JPH01320064A - 血液成分分離方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、血液をその成分毎に分離する為に用いるバッ
グと白血球除去フィルターとより成る分離システムに関
するものである。

更に詳細に述べると、採血に用いられる抗凝固剤入りの
採血バッグと、血漿、赤血球、血小板は通過させるが白
血球は通過させない白血球除去フィルターおよび少なく
とも３つの血液成分分離用バッグを組み合わせる事によ
り、無菌的に白１肛球除去濃厚赤血球、白血球除去濃縮
血小板血漿、＋ｆ＋を漿の３種類の血液成分を同時に分
離しようとするシステムに関するものである。

（従来技術） 近年、医学、特に免疫学の進歩により、血液をその成分
毎に分離し、治療の目的に適した血液成分のみを輸血す
る、いわゆる成分輸血が普及して来た。しかしながら成
分輸血の際、輸血用の血液成分中に混入して来る白血球
は患者にとっては他人の白血球であり、赤血球のＡＢＯ
型を合わせたとしても白血球の血液型は種類が多く、白
血球の型を完全に一致させて輸血する事は困難である。

その１ｂ輸血された白血球の表面に存在する抗原に対し
、患者の体内には抗体が産生され、繰り返し輸血された
患者の場合、患者体内の坑口血球抗体と輸血血液中の白
血球とが抗原抗体反応を起こし、発熱、Ｊ麻疹等の輸血
副作用を起こす事が多い。この為、輸血用血液成分中に
含まれる自ｆＩＩＬ球を除去する目的に使用される白血
球除去フィルターが近年開発されて来ている。これらの
白血球除去フィルターは全血または成分毎に分離された
血液成分中の白血球を効率良く除去する事ができるので
、輸血を受ける患者にとっては副作用が抑えられ、非常
にμばれている。

（発明が解決しようとする問題点） しかしながら、これらの白血球除去フィルターはｒｍ血
液バッグ接続する際、完全に無菌状態で接続する事が不
可能である為、白血球を除去した律液製剤は製造後２４
時間以内に使用する事か義務付けられている。白血球を
除去していない血液製剤は、これよりもずっと長い期間
保存する事ができるので、無菌的に白ｌ１ｌＬ球を除去
するシステムがあれば非常に有用である事は言うまでも
無い。こわを解決しようとする試みが米国特許第４５９
６６５７号であるが、このシステムは、採血バッグに少
なくとも２つのバッグを接続し、採血バッグと一方のバ
ッグとの間に白血球除去フィルターを組み込んたもので
あり、使用方法は、先ず採血バッグ中の金山［を遠心分
離し、その後、血小板を含む血漿は白血球除去フィルタ
ーが接続されていないバッグに移され、濃厚赤血球が白
血球除去フィルターを通してもう一方のバッグに移され
る。この発明によれば白血球除去濃厚赤血球と白血球、
血小板を含む血漿が１１Ｐられる事になる。すなわち、
濃厚赤龜球中に含まれる白血球は除去できるか、血小板
を含む血漿中に混入する白血球は除去できず、更には、
白血球除去フィルターが血液バッグと一緒に遠心分離機
により遠心される為白血球除去フィルターの容器やバッ
グの破損があり、安心して使え無い為広く一般に斤反す
るには至っていない。

本発明者らは上記した様な従来技術の欠点を解決し、遠
心分離操作を行なう際には、白血球除去フィルターを取
り外すＩＧができ、すなわち、フィルター容器やバッグ
の破Ｈ１の心配が無く、白血球を除去した濃厚赤血球、
白血球を除去した濃縮血小板血漿、血漿等の３つの血液
成分を無菌的に一気に分離できるシステムを提供する事
を目的に鋭意研究した結果、本発明を成すに至った。

（問題点を解決する為の手段） すなわち本発明は、採血バッグに血漿、赤血球、血小板
は通過させるが白血球は通過させない白血球除去フィル
ターの１端が接続され、白血球除去フィルターの他端に
は少なくとも３つの血液成分分離用バッグが接続されて
成る事を特徴とする血液成分分間システムである。

