JPH02142799A - 新規なグリコペプチド抗生物質のデカプラニン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なグリコペプチｒ抗生物質のデカプラニン
、培養放線菌ｙ−ｓ６．ｇ６９１ｏ　（ブダペスト条約
に従って西独微生物収集所にて１９８８年８月５日付で
ＤＳＭ　４７６５０番号で寄託された）、その変異体お
よび突然変異体によるその製法並びに医薬としてのその
使用に関する。

培養放線菌Ａ　ＨＩＬ　Ｙ−８６，３６９１０（培養放
線菌ムＹ−８６，３６９１０）はインド国マノ・ラシュ
トラ州プーナ近くで採集した土壌から単離された。培養
放線菌屋ＨＩＬ　ｙ−８６，３６９１０の変異体および
突然変異体は、突然変異原例えば紫外線またはＮメチル
−Ｎ′−二トローＮ′−二トロソグアニジンを用いる知
られた方法で得ることができる（例えば”　Ａｌｌｇｅ
ｍｅｉｎｅ　Ｍｉｋｒｏｏｂｉｏｌｏｇｉｅ　　、　Ｈ
，Ｇ、　８ｃｈｌｅｇｅｌ、　Ｇｅｏｒｇ　Ｔｈｉｅｍ
ｅ　Ｖｅｒｌａｇ　Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、　Ｎｅｖｒ　
Ｙｏｒｋ。

１９８５参照）。培養放線菌ＡＹ−８６，３６９１０は
放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ　）目および
キブデロスボランジウム（Ｋｉｂｄｅｌｏｓｐｏｒａｎ
ｇｉｕｍ　）属に属する。

骸菌は後記から明らかであるようにその形態学的、培養
および生理学的特性の多くにおいて知られた菌株とは相
異なるために新規な菌株であると考えられる。それはま
た後記から明らかなように新しい抗生物質（以下、デカ
ゾラニンと称する）を生産するので新菌株であると考え
られる。

デカプラニンすなわち弐■の化合物はバンコマイシン型
のグリコベゾチＰ抗生物質である。

文献に記載のバンコマイシン型のグリコペゾチｒ抗生物
質は米国特許第３，７８０，１７４号明細書に記載の抗
生物質Ａ　４７７　：　Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ
　３３．１４０７〜１４１６．１９８０に記載の抗生物
質Ａ３５５１２；”　ｔｈｅ　Ｐｒｏｇｒａｍｍｅ　ａ
ｎｄ　Ａｂｓｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　２３　ｒｄ
　Ｉｎｔｅｒ−ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ
　ｏｎ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ａｇｅｎｔｓ　
ａｎｄＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　”のＡｂｓｔｒａｃ
ｔ　Ａ　４４０およびＡ４４３、ｐ　１６４　、　Ｌａ
ｓ　Ｖｅｇａｓ、　１９８３に記載の抗生物質Ａ４１０
３０および抗生物質Ａ　４７９３４　；　＠ｔｈｅＰｒ
ｏｇｒａｍｍｅ　ａｎｄ　Ａｂｓｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　
ｔｈｅ　２６　ｔｈ　ＩｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅＣｏｎ
ｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　
Ａｇｅｎｔｓ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅ−ｒａｐｙ、
　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ａ　２２６．　ｐｌ　３７　、　
Ｎｅｗ　０ｒｌｅａｎｓ、　１９Ｂ６に記載の抗生物質
ＡＡＪ−２７１：　Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　２
８　。

３９５〜３９７．１９７５に記載の抗生物質ＡＢ−６５
：Ｊ、Ａｎも１ｂｉｏｔｉｃｓ、　３７　、８５〜９５
　、１９８４に記載のアクタゾラニン類；　Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ、、　３１．２８６１〜２８６
４、１９７９に記載のアクチフィジン類；Ｊ。

Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　４０　、１６５〜１７２　、
１９８７に記載のアクチノイジンＡ２；　Ｊ、　Ａｎｔ
ｉｂｉｏｔｉｃｓ　３８　、５５５〜５＋ｌおよび５６
１〜５７１．１９８５に記載のアリジノン類；Ｊ、　Ａ
ｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　１０１　、２２３７〜２
２３９．１９８０および１０２．１６７１〜１（５８４
，１９８０に記載ノアホックリシン；　Ｊ、　Ａｎｔｉ
ｂｉｏｔｉｃｓ　４０　、９１７〜９５２　、１９８７
０５つの連続論文に記載のクロロポリスボリン類；　Ａ
ｎｔｉｂｉｏｔｉｋ　Ｍｅｄ　Ｂｉｏｔｅｋｈｎｏｌ、
　３２　、５７１〜５７６　。

１９８７に記載のエレノマイシン：　Ｊ、　Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃｓ憇、１３８６〜１４０６　、１９８６に記
載のキブデジン類：米国特許第３，８０５，３０６号明
細書に記載の抗生物質ＬＬ−ＡＭ−３７４；　Ａｎｔｉ
ｍｉｃｒｏｂ　Ａｇｅｎｔｓ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｏｔｈ
ｅｒ。

１９６８　、２４２〜２４５に記載の抗生物質ＬＬ−Ａ
Ｖ−２９０；Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　２８　、５０３
〜５０７　、１９７５に記載のマンノベグチン類：　Ａ
ｇｒｉｃ、　Ｂｉｏｌ。Ｃｈｅｍ、　４７．４９９〜５
０６、１９８３およびＪ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、　５
３　、４７１−４７７　。

１９８８　Ｋ記載の抗生物質０Ａ−７６５３：　Ｃｈｅ
ｍ、　Ａｂｓｔｒ、。

１０８　、１６４４６６ｆ　、　１９８Ｂに記載のオリ
エンデシン類；　Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　４０
　、９７０〜９９０　、１９８７に記載のパルポジシン
：　Ｊ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、　Ｃｈｅｍ、　Ｃｏｍ
−ｍｕｎ、１９７９　；９０６〜９０８．１９７９およ
びＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓＡｎｎｕａｌ　１９５７〜１
９５７　、　Ｅｄｓ、　Ｈ，Ｗｅｌｃｈ　＆　Ｆ、　Ｍ
ａｒｔｉ−Ｉｂａｎｅｚ、　ｐｐ、６９９〜７０５．　
Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ、　Ｉｎｃ
。

Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　１９５７に記載のりストセチン類
；　Ａｎｔｉ−ｂｉｏｔｉｋｉ　１４　、５９４〜５９
７（１９６９）に記載のリストマイシンＡおよびＢ　；
　Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　３１　、１７０〜１
７７、１９７８およびＪ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　８０
Ｃ，１０（５、４８９１〜４８９５および４８９５〜４
９０２．１９８４に記載のテイコゾラニン類（ティコマ
イシン類）並びにＪ。

Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　８ｏｃ、　１０５　、６９１５〜
６９２２．１９８３に記載ノバンコマイシンでアル。

