を損傷（固定化微生物
の場合は、固定化された微生物の死滅、固定化酵素の場
合には、固定化された酵素の失活）することなく、該液
体中の雑菌を死滅させる。高圧電場パルスの印加は、固
定化生体触媒を含む液体中に浸漬させた電極に、所定の
電界強度になる様に、放電スイッチを用いて高電圧を印
加させることによって行なうことがふつうである。
（イ）高圧電場パルス
高圧電場パルスとは、たとえば、印加時の電極間の最大
電界強度が２ ｋＶ／ ｃｍ〜１００ ｋＶ／ ｃｍ、
その時の電極間の電圧をオシロスコープでモニターした
場合のパルスの波形（電圧の時間的変化を示す波形）に
おいて立上がりが約２０ ｎ５ｅｃ〜１μｓｅｃと極め
て速く、幅は約１００ ｎ５ｅｃ 〜１ ｍ５ｅｃであ
る高速パルス（あるいは短時間パルス）であって、公知
である。この高速パルスは、コンデンサー充電エネルギ
ーを、放電スイッチを通して短時間に放電させることに
より得られる。放電スイッチとしては、静止ギャップ、
回転ギャップ、サイリスタ、サイラトロン等が使用可能
であり、いずれも公知である。通常の水溶液はイオンを
多量に含むために電気的に良導体であるので、浸漬した
電極に直流電流を印加すると、大きな電流が流れて電気
分解が生じる。しかし、前述の様なパルスを印加した場
合には、電子は高速で走るが、電流を運ぶためのイオン
の動きが遅いため、水溶液は電気的に絶縁性液体と似た
性質を示す。即ち、導電性の水溶液中に高い電界強度の
場を作ることができるのが特徴である（文献６）。なお
、高圧電場パルスの極性は正と負があるが、本発明にお
いてはいずれも使用可能である。
電界強度が２ ｋＶ／ ｃｍ〜１００ ｋＶ／ ｃｍ、
その時の電極間の電圧をオシロスコープでモニターした
場合のパルスの波形（電圧の時間的変化を示す波形）に
おいて立上がりが約２０ ｎ５ｅｃ〜１μｓｅｃと極め
て速く、幅は約１００ ｎ５ｅｃ 〜１ ｍ５ｅｃであ
る高速パルス（あるいは短時間パルス）であって、公知
である。この高速パルスは、コンデンサー充電エネルギ
ーを、放電スイッチを通して短時間に放電させることに
より得られる。放電スイッチとしては、静止ギャップ、
回転ギャップ、サイリスタ、サイラトロン等が使用可能
であり、いずれも公知である。通常の水溶液はイオンを
多量に含むために電気的に良導体であるので、浸漬した
電極に直流電流を印加すると、大きな電流が流れて電気
分解が生じる。しかし、前述の様なパルスを印加した場
合には、電子は高速で走るが、電流を運ぶためのイオン
の動きが遅いため、水溶液は電気的に絶縁性液体と似た
性質を示す。即ち、導電性の水溶液中に高い電界強度の
場を作ることができるのが特徴である（文献６）。なお
、高圧電場パルスの極性は正と負があるが、本発明にお
いてはいずれも使用可能である。
（ロ）電 極
電極は、目的とする高圧電場パルスが印加口１能であれ
ば、種類（例えば白金、ステンレス、グラファイト等）
、形状（例えば板状、ワイヤー状、針状）、大きさ、浸
漬位置（例えば電極間圧＃Ｉ）に制限されない。但し、
実際に殺菌が行なわれるのは電極間の高圧電場パルスが
印加される部分だけであるので、目的とする殺菌効果が
得られる様にこれらの諸条件選定する必要がある。
ば、種類（例えば白金、ステンレス、グラファイト等）
、形状（例えば板状、ワイヤー状、針状）、大きさ、浸
漬位置（例えば電極間圧＃Ｉ）に制限されない。但し、
実際に殺菌が行なわれるのは電極間の高圧電場パルスが
印加される部分だけであるので、目的とする殺菌効果が
得られる様にこれらの諸条件選定する必要がある。
連続的な処理を行なうためには、対象液体の流路に高圧
電場パルス印加帯域を１個所または数個所設けた装買が
考えられよう。その場合の高圧電場印加帯域としては、
流路構成部材たとえば配管を一方の電極とし、他方の電
極をこの配管の中心に針状に設けたものからなる構成が
考えられる。
電場パルス印加帯域を１個所または数個所設けた装買が