本発明で言う採血バッグとは、採血針を備える採＋ｆｉ
ｔチューブを連結し、内部にはＡＣＤ　（アシッドサイ
トレートデキストローズ）、ＣＰＤ　（サイトレート・
フォスフェート・デキストローズ）等の抗凝固剤を封入
したバッグであり、一般の採血に使用する採血バッグを
使用する事ができる。

白血球除去フィルターとは、血液中の白血球は捕捉する
が他の血液成分すなわち血漿、赤証球、血小板は捕捉し
ないフィルターであり、繊維状物質、多孔性物質、粒子
状物質等を充填したフィルターを用いる事ができる。フ
ィルターの素材としては親水性材料、疎水性材料いずれ
も使用する事ができるが、匣小板の通過性の観点から親
水性表面を持つ材料の方が好ましい。フィルター素材の
形態としては、繊維状のものが白血球の捕捉効率が良く
推奨できる。［ｆｆ状物質の形態としては、織布状、不
織布状、綿状いずれも使用できるが、血液の通液性の観
点から不織布状のものが特に好ましい結果を与える。

−Ｆ記自白血球除去フィルター、例えば繊維状物質の集
合体である不織布をフィルターの主要材料として容器に
充填して用いるが、血小板の通過性をより良くする為に
不織布表面を親水性高分子でコーティングしたり、抗血
栓性材料でコートする事もできる。繊維の直径は、０．
３μｍから２０μｍ程度の物が用いられ、繊維の素材と
しては、合成繊維、再生セルロースの様な半合成繊維、
綿の様な天然繊維、無機繊維等が用いられる。中でも合
成繊維、例えばポリエチレンテレフタレート、ナイロン
、ポリプロピレン、ポリアクリロニトリル等の繊維が好
ましく用いられる。また、コート材としては、ヒドロキ
シエチルアクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレー
トの様にヒドロキシル基を有する高分子材料、ジエチル
アミノエチル（メタ）アクリレートとヒドロキシエチル
（メタ）アクリレートとの共１１に合体の様に塩基性含
窒素官能基を有する高分子材料、ポリエーテルウレタン
、アブコサン等を用いる事ができる。

血液成分分離用バッグとは、全血を濃厚赤血球、濃縮血
小板血漿、血漿等に分離する為に用いられる液密性のバ
ッグであり、・一般に用いられている血液成分分離用バ
ッグを用いる事ができる。

また、少なくとも濃縮血小板血漿を保存する１′ｂに用
いられる唾液成分分離用バッグは、グロー放電処理した
軟質ポリ塩化ビニールバッグ、通気量を大きくしたバッ
グ、ポリオレフィン系エラストマー製のバッグ、炭素数
の多いフタル酸エステルを可塑剤として使用したバッグ
等血小板の機能低下を起こし難い素材より成るバッグを
使用する事が好ましい。

以ド、図面を用いて本発明血液成分分離システムを更に
詳細に説明する。

第１図は、本発明の基本構成を示す模式図であり、第２
図は第１図のシステムに赤血球保護液としての赤血球保
存液入りバッグを配したものであり、第３図は第１図の
システムに白血球除去フィルターに滞留する血液を回収
する為の生理的溶液入りバッグを配したものであり、第
４図は、第２図と第３図を組み合わせたものである。

第１図において、供血者から採血された血液は採血バッ
グｌに導入され、採血バッグ内に存在する抗凝固剤と混
合され、唾液が凝固するのを防止される。採血された血
液は白血球除去フィルター２に重力により、または、採
血バッグを押える等の方法により送られ、白血球除去フ
ィルター２を通過した血液は第１の血液成分分離用バッ
グ３に送られる。血液は白血球除去フィルター２を通過
する事により白血球を除去されるので、第１の血液成分
分離用バッグに送られた血液に含まれるのは赤血球、血
小板および血漿である。この後、白血球除去フィルター
２と第１の血液成分分離用バッグ３との間のチューブを
アルミリングで圧着、あるいはヒートシーラーで熱融着
した後切り離し、血液成分分離用バッグ３．４．５だけ
を遠心分離装置にかけ、遠心する。この操作により第１
の血液成分分離用バッグ３中の血液は層分離し、上清に
多血小板血漿、沈漬に白血球除去濃厚赤血球か得られる
。

