JPH01265159A - 一体型多層分析要素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は液体試料中の特定の成分を分析するための改良
された乾式の一体型多層分析要素に関し詳しくは水性液
中試料の分析、特に体液（例、血液（全血、血漿、血清
）、リンパ液、唾液、尿など）を試料として用いる臨床
検査に有用な一体型多層分析要素に関する。

〔従来の技術〕

従来乾式の分析要素の一形態として、透明支持体の上に
呈色反応試薬と親水性ポリマーバインダーを含む吸水性
の試薬層と最外層に多孔性展開層（以下、展開層という
ことがある）を設けた一体型多層分析要素（以下、多層
分析要素ということがある）が多数提案されている。多
層分析要素の展開層はその上側表面（透明支持体から遠
い側の表面）に点着供給された水性液体試料（例、血液
（全血、血漿、血清）、リンパ液、唾液、髄液、膣液、
尿；飲料水、酒類；河川水；工場廃水等）を水性液体試
料中に含有されている成分を実質的に偏在させることな
しに横方向に拡げ単位面積当たりほぼ一定容量の割合で
親水性ポリマーを含む吸水性の試薬層または吸水層に供
給する作用（メータリング作用）をする層である。多孔
性展開層のうちで、特開昭４９−５３８８８（特公昭５
３−２１６７７）　、’米国特許３，９９２．１５８等
に開示のメンブランフィルタ（ブラッシュドボリマー）
に代表される非繊維性等方的微多孔質媒体層、特開昭５
５−９０８５９等に開示のポリマーミクロビーズが水不
膨潤性の接着剤で点接触状に接着されてなる連続空隙含
有三次元格子粒状構造物層に代表される非繊維性多孔性
展開層は多種の水性液体試料に対し優れた展開作用を示
すが、試料として全血を用いる場合に血液中の赤血球等
の固形成分により微空隙が目詰りして展開作用が損なわ
れ、高分子成分である蛋白質を高濃度に含む血漿または
血清を用いる場合にも高分子成分により微空隙が目詰り
して展開作用が損なわれるという問題点があった。これ
に対し特開昭５５−１６４３５６、特開昭５７−６６３
５９等に開示の織物からなる多孔性展開層（織展開層）
は水性液体試料として血液を用いる場合に全血、血漿、
血清のいずれをも良好に展開することができ、かつ一体
型多層分析要素の製造の容易さ、要素の丈夫さ等の種々
の点で優れた多孔性展開層である。

〔発明が解決しようとする課題〕

織物からなる展開層は、前述の如く優れた性能を有して
いるが、縦横の展開の不均一さが原因で展開の形がきれ
いな円形にならず、楕円状となるため、特に限られた面
積を用いた分析においては長径方向が、分析要素のエツ
ジの効果による発色の不均一さを生じ、最終的には分析
結果をバラクかせる要因となっていることが明らかとな
った。

本発明の目的は液体試料の展開が円形状を為し分析要素
として形成された際、展開の一方向への行き過ぎによる
バラツキの生成を抑え、再現性のよい一体型多層分析要
素を提供することにある。

また、本発明の他め目的は全血試料を用いた場合にも精
度よい測定が可能な一体型多層分析要素を提供すること
にある。

本発明の他の目的は水性液体試料として血液を用いる場
合に全血での測定値と血漿または血清での測定値との対
応づけまたは両側定値相互の換算が容易な一体型多層分
析要素を提供することにある。

本発明の他の目的は以下の説明および実施例の記載から
も明らかになろう。

〔課題を解決するための手段〕

本発明の一体型多層分析要素の特徴は多孔性展開層とし
て、緯糸あるいは経糸の少なくとも一方が複数糸よりな
る織物を用いることにある。すなわち、本発明は少なく
とも一つの試薬を結合剤中に含む少なくとも一つの試薬
層と織物からなる液体試料展開層をこの順に積層してな
る一体型多層分析要素において、前記液体試料展開層を
構成する織物が緯糸、経糸のうち少な（とも一方が複数
糸より成ることを特徴とする液体試料展開性の改良され
た、一体型多層分析要素に関するものである。

