JPH0213398A - 体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検出系 - Google Patents
体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検出系Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
座業上の利用分桁
本発明は、体液のエステル分解作用及び／又はタンパク
質分解作用を有する内容物を比色定量する几めの、相体
結合の多成分検出系に関する。
質分解作用を有する内容物を比色定量する几めの、相体
結合の多成分検出系に関する。
従来の技術
体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
を有する内容物の検出は極めて１要になっている。特に
腎及び泌尿生殖器路の疾患の診断にとって、尿中の白血
球に内在するエステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用に基づいて白血球を検出することはム要である。
を有する内容物の検出は極めて１要になっている。特に
腎及び泌尿生殖器路の疾患の診断にとって、尿中の白血
球に内在するエステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用に基づいて白血球を検出することはム要である。
このためには例えば試験片の形の担体結合検出系が特に
臀利であることが明らかになつ九。それというのもこの
検出系を試験すべら液体試料中に短時間浸漬すればよく
、引続いて試験片倉試料から取り出しｔ後で試料１μ！
当シの白血球数の測定が例えば呈色に基づいて短時間内
に可能でらる刀１らであ′る。この＝うにして、体液中
のその工うな内容物を検出する九めの清潔で簡単刀１つ
迅速な実施が、この九めに試料を用いて煩雑で、時間及
び経費のか刀）る操作おるいは試料のその工うな処理を
行なう必要もなく可能でおる。
臀利であることが明らかになつ九。それというのもこの
検出系を試験すべら液体試料中に短時間浸漬すればよく
、引続いて試験片倉試料から取り出しｔ後で試料１μ！
当シの白血球数の測定が例えば呈色に基づいて短時間内
に可能でらる刀１らであ′る。この＝うにして、体液中
のその工うな内容物を検出する九めの清潔で簡単刀１つ
迅速な実施が、この九めに試料を用いて煩雑で、時間及
び経費のか刀）る操作おるいは試料のその工うな処理を
行なう必要もなく可能でおる。
例えば尿中の白血球の工うな体液中のエステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用の内容物を比色定量する
ための有利な検出系としては、技術水準からとυわけ所
謂多成分系が公知である。これは、数種の化学物質ニジ
成る工りな試薬系で、化学物質のうち少なくとも１種は
体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
の内容物にニジ変化して、反応生成物か検出系の１つの
成分と又は数種の他の成分との遂次反応において反応し
て着色物質が生成し、これを比色定量することができる
。形成され九着色物質の１が試料中のエステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物の量の尺
度でおる。
及び／又はタンパク質分解作用の内容物を比色定量する
ための有利な検出系としては、技術水準からとυわけ所
謂多成分系が公知である。これは、数種の化学物質ニジ
成る工りな試薬系で、化学物質のうち少なくとも１種は
体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
の内容物にニジ変化して、反応生成物か検出系の１つの
成分と又は数種の他の成分との遂次反応において反応し
て着色物質が生成し、これを比色定量することができる
。形成され九着色物質の１が試料中のエステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物の量の尺
度でおる。
例えば、このような体液中のエステル分解作用及び／又
はタンパク質分解作用’ｋｌｉｒする内容物の検出には
、初めにエステルが検出すべき内容物にニジ分解されか
つ生成したヒドロキシル基が他の反応性物置にＬυ反応
して色素？形成する２成分系が特に好適である。例えは
、この原理による相体結合の多成分系はヨーロッパ特許
公開第０ ０３９ ８８０号明細書から公知である。
はタンパク質分解作用’ｋｌｉｒする内容物の検出には
、初めにエステルが検出すべき内容物にニジ分解されか
つ生成したヒドロキシル基が他の反応性物置にＬυ反応
して色素？形成する２成分系が特に好適である。例えは
、この原理による相体結合の多成分系はヨーロッパ特許
公開第０ ０３９ ８８０号明細書から公知である。
この特許公開明細書は、倒えは尿中の白血球のような体
液中のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
