【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は７―ヒドロキシPGE1類及びそれを含
有する薬剤組成物に関する。更に詳細には、抗血
小板凝集作用、抗潰瘍作用、血圧降下作用等の薬
理作用を有する新規７―ヒドロキシPGE1類に関
する。
本発明によれば下記式〔〕
〔式中、Ｒは水素原子又は低級アルキル基を表
わす。〕
で表わされる７―ヒドロキシPGE1類又はＲが水
素原子を表わすときその酸の非毒性塩が提供され
る。
本発明の７―ヒドロキシPGE1類は、上記式
〔〕で表わされるように７位に水酸基を有する
PGE1骨格を持つた新規化合物であり、この化合
物は優れた抗血小板凝集作用を有し、人間を含む
哺乳動物において、血栓形成の治療または予防に
有用であり、また胃潰瘍の形成を低下または制御
するため抗潰瘍剤としても有用であり、更にまた
高血圧の治療剤としても用いられる。
前記式〔〕で表わされる７―ヒドロキシ
PGE1類は、その７位、８位、11位、12位、15位
に不整炭素原子を有するため、各種の立体異性体
が存在するが、本発明の７―ヒドロキシPGE1類
はこれらすべての立体異性体及びそれらの混合物
を包含する。
前記式〔〕において、Ｒは水素原子又は低級
アルキル基を表わし、低級アルキル基としては、
メチル、エチル、イソプロピル、イソブチル基等
が好ましく挙げられる。
Ｒが水素原子のとき、前記式〔〕の７―ヒド
ロキシPGE1類の非毒性塩も本発明に包含される。
この非毒性塩としては、例えば、ナトリウム又は
マグネシウムの如きアルカリ金属の塩、カルシウ
ム又はマグネシウムの如きアルカリ土類金属の
塩、アンモニウム塩、あるいはメチルアミン塩、
ジメチルアミン塩、ベンジルアミン塩、フエネチ
ルアミン塩、ピペリジン塩、ジエタノールアミン
塩、リジン塩の如き有機アミン塩が挙げられる。
本発明で提供される上記式〔〕で表わされる
７―ヒドロキシPGE1類は、本発明者らが別途提
案（特願昭54−60293）した如き方法で製造され
る。すなわち、下記式〔〕
〔式中、R1は保護基を表わす。〕
で表わされる４―ヒドロキシシクロペンテノン類
を、非プロトン性不活性有機媒体中で、トリアル
キルホスフインの存在下、第１銅塩及び下記式
〔〕
〔式中、R2は保護基を表わす。〕
で表わされるリチウム化合物とを、該第１銅塩と
該リチウム化合物とをほぼ等モルで反応せしめ、
次いでルイス酸の存在下に、下記式〔〕
〔式中、R′は低級アルキル基を表わす。〕
で表わされるアルデヒドと反応せしめ、脱保護す
ることによつて製造される。
ここで用いられる上記式〔〕の４―ヒドロキ
シシクロペンテノン類、及び上記式〔〕のリチ
ウム化合物における保護基としては、テトラヒド
ロピラニル基、テトラヒドロフラニル基等の２―
環状エーテル基、トリメチルシリル基、ｔ―ブチ
ルジメチルシリル基などのトリアルキルシリル基
がある。非プロトン不活性有機媒体としては、例
えばペンタン、ヘキサン、ヘプタンの如き飽和炭
化水素類；ベンゼン、トルエンの如き芳香族炭化
水素類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン
の如きエーテル系溶媒が挙げられる。トリアルキ
ホスフインとしてはトリ―ブチルホスフインが好
く、第１銅塩としてはヨウ化第１銅が好い。第１
銅塩と上記式〔〕のリチウム化合物とは、ほぼ
等モル、好ましくは第１銅塩をリチウム化合物に
対して0.95〜1.15モル倍で用いる。トリアルキル
ホスフインはリチウム化合物に対して、好ましく
は１〜３モル、特に好ましくは1.9〜2.2モル倍の
範囲で用いられる。４―ヒドロキシシクロペンテ
ノン類は、リチウム化合物に対し、0.8〜1.2モル
倍で用いられる。
反応を行うには次のようにして行う。非プロト
ン不活性有機媒体中に、第１銅塩、リチウム化合
物、トリアルキルホスフインを加えて、−40℃〜
−78℃で数時間処理し、次に、式〔〕の４―ヒ
ドロキシシクロペンテノン類を加える。そして次
に、三弗化ホウ素、三弗化ホウ素エーテル錯体な
どのルイス酸の存在下に更に式〔〕で表わされ
るアルデヒドを添加することによつて、保護され
た７―ヒドロキシPGE1類が得られる。ルイス酸
は第１銅塩に対し、好ましくは0.9〜1.1モル倍で
使用する。
保護基を除去するには、それ自体公知の方法例
えば酸性あるいはアルカリ性の条件下に加水分解
する方法が採用される。また前記式〔〕でＲが
水素原子である酸を得るには、加水分解後の溶液
を中和し、エーテル、塩化メチレン、酢酸エチル
などの有機溶剤で抽出することにより得ることが
出来る。また酸の非毒性塩は、例えば適当な溶媒
中で、上記した方法で得られる酸と、塩基例えば
アルカリ金属の水酸化物あるいは炭酸塩、水酸化
アンモニウム、炭酸アンモニウム、アンモニアあ
るいはアミンを理論量ずつ反応させて得られる。
目的物の単離、精製は、抽出、蒸留、クロストグ
ラフイー等の手段により行うことができる。
かくして、本発明の７―ヒドロキシPGE1類が
製造され、この化合物は抗血小板凝集作用を有
し、人間を含む哺乳動物において、血栓形成の治
療または予防に有用である。またかかる化合物
は、人間を含む哺乳動物において、胃腸潰瘍の形
成を低下または制御するため、抗潰瘍剤としても
有用であり、また血圧降下作用を有するため高血
圧の治療剤としても有用である。
本発明の７―ヒドロキシPGE1類は、これらの
目的のため、経口的にあるいは直直腸内、皮下、
筋肉内等の非経口的に投与されうるが、好適には
経口投与または直腸内投与によるのがよく、かか
る投与経路は患者にとつて便利である。
経口投与のためには、固形製剤あるいは液体製
剤とされる。固形製剤としては、錠剤、丸剤、散
剤あるいは顆粒剤がある。このような固形製剤に
おいては、１つまたはそれ以上の活性物質が少く
とも１つの不活性な希釈剤、例えば、よく用いら
れる炭酸カルシウム、バレイシヨデンプン、アル
ギン酸あるいは乳糖と混合される。製剤は常法に
従つて行なわれるが、希釈剤以外の添加剤、例え
ばステアリン酸マグネシウムの如き潤滑剤を含有
していてもよい。
経口投与のための液体製剤としては、乳濁剤、
溶液剤、懸濁剤、シロツプ剤あるいはエリキシル
剤の剤型をとることができる。これらは、一般的
に用いられる不活性な希釈剤、例えば水あるいは
流動パラフインを含むことができる。
この製剤は、不活性な希釈剤以外に補助剤、例
えば湿潤剤、懸濁補助剤、甘味剤、風味剤、芳香
剤あるいは防腐剤を含んでいてもよい。