本発明の一体型多層分析要素の代表的態様は次の通りで
ある。

（１）光透過性水不浸透性支持体の上に親水性ポリマー
バインダーを含む吸水層および多孔性展開層がこの順に
積層一体化されてなる一体型多層分析要素であって、前
記展開層が緯糸あるいは経糸の少なくとも一方が複数糸
より成る織物である一体型多層分析要素 （２）光透過性水不浸透性支持体の上に液体試料中の成
分と反応して検出可能な変化を生じさせる少なくとも二
つの試薬を含む少なくとも一つの吸水性または水浸透性
の試薬層および多孔性展開層がこの順にあって、前記展
開層が緯糸あるいは経糸の少なくとも一方の複数糸より
成る織物である一体型多層分析要素 （３）光透過性水不浸透性支持体の上に親水性ポリマー
バインダーを含む吸水層および液体試料中の成分と反応
して検出可能な変化を生じさせる少なくとも一つの試薬
を含む多孔性展開層がこの順に積層一体化されてなる一
体型多層分析要素であって、前記展開層が緯糸あるいは
経糸の少なくとも一方が複数糸より成る織物である一体
型多層分析要素である。

本発明の一体型多層分析要素の光透過性水不浸透性支持
体としては前述の特許明細書等に開示の多層分析要素に
用いられているような水不透過性の透明支持体を用いる
ことができる。その亘体例としてはポリエチレンテレツ
クレート、ビスフェノールＡのポリカルボネート、ポリ
スチレン、セルロースエステル（例、セルロースジアセ
テート、セルローストリアセテート、セルロースアセテ
ートプロピオネート等）等のポリマーからなる厚さ約５
０μｍから約１ｍｍ、好ましくは約８０μｍから約３０
０ｐＩ１１の範囲の透明支持体を用いるこζができる。

支持体の表面には必要により前記の諸特許明細書等によ
り公知の下塗層または接着層を設けて支持体の上に設け
られる吸水層または試薬層等との接着を強固にすること
ができる。

透明支持体なしに形状を維持できる強度がある場合には
、本発明の一体型多層分析要素には透明支持体はなくと
もよい。しかし、多くの場合には、本発明の一体型多層
分析要素は支持体を有しており、支持体とその上の層が
ほぼ一様に接着されていることが好ましい。

吸水層は水を吸水して膨潤する親水性ポリマーを主成分
として構成される層であって、層の界面に到達または浸
透した水を吸収することができる層である。吸水層に用
いることができる親水性ポリマーは水吸水時の膨潤率が
、３０°Ｃで約１５０％から約２０００％、好ましくは
約２５０％から約１５００％の範囲の天然または合成親
水性ポリマーである。その例として特開昭５９−１７１
８６４、特開昭６０−１０８７５３等に開示のゼラチン
（例、酸処理ゼラチン、脱イオンゼラチン等）、ゼラチ
ン誘導体（例、フタル化ゼラチン、ヒドロキシアクリレ
ートグラフトゼラチン等）、アガロース、プルラン誘導
体、ポリアクリルアミド、ポリピリルアルコール、ポリ
ビニルピロリドン等をあげることができる。吸水層の乾
燥時の厚さは約１／Ｍから約１００μｍ、好ましくは約
３μｌから約５０１、特に好ましくは約５μｍから約３
０ｐｍの範囲であり、また実質的に透明であることが好
ましい。吸水層には公知の媒染剤、塩基性ポリマー、酸
性ポリマー等を含有させることができる。

吸水性または水浸透性の試薬層（以下、試薬層というこ
とがある）は液体試料中の測定対称成分と反応して検出
可能な変化を生じさせる少なくとも一つの試薬と親水性
ポリマーバインダーを含む実質的に非孔性で吸水性の層
または微多孔性で水浸透性の層である。検出可能な変化
とは主として光学的測定方法により検出できる変化を意
味しており、例えば色変化、発色（呈色）、蛍光発生、
紫外線領域における吸収波長の変化、混濁発生等である
。