を有する内容物を測定する九めの、担体結合の検出系に
関し、この系では前記の内容物に＝夛分解可能なエステ
ルと、エステル分解にＬり生成したヒドロキシ化合物の
ための反応成分としてのジアゾニウム塩とが一緒に同一
の試薬担体上に施されている。検出系の全成分が同一の
試薬担体上に一緒に存在することは、エステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用の内容物との反ｆｆ１Ｋ
ニジ生成し次物質ｒ史尺反応さセで呈色最終生成物に変
換させることができる点を明らかに保証するので最適で
ある＝うに思われる。
液中のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用
を有する内容物を測定する九めの、担体結合の検出系に
関し、この系では前記の内容物に＝夛分解可能なエステ
ルと、エステル分解にＬり生成したヒドロキシ化合物の
ための反応成分としてのジアゾニウム塩とが一緒に同一
の試薬担体上に施されている。検出系の全成分が同一の
試薬担体上に一緒に存在することは、エステル分解作用
及び／又はタンパク質分解作用の内容物との反ｆｆ１Ｋ
ニジ生成し次物質ｒ史尺反応さセで呈色最終生成物に変
換させることができる点を明らかに保証するので最適で
ある＝うに思われる。
検出反応の迅速かつ完全な進行は、敏感な試験の九めの
ペースである。前記の検出系の場合、尿中の白血球の検
出限界は約２分後の数値の読みホシの際に尿１μ７当シ
白血球約１，５〜２５個である。しかしながら区名にと
っては更に敏感な検出剤上開示することが望ましい。
ペースである。前記の検出系の場合、尿中の白血球の検
出限界は約２分後の数値の読みホシの際に尿１μ７当シ
白血球約１，５〜２５個である。しかしながら区名にと
っては更に敏感な検出剤上開示することが望ましい。
発明が解決しようとする課題
それ故、本発明な、公知の担体結合の検出系の感Ｍｋ上
姻り、検出系によシ表示される数値を読み増るまでの待
ち時間が長いという欠点を伴なわずに、体液のエステル
分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物
を比色定量するための、相体結合の多成分系検出系を数
字的診断の九めに開発するという課題に基づいている。
姻り、検出系によシ表示される数値を読み増るまでの待
ち時間が長いという欠点を伴なわずに、体液のエステル
分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物
を比色定量するための、相体結合の多成分系検出系を数
字的診断の九めに開発するという課題に基づいている。
課題を解決する九めの手段
従って、検出系の成分が、相互間で液体交換を可能にす
る別々の試梁相体中に存在すること１％徴とする、体液
のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用ｋＷ
する内容物を比色定量する九めの、冒頭？こ定義した多
成分検出系が見出され九〇 その際、体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質
分解作用を有する内容物を比色定量する九めの多成分検
出系としては、技術水準からこれについて公知の試薬系
が該尚する。エステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用によシ分解可能なエステルとジアゾニウム塩トに
合可する工うな多成分検出系が特に有利でおることが明
らかになつ九。そのエラな系はとシわけ尿中の白血球を
測定するのに好適であることが明らかになった。更にｔ
７２１．、鉄系と水浴液もしくは体液、例えば全血液、
血清、髄液、パンフレアーゼ分泌物又は水性の便浸出物
中のエラスターゼ、キモトリプシン又はトリプシンのよ
うなタンパク質分解ｍ：ＩＡｔ検出するのに利用するこ
とかできる。
る別々の試梁相体中に存在すること１％徴とする、体液
のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用ｋＷ
する内容物を比色定量する九めの、冒頭？こ定義した多
成分検出系が見出され九〇 その際、体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質
分解作用を有する内容物を比色定量する九めの多成分検
出系としては、技術水準からこれについて公知の試薬系
が該尚する。エステル分解作用及び／又はタンパク質分
解作用によシ分解可能なエステルとジアゾニウム塩トに
合可する工うな多成分検出系が特に有利でおることが明
らかになつ九。そのエラな系はとシわけ尿中の白血球を
測定するのに好適であることが明らかになった。更にｔ
７２１．、鉄系と水浴液もしくは体液、例えば全血液、
血清、髄液、パンフレアーゼ分泌物又は水性の便浸出物
中のエラスターゼ、キモトリプシン又はトリプシンのよ
うなタンパク質分解ｍ：ＩＡｔ検出するのに利用するこ
とかできる。
ヨーロッパ特許公開＄０ ０３９ ８８０号明細書に挙
げられている試薬糸を本発明によ）％＃Ｃ有利に使用す