また、この液体製剤は、ゼラチンのような吸収
されやすい物質のカプセルとしてもよい。
直腸内投与のための固形製剤としては、１つま
たはそれ以上の活性物質を含み、それ自体公知の
方法により製造される坐剤が含まれる。
非経口投与の製剤は、無菌の水性あるいは非水
性溶液剤、懸濁剤または乳濁剤である。非水性の
溶剤または懸濁剤としては、例えば、プロピレン
グリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ
油の如き植物油、オレイン酸エチルのような注射
しうる有機エステルがある。このような製剤はま
た、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤のような補
助剤を含むことができる。これらは、例えば、バ
クテリア保留フイルターをとおす過、殺菌剤の
配合あるいは照射によつて無菌化できる。また、
無菌の固形製剤を製造し、使用直前に無菌水また
は無菌の注射用溶媒に溶解して使用することがで
きる。
本発明の７―ヒドロキシPGE1類は、サイクロ
デキストリンの包接化合物として用いることによ
つて、その安定性が増大し、経口投与に好適なも
のとなるので、包接化合物として製剤化するのが
好ましい。
包接化合物は例えば、サイクロデキストリンを
水及び／または水と混和しうる有機溶媒に溶かし
て、これを水と混和しうる有機溶媒に溶かした７
―ヒドロキシPGE1類に加え、得られる混合物を
加熱することによつて製造される。目的とするサ
イクロデキストリン包接化合物は、減圧濃縮によ
つて、あるいは冷却して過するかまたはデカン
テーシヨンによつて単離される。サイクロデキス
トリンは、α―，β―、あるいはγ―サイクロデ
キストリンあるいは、これらの混合物が用いられ
る。
本発明の７―ヒドロキシPGE1類の投与量は、
１日、体重Kgあたり0.1μｇ〜100mgであり、1μｇ
〜10mgが好ましい。これらの投与量は、患者の病
状、体重、年令あるいは投与経路により左右され
る。
以下本発明を、実施例により更に詳細に説明す
る。
実施例 １
dl2―（１―ヒドロキシ―７―ケト―８―オキ
サノニル）―３―（３―ヒドロキシ―１―トラ
ンス―オクテニル）―４―ヒドロキシシクロペ
ンタノンの合成
50mlのフラスコにヨウ化第一銅229mg
（1.2mmol）をはかりとり、フラスコの内部をア
ルゴンで置換した。これに無水エーテル10mlを加
えた後トリ―ｎ―ブチルホスフイン0.60ml
（2.4mmol）を室温で加え10分間撹拌した。つぎ
にこれを−78℃に冷却し、dl1―リチオ―３―
（ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ）―trans―オ
クテン（1.2mmol）の無水エーテルと無水ヘキサ
ンの混合溶液を加えた。−78℃で30分間撹拌した
後dl4―（ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ）―
２―シクロペンテノン212mg（1.0mmol）の５ml
無水エーテル溶液を滴下し、78℃で１時間撹拌し
た。これに三フツ化ホウ素エーテル錯体0.15mlを
加え−78℃で10分間、−40℃で20分間撹拌した。
つぎにこれに無水THF5mlを加えた後、メチル７
―ケトヘプタノエート221mg（1.4mmol）の５ml
無水THF溶液を加え−40℃で1.5時間撹拌した。
これを除々に室温まで昇温した後、飽和塩化アン
モニウム水溶液で加水分解し、エーテルで抽出し
た。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、
減圧濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカ
ラムクロマトグラフイーに付し、ヘキサン―酢酸
エチル＝９：１溶出部分よりdl2―（１―ヒドロ
キシ―７―ケト―８―オキサノニル）―３―〔３
―（ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ）―１―ト
ランス―オクテニル〕―４―（ｔ―ブチルジメチ
ルシリルオキシ）シクロペンタノンの２つの立体
異性体をそれぞれ59mg（100）（TLC.Rf：0.39、
展開溶媒：ヘキサン 酢酸エチル＝４：１）と35
mg（102）（TLC.Rf：0.35、展開溶媒：ヘキサン
酢酸エチル＝41）を得た。
これらの化合物のスペクトルデータは次の示す
とおりであつた。
Rf値が大きい立体異性体（100）
IR（液膜）；
3470，2960，2945，2870，1741，1461，
1436，1404，1388，1360，1251，1196，
1170，1104，1002，970，938，834，772，
665cm-1
NMR（CCl4）δ；
0.85（Ｓ，18H），3.62（Ｓ，3H），3.85〜4.3
（ｍ，2H），5.46〜5.70（ｍ，2H）
TLC上でRf値が小さい立体異性体（102）
IR（液膜）；
3470，2960，2940，2870，1742，1464，
1438，1410，1378，1360，1258，1100，
1006，970，938，876，836，810，778，668
cm-1
NMR（CCl4）δ；
0.88（Ｓ，18H），3.60（Ｓ，3H），3.4（ｍ，
1H），3.7〜4.3（ｍ，2H），5.4〜5.7（ｍ，2H）
これらの２つの化合物はそれぞれ常法により脱
シリル化反応（THF―水―ACOH＝１：１：
３、室温５日間）に付し、溶媒を減圧留去した後
シリカゲルカラムクロマトグラフイー（ベンゼン
―酢酸エチル １：１〜酢酸エチル溶出）により
分離し、それぞれ２種類のdl2―（１―ヒドロキ
シ―７―ケト―８―オキサノニル）―３―（３―
ヒドロキシ―１―トランス―オクテニル）―４―
ヒドロキシシクロペンタノンを与えた。
これら４種類の立体異性体のスペクトルデータ
は次に示すとおりであつた。
〔化合物（100）の脱シリル化生成物〕
TLCのRf値が大きい化合物（dl5―epi―７―
ヒドロキシPGE1メチルエステル）（104）（収
率：20％）
NMR（CDCl3）δ；
0.89（ｍ，3H），1.1〜1.8（ｍ，16H），2.0〜
2.95（ｍ，9H），3.66（Ｓ，3H），3.6〜3.85
（ｍ，1H），3.9〜4.25（ｍ，2H），5.4〜5.9
（ｍ，2H）
TLCのRf値が小さい化合物（dl7―ヒドロキシ
PGE1メチルエステル）（106）（収率：28％）
NMR（CDCl3）δ；