試薬層に含有される試薬は液体試料中の分析対称成分と
この成分を分析するために選択した化学反応によって決
まり、選択した化学反応が２種以上の別個の層に含有さ
せることもできる。試薬層に含有させる試薬として前記
の諸特許明細書に開示の酵素を含む試薬組成物やその他
の公知の分析試薬系または臨床生化学診断試薬系等があ
る。

実質的に非孔性で吸水性の試薬層に用いられる親水性ポ
リマーは試薬または試薬組成物を実質的に均一に溶解ま
たは分散させる媒体として作用し、また液体試料中の水
を吸収して水とともに被検成分を試薬層に到達させる作
用を少なくとも有するものである。親水性ポリマーとし
ては前記の吸水層に用いられる吸水性の親水性ポリマー
と同じポリマーから適宜に選択して用いることができる
。

実質的に非孔性の試薬層の乾燥厚さは約３μｍから約５
０１！ｍ、好ましくは約５μｍから約３０μｍの範囲で
あり、また試薬層は実質的に透明であることが好ましい
。

微多孔性で水浸透性の試薬層は後述する織物布地展開層
と同様の布地、特開昭５５−１６４３５６等に記載の織
物布地、特開昭５７−１４８２５０に記載の有機ポリマ
ー繊維パルプ含有抄造紙、特開昭５７−１２５８４７等
に記載の繊維と親水性ポリマーの分散液を塗布して形成
した多孔性層等の繊維質多孔性層；特公昭５３−２１６
７７、米国特許３，９９２．１５８等に記載のメンブラ
ンフィルタ−層（ブラシシュポリマー層）、ポリマーミ
クロビーズ等の微粒子が親水性ポリマーバインダーで点
接触状に接着されてなる連続微空隙含有等方的多孔性層
（三次元格子状粒状構造物層）等の非繊維買方的多孔性
層等の微多孔性層に試薬組成物を含有させた層又は固体
微粒子と親水性ポリマーバインダーから構成される微多
孔性構造体に試薬組成物を含有させた層である。微多孔
性試薬層の乾燥時の層厚は約７μｍから約２５０　ｔｐ
ｖｈ、好ましくは約１０μｍ〜約２５０頗の範囲である
。微多孔性試薬層の上に織物布地展開層を設ける場合に
は、両層の間は特開昭６１−４９５９、特開昭６２−１
３８７５６等に記載の多孔性接着によるのが好ましい。

試薬層には公知のｐＨ緩衝剤組成物、高分子ｐＨ緩衝剤
、塩基性ポリマー、酸性ポリマー、高分子媒染剤等を含
有させることができる。

吸水層および実質的に非孔性の試薬層はいずれも前記の
光透過性水不浸透性支持体の上に公知の塗布方法により
設けることができる。微多孔性試薬層は特開昭５９−１
２０９５７、特開昭５９−１４５９６５等に開示の方法
等に従っても設けることができる。必要に応じて支持体
の表面を公知の物理化学的活性化処理または化学的活性
化処理し、あるいは透明な下塗層（例、ゼラチン下塗層
）を設けて支持体と吸水層または支持体と試薬層との間
の接着力を強くすることができる。支持体と試薬層の間
に吸水層を設けることができ、試薬層が微多孔性試薬層
の場合には試薬層と支持体の間に吸水層を設けることが
好ましい。

吸水層および実質的に非孔性の試薬層はいずれも前記の
光透過性水不浸透性支持体の上に公知の塗布方法により
設けることができる。微多孔性試薬層は特開昭５９−１
２０９５７、特開昭５９−１４５９６５等に開示の方法
に従って設けることができる。必要に応じて支持体の表
面を公知の物理化学的活性化処理または化学的活性化処
理し、あるいは透明な下塗層（例、ゼラチン下塗層）を
設けて支持体と吸水層または支持体と試薬層との間に吸
水層を設けることができ、試薬層が微多孔性試薬層の場
合には試薬層と支持体の間に吸水層を設けることが好ま
しい。