またグリコペプチド抗生物質に関する雑誌記事もＡｎｎ
、　Ｒｅｖ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　３８　、５３９
〜３５７．１９８４：Ｔｏｐｉｃｓ　ｉｎ　Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　５　、１１９〜１５
８１９８０　：　　−ＣＲＣＨａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　
Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　”Ｖｏｌ
ｕｍｅ　Ｉ　、　ｐｐ、　３０５〜３２３　、　Ｎａｎ
ｏｓ　Ｂｅｒｄｙ著ＣＲＣＰｒｅｓｓ。

Ｂｏｃａ　Ｒａｔｏｎ、　Ｆｌｏｒｉｄａ、　１９８０
に見出される。

バンコマイシン型のグリコペプチド抗生物質に関するそ
の他の概要記載は”’　Ｉｎｄｅｘ　ｏｆ　Ａｎｔｉｂ
ｉ−ｏｔｉｃｓ　ｆｒｏｍ　Ａｎｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ
ｓ　＃Ｈａｍａｏ　Ｕｍｅｚａｗａ、　Ｅｄｉｔｏｒｉ
ｎ　Ｃｈｉｅｆ、　Ｖｏｌｕｍｅ　Ｉ、　ｐ−５６８〜
５７０　、６７５　＋　７５５　。

Ｕｎｉｖ、　Ｐａｒｋ　Ｐｒｅｓｓ、　５ｔａｔｅ　Ｃ
ｏＣｏ１１ｅ、　Ｐｅｎｎ５ｙｌｖａｎｉａ。

Ｕ、Ｓ、Ａ、、　１９（５７：およびＶｏｌｕｍｅ　Ｉ
ｆ、　ｐ、　１０５　、１０６　。

１６Ｌ　６２５．１０８１　＋　１１００．　Ｕｎｉｖ
、　Ｐａｒｋ　Ｐｒｅｓｓ。

Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、　Ｕ８Ａ、　１９７８　ＩＣ参照
されうる。

バンコマイシン型のグリコペプチド抗生物質は下記の式
■ 分中に１個以上のＣｔ原子を含有することもできる。前
記アグリコンは下記のバンコマイシ−４ｔ（式■、式中
Ｒ１，Ｒ２＝Ｈおよび／またはＣ／−）およびアクチノ
イ・ジン酸（式■） Ｃ式中Ｒ１、Ｒ２＝Ｈおよび／またはＣＬ　、　Ｒ５，
１４＝＝ｅＨおよび／またはアルキル基；Ｘ、Ｙの各成
分は２ｓの相異なるアミノ酸であるかまたは同一アミノ
酸の成分であるかのいずれかであることができる）に示
されるようなへ！タベゾチドアグリコンの存在に特徴を
有する。糖類（塩基性および中性）は前記式（１）中の
ベンジルおよび／またはフェノールの各ＯＨ基に結合す
ることができる。また、これら抗生物質の大部分はその
ノぐンコマイシン酸成分および／′またはＸ、Ｙ成のよ
５な交叉結合された芳香族酸を含有する。

しかしながら、入手しうる全てのデータから考えて抗生
物質デカゾラニンは前記引用文献に記載のバンコマイシ
ン型のいずれものグリコ４ブチＰ抗生物質とは明らかに
異なっている。さらに、分子量および分子式のサーチキ
ーで行うケミカルアブストラクトサービスオンライン文
献サーチもまたデカゾラニンが新規化合物であるという
ことを確認している。

デカデラニンの構造は下記の式■に示すとおりである。

α−Ｌ−ラムノース バンコマイシン型のグリコベプチＰ抗生物質は広スペク
トルのダラム陽性菌例えばスタフィロコッカス（８ｔａ
ｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕａ）種およびストレプトコッカス
（Ｓちｒθｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種のペニシリン−メチ
シリン−およびオキサシリン−耐性菌株に対する抗菌剤
としての医薬において重要である。

本発明の新規抗生物質は多数の病原菌に対して活性であ
り、従ってヒトおよび獣医薬において有用である。さら
に正確に云えば、デカプラニンはダラム陽性菌例えばス
タフィロコッカスアウレウス（８ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃ
ｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）　、スタフィロコッカスエピデ
ルミゾイス（８ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓｅｐｉｄｅ
ｒｍｉｄｉｓ）　ｓストレソトコッカスパイオゲネス（
８ｔｒｓｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ス
トレゾトコツカスビリダンス（８ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ　ｖｉｒｉｄａｎｓ）　、ストレプトコッカスフェ
カリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉ
ｓ）　、ジグロコツカスニューモニエω１ｐｌｏｃｏｃ
ｃｕｓ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｓ）、パクテロイデスクラ
ギリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ）
、クロストリジウム・ジフイシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉ
ｕｍｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）　、　コリネバクテリウム（
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃ−ｔ、ｅｒｌｕｍ）種、アクチノパ
クター（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒ）種およびフッバク
テリウム（Ｆｕｓｏｂａｃ　ｔｅｒｉｕｍ）種によって
惹起される感染性疾患を治療するための治療薬として使
用されうる。

またデカデラニンは成長達成促進剤として家禽および家
畜用の飼料添加剤としても使用されうる。

本発明のさらに別の目的は培養菌ムＹ−８６，３６９１
０、その突然変異体および変異体からの新規抗生物質デ
カゾラニンの製造方法を提供することである。該方法は
炭素源、窒素源を必須栄養素の有機および無機塩と一緒
に含有する水性栄養培地中において好気性条件の下に培
養菌ＡＹ−８６，３６９１０、その変異体および突然変
異体を１８℃〜４０℃の温度および５．５〜８．５の−
で該培地が実質的なな抗生活性を示すまで培養し、次に
その抗生物質を培養プロスから単離しそして精製するこ
とからなる。

また本発明によれば、知られた方法で６．５〜８．５の
−において栄養培地を用いて土壌から培養菌ＡＹ−８４
３６９１０を単離する方法も提供される。

土壌からの該微生物の単離に用いられる栄養培地は炭素
源、窒素源、無機栄養素塩および凝固剤からなる。炭素
源はグルコース、デンプン、デキストリン、グリセロー
ル、スクロースまたは糖蜜であることができる。窒素源
はペプトン、酵母エキス、ビーフエキス、麦芽エキス、
カゼインまたはアさノ酸例えばアルギニンもしくはアス
ノぐラギンであることができる。凝固剤は例えば寒天で
あることができる。無機栄養塩は例えばナトリウム、カ
リウム、マグネシウム、カルシウム、リンまたは硫黄の
塩であることができる。微量元素として鉄、銅、マンガ
ン、亜鉛およびコバルトの塩が培地中に混入されうる。