考えられよう。その場合の高圧電場印加帯域としては、
流路構成部材たとえば配管を一方の電極とし、他方の電
極をこの配管の中心に針状に設けたものからなる構成が
考えられる。
（ハ）高圧電場パルスの印加条件
（イ）で規定したところの高圧電場パルスで目的とする
殺菌効果を得るために、諸条件、例えば印加パルス数等
も自ずから設定される。水野らはパン酵母を用いて、高
圧電場パルスの印加による死滅特性を調べて、ワイプル
分布に近似すると報告している（文献７．８）。この様
に対象とする各雑菌に対する殺菌効果を予め予備実験で
求めておくと、結果は式で導かれるので、目的とする殺
菌効果を得るための諸条件をその式の範囲内で任意にと
ることができる。
殺菌効果を得るために、諸条件、例えば印加パルス数等
も自ずから設定される。水野らはパン酵母を用いて、高
圧電場パルスの印加による死滅特性を調べて、ワイプル
分布に近似すると報告している（文献７．８）。この様
に対象とする各雑菌に対する殺菌効果を予め予備実験で
求めておくと、結果は式で導かれるので、目的とする殺
菌効果を得るための諸条件をその式の範囲内で任意にと
ることができる。
実験例
参考例
高圧電場パルスを印加した場合の印加電界強度と微生物
の生残率との関係について、基礎的な実験を行なった。
の生残率との関係について、基礎的な実験を行なった。
ここでは、殺菌槽（アクリル樹脂製、内寸５０關Ｘ５０
ｍｍＸ７ｍ■）にステンレス鋼製電極（５０ｍｍＸ５０
ｍｍＸ１ｎｍ）を電極間圧ｌ１ｉＳｌ■で挿入したもの
を用いて、第１図に示す様な電気回路模式図のシステム
で、印加パルス数は６００ （２４０パルス／分）で殺
菌を行なった。
ｍｍＸ７ｍ■）にステンレス鋼製電極（５０ｍｍＸ５０
ｍｍＸ１ｎｍ）を電極間圧ｌ１ｉＳｌ■で挿入したもの
を用いて、第１図に示す様な電気回路模式図のシステム
で、印加パルス数は６００ （２４０パルス／分）で殺
菌を行なった。
結果は、下表に示す通りである。なお、本発明を実施す
る場合の殺菌条件は、この様な結果から必要な殺菌効果
が得られる様に設定すればよい。
る場合の殺菌条件は、この様な結果から必要な殺菌効果
が得られる様に設定すればよい。
実施例１
（１） 麦芽汁で培養して得られた湿潤酵母菌体（Ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｌａｅ ：
水分７５ ％ ＊ ｋ ）１０、をアルギン酸ナトリウ
ム１．ｏｖ／ｖ％水溶峻１００ｍ１中に懸濁し、該懸濁
液を０．１Ｍ塩化カルシウム水溶液中に滴下して、直径
３關の固定化酵母標品（菌数２． ＯＸ １０８ｃｅ
ｌｌｓ／ｍｌ担体）を得た。
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｌａｅ ：
水分７５ ％ ＊ ｋ ）１０、をアルギン酸ナトリウ
ム１．ｏｖ／ｖ％水溶峻１００ｍ１中に懸濁し、該懸濁
液を０．１Ｍ塩化カルシウム水溶液中に滴下して、直径
３關の固定化酵母標品（菌数２． ＯＸ １０８ｃｅ
ｌｌｓ／ｍｌ担体）を得た。
（２） この固定化酵母標品をＬａｃｔｏｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｂｒｅ−ｖｉｓ （ＩＦｏ ３３４５）の
培養懸濁液（麦芽汁）（生菌数３．７ ｘ １０２ｃｏ
ｌｔｓ／ｍｌ）と混合し、これを参考例と同様のシステ
ム並びに殺菌槽で、固定化酵母標品の充填率６ Ｕ ｖ
／ｖ ９６で充填し、電界強度Ｅｐ−２０ｋＶ／ｃ＋ｎ
、印加パルス数６００（２４０回／分）で高圧電場パス
ルを印加したところ、Ｌａｃｔｏｂａｃｌｌｌｕｓ ｂ
ｒｃｖｉｓはＯｅｅｌ Ｉｓ／ｍｌと死滅したが、固定
化酵母の生菌数はパルス印加前と変化なかった。
ｌｕｓ ｂｒｅ−ｖｉｓ （ＩＦｏ ３３４５）の
培養懸濁液（麦芽汁）（生菌数３．７ ｘ １０２ｃｏ
ｌｔｓ／ｍｌ）と混合し、これを参考例と同様のシステ
ム並びに殺菌槽で、固定化酵母標品の充填率６ Ｕ ｖ
