JPH02104587A

JPH02104587A - Ｎ‐〔Ｎ‐（テトラヒドロピリド〔２，３‐ｄ〕ピリミジニルメチル）アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸誘導体

Info

Publication number: JPH02104587A
Application number: JP1139012A
Authority: JP
Inventors: Edward C Taylor; エドワード、シー、テイラー; James M Hamby; ジェームズ、エム、ハンビー; Chuan Shih; チュアン、シー
Original assignee: Eli Lilly and Co; Princeton University
Current assignee: Eli Lilly and Co; Princeton University
Priority date: 1988-05-31
Filing date: 1989-05-31
Publication date: 1990-04-17
Also published as: GR3018293T3; DE68924556T2; DE68924556D1; US4871746A; ATE129245T1; EP0344922B1; EP0344922A2; ES2078236T3; EP0344922A3

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、下記式のグルタミン酸誘導体の個々のジアス
テレオマー及びそれらのジアステレオマー混合物に関す
る：又は上記式中：Ｒ１は水素、炭素原子１〜６のアルキル又は炭素原子１
〜６のアルカノイルである；Ｒ２は水素又はカルボキシ保護基である；Ｒ３は水素又
はハロである；及びＲ４は水素又はアミノ保護基である。

式ＩＡ及びＩＢの化合物は、基質として葉酸及び特に葉
酸の代謝誘導体を利用する１以上の酵素に対して阻害作
用を有する。したがって、本化合物は、こうして阻害さ
れる酵素に依存した新生物（ｎｅｏｐｌａｓｆｌｌ）の
増殖を阻害するために単独で又は組合せて用いられる。

本発明は、式ＩＡ及びＩＢの化合物の薬学上許容される
塩、これら化合物及びそれらの塩の製造方法、呻乳動物
において新生物（以下腫瘍ともいう）増殖に対抗する方
法、並びにこれら化合物又はそれらの塩を含有した医薬
組成物にも関する。

本明細書で用いられるアルキルという用語は、メチル、
エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びイ
ソプロピル、イソブチル、Ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ネ
オペンチル等のようなそれらの分岐鎖異性体を含めた炭
素原子１〜６の直鎖又は分岐鎖−価脂肪族基を表す。同
様に、アルカノイルとは、ホルミル、アセチル、プロピ
オニル、ブチリル、ピバロイル等を含めた炭素原子１〜
６の直鎖又は分岐鎖−価脂肪族アシル基を表す。

Ｒ３がハロである場合、それはクロロ、ブロモ、ヨード
又はフルオロ、好ましくはクロロ又はフルオロである。

Ｒ２及びＲ４で示され本明細書で用いられている保護基
は、最終治療化合物中に通常存在しないが、但し化学操
作中に反応するおそれがある基を保護するために一部の
合成過程で意図的に導入され、後の合成段階で除去され
る基を表す。このような保護基を有する化合物は主に化
学中間体として重要であることから（但し、一部の誘導
体は生物学的活性も示す）、それらの正確な構造は重要
でない。このような保護基の形成及び除去のための多数
の反応は、例えば“有機化学における保護基”、ブレナ
ム・ブレス（Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ）、　ｏンドン
及びニューヨーク、１９７３年；グリーン。

Ｔｈ、　Ｗ、　（Ｇｒｅｅｎｅ、Ｔｈ、Ｗ、）、　　“
有機合成における保護基”、ウィリー（Ｖｉｌｅｙ）　
、ニューヨーク。

１９８１年；　“ザ・ペプタイデス” （Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ）、第１巻、シュレーダー
（Ｓｅｈｒ６ｄｅｒ）及びルブケ（Ｌｕｂｋｅ）　、ア
カデミツク・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）
、　ロンドン及びニューヨーク、１９６５年；　“有機
化学の方法″、ホーベンーヴエイル（ｌｌｏｕｂｅｎ−
Ｗｅｙ　ｌ　）　、第４版、第１５／Ｉ巻、ゲオルグ・
チーメ・フエルラーク（ＧｅｏｒｇＴｈｉｅｍｅ　Ｖｅ
ｒｌａｇ）、シュタットガート（Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ）
。

