JPH0196A - α−（２−アジド−２−デオキシグリコシル）セラミド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明はα−（２−アジド−２−デオキシグリコシル）
セラミド誘導体及びその製造法に関するものであり、更
に詳しくはスフィンゴ糖脂質に類似したα−（２−アジ
ド−２−デオキシグリコシル）セラミド誘導体及びその
製造法に関するものである。

［従来の技術］ スフィンゴ糖脂質は一般にセラミド（Ｎ−アシルスフィ
ンゴシン）の第１級水酸基が単糖またはオリゴ糖にβ−
結合でグリコシド結合しているものである。これらは主
に動物界に存在し、細胞膜の構成成分として知られてい
るが、細胞増殖や運動制御における情報媒介分子、細胞
の種類や分化過程に関連した細胞膜抗原分子、酵素や蛋
白質抗原などの生理活性分子の活性調節作用など、さま
ざまな機能が明らかにされてきている。しかし、この様
な脂質セラミドの第１級水酸基が単糖またはオリゴ糖に
ａ−結合したものは知られていなかった。

［発明が解決すべき問題点］ 糖脂質の糖鎖は、蛋白質のそれと同様癌に関連した抗原
決定部位として、またヒトの代表的アロ抗原であるＡＢ
Ｏ血液型物質の抗原決定部位として重要である。特にα
、１−３結合の２−アセトアミド−２−デオキシヘキソ
ピラノシル基、例えば２−アセトアミド−２−デオキシ
ガラクトピラノシル基を持つ化合物はＡ型の抗原関連物
質として知られている。従って、これらの抗原に対する
抗体を産生させることのできる感作用抗原として働く化
合物を開発することは重要な技術的課題であり、またこ
の様な化合物製造のための中間体を開発することもまた
重要な技術的課題である。

［問題点を解決するための手段］ 本発明はこの様な２−アセトアミド−２−デオキシヘキ
ソピラノシル基を持つ化合物への中間体として有用な化
合物、即ち一般式（＋）（式中Ｒ及びＲ２はいずれか一
方が水素で他方は低級アシルオキシ基であり、Ｒ及びＲ
４はいずれか一方が水素で他方は低級アシルオキシ基又
はその水酸基がベル低級アシル化された（１→４）結合
のヘキサピラノシル基であり、Ｒ５は炭素数１０ないし
２５のアルキル基であり、ｎは１０ないし２５の正の整
数を表わす）で表わされるα−（２−アジド−２−デオ
キシグリコシル）セラミド誘導体を提供するものである
。

本発明のα−（２−アジド−２−デオキシグリコシル）
セラミド誘導体の糖脂質部分はＲ１が低級アシルオキシ
基、Ｒが水素、Ｒ３が水素で、Ｒがその水酸基がベル低
級アシル化されたヘキサピラノシル基で置換された又は
無置換の水酸基のとき２−アジド−２−デオキシ−α−
Ｄ−グルコース又はその誘導体の骨格を冑する。

またＲ　が低級アシルオキシ基、Ｒ２が水素、Ｒ３がそ
の水酸基がベル低級アシル化されたヘキサピラノシル基
で置換された又は無置換の水酸基で、Ｒ４が水素のとき
２−アジド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトース又は
その誘導体の骨格を有する。

Ｒ又はＲ４の置換基としてのヘキサピラノシル基として
はＤ−グルコピラノシル基及びＤ−ガラクトピラノシル
基を代表例として例示することができる。

セラミド部分のＲ５として代表的な基はヘプタデシル基
であり、このときＲ５は隣接するアミドカルボニル基と
ともにステアロイルアミド基を構成する。またｎの代表
例は天然物（スフィンゴシンなど）由来の原料から調製
されるとき１２である。

本発明のα−（２−アジド−２−デオキシグリコシ・ル
）セラミド誘導体は一般式（１１）、即ち（式中Ｒ及び
Ｒ２はいずれか一方が水素で他方ｌ は低級アシルオキシ基であり、Ｒ及びＲ４はいずれか一
方が水素で他方は低級アシルオキシ基又はその水酸基が
低級アシル基でベルアシル化された（１−４）結合のヘ
キソピラノシル基であり、Ｒ６は低級アシル基であり、
Ｘはハロゲン原子を表す）で表されるペルアシル−２−
アジド−２−デオキシ糖ハロゲン化物を分子篩及び銀塩
触媒の存在下に、一般式 （式中Ｒ５は炭素数１０ないし２５のアルキル基を、Ｒ
７は第二級水酸基の保護基を、ｎは１ｏないし２５の正
の整数を表わす）で表わされるセラミド類と反応させる
ことことにより製造することができる。

反応の際の一般式（■１）で表されるペルアシル−２−
アジド−２−デオキシ糖ハロゲン化物と一般式（ＩＩり
で表されるセラミド類との量比は限定的でないが、通常
前者１モル当り後者約０．１モルないし約１０モル程度
、好ましくは約０．５モルないし約２モル程度を用いる
。

分子篩としてはＡ型、Ｙ型又は天然のゼオライト等を例
示することができる。

その使用量は限定的でないが、通常一般式（！１）で表
されるペルアシル−２−アジド−２−デオキシ糖ハロゲ
ン化物と一般式（Ｉｌｌ）で表されるセラミド類との合
量１ｆｆｉ量部当り約０．１重量部ないし約１０重工部
程度である。

触媒として用いる銀塩としては過塩素酸銀等の強酸銀塩
、トリフルオロメタンスルホン酸銀等の超強酸銀塩、炭
酸銀等を例示することができる。

その使用量は限定的でないが、通常一般式（ＩＩ）で表
されるペルアシル−２−アジド−２−デオキシ糖ハロゲ
ン化物１重量部当り約１重量部ないし約１０重工部程度
である。

