JPH0127044B2

JPH0127044B2 -

Info

Publication number: JPH0127044B2
Application number: JP28752385A
Authority: JP
Inventors: Itaru Yamamoto; Kazumi Ogata; Keiko Terajima
Original assignee: Senju Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Senju Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1985-12-19
Filing date: 1985-12-19
Publication date: 1989-05-26
Also published as: JPS62145019A

Description

【発明の詳細な説明】

（産業上の利用分野）本発明は新規かつ有用な非ステロイド系抗炎症
剤に関する。（従来の技術）炎症作用の機構は、たとえば細胞膜のリン脂質
から酵素ホスホリパーゼA₂によりアラキドン酸
が生成し、さらにシクロオキシゲナーゼによりプ
ロスタグランジンに進む経路と、リポキシゲナー
ゼによつてロイコトリエンに進む経路とが知られ
ている。抗炎症剤として用いられるステロイド系
薬剤はホスホリパーゼA₂を阻害するのでシクロ
オキシゲナーゼ経路およびリポキシゲナーゼ経路
の双方を阻害して抗炎症効果を発揮するという点
では理想的な抗炎症剤といえるが、その副作用が
強いため使用にあたつては問題が多い。一方、非
ステロイド系抗炎症剤の多くはアラキドン酸カス
ケードのシクロオキシゲナーゼ経路を阻害するの
みのため満足すべき消炎効果を期待し得ない。（発明が解決しようとする問題点）近年ステロイド系抗炎症剤以外のホスホリパー
ゼA₂阻害剤の検索が行われ、メパクリンやパラ
ブロモフエナシルブロマイド等が知られている
が、ホスホリパーゼA₂阻害活性は必ずしも強く
はなく、従つて実用上充分な効果をあげ得ないた
め、より強力な非ステロイド系のホスホリパーゼ
A₂阻害剤の開発が要望されている。本発明者等
は種々の化合物を合成してホスホリパーゼA₂阻
害作用物質を検索し、安全かつ有効な非ステロイ
ド系のホスホリパーゼA₂阻害剤を開発するべく
検討を重ねた結果本発明を完成した。（問題点を解決するための手段）本発明は、式〔式中Ｒは

