JPH02166166A - ルイス塩基の混合カルコゲン化ピリリウム塩 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 この発明は、新規なビリリウム色素およびそのような色
素の製造方法に関する。

〔従来の技術およびその課題〕

過去において、カルコゲノビリリウム類は次の２種のス
キームのいずれかを使用して製造されてきた。

旦 これらの上式中、Ｒは各種置換基を表しており、Ｘ、お
よびＸ２は同一または相違するカルコゲンを表しており
、そしてＺはアニオンを表わす。

これらの反応は、一般に比較的純粋な結果物を生成する
のに成功していた。しかしながら、本発明者は、特殊な
ケースではＸＩとＸ２が混合されるとき、すなわちＸｌ
がＳｅまたはＴｅでＸ２が異なったカルコゲン化物であ
り、Ｚがルイス塩基である場合が存在することを見い出
した。このようなケースでは、最終生成物は不安定であ
り、もとの出発原料のごちゃまぜになった混合物まで分
解して逆戻りする。従って、いくらよくてもほんの５０
％純粋な目的生成物が得られるにすぎない。

医薬組成物では、このような結果は許容できない。

これは、Ｚ−が最大の水溶性を有するハロゲン化物であ
る場合には、ハロゲン化物がほどよいルイス塩基となる
ので特に不適当である。無論、不純物は最終生成物を、
例えばガン療法に使用する場合の効能を失墜させるであ
ろう。

前記構造ＡおよびＢの化合物は、ＸｌがＳｅでＸ２がＴ
ｅである場合を教示している。しかしながら、これらの
ケースでは、Ｚは生成物ＡおよびＢの純度を危険にさら
すようなルイス塩基でなかった。これらに触れている例
（２−がＢＦ４−またはＣ２Ｏ４−である）は、米国特
許第４，５８４．２５８号明細書に見られる。

この発明の目的は、混合ＳｅおよびＴｅ原子ならびにル
イス塩基アニオンを有する相当純粋なビリリウム色素の
製造方法を提供するにある。

〔発明の構成〕

この発明の−の態様によれば、発明の目的は、次式 （上式中、Ｒ’、Ｒ’、Ｒ’およびＲ１′は、水素原子
および炭素原子１〜１２個のアリール基、ヘテロアリー
ル基もしくはアルキル基から選ばれる基であり；Ｒ”、
Ｒ”、Ｒ’およびＲ７は、炭素原子１〜１２個のアルキ
ル基、了り−ル基、アルキルチオ基、アリールチオ基、
アルキルセレノ基、アリールセレノ基、アルキルテルロ
基もしくはアリールテルロ基、ならびに水素原子、ハロ
ゲン原子、ヒドロキシル基、アルコキシル基およびアミ
ノ基から選ばれる基であり；Ｒ’ｌＲ”およびＲｌ　ｌ
は、炭素原子１〜１２個のアルキル基およびアルコキシ
ル基、ならびに水素原子、ハロゲン原子およびシアノ基
から選ばれる基であり；ｎは、０，１または２であり；
ＸＩおよび＞（ｚは、一つがＳｅまたはＴｅのいずれか
である以外は相互に相違するカルコゲン化物であり、そ
して２−はルイス塩基を表す）で示される医薬的に純粋
形のセレノビリリウム色素またはテルロビリリウム色素
によって達成される。

この発明のもう一つの態様によれば、この発明の目的は
、次の工程を含んでなる前記のような色素の製造方法に
よって達成される。

（ａ）次式 （上式中、各Ｒ’ｌＲ”１Ｒ３１Ｒ’　からＲ”、ｎ、
Ｘ’およびＸ２は前記と同じ意味を表すが、Ｚ−はルイ
ス塩基以外のアニオンを表す）で示される化合物を選択
する工程、ならびに（ｂ）前記非ルイス塩基アニオンを
ルイス塩基アニオンで交換するのに十分な時間、ルイス
塩基含有のイオン交換樹脂と前記化合物を混合する工程
。