反応は溶媒中、不活性ガス雰囲気中で行なうことが好ま
しい。溶媒としては再出発原料を溶解できるものであれ
ば格別の限定はないが、適当な溶媒としてニトロメタン
、トルエン、クロロホルム、塩化メチレン、ジクロルエ
タン等を例示することができる。

溶媒の使用量は限定的でないが、少なくとも反応成分を
溶解するに必要な量である。上限は格別ないが、実用上
再反応成分の合ｆｆ１１重量部に対して約１００重工部
程度である。

反応温度も限定的でなく室温程度の温和な条件で行なう
ことができるが、一般的には約−１０℃ないし約１００
℃程度である。

反応時間は反応条件により変り得るが、室温程度の反応
温度を用いたとき数時間ないし数日程度である。

生成した本発明のα−（２−アジド−２−デオキシグリ
コシル）セラミド誘導体は溶媒抽出、液体クロマトグラ
フィなどによる分離等、慣用の手段で精製回収できる。

［作用］ 本発明のα−（２−アジド−２−デオキシグリコシル）
セラミド誘導体はこれを ■）そのアジド部分にトリフェニルホスフィンを付加さ
せたのち加水分解してアジド基をアミノ基に変換し、又
は ２）水素添加によってセラミド部分の二重結合を飽和結
合とし、かつアジド基をアミノ基に転換し、 形成されたアミノ基をアセチル化し、保護基Ｒ７を離脱
させ、かつ低級アシルオキシ基を水酸基に変換すること
によって、一般式（ＩＶ）、即ち０）ｉ （式中Ｒ及びＲ１２はいずれか一方が水素で他方は水酸
基であり、Ｒ１３及びＲ１４はいずれか一方が水素で他
方は水酸基又は（１−４）結合のヘキサピラノシル基で
あり、Ｒ５及びｎは前記同様の意味を表し、Ｘ　及びＸ
２はそれぞれ水素又は両者合体して形成される二重結合
を表わす）のα−グリコジルセラミド誘導体とすること
ができる。

こうして得られるα−グリコジルセラミド誘導体はこれ
で哺乳動物を感作することによってその糖鎖部分に対す
る抗体を産生させることができる。

以下本発明を実施例で更に詳しく説明する。

なお実施例中で用いたセラミドは下記の構造を有する天
然物由来のものである。

Ｈ 実施例１ ２−アジド−２−デオキシ−３，４，６−トリー〇−ア
セチルーα−Ｄ−ガラクトピラノシルニー１　（３−０
−ベンゾイル）セラミド３位水酸基をベンゾイル化した
セラミド４０ＩＩ１ｇ。

モレキュラーシーブ４人１００１ｇ、炭酸銀１１００ｆ
ｆ１　＋過塩素酸銀５０ｍｇを塩化メチレン５　ｍｌに
加えて、アルゴン気流下に室温でよく攪はんした。これ
に、２−アジド−２−デオキシ−３，４，６−トリー〇
−アセチルーα−Ｄ−ガラクトピラノシルクロライド４
Ｑ＋＊ｇを塩化メチレンに溶かした溶液を滴下した。室
温で４０時間攪はんを続け、反応終了後、反応液を口遇
し、塩化メチレンでよく洗浄して溶液を減圧濃縮した。

残さを酢酸エチル；ｎ−ヘキサン−１：３の混合溶媒を
使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し
た。

精製画分を集めて蒸発乾固し、３２．４ｍｇの固体を得
た。

１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ（、ｆ１３）の測定結果より、δ−
４，９０ｐｐｍ（Ｊ　　＝３．６６Ｈｚ）に■−２ α結合した時のアノマー位プロトンが見られ、６．６１
ｐｐｍに−ＮＨＣＯ−１５．５７ｐｐｍと５．９４ｐｐ
ｍに二重結合プロトンが、そして、赤外吸収スペクトル
において、２１２０ｃｍ−１にアジドの吸収が見られる
ことから、このものは２−アジド−２−デオキシ−３，
４，６−トリー〇−アセチルーα−Ｄ−ガラクトピラノ
シル１−１（３−０−ベンゾイル）セラミドであると確
認された。

実施例２ ベンゾイル化したセラミド４０ａ＋ｇ、モレキュラーシ
ーブ４人を１１００ｎ、炭酸銀１００ａ＋ｇ、過塩素酸
銀５　ｍｇを塩化メチレン５ｍｌに加えて、アルゴン気
流下に室温でよく攪はんした。これに、２−アジド−２
−デオキシ−３，４，６−トリー〇−アセチルーα−Ｄ
−グルコピラノシルクロライド４０−ｇを塩化メチレン
２ｍｌに溶かした溶液を滴下した。室温で攪はんを続け
、反応終了後、反応液を口過し、塩化メチレンでよく洗
浄して溶液を減圧濃縮した。残さを酢酸エチル：ｎ−ヘ
キサン−１：３の混合溶媒を使用してシリカゲルカラム
クロマトグラフィーで精製した。精製画分を集めて蒸発
乾固し、３９．２ｍｇの固体を得た。

Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　３）の測定結果より、δ−４
，９１ｐｐｍ（Ｊ−３，６５Ｈｚ）にα体のアノマー位
プロトンが見られ、６．６１ｐｐｍに−ＮＨＣＯ−１５
．５７ｐｐｍと５．９２ｐｐｍに二重結合プロトンが見
られ、赤外吸収スペクトルにおいて、２１２０ＣＩ１１
−１にアジドの吸収が見られることから、このものは２
−アジド−２−デオキシ−３，４，６−トリー〇−アセ
チルーα−Ｄ−グルコピラノシル１−１　（３−０−ベ
ンゾイル）セラミドであると確認された。