試薬層または吸水層の上に光遮蔽層を設けることができ
る。光遮蔽層は光遮蔽性または光遮蔽性と光反射性を兼
ね備えた微粒子または微粉末（以下、単に微粒子という
）が少量の被膜形態成能を有する親水性ポリマーバイン
ダーに分散保持されている水透過性または水浸透性の層
である。光遮蔽層は試薬層または吸水層における検出可
能な変化（色変化、発色等）を光透過性支持体側から反
射測光する際に後述する多孔性展開層に点着供給された
水性液体試料の色、特に全血試料に含まれるヘモグロビ
ンの赤色等を遮蔽するとともに光反射層または背景層と
しても機能する。

光遮蔽性と光反射性とを兼ね備えた微粒子の例としては
二酸化チタン微粒子（ルチル型、アナターゼ型またはプ
ルカイト型の粒子径的０．１−から約１．２ｍの微結晶
粒子等）、硫酸バリウム微粒子、アルミニウム微粒子ま
たは微小フレーク等があり、光遮蔽性微粒子の例として
はカーボンブラック、ガスブラック、カーボンミクロビ
ーズ等があり、これらのうちで二酸化チタン微粒子、硫
酸バリウム微粒子が好ましい。被膜形成能を有する親水
性ポリマーバインダーとしては吸水層に用いられるのと
同じ親水性ポリマーのほかに弱親水性の再生セルロース
、セルロースアセテート等があり、これらのうちではゼ
ラチン、ゼラチン誘導体、ポリアクリルアミド等が好ま
しい。ゼラチン、ゼラチン誘導体は公知の硬化剤（架橋
剤）を混合して用いることができる。

光遮蔽層は光遮蔽性微粒子と親水性ポリマーとの水性分
散液を公知の方法により試薬層または吸水層の上に塗布
し乾燥することにより設けることができる。光遮蔽性微
粒子と親水性ポリマーバインダーとの乾燥時の体積比は
光遮蔽性微粒子１０に対しポリマーバインダーが約２．
５から約７．５、好ましくは約３．０から約６．５の範
囲であり、光遮蔽性微粒子が二酸化チタン微粒子の場合
には重量比で二酸化チタン微粒子１０に対しポリマーバ
インダーが約０．６から約１．８、好ましくは約０．８
から約１．５の範囲である。光遮蔽層の乾燥層の厚は約
３μｍから約３Ｏｎ、好ましくは約５　ｐｍから約２０
ｐＩ１１の範囲である。

試薬層、吸水層または光遮蔽層の上には後述する多孔性
展開層を接着し積層するために接着層を設けることがで
きる。光遮蔽層の上に多孔性展開層を設ける場合には接
着層は必須である。接着層は水で湿潤しているとき、ま
たは水を含んモ膨潤しているときに多孔性展開層を接着
して一体化できる親水性ポリマーから主としてなる。接
着層に用いうる親水性ポリマーとしては吸水層に用いう
るのと同じ親水性ポリマーがあげられ、これらのうちで
ゼラチン、ゼラチン誘導体、ポリアクリルアミド等が好
ましい。接着層の乾燥層厚は約０．５−から約２０μｍ
、好ましくは約１μｍから約１０−の範囲である。接着
層には界面活性剤を含有させることができる。界面活性
剤としてはノニオン性界面活性剤、特にオキシエチレン
基またはオキシプロピレン基が８〜１５個連なった鎖状
構造を含むノニオン性界面活性、剤が好ましい。

接着層は親水性ポリマーと所望により加えられる界面活
性剤等を含む水溶液を公知の方法で試薬層、吸水層また
は光遮蔽層の上に塗布して設けることができる。

吸水層または試薬層の上に直接または接着層を介して、
または光遮蔽層（光反射Ｎ）の上に接着層を介して、織
物生地からなる多孔性展開層（織物展開層）を設ける。

多孔性展開層はその上側表面（ｙｚ明支持体から遠い側
の表面）に点着供給された水性液体試料をその中に含有
している成分を実質的に偏在させることなしに横方向に
拡げ単位面積当たりほぼ一定容量の割合で親水性ポリマ
ーバインダーを含む吸水層、または吸水性または水浸透
性の試薬層に供給する作用（展開作用またはメータリン
グ作用）をする層である。さらに多孔性展開層は水性液
体試料中の分析を阻害する非溶解性物質（例、全血試料
中の赤血球等）を濾過除去する作用をもする層である。