本発明者は、ガン細胞、より具体的には分化したカルｙ
ノーマ細胞およびメラノーマ細胞に対する光力学療法（
ｐｄ　ｔ　）で特に有効な新規ビリリウム色素ならびに
それらの製造方法を見い出した。これらはまた、光電導
、フォトレジスト、リソグラフィまたは光記録組成物に
て利用することができる。

本発明は、１つがＴｅまたはＳｅのいずれかである混合
カルコゲン化物を含有する医薬的に純粋なビリリウム色
素に特徴を有する。好ましくは、色素が次の構造式で示
される。

上式中、Ｒ’、Ｒ’、Ｒ’　およびＲ１′は、水素原子
、炭素原子６〜１２個のアリール（例えば、フェニルお
よびナフチルなど）基、炭素原子６〜１２個のへテロア
リール（例えば、ピリジル、チエニルおよびフリルなど
）基、または炭素原子１〜１２個のアルキル（例えば、
メチル、エチル、プロピル、１ｓｏ−プロピル、ブチル
、ｔ−ブチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルおよびド
デシルなど）基から選ばれる基でありｉＲ”ｌＲ’ｌＲ
＆およびＲ７は、水素原子、アミノ基、ヒドロキシル基
、ハロゲン（例えば、塩基、フッ素、ヨウ素および臭素
）原子、あるいはアルキル基、アリール基またはアルキ
ルもしくはアリール誘導体（例えば、アルキルチオ、ア
ルコキシ、アルキルセレノ、アリールセレノ、アルキル
テルロもしくはアリールテルロ）基であってこれらの全
てが炭素原子１〜１２個を有する基（例えば、メチル基
、エチル基、プロピル基、ヘキシル基、ドデシル基、フ
ェニル基、ナフチル基、メチルチオ基、ヘキシルチオ基
、ドデシルチオ基、フェニルチオ基、これらに対応する
セレノの等価な基、これらに対応するテルロの等価な基
、メトキシル基およびプロポキシル基など）から選ばれ
る基であり、ＲＪｌ＠およびＲｔ＋は、水素原子、ハロ
ゲン（例えば塩素、フッ素、臭素およびヨウ素）原子、
シアン基、ならびに炭素原子１〜１２個のアルキルおよ
びアルコキシル（例えば、メチル、エチル、プロピル、
１ｓｏ−プロピル、ブチル、Ｌ−ブチル、ヘキシル、ヘ
プチル、オクチル、ドデシル、メトキシ、プロポキシ、
ブトキシ、Ｌ−ブトキシ、ヘプトキシ、およびドデシル
オキシなど）基から選ばれ；ｎは、０．ｌまたは２であ
り、ＸＩ　およびＸ２は前記のような基であり、そして
Ｚは水溶性ルイス塩基である０本明細書で使用する「医
薬的に純粋」とは、ＦＤＡによって許容される純度の水
準を意味し、一般に不純物が色素重量の２％を越えない
、すなわち合成された色素について少なくとも９８％が
前記で特定した構造の色素であることを意味する。不純
である色素は、いまだｐｄｔの効能を有するかも知れな
いが、これらは各個別の成分ならびに組み合わせ物につ
いてＦＤＡの認可が必要であり、結局、不必要な経費が
かかり医薬的に純粋な色素を使用して得られる結果より
も満足度は少ないはずである。