実施例３ ベンゾイル化したセラミド４０ｍｇ、モレキュラーシー
ブ４人　１００ａ＋ｇ、炭酸銀１００ｍｇ、過塩素酸銀
５　ｍｇを塩化メチレン５　ｍｌに加えて、アルゴン気
流下に室温でよく攪はんした。これに、２−アジド−２
−デオキシ−３，６−ジー０−アセチル−４−０−（２
，３，４，６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−ガラク
トピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシルクロライド
１１１０ｍｇを塩化メチレン２　ｍｌに溶かした溶液を
滴下した。室温で攪はんを続け、反応終了後、反応液を
口過し、塩化メチレンで洗浄して溶液を減圧濃縮した。

残さを酢酸エチル：ｎ−ヘキサン−１：３の混合溶媒を
使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し
た。精製画分を集めて蒸発乾固し、５２．８ａ＋Ｈの固
体を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ（１３）の測定結果より、δ−４，
９０ｐｐｍ　（Ｊ＝３．６６Ｈｚ）にα結合した時のア
ノマー位プロトンが見られた。

２、ｌｐｐｍ付近に一〇〇ＯＣＲ，６，５９ｐｐｍにセ
ラミド部分の−ＮＨＣＯ−が確認された。

赤外吸収スペクトルで２１２０ｃｍ−’にアジドの吸収
が見られた。従って、このものは２−アジド−２−デオ
キシ−３，６−ジー０−アセチル−４−Ｏ−（２，３，
４，６−テトラ−０−フセーｆ−Ａｔ−β−Ｄ−ガラク
トピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシル１−１　（
３−０−ベンゾイル）セラミドであることが確認された
。

実施例４ ベンゾイル化したセラミド４０ｍｇ、モレキュラーシー
ブ４人　１００ｍｇ、炭酸銀１００ｍｇ、過塩素酸銀５
　ｍｇを塩化メチレン５　ｍｌに加えて、アルゴン気流
下に室温でよく攪はんする。これに、２−アジド−２−
デオキシ−３，６−ジー０−アセチル−４−０−（２，
３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチルーβ−Ｄ−グルコピ
ラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシルクロライドｇＯ
ｍｇを塩化メチレン２　ｍｌに溶かした溶液を滴下した
。室温で攪はんを続け、反応終了後、反応液を口過し、
塩化メチレンで洗浄して溶液を減圧濃縮した。　残さを
酢酸エチル：ｎ−ヘキサン−１：３の混合溶媒を使用し
てシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。精
製画分を集めて蒸発乾固し、６０．９ＩＩｇの固体を得
た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊｌ　３）の測定結果より、δ−
４，８８ｐｐｍ　（Ｊ＝３．６６Ｈｚ）にα結合した時
のアノマー位プロトンが確認された。

２、ｌｐｐｍ付近に一〇〇ＯＣＲ，６，６２ｐｐｍにセ
ラミド部分の−ＮＨＣＯ−が確認された。従って、この
ものは２−アジド−２−デオキシ−３，６−ジー０−ア
セチル−４−０−（２゜３．４．６−テトラ−Ｏ−アセ
チルーβ−ｐ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル１−１　（３−０−ベンゾイル）セラミドであ
ることが確認された。

使用例１ ２−アジド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル１−１　　（３−０−ベンゾイル）セラミド３２．Ｏ
ｍｇを乾燥したテトラヒドロフラン６　ｍｌに溶解し、
トリフェニルフォスフイン５．５ｍｇを加えて、室温で
攪はんした。反応が終了した時点で水を加えた。酢酸エ
チルで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を減圧
濃縮した。残さを酢酸エチル：ｎ−ヘキサン−１：１、
続いて、クロロホルム：メタノール−９＝１の混合溶媒
を使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけ
て分離精製した。精製画分を直ちに、無水酢酸を用いて
アセチル化した。反応液を常法により処理して、残さを
酢酸エチル：ｎ−ヘキサン−１：１の混合溶媒を用いて
、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて分離精
製した。精製画分から２０．６ｍｇのシロップを得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＪ　３）の測定結果より、０．９
ｐｐｍにメチル基、１．２ｐｐｍ付近に−ＣＨ＋、２．
Ｏ５ｐｐｍに−ＮＨＣＯＣＨ，ｉ　。

５．５ｐｐｍ付近に二重結合のプロトン、７．２−８．
２ｐｐｍに芳香族プロトンが確認された。

従って、このものは、２−アセタミド−２−デオキシ−
３，４，６−トリー〇−アセチルーα−Ｄ−ガラクトピ
ラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）セラミドで
あると確認された。

２−アセタミド−２−デオキシ−３，４，６−トリー〇
−アセチルーα−Ｄ−ガラクトピラノシルー−１（３−
０−ベンゾイル）セラミド２０．６ｍｇを乾燥したメタ
ノールに溶解し、これに無水メタノールに溶解したナト
リウムメチラートを少量加えて室温で攪はんした。反応
終了後、イオン交換樹脂（ＩＲ−１２０Ｂ）を使用して
中和した。樹脂を口過してメタノールで洗浄し、口演を
減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーにかけて分離精製した。まず、酢酸エチル二〇−ヘ
キサン−１：３の混合溶媒を使用して不純物を除き、次
に、クロロホルム：メタノール−９：２の混合溶媒を使
用して精製し、精製両分から白色固体１０．５ｎｇ得た
。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ，Ｊ　３）の測定結果より、０．
８９ｐｐｍに−ＣＨ、１，１−１，４ｐｐｍ付近に−Ｃ
Ｈ２＋、２．Ｏ４ｐｐｍに−ＮＨＣＯＣＨ、４，８１ｐ
ｐｍ（Ｊ　−３，７５Ｈｚ）にアノマー位のプロトン、
５．２−６．０ｐｐｍに二重結合のプロトンが見られた
。

