JPH0211597B2

JPH0211597B2 -

Info

Publication number: JPH0211597B2
Application number: JP15917482A
Authority: JP
Inventors: Tetsuo Shiba
Original assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1982-09-13
Filing date: 1982-09-13
Publication date: 1990-03-14
Also published as: JPS5948497A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は一般式（）で示される新規ジサツカライド誘導体に関する。
（上記式中、R₁COは低級〜中級直鎖状脂肪酸残
基を、R₂COはヒドロキシ基を有する低級〜中級
直鎖状脂肪酸残基を意味し、R₃、R₄は各々水素
原子又はリン酸基を意味する。）各種グラム陰性桿菌の細胞壁成分である内毒素
が生体の免疫機能促進活性等、様々な生物活性を
有することが知られているが、その化学構造と活
性との関係は明確にされていない。本発明者等はその活性単位であろうと考えられ
ているリボ多糖に注目し、その基礎的な骨格構造
に関する検討を試みる過程で、直鎖状脂肪酸及び
ヒドロキシで置換された直鎖状脂肪酸残基を有す
るジサツカライドの１位に又は１位と4′位にリン
酸基を導入した新規ジサツカライド誘導体を合成
し、このものがすぐれたマイトジエン活性を示す
ことを見出し、本発明を完成した。本発明によつて得られる化合物はマイトジエン
活性、すなわち、リンパ球を刺激して、これを幼
若化させる作用を有するため、リンパ系細胞の増
加を促し、免疫能を増強させうるものである。従
つて、本発明化合物は各種感染症の予防及び治療
剤、抗腫瘍剤等として免疫機能の低下に起因する
多くの疾病に用いることが有望なものである。本発明化合物のマイトジエン活性は、たとえば
単離されたマウスリンパ系培養細胞における〔
³H〕チミジンの取り込み増加によつて確認され
た。すなわちBALB／Ｃ nu／nuマウスの脾臓
を磨り潰し、リンパ球を集め１×10⁵〜１×10⁶
個／mlとして培養する。培養終了24時間前に〔
³H〕ラベルされたチミジンを培養液に加え、培
養終了後、細胞をグラスマイクロフアイバーペー
パーに集めて乾燥し、細胞に取り込まれた〔
³H〕チミジンの放射能を測定する。試料を添加
したテスト培養と対照培養におけるチミジンの取
り込みの比を求め刺激係数とする。（刺激係数＝
テスト培養における〔 ³H〕チミジンの取り込
み／対照培養における〔 ³H〕チミジンの取り込
み）。この刺激係数の大きさがマイトジエン活性
の尺度とみなされる。表１にその成績を示す。

【表】表１〜２に記した本発明化合物１、２は下記の
通りである。本発明化合物１：６−０−〔２−デオキシ−２−
（（Ｒ）−３−ヒドロキシテトラデカノイルアミ
ノ）−６−０−テトラデカノイル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシル〕−２−デオキシ−２−〔（Ｒ）−
３−ヒドロキシテトラデカノイルアミノ〕−３，
４−ジ−０−テトラデカノイル−２−Ｄ−グル
コピラノース−１−リン酸エステルナトリウム
塩本発明化合物２：６−０−〔２−デオキシ−２−
（（Ｒ）−３−ヒドロキシテトラデカノイルアミ
ノ）−６−０−テトラデカノイル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシル〕−２−デオキシ−２−〔（Ｒ）−
３−ヒドロキシテトラデカノイルアミノ〕−３，
４−ジ−０−テトラデカノイル−α−Ｄ−グル
コピラノース−１，4′−ジリン酸エステルナト
リウム塩本発明化合物は下記反応工程に従つて製するこ
とができる。（式中、AcはCH₃CO−を、BzはC₆H₅CO−を、
BzlはC₆H₅CH²−を、AllylはCH₂＝CH−CH₂−
を、RCOは保護された水酸基を有する低級〜中
級直鎖状脂肪酸残基を意味し、R₁COは前記に同
じ。）即ち、化合物（）を無水塩化メチレン、無水
炭酸カリウム存在下、トリエチルオキソニウムテ
トラフルオロボレートと反応し、次いでテトラヒ
ドロフランの存在下に室温において1N塩酸で処
理し、Ｎ−アセチルグループを遊離のアミノ基と
する。反応時間は数時間好ましくは１〜２時間が