この後上清を第２の血液成分分離用バッグ４に移し、更
にもう１度遠心分離操作を行なうと第２の血液成分分離
用バッグ４中の多血小板血漿は上清に血漿、沈漬に白血
球除去濃縮血小板餌漿が得られる。

第２回目の遠心分離操作を行なう前に第１の血液成分分
離用バッグ３は、前述した操作と同じ様にして切り離し
てしまい、残りの２つの血液成分分離用バッグ４．５だ
け、第２回目の遠心分離操作にかけても良い。第２回目
の遠心分離操作の後、上清の血漿を第３の血液成分分離
用バッグ５に移し、前述した操作の様にして血液成分分
離用バッグ３．４．５を切り躍せば第１のバッグ３に白
血球除去濃厚赤血球、第２のバッグ４に白血球除去濃縮
面小坂血漿、第３のバッグ５に血漿がそれぞれ無菌的に
得られる（説明中、血液成分を１つのバッグから別のバ
ッグへ移す際等のチューブのクランプ操作は省略した。

以下同じ）。遠心分離操作の際には血液成分分離用バッ
グ３．４．５のみを遠心すれば良いので自撞球除去フィ
ルター２の容器が破損したり血液成分分離用バッグ３．
４．５が白血球除去フィルター２の容器に押し潰されて
破れる様な事が無く、安全である。

第２図は第１図に赤血球保存液入りのバッグ６を取り付
けたものであるが、赤血球保存液は、第１回［Ｉの遠心
分離操作を行ない、上清の多血小板血漿を第２の唾液成
分分離用バッグ４に移した後、第１の血液成分分離用バ
ッグ３内に残る濃厚赤血球に加えられる。赤血球保存液
を濃厚赤捕球に加える事で赤血球の保存日数を更に長く
しても輪作に用いる事が可能になる。赤血球保存液の例
としては、アデニン、マンニトール、ソルビトール、グ
アノシン等を１柿類以上含む生理的溶液が挙げられる。

第３図は、第１図に生理的溶液入りのバッグ７を取り付
けたものであるが、生理的溶液は、血液を採血バッグ１
から白血球除去フィルター２に流し終えた後、白血球除
去フィルター２に送られ、白血球除去フィルター２の中
に少量残存する血液を第１の血液成分分離用バッグ３に
回収する為に用いられる。この操作により、赤血球、証
小板、血漿の回収率が高くなる。生理的溶液は生理食塩
水、リンゲル液等血液成分に対してダメージをケえ難く
、生体にとって安全なものであれば全て使える。

第４図は、第２図と第３図を組み合わせたものであり、
使用方法も前述のとうりである。

また、血漿の回収率を高くする為に、第１の唾液成分分
離用バッグ３を更に強く遠心し、Ｌ清の＋ｆ＋を漿を第
３の血液成分分離用バッグ５に移す為のバイパス回路を
血液成分分離用バッグ３．５間に設ける事も本発明に含
まれる。更に、第１図から第４図までの例では血液成分
分離用バッグ３．４．５が直列の位置関係で示されてい
るが、並列の位置関係にしても血液成分を分離する操作
上特別な問題は無く、この様な接続の仕方も本発明に含
まれる。

また、先に述べた血液成分分離操作では、濃縮血小板血
漿を得る際に遠心分離を行ない、沈渣として血小板を得
ているが、第２回目の遠心分離をせずに第１回目の遠心
分離操作後第１の血液成分分離用バッグ３から上清のう
ち血小板濃度の薄い部分を血液成分分離用バッグ５に移
した後、血小板濃度の濃い部分を血液成分分離用バッグ
４に移す方法もとれる。この操作の場合は、血液成分分
離用バッグ３．４．５は並列の位置関係である事か好ま
しい。