多孔性展開層に用いうる織物生地としては、緯糸あるい
は経糸の少なくとも一方が複数糸より成る平織物が用い
られる。

平織物の好ましい具体例としては、緯糸２本、経糸１本
で織った平織物布地、緯糸１本、経糸２本で織った平織
物布地、緯糸、経糸とも２本で織った平織物布地がある
。

織物生地を構成する糸としては綿、紺、羊毛等の天然繊
維の糸、ビスコースレーヨン、キュプラ等の再生セルロ
ース、セルロースジアセテート、セルローストリアセテ
ート等の半合成有機ポリマー、ポリアミド（各種のナイ
ロン類）、アセタール化ポリビニルアルコール（ビニロ
ン等）、ポリアクリロニトリル、ポリエチレンテレフタ
レート、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン
等の合成有機ポリマーの細繊維からなる糸または単繊維
からなる糸、天然繊維と再生セルロース、半合成または
合成有機ポリマー繊維との混合繊維からなる糸があげら
れる。糸の形態としてはフィラメント糸、紡績糸、ある
いはこれらに撚りを与えた有撚糸、さらにフィラメント
糸と短繊維との複合糸など各種の形態のものを用いるこ
とができる。

これらのうちでは、フィラメント糸の有撚糸が好ましい
。織物生地の糸の太さは綿紡績糸番手で表して約２０３
から約１５Ｏ３、好ましくは約４Ｏ３から約１２Ｏ３相
当の範囲、または絹糸デニールで表して約３５Ｄから約
３００　Ｄ、好ましくは約４５Ｄから約１３０　Ｄ、相
当の範囲、織物生地の厚さは約１１００Ｉ１から約５０
０μｍ好ましくは約１２０ｎから約３５０ｐｍの範囲、
織物生地の有する空隙率は約４０％から約９０％、好ま
しくは約５０％から約８５％の範囲である。

多孔性展開層にもちいられる織物は水洗等の脱脂処理に
より少なくとも糸製造時または織物製造時に供給または
付着した油脂類を実質的に除去した織物生地であるが、
さらにその織物生地は特開昭５７−６６３５９に開示の
物理的活性化処理（好ましくはグロー放電処理またはコ
ロナ放電処理等）を生地の少なくとも片面に施すか、あ
るいは特開昭５５−１６４３５６、特開昭５７−６６３
５９等に開示の親木性ポリマー含浸処理等の親水化処理
、またはこれらの処理工程を逐次実施することにより繊
物を親水化し、下側（支持体に近い側）の層との接着力
を強化することができる。

織物生地を試薬層、吸水層または接着層に接着積層する
には特開昭５５−１６４３５６、特開昭５７−６６３５
９等に開示の方法に従うことができる。すなわち試薬層
、吸水層または接着層の塗布後未乾燥のうちに、または
乾燥後の層に水（または界面活性剤を少量含む水）を実
質的に均一に供給し層を膨潤させ、ついで織物生地を湿
潤または膨潤している層の上に実質手酌に均一に軽く圧
力をかけながら接着積層し一体化する。試薬層、吸水層
または接着層の親水性ポリマーバインダーがゼラチンま
たはゼラチン誘導体の場合には層の塗布後ゼラチン（誘
導体）が未乾燥のゲル状態の間に織物生地を接着積層し
一体化する方法を採用することができる。

このようにして織物展開層を有する一体型多層分析要素
が完成する。

本発明の一体型多層分析要素の織物展開層には特開昭６
０−２２２７７０に開示の一体型多層分析要素と同様に
して一定量の液体試料の展開面積を調節する目的で種々
のポリマーあるいは／および界面活性剤を含有させるこ
とができる。

