【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は一般式（）
（式中ＲはＨまたはCH3で示される基を表わす）
で示される化合物またはその塩を有効成分として
含有する抗血栓剤に関する。
脳卒中や心筋硬塞発作の主な原因の一つに血栓
症がある。種々の原因で生成した血栓は、壁圧血
栓として動脈硬化を促進したり、流血中に流れ出
た血栓が塞栓なると、循環障害を引きおこす。こ
れら動脈硬化、循環障害は上記脳卒中や心筋硬塞
発作の原因と考えられている。
近年の進歩した血小板機能に関する研究によれ
ば、血小板が血栓形成過程において中心的な役割
を持つていることが明らかになつた。
即ち、流血中に存在する血小板は正常な血管壁
とは平衡状態を保ち、凝集塊を生じることはない
が損傷部が生じると血管壁に内膜下組織に点在す
るコラーゲンや基底膜と粘着する。その粘着は血
小板のdence bodyからのADPやセロトニンの放
出反応を引きおこす。放出されたADPやセロト
ニンは、血小板相互の凝集反応を引きおこし、血
小板塊をつくる。
同時に、血小板第３因子の放出も引き起こし、
放出された血小板第３因子はトロンビンの生成を
促進する。その結果、血液凝固過程を活性化し、
血栓が形成されると考えられている。
以上の様な血栓形成における重要な血小板の役
割に注目し、血小板の粘着、放出、凝集の諸機能
を抑制する薬剤を血栓症の予防および治療に用い
る試みがなされている。
従来、血小板凝集抑制剤としては、アスピリ
ン、インドメサチンなどのような非ステロイド系
消炎剤、スルフインピラゾンのようなピラゾール
誘導体、ジピリダールなどのピリミドピリミジン
誘導体、アデノシン誘導体、パパベリンなどが知
られているが、薬理効果、安全性の面から、より
優れた薬剤の開発が望まれている。
本発明者らは4000種以上の化合物のスクリーニ
ング・テストを行つた結果、一般式（）で表わ
される化合物が強力な血小板凝集抑制作用を有
し、且つ毒性も低いことを見い出し本発明を完成
した。
以下に本発明を詳細に説明する。
本発明は一般式（）で示される化合物または
その塩を有効成分として含有する抗血栓剤を提供
するものである。
一般式（）で示される化合物のうちＲがＨで
示される化合物、すなわち（２−ヒドロキシエチ
ル）−１，２−ベンゾイソチアゾロ−３−オン
（化合物）は特開昭53−84969号公報に記載され
た化合物であり、ＲがCH3で示される化合物、す
なわち（２−ヒドロキシプロピル）−１，２−ベ
ンゾイソチアゾロ−３−オン（化合物）は新規
化合物であり、上記文献記載の方法に従つて製造
できるが、その製法の一例を参考例１に示す。
一般式（）で示される化合物の硫酸塩、塩酸
塩、臭化水素酸塩などの鉱酸塩、ナトリウム塩、
カリウム塩などのアルカリ金属塩、安息香酸、フ
マル酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸などの有機
酸塩などがあげられる。
次に、本発明に用いる化合物が血小板凝集抑制
作用を有することを以下の実験例によつて示す。
実験例 １
ウサギ多血小板血漿における血小板凝集抑制作
用（in vitro実験）
(a) 方法
家兎（２−2.5Kg）の総頚動脈より、９容量
の血液を採血し、3.8％クエン酸ナトリウム１
容量を含むシリコン処理フラスコに入れる。該
血液を1000rpmで15分遠心分離して、多血小板
血漿（platelet rich plasma.以下PRPと略称
する）を得た。
血小板凝集の観察はAggregometer（Bryston
社製）を用いて行なつた。諸種の凝集惹起（誘
発）物質の添加後の凝集の度合を比濁法により
透光度の増加としてとらえた。
(b) 操作
PRP0.9mlをAggregometer用のシリコン処
理キユベツトに入れ、ここに各種濃度の薬剤
（検体）または対照抑制薬物を含む生理食塩水
溶液0.05mlを添加後、１分間ふ置し、次いで、
各種凝集惹起物質を加えてその後の血小板含有
液の状態を観測し、吸光度を測定する。凝集抑
制率は次式より求める。
凝集抑制率（％）＝Ｃ−Ｄ／Ｃ×100
ここでＣは、生理食塩水を添加した時の最大
凝集率を示す透光度変化を示し、Ｄは薬剤添加
時の最大凝集率を示す透光度変化を示す。
(c) 結果
ADPおよびコラーゲン誘発血小板凝集抑制
作用
ADP（10-5M）をPRPに添加すると直ちに血
小板の形態変化に伴う一過性の透光度の減少に
続き、明らかな凝集が認められる。
コラーゲンをPRPに添加すると、１−２分
の潜伏期間を置いてから凝集が認められる。こ
れらの血小板凝集に対する各薬剤による抑制効
果を第１表に示す。
第１表の結果は、化合物およびが各種薬
剤惹起血小板凝集に対して抑制作用を有するこ
とを示している。
The present invention is based on the general formula () (In the formula, R represents a group represented by H or CH 3 )
The present invention relates to an antithrombotic agent containing the compound or a salt thereof as an active ingredient. Thrombosis is one of the main causes of stroke and myocardial infarction. Thrombi generated for various reasons promote arteriosclerosis as wall-pressure thrombi, or cause circulatory disorders when thrombi that flow out during blood flow become embolized. These arteriosclerosis and circulatory disorders are thought to be the causes of the above-mentioned strokes and myocardial infarction attacks. Recent advances in research on platelet function have revealed that platelets play a central role in the blood clot formation process. In other words, platelets present in blood flow maintain a