１９７４年のようないくつかの標準的文献中に記載され
ている。

カルボキシ基は、分子の望ましい構造を壊さない十分に
穏やかな条件下で選択的に除去可能なエステル基、特に
メチルもしくはエチルのような低級アルキルエステル及
び詳しくはｔ−ブチルのような１位で分岐したエステル
；並びに（１）例えばメトキシメチル、１−メトキシエ
チル及びエトキシメチルのような低級アルコキシ、（２
）例えばメチルチオメチル及び１−エチルチオエチルの
ような低級アルキルチオ、（３）２，２．２−トリクロ
ロエチル、２−ブロモエチル及び２−ヨードエトキシカ
ルボニルのようなハロゲン、（４）例えばｔｅｒｔ−ブ
チルのような低級アルキル、メトキシのような低級アル
コキシ、ヒドロキシ、クロロのようなハロ及びニトロで
各々が一１二もしくは三置換されているか又は非置換で
ある、例えばベンジル、４−ニトロベンジル、ジフエニ
′ルメチル、ジ（４−メトキシフェニル）メチルのよう
な１又は２のフェニル基、又は（５）フェナシルのよう
なアロイルで１又は２位が置換された上記の低級アルキ
ルエステルとして保護することができる。カルボキシ基
は、例えばトリメチルシリルオキシカルボニルとして、
トリ低級アルキルシリルのような有機シリル基の形でも
保護される。

同様に、アミノ基は、穏やかな条件下で選択的に除去可
能なアシル基、特にホルミル、１位で分岐した低級アル
カノイル基、詳しくはピバロイルのような三級アルカノ
イル、又は例えばトリフルオロアセチルのように１位で
置換された低級アルカノイル基を用いてアミドとして保
護することができる。

本発明の化合物は、薬学上許容される塩の形で通常有利
に用いることができる。その水和物を含めたこのような
形は通常結晶であって、溶液を形成し又は医薬組成物を
処方する上で有利である。

塩基との薬学上許容される塩としては、例えばナトリウ
ム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、
アルミニウム、亜鉛、アンモニウム、トリメチルアンモ
ニウム、トリエタノールアンモニウム、ピリジニウム及
び置換ピリジニウム塩のような、アルカリ金属、アルカ
リ土類金属、無毒性金属、アンモニウム並びに−１二及
び三置換アミン類から形成される塩類がある。ニナトリ
ウム塩が特に有利である。

本発明の化合物は、下記式の保護アミノメチルベンゾイ
ルグルタミン酸誘導体：〔上記式中、各Ｒ２はカルボキシ保護基である；及びＲ
３は水素又はハロである〕を下記式の２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−ホルミル
ピリド［２，３−ｄ）ピリミジン：Ｈ〔上記式中、Ｒ４はアミノ保護基である〕と反応させる
ことによって製造することができる。

その結果、下記式の中間シッフ塩基が形成される；式■
のシッフ塩基は、例えば水素化ホウ素のような金属水素
化物によりその場で還元して、下記式Ｖの対応保護Ｎ−
［Ｎ−（２−アミノ−４−ヒドロキシピリド（２，３−
ｄ）ピリミジン−６＝イルメチル）−４−アミノメチル
ベンゾイル〕グルタミン酸誘導体を得ることができる：
■ 弐Ｖの化合物の接触還元により、Ｒ１が水素、Ｒがカル
ボキシ保護基、及びＲ４がアミノ保護基である式ＩＡ及
びＩＢのジアステレオマー混合物が得られる。適切な水
素添加触媒としては、貴金属及び酸化パラジウムもしく
は白金、酸化ロジウムのような貴金属酸化物、並びに炭
素もしくは酸化カルシウムのような担体上の上記物質が
ある。

このような水素添加ではベンジルアミン構造の開裂を引
き起こす傾向がややあることから、穏やかなロジウム炭
の使用が好ましい。一方、式■の化合物は、最初に対応
Ｎ−ホルミル、Ｎ−アセチル又はＮ−）リフルオロアセ
チル化合物のようなＮ−アシル化誘導体に変換されるが
、最後の基は除去しゃすいアミノ保護基の性質を有して
いる。このような付加保護の場合には、水素添加時のベ
ンジルアミン構造の開裂は回避されるか又は最少に抑制
される。水素添加により、Ｒ１がアシル基、Ｒ２がカル
ボキシ保護基、及びＲ４がアミノ保護基である式ＩＡ及
びＩＢのジアステレオマー混合物が得られる。次いで、
塩基での加水分解による等のＲ及びＲ４保護基の除去に
よって、Ｒ及びＲ４が各々水素である式ＩＡ及びＩＢの
ジアステレオマー化合物の混合物を得る。前記のように
、Ｎ−）リフルオロアセチル化合物のような容易に加水
分解されやすいＮ−アシル誘導体が用いられる場合には
、これはＲ及びＲ４基の加水分解中に同時に除去される
。