本発明の細菌は枝分れした基質菌糸体から気中菌糸を形
成するダラム陽性、非抗酸性、線状の菌である。十分に
発育した基質菌糸体は菌糸置換なしで種々の程度のフラ
グメント化を示すことができる。振とうフラスコおよび
発酵槽中においてフラグメント化は通常観察される。ま
つ直ぐにまたは僅かに曲がって生産される気中菌糸は棒
状の滑壁胞子からなる。該胞子は０．２〜０．５　Ｘ　
１〜３μｍの寸法を有する。これらの胞子鎖は通常、鎖
１本当たり５０個より多い胞子を有していて非常に長い
がしかし１０個またはそれ以下の胞子からなる短鎖数本
もまた存在している。また胞子貴様構造も観察される。

（Ａｃｔ、１ｎｏｐｌａｎａｃｅａｅ）に見られる分生
子構造と類似のこれら胞子裏機構造は限定された壁によ
って取り囲まれているが、しかし胞子を含有しない。

広範囲の操作および実験にもかかわらず、これら胞子貴
様構造からの胞子の発生または放出は観察されない。そ
れらは直接発芽し、１個以上の肢管な生ずる。また同様
の形態学的特徴がＩｎｔ、　Ｊ、　Ｓｙｓｔｅｍ、　Ｂ
ａｃｔｅｒｏｌ、　３６　、４７〜５４１９８６に報告
のキブデロスボランジウム属においても記載されている
。ＩＭＦ　（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａ１８ｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ　Ｐｒｏｊｅｃｔ　）培地２．３．４．５
および７上並びに栄養寒天上に見られる胞子嚢機体の表
面は粗くてかつしわが寄っており、そしてそれらの大き
さは２〜１６μｍである。

いくつかの培地上において培養放線菌ＡＹ−８６，３６
９１０はその寒天中に特徴的な結晶を生ずる。

種々の寒天培地上における微生物の培養特性は下記のと
おりである。

を酵母エキス−麦芽エキス寒天 （ＩＳＰ培地２） 生　長　　　：良好、乾燥している、しわあり気中菌糸
　：穏和、粉末状、黄色がかった白色層　面　　：黄茶
色 可溶性色素：茶色がかった緑色 ２、オートミール寒天 （ＩＳＰ培地３） 生　長　　　：穏和、中央に隆起あり、乾燥している気
中菌糸　　：穏和、粉末状、黄色がかった白色層　面　
　：淡黄色 可溶性色素：な　し 五無機塩−デンプン寒天 （ＩＳＦ培地４） 生　長　　　：穏和、中央に隆起あり、乾燥している気
中菌糸　二弱い、粉末状、黄色がかった白色層　面　　
：淡黄色 可溶性色素：な　し ４、クリセロールーアスノｑライン寒天（Ｉ８Ｐ培地５
） 生　長　　　：穏和、隆起あり、乾燥している気中菌糸
　　二弱い、粉末状、黄色がかった白色裏面　：黄色 可溶性色素：な　し ６ペプトンー酵母エキス−鉄寒天 （ＩＭＦ培地６） 生　長　　：ｊ！Ｌ好、隆起あり、湿っている気中菌糸
　：な　し 裏　面　　：淡黄色 可溶性色素：な　し ＆チロシン寒天 （Ｘｓｐ培地７） 生　長　　　：良好、隆起あり、乾燥している気中菌糸
　：穏和、粉末状、黄色がかった白色裏　面　　：淡黄
色 可溶性色素：な　し ２スクロース−硝酸塩寒天 （ツアペックの寒天） 生　長　　　：弱い、ふくらんでいる、乾燥している気
中菌糸　：な　し 裏　面　　：淡黄色 可溶性色素：な　し ８、ペプトン−ビー７エキス寒天 （栄養寒天） 生　長　　：豊富、隆起あり 気中菌糸　　：非常に僅か、粉末状、黄色がかった白色
裏　面　　：淡黄色 可溶性色素：な　し コロニーの裏面：使用したいずれもの培地上において特
有の色素は生産されない。基質菌糸体は−の変化に対し
て全く応答を示さない。

可溶性色素：　ＩＭＰ培地２上に観察される茶色がかっ
た緑色色素は−イン・クケータではない。

本発明微生物の最適生長範囲は２５℃〜３５℃であり、
４℃では生長は乏しくそして４５℃では全く生長がない
。この微生物はグルコース−ペプトン−ゼラチン培地中
でゼラチンを液化し、デンプン−無機塩寒天中でデンプ
ンを加水分解しそして硝酸塩ブロス中において硝酸塩を
還元する。

チロシン寒天、ペプトン−酵母エキス−鉄寒天またはト
リプトン−酵母エキスブロスにおいてメラニンの生産は
全く観察されない。該微生物はセルロース分解作用を全
く示さず、乳汁を凝固せず、ネガティブなチロシナーゼ
反応およびネガティブな硫化水素生産を示しそして単に
乳汁な弱くペプトン化するだけである。

ツアペック溶液（Ｃｚａｐｅｋ’ｓ　５ｏｌｕｔｉｏｎ
）寒天上ではその生長は平らで滑らかな白色コロニーを
有して良好である。

該微生物の炭素同化パターン〔プリｒ）・ムーゴットリ
ーブ培地（Ｐｒｉｄｈａｍ−Ｇｏｔｔｌｉｅｂ’ｓ　ｍ
ｅｄｉｕｍ）中の〕は下記のとおりである。

ボ・クチイブ＝Ｄ−グルコース、Ｌ−アラビノース、Ｄ
−キシロース、Ｍ−イノシ トール、Ｄ−マンニトール、Ｄ− フルクトース、がラクトース、サ リシン、マルトース、セロビオ− ス、マンノース、ラクトースおよ びグルタミン酸ナトリウム 疑わしい　ニスクロース、ラフィノースネガティブ：ラ
ムノース、セルロースおよびズルシトール 培養放線菌ＡＹ−８６，３６９１０は０．２Ｍｇ／−よ
り大きな濃度でストレプトマイシンにより阻害され、５
〜７％の濃度でＮａＣ２を許容することができそして５
．５〜１α５の一許容範囲を有する。

培養放線菌ＡＹ−８６，５６９１０の細胞壁分析によれ
ばメソ−ジアミノピメリン酸、Ｄ−グルタミン酸、ＤＬ
−アラニン、ムラミン酸、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルニス
アミン、Ｄ−ガラクトースおよびアラビノースを含有す
る■型細胞壁並びにＤ−ガラクトースおよびアラビノー
スのＡＷ全細胞糖ノターンの存在が示される。ξコール
酸は全く存在しない。

培養放線菌ム）（ＩＬＹ−８４３６９１０はキブデロス
ボラン・ジウム属の場合と一致する化学分類上の性質、
培養特性および形態学を有する。下記に示す３種の報告
されたキブデロスボランジウム種の菌株すなわちキブデ
ロスボランジウムアリダム（Ｋｉｂｄｅｌｏｓｐｏｒａ
ｎｇｉｕｍ　ａｒｉｄｕｍ）　ＡＴＣＣ３９３２３（Ｉ
ｎｔ、　Ｊ、　　８ｙｓｔｅｍｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏ
ｌｏｇｙ　６６　、４７〜５４．１９８６）、Ｋ、アリ
ダム亜種ラルガム（ｌａｒｇｕｍ）ＡＴＣＣ３９９２２
（Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　３９　、１３８６〜
１３９４　。