【式】又は

【式】Ｘは水素又はハロゲンを示す〕で表される化合物またはその塩を有効成分として
含有することを特徴とする抗炎症剤である。上記式〔〕中Ｘで示されるハロゲンは、塩
素、臭素、ヨウ素、フツ素等いずれも本発明の目
的に使用され得る。本発明の抗炎症剤は、その有効成分として式
〔〕で示される化合物を含有する。本化合物は、
その塩として用いてもよい。塩としては、たとえ
ばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属
塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩等があ
り、いずれも有利に使用しうる。これらの本発明
の有効成分の毒性はきわめて低い。本発明の抗炎症剤は通常、注射剤、軟膏剤、貼
布剤等の非経口用剤、錠剤、カプセル剤、シロツ
プ剤等の経口用剤として調製される。本発明の抗炎症剤中の化合物〔〕の含有量は
その剤形や適応症状によつて異なるが、通常
0.005〜30％程度このましくは0.01〜10％程度を
含有させるのがよい。たとえば注射剤の場合は
0.01〜0.1％程度の水性溶液として、軟膏剤の場
合は軟膏中に１〜10％程度を含有させるのがよ
い。また、経口用剤の場合は１日量成人100〜
1000mg程度の用量となるよう調製される。本発明の抗炎症剤には他種の薬剤を配合しても
よい。配合し得る薬剤としては、たとえば、防腐
剤、賦形剤、非イオン界面活性剤等があるが、本
発明の目的をそこなわないかぎり、それら以外の
適宜の薬物、または着色剤等を適宜配合すること
ができる。本発明の抗炎症剤の有効成分である化合物
〔〕は、たとえば昭和59年特許出願公開第
219295号記載の方法またはそれに準じた方法によ
つて製造し得る。すなわち、有機溶媒中α―トコ
フエロールにオキシ塩化リン等のハロリン酸エス
テル化剤を塩基性脱酸剤の存在下に反応させてハ
ロリン酸エステルに導き、これに反応に関与しな
い水酸基が保護されたアスコルビン酸またはウリ
ジンを反応させ、ついで保護基を離脱させること
により化合物〔〕またはその塩が得られる。（作用）本発明の抗炎症剤の有効成分である化合物
〔〕について、そのホスホリパーゼA₂阻害効果
は、下記実験例に示すとおりである。以下の記載
において上記一般式〔〕で示される化合物のう
ち、Ｒで示される基が〔ａ〕で示されるものを
EPC，〔ｂ〕で示される化合物のＸが水素である
ものをEPUと称することとする。なお、EPUは
文献未載の新規物質である。実験例１（ホスホリパーゼA₂阻害作用）実験材料 ¹⁴C―アラキドニルホスフアチジルコリン（以
下 ¹⁴C―PCと略称する）はアメルスナム
（Ametsnam）社から、メパクリンおよびDL―α
―トコフエロールは半井化学薬品工業から購入し
た。EPCカルシウム塩は昭和59年特許出願公開
第219295号公報記載の方法によつて製造し、
EPUは下記参考例によつて製造した。また、対
照としてのコハク酸α―トコフエロールはDL―
α―トコフエロールと無水コハク酸から、DL―
α―トコフエリルフオスフエートはDL―α―ト
コフエロールとオキシ三塩化リンからそれぞれ文
献に従つて合成したものを用いた。また、SDラ
ツトは静岡県実験動物農業協同組合から購入し
た。参考例（EPUの合成）オキシ三塩化リン6.12ｇをベンゼン50mlに溶か
して置き、これにDL―α―トコフエロール8.6ｇ
（0.02モル）およびピリジン9.5ｇをベンゼン50ml
に溶かした混合液を撹拌下に滴下する。滴下終了
後、なお、３時間かき混ぜ、析出した塩酸ピリジ