式ＩＡ及びＩＢで示される個々のジアステレオマーの混
合物はそのまま治療に用いることができ、又はクロマト
グラフィーによる等で機械的に分離することもできる。

一方、個々のジアステレオマーは、１０−カンファース
ルホン酸、ショノウ酸、α−プロモショノウ酸、メトキ
シ酢酸、酒石酸、ジアセチル酒石酸、リンゴ酸、ピロリ
ドン−５−カルボン酸等の個々のエナンチオマー（鏡像
異性体）のようなキラル酸とジアステレオマー塩を形成
し、しかる後一方又は双方とも実質上他方を含有しない
ように、即ち９５％以上の光学純度を有する形で個々の
ジアステレオマー塩基の一方又は双方を遊離させ、場合
によりプロセスを繰返すことにより、分離することがで
きる。この分離は、保３基除去の前又は後で行われる。

前記のように、本発明の化合物は基質として葉酸、特に
葉酸の代謝誘導体を利用する１以上の酵素に対して作用
を有する。本化合物は、絨毛癌、白血病、女性乳房の腺
癌、頭部及び頚部の表皮癌、偏平上皮又は小細胞肺癌並
びに様々なリンパ肉腫を含めた腫瘍の増殖を阻害するた
めに有資格専門家の監視下で用いることができる。本化
合物は、菌状息肉腫及び乾癖を治療するためにも使用可
能である。

本化合物は、腫瘍を有しかつ治療の必要がある哺乳動物
に他の抗腫瘍剤、ステロイド等を含めた他の治療剤と組
合せて又は単独で経口、但し好ましくは非経口で投与さ
れる。非経口投与経路としては、筋肉内、鞘内（１ｎｔ
ｒａｔｈｃｃａｌ）　、静脈内及び動脈内がある。投与
療法は具体的な腫瘍、患者の症状及び応答性に応じて決
定されねばならないが、但し通常投与量は５〜１０日間
にわたり約１０〜約１００ｍｇ／日であるか又は−回の
１日投与量２５０〜５００ｍｇが例えば１４日毎に周期
的に繰返される。現在使用中の他の抗代謝産物と比較し
て低毒性であるのみならず、毒性応答性は１０二を減ら
すか、又は隔日で化合物を投与するかのいずれか、又は
双方によりしばしば回避しうる。経口投与形としては、
薬物１〜１１０ｆｆ１／単位用量を含有した錠剤及びカ
プセルがある。２０〜１００ｍｇ／ｍｌを含有した等張
液も非経口投与用に使用可能である。

下記例は、本発明を更に説明するものである。

ＮＭＲデータにおいて、“Ｓ゛はシングレットを表し、
ｄ“はダブレットを表し、“ｔ“はトリブレットを表し
、′ｑ°はクアルテットを表し、“ｍ“はマルチブレッ
トを表し、かつ“ｂｒ”はブロードなピークを表す。

例１氷酢酸７０ｍ１中２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキ
シ−６−ホルミルピリド（２，３−ｄ）ピリミジン３．
　０ｇ　（１０，９ｍｍｏｌ）　、Ｎ−（ｐ　−アミノ
メチルベンゾイル）−Ｌ−グルタミン酸ジエチル塩酸塩
４．４７ｇ　（１２，２５ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウ
ム１．０ｇ　（１２，２５ｍ＋＋＋ｏｌ）の混合物を２
５℃で１８時間攪拌した。この溶液にボラン−トリエチ
ルアミン錯体０．４２ｇ（０，５４ｍ１．３．　６５ｏ
＋ａ＋ｏｌ）を加えた。この混合物を２５℃で２時間攪
拌し、しかる後溶媒を減圧下で除去した。残渣を塩化メ
チレン（２００ｍｌ）に溶解し、水で１回、しかる後炭
酸水素ナトリウム飽和水溶液で２回抽出した。水層を合
わせ、塩化メチレンで逆抽出した。有機層を合わせ、無
水硫酸マグ′ネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下で除去し
た。残渣を酢酸エチルから再結晶化し、Ｎ−［Ｎ−（２
−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシピリド［２，３−
ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−４−アミノメチル
ベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル３．４ｇ（収率５２
％）を得た；１ｐ１４９−１５１℃；　’ｌ（ＮＭＲ（
Ｍｅ２ＳＯｄＢ　）６１、１０−１．１７（ａ、６Ｈ）
　、　１．２２（ｓ、　９１１）　、　１．９−２．１
５（Ｉｌｌ、２１１）　。