１９８６）およびに、フィリッピネンス（Ｐｈｉｌｉｐ
ｐｉｎｅｎｓｅ）ＮＲＲＬ　１９１９８　（Ｉｎｔ、　
Ｊ、　Ｓｙｓｔｅｍｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　
Ｍ　１２８２〜２８６．１９８８）との比較は下記のと
おりである。

可溶性色素　はとんどなし　　はとんどなし　　時々　
　　時々細胞壁：＋＋ ラムノース 下記糖の利用： アラビノース デキストリン ラフィノース ＮａＣ１許容− ＮＯ３還元 乳汁のベグトン化 脂肪酸分析■： イソー１４：０ イソ−１６：０ アンティソー１５二〇 トランス−１６：１ １５：０ シス−１７：１ １７：Ｏ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ３−２Ｊ３ ２α７−４６．７ ８．０−１１７ ２．１−４．１ 存在しない Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

Ｎ、’Ｉ’。

＝試験されていない。

＋ １−１ｉ４ ６３．９−６７．５ 存在しない Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

Ｎ、Ｔ。

＋ ２．１ ′１１ ５．１ 存在しない ５．１ ｔ４ ｃＬ２ 上記の知られた微生物の培養および生理学的特徴につい
ての公開された情報は、本発明の微生物と比較した場合
明らかな差異を示す。さらに、培養放線菌ＡＹ−８へ３
６９１０を発酵させると新規グリコベプチＰ抗生物質で
あるデカプラニンが得られる。

従って、本発明の微生物はキシプロスポランジウムの新
種として考えられそしてキブデロスボランジウムデツケ
ンシス（Ｋｉｂｄｅｌｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍｄｅｃｃ
ａｅｎｓｉｓ）新種と命名された。

当業者ならば、本発明はＡｉｌ記で具体的に述べた特定
の微生物に限定されるのではなくて、新規グリコペゾチ
Ｐ抗生物質デカデラニンを生産しうる該微生物から誘導
される自然および人工の突然変異体および変異体の全て
を包含するということを十分に理解することができるで
あろう。

本発明によれば新規抗生物質デカプラニンの製造方法が
提供される。該方法は炭素源、窒素源、栄養無機塩およ
び微量元素を含有する栄養培地中において好気性条件の
下に培養放線菌扁Ｙ−８へ３６９１０を好ましくは６．
０〜８．０の−および１８〜４０℃の温度で発酵させて
培養しついで賦化合物を本明細書中に記載のような知ら
れた方法で培養ブロスから単離させることからなる。

新規抗生物質製造のために栄養培地中で使用する炭素源
は例えばグルコース、デンプン、デキストリン、グリセ
ロール、スクロース、糖蜜または油であることができる
。新規抗生物質製造のために栄養培地中で使用する窒素
源は例えば大豆ミール、酵母エキス、ビーフエキス、麦
芽エキス、コーンステイープリカー　ヘゲトンまたはカ
ゼインであることができる。新規抗生物質製造のために
栄養培地中で使用する栄養無機塩／鉱酸塩は例えば塩化
す）　ＩＪウム、硫酸マグネシウム、硝酸カリウム、硫
酸アンモニウムまたは炭酸カルシウムであることができ
る。微量元素としては鉄、マンガン、銅、亜鉛、コバル
）またはその他のこのような重金属の各塩を使用するこ
とができる。

特Ｋ、培養放線菌ムＹ−８へ３６９１０は２９℃（±１
℃）およびｐＨ＆５において培養される。

この発酵は液内発酵であるのが好ましい。新規抗生物質
複合体の発酵および生成の過程は、知られた寒天平板拡
散法によってスタフィロコッカスアウレウス（Ｓｔａｐ
ｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）２０９Ｐおよび
ミクロコッカスルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓｌｕ
ｔｅｕｓ）に対する培養液および菌糸体の抗菌活性を測
定することＫよってモニターされうる。

所望により該培養菌の発酵中その栄養培地中に抗発泡剤
例えばデスモフェン（Ｄｅｓｍｏｐｈｅｎ”プロピレン
オキシドを基本とするポリエーテル、Ｂａｙｅｒ社製）
が使用される。

デカデラニンは適当な吸着剤上での直接吸着によって培
養ブ關スから得ることができる。例えば本発明化合物を
含有する培養炉液は活性木炭、Ｄｉａｉｏｎ＠ＨＰ２０
　（ポリスチレン−ジビニルベンゼンコポリマーを基本
とする高多孔吸着性樹脂、三菱化学工業社製）またはＡ
ｍｂｅｒｌｉ　ｔｅ＠ＸＡＤ（ポリスチレンまたはアク
リル酸エステルを基本とする多孔吸着性樹脂、Ｒｏｈｍ
　＆　Ｈａｓａ社（米国）製）上に吸着されうる。より
好ましい吸着剤はＤｉａｌｏｎ’　ＨＰ２０である。本
発明化合物は適当な移動相例えばメタノール、アセトニ
トリルまたはアセトンを単一、お互いの組合せまたは水
との組合せのいずれかで用いて該吸着剤から溶離される
ことができそして溶離物は蒸発乾固させるのが好ましい
。好捷しい溶離剤は水性メタノールおよびアセトンであ
る。

また、デカゾラニンはイオン交換クロマトグラフィーを
用いて培養炉液から単離されうる。

適当な樹脂はメタクリル酸とジビニルベンゼンからなる
弱酸性のコポリマーの陽イオン交換樹脂型例えばＡｍｂ
ｅｒｌｉｔｅ■ＩＲＣ−５０（Ｒｏｈｍ　＆　Ｈａｇｓ
社製）である。この手法では該培養炉液を陽イオン交換
樹脂Ａｍｂｅｒｌｉ　ｔｅ＠ＩＲＣ−５０（Ｈ”）を使
用するカラムクロマトグラフィーに付す。本発明化合物
は最初にイオン交換体上に吸着され、次に適当な移動相
例えば希塩酸の水溶液またはメタノール溶液を用いて完
全に溶離される。移動相としては水中に溶解した［１．
１ＮＨＣｔ溶液を使用するのが好ましい。こうして得ら
れた活性溶離物をゾールしついで濃縮する。また該活性
溶離物を脱色するのに弱塩基性型の陰イオン交換樹脂Ａ
ｍｂｅｒｌｉ　ｔｅ＠ＩＲｋ−６８Ｃ１−を使用しても
よい。