ることができる。このために、該文献に記載されている
種類の、エステル分服作用及び／又はタンパク質分解作
用にＪ：υ分解可能なエステル少なくとも１１及びジア
ゾニウム場少なくとも１柚を別々の試薬相体上に施す。
げられている試薬糸を本発明によ）％＃Ｃ有利に使用す
ることができる。このために、該文献に記載されている
種類の、エステル分服作用及び／又はタンパク質分解作
用にＪ：υ分解可能なエステル少なくとも１１及びジア
ゾニウム場少なくとも１柚を別々の試薬相体上に施す。
検出反応匝直接化学的に関与する検出系の成分、例えば
エステル及びジアゾニウム塩と共に、検出系は他の助剤
、例えば緩衝物質、湿潤剤、安定化剤及び／又は賦活剤
を含有していてもよい。このような助剤は、例えばヨー
ロッパ特許公開第０ ０３９ ８８０号明細書からも公
知である。しかしながら助剤は本発明による検出系の成
分を形成するものではない。
エステル及びジアゾニウム塩と共に、検出系は他の助剤
、例えば緩衝物質、湿潤剤、安定化剤及び／又は賦活剤
を含有していてもよい。このような助剤は、例えばヨー
ロッパ特許公開第０ ０３９ ８８０号明細書からも公
知である。しかしながら助剤は本発明による検出系の成
分を形成するものではない。
試薬担体としては、一般にこの九めに使用することので
きるすべての材料、例えば吸収性か又は膨潤性の、多孔
性か又は非多孔性の材料あるいは被験液体とのａ＋触の
際にその中に溶けるような材料ケ使用することができる
。例えばセルロース、誰厭、合成繊維フリース、ガラス
繊維フリース、ポリビニルエステルフィルム、ポリアミ
ドフィルム又は例えばキサンタンプム製のフィルムが挙
げられる。
きるすべての材料、例えば吸収性か又は膨潤性の、多孔
性か又は非多孔性の材料あるいは被験液体とのａ＋触の
際にその中に溶けるような材料ケ使用することができる
。例えばセルロース、誰厭、合成繊維フリース、ガラス
繊維フリース、ポリビニルエステルフィルム、ポリアミ
ドフィルム又は例えばキサンタンプム製のフィルムが挙
げられる。
本発明に＝る担体結合の積出剤は検出系の成分を異なる
試薬担体中に包含する。検出反応にｒＩ！接化学的に関
与する試薬は、被験液体との接触後に、初めて、少なく
とも部分的にその液体中に溶解することにＬり相互に混
合する。その際に、別々の試薬担体は区分されているが
、担体間で液体交換が可能である＝うに配置されている
。本発明ｖＣよる相体結合の検出剤の優れた実施形では
、例えばエステル及びノアゾニウム塩のような検出系の
成分をそれぞれき有する試薬相体か上下に重ねられ、堆
積体として配置されている。この試粟指体堆積体ｙｋニ
ジ増り扱い易くするために、この堆積体は例えば剛性シ
ートのようなプラスチック相体上に配置されていてよい
。プラスチック相体上への堆積体の固定は、例えはネッ
ト掛け、側部接着又は試薬相体をプラスチック相体上に
接清さセかつ他の試薬相体を先行の相体上に点接着する
ことに、ｃ！７行なうことができる。被験液体上良好に
吸収さセるためには、そのＬうな試薬担体堆積体の王国
例えば空フリース？！−訟けてもよい。
試薬担体中に包含する。検出反応にｒＩ！接化学的に関
与する試薬は、被験液体との接触後に、初めて、少なく
とも部分的にその液体中に溶解することにＬり相互に混
合する。その際に、別々の試薬担体は区分されているが
、担体間で液体交換が可能である＝うに配置されている
。本発明ｖＣよる相体結合の検出剤の優れた実施形では
、例えばエステル及びノアゾニウム塩のような検出系の
成分をそれぞれき有する試薬相体か上下に重ねられ、堆
積体として配置されている。この試粟指体堆積体ｙｋニ
ジ増り扱い易くするために、この堆積体は例えば剛性シ
ートのようなプラスチック相体上に配置されていてよい
。プラスチック相体上への堆積体の固定は、例えはネッ
ト掛け、側部接着又は試薬相体をプラスチック相体上に
接清さセかつ他の試薬相体を先行の相体上に点接着する
ことに、ｃ！７行なうことができる。被験液体上良好に
吸収さセるためには、そのＬうな試薬担体堆積体の王国
例えば空フリース？！−訟けてもよい。
直接プラスチック相体上に設ける試薬担体の材料として
は、ポリエステルフィルム又はポリアミドフィルムの＝
うなプラスチックフィルム６るいはセルロースフリース
の１うな吸収性材料が特に好適である。その上に設ける
試薬相体には、例えは織物、半透明の多孔性劇料、透明
のフィルムある鱒は被験液体で溶ける材料が特に有利で
ある。被験液体との接触、例えば七リークな相体結合の
検出剤中への浸漬に！Ｄ又は被＃液体ｔに士量投与する
ことにエフ試薬担体中に包含されて釣る検出系成分が少
なくとも一部溶解し、全体的には清心過程で混合し、つ
い艮はエステル分解作用人び／又はタンパク負分解作用
を存する内容物の４仕では検出反応が開始する。
は、ポリエステルフィルム又はポリアミドフィルムの＝
うなプラスチックフィルム６るいはセルロースフリース
の１うな吸収性材料が特に好適である。その上に設ける
試薬相体には、例えは織物、半透明の多孔性劇料、透明
のフィルムある鱒は被験液体で溶ける材料が特に有利で