従って、このものは、２−アセタミド−２−デオキシ−
α−Ｄ−ガラクトピラノシル１−１セラミドであると確
認された。

［抗体産生］ こうして得た２−アセタミド−２−デオキシ−α−Ｄ−
ガラクトピラノシル１−１セラミドを慣用の方法でサル
モネラ　ミネソタ菌体に吸着させ、バルブ／Ｃ（Ｂａ　
１　ｂ／Ｃ）系マウスの腹腔内に当初５ｍｇ、４８目１
０ｍｇ、７日目１５ｍｇ、１２日目２０四ｇ及び２６日
０Ｚ（１＊ｇの量で投与した。免疫開始後３０日０に採
血を行ない、抗血清を得た。

この抗血清の抗体力価を以下の様にしてＥＬ　Ｉ　ＳＡ
法で測定した。

２−アセタミド−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシル１−１セラミド１０ｎｇ、ホスファチジルコリン
１１００ｎ及びコレステロール５０ｎｇを含む抗原溶液
並びにホスファチジルコリン１１００ｎ及びコレステロ
ール５０ｒＨのみを含む対照溶液を用いて９６ウエル　
プレートのコーティングを行ない、各ウェルを水洗した
。

一方得られたマウス抗血清を５６℃で３０分間加熱処理
したのち倍数希釈を行なって、それぞれを検体及び対照
の各ウェルに添加した。そのまま室温で１時間反応せた
のち、反応液を除去し、ウェルを水洗した。

ペルオキシダーゼで標識したヤギ抗マウスＩｇＧ血清（
対Ｈ鎖及び対し鎖、５００倍希釈）及び同ヤギ抗マウス
ＩｇＭ血清（対μ鎖、５００倍希釈）の混合液を各ウェ
ルに加えて室温で１時間反応させた。反応液を水洗し、
基質０−フェニレンジアミンを含む水溶液を添加して室
温で１０分間反応させ、５００ｎｍでの吸光度を測定し
た。結果を第１表に示す。本使用例で調製した糖鎖抗原
に対する抗体が産生されていたことが明かである。

第　　１　　表 使用例２ 実施例２で得た２−アジド−２−デオキシ−３゜４．６
−）リーＯ−アセチルーα−Ｄ−グルコピラノシル１−
１　（３−０−ベンゾイル）セラミド３１．５１１１ｇ
を乾燥したテトラヒドロフラン６　ｍｌに溶解し、トリ
フェニルフォスフイン５．５ｍｇを加えて、室温で攪は
んした。反応が終了した時点で水を加えた。加水分解終
了後、反応液を酢酸エチルで抽出し、硫酸マグネシウム
で乾燥後、溶液を減圧濃縮した。残さを酢酸エチル二〇
−ヘキサン−１：１、続いて、クロロホルム：メタノー
ル−９：１の混合溶媒を使用してシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーにかけて分離精製した。このものを直ち
に、無水酢酸を用いてアセチル化した。

反応液を常法により処理して、残さを酢酸エチル：ｎ−
ヘキサン−１：１の混合溶媒を用いて、シリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーにかけて分離精製した。精製画分
から２５．４ｍｇのシロップを得た。

’Ｈ−ＮＭＲ＜ｃＤｃｐ　３＞の測定結果より、０．９
ｐｐｍにメチル基、１．２ｐｐｍ付近にメチレン基、２
．Ｏ５ｐｐｍに−ＮＨＣＯＣＨ３のメチル基、５．５ｐ
ｐｍ付近に二重結合のプロトン、７．２−８．２ｐｐｍ
に芳香族プロトンが見られ、このものは、２−アセタミ
ド−２−デオキシ−３，４，６−トリー〇−アセチルー
α−Ｄ−グルコピラノシル１−１　（３−０−ベンゾイ
ル）セラミドであると確認された。

２−アセタミド−２−デオキシ−３，４，６−トリー〇
−アセチルーα−Ｄ−グルコピラノシル１−１　　（３
−０−ベンゾイル）セラミド２２．６１１１ｇを乾燥し
たメタノールに溶解し、これに無水メタノールに溶解し
たナトリウムメチラートを少量加えて室温で攪はんした
。イオン交換樹脂（ＩＲ−１２０Ｂ）を使用して中和し
た後、樹脂を口過してメタノールで洗浄し、口演を減圧
濃縮した。

残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて分
離精製した。まず、酢酸エチル二〇−ヘキサン−１：３
の混合溶媒を使用して不純物を除き、次に、クロロホル
ム：メタノール−９：２の混合溶媒を使用して精製し、
精製画分から白色固体１４．３１１１ｇ得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ、ＣＪ　３）の測定結果より、δ−
０，９１ｐｐ’ｍにメチル基、１．２ｐｐｍ付近にメチ
レン、２．４０ｐｐｍにアセタミド基のメチル基、４．
７８ｐｐｍ　ＣＪ−３，７６Ｈｚ）にアノマー位のプロ
トン、５．２−６゜Ｏｐｐｍに二重結合プロトンが見ら
れ、このものは、２−アセタミド−２−デオキシ−α−
Ｄ−グルコピラノシル１−１セラミドであると確認され
た。