0.89（ｍ，3H），1.0〜1.7（ｍ，16H），1.9〜
2.9（ｍ，6H），3.05（Ｓ，3H，D2O添加によ
り消失），3.66（Ｓ，3H），3.5〜3.8（ｍ，
1H），3.9〜4.2（ｍ，2H），5.45〜5.7（ｍ，
2H）
〔化合物（102）の脱シリル化生成物〕
TLCのRf値が大きい化合物（dl15―epi―７―
ヒドロキシPGE1メチルエステル）（108）（収
率：18％）
NMR（CDCl3）δ；
0.89（ｍ，3H），1.0〜1.8（ｍ，16H），1.95〜
3.6（ｍ，9H），3.67（Ｓ，3H），3.3〜4.3（ｍ，
3H），5.4〜5.85（ｍ，2H）
TLCのRf値が小さい化合物（dl7―ヒドロキシ
PGE1メチルエステル）（110）（収率：14％）
NMR（CDCl3）δ；
0.89（ｍ，3H），1.1〜1.8（ｍ，16H），2.0〜
3.0（ｍ，9H），3.67（Ｓ，3H），3.85〜4.30
（ｍ，3H），5.55〜5.75（ｍ，2H）
実施例 ２
２―（１―ヒドロキシ―７―ケト―８―オキサ
ノニル）―３―（３（Ｓ）―ヒドロキシ―１―
トランス―オクテニル）―４（Ｒ）―ヒドロキ
シシクロペンテノンの合成
50mlのフラスコにヨウ化第一銅343mg
（1.8mmol）をはかりとり、フラスコの内部をア
ルゴンで置換した。これに無水エーテル15mlを加
えた後、トリ―ｎ―ブチルホスフイン0.9ml
（3.6mmol）を室温で加え10分間撹拌した。つぎ
にこれを−78℃に冷却し、１―リチオ―３（Ｓ）
―（ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ）―trans
―オクテン（1.8mmol）の無水エーテルと無水ヘ
キサンの混合溶液を加えた。これを−78℃で30分
間撹拌した後４（Ｒ）―（ｔ―ブチルジメチルシ
リルオキシ）―２―シクロペンテノン318mg
（1.5mmol）の７ml無水エーテル溶液を滴下し、−
78℃で１時間撹拌した。これに三フツ化ホウ素エ
ーテル錯体0.23mlを加え、−78℃で10分間、−40℃
で20分間撹拌した。これに無水THF5mlを加えた
後、メチル７―ケトヘプタノエート332mg
（2.1mmol）の７ml無水THF溶液を加え、−40℃
で1.5時間撹拌した。これを徐々に室温まで昇温
した後飽和塩化アンモニウム水溶液で加水分解
し、エーテル抽出した。有機層を無水硫酸ナトリ
ウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた粗生
成物をシリカゲルカラムクロマトグラフイーに付
し、ヘキサン―酢酸エチル＝９：１溶出部分よ
り、２―（１―ヒドロキシ―７―ケト―８―オキ
サノニル）―３―〔３（Ｓ）―（ｔ―ブチルジメ
チルシリルオキシ）―１―trans―オクテニル〕
―４（Ｒ）―（ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ）
シクロペンタノンの２つの立体異性体をそれぞれ
79mg（112）（TLC、Rf：0.39、展開溶媒、ヘキ
サン―酢酸エチル＝４：１）と75mg（114）
（TLC、Rf：0.35、展開溶媒、ヘキサン―酢酸エ
チル＝４：１）を得た。
これらの化合物で、化合物（112）のRf値及び
スペクトルデータは実施例１の化合物（100）と、
化合物（114）のRf値及びスペクトルデータは実
施例１の化合物（102）と一致した。
これら２つの化合物を脱シリル化反応に付し、
それぞれ一種類の化合物を与え、化合物（112）
の脱シリル化生成物（116）のRf値及びスペクト
ルデータは実施例１の化合物（106）と、化合物
（114）の脱シリル化生成物（118）のRf値及びス
ペクトルデータは実施例１の化合物（110）と一
致した。
実施例 ３
50mlのフラスコにヨウ化第一銅325mg
（1.7mmol）をはかりとり、フラスコの内部をア
ルゴンで置換した。これに無水エーテル10mlを加
えたのちトリ―ｎ―ブチルホスフイン687mg
（3.4mmol，0.85ml）を室温で加え、10分間撹拌
した。つぎにこれを−78℃に冷却し、１―リチオ
―３―（テトラヒドロピラン―２―イルオキシノ
―１―トランス―オクテンを加えた。−78℃で30
分間撹拌したのち、４―（テトラヒドロピラン―
２―イルオキシ）―２―シクロペンテノン273mg
（1.5mmol）の無水エーテル５ml溶液をゆつくり
滴下した。−78℃で10分間撹拌したのち三フツ化
ホウ素エーテル錯体194mg（1.7mmol）を加え、−
78℃で10分間、−55℃で20分間ついで−40℃で10
分間撹拌した。つぎにこれに無水THF5mlを加え
たのち、メチル７―ケトヘプタノエート316mg
（2mmol）の無水THF10ml溶液を加えた。徐々
に室温まで昇温したのち、飽和塩化アンモニウム
水溶液で加水分解し、エーテルで抽出した。有機
層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥したのち、エバ
ボレーターで減圧濃縮した。得られた粗生成物を
シリカゲルカラムクロマトグラフイー（アンモニ
ア処理シリカゲル15ｇ、溶出溶媒、ベンゼン：酢
酸エチル＝３：１）に供し、２―（１―ヒドロキ
シ―７―ケト―８―オキサノニル）―３―〔３―
（テトラヒドロピラン―２―イルオキシ）―１―
トランス―オクテニル〕―４―（テトラヒドロピ
ラン―２―イルオキシ）シクロペンタノン（立体
異性体の混合物）423mg（収率：53％）を得た。
Rf（展開溶媒、ベンゼン：酢酸エチル＝１：
１）；0.43
IR（液膜）；
3440cm-1（OH），1740cm-1（Ｃ＝０）
NMR（CCl4）δ；
0.8〜1.1（ｍ，3H，CH3），1.1〜2.8（ｍ，
35H，CH2，CHとOH），3.2〜4.2（ｍ，7H，
OCH2CH2，CHOTHPとCHOH），3.62（Ｓ，
3H，OCH3），4.4〜4.8（ｍ，2H，OCHO），
5.4〜5.8（ｍ，2H，CH＝CH）
２―（１―ヒドロキシ―７―ケト―８―オキサ
ノニル）―３―〔３―（テトラヒドロピラン―２
―イルオキシ）―１―トランス―オクテニル〕―
４―（テトラヒドロピラン―２―イルオキシ）シ
クロペンタノンを、テトラヒドロフラン、水の混
合溶媒で酢酸と反応させて、２―（１―ヒドロキ
シ―７―ケト―８―オキサノニル）―３―（３―
ヒドロキシ―１―トランス―オクテニル〕―４―
ヒドロキシシクロペンタノン（120）（立体異性体
の混合物）を得た。
実施例 ４
（in vitro血小板凝集阻止作用）