デカデラニンを含有する前記の濃縮された活性溶離物は
多数の方法でさらに精製されうる。

例えば活性炭素Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ＠ＸＡＤ−４および
７、Ｄｉａｉｏｎ＠ＨＰ−２０による再吸着および溶離
法、５ｅｐｈａａｅｘ＠ＬＨ−２０およびＧシリーズゲ
ル（アカロース上に一定の多孔性を有するゲル、Ｐｈａ
ｒｍａｃｉａＦｉｎｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ　ＡＢ社（
スエーデン）製）およびその同等物によるゲル濾過並び
に５ｅｐｈａａｅｘ０Ｄ謔（−）エチルアミノエチル）
ゲルによるイオン交換ゲル濾過をそれ以上の精製のため
に好都合に組合せることができる。さらに適当な吸着剤
例えばシリカゲル、アルミナおよび変性シリカゲル−Ｃ
１８を適当な溶媒系とともに用いる薄層クロマトグラフ
ィー、中圧および高圧液体クロマトグラフィーを使用し
てもよい。さらに特定の溶媒系を用いる向流クロマトグ
ラフィーは該方−３〇− 法に十分役立つことができる。より好ましい精製法とし
てはＤｉａｉｏｎ＠ＨＰ−２０を用いる反復吸着および
溶離、次いで溶離溶媒としてメタノール−またはアセト
ニトリル−水性塩溶液を用いる変性シリカゲル０１８に
よる中圧液体クロマトグラフィーによる方法がある。

デカプラニンは例えば無機酸および有機酸例えばＨＣｌ
、　Ｈ２ＳＯ４、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、
安息香酸でまたは塩基例えばアミン（例えばトリエチル
アミン）で知られた方法によってその生理学的に許容し
うる塩に変換されうる。

デカゾラニンの物理化学的および分光学的性質は下記の
第１表に示すとおりである。

第　　１　　表 デカプラニンの物理化学的および分光学的性質性　　　
　質：僅かにピンクがかった色合いを有する白色粉末 化学物質の型：バンコマイシン類の塩基性グリコペプチ
ド溶　解　性：水 融　　　　点：＞２４０℃（分解） Ｃａ〕Ｄニーｓｙ、６°（Ｃ０５、Ｈ２Ｏ）Ｃｍ−１（
添付図面の第３図参照） ｉ　Ｈ−ＮＭＲ（２７０：添付図面の第４図に示されて
いるＭＨｚ　、　ｄ６−ＴＭ３０） ｙｓｏ　９：１．３４３ Ｋ） により得られた）　モノデクロロ類似体表　　Ａ ５６．０９ ｚ９７ ６０．７５ ６２．５５ ６３、７１ ６３．８５ Ｚ５６ ７０．１５ ７０．８７ ７１、９７ ７２．３３ ７２．３６ ７３．４６ ７５．９５ デカプラニンの１’Ｃ−ＮＭＲシグナルの化学シフト（
ｐｐｍ）（基準としてＴＭＳ使用） ７６、７２ Ｚ０６ Ｚ４３ ８２．１４ ９３．７（Ｓ １０２．９２ １０３．３４ １０４．３３ １０５．１５ １０７．９２ １０９、＋５９ １１９．１０ １２２，７２ １２３，１１ １２４，０７Ｓ １２６．０７ １２６．９６ １２７．５４ １２７．９５ １２９．１６ １２９．５３ １３０．１３ １３１．０１ １３４．５１ １３４．７１ １３５．６０ １５７．０６ １５８．９５ １３９．６１ １５１．２０ １５３．６９ １５５．８６ １５＜Ｓ、４７ １５７．０３ １５７．５９ １５７．９２ １６８．２８ １７０．５８ １７１．７５ １７２．３３ １７２．７０ １７４８６・ １７７．８８ １７８．４７ 　Ｚ９７ １８．７９ ２２．９７ ２５．５１ ３４．７１ ３９、８０ ３８．１９ ４２．００ ５３．６３ ５５．８０ 該化合物およびその分解生成物の完全な分光学的分析に
より解明されたデカプラニンの構造は前記式■に示され
ている。

デカプラニンの生物活性 デカプラニンは広範囲のダラム陽性菌、例えばにニジリ
ン、メチ７リン、オキサシリン、その他のβ−ラクタム
抗生物質、テトラサイクシリ類、アミノグリコシド類お
よびエリスロマイシンのような普通に使用されている抗
生物質に耐性を示す腸球菌および臨床単離物に対して活
性を示す。最小阻害濃度０．４ＩＣ）を種々の微生物に
ついて測定したところ、その結果は下記の第■表に示す
とおりである。

第　　■　　表 デカゾラニンのＭＩＣ−μｇ／ｍｌ 供試微生物 （Ｓ。

ａｕｒｅｕｓ） スタフィロコッカスアウレウス （Ｓ、ａｕｒｅｕｓ）５０６６　ＭｅｔｈＲスタフィロ
コッカスアウレウス （Ｓ、ａｕｒｅｕｓ）６９７１　Ｔ’＋：スタフィロコ
ッカスアウレウス （Ｓ、ａｕｒｅｕｓ）Ｒ８５ＴｅｔＲ スタフィロコッカスアウレウス （Ｓ、ａｕｒｅｕｓ）７０５ スタフィロコッカスアウレウス （Ｓ、　ａｕｒｅｕｓ）　Ｒ８５／ｍ　ＥｍＲスタフィ
ロコッカスアウレウス （Ｓ、　ａｕｒｅｕｓ）　Ｂ　７１０　ＭｅｔｈＲデ”
カプラニン １．２５〜２．５ ０３９〜０７８ ０７８〜１．２５ ［Ｊ、３９〜０．７８ ０７８〜１．２５ ０．７８〜１２５ スタフィロコッカスアウレウス （Ｓ、ａｕｒｅｕｓ）　７１２　ＭｅｔｈＲｌ、２５〜
２５ （Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）２０
９　Ｐスタフィロコッカスアウレウス （Ｓ、　ａｕｒｅｕｓ）　７８９　ＭｅｔｈＲ０７８〜
１．２５ スタフィロコッカスアウレウス （Ｓ、　ａｕｒｅｕｓ）　０１１ＵＣ５ＭａｃＲ０７８
〜１２５ 供試微生物 デカプラニン 供試微生物 デカプラニン （ｓｔｒ。