適当である。次いで塩基の存在下ジシクロヘキシ
ルカルボジイミド（以下DCCと略）を用いて保
護された水酸基を有する低級〜中級直鎖状脂肪酸
でアシル化し、Ｎ−アシル体を得る。（第１工程）
得られたＮ−アシル体をアルコール性アンモニア
で処理すると０−アシル基が脱離したＮ−アシル
−０−遊離体が得られる。この反応における反応
条件としては約50℃で約10〜36時間加熱するのが
適当でる。（第２工程）次いでＮ−アシル−０−
遊離体を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ｐ−
トルエンスルホン酸の存在下に２，２−ジメトキ
シプロパンと室温で約２時間反応させると、4′，
6′−０−イソプロピリデン誘導体が得られる。
（第３工程）このものをピリジン溶液中で低級〜
中級直鎖状脂肪酸のハライドで処理すると遊離の
水酸基がアシル化された０，Ｎ−アシル−イソプ
ロピリデン体が得られる。この反応は室温、数時
間で進行する。（第４工程）前記化合物を90％酢酸中約90℃で数十分、好ま
しくは、約20分加熱して脱イソプロピリデン体と
し、次いでテトラヒドロフラン−ピリジン混液中
低級〜中級直鎖状脂肪酸のハライドで、約０℃数
時間、好ましくは２〜３時間処理するとＯ，Ｎ−
アシル体が得られる。（第５工程）かくして得られたＯ，Ｎ−アシル体をエタノー
ル−ベンゼン−水の混液中でトリストリフエニル
ホスフインロジウムクロリド、ジアザビシクロオ
クタンと共に90℃で４〜16時間処理することによ
つてアリル基を異性化し、次いでアセトン−水混
液中で塩化第二水銀−酸化第二水銀でアリル基を
切断すると化合物（）が得られる。この反応は
室温１〜1.5時間が適当である。（第６工程）化合
物（）を無水テトラヒドロフラン溶液とし、−
70℃で１〜1.5モル当量のｎ−ブチルリチウムを
含むヘキサン溶液を加え、続いて１〜1.5モル当
量のジベンジルホスホロクロリデートを加えて−
70℃で約５分、−60℃〜−50℃で５〜10分反応し、
次にメタノール、酢酸及びパラジウム黒を加えて
中圧（５〜10気圧好ましくは７気圧）で接触還元
を行ない常法処理後トリエチルアミン塩とし、シ
リカゲルクロマトにより精製し、次いでナトリウ
ム塩とすることにより本発明の目的化合物の一つ
であるモノ燐酸エステル体が得られる。又化合物
（）の無水テトラヒドロフラン溶液に−70℃で
２〜2.5モル当量のｎ−ブチルリチウムのヘキサ
ン溶液を加えて２分処理し、これに２〜2.5モル
当量のジベンジルホスホクロリデートをを加えて
−50℃、５〜10分反応した後モノ燐酸エステルを
得た方法と同様に処理してジ燐酸エステル体が得
られる。以下実施例により本発明を更に詳しく説明す
る。実施例１アリル６−０−（２−アセトアミド−４，６−
ジ−０−アセチル−３−０−ベンジル−２−デオ
キシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２−アセト
アミド−４−０−アセチル−３−０−ベンゾイル
−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド4.0
ｇを無水塩化メチレン60mlに溶解し、無水炭酸カ
リウム4.0ｇ、トリエチルオキソニウムテトラフ
ルオロボレート3.9ｇを加えて室温にて12時間撹
拌する。この混合物を水で３回洗浄し、有機層を
硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧で留
去し、残渣をテトラヒドロフラン60mlに溶解す
る。この溶液を０℃で1N塩酸10.2mlを加え、２
時間撹拌後溶媒を減圧留去して得られる残渣をテ
トラヒドロフラン−クロロホルム混液（混合比
５：１）120mlに溶解する。これに（Ｒ）−３−ベ
ンジルオキシテトラデカン酸4.4ｇ、ジシクロヘ
キシルカルボジイミド3.2ｇ、無水炭酸カリウム
4.0ｇ、トリエチルアミン1.4mlを加え、室温で２
日間撹拌したのち、不溶物を濾去し、溶媒を減圧
留去して得られる残分をメタノールから再交晶す
るとアリル６−Ｏ−〔４，６−ジ−０−アセチル
−３−０−ベンジル−２−（（Ｒ）−３−ベンジル
オキシテトラデカノイルアミノ）−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシル〕−４−０−アセチ
ル−３−０−ベンゾイル−２−（（Ｒ）−３−ベン
ジルオキシテトラデカノイルアミノ）−２−デオ
キシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合物）
3.3ｇが得られる。融点190〜192℃。〔α〕²² _D−4.76゜（C0.42、クロロ
ホルム）元素分析値 C₇₇H₁₀₈O₁₇N₂・1/2H₂Oとして計数値（％） C68.88、H8.18、N2.09 分析値（％） C68.81、H8.08、N2.11 化合物 500mgをエタノール50mlに溶かし、28％アン
モニア水50mlを加えて50℃で36時間撹拌する。
溶媒を減圧で留去して得られた残分をメタノー
ル−水から再沈澱してアリル６−０−〔３−０
−ベンジル−２−（（Ｒ）−３−ベンジルオキシ
テトラデカノイルアミノ）−２−デオキシ−β
−Ｄ−グルコピラノシル〕−２−（（Ｒ）−３−ベ
ンジルオキシテトラデカノイルアミノ）−２−
デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合物
）380mgを得る。融点210〜211℃。化合物 360mgを無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
30mlに溶解し、２，２−ジメトキシプロパン
2.5ml、ｐ−トルエンスルホン酸−水和物15mg
を加えて室温で２時間撹拌した後、氷冷して飽
和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、析出した
固体を濾取し、メタノールから再結晶してアリ
ル６−０−〔３−０−ベンジル−２−（（Ｒ）−３
−ベンジルオキシテトラデカノイルアミノ）−
２−デオキシ−４，６−０−イソプロピリデン
−β−Ｄ−グルコピラノシル〕−２−（（Ｒ）−３
−ベンジルオキシテトラデカノイルアミノ）−
２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（化
合物）250mgが得られる。融点172〜175℃。元素分析値 C₆₇H₁₀₂O₁₃N₂として計数値（％） C70.37、H8.99、N2.45 分析値（％） C70.23、H8.93、N2.44 化合物 1.78ｇをピリジン70mlに溶解し、無水硫酸カ
ルシウム2.0ｇ、塩化テトラデカノイル1.92ｇ
を加えて室温で３時間撹拌する。不溶物を濾去
したのち溶媒を減圧下に留去して得られる残渣
をアセトン−メタノールから再結晶してアリル
６−０−〔３−０−ベンジル−２−（（Ｒ）−３−
ベンジルオキシテトラデカノイルアミノ）−２
−デオキシ−４，６−０−イソプロピリデン−
β−Ｄ−グルコピラノシル〕−２−（（Ｒ）−３−
ベンジルオキシテトラデカノイルアミノ）−２
−デオキシ−３，４−ジ−０−テトラデカノイ
ル−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合物）
1.42ｇを得る。融点155〜156℃。〔α〕²² _D−7.84゜（C0.51、クロ
ロホルム）元素分析値 C₉₅H₁₅₄O₁₅N₂として計数値（％） C72.94、H9.92、N1.79 分析値（％） C72.88、H9.90、N1.86 化合物 1.42ｇを90％酢酸200mlと共に90℃で20分間
加熱する。放冷後減圧下に溶媒を留去し、残渣
をメタノールから再結晶して脱イソプロピリデ
ン体を得る。これをテトラヒドロフラン−ピリ
ジン混液（混合比１：１）40mlに溶かし、塩化
テトラデカノイル330mgを加えて０℃で２時間
撹拌する。続いてこれにメタノールを加えて室
温で30分間撹拌したのち、溶媒を減圧留去し、
残渣をメタノールから再結晶してアリル６−０
−〔３−０−ベンジル−２−（（Ｒ）−３−ベンジ
ルオキシテトラデカノイルアミノ）−２−デオ
キシ−６−０−テトラデカノイル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシル〕−２−（（Ｒ）−３−ベンジルオ
キシテトラデカノイルアミノ）−２−デオキシ
−３，４−ジ−０−テトラデカノイル−β−Ｄ
−グルコピラノシド（化合物）1.45ｇを得
る。融点164〜165℃。〔α〕²² _D−25.1゜（C0.89、クロ
ロホルム）元素分析値 C₁₀₆H₁₇₆O₁₆N₂として計数値（％） C73.40、H10.23、N1.61 分析値（％） C73.25、H10.15、N1.60 化合物 700mgをトリストリフエニルホスフインロジ
ウムクロリド150mg、ジアザビシクロオクタン