ことに酵素に代表される高分子物質または蛋白に結合し
た被検成分の解離剤等が試薬組成物の成分として含まれ
る場合にはその試薬成分を織物展開層に含有させるのが
好ましいことがある。織物展開層に試薬組成物またはそ
の一部の成分を含有させるには酵素についてｒＲｅｓｅ
ａｒｃｈ　ＤｉｓｃｌｏｓｕｒｅＪ＃１２６２６（Ｏｃ
ｔｏｂｅｒ　１９７４）、特開昭５０−１３７１９２、
特開昭５７−２０８９９７等、酵素の基質についての特
開昭５７−２０８９９８等、蛋白に結合した被検成分の
解離剤について特開昭５９−１７１８６４等に開示の方
法に従って実　　　　　−施することができる。

本発明の一体型多層分析要素には前述の諸層のほかに必
要に応じて特開昭５１−４０１９１、特開昭５３−１３
１０８９等に開示の検出層または媒染層、特開昭５４−
２９７００等に開示のミグレーション阻止層、特開昭５
１−４０１９１等に開示の中間層、特開昭５６−８５４
９に開示の試薬含有微粒子分散層、特開昭５２−３４８
８に開示の特定の疎水性ポリマーの均質薄層からなるバ
リアー層、特開昭５８−７７６６１．特開昭６０−４４
８６５等に開示の空気バリヤー層、特開昭６０〜２１４
５２に開示のガス透過性粘着性中間層等を組み込んで設
けることができる。

展開層、試薬層、吸水層、検出層、接着層等には界面活
性剤、好ましくはノニオン性界面活性剤を含有させこと
ができる。ノニオン性界面活性剤の例として、ｐ−オク
チルフェノキシポリエトキシエタノール、ｐ−ノニルフ
ェノキシポリグリシドール、ポリオキシエチレンオレイ
ルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレ
ート、オキチルグルコシド等がある。ノニオン性界面活
性剤を試薬層、吸水層又は検出層に含有させることによ
り分析操作時に水性液体試料中の水が試薬層、吸水層又
は検出層に実質的に一様に吸収されやすくなり、また展
開層との液体接触が迅速かつ実質的に一様になる。ノニ
オン性界面活性剤を展開層に含有させることにより水性
液体試料の展開作用（メータリング作用）がより良好に
なる。ノニオン性界面活性剤の展開層における含有量は
展開層１ｒｒｆ当り約１０■〜約３．０ｇ、好ましくは
約２０■〜約２．０ｇの範囲である。

本発明の多層分析要素は前述の諸特許明細書に記載の公
知の方法により調製することができる。

本発明の多層分析要素は一辺約１５閣から約３０ａｎの
正方形またはほぼ同サイズの円形等の小片に裁断し、特
公昭５７−２８３３１、実公昭５６−１４２４５４、特
開昭５７−６３４５２、実開昭５８−３２３５０、特表
昭５８−５０１１４４等に記載のスライド枠に収めて化
学分析スライドとして用いることが、製造、包装、輸送
、保存、測定操作等諸種の観点で好ましい。使用目的に
よっては長いテープ状でカセットまたはマガジンに収め
て用いること、または小片を開口のあるカードに貼付ま
たは収めて用いることなどもできる。

本発明の多層分析要素は前述の諸特許明細書等に記載の
操作により液体試料中のアナライトの分析を実施できる
。例えば約５　ｐｇから約３０ａｌ好ましくは８μｅか
ら１５ｐｆｆｉの範囲の全血、血漿、血清、尿等の水性
液体試料中を展開層に点着し、１分から１０分の範囲で
、約２０°Ｃから約４０°Ｃの範囲の実質的に一定の温
度で、好ましくは３７°Ｃ近傍の実質的に一定の温度で
インクベーションし、要素内の発色または変色を可視光
又は紫外光の吸収極大波長またはその近傍の波長の光を
用いて光透過性支持体側から反射測光し、予め作成した
検量線を用いて比色測定法の原理により液体試料中のア
ナライトの含有量を求めることができる。あるいは、要
素内の蛍光の強度を測光し、予め作成した検量線を用い
て液体試料中のアナライト含有量を求めることができる
。点着する液体試料の量、インクベーション時間及び温
度を一定にすることによりアナライトの定量分析を高精
度で実施できる。測定操作は特開昭６０−１２５５４３
、特開昭６０−２２０８６２、特開昭６１−２９４３６
７、特開昭５８−１６１８６７等に記載の化学分析装置
により極めて容易な操作で高精度の定量分析を実施でき
る。