また、本明細書で使用するところの１アルキル」は、例
えばヒドロキシル基によって置換されたアルキルを含む
。

利用できるルイス塩基アニオンとしては、塩化物および
臭化物のようなハロゲン化物ならびにｃｕｓｓｏ！−が
挙げられる。

従って、この発明で有用なビリリウム類としては、第１
表に列挙されるビリリウムと前記の利用できるアニオン
のいずれかによって形成される塩が挙げられる。

ビリリウム類の最も好ましい例としては次のものが挙げ
られる。

男−」−一表 １゜ ２゜ ３゜ ２．６−ジーｔ−ブチル−４−〔３ （２，６−ジーＬ−ブチル−４Ｈ−テルロビラン−４−
イリデン）−１−プロ ペン−１−イル］セレノビリリウムク ロライド ２．６−ジーｔ−ブチル−４−（３− （２，６−ジーも一ブチルー４Ｈ−テルロビランー４−
イリデン）−１−プロ ペン−１−イルコチオピリリウムクロ ライド ２．６−ジーｔ−ブチル−４−（３− （２，６−ジーｔ−ブチル−４Ｈ−テルロピラン−４−
イリデン）−１−プロ ペン−１−イル〕ビリリウムクロライ 髪−」−一表（続き） 立聚昼号 ４、　　　２．６−ジーｔ−ブチル−４−（３−（２，
６−ジーＬ−ブチル−４日−セレノピラン−４−イリデ
ン）−３−メチ ル−１−プロペン−１−イル〕テルロ ピリリウムクロライド ５、　　　２．６−ジーｔ−ブチル−４−（３−（２，
６−ジーｔ−ブチル−４Ｈ−セレノピラン−４−イリデ
ン）−１−プロ ペン−１−イルコチオピリリウムブロ マイド ６、　　　２．６−ジーも一ブチルー４−　（３−（２
，６−ジーｔ−ブチル−４Ｈ−セレノピラン−４−イリ
デン）−１−プロ ペン−１−イル〕ピリリウムクロライ 】ニート−表（続き） 一１目Ｅ号 ７゜ ８゜ ２．６−ジーｔ−ブチル−４−（２。

６−ジー【−ブチル−・４Ｈ−チオビラン−４−イリデ
ンメチル）−３−ヨウ ドテルロピリリウムクロライド ２．６−ジー（４−ヒドロキシ−ｎ− ブチル）−４−（２，６−ジーｔ−ブ チル−４Ｈ−セレノピラン−４−イリ デンメチル）テルロビリリウムクロラ イド 倫二コＫ Ｚがルイス塩基（例えば、ハロゲン化物またはメシル化
物）であり、ＸｌおよびＸｔが相違しているので、相当
純粋な生成物を得るには次の方法を使用することが必要
である。すなわち、ルイス塩基アニオン以外のアニオン
を有する目的の色素を、ルイス塩基を含有するイオン交
換樹脂と混合し、そしてイオン交換を起こさせる。さら
に、この方法を使用してＸｌおよびＸｔが同一である前
記色素のルイス塩基塩さえも製造することができる。

製造■ 出発原料、すなわち、ルイス塩基以外のアニオンを有す
る色素は、次の一触的な２種の反応に沿って製造された
。

上記各式中、Ｒ’　ｚＲ”＋　Ｘ’、Ｘ”、ｎおよびＺ
は、Ｚがルイス塩基以外のもの、例えば、テトラフルオ
ロボレート、ヘキサフルオロホスフェートまたはバーク
ロレートであることを除いて前述のような基から選ばれ
る。

の　ローゼ 色素１のバークロレート塩（０，１９ｇ　、　０．２７
ミリモル）とアンバーライト（＾ｍｂｅｒｌｉｔｅ）Ｉ
ＲＡ−４００（ＩＪ　）イオン交換樹脂１．５ｇを、メ
タノール７５１Ｒ１中で４時間撹拌した。イオン交換樹
脂を濾取し、濾過ケークをメタノール１０ｄで洗浄した
。合わせた濾液を前記イオン交換樹脂１．５ｇと共に、
さらに２時間撹拌した。イオン交換樹脂を濾取し、濾過
ケークをメタノール１０ｒｎｉで洗浄した。合わせた濾
液を減圧下で濃縮した。残渣をアセトニトリル５ｉに溶
解し、次いでエーテルで５０ｍまで希釈した。冷却する
ことにより色素を黄緑の結晶として沈殿させ、濾取し、
エーテルで洗浄し、次いで乾燥させて色素０．１４ｇ　
（８２％）を得た。

ｍｐ２１３．５〜２１５°Ｃ１λ−Ｘ（ＣＨｚＣＩｌｚ
）７８６ｎｍ（ε３０４．０００）、　ＩＦＩ　ＮＭＲ
（ＣＤ３０Ｄ）　　６８．８７（ｔ、　ＩＬ　Ｊ−１３
，３）ｔｚ）、　７．７８（ｂｒ　ｓ、　４８）、　６
．７６（ｄ、　ＩＨ，Ｊ＝１３．３＆）、　６．７１（
ｄ、　１Ｂ、　Ｊ＝１３．３Ｈｚ）、　１．４７（ｓ。