２．４０　（Ｌ　、　２Ｈ，Ｊ＝７．４１１ｚ）　、　
３．７５　（ｓ、　２Ｈ）　、　３．７７（ｓ、　２１
１）　。

３．９７−４．１０（４，４Ｈ）　、４．３６−４．４
４　（ｉ　、　ＩＩＩ）　、　７．４１−７．４４　（
ｍ　。

２１１．ＡＡ　’ＢＢ’　）　、　７．８０−７．８３
　（ｍ　、　２１１．ＡＡ’ＢＢ’　）、８．３４５　
（ｄ　、　ＩＩＩ。

Ｊ−２，０９１１ｚ）　、　８．６５　（ｄ　、　ｌ）
Ｉ、　Ｊ−７Ｊ８１１ｚ）　、　８．７６　（ｄ　、　
ｉｌｌ。

Ｊ−２，０９１１ｚ）　；　Ｃ３ｏＨ３８Ｎ　６０７と
しての分析計算値；Ｃ６０，５９、Ｈ６，４４，Ｎ１４
．１３　　；実測値：　ＣＧｏ、７５　。

Ｈ６，６ｇ、　　Ｎ１４．３３　。

同様の方法で、Ｎ−［Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４
−ヒドロキシピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−６−イ
ルメチル）−３−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン
酸ジエチル、Ｎ−（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−
ヒドロキシピリド（２，３−ｄ〕ピリミジン−６−イル
メチル）−３−フルオロ−４−アミノメチルヘンゾイル
〕グルタミン酸ジエチル及びＮ−（Ｎ−（２−ピバロイ
ルアミノ−４−ヒドロキシピリド（２，３−ｄ）ピリミ
ジン−６−イルメチル）−２−クロロ−４−アミノメチ
ルヘンゾイル〕グルタミン酸ジエチルは、各々Ｎ−（３
−アミノメチルベンゾイル）グルタミン酸ジエチル、Ｎ
−（３−フルオロ−４−アミノメチルベンゾイル）グル
タミン酸ジエチル及びＮ−（２−クロロ−４−アミノメ
チルベンゾイル）グルタミン酸ジエチルから製造され、
しかる後下記例で例示されているように処理される。

アミノメチルベンゾイルグルタミン酸ジアルキル出発物
質は、モレキュラーψファーマコロジー（Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒ　ＰｈａＩＩｌａｃｏｌｏｇｙ）　、第８巻、第
７４０−７５０頁で記載された操作に従い３−アミノメ
チル安息香酸、３−フルオロ−４−アミノメチル安息香
酸及び２−クロロ−４−アミノメチル安息香酸から合成
することができる。

例２９８％ギ酸１０ｍ１中Ｎ−ＣＮ−（２−ピバロイルアミ
ノ−４−ヒドロキシピリド［２，３−ｄ）ピリミジン−
６−イルメチル）−４−アミノメチルベンゾイル〕グル
タミン酸ジエチル１．０ｇ（］、　、　　７　ｍｍｏｌ
）の溶液に無水酢酸０．３５ｇ（０，３３ｍｌ、　３．
　５ｎ＋ｌｌ１ｏｌ）を加えたｏＧ全合物２５℃で１時
間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、固体物を塩化メチ
レンに溶解し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液で２回抽出
した。水層を塩化メチレンで逆抽出し、有機層を合わせ
、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を蒸発乾固し
、Ｎ−［Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシ
ピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−
Ｎ−ホルミル−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミ
ン酸ジエチルを定量的収率で得たが、これは更に精製せ
ずに次の処理で用いることができる；　’ＨＮＭＲ（Ｍ
ｅ２Ｓｏ　４Ｂ　）６１．１１−１．１８（ｍ、６）１
）。

１．２４　（ｓ　、　９Ｈ）　、　１．９−２．１５（
ＩＩｌ、　２１０　、２４９−２．４４（ＩＩｌ、　２
Ｈ）　。

４．３９−４．４２（＋ａ、３Ｈ）、４．５３−４．５
５（ｎ＋、２Ｈ）、７．２１−７．４４及び７．３４−
７．３７（ｍ、２１１．ＡＡ’ＢＢ’）　、７．７６−
７．７８及び７．１１１１−７．８４（ａ＋、２Ｈ，＾
＾’ＢＢ’）、８．１２及び８．１３（ｓ、ＩＩＩ）、
８．旧−８，７８（ｍ、２１１）。