本発明の７―ヒドロキシPGE1類を含め被験薬
物のin vitroにおける血小板凝集阻止作用を家兎
PRPを用いて検定した。
結果は血小板凝集の50％阻止濃度（Ｉ C50）
で示した。凝集剤は終濃度5μHのADP―２ナト
リウム塩を用いた。
結果を第１表に示した。
PRP、薬物、凝集剤の調製
(1) 富血小板血漿（PRP）の調製
体重2.0〜3.0Kgの雄性白色在来種家兎より耳静
脈採血法によつてクエン酸血（3.8％クエン酸ソ
ーダ１容と血液９容の割合）を採取した。
得られたクエン酸血を100Gで10分間室温で遠
心し、上清（PRP）を分離した。
得られたPRPは室温に保存し、なるべく早く
使用するようにし、調製後４時間を経過したもの
は使用しなかつた。
(2) 薬物の調製
被検薬物は一般的には10mg／mlまたは１mg／ml
となるようにエチルアルコールに溶解し、生理食
塩水で希釈して濃度を調整する。
(3) 凝集剤の調製
ADP溶液
ADP2ナトリウム塩協和醗酵を0.1Mトリス塩
酸緩衝液PH7.8に溶解して50μMの溶液を調製した
（終濃度5μM）。
血小板凝集阻止試験法
(1) プランクの血小板凝集度
アグリゴメーターの37℃のキユベツト中であら
かじめ温ためておいた200μのPRPに25μの生
理食塩水と25μの凝集剤溶液を加えて血小板を
凝集させ、その凝集曲線を理化電機社製アグリゴ
メーターにて３分間記録した。この血小板凝集に
おける最大凝集度をプランクの最大凝集度をプラ
ンクの最大凝集度とした。
(2) 血小板凝集阻止試験
200μのPRPに25μの被検薬物溶液を加え、
上記(2)と同様にして２分間プレインキユベーシヨ
ンした後、50μMのADP2ナトリウム液25μを加
えて凝集曲線を３分間記録し、その時間内におけ
る血小板の最大凝集度を測定して阻害率を下記式
にて算出した。阻害率が50％を越す薬物の最低濃
度（終濃度で表現）をIC50値として示した。
阻害率（％）＝100
−被検薬物添加系の最大凝集度／ブランクの最大凝
集度×100
なお、上記in vitro血小板凝集阻止試験につい
ては、Davis.H.M.，Phylis，J.，Paul.K.and
Torry W.；Thromb.Res・11217〜226（1977）お
よびAnderson R.E.and Foulks J.G.；Thrnmb.
Haemos.36343〜359（1976）が参考とされる。
The present invention relates to 7-hydroxy PGE 1 and pharmaceutical compositions containing the same. More specifically, the present invention relates to a novel 7-hydroxy PGE type 1 having pharmacological effects such as antiplatelet aggregation, antiulcer, and hypotensive effects. According to the present invention, the following formula [] [In the formula, R represents a hydrogen atom or a lower alkyl group. ] 7-Hydroxy PGE represented by 1 or when R represents a hydrogen atom, a non-toxic salt of the acid is provided. The 7-hydroxy PGE 1 of the present invention has a hydroxyl group at the 7-position as represented by the above formula []
A novel compound with a PGE 1 backbone, this compound has excellent antiplatelet aggregation activity and is useful in treating or preventing blood clot formation in mammals including humans, and also reduces or controls the formation of gastric ulcers. Therefore, it is useful as an anti-ulcer agent, and is also used as a therapeutic agent for hypertension. 7-hydroxy represented by the above formula []
Since PGE 1 has asymmetric carbon atoms at the 7th, 8th, 11th, 12th, and 15th positions, there are various stereoisomers, but the 7-hydroxy PGE 1 of the present invention has all of these stereoisomers. stereoisomers and mixtures thereof. In the above formula [], R represents a hydrogen atom or a lower alkyl group, and the lower alkyl group is:
Preferred examples include methyl, ethyl, isopropyl, and isobutyl groups. When R is a hydrogen atom, non-toxic salts of 7-hydroxy PGE 1 of the above formula [] are also included in the present invention.
Examples of the non-toxic salts include salts of alkali metals such as sodium or magnesium, salts of alkaline earth metals such as calcium or magnesium, ammonium salts, or methylamine salts.