２７Ｈ）、　１．４５（ｓ、　９）１）、元素分析Ｃｔ
ｑＨａｘＳｅＴｅ−Ｃ１としての計算値：　Ｃ，５５，
０；　Ｈ，６，８；　Ｃ１、５，６゜実験値：　Ｃ，５
５，２；　Ｈ，６，８ｉ　ＣＪ　、　５．５゜（８２％
の収得物は、完全に「医薬的に純粋」なものから成り、
１８％の欠損は、この方法における材料の損失に起因す
るにすぎない、実際に得られた色素は前述の「医薬的に
純粋」な基準に合致した。） １゛告２１．２のクローイド塩 色素２のへキサフルオロホスフェート塩（０，０７０ｇ
、０．１０ミリモル）をメタノール２ｏ−に溶解した。

アンバーライトＩＲＡ−４００（ＣＩりイオン交換樹脂
１ｇを加えた。得られた混合物を周囲温度で４時間撹拌
した。このイオン交換樹脂を濾取し、濾過ケ−りをメタ
ノールｌＯｄで洗浄した。合わせた濾液を濃縮した。残
渣を、アセトニトリル１−とエーテル２０ｄから再結晶
した。冷却沈殿した青銅色の針状晶を濾取し、エーテル
で洗浄し、次いで乾燥して色素２を０．０４８ｇ　（８
１％）得た。

ａ、ｐ、２００．５〜２０３．５°Ｃ０λ。□（水）　
７４５Ｄｍ（ｅｌｌｏ、０００）、　’ＨＮＭＲ（ＣＤ
３０Ｄ）　　δ８．７？（ｔ、　ｉｌｌ、　Ｊ＝１３Ｈ
ｚ）、　７．９３（ｂｒ　ｓ、　２１１）、　７．７（
ｂｒ　ｓ、　２）１）、　６．６９（ｄ、　２１ｆ、　
Ｊ−１３）−［ｚ）、　１．４８（ｓ、　１８１ｔ）、
　１．４２　（ｓ。

１８１Ｄ、元素分析Ｃｔｑ］ｌ＜ｘｓＴｅｃｌとしての
計算値二Ｃ，５９，４；　１１．７．４　；　Ｃ１、６
，Ｑ、　　実験値−〇。

５９．３　；　Ｉ＋、　７．４　；　Ｃ１、５，８゜２
．６−ジーｔ−ブチル−４−メチルセレノピリリウムク
ロライド（６，ＯＯｇ　、　１８．８ミリモル）と（２
，６−ジーｔ−ブチルテルロピラン−４−イリデン）ア
セトアルデヒド（６，７２ｇ　、　１９．４ミリモル）
を、無水酢酸２Ｏｄ中で１１分間蒸気浴上にて加熱した
。反応混合物を周囲温度に冷却し、アセトニトリル１５
ｄを加えた。得られた溶液をグラスウールのパッドを通
して濾過した。濾液をエーテル２５０ｄで希釈し、得ら
れた溶液を冷却した。青銅色結晶として沈殿した色素を
濾取し、エーテルで洗浄し、次いで乾燥して色素１０．
５１ｇ　（８８％）を得た。’ＨＮＭＲスペトクルは、
生成物が色素２ａ対色素２対色素２ｂの１対２対１の混
合物であることを示した（色素２ａと色素２ｂは、色素
の２個のへテロ原子環の両方にそれぞれＳｅまたはＴｅ
を有する類縁化合物である）。反応を通じてヘテロ原子
の無秩序な奪い合いが生ずる場合には、ヘテロ原子の統
計的な分布から前記混合は予測される。