ンをろ別後、ろ液を減圧下、50℃で濃縮する。こ
の残査油状物にベンゼン30mlを加えて溶かして置
く。一方、イソプロピリデンウリジン6.82ｇ
（0.024モル）およびピリジン3.2ｇをテトラヒド
ロフラン120mlに溶かして、氷冷下、撹拌下に上
記ベンゼン溶液を滴下し、滴下終了後、約１時間
撹拌し、更に室温にもどして約１時間撹拌する。
つぎに析出した塩酸ピリジンをろ別後、ろ液を減
圧下で溶媒を留去させる。残査油状物をエチルア
ルコール30mlに溶かし、これに１規定の塩酸150
mlを加えて約15分間加熱還流させた後冷却させ、
これに酢酸エチルで抽出し、無水硫酸ナトリウム
で乾燥後酢酸エチルを留去させる。この残査に無
水エチルアルコール約100mlを加えて溶かし、撹
拌下これに飽和の水酸化ナトリウム液を徐々に溶
液のPHが中性になるまで滴下させると、白色結晶
を析出する。これをろ別し、エチルアルコールで
洗浄する。これを水―エチルアルコールから再結
晶させると融点246〜248゜（分野）のDL―α―ト
コフエロール、ウリジンリン酸ジエステルナトリ
ウム塩8.5ｇを得る。また、このナトリウム塩を水に溶かし、塩酸酸
性とするとDL―α―トコフエロール、ウリジン
リン酸ジエステルが白色結晶として7.1ｇ得られ
る。 (1) ホスホリパーゼA₂の調製まず雄のSDラツト（180ｇ〜200ｇ）を24時間
絶食させた後に屠殺して胃を摘出し、前胃を除去
後反転させ、これを0.05モルグリシン／水酸化ナ
トリウム緩衝液（PH9.5）で洗浄し、粘膜部分を
軽く剥ぎ取る。５〜６匹分の粘膜を集め、直ちに
上記と同じ緩衝液に懸濁させ、50℃で10分間熱処
理してリゾプラーゼ（lyso Plase）を失活させた
のち、超音波処理を施し、2000cpmで５分間遠心
分離し、上清を集め、これを酵素調製品とした。
本酵素は−80℃で長期間凍結保存してもその活性
を失わなかつた。 (2) ホスホリパーゼA₂活性の測定 ¹⁴C―PCを共栓付試験管に必要量入れ、窒素
気流中で有機溶媒を留去しておく。これに少量の
エーテルを加え、0.1モル／水酸化ナトリウム緩
衝液（PH8.5）、0.2モル食塩水、２ミリモル塩化
カルシウム水溶液および酵素溶液を加えて全量を
200μとする。各検体試料は、あらかじめ緩衝
液に溶解し、濃度を調製しておく。この場合、緩
衝液に溶解し難い試料はエチルアルコールまたは
ジメチルスルホキシド等に溶解したものを緩衝液
に用いて希釈するが、エチルアルコールやジメチ
ルスルホキシド等最終濃度は５％以下となるよう
にする。酵素溶液に検体溶液とを混合して37℃で
30分間放置したのち、クロロホルム／メタノール
溶液（1/2）0.75mlを加えて反応をとめる。更に
クロロホルム、水を0.25mlずつ加え、20分間振り
混ぜて生成物を抽出後、クロロホルム層を分取す
る。これを窒素気流中で有機溶媒を留去し、残留
物を再度少量のクロロホルムに溶解し、全量を薄
層板上に滴下してクロマトグトグラフイーを行
う。同時にアラキドン酸の標準品についてもクロ
マトグラフイーを行つてその位置を測定の標準と
した。展開溶媒としては、リグロイン／エーテ
ル／酢酸の溶液（50／50／１）を用いた。ヨウ素
蒸気による発色でアラキドン酸の位置を確認した
のち、その部分をかきとつて、液体シンチレーシ
ヨンカウンターで放射能を測定した。試験結果本発明の有効成分であるEPCナトリウム塩、
EPCカルシウム塩ならびにEPU、および対照と
してメパクリンを用いてホスホリパーゼA₂阻害
作用を測定した結果を第１表に示す。