Examples include organic amine salts such as dimethylamine salt, benzylamine salt, phenethylamine salt, piperidine salt, diethanolamine salt, and lysine salt. The 7-hydroxy PGE 1 represented by the above formula [] provided by the present invention is produced by a method as separately proposed by the present inventors (Japanese Patent Application No. 1983-60293). In other words, the following formula [] [In the formula, R 1 represents a protecting group. ] 4-hydroxycyclopentenones represented by a cuprous salt and the following formula [ ] in the presence of a trialkylphosphine in an aprotic inert organic medium. [In the formula, R 2 represents a protecting group. ] The cuprous salt and the lithium compound are reacted in approximately equimolar amounts,
Then, in the presence of a Lewis acid, the following formula [] [In the formula, R' represents a lower alkyl group. ] It is produced by reacting with an aldehyde represented by and deprotecting. The protecting groups used here in the 4-hydroxycyclopentenones of the above formula [] and the lithium compounds of the above formula [] include 2-
Examples include trialkylsilyl groups such as a cyclic ether group, trimethylsilyl group, and t-butyldimethylsilyl group. Examples of the aprotic inert organic medium include saturated hydrocarbons such as pentane, hexane and heptane; aromatic hydrocarbons such as benzene and toluene; and ethereal solvents such as diethyl ether and tetrahydrofuran. Tri-butylphosphine is preferred as the trialkyphosphine, and cuprous iodide is preferred as the cuprous salt. 1st
The copper salt and the lithium compound of the above formula [] are used in approximately equal moles, preferably the cuprous salt is used in an amount of 0.95 to 1.15 times the mole of the lithium compound. The trialkylphosphine is preferably used in an amount of 1 to 3 moles, particularly preferably 1.9 to 2.2 moles, relative to the lithium compound. 4-hydroxycyclopentenones are used in an amount of 0.8 to 1.2 times the mole of the lithium compound. The reaction is carried out as follows. Cuprous salt, lithium compound, and trialkylphosphine were added in an aproton inert organic medium and heated to -40°C.
After treatment at -78°C for several hours, 4-hydroxycyclopentenones of formula [] are added. Next, protected 7-hydroxy PGE type 1 is obtained by further adding an aldehyde represented by the formula [] in the presence of a Lewis acid such as boron trifluoride or boron trifluoride ether complex. It will be done. The Lewis acid is preferably used in an amount of 0.9 to 1.1 times the mole of the cuprous salt. To remove the protecting group, a method known per se, such as a method of hydrolysis under acidic or alkaline conditions, is employed. An acid in which R is a hydrogen atom in the above formula [] can be obtained by neutralizing the solution after hydrolysis and extracting with an organic solvent such as ether, methylene chloride, or ethyl acetate. In addition, non-toxic salts of acids can be prepared, for example, by combining the acid obtained by the method described above and a base such as an alkali metal hydroxide or carbonate, ammonium hydroxide, ammonium carbonate, ammonia or an amine in stoichiometric amounts in a suitable solvent. Obtained by reaction.
Isolation and purification of the target product can be performed by means such as extraction, distillation, and clostography. Thus, 7-hydroxy PGE 1 of the present invention is produced, and this compound has an antiplatelet aggregation effect and is useful for treating or preventing thrombus formation in mammals including humans. Such compounds are also useful as antiulcer agents in mammals, including humans, because they reduce or control the formation of gastrointestinal ulcers, and they are also useful as therapeutic agents for hypertension because they have a blood pressure lowering effect. For these purposes, the 7-hydroxy PGE 1 of the present invention can be administered orally, rectally, subcutaneously,
Although it may be administered parenterally, such as intramuscularly, it is preferably administered orally or rectally, as such routes of administration are convenient for the patient. For oral administration, it is formulated into solid or liquid preparations. Solid preparations include tablets, pills, powders, and granules. In such solid formulations, one or more active substances are mixed with at least one inert diluent, such as the commonly used calcium carbonate, potato starch, alginic acid or lactose. The formulation is carried out according to conventional methods, but may contain additives other than diluents, such as lubricants such as magnesium stearate. Liquid preparations for oral administration include emulsions,
It can take the form of a solution, suspension, syrup or elixir. These can include commonly used inert diluents such as water or liquid paraffin. In addition to inert diluents, the preparations may also contain auxiliary agents, such as wetting agents, suspending agents, sweetening agents, flavoring agents, perfuming agents or preservatives. The liquid preparation may also be in the form of capsules of easily absorbed material such as gelatin. Solid preparations for rectal administration include suppositories containing one or more active substances and prepared by methods known per se. Preparations for parenteral administration are sterile aqueous or nonaqueous solutions, suspensions, or emulsions. Non-aqueous solvents or suspending agents include, for example, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injectable organic esters such as ethyl oleate. Such formulations may also contain adjuvants such as preservatives, wetting agents, emulsifying agents, and dispersing agents. These can be sterilized, for example, by filtration through a bacteria-retaining filter, by incorporation with a disinfectant, or by irradiation. Also,
A sterile solid preparation can be prepared and used by dissolving it in sterile water or a sterile injectable solvent immediately before use. When the 7-hydroxy PGE 1 of the present invention is used as a cyclodextrin clathrate, its stability increases and it becomes suitable for oral administration, so it is preferable to formulate it as a cyclodextrin clathrate. preferable. The clathrate compound can be prepared, for example, by dissolving cyclodextrin in water and/or a water-miscible organic solvent;
-Produced by adding hydroxy PGE 1 and heating the resulting mixture. The desired cyclodextrin clathrate compound is isolated by concentration under reduced pressure, by filtering with cooling or by decantation. The cyclodextrin used is α-, β-, or γ-cyclodextrin, or a mixture thereof. The dosage of 7-hydroxy PGE 1 of the present invention is:
0.1 μg to 100 mg per kg of body weight per day, 1 μg
~10 mg is preferred. These dosages depend on the patient's medical condition, weight, age, or route of administration. The present invention will be explained in more detail below with reference to Examples. Example 1 Synthesis of dl2-(1-hydroxy-7-keto-8-oxanonyl)-3-(3-hydroxy-1-trans-octenyl)-4-hydroxycyclopentanone Cuprous iodide in a 50 ml flask 229mg
(1.2 mmol) was weighed out, and the inside of the flask was replaced with argon. Add 10 ml of anhydrous ether to this, and then add 0.60 ml of tri- n -butylphosphine.
(2.4 mmol) was added at room temperature and stirred for 10 minutes. Next, this was cooled to -78℃ and dl1-lithio-3-
A mixed solution of ( t -butyldimethylsilyloxy)-trans-octene (1.2 mmol) in anhydrous ether and anhydrous hexane was added. After stirring for 30 min at −78 °C, dl4-( t -butyldimethylsilyloxy)-
5 ml of 2-cyclopentenone 212 mg (1.0 mmol)
Anhydrous ether solution was added dropwise, and the mixture was stirred at 78°C for 1 hour. To this was added 0.15 ml of boron trifluoride ether complex, and the mixture was stirred at -78°C for 10 minutes and at -40°C for 20 minutes.