なお、本発明の一体型多層分析要素は織物生地を実開昭
５７−４２９５１に開示の一定の形の一定面積の水性液
体試料点着供給用ポーラス層（パッチ）として最上層に
設けた態様とすることもできる。

〔作用〕

展開層に緯糸、経糸のうち少なくとも一方が複数糸より
なる織物を使用することにより全血試料であっても点着
された試料を均一に円形に展開することができる。

以下、実施例および比較例により本発明を具体的に詳細
に説明する。

〔実施例） 実施例１ ゼラチン用下塗り処理が施されである厚さ１８０μｍの
無色透明ポリエチレンテレフタレー）　　（ＰＥＴ）フ
ィルム上に層中の各成分の被覆量が下記のようになるよ
う、グルコース定量用試薬層を塗布した。

グルコースオキシダーゼ　　　　　１００００　Ｕ／Ｉ
Ｔｆペルオキシダーゼ　　　　　　　　１００００　Ｕ
／ボ１．７−シヒドロキシナフタレン　１００ＯＱ憚ｇ
／ｒｒ（４−アミノアンチピリン　　　　　　５００　
ｔａｇ／ボアルカリ処理ゼラチン　　　　　　　２０ｇ
／ｒｒｆノニルフェノキシポリエトキシエタノール（平
均ｌＯオキシエチレン単位含有）　　５００　ｍｇ／ｒ
ｒｒこの試薬層の上に更に次に示すような被覆量となる
よう光遮蔽層を塗布した。

酸化チタン微粉末　　　　　　　　　１０　ｇ／ｒＩ？
アルカリ処理ゼラチン　　　　　　　　５ｇ／ｎ（ノニ
ルフェノキポリエトキシエタノール（平均１０オキシ工
チレン単位含有）　　２００　ｍｇ／ｒｄさらに、その
上に下記の被覆量となるよう接着層を塗布し、グルコー
ス定量用シートを作製した。

アルカリ処理ゼラチン　　　　　　　２．０　ｇ／ｒｄ
ノニルフェノキポリ千トキシトキシエタノール１０オキ
シ工チレン単位含有）　　１００　ｍｇ／ｎ（別に緯糸
として、ポリエチレンテレフタレートを主成分とするポ
リエステルフィラメント７５ｄ／３６ｆの３００回／ｍ
で撚糸した糸を２本引揃えて使用し、経糸としては同じ
くポリエチレンテレフタレートを主成分とするポリエス
テルフィラメント７５ｄ／３６ｆの３００回／ｍで撚糸
した糸を１本使用した、緯線密度８５本Ｚインチ、経糸
密度２００本／インチの平織物布地を用意した。その布
地を約９５°ＣのＮａ　Ｏｌｌ水溶液で処理して約１２
％減量加工後、低温プラズマ処理により親水化し、液体
試料展開層用織物とした。

先に作製した、グルコース定量用シートを０．２％ノニ
ルフェノキシポリエトキシエタノール（平均１０オキシ
工チレン単位含有）水溶液にてほぼ均一に湿潤させ直ち
に上記の液体試料展開層用織物と密着させつつ、加圧ロ
ーラー間を通過させて両者を均一にラミネートした。得
られた積層物は乾燥後もはがれてしまうことなく強固に
接着されていた。