尖几■ 哺乳類における分化したカルシノーマまたはメラノーマ
を処理する光力学療法では、本発明の色素を製薬上許容
されうる担体に添加する場合特に有用である。製薬上許
容されうる担体は、ビリリウム色素を十分に溶解しうる
溶媒のごとき各種担体から選ぶことができる。適当な担
体溶媒の好ましい例には、最少量（色素１００■／９５
％エタノールのＩｎ１）をリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ　）
で希釈して１１濃度の色素の塩を生ずるものが含まれる
。さらに他の有用な例としては、水中５％デキストロー
ス溶液、またはポリエトキシ化ヒマシ油のようなポリオ
ールとエタノールの混合物（ｒＤｉｌｕｅｎｔ　ｋ１２
」として米国国立ガン研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃａ
ｎｃｅｒ　Ｉｎ−５ｔＨｕｔｅ）から人手可能］が挙げ
られる。

さらに別の許容可能な溶媒としては、膀胱的処理用のジ
メチルスルホキシド（Ｄ？ｌ５Ｏ）ならびに腹腔内（１
，Ｖ、）および静脈内Ｂ、ｐ、）注射用等張生理食塩水
が挙げられる。

さらに有用なその他の担体としては以下のものが挙げら
れる。

ゼラチンのような材料、シェークロースもしくはラクト
ースのような天然の糖類；レクチン、ペクチン、スター
チ（例えば、コーンスターチ）、アルギン酸、チロース
（ｔｙｌｏｓｅ）　；タルク、セキショウシ、シリカ（
例えば、コロイドシリカ）；グルコース、セルロース、
セルロース誘Ｒ体Ｃ例えば、セルロースの水酸基を低級
脂肪族アルコールおよび／もしくは低級飽和オキシアル
コールで部分的にエーテル化したセルロース（例えば、
メチルヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロー
ス、ヒドロキシエチルセルロース）］；ステアリン酸エ
ステル（例えば、ステアリン酸メチルおよびステアリン
酸グリセリル）；炭素原子１２〜２２個を有する脂肪酸
、特に飽和酸のマグネシウム塩およびカルシウム塩（例
えば、ステアリン酸カルシウム、ラウリン酸カルシウム
、オレイン酸マグネシウム、バルミチン酸カルシウム、
ベヘン酸カルシウムおよびステアリン酸マグネシウム）
；特に植物起源の乳化剤、油脂ならびに脂肪、（例えば
、ピーナツ油、ヒマシ油、オリーブ油、ゴマ油、綿実油
、トウモロコシ油、麦芽油、ヒマワリ種子油、タラ肝油
）、飽和脂肪酸（Ｃ＋ｚｌｌｚ４０ｚからＣ１１ＩＨＩ
＆Ｏ□までおよびそれらの混合物）のモノグリセリド、
ジグリセリドおよびトリグリセリド（例えば、モノステ
アリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、トリ
ステアリン酸グリセリル、トリラウリル酸グリセリル）
；製薬上適合性の一価もしくは多価アルコール（例えば
、グリセリン、マンニトール、ソルビトール、ペンタエ
リスリトール、エチルアルコール、ジエチレングリコー
ル、ジプロピレングリコール、ポリエチレングリコール
および他のポリアルキレングリコール）：ならびにこれ
らのアルコールおよびポリグリコールの誘導体、飽和お
よび不飽和脂肪酸（炭素原子２〜２２個、特に１０〜１
８個）と−価の脂肪族アルコール（炭素原子１〜２０個
のアルカノール）または多価アルコール（例えば、グリ
コール、グリセリン、ジエチレングリコール、ペンタエ
リスリトール、ソルビトール、マンニトール、エチルア
ルコール、ブチルアルコール、オクタデシルアルコール
など）とのエステル（例えば、ステアリン酸グリセリル
、パルミチン酸グリセリル、ジステアリン酸エチレン、
ジ酢酸エチレン、モノアセチン、トリアセチン、オレイ
ン酸グリセリル）；エーテル化された多価アルコールの
エステル：安息香酸ベンジル；ジオキソラン；グリセリ
ンホルマール；テトラヒドロフルフリルアルコール；ラ
クタミド星ラクテート（例えば、乳酸エチル）：炭酸エ
チル：シリコーン（特に、中粘度ジメチルシロキサン）
；ならびに炭酸マグネシウムなど。