Next, after adding 5 ml of anhydrous THF to this, methyl 7
-5 ml of 221 mg (1.4 mmol) of ketoheptanoate
Anhydrous THF solution was added and stirred at -40°C for 1.5 hours.
After gradually raising the temperature to room temperature, this was hydrolyzed with a saturated aqueous ammonium chloride solution and extracted with ether. After drying the organic layer with anhydrous sodium sulfate,
It was concentrated under reduced pressure. The obtained crude product was subjected to silica gel column chromatography, and dl2-(1-hydroxy-7-keto-8-oxanonyl)-3-[3
-( t -butyldimethylsilyloxy)-1-trans-octenyl]-4-(t-butyldimethylsilyloxy)cyclopentanone, 59 mg (100) each (TLC.Rf: 0.39,
Developing solvent: hexane ethyl acetate = 4:1) and 35
mg (102) (TLC.Rf: 0.35, developing solvent: hexane ethyl acetate = 41). The spectral data of these compounds were as shown below. Stereoisomer with large Rf value (100) IR (liquid film); 3470, 2960, 2945, 2870, 1741, 1461,
1436, 1404, 1388, 1360, 1251, 1196,
1170, 1104, 1002, 970, 938, 834, 772,
665cm -1 NMR (CCl 4 ) δ; 0.85 (S, 18H), 3.62 (S, 3H), 3.85-4.3
(m, 2H), 5.46-5.70 (m, 2H) Stereoisomer with small Rf value on TLC (102) IR (liquid film); 3470, 2960, 2940, 2870, 1742, 1464,
1438, 1410, 1378, 1360, 1258, 1100,
1006, 970, 938, 876, 836, 810, 778, 668
cm -1 NMR (CCl 4 ) δ; 0.88 (S, 18H), 3.60 (S, 3H), 3.4 (m,
1H), 3.7-4.3 (m, 2H), 5.4-5.7 (m, 2H) These two compounds were subjected to a desilylation reaction (THF-water-ACOH=1:1:
3. At room temperature for 5 days), the solvent was distilled off under reduced pressure, and then separated by silica gel column chromatography (benzene-ethyl acetate 1:1 to ethyl acetate elution). 7-keto-8-oxanonyl)-3-(3-
Hydroxy-1-trans-octenyl)-4-
Hydroxycyclopentanone was given. The spectral data of these four stereoisomers were as shown below. [Desilylated product of compound (100)] Compound with a large TLC Rf value (dl5-epi-7-
Hydroxy PGE 1 methyl ester) (104) (yield: 20%) NMR (CDCl 3 ) δ; 0.89 (m, 3H), 1.1-1.8 (m, 16H), 2.0-
2.95 (m, 9H), 3.66 (S, 3H), 3.6-3.85
(m, 1H), 3.9~4.25 (m, 2H), 5.4~5.9
(m, 2H) Compounds with small TLC Rf values (dl7-hydroxy
PGE 1 methyl ester) (106) (yield: 28%) NMR (CDCl 3 ) δ; 0.89 (m, 3H), 1.0-1.7 (m, 16H), 1.9-
2.9 (m, 6H), 3.05 (disappeared by addition of S, 3H, D 2 O), 3.66 (S, 3H), 3.5-3.8 (m,
1H), 3.9-4.2 (m, 2H), 5.45-5.7 (m,
2H) [Desilylated product of compound (102)] Compound with a large TLC Rf value (dl15-epi-7-
Hydroxy PGE 1 methyl ester) (108) (yield: 18%) NMR (CDCl 3 ) δ; 0.89 (m, 3H), 1.0~1.8 (m, 16H), 1.95~
3.6 (m, 9H), 3.67 (S, 3H), 3.3~4.3 (m,
3H), 5.4-5.85 (m, 2H) Compounds with small TLC Rf values (dl7-hydroxy
PGE 1 methyl ester) (110) (yield: 14%) NMR (CDCl 3 ) δ; 0.89 (m, 3H), 1.1-1.8 (m, 16H), 2.0-
3.0 (m, 9H), 3.67 (S, 3H), 3.85-4.30
(m, 3H), 5.55-5.75 (m, 2H) Example 2 2-(1-hydroxy-7-keto-8-oxanonyl)-3-(3(S)-hydroxy-1-
Synthesis of trans-octenyl)-4(R)-hydroxycyclopentenone 343 mg of cuprous iodide in a 50 ml flask
(1.8 mmol) was weighed out, and the inside of the flask was replaced with argon. After adding 15 ml of anhydrous ether to this, 0.9 ml of tri- n -butylphosphine
(3.6 mmol) was added at room temperature and stirred for 10 minutes. Next, this was cooled to -78℃ and 1-lithio-3(S)
-( t -butyldimethylsilyloxy)-trans
- A mixed solution of octene (1.8 mmol) in anhydrous ether and anhydrous hexane was added. After stirring this at -78°C for 30 minutes, 318 mg of 4(R)-( t -butyldimethylsilyloxy)-2-cyclopentenone was added.
(1.5 mmol) in 7 ml of anhydrous ether was added dropwise, -
Stirred at 78°C for 1 hour. Add 0.23ml of boron trifluoride ether complex to this and heat at -78℃ for 10 minutes at -40℃.
The mixture was stirred for 20 minutes. After adding 5 ml of anhydrous THF to this, 332 mg of methyl 7-ketoheptanoate was added.
(2.1 mmol) in 7 ml anhydrous THF solution and at -40°C.
The mixture was stirred for 1.5 hours. After gradually raising the temperature to room temperature, the mixture was hydrolyzed with a saturated aqueous ammonium chloride solution and extracted with ether. The organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate and then concentrated under reduced pressure. The obtained crude product was subjected to silica gel column chromatography, and 2-(1-hydroxy-7-keto-8-oxanonyl)-3-[3(S )-( t -butyldimethylsilyloxy)-1- trans -octenyl]
-4(R)-(t-butyldimethylsilyloxy)
Each of the two stereoisomers of cyclopentanone
79mg (112) (TLC, Rf: 0.39, developing solvent, hexane-ethyl acetate = 4:1) and 75mg (114)
(TLC, Rf: 0.35, developing solvent, hexane-ethyl acetate = 4:1) was obtained. Among these compounds, the Rf value and spectral data of compound (112) are the same as that of compound (100) of Example 1,
The Rf value and spectral data of compound (114) matched those of compound (102) of Example 1. These two compounds are subjected to a desilylation reaction,
Give one type of compound each, compound (112)
The Rf value and spectrum data of the desilylation product (116) of compound (106) of Example 1 and the Rf value and spectrum data of the desilylation product (118) of compound (114) of Example 1 Consistent with compound (110). Example 3 325 mg of cuprous iodide in a 50 ml flask
(1.7 mmol) was weighed out, and the inside of the flask was replaced with argon. After adding 10 ml of anhydrous ether to this, 687 mg of tri- n -butylphosphine was obtained.