使用例３ 実施例３で得られた２−アジド−２−デオキシ−３，６
−ジー０−アセチル−４−０−（２，３゜４．６−テト
ラ−０−アセチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α
−Ｄ−グルコピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイ
ル）セラミド３１．３ｍｇを乾燥したテトラヒドロフラ
ン６　ｍｌに溶解し、トリフェニルフォスフイン７．３
ｍｇを加えて、室温で攪はんした。反応が終了した時点
で水を加えた。

加水分解終了後、反応液を酢酸エチルで抽出し、硫酸マ
グネシウムで乾燥後、溶液を減圧濃縮した。

残さをまず、酢酸エチル二〇−ヘキサン−１＝１、続い
て、クロロホルム：メタノール■９：１の混合溶媒を使
用してシリカゲル力ラムクロマトグラフィニにかけて分
離精製した。精製画分は、ニンヒドリン反応が陽性であ
ったので直ちに、無水酢酸を用いてアセチル化した。反
応液を常法により処理して、残さを酢酸エチル：ｎ−ヘ
キサン−１：１の混合溶媒を使用して、シリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーにかけて分離精製した。精製画分
から２５．８ｍｇのシロップを得た。

１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ（１３）の測定結果より、０．９ｐ
ｐｍにメチル基、１．２ｐｐｍ付近にメチレン、２．Ｏ
５ｐｐｍにアセタミド基のメチル基、５．５ｐｐｍ付近
に二重結合のプロトン、７．２−８．２ｐｐｍに芳香族
プロトンが確認された。従って、このものは、２−アセ
タミド−２−デオキシ−３，６−ジー０−アセチル−４
−０−（２，３，４，６−テトラ−０−アセチル−β−
Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシル
１−１　（３−０−ベンゾイル）セラミドであると確認
された。

２−アセタミド−２−デオキシ−３，６−ジー０−アセ
チル−４−０−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチ
ルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）セラミド２
５．８ｍｇを乾燥したメタノールに溶解し、これに無水
メタノールに溶解したナトリウムメチラートを少量加え
て室温で攪はんした。イオン交換樹脂（ＩＲ−１２０Ｂ
）を使用して中和した。樹脂を口過してメタノールで洗
浄し、口演を減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムク
ロマトグラフィーにかけて分離精製した。

まず、酢酸エチル：ｎ−ヘキサン−に３の混合溶媒を使
用して不純物を除き、次に、クロロホルム：メタノール
−９：２の混合溶媒を使用して精製し、精製画分から白
色固体１０゜９１ｍｇ得た。

１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＪ　３）の測定結果より、０．９
０ｐ、ｐｍにメチル基、１．２ｐｐｍ付近にメチレン、
２．Ｏ４ｐｐｍにアセタミド基のメチル基、４．７５ｐ
ｐｍ　（Ｊ−３，７７Ｈｚ）にアノマー位のプロトン、
５．３２と５．６４ｐｐｍに二重結合プロトンが見られ
た。従って、このものは、２−アセタミド−２−デオキ
シ−４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ
−グルコピラノシル１−１セラミドであると確認された
。

使用例４ 実施例４で得た２−アジド−２−デオキシ−３゜６−ジ
ー０−７セーＦ−ルー４−０−　（２，３，４゜６−テ
トラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−α
−Ｄ−グルコピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイ
ル）セラミド４０．６ａ＋ｇを乾燥したテトラヒドロフ
ラン１０ｍ１に溶解し、トリフェニルフォスフイン９．
６ｍｇを加えて、室温で攪はんした。反応が終了した時
点で水を加えた。加水分解終了後、反応液を酢酸エチル
で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を減圧濃縮
した。残さを、まず、酢酸エチル：ｎ−ヘキサン−１：
１、続いて、クロロホルム：メタノール■９：１の混合
溶媒を使用して、シリカゲルカラムクロマトクラフィー
にかけて分離精製した。精製画分を、直ちに無水酢酸を
用いてアセチル化した。反応液ヲ常法により処理して、
残さを酢酸エチル：ｎ−ヘキサン園１＝１の混合溶媒を
使用して、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけ
て分離精製した。精製画分から３１．２ｍｇのシロップ
を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊｌ　３）の測定結果より、０．
９２ｐｐｍにメチル基、１．２ｐｐｍ付近にメチレン、
２．Ｏ７ｐｐｍにアセタミド基のメチル基、５．５ｐｐ
ｍ付近に二重結合のプロトン、７．２−８．２ｐｐｍに
芳香族プロトンが確認された。従って、このものは、２
−アセタミド−２−デオキシ−３，６−ジーＯ−アセチ
ル−４−〇−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル
ーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノ
シル１−１　（３−０−ベンゾイル）セラミドであると
確認された。

２−アセタミド−２−デオキシ−３，６−ジーＯ−アセ
チル−４−０−（２，３，４，６−テトラ−０−アセチ
ルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）セラミド３１
．２ｍｇを乾燥したメタノールに溶解し、これに無水メ
タノールに溶解したナトリウムメチラートを少量加えて
室温で攪はんした。反応終了後、イオン交換樹脂（ＩＲ
−１２０Ｂ）を使用して中和した。樹脂を口過してメタ
ノールで洗浄し、口演を減圧濃縮した。残さをシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーにかけて分離精製した。ま
ず、酢酸エチル：ｎ−ヘキサン−１：３の混合溶媒を使
用し−で不純物を除き、次に、クロロホルム：メタノー
ル−ｗ９；２の混合溶媒を使用して精製し、精製画分か
ら白色固体１７．２ｍｇ得た。