ある。被験液体との接触、例えば七リークな相体結合の
検出剤中への浸漬に！Ｄ又は被＃液体ｔに士量投与する
ことにエフ試薬担体中に包含されて釣る検出系成分が少
なくとも一部溶解し、全体的には清心過程で混合し、つ
い艮はエステル分解作用人び／又はタンパク負分解作用
を存する内容物の４仕では検出反応が開始する。
本発明による担体結合の検出剤は従来分節の剤艮比べて
倍以上の感度を示し馬具的でめった。
倍以上の感度を示し馬具的でめった。
２分間の待ち時間で試料１μ！当９５個の白皿球を比色
定食することができる。試料１μ！当り白血球１０個以
上の数だと担体結合の検出系で湿潤して１分後艮は既に
読み取りすることができる。
定食することができる。試料１μ！当り白血球１０個以
上の数だと担体結合の検出系で湿潤して１分後艮は既に
読み取りすることができる。
実施例
次疫本発明を実施例にエフ詳説するが、これに限定され
るものではない。
るものではない。
例１
尿中白血球を検出する九めの試験感度
Ａ）エステル及びノアゾニウム塩を１回で含浸させた技
術水準による相体結合の検出糸（第１図）： ペーパー７リース２３ ｓ Ｌ （８ｃｈ’１ｅｉｃｈ
ｅｒ ＆８ｃｈｉｉ１１社、西ドイツ国、Ｄａ８ｓｅｌ
在）を久の工うに助剤及び検出系の成分で含浸した：ａ
）水１１中に磯酸６５ｇ及び水酸化す？ ＩＪウム２１
９を含有し°刀葛つ１Ｎ塩酸で−８，０に肖節し友含浸
浴液で前含浸した。引続いて、含浸し九フリースｋｉｔ
燥さセた。
術水準による相体結合の検出糸（第１図）： ペーパー７リース２３ ｓ Ｌ （８ｃｈ’１ｅｉｃｈ
ｅｒ ＆８ｃｈｉｉ１１社、西ドイツ国、Ｄａ８ｓｅｌ
在）を久の工うに助剤及び検出系の成分で含浸した：ａ
）水１１中に磯酸６５ｇ及び水酸化す？ ＩＪウム２１
９を含有し°刀葛つ１Ｎ塩酸で−８，０に肖節し友含浸
浴液で前含浸した。引続いて、含浸し九フリースｋｉｔ
燥さセた。
））ａ）にニジ製造した稜衝ｇ、宮浸７リースｔエタノ
ール１１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ）−
ペンゼンーゾアゾニウムーナトラクロロチンケート０．
３５ Ｆ、３−（Ｎ−１ルエンー４′−スルホニル−Ｌ
−７ラニルオキシンーインドール０．７８．９ 、
リン酸トリモルホリド８１．３＆及びデカノール２１．
７ｍｚを官有する溶液で主要含浸を行ない、引続いて乾
燥さセた。
ール１１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ）−
ペンゼンーゾアゾニウムーナトラクロロチンケート０．
３５ Ｆ、３−（Ｎ−１ルエンー４′−スルホニル−Ｌ
−７ラニルオキシンーインドール０．７８．９ 、
リン酸トリモルホリド８１．３＆及びデカノール２１．
７ｍｚを官有する溶液で主要含浸を行ない、引続いて乾
燥さセた。
この工うに含浸さセたフリース’ｆｇ６Ｘ ６１１１の
正方形に切断し、このＬうに製造し７２．試薬相体１【
長さ１２．６ｍ、幅６ｍ及び厚さ１鵡のポリスチレン帯
材３上に糸の太さ６０μｍのナイロンネット２ＮＹ７５
ＨＯ（Ｚｉｉｒｉｃｈｅｒ Ｂｅｕｔｅｌｆａｂｒｉｋ
ＡＧ、スイス匡１、チューリッヒ在ンにニジ固定し九。
正方形に切断し、このＬうに製造し７２．試薬相体１【
長さ１２．６ｍ、幅６ｍ及び厚さ１鵡のポリスチレン帯
材３上に糸の太さ６０μｍのナイロンネット２ＮＹ７５
ＨＯ（Ｚｉｉｒｉｃｈｅｒ Ｂｅｕｔｅｌｆａｂｒｉｋ
ＡＧ、スイス匡１、チューリッヒ在ンにニジ固定し九。
この丸めにこのナイロンネットｔ−ｍ時に約１７５℃で
プラスチック帯材と部分的艮俗着した。
プラスチック帯材と部分的艮俗着した。
Ｂ）エステル及びノアゾニウム塩を別々に含浸し九担体
結合の検出系（第１図） ペーパーフリース２３８ Ｌ （８ｏｈｌｅｉｃｈｅｒ
＆５ｃｈｉｉ１１社、西ドイツ国、Ｄａｓａｅｌ在）
ヲ次のＬうに検出系の助剤及び成分で含浸した：ａ）水
１ノ中に硼酸６５ｇ及び水酸化ナトリウム２１．！ｉｉ
’？含有しかつ１Ｎ墳酸でｐ）１８．０に調節し九含浸
溶液を前含浸した。引続いて、この含浸７リース金乾燥
させた。
結合の検出系（第１図） ペーパーフリース２３８ Ｌ （８ｏｈｌｅｉｃｈｅｒ
＆５ｃｈｉｉ１１社、西ドイツ国、Ｄａｓａｅｌ在）
ヲ次のＬうに検出系の助剤及び成分で含浸した：ａ）水
１ノ中に硼酸６５ｇ及び水酸化ナトリウム２１．！ｉｉ
’？含有しかつ１Ｎ墳酸でｐ）１８．０に調節し九含浸
溶液を前含浸した。引続いて、この含浸７リース金乾燥
させた。
ｂ） ａ）にニジ製造し７？、緩衝剤含浸７リースを、
エタノール１１中に６−（Ｎ−トルエン−４′−スルホ
ニル−Ｌ−アラニルオキシ）−インドール０．７８１１
． リン酸トリモルホリド８１．３．Ｆ及びデカノー
ル２１．７ｄｋ含有する溶液で含浸し、引続いて乾燥さ
セた。
エタノール１１中に６−（Ｎ−トルエン−４′−スルホ
ニル−Ｌ−アラニルオキシ）−インドール０．７８１１
． リン酸トリモルホリド８１．３．Ｆ及びデカノー
ル２１．７ｄｋ含有する溶液で含浸し、引続いて乾燥さ
セた。
Ｃ） ａ）及びｂ）にニジ含浸したフリースｔ１水１１