／ｖ ９６で充填し、電界強度Ｅｐ−２０ｋＶ／ｃ＋ｎ
、印加パルス数６００（２４０回／分）で高圧電場パス
ルを印加したところ、Ｌａｃｔｏｂａｃｌｌｌｕｓ ｂ
ｒｃｖｉｓはＯｅｅｌ Ｉｓ／ｍｌと死滅したが、固定
化酵母の生菌数はパルス印加前と変化なかった。
実施例２
（１） 麦芽ン１で培養して得られた酵母菌体（Ｓａ
ｃ−ｃｂａｒｏＩＩｙｃｅｓ ｃｃｒｃｖｌｓｉａｅを
麦芽ン１に菌体濃度６． Ｏｘ １０” ｃｅｌｌｓ
／ｍｌとなる様に懸濁させた。
ｃ−ｃｂａｒｏＩＩｙｃｅｓ ｃｃｒｃｖｌｓｉａｅを
麦芽ン１に菌体濃度６． Ｏｘ １０” ｃｅｌｌｓ
／ｍｌとなる様に懸濁させた。
これに多孔性泡ガラス（吸水率５０％）を１５ｖ／ｖ
９６の割合で浸漬し、８℃で約４８時間、２０ Ｏｒｐ
ｍの回分式撹拌を行なって酵母を固定化した（菌数６．
Ｏｘ １０７ｃｅｌｌｓ／ｍｌ担体）。
９６の割合で浸漬し、８℃で約４８時間、２０ Ｏｒｐ
ｍの回分式撹拌を行なって酵母を固定化した（菌数６．
Ｏｘ １０７ｃｅｌｌｓ／ｍｌ担体）。
（２） この固定化酵母標品をＥｎｔｅｒｏｂａｃｔ
ｏｒ ａｅｒｏ−ｇｅｎｅｓ （Ｉ Ｆ ０ １３５
３４ ）の培養懸濁液（麦芽汁）（生菌数１． ２ Ｘ
１０３ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）と混合し、これを実施例１
と同様の！ｉ！！置に固定化酵母標品の充填率６０ ｖ
／ｖ ９ｂで充填し、電界強度Ｅｐ＝ １００ ｋＶ／
ａｎ、印加パルス数６０ （２４０回／分）で高圧電
場パルスを印加したところ、Ｅｎｔｃｒｏｂａｃｔｏｒ
ａｃｒｏｇｃｎｃｓはＯｅｅｌ Ｉｓ／ｍｌと死滅し
たが、固定化酵母の生菌数はパルス印加前と変りなかっ
た。
ｏｒ ａｅｒｏ−ｇｅｎｅｓ （Ｉ Ｆ ０ １３５
３４ ）の培養懸濁液（麦芽汁）（生菌数１． ２ Ｘ
１０３ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）と混合し、これを実施例１
と同様の！ｉ！！置に固定化酵母標品の充填率６０ ｖ
／ｖ ９ｂで充填し、電界強度Ｅｐ＝ １００ ｋＶ／
ａｎ、印加パルス数６０ （２４０回／分）で高圧電
場パルスを印加したところ、Ｅｎｔｃｒｏｂａｃｔｏｒ
ａｃｒｏｇｃｎｃｓはＯｅｅｌ Ｉｓ／ｍｌと死滅し
たが、固定化酵母の生菌数はパルス印加前と変りなかっ
た。
実施例３
（１） グルコースを基質とした培地（乳酸菌用培地
）で培養して得られた乳酸菌菌体（１，ａｅＬｏｂａｃ
ｌ−１１ｕｓ ｅａｓｅｌ ：水分７５％含白１）（Ｉ
ＦＯ３４２５）５ｇを水２５ｍ１に溶解し、２０℃に保
持した。次いでに一カラギーナン３ｇを７５ｍ１の水に
溶解して６０℃に保温したものと混合し、冷却した。こ
れに塩化カリウムＯ，１ｗ／ｖ％水溶液１００ｍ１を加
えてゲル化して、乳酸菌を固定化した（曲数３． ＯＸ
１０８ｃａｌｌｓ／ｍｌ担体）。得られた固定化乳酸
菌標品を、−辺３ｍｍの立方体に細断した。
）で培養して得られた乳酸菌菌体（１，ａｅＬｏｂａｃ
ｌ−１１ｕｓ ｅａｓｅｌ ：水分７５％含白１）（Ｉ
ＦＯ３４２５）５ｇを水２５ｍ１に溶解し、２０℃に保
持した。次いでに一カラギーナン３ｇを７５ｍ１の水に
溶解して６０℃に保温したものと混合し、冷却した。こ
れに塩化カリウムＯ，１ｗ／ｖ％水溶液１００ｍ１を加
えてゲル化して、乳酸菌を固定化した（曲数３． ＯＸ
１０８ｃａｌｌｓ／ｍｌ担体）。得られた固定化乳酸
菌標品を、−辺３ｍｍの立方体に細断した。
（２） この固定化乳酸菌標品をｓａｃｃｈａｒｏｍ
ｙｃｃｓｃｃｒｃｖｌｓｌａｃの培養懸濁液（麦芽汁）
（生菌数２、 Ｉ Ｘ １０２ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）と
混合し、これを実施例１と同様の装置に固定化乳酸菌標
品の充填率６０ｖ／ｖ％で充填し、電界強度Ｅ ｐ ＝
２ ｋＶ／ ｃｖ。
ｙｃｃｓｃｃｒｃｖｌｓｌａｃの培養懸濁液（麦芽汁）