１Ｈ−ＮＭＲＣＣＤＣ１３）の測定結果より、０．８９
ｐｐｍにメチル基、１．２ｐｐｍ付近にメチレン、２．
Ｏ５ｐｐｍにアセタミド基のメチル基、４．７８ｐｐｍ
（Ｊ−３，７７Ｈｚ）にアノマー位のプロトン、５．２
−６．０ｐｐｍに二重結合プロトンが見られた。従って
、このものは、２−アセタミド−２−デオキシ−４−０
−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル１−１セラミドであることが確認された。

使用例５ 使用例１の途中で得た２−アセタミド−２−デオキシ−
３，４，６−）リーＯ−アセチルーａ−Ｄ−ガラクトピ
ラノシル１−１　（３−０−ベンゾイル）セラミド２８
．５ａ＋ｇをメタノール２０ｍ１にとかし、酸化白金１
．１１１１ｇを加えて、反応器を水素で置換して激しく
攪はんした。４８時間後、反応液を口過してメタノール
でよく洗浄し、口演を約半分に減圧濃縮し、無水酢酸を
加えて、室温で一夜攪はんした。反応液を減圧濃縮した
。残さをクロロホルム：メタノール■９８：２の混合溶
媒を使用して、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで
精製した。精製画分を集めて減圧濃縮し、２０．９ｍｇ
のシロップを得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊｌ　３）の測定結果より、δ−
６．５６ｐｐｍ　（Ｊ−９，４５Ｈｚ）にセラミド部分
の−ＮＨＣＯ−１６．０７ｐｐｍ　（Ｊ−９，４５Ｈｚ
）に−ＮＨＣＯＣＨ３が見られたが、５．５ｐｐｍ付近
に二重結合のプロトンが見られなかった。従って、この
ものはセラミド部分の二重結合が飽和した２−アセタミ
ド−２−デオキシ−３，４，６−トリー〇−アセチルー
α−Ｄ−ガラクトピラノシル１−１　（３−０−ベンゾ
イル）ジヒドロセラミドであると確認した。

このセラミド部分が飽和した２−アセタミド−２−デオ
キシ−３，４，６−トリー〇−アセチルーａ−Ｄ−ガラ
クトピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）ジヒ
ドロセラミド２０．９ｍｇをメタノール１０ｍ１に溶解
し、これにナトリウムメチラートのメタノール溶液を少
し加えて室温で一夜攪はんした。イオン交換樹脂（ＩＲ
−１２０Ｂ）で中和して口過した。樹脂をメタノールで
よく洗浄して、口演を減圧濃縮して、残さをシリカゲル
カラムクロマトグラフィーで精製した。まず、クロロホ
ルム：メタノール−９５：５の混合溶媒を使用して不純
物を分離し、引き続いて、クロロホルム：メタノール−
９：１の混合溶媒を使用して目的物を精製した。精製画
分を集めて蒸発乾固し、１０．６ｍｇの白色固体を得た
。

１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＪ　３）の測定結果より、δ＝４
．８０　（Ｊ−３，８４Ｈｚ）にα体のアノマー位のプ
ロトンが見られ、２．Ｏ５ｐｐｍにＮ−アセチル基のメ
チルプロトンが見られたが、二重結合のプロトンが見ら
れなかったので、このものは、２−アセトアミド−２−
デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル１−１ジヒドロ
セラミドであると確認された。

使用例６ 実施例２で得た２−アジド−２−デオキシ−３゜４．６
−）リーＯ−アセチルーα−Ｄ−グルコピラノシル１−
１　（３−０−ベンゾイル）セラミド３３．５ｆｆ１ｇ
をメタノール２５ｍ１に溶かし、酸化白金１．５ｍｇを
加えて、反応器内を水素で置換して激しく攪はんした。

４８時間後、反応液を口過してメタノールで洗浄し、口
演を約半分に濃縮し、無水酢酸を加えて、室温で一夜攪
はんして、反応液を減圧濃縮した。残さをクロロホルム
：メタノール−９８：２の混合溶媒を使用して、シリカ
ゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。精製画分を
集めて減圧濃縮し、２６．２ｍｇのシロップを得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＪ　３）の測定結果より、δ−６
．５７ｐｐｍ　（Ｊ＝９．４４Ｈｚ）にセラミド部分の
−ＮＨＣＯ−が、δ−６．０５ｐｐｍ（Ｊ＝９．４３Ｈ
ｚ）に−ＮＨＣＯＣＨ３が見られたが、δ−５，５ｐｐ
ｍ付近に二重結合プロトンが見られなかった。従って、
このものは、セラミド部分の二重結合が飽和した２−ア
セタミド−２−デオキシ−３，４，６−）ソー０−アセ
チルーα−Ｄ−グルコピラノシル１−１　（３−０−ベ
ンゾイル）ジヒドロセラミドであると確認した。

このセラミド部分が飽和した２−アセタミド−２−デオ
キシ−３，４，６−）リーＯ−アセチルーα−Ｄ−グル
コピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）ジヒド
ロセラミド２６．２ｍｇメタノール２０ｍ１に溶かし、
これに、ナトリウムメチラートのメタノール溶液を少し
加えて、室温で一夜攪はんした。

イオン交換樹脂（ＩＲ−１２０Ｂ）で中和して口過した
。樹脂をメタノールでよく洗浄して、口演を減圧濃縮し
て、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製
した。まず、クロロホルム：メタノール−９５：５の混
合溶媒を使用して不純物を除去し、引き続いて、クロロ
ホルム：メタノール−９：１の混合溶媒を使用して目的
物を精製した。精製画分を集めて蒸発乾固し、１２．５
ｍｇの白色固体を得た。