さらに他の添加剤および組成物の調製方法は、現存する
文献に見い出すことができる。

利用可能な本色素の供給方法としては、１．Ｖｌ、Ｐ、
膀胱内注入および動脈内注射が挙げられる。

投薬水準は、ガンに対して使用されるビリリウム色素に
依存する。これらの用量決定は、Ｇｏｏｄｍａｎおよび
Ｇｉｌｍａｎの“Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｏｉａｃｏｌｏ　１
ｃａｌ　Ｂａ５ｉｓ　ｏｆハ肛鉦競旦亜″　（第６版）
　、１６７５〜１７３７ページ、副題″’Ｄｅｓｉｇｎ
　ａｎｄ　Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄｏｓａ
ｇｅ　Ｒｅ−ｇｔｍｅｎｓ’　　（Ｍａｃｍｉｌｌａｎ
　Ｐｕｂｌｔｓｈｉｎｇ　Ｃｏ、、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ
。

１９８０）に記載される方法を使用し当業者によって決
定されるであろう。普通に経験したｐｄｔ剤に対する投
薬ならびに臨床試験と動物のプロトコールで見い出され
たＬＤ、。の投薬量によれば、ヒトの消費に対する投薬
量は体重１ｋｇ当たり１．０〜７．５■であることが推
測されるので、この水準を越えないような各種の注入プ
ロトコールを使用し、次いで適当な時間内に光線療法を
施こすことができる。

ガン処理剤としての機能に関するこの発明の色素の効能
は、空気飽和溶液で一重項酸素を発生させる色素の反射
能力に一部存在する。（本明細書で使用する「空気飽和
溶液」とは、大気にさらした色素溶液を意味する。）各
種のカルコゲノビリリウム色素の研究では、セレンまた
はテルル原子を含有するそれらの色素だけが、照射によ
りある程度感知しうる一重項酸素の発生を示すにすぎな
い。偶然にも、セレノビリリウム色素およびテルロビリ
リウム色素は、それらのビリリウム類縁化合物およびチ
オピリリウム類縁化合物に比し、赤色域にシフトしてい
る吸収極大を有する。第■表は、カルコゲノビリリウム
色素の例、−重項酸素を発生するためのそれらの量子効
率およびそれらの吸収極大を示す（この表中、Ｍｅはメ
チル基であり、ｔ−ＢＵは第三級ブチル基を表す）。

ム」ユ□工Ｌ ＊推定 ］−」Ｌ−麦 ０、ｏ９ ０．０７ ０．０６ ０．０１ ０．００８ ｏ、ｏｏｓ ７８６ｎｍ（Ｃ１ｌｘＣｊ！　Ｊ ７４５ｎａ＋（ＲｘＯ） ７００ｎｍ　０１　ｇｏ） ８Ｑ３ｎｍ（ＣＨｚＣｊ！ｉ） ７００ｎｍ（ＩＩｚＯ） ６６０ｎ曽（ＲｘＯ） これらのすべてが少な（ともｏ、ｏｏｓであるΦ値を有
する。また、第■表のλ１．ヨは各ケースにおいて６５
０ｎｍ以上であり、殆どのケースで７００ｎｍを上回る
。

使用される波長が７００ｎｍ以上（すなわち、殆どの体
組成へ有効に透通ずる波長）である場合には、ｐｄｔに
とって必要な光線照射量は、少なくとも約１５Ｊ／ｃ＋
ａが一般的である。色素がΦ値としてほんの０．００５
またはわずかに大きい場合には、量を増加することが有
用である。照射波長は、λＩＩＩＫに調和されるように
選ばねばならない。好ましい照射方法には、常用されて
いるアルゴン−ボンブト（ａｒｇｏｎ−ｐｕｍｐｐｅｄ
）色素レーザーのごときレーザー例えば、４００趨の石
英光ファイバーが連結されたレーザー色素ＬＤＳ７５１
または７００ｎｍを越える（例えば、８００±２ｎ！Ｉ
）の固定された波長を存するレーザーダイオードが挙げ
られる。また、７３０ｎｍを下回る光を遮断する遮断フ
ィルターを備えるタングステンライトも有用である。