このようにしてグルコース定量用一体型多層分析要素を
得た。

実施例２ 多孔性展開層としてポリエチレンテレフタレートを主成
分とするポリエステルフィラメント７５ｄ７９６ｆを使
用し、実施例１と同様の盛り方をした平織物を用いた以
外は実施例１と同様にしてグルコース定量用一体型多層
分析要素を得た。

比較例１ 多孔性展開層として緯糸、経糸の双方ともポリエチレン
テレフタレートを主成分とするポリエステルフィラメン
ト７５ｄ／３６ｆの３００回７ｍで撚糸した糸を１本で
使用して、緯糸密度１７０本フインチ、経糸密度２００
零／インチで織った平織物を用いた以外は実施例１と同
様にしてグルコース定量用一体型多層分析要素を得た。

上記のようにして得られたグルコース定量用−体型多層
分析要素について下記のような２種の測定を実施した。

■血液展開性の比較 血液凝固阻止剤としてＥＤＴＡ−２Ｋ　（エチレフジア
ミン４酢酸２カリウム塩）を用いて採血した全血を１０
°Ｃ冷却下２５０Ｏｒｐｍ　１０分間遠心分離し血球と
血漿を用い再構成後のへマドクリット値（Ｈｃ　ｔ）が
第１表に示す値となるよう混合しグルコース定量用一体
型多層分析要素の血液展開性比較試験に用いた。

■グルコース定量性の比較 グルコースを約１０Ｏｎ＋ｇ／ｄＬ含む正常人全血（Ｂ
ｅｔ４４％）について、３種のグルコース定量用一体型
多層分析要素を用いてグルコース測定値を求める分析操
作をそれぞれの要素について２０回ずつくりかえし実施
した。

上記■■の性能評価試験は、いずれも要素の展開層にサ
ンプル（全血および再構成全血）１０ｐＩｌを点着し、
３７°Ｃで６分インクベーションし、直ちに透明支持体
側から中心波長５４０ｎａ＋の可視光を用いて要素内の
発色の光学濃度値に換算した。

以上２項目の測定結果は第１表および第２表に示す通り
であり本発明の経糸あるいは緯糸の少なくとも一方が複
数糸より織布を展開層として用いた一体型多層分析要素
が血液展開性およびグルコース濃度定量性に優れている
ことがわかる。

■血液展開性評価結果（第１表） 実施例１および２で示したグルコース定量用−体型多層
分析要素は展開する血液のへマドクリット値（Ｈｃ　ｔ
）が変化しても展開の形はほぼ一定で円形に近いが比較
例に示したものでは展開する血液のＨｃｔ値が変化する
と展開面積だけでなく展開の形も変化し実施例１あるい
は２のグルコース定量用一体型多層分析要素の方が血液
展開性に優れることが分る。

第１表血液展開性の比較 ■グルコース濃度測定量性評価結果 第２表の結果は実施１．２および比較例１のグルコース
分析用一体型多層分析要素を用いて得られた測定結果で
ある。

グルコース濃度はほぼ近い値として測定されているが、
測定のバラツキ（同時再現性）が実施例１あるいは２に
示したグルコース定量用一体型多層分析要素の方が比較
例１に示したものより再現性に優れており信顧性の高い
測定結果を得ることができることが分る。

第２表　グルコース定量性の比較 ＊変動係数 〔発明の効果〕 本発明の一体型多層分析要素は点着された液体試料を均
一に展開することができ、展開の一方向への行き過ぎに
よるバラツキを抑えて分析の結果の再現性が良好である
。特に、全血試料の場合にも均一に展開させることがで
きる。

特許出願人　富士写真フィルム株式会社同　　　ユニチ
カ株式会社

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）少なくとも一つの試薬を結合剤中に含む少なくと
   も一つの試薬層と織物からなる液体試料展開層をこの順
   に積層してなる一体型多層分析要素において、前記液体
   試料展開層を構成する織物が緯糸、経糸のうち少なくと
   も一方が複数糸より成ることを特徴とする一体型多層分
   析要素
2. （２）前記試薬層が光透過性水不浸透性の平面状支持体
   の一方の表面に設けられている特許請求の範囲１に記載
   の一体型多層分析要素