中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ〕−ペンゼン
ーンアゾニウムーテトラクロロチンケ−） ０．３７９
及び酒石酸０．２２９七官有する溶液で含浸し、引続い
て乾燥さセた。
中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モルホリノ〕−ペンゼン
ーンアゾニウムーテトラクロロチンケ−） ０．３７９
及び酒石酸０．２２９七官有する溶液で含浸し、引続い
て乾燥さセた。
コノ工うに含浸したペーパーフリースに使ってＡ）と同
様に第１図による相体結合の検出糸上製造し九〇 Ｃ）本発明による検出系（第２囚）： ■）ペーパーフリース２３８Ｘｒ （８ｃｈ１ｏｉｃｈ
ｅｒ＆ ！９ｏｈｉｉ１１社、西ｒイッ国、Ｄａａｓｅ
ｌ在）ｌ−ｉ７のように含浸しｆｃ： ａ）水１１中に硼酸６５９及び水酸化ナトリウム２１ｇ
を含有しかつ１Ｎ塩酸でｐ）ｉ８．０に調節し几含浸溶
液で前含浸した。引続いて、含浸７リースを乾燥さセｔ
０ ｂ） ａ）によυ製造した緩衝剤含浸７リースの主要含
浸を、エタノールｌｌ中に３−（Ｎ−トルエン−４１−
スルホニル−Ｌ−アラニルオキシ）−インドール０．７
８．５’、 リン酸トリモルホリド８１．３ｇ及びデ
カノール２１．７ｄ’に官有する溶液で行ない、引続い
て乾燥さセた。
様に第１図による相体結合の検出糸上製造し九〇 Ｃ）本発明による検出系（第２囚）： ■）ペーパーフリース２３８Ｘｒ （８ｃｈ１ｏｉｃｈ
ｅｒ＆ ！９ｏｈｉｉ１１社、西ｒイッ国、Ｄａａｓｅ
ｌ在）ｌ−ｉ７のように含浸しｆｃ： ａ）水１１中に硼酸６５９及び水酸化ナトリウム２１ｇ
を含有しかつ１Ｎ塩酸でｐ）ｉ８．０に調節し几含浸溶
液で前含浸した。引続いて、含浸７リースを乾燥さセｔ
０ ｂ） ａ）によυ製造した緩衝剤含浸７リースの主要含
浸を、エタノールｌｌ中に３−（Ｎ−トルエン−４１−
スルホニル−Ｌ−アラニルオキシ）−インドール０．７
８．５’、 リン酸トリモルホリド８１．３ｇ及びデ
カノール２１．７ｄ’に官有する溶液で行ない、引続い
て乾燥さセた。
ｍ）ナイａ ｙ ＠ｌ、物ＮＹ２０ＨＣ（７ｉ（７，＋
太す２０μｍ ） （Ｚｕｒｉｃｈｅｒ Ｂｅｕｔｅｌ
ｔｕｃｈｆａｂｒｉｋ ＡＧ社、スイスキＪ、チニーリ
ッヒ在）を１水１１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モル
ホリノ）−ベンゼンーンアデニウムーテトラクロロチン
ケート５．７８ｇ及び酒石１！ｇ１２．２５１１’に含
有する溶液で含浸し、引続いて乾燥さセた。
太す２０μｍ ） （Ｚｕｒｉｃｈｅｒ Ｂｅｕｔｅｌ
ｔｕｃｈｆａｂｒｉｋ ＡＧ社、スイスキＪ、チニーリ
ッヒ在）を１水１１中に２−メトキシ−４−（Ｎ−モル
ホリノ）−ベンゼンーンアデニウムーテトラクロロチン
ケート５．７８ｇ及び酒石１！ｇ１２．２５１１’に含
有する溶液で含浸し、引続いて乾燥さセた。
■）からの含浸ペーパー７リースに６ Ｘ ６ｍの正方
形に切断しかつ試薬相体１とし７ｊ＋＞ Ｕ）で製造し
九ナイロン織物も同じ大きさの正方形に切断しかつ試薬
相体４とした。試薬担体１及び４ｔ−堆積体として、ナ
イロンネット２ ＮＹ７５ＨＯ（糸の太さ６０μｍ ）
（Ｚｉｉｒｉｏｈｅｒ Ｂｅｕｔａｌ−ｔｕａｈｆａ
ｂｒｉｋ社、スイス国、チューリッヒａ）を用いて長さ
１２．６ｃＩＩ＆、幅６鵬及び厚さ１ｗＭのポリスチレ
ン帯材３上に固定した。ナイロンネットはプラスチック
帯材上で熱時疋約１７５℃で部分浴着さセ九〇 Ｄ）白血球を有沼液は、白血球を含まない尿に血液から
単離した白血球を児えることに工す製造した。検出系の
試験の九めに次の濃度を適用し友：尿１μｊ当り白血球
０．５，１０．２０及び４０個。
形に切断しかつ試薬相体１とし７ｊ＋＞ Ｕ）で製造し
九ナイロン織物も同じ大きさの正方形に切断しかつ試薬
相体４とした。試薬担体１及び４ｔ−堆積体として、ナ
イロンネット２ ＮＹ７５ＨＯ（糸の太さ６０μｍ ）
（Ｚｉｉｒｉｏｈｅｒ Ｂｅｕｔａｌ−ｔｕａｈｆａ
ｂｒｉｋ社、スイス国、チューリッヒａ）を用いて長さ
１２．６ｃＩＩ＆、幅６鵬及び厚さ１ｗＭのポリスチレ
ン帯材３上に固定した。ナイロンネットはプラスチック
帯材上で熱時疋約１７５℃で部分浴着さセ九〇 Ｄ）白血球を有沼液は、白血球を含まない尿に血液から
単離した白血球を児えることに工す製造した。検出系の
試験の九めに次の濃度を適用し友：尿１μｊ当り白血球
０．５，１０．２０及び４０個。
Ａ） 、 Ｂ） 及びＣ）で製造した試験片を白血球を
含まない尿試料と白血球を含有する試料中に浸漬しかつ
２分後に色素形成上視覚的に読み取るか又はレミッショ
ン側元法に工す測定した。
含まない尿試料と白血球を含有する試料中に浸漬しかつ
２分後に色素形成上視覚的に読み取るか又はレミッショ
ン側元法に工す測定した。
Ａ） 、Ｂ）及びＣ） Ｋ、記載の検出系にＬす欠の結
果が得られた。
果が得られた。
検出系人）及びＢ） Ｃ枝術水ｍ）では試料と接触して
〃）ら２分後では白血球の検ｔ１１）限界は試料１μｊ
当フ白血球数約２０−ｔｉｂｆｆ、不発明による検出系