state of equilibrium with normal blood vessel walls and do not form aggregates, but when an injury occurs, platelets adhere to the collagen and basement membrane scattered in the subintimal tissue on the blood vessel wall. do. This adhesion triggers the release of ADP and serotonin from platelet dense bodies. The released ADP and serotonin cause platelets to aggregate with each other, forming platelet clumps. At the same time, it also causes the release of platelet factor 3,
Released platelet factor 3 promotes thrombin generation. As a result, it activates the blood coagulation process,
It is thought that a blood clot may form. Focusing on the important role of platelets in thrombus formation as described above, attempts have been made to use drugs that suppress platelet adhesion, release, and aggregation functions for the prevention and treatment of thrombosis. Conventionally known platelet aggregation inhibitors include nonsteroidal anti-inflammatory drugs such as aspirin and indomethatine, pyrazole derivatives such as sulfinpyrazone, pyrimidopyrimidine derivatives such as dipyridal, adenosine derivatives, and papaverine. However, in terms of pharmacological effects and safety, the development of better drugs is desired. As a result of screening and testing over 4,000 types of compounds, the present inventors discovered that the compound represented by the general formula () has a strong platelet aggregation inhibitory effect and low toxicity, and completed the present invention. . The present invention will be explained in detail below. The present invention provides an antithrombotic agent containing a compound represented by the general formula () or a salt thereof as an active ingredient. Among the compounds represented by the general formula (), the compound in which R is H, that is, (2-hydroxyethyl)-1,2-benziisothiazol-3-one (compound) is described in JP-A-53-84969. The described compound in which R is CH 3 , i.e. (2-hydroxypropyl)-1,2-benzisothiazol-3-one (compound), is a new compound and can be prepared by the method described in the above literature. Therefore, it can be manufactured, and an example of the manufacturing method is shown in Reference Example 1. Mineral acid salts such as sulfate, hydrochloride, and hydrobromide, and sodium salts of the compound represented by the general formula (),
Examples include alkali metal salts such as potassium salts, and organic acid salts such as benzoic acid, fumaric acid, succinic acid, tartaric acid, and citric acid. Next, the following experimental examples demonstrate that the compounds used in the present invention have a platelet aggregation inhibiting effect. Experimental Example 1 Platelet aggregation inhibitory effect in rabbit platelet-rich plasma (in vitro experiment) (a) Method Nine volumes of blood were collected from the common carotid artery of a domestic rabbit (2-2.5 kg), and 3.8% sodium citrate was added to the blood.