例３Ｎ−（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４〜ヒドロキシピ
リドＣ２，３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−Ｎ
−）リフルオロアセチル−４−アミ塩化メチレン５０ｍ
１中Ｎ−［Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキ
シピリド（２，３−ｄ〕ピリミジン−６−イルメチル）
−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル
３．２３ｇ（５，４３ｔｘｍｏｌ）の冷（０℃）溶液に
無水トリフルオロ酢酸２．　２８ｇ　（１０，８６ｍｍ
ｏｌ）を１０分間かけて滴下した。反応混合物を室温に
戻し、しかる後１８時間攪拌した。塩化メチレン１００
ｍ１を加え、しかる後混合物を炭酸水素ナトリウム飽和
溶液で３回抽出した。水層を塩化メチレンで逆抽出し、
合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。懸
濁液を濾過し、濾液を減圧下で蒸発させ、粗製Ｎ−（Ｎ
−（２−ピバロイルアミ　　　゛ノー４−ヒドロキシピ
リド［２，３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−Ｎ
−トリフルオロアセチル−４−アミノメチルベンゾイル
〕グルタミン酸ジエチルを定量的収率で得たが、これは
更に精製せずに次の工程で用いることができる。

例４ン酸ジエチル氷酢酸５０ｍ１中Ｎ−［Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−
４−ヒドロキシピリド［２，３−ｄ）ピリミジン−６−
イルメチル）−Ｎ−ホルミル−４−アミノメチルベンゾ
イル〕グルタミン酸ジエチル１、　０９ｇ　（０，１７
ｎ＋ｍｏｌ）の溶液に酸化白金１６４ｍｇを加えた。懸
濁液を水素雰囲気（５０ｐｓｉ、約３．５ｋｇ／ｃｄ）
下２５℃で３時間にわたりパール（Ｐａｒｒ）水素添加
装置内で振盪した。反応混合物をセライトで濾過し、濾
液を減圧下で蒸発させた。残渣を塩化メチレン１００ｍ
１に溶解し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液で２回抽出し
た。水層を塩化メチレン７５ｍ１で逆抽出し、有機層を
合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過した。

濾液を減圧下で除去し、残渣をクロマトグラフィーに付
し、塩化メチレン中５％メタノールで溶出させ、Ｎ−Ｃ
Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシ−５，６
，７，８−テトラヒドロピリド（２，３−ｄ）ピリミジ
ン−６−イルメチル）−Ｎ−ホルミル−４−アミノメチ
ルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル０．８ｇ　（収率
７３％）を得た。分析サンプルをアセトニトリルから再
結晶化させた；ｍｐ１４９−１５１℃；　　’ＨＮＭＲ
（ＭＯ２Ｓｏ　、ｄｓ　）６１．１１−１．１Ｂ（ｍ、
［ｉＨ）、１．１８（ｓ、９）１）。

１、８３−２．１５（＋ａ　、　４Ｈ）　、　２．３０
−２．４７　（Ｉｌｌ、　３Ｈ）　、　２．７９−３．
２０　（ｍ　。

４Ｈ）、　３．９８−４．１１（ｍ、４ｔｌ）、４４８
−４．４３（ｍ、ＬＨ）、４．５３−４．５４（ｎ＋、
　２Ｈ）　、　６．４０−８．５１　（ｍ　、　ＩＨ）
　、　７．３３−７．３８　（ｍ　、　２Ｈ。

＾Ａ’ＢＢ’）、　７．８０−７．８５（ｍ、２）１．
ＡＡ’ＢＢ’）、８．ＩＩ　　及び８．３８（ｓ、ＩＨ
’）、　８．８７−８．７３（＋ｎ、１）１）；Ｃ３，
Ｈ４２Ｎ　６０８としての分析計算値：　Ｃ５９，４１
、Ｈ６，７５゜Ｎ１３．４１　　；実測値：　Ｃ５９，
１４、Ｈ６，７３，Ｎ１３．１３４゜例５３−ｄ〕ピリミジン−６−イルメチル）−Ｎ−トリフル
オロアセチル−４−アミノメチルベンシイ氷酢酸６０ｍ
１中例３の生成物Ｎ−（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−
４−ヒドロキシピリド〔２゜３−ｄ〕ピリミジン−６−
イルメチル）−Ｎ−）リフルオロアセチル−４−アミノ
メチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル３．　７５ｇ
　（５，４３１１ＩＩｌｏ１）に酸化白金５７５ａｇを
加えた。懸濁液を５０ｐｓｉ　　（約３．５ｋｇ／ｃシ
）下２５℃で３時間にわたりバール装置内で水素添加し
た。反応混合物をセライトで濾過し、溶媒を減圧下で除
去した。