（発明の効果） 以上述べた様に、本発明を用いる′１（により、全血か
ら１つの血液成分分離システムを用いるだけで、完全に
無菌的に、白血球を除去した濃厚赤血球、白血球を除去
した濃縮血小板血漿、血漿の３種類の唾液成分を同時に
得る事ができる様になった。更に遠心分離操作を行なう
際、白血球除去フィルターを取り外してしまう事が可能
な為、遠心時に白Ｉｆ１１球除去フィルターが破損した
り、血液成分分離用バッグが破損される事が無い為非常
に安全な血液成分分離システムとする事ができた。

また、１目１ｕｌ１球を除去した血液製剤が得られる為
、微小凝集物の発生も少なく、溶面等も少なくな）た。

以下、実ｍ例により本発明をより詳細に説明する。

（実施例） 実ｈ’ｔｓ例１ 唾液成分分離システムとして第１図に示すものを用いた
。

白血球除去フィルター２としては、・ト均直径１．８μ
ｍのポリエチレンテレフタレート製不織布を６７ｍｍＸ
６７ｍｍの正方形に切断したものを重ねて、第５図に示
すようにカラム内にセットした後、後述するコポリマー
をコートしたものを用いた。不織イａフィルター層１１
は、２枚の角型の枠体９．９′を組み合わせてできてい
るカラム本体８の中にセットされており、その周辺部は
圧着されている。１０．１０′はカラムの内側に設けら
れた突起であり、不織布フィルターの中央部を部分的に
支持している。１２は処理血液人口、１３は分離血液出
口である。不織布フィルターの有効断面積は６０ｍｍＸ
６０ｍｍ＝３６００ｍｍ２であり、厚みは７ｍｍ、重量
は４．２ｇである。

コポリマーの合成及び不織布へのコーティングは以下の
様に行なった。

２−ヒドロキシエチルメタアクリレート（以下ＨＥＭＡ
と略称する）とジエチルアミノエチルメタアクリレート
（以下ＤＥＡＭＡと略称する）のコポリマーを通常の溶
液ラジカル「Ｆ合によって合成した。重合条件としては
、エタノール中の千ツマー濃度１モル／ｊ２で開始剤と
してアゾイソブチロニトリル（Ａ　Ｉ　ＢＮ）１／２０
０モル／２存在下、６０℃で８時間重合反応を行った。

上記ポリマーをＩｇ／ｄｉの濃度になる様にエタノール
に溶解したものを前述の不織布フィルターに充填した後
、余分なポリマーを乾燥窒素を送り込む事により除去し
、更にそのまま窒素を送り続け、乾燥した。このフィル
ターを更に１６時間真空乾燥した後、白血球除去フィル
ター２とした。コーティングしたＨＥＭＡとＤＥＡＭＡ
とのコポリマー中のＤＥＡＭＡ単位の含量は５モル％と
した。

採血バッグ１はＣＰＤ入りの採血バッグ、血液成分分離
用バッグ３．４．５は市販のものを用いた。

供血者からの血液４００ｇを採血バッグ１に導入した後
、重力により白血球除去フィルター２を経由して、第１
の面域成分分離用バッグ３に流した。血液全てを流し終
えるまでの時間は２０分であった。

この後、ヒートシーラーを用いて白血球除去フィルター
２と第１の血液成分分離用バッグ３との間のチューブを
２ケ所溶着し、その間をはさみで切断し、唾液成分分離
用バッグ３．４．５を２２℃の遠心分離機にセットし、
３００ｇで１８分遠心した。この後遠心分離機より血液
成分分離用バッグ３．４．５を取り出し、第１の血液成
分分離用バッグ３を押えつけながら上清を第２の血液成
分分離用バッグ４に移した。この後もう１度２２℃の遠
心分離機にセットし、３０００ｇで６分遠心した。その
後遠心分離機から血液成分分離用バッグ３．４．５を取
り出し、第２の血液成分分離用バッグ４に２０ｍ１の血
漿を残す様にして上清を第３の唾液成分分履用バッグ５
に移した。