Place into a siliconized flask containing the volume. The blood was centrifuged at 1000 rpm for 15 minutes to obtain platelet rich plasma (hereinafter abbreviated as PRP). Platelet aggregation can be observed using an Aggregometer (Bryston
(manufactured by KK). The degree of aggregation after the addition of various aggregation-inducing substances was determined by the nephelometric method as an increase in light transmittance. (b) Operation 0.9 ml of PRP was placed in a silicone-treated cuvette for Aggregometer, and after adding 0.05 ml of physiological saline solution containing various concentrations of drug (sample) or control inhibitory drug, it was incubated for 1 minute, and then
After adding various aggregation-inducing substances, the state of the platelet-containing solution is observed and the absorbance is measured. The agglomeration suppression rate is calculated from the following formula. Aggregation inhibition rate (%) = CD / C × 100 Here, C indicates the change in light transmittance indicating the maximum aggregation rate when physiological saline is added, and D indicates the maximum aggregation rate when the drug is added. Shows changes in light transmittance. (c) Results ADP and collagen-induced platelet aggregation inhibitory effect When ADP (10 -5 M) is added to PRP, a transient decrease in light transmittance accompanied by a change in platelet morphology is immediately followed by clear aggregation. When collagen is added to PRP, aggregation is observed after a 1-2 minute incubation period. Table 1 shows the inhibitory effects of each drug on platelet aggregation. The results in Table 1 show that the compounds have an inhibitory effect on platelet aggregation induced by various drugs.
【表】【table】
【表】
実験例 ２
急性毒性
方 法
レーベンス・ケルベー法に準拠して、雄性dd
系マウス（20±１ｇ）一群５匹に検体の0.3％
CMC懸濁液（検体濃度100mg／ml）を用いて経口
投与により行つた。
この結果、化合物のLD50値は＞１ｇ／Kg、
化合物のLD50値は＞１ｇ／Kgであつた。
この結果より、化合物およびはいずれもか
なりLD50値の高い、安全な薬剤であることが判
かる。
以上、説明した如く、本発明によつて提供され
る薬剤は、血小板凝集を阻害、抑制し、抗血栓剤
としての利用が期待される。
尚、一般式（）で示される化合物は、通常の
処方により錠剤、散剤、カプセル、または注射剤
などにして用いることができる。
この時、通常の賦形剤、崩壊剤、結合剤、展着
剤、滑沢剤、色素、剤皮成分、希釈剤などが用い
られる。
好ましく用いられる賦形剤としてはブドウ糖、
乳糖など、崩壊剤としてはデンプン、アルギン酸
ナトリウムなど、滑沢剤としてはステアリン酸マ
グネシウム、硫酸パラフイン・タルクなど結合剤
としては、単シロツプ、エタノール、ゼラチンな
ど、剤皮としては、分散剤と可塑剤があげられる
が、分散剤としては、メチルセルロース、エチル
セルロースなど、可塑剤としては、グリセリン、
デンプンなどが用いられる。また結晶セルロース
は崩壊、滑沢、結合および賦形剤としての性質を
全て有するものとして使用される。
投与方法は、経口もしくは注射により行なわれ
一般式（）で示される化合物の、LD50値が極
めて高い安全な化合物であるので、かなり高用量
まで可能であるが最低有効用量は、１回10〜500
mg／成人である。
参考例 １
（２−ヒドロキシプロピル）−１，２−ベンゾ
イソチアゾロ−３−オンの製造：
２，2′−ジチオビスベンゾイルクロライド10.3
ｇ（0.03モル）を乾燥四塩化炭素50ml中に懸濁さ
せ乾燥塩素を完全に溶解するまで加える。窒素ガ
スを通すことによつて過剰の塩素を除去し溶液を
過する。得られる液を冷却撹拌しながら塩化
メチレン100mlに溶解したイソプロパノールアミ
ン13.5ｇ（0.18モル）中に滴下する。滴下後さら
に１時間撹拌する。反応混合物を10％NaOH水
溶液で洗い、次に水で２回洗う。無水Na2SO4で
乾燥し、溶媒を減圧除去する。生成残留物をクロ
ロホルムに溶かしアルミナのカラムで過するこ
とにより黄褐色油状物を得る。この油状物は徐々
に結晶化する。ベンゼン−石油ベンゼンから再結
晶することにより3.2ｇ（25.8％）の目的物を白
色結晶として得る。
このものの物性は以下の通り。
融点 76〜78℃
元素分析
Ｃ Ｈ Ｎ
計算値(%) 57.31 5.31 6.69
実測値(%) 57.20 5.39 6.40
赤外線吸収スペクトル：第１図
２，２−ジチオビス（Ｎ−２−ヒドロキシプロ
ピルベンツアミド）8.4ｇ（0.02モル）をクロロ
ホルム100mlに懸濁させ臭素3.5ｇを冷却撹拌しな
がら滴下する。
滴下終了後30分撹拌を続け、その後トリエチル