残渣を塩化メチレンに溶解し、炭酸水素ナトリウム飽和
溶液で２回抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾
燥し、減圧下で蒸発させた。残渣をクロマトグラフィー
に付し、塩化メチレン中５％メタノールで溶出させ、Ｎ
−（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシ−５
，６，７，８−テトラヒドロピリド（２，３−ｄ）ピリ
ミジン−６−イルメチル）−Ｎ−トリフルオロアセチル
−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル
１．２５ｇ（収率３３％）を得た；’ＨＮＭＲ（Ｍｅ２
３０　ｄ、　）δ１．１１−１．１５（ｍ、８Ｈ）、１
．３３（ｓ、９Ｈ）。

１．８−２．１（ａ＋、６Ｈ）、２．２２８−２４３（
，２Ｈ）、３．０７−３．１８（ｍ。

ＩＨ）、３．９７−４．１０（１１，４Ｈ）、４．１０
−４．２０（ｆｆｉ、ＩＨ）、６．８４−８．６７（＋
ａ、　ＩＨ）　、８．０３−８．０８（ｎ、　ＩＨ）。

例６０、ＩＮ　　ＮａＯＨ中Ｎ−［Ｎ−（２−ピバロイルア
ミノ−４−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロ
ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イルメチル）−
Ｎ−ホルミル−４−アミノメチルベンゾイル］グルタミ
ン酸ジエチル０．５ｇ（０，８ａ＋ａｏｌ）の溶液を２
５℃で５日間攪拌した。

反応混合物を濾過し、濾液を０．５Ｎ塩酸で酸性（ｐＨ
４）にした。０℃で１時間後に生成した固体物を集め、
水洗し、Ｐ　２０５で乾燥させ、Ｎ−［Ｎ−（２−アミ
ノ−４−ヒドロキシ−５，６゜７．８−テトラヒドロピ
リドＣ２，、３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−
Ｎ−ホルミル−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミ
ン酸０．２６ｇ（収率６７％）を得た。分析サンプルを
エタノールから再結晶化させた；ｌｌ１ｐ１７８℃（徐
々に分解）　　；　　’ｌ（ＮＭＲ（Ｍｅ２Ｓｏ　ｄ６
’）δ１．７５−２．２３（ｍ、５１１）。

２．２−２．４２　（ＩＩｌ、　３ｔ（）　、　２．６
５−２．８３　（ｉ＋、　１ｌｌ）　、３．０−３．１
７　（ｍ。

２Ｈ）　、４．３８−４．４０（ｍ、　１８）　、４．
４４−４．６０（ｍ、　２１１）　、　５．９５　（ｓ
　。

２１１）　、８．２９（ｓ、　ＩＩＩ）　、　７．２８
−７．３６　（ｍ　、　２１１．ＡＡ’ＢＢ’　）、　
７．６９−７．９２（ａ＋、２Ｈ，ＡＡ’ＢＢ’）、８
．１０及び８．３６（Ｓ、ｌｌ＋）、８．５７（ｔ。

１１１、ノー７．７８１１ｚ）、９．８（ｂｒ　　ｓ、
１）Ｉ）；　Ｃ２２Ｈ２６Ｎ　６０　７　としての分析
計算値：　Ｃ５４，３２、Ｈ５，３９，Ｎ１７．２８　
　；実ａｌｌ値：　Ｃ５４，６７、Ｈ５，４Ｂ、　Ｎ１
７．０２゜Ｎ−（Ｎ−（２−アミノ−４−ヒドロキシ−
５゜６、７．８−テトラヒドロピリド（２，３−ｄ）ピ
リミジン−６−イルメチル）−Ｎ−ホルミル−４−アミ
ノメチルベンゾイル〕グルタミン酸の全細胞ヒト白血病
細胞系ＣＣＲＦ−ＣＥＭにおけるＩＣ５ｏは、０．０７
８ｇｇ／ｍｌである。

例７氷酢酸中Ｎ−（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒド
ロキシピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチ
ル）−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエ
チル（０，３７ｇ。

０、　６２ｒａｍｏｌ）の溶液に５％ロジウム炭（０，
１２５ｇ）を加え、懸濁液を水素雰囲気（５０ｐｓｉ、
約３．５ｋｇ／ｃｄ）下２５℃で４８時間にわたりパー
ル装置内で振曾した。反応混合物をセライトで濾過して
触媒を除去し、濾液を減圧下で蒸発させた。残渣を塩化
メチレンに溶解し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で２
回抽出した。反応混合物を無水硫酸マグネシウムで乾燥
し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルから再
結晶化し、Ｎ−（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒ
ドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロピリドＣ２，
３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−４−アミノメ
チルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル０．２３３ｇ　
（収率３７％）を得た；ｍｐ１４６−１４７℃；　１Ｈ
ＮＭＲ（Ｍｅ、、　Ｓｏ　δ６．Ｄ２０交換）６１．０
９−１．１５（ｍ、８Ｈ）、１．１５（ｓ、９Ｈ）、１
．９０−２．１７（ｅ、４）１）　、２．４０（ｔ、２
Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）　、２．５０−２．６０（ｍ、　
１８）　。