Ｃ）では読み試料１μｊ当υ白血球数５である。
〃）ら２分後では白血球の検ｔ１１）限界は試料１μｊ
当フ白血球数約２０−ｔｉｂｆｆ、不発明による検出系
Ｃ）では読み試料１μｊ当υ白血球数５である。
検出系０）１に適用すると、１分後國は既艮試料１μｊ
当シ白血球ｔ！１．５という濃度を視覚的にあるいはレ
ミッション？ａＩＪ定に工υ検出することかで龜ｈｏ検
出系Ａ）及びＢ）の場合、この短い時間では検出限界は
白血球数２０７μＥエクも高い。
当シ白血球ｔ！１．５という濃度を視覚的にあるいはレ
ミッション？ａＩＪ定に工υ検出することかで龜ｈｏ検
出系Ａ）及びＢ）の場合、この短い時間では検出限界は
白血球数２０７μＥエクも高い。
第１図は従来技術の担体結合の検出系の略示図であ夛、
第２図は不発明に、よる検出系の酩示図である。 １．４・・・試薬ｍ体、２・・・ナイロンネット、３・
・・ポリスチレン帯材。
第２図は不発明に、よる検出系の酩示図である。 １．４・・・試薬ｍ体、２・・・ナイロンネット、３・
・・ポリスチレン帯材。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、検出系の成分が、相互間で液体交換を可能にする別
々の試薬担体中に存在することを特徴とする、体液のエ
ステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する
内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検
出系。 ２、成分としてエステル分解作用及び／又はタンパク質
分解作用により分解可能なエステル少なくとも１種及び
ジアゾニウム塩少なくとも１種が別々の試薬担体上に施
されている請求項１記載の検出系。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3813503A DE3813503A1 (de) | 1988-04-22 | 1988-04-22 | Traegergebundenes mehrkomponentiges nachweissystem zur kolorimetrischen bestimmung esterolytisch oder/und proteolytisch aktiver inhaltsstoffe von koerperfluessigkeiten |
| DE3813503.5 | 1988-04-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0213398A true JPH0213398A (ja) | 1990-01-17 |
| JPH0724599B2 JPH0724599B2 (ja) | 1995-03-22 |
Family
ID=6352593
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1101849A Expired - Lifetime JPH0724599B2 (ja) | 1988-04-22 | 1989-04-24 | 体液のエステル分解作用及び／又はタンパク質分解作用を有する内容物を比色定量するための、担体に結合した多成分検出系 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5015572A (ja) |
| EP (1) | EP0340511B2 (ja) |
| JP (1) | JPH0724599B2 (ja) |
| KR (1) | KR910008570B1 (ja) |
| AT (1) | ATE85127T1 (ja) |
| DE (2) | DE3813503A1 (ja) |
| ES (1) | ES2053853T5 (ja) |
| GR (2) | GR3007606T3 (ja) |
| HK (1) | HK173896A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007142779A (ja) * | 2005-11-17 | 2007-06-07 | Pioneer Electronic Corp | スピーカ装置 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU4135096A (en) * | 1994-11-07 | 1996-06-06 | Litmus Concepts, Inc. | Assay for proline iminopeptidase and other hydrolytic activities |
| US5716831A (en) * | 1995-05-24 | 1998-02-10 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Method and test kit for detecting insecticide resistance |