ｂｏｖｉｓ） （Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄ
ｉｓ）１７８ストレプトコツカスビリダンス （Ｓｔｒ、　ｖｉｒｉｄａｎｓ） ０７８〜６２ スタフイロコツカスエピデルミジス （Ｓ、　　ｅｎｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）　３２９６５０７
８〜１．５６ ストレフトコツカスニューモニエ （Ｓｔｒ、　　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）０．１２〜０６
９ ストレプトコッカスフェカリス （Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　　ｆａｅｃａｌｉｓ）
２５〜６．２ ストレプトコッカスへモリチカス （Ｓｔｒ、ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）１０〜４．０ ストレプトコッカスフェカリス （８ｔｒ、　　ｆａｅｃａｌｉｓ）　０２１）０１’）
ｔｌ’Ｉ　Ｍａｃ”１．２５〜２．５ エンテロコツカスフェカリス （Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ）　Ａ
ＴＣＣ２９２１２１，５６〜６．２ ストレプトコッカスフェカリス （Ｓｔｒ、ｆａｅｃａｌｉｓ）　ＵＤ８ｂ０．７８〜１
．２５ エンテロコツカスシュランス （Ｅｎｔ、ｄｕｒａｎｓ）５８ ０７８〜１２５ ストレプトコッカスフェカリス （Ｓｔｒ、　　ｆａｅｃａｌｉｓ）　７５６０７８〜１
２５ エンテロコツカスヒレ （Ｅｎｔ、ｈｉｒａｅ）５５ １．５６〜２５ ストレプトコッカスフェカリス （Ｓｔｒ、　　ｆａｅｃａｌｉｓ）　２３２４１１．２
５〜２．５ エンテロコツカスフェシウム （Ｅｎｔ、ｆａｅｃｉｕｍ）　Ｄ　５９２．５〜６．２ ストレプトコッカスフェカリス （Ｓｔｒ、ｆａｅｃａｌｉｓ）　２１７７７２５〜３．
２ バチルス種 （Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ、） １．５６〜６２ ストレプトコッカス／署イオゲネス （Ｓｔｒ、　　ｐｙｏｇｅｎｅｓ）　３０８０．０９８ クロストリジウムデイフイリル （Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）０３
９〜１５６ ストレプトコッカス７にイオゲネス （Ｓｔｒ、ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ａ　７７供試微生物 デカプラニン 第　　ＩＩ 表 （ＣＯｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　　ｊｅｋｅｉｕｍ
）リステリアモノシトゲネス　　　　　　　　　　１．
５６〜３．２（Ｌｉｓｔｅｒｉａ　：ｎｏｎａｃｙｔｏ
ｇｅｎｅｓ）はゾトストレゾトコッカスオｉｆ　　　　
　　　　　（３，１２〜０．３９（Ｐｅ７ＪｔＯＳｔｌ
”ｅｐｔＯＣＯＣＣｕＳ　Ｓｐ−）ヲロビオニバクテリ
ウムアク不ス　　　　　　０．１２〜０，７８（ＰＴ’
０ｐｌＯｎｌｂａＣｔｅｒｌｌｌｌｎ　ａｃｎｅｓ）λ
・１ａｃ−マクロラフイド　　　；　　Ｍｅｔｂ−ノア
シリンＴｅｔ−テトラサイクリン　；　Ｅｍ　−エリス
ロマイシン°“インビボ”抗菌性保護の研究 デカプラニンは、インビボ系においてスタフィロコッカ
スアウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒ
ｅｕｓ）１１７１［］（メチンリン耐性）で実験的に感
染させた実験室用マウスを試験した場合に良好な活性を
示した。結果は下記の第１１１表に示すとおりである。

スイスマウスの芙験的感染症に対するデカゾラニンおよ
びバンコマイシンの活性接種物１１１）ＨアウンウスＥ
７１０（Ｍｅｔｂす５ＸＩＤ９ｃ：ｐＶママウス投与　
：　”９／に９　Ｘ　’６　（皮下）デカプラニン　　
　　　　１４．２６　　　　　２８．２３バンコマイシ
ン　　　　　１Ｂ、９４　　　　　３２．０１毒性調査 実験室用動物で本発明化合物の急性毒性を評価し７た。

これまでスイスマウスに皮下注射された最大投与量、１
０００ｍｇ／に＆および２０　Ｄ　Ｏｎ＋ｙ　／　ｋ７
の投与量においてさえ急性毒性は全く観察されなかった
。さらに、予想外なことに同一・投与量のバンコマイシ
ンでは注射の部位に組織壊死が見られたが、デカプラニ
ンでは全く異常が観察されなかった。

つ１スター（ｗｉｓｔａｒ）ラットに該化合物を静脈内
注射することによってなされた急性毒性調査では、ＬＤ
５Ｑが２．ｓｏｏａｇ／ｋｙ（静脈内）ヨリ大キいとい
うことが示された。スイス白色マウスに対する上記と同
様の急性毒性調査では、ＬＩ）５Ｑが５．００　Ｄａｙ
／　ｋｙ　（静脈内）より大きいということが示された
。１４日目の終りそしてその後の期間における各動物を
解剖して肉眼で調査したところ、いずれの調査でも形態
学上の変化は全く見られなかった。

これらの結果から、本発明の新規抗生物質すなわちデカ
ブラニンは非常に耐性がありそして経口、筋肉内または
静脈内経路によって投与されうるということが分かる。

従って、本発明はまた化合物デカプラニンを含有する細
菌感染症治療用医薬製剤にも関する。

−４１＝ 本発明化合物はまた、例えばペニシリン類、セファロス
ポリン類、アミノグリコシド類またはキノロン類の系列
から選択されるその他の活性物質との組合せで使用され
うる。

デカプラニ／およびその生理学的に許容しうる酸付加塩
は例えば経口、筋肉内または静脈内投与されうる。デカ
プラニンを活性物質として含有する医薬製剤ｒま、該化
合物を例えば充填剤、乳化剤、潤滑剤、マスキングフレ
ーバー、着色剤または緩衝物質のような希釈剤の薬理学
的に許容しうるビヒクル１種またはそれ以上と混合する
ことにより調製されそして適当な製剤形態例えば錠剤、
コーティング錠剤、カプセルまたは非軽口用に適した懸
濁液もしくは溶液に変換されうる。

ビヒクルまたは希釈剤の例としてはトラガヵント、ラク
トース、タルク、寒天、ポリグリコ−４２＝ −ル類、エタノールおよび水をあげることができる。非
経口用として適当であり好ましいのは水中の懸濁液また
は溶液である。また例えばカプセルのような適当な形態
で活性物質をビヒクルまたは希釈剤なしのそのままで投
与することもできる。

本発明化合物またはその生理学的に許容しうる酸付加塩
の適当な投与量は、体菖約６０ｋｆｌの成人の場合約０
４〜２０ｔ／日、好ましくは０．５〜４ｖ／日である。

単一投与量または一般には多数回投与量を投与すること
ができる。この単一投与量は活性物質を約５０〜４．０
００罫ｇ好ましくは約５００〜２．ＯＤＤｍｇの量で含
有することができる。