２．７５−２．８５（ｍ、ＩＨ）、２．８５−２．９７
（ｍ、ＬＨ）、３．９８−４．０７（ｍ。

４Ｈ）、４．１Ｏ−４，１１（ｍ、２Ｈ）　、　４Ｊ７
−４．４３Ｃ１１，ｌＨ）、７．５５−７．５７（＾Ａ
’ＢＢ″、２Ｈ）、７．８５−７．８８（ＡＡ″ＢＢ’
、２Ｈ）、８．７８（ｄ。

ＬＨ，Ｊ”’７４７Ｈｚ）；　Ｃ３ｏＨ４２Ｎ６０７と
しての分析計算値：　Ｃ６０，１９、Ｈ７，０７，Ｎ１
４．０４　、実測値二Ｃ６Ｇ、３０　、　Ｈ６，８５，
Ｎ１３．９Ｂ。

例８無水エタノール５０ｍ１中Ｎ−［Ｎ−（２−ピバロイル
アミノ−４−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒド
ロピリドＣ２，３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）
−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル
１．０ｇ及びｄ（＋）−カンファースルホン酸９００ｆ
ｆ１ｇの混合物を還流下で４時間加熱する。冷却後、混
合物は放置時に固体物を生じたが、これを濾取し、エタ
ノールから数回分別再結晶化し、最初のジアステレオマ
ーを得る。母液からの溶媒除去により他のジアステレオ
マーを得、９５％以上の光学純度が得られるまでエタノ
ールから数回再結晶化する。

例９Ａ、　　ＩＮ水酸化ナトリウム１０ｍ１中Ｎ−［Ｎ−（
２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシ−５゜６、７．
８−テトラヒドロピリド（２，３−ｄ〕ピリミジン−６
−イルメチル）−Ｎ−）リフルオロアセチル−４−アミ
ノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル０．４８ｇ
の溶液を２５℃で７２時間攪拌した。反応混合物に活性
炭を加え、懸濁液をセライトで濾過した。濾液を酢酸で
酸性化し、０℃で４時間貯蔵した。生成した固体物を集
め、水、エタノール及びエーテルで連続的に洗浄し、Ｎ
−（Ｎ−（２−アミノ−４−ヒドロキシ−５，６，７，
８−テトラヒドロピリド〔２，３−ｄ）ピリミジン−６
−イルメチル）−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタ
ミン酸０．２４１ｇ（収率７６％）を得た：　ｍｐ２６
３℃（分解）；ＩＨＮＭＲ（Ｍｅ２ｓｏ　ｄ、　）６１
．８−２．２５（ａ、４１１）、２．２７（ｔ。

２Ｈ，Ｊ−８，９５Ｈｚ）　、　２．７３−３．００　
（Ｔ１１．２Ｈ）　、　３．２８−３．３１　（ｍ　、
　ＬＨ）。

４．０５（ｓ、２Ｈ）、４．１４（ｓ、２Ｈ）、４．２
１（ｓ、２Ｈ）、４．３６−４．４１（＋ｎ、　ＩＨ）
　、　７．４１−７．４５（ｍ、　２Ｈ，ＡＡ’ＢＢ’
）、　７．８０−７．８２　（ＴＯ、２Ｈ。

ＡＡ’ＢＢ’）、８．６１（ｓ、ＩＨ）；　Ｃ２１Ｈ２
ＢＮ　６０６−　Ｈ２０としての分析計算値：　Ｃ５３
，９５、Ｎ５．８２゜Ｎ１３．９７　；実測値：　Ｃ５
４，０７、Ｎ５．４８．　Ｎ１７．７Ｂ。

Ｂ、　　同様に、Ｎ−［Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−
４−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロピリド
（２，３−ｄ］ピリミジン−６−イルメチル）−４−ア
ミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチルからＮ−
（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシ−５，
６，７，８−テトラヒドロピリド（２，３−ｄ）ピリミ
ジン−６−イルメチル）−４−アミノメチルベンゾイル
〕グルタミン酸が得られる。