【表】

【表】第１表に示すようにEPCナトリウム塩、EPC
カルシウム塩およびEPUのホスホリパーゼA₂阻
害作用は対照として用いたメパクリンと比べては
るかに強い。なお、表には示さなかつたがDL―
α―トコフエロールのホスホリパーゼA₂阻害活
性はメパクリンよりもはるかに弱く、コハク酸ト
コフエロールおよびDL―α―トコフエローホス
フエートには全くホスホリパーゼA₂阻害作用は
認められなかつた。実験例２（ラツトのカラゲニン浮腫に対する抗
炎症効果）ラツト背部にカラゲニンを用いて浮腫を生じさ
せた。浮腫を生じさせる２時間前にEPCカルシ
ウム塩およびEPUナトリウム塩を腹腔内投与し
て浮腫の抑制率を測定した結果を第２表に示す。なお、測定方法は下記の文献によつた。田村滋夫、葛声政二：抗炎症剤の薬効検定法と
してのカラゲニン膿瘍モデルの再評価日薬理誌
84337〜344（1984）

【表】第２表にみられるように、EPCカルシウム塩
およびEPUナトリウム塩は投与量50ないし100
mg／Kgで浮腫重量および血管透過性（吸光度）と
も対照群に比して有意に抑制した。実験例３（モルモツトの紫外線紅斑に対する抗
炎症効果）雄のハーレイ（Hartley）系モルモツト（各約
200ｇ（８匹を使用し、予めその背部を電気バリ
カンおよび脱毛クリームで除毛した。２ケ所に直
径10mmの小孔をあけた布をあて、その小孔を中心
として直径40mmに実験開始２時間前、１時間半
前、１時間前に被験物質を１カ所あたり100mgず
つ塗布し、最終塗布１時間後に温水を含んだガー
ゼで被験物質を拭きとつた。皮膚が乾燥してか
ら、前記の布をあてて水銀ランプ（東芝理化学用
水銀灯440W）で５cmの距離から２分間照射した。
照射直後に再度被験物質を100mgずつ塗布し、紫
外線照射の２時間後に紅斑の形成程度を次の基準
に基づいて判定した。紅斑なし０紅斑がわずかに認められる。１紅斑が認められるが境界が不明瞭２境界が明瞭な紅斑３紅斑の赤みが強く境界が明瞭なもの４本実験では被験物質として50％グリセリンに溶
解した10％EPCナトリウム塩、対照物質として
50％グリセリンを用いた。EPCナトリウムでは
平均値1.33±0.52、対照（50％グリセリン）では
平均値３±1.41であつてEPCナトリウムによる抑
制率は55.7％であつた。（実施例）実施例１点眼剤 DL―α―トコフエロール、ウリジンリン酸ジ
エステルナトリウム 0.3ｇホウ酸 1.5ｇホウ砂 0.3ｇＰ―オキシ安息香酸メチル 0.026ｇＰ―オキシ安息香酸プロピル 0.014ｇ滅菌精製水全量 100ml 以上を調製し、点眼剤とする。実施例２内服錠Ｌ―アスコルビン酸、DL―α―トコフエロー
ルリン酸ジエステルカルシウム 100mg 乳糖 80mg デンプン 17mg ステアリン酸マグネシウム３mg 以上を１錠分の材料として常法により錠剤に成
型する。必要に応じて糖衣を施してもよい。実施例３注射剤 DL―α―トコフエロール、ウリジンリン酸ジ
エステルナトリウム 0.02ｇブドウ糖５ｇ注射用蒸留水全量 100ml 以上を注射剤の調製法に従つて注射剤とする。実施例４皮膚用外用軟膏剤Ｌ―アスコルビン酸、DL―α―トコフエロー
ルリン酸ジエステルナトリウム 5.0ｇグリセリン 12.0ｇステアリルアルコール 25.0ｇ白色ワセリン 25.0ｇＰ―オキシ安息香酸メチル 0.025ｇＰ―オキシ安息香酸プロピル 0.015ｇ滅菌精製水全量 100ｇ以上を軟膏の一般的調製法によつて調製し、皮
膚用外用軟膏剤を得る。実施例５シロツプ剤Ｌ―アスコルビン酸、DL―α―トコフエロー
ルリン酸ジエステルカリウム 2.0ｇＤ―ソルビトール70％液 70ml Ｐ―オキシ安息香酸メチル 0.028ｇＰ―オキシ安息香酸ブチル 0.012ｇ以上を滅菌精製水に溶かし、１規定の塩酸でPH
6.0に調製したのち、全量100mlとしてろ過し、ガ
ラスビンに充填し、シロツプ剤を得る。実施例６化粧水Ｌ―アスコルビン酸、DL―α―トコフエロー
ルリン酸ジエステルカリウム 1.0ｇクエン酸 0.1ｇグリセリン 5.0ｇエチルアルコール 8.0ml Ｐ―オキシ安息香酸メチル 0.1ｇ以上を滅菌精製水に溶かし、１規定の水酸化ナ
トリウムでPH6.0としたのち全量100mlとしてろ過
しガラスビンに充填して、化粧水とする。実施例７クリーム剤Ｌ―アスコルビン酸、DL―α―トコフエロー
ルリン酸ジエステルカリウム 1.0ｇステアリン酸 2.0ｇステアリルアルコール 7.0ｇスクワラン 5.0ｇオクチルドデウカノール 6.0ｇポリオキシエチレン（15）セチルエーテル
3.0ｇグリセリンモノステアレート 2.0ｇプロピレングリコール 5.0ｇＰ―オキシ安息香酸メチル 0.2ｇＰ―オキシ安息香酸プロピル 0.1ｇ滅菌精製水 68.7ｇ滅菌精製水にプロピレングリコールおよびＬ―
アスコルビン酸、DL―α―トコフエロールリン
酸ジエステルカリウムを加えて溶かし、加熱して
70℃にする。一方、他の成分を混合し、加熱融解
して70℃として置き、これに撹拌下に、前述した
水相部を加えて、均一に乳化させ、室温まで冷却
して化粧用クリームとする。これをクリーム用容
器に充填する。（発明の効果）本発明の抗炎症剤は、毒性も低く、少量できわ
めてすぐれた抗炎症効果を示すので、炎症の治療
剤として有利に使用することができる。

Claims

【特許請求の範囲】１式〔式中Ｒは【式】又は【式】を示し、Ｘは水素又はハロゲンを示す〕で表される化合物またはその塩を有効成分として
含有することを特徴とする抗炎症剤。