(3.4 mmol, 0.85 ml) was added at room temperature and stirred for 10 minutes. This was then cooled to -78°C and 1-lithio-3-(tetrahydropyran-2-yloxyn-1-trans-octene was added.
After stirring for a minute, 4-(tetrahydropyran-
2-yloxy)-2-cyclopentenone 273mg
(1.5 mmol) in 5 ml of anhydrous ether was slowly added dropwise. After stirring at −78°C for 10 minutes, 194 mg (1.7 mmol) of boron trifluoride ether complex was added.
78°C for 10 minutes, -55°C for 20 minutes, and -40°C for 10 minutes.
Stir for a minute. Next, after adding 5 ml of anhydrous THF to this, 316 mg of methyl 7-ketoheptanoate was added.
(2 mmol) in 10 ml of anhydrous THF was added. After gradually raising the temperature to room temperature, the mixture was hydrolyzed with a saturated aqueous ammonium chloride solution and extracted with ether. The organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate, and then concentrated under reduced pressure using an evaporator. The obtained crude product was subjected to silica gel column chromatography (15 g of ammonia-treated silica gel, elution solvent, benzene:ethyl acetate = 3:1) to obtain 2-(1-hydroxy-7-keto-8-oxanonyl)-3. - [3-
(tetrahydropyran-2-yloxy)-1-
423 mg (yield: 53%) of trans-octenyl]-4-(tetrahydropyran-2-yloxy)cyclopentanone (mixture of stereoisomers) was obtained. Rf (developing solvent, benzene: ethyl acetate = 1:
1); 0.43 IR (liquid film); 3440 cm -1 (OH), 1740 cm -1 (C = 0) NMR (CCl 4 ) δ; 0.8 to 1.1 (m, 3H, CH 3 ), 1.1 to 2.8 (m,
35H, CH 2 , CH and OH), 3.2-4.2 (m, 7H,
OCH 2 CH 2 , CHOTHP and CHOH), 3.62 (S,
3H, OCH 3 ), 4.4-4.8 (m, 2H, OCHO),
5.4-5.8 (m, 2H, CH=CH) 2-(1-hydroxy-7-keto-8-oxanonyl)-3-[3-(tetrahydropyran-2
-yloxy)-1-trans-octenyl]-
4-(tetrahydropyran-2-yloxy)cyclopentanone is reacted with acetic acid in a mixed solvent of tetrahydrofuran and water to produce 2-(1-hydroxy-7-keto-8-oxanonyl)-3-(3-
Hydroxy-1-trans-octenyl]-4-
Hydroxycyclopentanone (120) (mixture of stereoisomers) was obtained. Example 4 (In vitro platelet aggregation inhibitory effect) The in vitro platelet aggregation inhibitory effect of test drugs including 7-hydroxy PGE 1 of the present invention was tested in rabbits.
Tested using PRP. The result is the 50% inhibitory concentration (I C 50 ) of platelet aggregation.
It was shown in ADP-disodium salt with a final concentration of 5 μH was used as the flocculant. The results are shown in Table 1. Preparation of PRP, drugs, and aggregating agents (1) Preparation of platelet-rich plasma (PRP) Citric blood (3.8% sodium citrate 1 volume and 9 volumes of blood) were collected. The obtained citrate blood was centrifuged at 100 G for 10 minutes at room temperature, and the supernatant (PRP) was separated. The obtained PRP was stored at room temperature and used as soon as possible, and was not used more than 4 hours after preparation. (2) Preparation of drug The test drug is generally 10 mg/ml or 1 mg/ml.
Dissolve in ethyl alcohol and dilute with physiological saline to adjust the concentration. (3) Preparation of flocculant ADP solution ADP disodium salt Kyowa Hakko was dissolved in 0.1 M Tris-HCl buffer pH 7.8 to prepare a 50 μM solution (final concentration 5 μM). Platelet aggregation inhibition test method (1) Planck's platelet aggregation Platelets are aggregated by adding 25μ of physiological saline and 25μ of aggregating agent solution to 200μ of PRP pre-warmed in a 37℃ cuvette of an aggregometer. The aggregation curve was recorded for 3 minutes using an aggregometer manufactured by Rika Denki. The maximum aggregation degree in this platelet aggregation was defined as Planck's maximum aggregation degree. (2) Platelet aggregation inhibition test Add 25μ of test drug solution to 200μ of PRP,
After pre-incubation for 2 minutes in the same manner as in (2) above, 25μ of 50μM ADP2 sodium solution was added and the aggregation curve was recorded for 3 minutes, and the maximum degree of platelet aggregation within that time was measured to determine the inhibition rate. It was calculated using the following formula. The lowest concentration of drug (expressed as final concentration) at which the inhibition rate exceeded 50% was expressed as the IC 50 value. Inhibition rate (%) = 100 - maximum aggregation degree of test drug added system / maximum aggregation degree of blank x 100 Regarding the above in vitro platelet aggregation inhibition test, please refer to Davis.HM, Phylis, J., Paul.K. and
Torry W.; Thromb.Res・11 217-226 (1977) and Anderson REand Foulks JG; Thromb.
Reference is made to Haemos. 36 343-359 (1976).