Ｎ−［Ｎ−（２−アミノ−４−ヒドロキシ−５゜６、７
．８−テトラヒドロピリド［２，３−ｄ）ピリミジン−
６−イルメチル）−４−アミノメチルベンゾイル〕グル
タミン酸の全細胞ヒト白血病細胞系ＣＣＲＦ　−ＣＥ　
Ｍニオｌ：ｌ　Ｉ　Ｃ５ｏハ、０．０１０ｇｇ　／　ｍ
＋である。

同様の方法で、Ｎ−（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４
−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロピリド（
２，３−ｄ〕ピリミジン−６−イルメチル）−３−アミ
ノメチルベンゾイル〕グルタミン酸、Ｎ−（Ｎ−（２−
ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシ−５，６，７，８−
テトラヒドロピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−６−イ
ルメチル）−３−フルオロ−４−アミノメチルベンゾイ
ル〕グルタミン酸及びＮ−［Ｎ−（２−ピバロイルアミ
ノ−４−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロピ
リド（２，３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−２
−クロロ−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸
は、前記例と同様の操作に従い、各々Ｎ−（Ｎ−（２−
ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシピリド（２，３−ｄ
）ピリミジン−６−イルメチル）−３−アミノメチルベ
ンゾイル〕グルタミン酸ジエチル％Ｎ−（Ｎ−（２−ピ
バロイルアミノ−４−ヒドロキシピリド〔２゜３−ｄ〕
ピリミジン−６−イルメチル）−３−フルオロ−４−ア
ミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエチル及びＮ−
（Ｎ−（２−ピバロイルアミノ−４−ヒドロキシピリド
［２，３−ｄ）ピリミジン−６−イルメチル）−２−ク
ロロ−４−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸ジエ
チルから製造される。

出願人代理人　　佐　　藤　　−雄

Claims

【特許請求の範囲】１、下記式のグルタミン酸誘導体： ▲数式、化学式、表等があります▼ I Ａ又は ▲数式、化学式、表等があります▼ I Ｂ〔上記式中：Ｒ＾１は水素、炭素原子１〜６のアルキル又は炭素原子
１〜６のアルカノイルである；Ｒ＾２は水素又はカルボキシ保護基である；Ｒ＾３は水
素又はハロである；及びＲ＾４は水素又はアミノ保護基である〕からなる群より選択される化合物及びそれらの薬学上許
容される塩。２、Ｒ＾２及びＲ＾４の各々が水素である、請求項１に
記載の化合物。３、下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ I Ａ又は ▲数式、化学式、表等があります▼ I Ｂ〔上記式中：Ｒ＾１は水素、メチル、エチル、ホルミル又はアセチル
である；Ｒ＾３は水素、クロロ又はフルオロである〕学上許容さ
れる塩。４、Ｒ＾１及びＲ＾３の各々が水素である、請求項３に
記載の化合物及びその薬学上許容される塩。５、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−〔Ｎ−（２−アミノ−４−ヒドロ
キシ−５，６，７，８−テトラヒドロピリド〔２，３−
ｄ〕ピリミジン−６−イルメチル）−４−アミノメチル
ベンゾイル〕グルタミン酸である、請求項４に記載の化
合物。６、（Ｒ，Ｓ）−Ｎ−〔Ｎ−（２−アミノ−４−ヒドロ
キシ−５，６，７，８−テトラヒドロピリド〔２，３−
ｄ〕ピリミジン−６−イルメチル）−４−アミノメチル
ベンゾイル〕グルタミン酸である、請求項４に記載の化
合物。７、Ｒ＾１がホルミルであり、Ｒ＾３が水素である、請
求項３に記載の化合物及びその薬学上許容される塩。８、（Ｓ，Ｓ）−Ｎ−〔Ｎ−ホルミル−Ｎ−（２−アミ
ノ−４−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロピ
リド〔２，３−ｄ〕ピリミジン−６−イルメチル）−４
−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸である、請求
項７に記載の化合物。９、（Ｒ，Ｓ）−Ｎ−〔Ｎ−ホルミル−Ｎ−（２−アミ
ノ−４−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロピ
リド〔２，３−ｄ〕ピリミジン−６−イルメチル）−４
−アミノメチルベンゾイル〕グルタミン酸である、請求
項７に記載の化合物。１０、哺乳動物（ヒトを除く）において腫瘍増殖に対抗
するための方法であって、上記哺乳動物に単一又は多数回用量療法で請求項１に記
載の化合物の有効量を投与することを特徴とする方法。１１、哺乳動物における腫瘍増殖に対抗するための医薬
組成物であって、単一又は多数回用量療法による哺乳動物への投与におい
て上記増殖に対抗する上で有効な量の請求項１に記載の
化合物と薬学上許容される担体とを含んでなる医薬組成
物。