アミン4.1ｇ（0.04モル）を滴下する。滴下終了
後30分還流する。反応混合物を水で３回洗い、無
水Na2SO4で乾燥する。溶媒を減圧で留去し、黄
褐色油状物を得る。この油状物は徐々に固化す
る。これをベンゼン−石油ベンゼンから再結晶し
て5.0ｇ（59.8％）の目的物を白色結晶として得
る。
このものの物性はＡ法で得られたものの物性値
とよく一致した。
実施例 １
錠剤の製法
１ 用いる材料
化合物 2000ｇ
乳 糖 100ｇ
殿 粉 150ｇ
カルボキシルメチルセルローズ・カルシウム
（CMC−Ca） 150ｇ
ポリビニルアルコール（PVA） 100ｇステアリン酸マグネシウム 25ｇ
2525ｇ
２ 方法
化合物、乳糖、殿粉およびCMC−Caを上
記分量秤量し、混合機中でよく混合し混合粉末
をつくる。この粉末にPVAを含む練合液を加
えて、通常の湿式造粒法に従つて造粒し、次い
で乾燥、整粒する。これにステアリン酸マグネ
シウムを加えて混合し、錠剤用顆粒を製造す
る。これをロータリー・タブレツト・プレスを
用いて、９ミリ径の糖衣面の杵を使用して、直
径９ミリ、厚み４ミリ、重量252.5mgの錠剤を
製造する。
実施例 ２
カプセル剤の製法
１ 用いる材料（剤皮）
ハイドロキシプロピルメチルセルローズ 48ｇ
ポリエチレングリコール−4000 10ｇ
酸化チタン（TiO2） 30ｇ
２ 方法
上記剤皮成分を、アセトン−ジクロルメタン
混合液（容量比１：１）に溶解し、コーテング
液を製造する。
通常の方法で上記コーテング液を、実施例１
で得られた錠剤にコーテイングし、コーテイン
グ錠とする。
実施例 ３
注射液の製法
化合物500mg、グルコース50ｇを秤取し、蒸
留水を加えて溶解し、全量を１とする。この溶
液をポア・サイズ0.22μのメンブランフイルター
（ミリポア社製、FGLP14200）を用いて、N2ガ
スによる加圧（0.5Kg／cm3）過を行ない、液
を20ml容白色アンプルに分注し熔封する。[Table] Experimental example 2 Acute toxicity method Based on the Lebens-Kerbet method, male dd
0.3% of the sample for each group of 5 mice (20±1g)
The test was carried out by oral administration using a CMC suspension (specimen concentration 100 mg/ml). As a result, the LD 50 value of the compound is >1 g/Kg,
The LD 50 value of the compound was >1 g/Kg. These results show that both compounds are safe drugs with fairly high LD 50 values. As explained above, the drug provided by the present invention inhibits and suppresses platelet aggregation, and is expected to be used as an antithrombotic agent. Incidentally, the compound represented by the general formula () can be used in the form of tablets, powders, capsules, injections, etc. by conventional formulation. At this time, conventional excipients, disintegrants, binders, spreading agents, lubricants, pigments, coating components, diluents, etc. are used. Preferably used excipients include glucose,
Disintegrants such as lactose, starch and sodium alginate, lubricants such as magnesium stearate, paraffin sulfate and talc, binders such as simple syrup, ethanol, and gelatin, and coatings such as dispersants and plasticizers. Dispersants include methylcellulose, ethylcellulose, etc., and plasticizers include glycerin,
Starch etc. are used. Crystalline cellulose is also used as having disintegrating, lubricating, binding and excipient properties. The administration method is oral or injection, and since the compound represented by the general formula () is a safe compound with an extremely high LD 50 value, it is possible to administer a fairly high dose, but the lowest effective dose is 10 to 100 mg/dose. 500
mg/adult. Reference Example 1 Production of (2-hydroxypropyl)-1,2-benzisothiazol-3-one: 2,2'-dithiobisbenzoyl chloride 10.3