【表】
実施例 ５
Y.H.Leeらの処法により、非ステロイド性抗炎
症剤の典型であるインドメサシンによるラツトに
おける潰瘍形成阻害作用を評価した。
すなわち本実験には雄性ラツト（Spnague
Dawley種200ｇ）を用い、これらは実験開始前
24時間個別にケージに入れ絶食させておいた。イ
ンドメサシンを経口投与（p.o.）し、６時間後に
これらを殺し、胃線部の潰瘍形成を検査した。７
―ヒドロキシPGE1類はインドメサシン投与30分
前ならびに３時間後に経口的に与えた。インドメ
サシン１定量投与に対する７―ヒドロキシプロス
タグランジンE1類の潰瘍形成阻害率を求めた。
なおインドメサシンは水性懸濁液（水14μにつ
きポリゾルベート80を２滴含有する）0.5mlを投
与した。また７―ヒドロキシPGE1類は0.9％の食
塩を含むリン酸緩衝液に溶解して与えた。
下記の第１表はインドメサシン（20mg／Kg、p.
o.）誘起の潰瘍形成に対する本発明の７―ヒドロ
キシPGE1類の抑制を示している。[Table] Example 5 The inhibitory effect of indomethacin, a typical non-steroidal anti-inflammatory drug, on ulcer formation in rats was evaluated according to the regimen of YHLee et al. In other words, male rats (Spnague) were used in this experiment.
Dawley seeds (200g) were used, and these were collected before the start of the experiment.
The animals were kept individually caged and fasted for 24 hours. Indomethacin was administered orally (po), and after 6 hours they were sacrificed and the gastric line was examined for ulceration. 7
- Hydroxy PGE Class 1 was given orally 30 minutes before and 3 hours after administration of indomethacin. The ulcer formation inhibition rate of 7-hydroxyprostaglandin E class 1 in response to fixed dose administration of indomethacin 1 was determined.
Indomethacin was administered at 0.5 ml of an aqueous suspension (containing 2 drops of polysorbate 80 per 14 μm of water). In addition, 7-hydroxy PGE 1 was dissolved in a phosphate buffer containing 0.9% sodium chloride. Table 1 below shows indomethacin (20mg/Kg, p.
o.) shows the inhibition of 7-hydroxy PGE 1 of the present invention against induced ulceration.
【表】
実施例 ６
７―ヒドロキシPGE1のシクロデキストリン包
接化合物
７―ヒドロキシPGE1メチルエステル10mgをエ
タノール0.1mlにとかして、β―シクロデキスト
リン15mgと水0.2mlの溶液に加え、室温で10分間
撹拌した。
得られた混合物を減圧濃縮して７―ヒドロキシ
PGE1メチルエステルのβ―シクロデキストリン
包接化合物13mgを得た。生成物中の７―ヒドロキ
シPGE1メチルエステルの含量は６％であつた。
実施例 ７
（錠剤の製剤）
１錠が次の組成よりなる錠剤を製造した。
活性成分 200mg
乳糖 280mg
ジヤガイモデンプン 80mg
ポリビニルピロリドン 11mg
ステアリン酸マグネシウム ５mg
576mg
活性成分、乳糖およびジヤガイモデンプンを混
合し、これをポリビニルピロリドンの20％エタノ
ール溶液で均等に湿潤させ、2.0mmメツシユのフ
ルイを通し、45℃にて乾燥させ、かつ再び1.5mm
メツシユのフルイを通した。こうして得た顆粒を
ステアリン酸マグネシウムと混和し、錠剤に圧縮
した。
活性成分として、代表的に、化合物（104）お
よび（118）を用いた。
実施例 ８
（カプセル剤の製剤）
１カプセルが次の組成を含有する硬質ゼラチン
カプセルを製造した。
活性成分 200mg
微晶セルロース 195mg
無定形珪酸 ５mg
400mg
細かく粉米化した形の活性成分、微晶セレロー
ス及び未プレスの無定形珪酸を十分に混合し、硬
質ゼラチンカプセルに詰めた。
活性成分として、代表的に化合物（106）を用
いた。製造中、実験的なトラブルはなかつた。
実施例 ９
（アンプル剤の製剤）
１本のアンプル（５ml容量）に次の組成を含有
するアンプルを製造した。
活性成分 200mg
ポリエチレングリコール600 200mg
蒸留水 全量 5.0mg
ポリエチレングリコールおよび活性成分を窒素
下に水中に溶解させ、これを沸騰させ、窒素下に
冷却させ、かつ蒸留した。この溶液に前処理した
水を加えて与えられた容量にし、無菌状態下に
過した。本製造は散光中にて行われる。
充填は窒素気流中にて行われ、滅菌は121℃に
て20分間行つた。
なお、上記活性成分としては、化合物（120）
を用いた。[Table] Example 6 Cyclodextrin clathrate compound of 7-hydroxy PGE 1 10 mg of 7-hydroxy PGE 1 methyl ester was dissolved in 0.1 ml of ethanol, added to a solution of 15 mg of β-cyclodextrin and 0.2 ml of water, and stirred at room temperature for 10 min. Stir for a minute. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure to give 7-hydroxy
13 mg of β-cyclodextrin inclusion compound of PGE 1 methyl ester was obtained. The content of 7-hydroxy PGE 1 methyl ester in the product was 6%. Example 7 (Preparation of tablets) Tablets each having the following composition were manufactured. Active ingredients 200 mg Lactose 280 mg Dimeat starch 80 mg Polyvinylpyrrolidone 11mg Magnesium stearate 5mg 576mg The active ingredients, lactose and diyimo starch were mixed, evenly moistened with a 20% ethanol solution of polyvinylpyrrolidone, and passed through a 2.0 mm mesh sieve. Dry at 45℃ and re-shape to 1.5mm
I passed it through Metsuyu's flue. The granules thus obtained were mixed with magnesium stearate and compressed into tablets. Compounds (104) and (118) were typically used as active ingredients. Example 8 (Capsule formulation) Hard gelatin capsules were prepared, one capsule containing the following composition: Active Ingredients 200mg Microcrystalline Cellulose 195mg Amorphous Silicic Acid 5mg 400mg The active ingredient in finely powdered form, microcrystalline cererose and unpressed amorphous silicic acid were thoroughly mixed and packed into hard gelatin capsules. Compound (106) was typically used as the active ingredient. There were no experimental problems during manufacturing. Example 9 (Formulation of ampoule) An ampoule containing the following composition in one ampoule (5 ml volume) was manufactured. Active ingredient 200 mg Polyethylene glycol 600 200 mg Distilled water Total amount 5.0 mg Polyethylene glycol and active ingredient were dissolved in water under nitrogen, which was boiled, cooled under nitrogen and distilled. The solution was made up to the given volume with pretreated water and filtered under sterile conditions. This production is carried out under diffused light. Filling was carried out in a nitrogen stream and sterilization was carried out at 121°C for 20 minutes. In addition, as the above active ingredient, compound (120)
was used.