250mgと共に、エタノール−ベンゼン−水混液
（混合比７：３：１）60ml中90℃で４時間撹拌
する。減圧下に溶媒を留去し、残渣をメタノー
ルから再沈澱させて精製したのち、これをアセ
トン−水混液（混合比10：１）200mlに溶解し、
塩化第二水銀1.5ｇ、酸化第二水銀1.5ｇと共に
１時間撹拌する。不溶物を濾去したのち溶媒を
減圧下に留去し、残分をクロロホルムに溶解
後、ヨウ化カリウム水溶液、次いで水で洗い、
硫酸マグネシウムで乾燥する。溶媒を減圧で留
去したのち、シリカゲルカラムクロマトグラフ
イー（溶媒はクロロホルム−アセトン９：１混
液）で精製しメタノールから再沈澱して６−０
−〔３−０−ベンジル−２−（（Ｒ）−３−ベンジ
ルオキシテトラデカノイルアミノ）−２−デオ
キシ−６−０−テトラデカノイル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシル〕−２−（（Ｒ）−３−ベンジルオ
キシテトラデカノイルアミノ）−２−デオキシ
−３，４−ジ−０−テトラデカノイル−Ｄ−グ
ルコース（化合物）480mgを得る。融点145℃〜162℃。〔α〕²² _D−4.76゜（C0.42、ク
ロロホルム）元素分析値 C₁₀₃H₁₇₂O₁₆N₂・1/2H₂Oとして計数値（％） C72.62、H10.24、N1.64 分析値（％） C72.68、H10.18、N1.71 化合物 370mgを無水テトラヒドロフラン20mlに溶解
し、−70℃でｎ−ブチルリチウム19.2mgを含む
ヘキサン溶液、続いてジベンジルホスホロクロ
リデート104mgを加える。−70℃で５分間、−50
℃で５分間撹拌後、メタノール５mlと酢酸0.5
mlを加える。この混合物にパラジウム黒を加え
７気圧の水素気流中接触還元する。触媒を濾去
後トリエチルアミンを加えた後溶媒を減圧留去
し、残分をシリカゲルカラムクロマトグラフイ
ー（溶媒はクロロホルム−メタノール−水
40：10：１混液）で精製し、ナトリウム塩に変
換した後メタノールから再沈澱して６−０−
〔２−デオキシ−２−（（Ｒ）−３−ヒドロキシテ
トラデカノイルアミノ）−６−０−テトラデカ
ノイル−β−Ｄ−グルコピラノシル〕−２−デ
オキシ−２−（（Ｒ）−３−ヒドロキシテトラデ
カノイルアミノ）−３，４−ジ−０−テトラデ
カノイル−α−Ｄ−グルコピラノース−１−リ
ン酸エステルナトリウム220mgを得る。融点177〜181℃。〔α〕²⁰ _D＋13.5（C0.48、クロ
ロホルム−メタノール３：１）元素分析値 C₈₂H₁₅₃O₁₉N₂PNa₂・5H₂Oとし
て計数値 C60.12、Ｈ10.03、N1.71、P1.90 分析値 C60.35、Ｈ 9.79、N1.79、P1.63 実施例２化合物 170mgを無水テトラヒドロフラン15mlに溶解
し、−70℃に冷却してｎ−ブチルリチウム15.4
mgを含むヘキサン溶液を加えこの温度で２分間
撹拌する。これにジベンジルホスホロクロリデ
ート71mgを加えて−50℃で５分間撹拌したのち
メタノール５mlと酢酸0.5mlを加える。この混
合物にパラジウム黒を加え７気圧の水素気流中
接触還元する。触媒を濾去後トリエチルアミン
を加えた後、溶媒を減圧留去し、残分をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフイー（溶媒はクロロ
ホルム−メタノール−水 40：10：１混液）
で精製し、ナトリウム塩に変換したのちメタノ
ールから再沈澱して６−０−〔２−デオキシ−
２−（（Ｒ）−３−ヒドロキシテトラデカノイル
アミノ）−６−０−テトラデカノイル−β−Ｄ
−グルコピラノシル〕−２−デオキシ−２−
（（Ｒ）−３−ヒドロキシテトラデカノイルアミ
ノ）−３，４−ジ−０−テトラデカノイル−α
−Ｄ−グルコピラノース−１，4′−ジリン酸エ
ステルナトリウム（化合物２）を得る。融点218〜222℃（分解）。〔α〕¹⁵ _D＋12.5゜
（C0.51、クロロホルム−メタノール−水30：
10：１）元素分析値 C₈₂H₁₆₀O₂₆N₂P₂Na₄・4H₂Oとし
て計数値（％） C56.47、H9.25、N1.61 分析値（％） C56.18、H9.21、N2.03

Claims

【特許請求の範囲】１一般式で示されるジサツカライド誘導体（上記式中、R₁COは低級〜中級直鎖状脂肪酸残
基を、R₂COはヒドロキシ基を有する低級〜中級
直鎖状脂肪酸残基を、R₃、R₄は各々水素原子又
はリン酸基を意味する。）