| US6528652B1 (en) | 1999-01-21 | 2003-03-04 | Chronimed | Composition and device for detecting leukocytes in urine |
| US6348324B1 (en) | 1999-01-21 | 2002-02-19 | Hypoguard America Limited | Composition and device for detecting leukocytes in urine |
| JP2014011974A (ja) * | 2012-07-04 | 2014-01-23 | Sony Corp | 化学反応用マイクロチップ及びその製造方法 |
| EP3848708A1 (en) | 2020-01-13 | 2021-07-14 | Roche Diagnostics GmbH | Reagent formulation for leukocyte test strip |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60222770A (ja) * | 1984-04-19 | 1985-11-07 | Fuji Photo Film Co Ltd | 一体型多層分析要素 |
| JPS62182652A (ja) * | 1985-06-20 | 1987-08-11 | Fuji Photo Film Co Ltd | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
| JPS62274262A (ja) * | 1986-05-16 | 1987-11-28 | ベ−リンガ−・マンハイム・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング | 凝固パラメ−タを測定する分析素子 |
| JPS63219397A (ja) * | 1986-05-28 | 1988-09-13 | Fuji Photo Film Co Ltd | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3017721A1 (de) * | 1980-05-09 | 1981-11-26 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme und dafuer geeignete substrate |
| JPS57144996A (en) * | 1981-02-27 | 1982-09-07 | Fuji Photo Film Co Ltd | Film for quantitative analysis |
| DE3118381A1 (de) * | 1981-05-09 | 1982-11-25 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Mehrschichtiges testmittel zum nachweis einer komponente einer fluessigen probe |
| JPS57208997A (en) * | 1981-06-17 | 1982-12-22 | Fuji Photo Film Co Ltd | Liquid analyzing material for oxidase enzyme reaction system |
| JPS57208998A (en) * | 1981-06-17 | 1982-12-22 | Fuji Photo Film Co Ltd | Multi-layered analytical film for determination of transaminase |
| DE3332144A1 (de) * | 1982-09-06 | 1984-03-08 | Konishiroku Photo Industry Co., Ltd., Tokyo | Analytisches element |
| US4637979A (en) * | 1984-04-06 | 1987-01-20 | Miles Laboratories, Inc. | Composition and test device for determining the presence of leukocytes containing a zwitterion coupling agent |
| DE3413119A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
| DE3413078A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Chromogene aminosaeure- und peptidester, verfahren zu deren herstellung, verwendung dieser verbindungen in analysenverfahren sowie mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