〔実施例〕

以下の例は、前述のガンを処理する場合の本発明の詳細
な説明するものである。

空気飽和メタノール中の照射により一重項酸素を発生す
る第１表由来の各種セレノビリリウム色素およびテルロ
ビリリウム色素は、光力学療法剤としてのそれらの有効
性について咄乳頻細胞培養物により生体外試験を行った
。これらの結果を第■表にまとめた。試験した細胞系に
は、Ｕ２５１　（マウスグリオーマ）、Ｂ−１６メラノ
ーマ（マウスグリオーマ）およびＦＡＤＵ　（ヒト扁平
上皮細胞性カルシノーマ）を含めた。対照としては、）
ＩＳＫＩ　（正常なヒト皮膚線維芽細胞）およびＣＶ−
１（正常なサル腎細胞）を使用した。

生体外細胞培養物は、ウシ胎児血清を１０％まで補足し
、Ｌ−グルタミンを４．５　ｍＭに調節した抗生物質を
含まない増殖培地ＤＭＥＭ　−Ｆ１２で増殖させた。

ＤＭＥＭ　−Ｆ１２は、ダルベツコ変性イーグル培地（
Ｇｉｂｃｏ）とハム（Ｈａｍ）の栄養混合物Ｆ１２（Ｇ
ｉｂｃｏ）の１対ｌ混合物である。多ウェルプレートを
、ウェルからウェルへの光散乱を最小にする目的で各ウ
ェルのウェル内部にスプレー塗料で塗布して黒くした後
、細胞を接種した。サブコンフルエント細胞培養物をト
リプシン処理し、次いでウェル２Ｃ！！当たり１０’細
胞濃度でプレートを作成した。湿った大気中３７°Ｃで
一夜細胞をインキヱベーションした後、色素および／ま
たは光線にさらした。

カルコゲノビリリウム色素の原液を、暗所で９５％エタ
ノールを用いる超音波処理によりｌ　ｍＭｆｉ度で調製
した。これらの原液を増殖培地で所定濃度まで希釈した
。色素は、照射時まで全実験操作を通じて光線から保護
した。色素注入と露光間の時間の長さは、約０．３５時
時間的０．５時間であった。

色素を露光するための標準的な時間は、１時間とした０
色素含有培地を新鮮な増殖培地と取り替えた後に照射し
た。１８〜２４時間後、代謝活性の残存する細胞をＭＴ
Ｔ比色分析および／または細胞計数により評価した。ア
ッセイは、一般に１０％未満の標準偏差を有する三重反
復にて実施した。殺パーセントは、ＭＴＴ分析に対する
処理試料の平均光学濃度と対照（未処理）試料のそれと
から、または細胞計数法に対するそれらの２群の平均細
胞数から決定した（第■表、参照のこと）。

３種の光源に由来する近赤外光線および可視光線をこれ
らのアッセイに用いた。タングステンライト（１００〜
２００ｍＷ）を使用して低ｍ−の複数波長効果を評価し
た。レーザー色素ＬＤＳ７５１（Ｅｘｃｉｔｏｎ　Ｃｈ
ｅ−ｍｔｃａｌ　Ｃｏ、、　Ｉｎｃ、、　ＤａｙＬｏｎ
、　０ｈｔｏ）とピーク波長７８５±５ｎｍを有するア
ルゴン−ボンブト色素レーザー（Ｍｏｄｅｌ　１５０　
Ａｕｒｏｒａ＋　Ｃｏｏｐｅｒ　Ｌａ５ｅｒｓｏｎｔｃ
ｓｔＩｎｃ、、　５ａｎｔａ　Ｃ１ａｒａ、　Ｃａ１ｉ
ｆｏｒｎｉａ）を均一モード分布の光強度を与えるマイ
クロレンズアセンブリーに、１４の石英光ファイバーで
接続した。３番目に、固定された波長８００±２帥を有
するレーザーダイオードは、近赤外線で光エネルギーを
供給した。このダイオードは、透明で磨いた末端を有す
る４００ｊｎｎの石英光ファイバーで連結した。レーザ
ー照射試験では、ウェル底面から前記ファイバーの先端
の距離は、レーザー照射線が標的領域２ＣＩＩＩを正確
に覆うように調整した。ディスクルパワー（ｄｉｓｔａ
ｌ　ｐｏｈｅｒ）メータ（Ｍｏｄｅｌ　２０００＋　Ｃ
ｏｈｅｒｅｎＬ。