（生菌数２、 Ｉ Ｘ １０２ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）と
混合し、これを実施例１と同様の装置に固定化乳酸菌標
品の充填率６０ｖ／ｖ％で充填し、電界強度Ｅ ｐ ＝
２ ｋＶ／ ｃｖ。
印加パルス数１２０００ （２４０回／分）で高圧電場
パルスを印加したところ、５ａｃｃｈａｒｏＩＩｌｙｃ
ｅｓｃｅｒｅｖｌｓｌａｅはＯｅｅｌ Ｉｓ／ｍｌと死
滅したが、固定化乳酸菌の生菌数はパルス印加前と変り
なかった。
パルスを印加したところ、５ａｃｃｈａｒｏＩＩｌｙｃ
ｅｓｃｅｒｅｖｌｓｌａｅはＯｅｅｌ Ｉｓ／ｍｌと死
滅したが、固定化乳酸菌の生菌数はパルス印加前と変り
なかった。
実施例４
（１） プルラナーゼ（林原（株）製品）１０ｍｇを
０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４）２５ｍｌに溶解して、２
０℃に保持した。次いで、に−カラギーナン３ｇを７５
ｍ１の水に溶解して６０℃に保温したものと混合し、こ
れを塩化カリウムＯ，ｌｖ／ｖ％水溶液１００ｍ１に滴
下してゲル化して、直径３ｍｍの固定化プルラナーゼ標
品を得た。
０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４）２５ｍｌに溶解して、２
０℃に保持した。次いで、に−カラギーナン３ｇを７５
ｍ１の水に溶解して６０℃に保温したものと混合し、こ
れを塩化カリウムＯ，ｌｖ／ｖ％水溶液１００ｍ１に滴
下してゲル化して、直径３ｍｍの固定化プルラナーゼ標
品を得た。
（２） この固定化プルラナーゼ標品を５ａｃｃｈａ
ｒＯ１−ｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｌｓｉａｅ培養懸濁液（
麦芽汁）（生菌数３、 ＯＸ １０３ｃｅｌｌｓ／ｍ
ｌ）と混合し、これを実施例１と同様の装置に固定化プ
ルラナーゼ標品の充填率６０ｖ／ｖ％で充填し、電界強
度Ｅｐ−６ｋＶ／備、印加パルス数２４００ （２４０
回／分）で高圧電場パルスを印加したところ、５ａｃｃ
ｈａｒｏｉｙｃｅｓｅｅｒｅｖｉｓｉａｅはＱ ｅｅｌ
Ｉｓ／ｍｌと死滅したが、固定化プルラナーゼの酵素
活性は、これをプルランから発生するマルトトリオース
を還元糖定量法で測定したところ、パルス印加前と同じ
活性を保持していた。
ｒＯ１−ｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｌｓｉａｅ培養懸濁液（
麦芽汁）（生菌数３、 ＯＸ １０３ｃｅｌｌｓ／ｍ
ｌ）と混合し、これを実施例１と同様の装置に固定化プ
ルラナーゼ標品の充填率６０ｖ／ｖ％で充填し、電界強
度Ｅｐ−６ｋＶ／備、印加パルス数２４００ （２４０
回／分）で高圧電場パルスを印加したところ、５ａｃｃ
ｈａｒｏｉｙｃｅｓｅｅｒｅｖｉｓｉａｅはＱ ｅｅｌ
Ｉｓ／ｍｌと死滅したが、固定化プルラナーゼの酵素
活性は、これをプルランから発生するマルトトリオース
を還元糖定量法で測定したところ、パルス印加前と同じ
活性を保持していた。
引用文献
（１） 新燃料油開発技術研究組合編： “新燃料油
の研究開発（昭和５７年度公開年報）”（２） 白田
輝也ら：特開昭５９−１７３０８６号公報 （３） 仲田俊之ら：特開昭６０−７５２８９号公報 （４） 大島泰部： “異常環境と微生物酵素”（講
談社）（１９７７） （５） 大島泰部“好熱性細菌” （重大出版会）（
８） 佐藤正之ら：化学工学協会群馬大会講演要旨集
（昭和６１年）９．２１３ （７） 水野彰ら：化学工学協会群馬大会講演要旨集
（昭和６１年）Ｌｕｌ！ （８） 水野彰ら：電気学会全国大会講演要旨集（昭
和６１年）ｐ、７０９
の研究開発（昭和５７年度公開年報）”（２） 白田
輝也ら：特開昭５９−１７３０８６号公報 （３） 仲田俊之ら：特開昭６０−７５２８９号公報 （４） 大島泰部： “異常環境と微生物酵素”（講