以下に本発明を実施例により説明するが、それらは本発
明の範囲を限定するものではない。

実施例　１ 土壌からの培養放線菌ＡＹ−８６，３６９１０の単離ａ
）単離栄養培地の調製 培地１ニゲルコース　　　　・・・ グリセロール　　・・・ Ｌ−アルギニン　・・・ Ｋ２ＨＰＯ４・・・ ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０・・・ ＮａＣ１・・・ 酵母エキス　　　・・・ Ｆｅ２（ＳＯ４）ｓ　　　　　・・・ ＣｕＳＯ４・５Ｈ２０− ＺｎＳＯ４・７Ｈ２０・・・ ＭｎＳＯ４”　７Ｈ２０− 寒　　　天 蒸留水 …　　　　　　　・・・ １．０？ １、Ｏｖ ６ｖ Ｏ，３Ｌ？ ０２？ ２．０２ １０、Ｏｆ・で？ １、０　Ｍ９ ０ｒ９ １、０　ＭＱ １５０コア １リツトル 培地２ニゲルコース Ｌ−アスパラギン に２ＨＰＯ４ ＭｇＳＯＡ・７１■２０ 土壌エキス 寒　　　　　天 蒸　　留　　水 … 培地３＝デンツン カゼーイ／ ＮＯ５ ＮａＣＡ！ Ｋ　２　ＨＰＯ４ ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０ ａＣＯ５ ｅＳＯ４ 寒　　　　　天 蒸　　留　　水 ２、Ｏｆ １．０ｔ ０．５ｆ 〔１５り ００　　ｄ ５０ｔ １０．０ｆ ２、Ｏｆ ２．０２ ０．０２ｒ Ｏ，０１Ｆ １５、Ｏｆ １リツトル ７２〜Ｚ５ 上記各培地は１２１℃でＡ時間滅菌された。

Ｉ３）　　土１懸濁液のｉ／ｌ製 土壌１２な蒸留水中に懸濁し、激しく振とうする。この
土壌を沈殿させ、上澄み液を前記の単離培地の各々に接
種するのに使用する。

Ｃ）単離培地の接種 前記の単離栄養培地の１種５０　ｍｌを含有する各ベト
リ皿にそれぞれ土壌懸濁液１ｍｇを接種する。

ｄ）培養放線菌１７；Ｙ−８６，３６ソ１０の単離前記
接種済みのベトリ皿を３０Ｃで２週間インキュベートし
次いで培養放線菌／／ｉ　Ｙ−８６，，５６９１０を増
殖微生物から単離する。

実施例　２ 発酵によるデカプラニン製造用の培養放線菌属Ｙ−８６
，３６９１０の培養 培養放線菌ＡＹ−８６，３６９１０を下記組成：麦芽エ
キス　・・・　１００を 酵母エキス　・・・　　４０ｉ／ クルコース　・・・　　４０？ 摩　　　　　天　　・・・　　１５０２蒸　　留　　水
　　・・・　　　１リットル−・・・　　　ＺＯ の酵母−麦芽寒天上に保持する。この培地を各試験管に
分配し、１２１℃で６０分間滅菌する。

寒天斜面を調製するために各試験管を傾斜した位置の状
態で冷却する。各寒天斜面に培養菌を接種し次いで良好
な生長および胞子形成が観察されるまで２８′Ｃで１０
〜１５日間インキュベートする。寒天斜面からの栄養菌
糸体上の胞子の蒸留水懸濁液を使用して、それぞれが種
培地１００＋＋＋ｊを含有する５００ｍ１ｃルレンマイ
ヤ一フラスコ５個に接種する。

種培地の組成ニ ゲルコース　　　　・・・　１５．Ｏｒ大豆ミール　　
　　・・・　１５．Ｏｆコーンステープリカー　　・・
・　　　５．０ｒＣａＣＯ，−２，０ｔ ＮａＣｌ　　　　　　　　　　−・・５．　Ｏｆ蒸　留
　水　　　　　・・・　　１リツトルｐａｌ　　　　　
　　　　　・・・　　６．５上記培地を１００−ずつ各
５００−エルレンマイヤーフラスコに分配し、１２１℃
で６０分間滅菌する。これらのフラスコを冷却し、培養
菌を接種しそして３８削スローを有する回転振とう器上
で２４　Ｏｒｐｍにおいて２９℃（±１℃）で７２時間
撮とうする。生長したこの生成物を使用して、それぞれ
が１ｏｌを含有するが、そのうちの８〜１０％（容量）
が稽培地を含有する１５ツガラス製発酵器２個に接種し
て第２の種培地段階を調製する。この発酵は１８０〜２
０　Ｏｒｐｍでの攪拌下、６〜７１／分で通気しながら
２９℃（±１　’Ｃ）で４８時間実施される。

得られた十分に生長した第２の種培地段階を生産培地の
接種用に使用する。

生産培地の組成： ゲキストリン　　　　　２０．　Ｏｆ 大豆粉　　　１０．Ｏｆ 酵母エキス　　　・・・　　　１．０？ＦｅＳＯ４・７
Ｈ２０−０，１？ 蒸　　留　　水　　　　　　　　　　１リットル−・・
・　　　　ＺＯ この発酵器の内容物に挑発泡剤として０．０２５％Ｄｅ
ｓＩＬｌｏｐｈｅｎ■を加える。

上記培地２８０１を６９０１発酵器中に入れ、間接およ
び直接蒸気によって１２１℃で２８分間滅菌する。発酵
器な冷却し、前記の第２の種培養段階（８容量チ）を接
種する。発酵は１０〇〜１２Ｏｒｐｍでの攪拌下に２９
℃（±１℃）で６６〜６８時間行う。通気速度は毎分１
７０１である。

６６〜６８時間抜発酵が終了した時に、６５〜ＺＯの…
である培養炉液を寒天ウェル法（６闘直径）によって試
験するとスタフィロコッカスアウレウス２０９Ｐの阻止
帯の直径は１６龍である。充填された細胞容量は約２０
係である。

抗生物質複合体を台上する収穫された培養ブロスな遠心
分離機にかけて菌糸体を除去し、培養炉液をさらに実施
例４に記載のように処理する。

実施例　３ 発酵によるデカプラニン製造用の培養放線菌属Ｙ−８６
，３６９１０の培養 操作は実施例２の場合と同様であるが、下記の相違を有
する。

生産培地の組成： デンプン　　　　・・・　　２０．Ｃ１大豆ミール　　
　・・・　　１０．ＣｌＣａＣＯ３・・・　　　　　５
．Ｏ？ Ｎａ（Ｊ　　　　　　　　　　　　−・−５，ＯｆＦｅ
ＳＯ４・７Ｈ２００，Ｉ　Ｐ 蒸　　留　　水　　　　　　　　　　１リットル−・・
・　　　　　７０ 上記培地１００７！を１５０１発酵器中に導入し、直接
および間接蒸気によって１２１℃で２８分間滅菌する。

発酵器を冷却しついで前記の第２の種培養段階（８容１
ｊｋ％）を接種する。発酵は１１００−１２０ｒｐでの
攪拌下に、７０〜９０１／分の通気速度で２９℃（±１
℃）において行う。