-
1988
- 1988-04-22 DE DE3813503A patent/DE3813503A1/de not_active Ceased
-
1989
- 1989-04-14 ES ES89106745T patent/ES2053853T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-14 EP EP89106745A patent/EP0340511B2/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-14 DE DE8989106745T patent/DE58903378D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-14 AT AT89106745T patent/ATE85127T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-04-19 US US07/340,885 patent/US5015572A/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-22 KR KR1019890005381A patent/KR910008570B1/ko not_active Expired
- 1989-04-24 JP JP1101849A patent/JPH0724599B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-04-09 GR GR930400204T patent/GR3007606T3/el unknown
-
1996
- 1996-09-12 HK HK173896A patent/HK173896A/xx not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-02-27 GR GR970400377T patent/GR3022696T3/el unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60222770A (ja) * | 1984-04-19 | 1985-11-07 | Fuji Photo Film Co Ltd | 一体型多層分析要素 |
| JPS62182652A (ja) * | 1985-06-20 | 1987-08-11 | Fuji Photo Film Co Ltd | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
| JPS62274262A (ja) * | 1986-05-16 | 1987-11-28 | ベ−リンガ−・マンハイム・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング | 凝固パラメ−タを測定する分析素子 |
| JPS63219397A (ja) * | 1986-05-28 | 1988-09-13 | Fuji Photo Film Co Ltd | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007142779A (ja) * | 2005-11-17 | 2007-06-07 | Pioneer Electronic Corp | スピーカ装置 |
| US8131004B2 (en) | 2005-11-17 | 2012-03-06 | Pioneer Corporation | Speaker apparatus |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0340511B1 (de) | 1993-01-27 |
| GR3022696T3 (en) | 1997-05-31 |
| EP0340511B2 (de) | 1997-01-29 |
| JPH0724599B2 (ja) | 1995-03-22 |
| US5015572A (en) | 1991-05-14 |
| DE58903378D1 (de) | 1993-03-11 |
| KR890016386A (ko) | 1989-11-29 |
| GR3007606T3 (en) | 1993-08-31 |
| ES2053853T3 (es) | 1994-08-01 |
| ATE85127T1 (de) | 1993-02-15 |
| KR910008570B1 (ko) | 1991-10-19 |
| ES2053853T5 (es) | 1997-06-01 |
| DE3813503A1 (de) | 1989-11-02 |
| EP0340511A1 (de) | 1989-11-08 |
| HK173896A (en) | 1996-09-20 |
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