談社）（１９７７） （５） 大島泰部“好熱性細菌” （重大出版会）（
８） 佐藤正之ら：化学工学協会群馬大会講演要旨集
（昭和６１年）９．２１３ （７） 水野彰ら：化学工学協会群馬大会講演要旨集
（昭和６１年）Ｌｕｌ！ （８） 水野彰ら：電気学会全国大会講演要旨集（昭
和６１年）ｐ、７０９
第１図は、実験例で使用した装置を示す説明図である。
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３・・・高電圧抵抗、
Ｃ１、Ｃ２・・・コンデンサー。Ｃ１は放電制御用（４
０００ｐＦ） １・・・スライダック ′２・・・ネオントランス ３・・・＋？！Ｅ！圧整流器 ４・・・銅板 ５・・・スパークギトップ ６・・・放電殺菌槽（８全５０ｍ１） ７・・・高電圧プローブ ８・・・オシロスコープ（１００ＭＨ２以上、５ｔｏｒ
ａｑｃ型） 出願人代理人 佐 藤 −雄
０００ｐＦ） １・・・スライダック ′２・・・ネオントランス ３・・・＋？！Ｅ！圧整流器 ４・・・銅板 ５・・・スパークギトップ ６・・・放電殺菌槽（８全５０ｍ１） ７・・・高電圧プローブ ８・・・オシロスコープ（１００ＭＨ２以上、５ｔｏｒ
ａｑｃ型） 出願人代理人 佐 藤 −雄
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、固定化生体触媒を含む液体に高圧電場パルスを印加
することを特徴とする、固定化生体触媒を含む液体の殺
菌法。 ２、高圧電場パルス印加時の電界強度が２ｋＶ／ｃｍ〜
１００ｋＶ／ｃｍである、特許請求の範囲第１項記載の
方法。 ３、印加パルスが、その波形（すなわち、電圧の時間的
変化を示す波形）が立上がりが２０ｎｓｅｃ〜１μｓｅ
ｃで幅が１００ｎｓｅｃ〜１ｍｓｅｃであるようなもの
である、特許請求の範囲第１〜２項いずれか１項記載の
方法。 ４、固定化生体触媒が固定化微生物あるいは固定化酵素
である、特許請求の範囲第１〜３項いずれか１項記載の
方法。 ５、微生物が酵母である、特許請求の範囲第４項記載の
方法。 ６、固定化生体触媒を含む液体が固定化酵母を含む麦芽
汁である、特許請求の範囲第１〜５項いずれか１項記載
の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62-154825A JPH012575A (ja) | 1987-06-22 | 固定化生体触媒環境の殺菌法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62-154825A JPH012575A (ja) | 1987-06-22 | 固定化生体触媒環境の殺菌法 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS642575A JPS642575A (en) | 1989-01-06 |
| JPH012575A true JPH012575A (ja) | 1989-01-06 |
| JPH0448439B2 JPH0448439B2 (ja) | 1992-08-06 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102015005972A1 (de) | 2014-05-15 | 2015-11-19 | Fanuc Corporation | Laseroszillator mit Gaszirkulation |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102015005972A1 (de) | 2014-05-15 | 2015-11-19 | Fanuc Corporation | Laseroszillator mit Gaszirkulation |
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