１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊｉ　３）の測定結果より、δ−
４，７５（Ｊ−３，８５Ｈｚ）にα体のアノマー位のプ
ロトンが確認され、２．Ｏ５ｐｐｍにＮ−アセチル基の
メチルプロトンが見られたが、二重結合のプロトンが見
られなかった。このものは、２−アセタミド−２−デオ
キシ−α−Ｄ−グルコピラノシル１−１ジヒドロセラミ
ドであると確認された。

使用例７ 実施例３で得た２−アジド−２−デオキシ−３゜６−ジ
ー０−７セチ／ｌ、−４−０−（２，３，４゜６−テト
ラ−Ｏ−アセチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α
−Ｄ−グルコピラノシル１−１（３−０−ベンゾイル）
セラミド５２．８ａ＋ｇをメタノール４０ｍ１に溶解し
、酸化白金１．５ａ＋ｇを加えて、反応器を水素で置換
して激しく攪はんした。

４８時間後、反応液を口過してメタノールで洗浄し、口
演を約半分に減圧濃縮した。残さをクロロホルム：メタ
ノール−９８：２の混合溶媒を使用して、シリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーで精製した。精製画分を集めて
減圧濃縮し、３８．６ｍｇのシロップを得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ（１３）の測定結果より、δ−６．
５６ｐｐｍ　（Ｊ＝９．４４Ｈｚ）にセラミド部分の−
ＮＨＣＯ−が、δ−６．０６ｐｐｍ（Ｊ−９，４４Ｈｚ
）に−ＮＨＣＯＣＨが見られたが、δ−５，５ｐｐｍ付
近に二重結合のプロトンが見られなかった。従って、こ
のものは、２−アセタミド−２−デオキシ−３，６−ジ
ー〇−アセチル−４−０−（２，３，４，６−テトラ−
０−アセチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ
−グルコピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）
ジヒドロセラミドであると確認された。

この２−アセタミド−２−デオキシ−３，６−ジーＯ−
アセチル−４−０−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ア
セチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グル
コピラノシル１−１　　（３−〇−ベンゾイル）ジヒド
ロセラミド３８．６ｍｇをメタノール３０ｍ１に溶かし
、これに、ナトリウムメチラートのメタノール溶液を少
し加えて、室温で一夜攪はんした。イオン交換樹脂（Ｉ
Ｒ−１２０Ｂ）で中和して口過した。メタノールでよく
洗浄して、口演を減圧濃縮して、残さをシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーで精製した。まず、クロロホルム
：メタノール−９５：５の混合溶媒を使用して不純物を
分離し、引き続いて、クロロホルム：メタノール−９：
１の混合溶媒を使用して目的物を精製した。精製画分を
集めて蒸発乾固し、２８．２ｍｇの白色固体を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊｌ　３）の測定結果より、δ−
４，７４ｐｐｍ　（Ｊ−３，８４Ｈｚ）にα体のアノマ
ー位のプロトンが確認され、２．Ｏ５ｐｐｍに−ＮＨＣ
ＯＣＨ３のメチルプロトンが見られたが、二重結合のプ
ロトンが見られなかった。

従って、このものは、２−アセタミド−２−デオキシ−
４−０−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル１−１ジヒドロセラミドであると確認さ
れた。

使用例８ 実施例４で得た２−アジド−２−デオキシ−３゜６−ジ
ーＯ−アセチル−４−０−（２，３，４゜６−テトラ−
０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−
グルコピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）セ
ラミド６０．９ｍｇをメタノール４０ｍ１に溶かし、酸
化白金１．７ｍｇを加えて、反応器を水素で置換して、
激しく攪はんした。

４８時間後、反応液を口過してメタノールで洗浄し、口
演を約半分に減圧濃縮し、無水酢酸を加えて、−夜攪は
んした。反応液を減圧濃縮し、残さをクロロホルム：メ
タノール−９８：２の混合溶媒を使用して、シリカゲル
カラムクロマトグラフィーで精製した。精製画分を集め
て減圧濃縮し、１１．３ｍｇのシロップを得た。

１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＪ　３）の測定結果より、δ−６
．５８ｐｐｍ　（Ｊ＝９．４４Ｈｚ）にセラミド部分（
７）−ＮＨＣＯ−が、δ−６．ｏｓｐｐｍ（Ｊ−９，４
４Ｈｚ）に−ＮＨＣＯＣＨ３が見られたが、δ−５，５
ｐｐｍ付近に二重結合のプロトンが見られなかった。従
って、このものは、２−アセタミド−２−デオキシ−３
，６−ジー〇−アセチル−４−０−（２，３，４，６−
テトラ−Ｏ−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−
α−Ｄ−グルコピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾ
イル）ジヒドロセラミドであると確認された。

この２−アセタミド−２−デオキシ−３，６−ジー〇−
アセチル−４−０−（２，３，４，６−テトラ−０−ア
セチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル１−１　　（３−０−ベンゾイル）ジヒドロ
セラミド１１．３ｍｇをメタノール３０ｍ１に溶かし、
これにナトリウムメチラートのメタノール溶液を少し加
えて、室温で一夜攪はんした。イオン交換樹脂（ＩＲ−
１２０Ｂ）で中和して口過した。メタノールで樹脂をよ
く洗浄して、口演を減圧濃縮して、残さをシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーで精製した。まず、クロロホル
ム：メタノール−９５：５の混合溶媒を使用して不純物
を分離し、引き続いて、クロロホルム：メタノール−９
：１の混合溶媒を使用して目的物を精製した。精製画分
を集めて蒸発乾固し、３０．５ｍｇの白色固体を得た。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　３）の測定結果より、δ−
４，８０ｐｐｍ　（Ｊ−３，８４Ｈｚ）にα体のアノマ
ー位のプロトンが確認され、２．Ｏ７ｐｐｍに−ＮＨＣ
ＯＣＨ３のメチルプロトンが見られたが、二重結合のプ
ロトンが見られなかった。