g (0.03 mol) is suspended in 50 ml of dry carbon tetrachloride and the dry chlorine is added until completely dissolved. The solution is filtered to remove excess chlorine by passing nitrogen gas through it. The resulting liquid was added dropwise to 13.5 g (0.18 mol) of isopropanolamine dissolved in 100 ml of methylene chloride while cooling and stirring. After the addition, the mixture was further stirred for 1 hour. The reaction mixture is washed with 10% aqueous NaOH and then twice with water. Dry over anhydrous Na 2 SO 4 and remove the solvent under reduced pressure. The resulting residue is dissolved in chloroform and filtered through an alumina column to give a yellowish brown oil. This oil gradually crystallizes. Recrystallization from benzene-petroleum benzene yields 3.2 g (25.8%) of the desired product as white crystals. The physical properties of this product are as follows. Melting point 76-78℃ Elemental analysis C H N Calculated value (%) 57.31 5.31 6.69 Actual value (%) 57.20 5.39 6.40 Infrared absorption spectrum: Figure 1 8.4 g (0.02 mol) of 2,2-dithiobis(N-2-hydroxypropylbenzamide) is suspended in 100 ml of chloroform, and 3.5 g of bromine is added dropwise with stirring while cooling. After the addition was completed, stirring was continued for 30 minutes, and then 4.1 g (0.04 mol) of triethylamine was added dropwise. Reflux for 30 minutes after completion of the dropwise addition. The reaction mixture is washed three times with water and dried over anhydrous Na 2 SO 4 . The solvent was removed under reduced pressure to obtain a tan oil. This oil gradually solidifies. This was recrystallized from benzene-petroleum benzene to obtain 5.0 g (59.8%) of the desired product as white crystals. The physical properties of this product were in good agreement with those obtained by method A. Example 1 Tablet manufacturing method 1 Materials used Compound 2000g Lactose 100g Starch powder 150g Carboxylmethylcellulose calcium (CMC-Ca) 150g Polyvinyl alcohol (PVA) 100g Magnesium stearate 25g 2525g 2 Method Compound, lactose, starch and CMC- Weigh the above amount of Ca and mix well in a mixer to make a mixed powder. A kneading solution containing PVA is added to this powder and granulated according to a conventional wet granulation method, followed by drying and sizing. Magnesium stearate is added and mixed to produce granules for tablets. Using a rotary tablet press and a 9 mm diameter sugar-coated punch, tablets with a diameter of 9 mm, a thickness of 4 mm, and a weight of 252.5 mg are produced. Example 2 Capsule manufacturing method 1 Materials used (shell) Hydroxypropyl methyl cellulose 48 g Polyethylene glycol-4000 10 g Titanium oxide (TiO 2 ) 30 g 2 Method The above shell components were mixed with an acetone-dichloromethane mixture (volume ratio 1:1). ) to produce a coating solution. Example 1
The tablets obtained in step 1 are coated to obtain coated tablets. Example 3 Method for producing injection solution Weigh out 500 mg of the compound and 50 g of glucose, add distilled water to dissolve them, and make the total amount 1. Using a membrane filter with a pore size of 0.22 μ (Millipore, FGLP14200), this solution was pressurized with N 2 gas (0.5 Kg/cm 3 ), and the solution was dispensed into 20 ml white ampoules and melted. Seal.
【図面の簡単な説明】[Brief explanation of drawings]
第１図は化合物の赤外線吸収スペクトルを示
す。
Figure 1 shows the infrared absorption spectrum of the compound.