発酵が６６〜６８時間後に終了した時に培養ブロスの田
はＺＯであり、そしてその培養Ｆ液を寒天ウェル法（６
龍直径）によって試験するとスタフィロコッカスアウレ
ウス２０９Ｐの阻止帯の直径は１７＊ｐである。充填さ
れた細胞容量は２０チである。この培養ブロスは実施例
４のように処理される。

実地例　４ デカゾラニンの単離および精製 実施例２および６で得られた収楊されたブロス約６４５
１を遠心分離によって菌糸体から分離した。得られたブ
ロスヂ液（ｐＨ６，５〜７．０）全全部で２５１のＤｉ
ａｉｏｎ■ＨＰ−２００カラムに通した。これらのカラ
ムを全部で５００１の脱イオン永久に１００１の６０チ
メタノール水溶液で完全に洗浄した。デカプラニンは全
部で２００ノの７０％メタノール水溶液、１００１のメ
タノールおよび２００１の５０％アセトン水溶液で各カ
ラムから溶離された。該溶離物をスタフィロコッカスア
ウレウス２０９Ｐ、Ｓ、アウレウス２０２４０およびミ
クロコツカスルテウスに対して試験することによりその
生物活性をモニターした。これらの活性溶離物を合一し
次いで減圧下に濃縮して有機溶媒を除去した。

デカゾラニンを含有する得られた水溶液（１８０１）を
、脱イオン水中にセットしたＡｍｂｅ　ｒ　１　ｉ　ｔ
ｅ■ＩＲＡ　６８（（Ｊ’−）　５１のカラムに通過さ
せて脱色した。このカラムを脱イオン水１０ｊ？で洗浄
した。

流出液および水洗液を合一し、水中に入れた１０１のＤ
ｉａｉｏｎ■ＨＰ−２００カラムに通した。このカラム
を水洗液が塩素イオンを含有しなしなるまで脱イオン水
４０Ｉ！で洗浄した。次にこのカラムを７０ｊ？の５０
係アセトン水溶液で溶離し、活性溶離物を真空中で濃縮
してアセトンおよび大部分の水を除去した。得られた７
００ｍ１の水溶液を凍結乾燥して半精製デカプラニン１
５ｆを僅かに黄色がかった粉末として得た。

こうして得られた半精製デカプラニンをジメチルオクタ
デシルシリル化シリカゲル（ＲＰ１８）全充填した５、
５　Ｘ　５３　ｃＲＬａｂｏｍａｔｉｃ■ガラス製カラ
ムで中圧液体クロフカラムフィー（λ４ＰＬＣ）にかけ
た。このカラムは最初、脱イオン水中に溶解したＮＨ４
０ＡＣの０．１Ｍ溶液でセットされ次にＣＨ３ＣＮとこ
のＮＨ４０ＡＣ水溶液との混合物で溶離された。

その際ＣＨ３ＣＮの量は２％（１，２１）、４チ（５，
６Ａ’）、６％Ｃ２，４１）、１０チ（２，４７’）お
よび１５係（２，８Ｌ）であった。流速は３０−７分に
維持されモして５００　ｔｎｔのフラクション中に集め
られた溶離物を２２０　ｎｍでの謀検出並びに細菌生物
検定によってモニターした。デカプラニンはＮＨ４０Ａ
ｃ水溶液中の２チおよび４％ＣＨ３０Ｎによってカラム
から溶離された。これらの溶離物を合一しついで減圧下
に濃縮してＣＨ３ＣＮを除去した。

得られたデカプラニン水溶液を２回蒸留の水中にセット
したＤｉａｉｏｎ■ＨＰ−２０６００ｄのカラムに通し
た。このカラムを２回蒸留した水２Ａ’で洗浄し次に５
０チアセトン水溶液４／で溶離した。これらの活性溶離
物を減圧下に濃縮してアセトンを除去しついで凍結乾燥
してデカプラニン８４２を僅かにピンクがかった色合い
を有する白色粉末として得た。

実施例　５ デカゾラニン塩の製造および該塩の遊離塩基への再変換 塩基性化合物であるデカプラニンは強酸例えばＨＣｌ５
Ｈ２ＳＯ４、ＣＦ３ＣＯ０Ｉ、　ＣＨ３ＣＯ０Ｈでの処
理によってその酸付加塩に変換されつる。

蒸留水１〇−中に溶解したデカプラニン（遊離塩基）　
１００　ＩＩｇにｌＮＨＣｌ６４μノを０℃で加え次い
で室温で３時間攪拌しそして凍結乾燥して塩酸塩９５　
ｍｇを製造した。このデカプラニン・ＨＣｌ塩の塩累分
析はモノ塩酸塩であることを示した。

デカゾラニン塩は陰イオン交換樹脂での処理によって遊
離塩基に再変換されうる。

蒸留水２０〇−中におけるデカゾラニン・ＣＦ３ＣＯ０
Ｉ（塩（２００１ｇ）を攪拌下に室温で６０分間水中の
Ｄｏｗｅｘ　１２　Ｘ　（ＯＡｃ−）　５　？で処理し
ついで濾過した。Ｆ液を凍結乾燥してデカプラニン遊離
塩基１４　Ｄ　Ｑを得た。

【図面の簡単な説明】

図面はデカプラニンの物理学的および分光学的性質を示
すものであって、第１図は高速液体クロマトグラフィー
（ＨＰＬＣ）のクロマトグラム、第２図はＵＶスペクト
ル、第６図はＩＲ（ＫＢｒ）スペクトル、第４図は’　
Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ　、　ｄ６−ＤＭＳ○）そし
て第５図は”Ｃ−ＮＭＲ（Ｉ　Ｄ　ＯＭ）Ｔｚ　、　Ｈ
２０／ｄ６−ＤＳＭＳ９：１．３４３Ｋ）によるデータ
を示している〇第 図 デカプラニンのＵＶスペクトル

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表される化合物デカプラニン並びにその自明な化学的
   同等物および生理学的に許容しうる塩。 ２）炭素源、窒素源、無機栄養源および鉱酸塩を含有す
   る水性栄養培地中において好気性条件の下に培養放線菌
   Ｙ−８６，３６９１０（ＤＳＭ４７６３）を培養するこ
   とからなる請求項１記載の化合物の製造方法。 ３）培養を１８〜４０℃で行う請求項２記載の方法。 ４）培養を５．５〜８．５のｐＨで行う請求項２または
   ３記載の方法。 ５）培養を２９℃（±１℃）の温度および約６．５のｐ
   Ｈで行う請求項２〜４のいずれかの項に記載の方法。 ６）培養を６６時間以上実施する請求項２〜６のいずれ
   かの項に記載の方法。 ７）培養を液内培養として実施する請求項２〜６のいず
   れかの項に記載の方法。 ８）所望により慣用の補助剤および／またはビヒクルと
   一緒に請求項１記載の化合物を含有する製剤。 ９）抗生作用を有する製剤製造用の請求項１記載の化合
   物の使用。 １０）培養放線菌Ｙ−８６，３６９１０（ＤＳＭ４７６
   ３）。