従って、このものは、２−アセタミド−２−デオキシ−
４−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グル
コピラノシル１−１ジヒドロセラミドであると確認され
た。

［発明の効果］ 本発明のα−（２−アジド−２−デオキシグリコシル）
セラミド誘導体は、糖鎖抗原として有用なα−グリコジ
ルセラミド誘導体への中間体として優れている。また本
発明の方法によれば、この中間体を容易かつ効率よく製
造することができる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１及びＲ＿２はいずれか一方が水素で他方は
   低級アシルオキシ基であり、Ｒ＿３及びＲ＿４はいずれ
   か一方が水素で他方は低級アシルオキシ基又はその水酸
   基が低級アシル基でペルアシル化された（１→４）結合
   のヘキソピラノシル基であり、Ｒ＿５は炭素数１０ない
   し２５のアルキル基であり、Ｒ＿６は低級アシル基であ
   り、Ｒ＿７は水酸基の保護基であり、ｎは１０ないし２
   ５の正の整数を表わす）で表わされるα−（２−アジド
   −２−デオキシグリコシル）セラミド誘導体。 （２）低級アシルオキシ基がアセチルオキシ基で、低級
   アシル基がアセチル基である特許請求の範囲第１項記載
   のα−（２−アジド−２−デオキシグリコシル）セラミ
   ド誘導体。（３）低級アシル基でペルアシル化された（
   １→４）結合のヘキソピラノシル基が２，３，４，６−
   テトラ−Ｏ−アセチルグルコピラノシル基又は２，３，
   ４，６−テトラ−Ｏ−アセチルガラクトピラノシル基で
   ある特許請求の範囲第１項又は第２項記載のα−（２−
   アジド−２−デオキシグリコシル）セラミド誘導体。 （４）Ｒ＿６がアセチル基であり、Ｒ＿７がベンゾイル
   基であり、ｎが１２である特許請求の範囲第１項ないし
   第３項のいずれかの項記載のα−（２−アジド−２−デ
   オキシグリコシル）セラミド誘導体。 （５）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１及びＲ＿２はいずれか一方が水素で他方は
   低級アシルオキシ基であり、Ｒ＿３及びＲ＿４はいずれ
   か一方が水素で他方は低級アシルオキシ基又はその水酸
   基が低級アシル基でペルアシル化された（１→４）結合
   のヘキソピラノシル基であり、Ｒ＿６は低級アシル基で
   あり、Ｘはハロゲン原子を表わす）で表わされるペルア
   シル−２−アジド−２−デオキシ糖ハロゲン化物を、分
   子篩及び銀塩触媒の存在下に、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿５は炭素数１０ないし２５のアルキル基を、
   Ｒ＿７は第二級水酸基の保護基を、ｎは１０ないし２５
   の正の整数を表わす）で表わされるセラミド類と反応さ
   せることを特徴とする、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１ないしＲ＿７及びｎは前記同様の意味を表
   す）で表わされるα−（２−アジド−２−デオキシグリ
   コシル）セラミド誘導体の製造方法。 （６）反応を室温で行う特許請求の範囲第５項記載の製
   造方法。 （７）低級アシルオキシ基がアセチルオキシ基で低級ア
   シル基がアセチル基である特許請求の範囲第５項又は第
   ６項記載の製造方法。 （８）低級アシル基でペルアシル化された（１→４）結
   合のヘキソピラノシル基が２，３，４，６−テトラ−Ｏ
   −アセチルグルコピラノシル基又は２，３，４，６−テ
   トラ−Ｏ−アセチルガラクトピラノシル基である特許請
   求の範囲第５項ないし第７項のいずれかの項記載の製造
   方法。 （９）Ｒ＿５がヘプタデシル基であり、Ｒ＿７がベンゾ
   イル基であり、ｎが１２である特許請求の範囲第５項な
   いし第８項のいずれかの項記載の製造方法。 （１０）分子篩がＡ型ゼオライトであり、銀塩が銀の強
   酸又は超強酸の塩である特許請求の範囲第５項ないし第
   ９項のいずれかの項記載の製造方法。 （１１）銀塩がＡｇ＿２ＯＳＯ＿２ＣＦ＿３、ＡｇＣｌ
   Ｏ＿４又はＡｇ＿２ＣＯ＿３である特許請求の範囲第５
   項ないし第１０項のいずれかの項記載の製造方法。 （１２）分子篩及び銀塩触媒の使用量がそれぞれ、反応
   成分の合量１重量部当り０．１重量部ないし１０重量部
   及びペルアシル−２−アジド−２−デオキシ糖ハロゲン
   化物１重量部当り１重量部ないし１０重量部である特許
   請求の範囲第５項ないし第１１項のいずれかの項記載の
   製造方法。 （１３）溶媒としてニトロメタン、トルエン、クロロホ
   ルム、塩化メチレン又はジクロルエタンを用いる特許請
   求の範囲第５項ないし第１２項のいずれかの項記載の製
   造方法。 （１４）溶媒の使用量が少なくとも反応成分を溶解する
   に充分な量である特許請求の範囲第５項ないし第１３項
   のいずれかの項記載の製造方法。