以上の様にして得られた各血液成分分離用バッグ中の成
分を実験に供した血液と比較して分析したところ、第１
の血液成分分離用バッグ３中に含まれる濃厚赤血球中に
は実験に供した赤血球の９１％が回収され、混入した白
血球は実験に供した白血球の０．８％であった。第２の
血液成分分離用バッグ４中に含まれる濃縮血小板血漿中
には実験に供した血小板の６２％が回収され、混入した
白血球は実験に供した白血球の０．９％であった。第３
の血液成分分離用バッグ５中には１６４ｍ１の血漿が回
収できた。操作中血液成分分離用バッグ、回路等の破損
は無かった。

実施例２ 血液成分分離システムとして、第３図に示すものを用い
た。生理的溶液を含むバッグ７としては、生理食塩液３
０ｍｊＺを含むポリ塩化ビニル製バッグを用いた。これ
以外の構成部品は全て実施例１と同じにした。

操作方法も、採血バッグｌ中の血液を全て流し終わった
後、生理的溶液を含むバッグ７中の生理食塩液を白血球
除去フィルター２に流した事態外は、実施例１と同様に
操作を行なった。

得られた各血液成分分離用バッグ中の成分を実施例１と
同様に分析したところ、第１の血液成分分離用バッグ３
中に含まれる濃厚赤血球中には実験に供した赤直球の９
６％が回収され、混入した白血球は実験に供した白血球
の０．８％であった。第２の血液成分分離用バッグ４中
に含まわる濃縮血小板血漿中には実験に供した血小板の
６６％が回収され、混入した白血球は実験に供した白血
球の０．９％であった。第３の血液成分分難用バッグ５
中には１７８ｍＩＬの血漿が回収できた。

操作中血液成分分離用バッグ、回路等の破損は無く、実
施例１に比べ、赤＋ｍ球、直小板、血漿の回収率か高く
なった。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明血液成分分離システムの基本構成を示す
模式図であり、第２図は第１図のシステムに赤血球保存
液入りバッグを配したシステムの模式図であり、第３図
は第１図のシステムに生理的溶液入りバッグを配したシ
ステムの模式図であり、第４図は第２図と第３図を組み
合わせたシステムの模式図である。第５図は実施例で用
いた白血球除去フィルターの構成を示す断面模式図であ
る。 １、採血バッグ ２、白血球除去フィルター ３．４．５．血液成分分離用バッグ ６、赤血球保存液入りバッグ ７、生理的溶液入りバッグ ８、カラム本体 ９．９’　、枠体 １０．１０’、突起 １１、不織布フィルター層 １２、血液人［１ １３，１１１１液出Ｌ１

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）採血バッグに血漿、赤血球、血小板は通過させる
   が白血球は通過させない白血球除去フィルターの１端が
   接続され、白血球除去フィルターの他端には少なくとも
   ３つの血液成分分離用バッグが接続されてなる事を特徴
   とする血液成分分離システム。
2. （２）血液成分分離用バッグの中、少なくとも濃縮血小
   板血漿保存用に用いられるバッグが血小板の機能低下を
   起こし難い素材よりなる請求項１記載の血液成分分離シ
   ステム。
3. （３）白血球除去フィルターから濃縮赤血球保存用に用
   いられる血液成分分離用バッグまでの間の少なくとも１
   ケ所に、赤血球保存液を含むバッグが接続されている請
   求項１または２記載の血液成分分離システム。
4. （４）採血バッグから白血球除去フィルターまでの間の
   少なくとも１ケ所に、生理的溶液を含むバッグが接続さ
   れている請求項１〜３のいずれか１つに記載の血液成分
   分離システム。