Ｉｎｃ、　＊へｕｂｕｒｎ＋　Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａ）
を使用してレーザー光源のエネルギー出力を測定した。

。 １」Ｌｌ ｌ ５Ｘ１０−” １ｓＫＩ Ｃ１５Ｘ１０−Ｉ　　　ＣＶＩ　　　　　１５　　１０
０．０９９．ＯＡＣｌ　　５Ｘ１０−”　　　υ２５１
　　　１５　　　　Ｂ５．０６５．ＯＣＣ１５Ｘ１０−
Ｉ　　　Ｂ−１６１５９９，００，０３ＡＩＸＩＯ−’ ５ＫＩ ３　　　（Ｊ　　ｌＸｌ０−’　　　ＣＶｉ　　　　　
１５　　１００．０９９．ＯＡ３　　　Ｃ７１ＸＩＯ−
７Ｕ２Ｓ１　　　　１５　　　９０．（１５８，０Ａ３
　　Ｃβ　　ｌＸｌ０−’　　　Ｂ−１６１５９９，０
０，Ｉ　　　　Ａ６　　　ＣＩ　　　ｌＸｌ０−’　　
　ＣＶＩ６　　　Ｃｊ　　Ｉ　Ｘｌ０−”　　　Ｂ−１
６６ＣＪ　　Ｉ　Ｘｌ０−’　　　ＦＡＤＵ１５　　１
００．０　９９．０ １５　　　９９．０　０．２ １５　　　９９．０　０．２ ａ　）　ｌｌ５ＫＩ、正常なヒト皮膚線維芽細胞；、ｃ
ｖｌ、正常なサル腎細胞、　０２５１、マウスグリオー
マ；Ｂ−１６、マウスグリオーマ；　ＦＡＤＵ、ヒト扁
平上皮細胞。

ｂ）Ａ、約７３０ｎｍで遮断するフィルターを備えたタ
ングステン光源、Ｂ、７８５±５ｎｍに発光極大を有す
る色素レーザー；Ｃ，８００±２ｎｍに発光極大を存す
るダイオード・レーザー。

第■表から、問題のガン細胞の殆どが本発明の色素によ
って効率的に殺されるが、それは光エネルギーを照射し
た後に限られることが理解できる（暗所での生存率水準
を越えて、光線照射後の生存率が少なくとも５％減少す
ることが光線療法の確立には必要である）。

れらを−層容易に水溶性とするアニオンを伴う点にある
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式中、Ｒ＾１、Ｒ＾４、Ｒ＾５およびＲ＾８は、水
   素原子および炭素原子１〜１２個のアリール基、ヘテロ
   アリール基もしくはアルキル基から選ばれる基であり、
   Ｒ＾２、Ｒ＾３、Ｒ＾６およびＲ＾７は、炭素原子１〜
   １２個のアルキル基、アリール基、アルキルチオ基、ア
   リールチオ基、アルキルセレノ基、アリールセレノ基、
   アルキルテルロ基もしくはアリールテルロ基、ならびに
   水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、アルコキシ
   ル基およびアミノ基から選ばれる基であり、Ｒ＾９、Ｒ
   ＾１＾０およびＲ＾１＾１は、炭素原子１〜１２個のア
   ルキル基およびアルコキシル基、ならびに水素原子、ハ
   ロゲン原子およびシアノ基から選ばれる基であり、ｎは
   、０、１または２であり、Ｘ＾１およびＸ＾２は、一つ
   がＳｅまたはＴｅのいずれかである以外は相互に相違す
   るカルコゲン化物であり、そしてＺ＾−はルイス塩基を
   表す）で示される医薬的に純粋形のセレノピリリウム色
   素またはテルロピリリウム色素。 ２、（ａ）次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式中、Ｒ＾１、Ｒ＾４、Ｒ＾５およびＲ＾６は、水
   素原子および炭素原子１〜１２個のアリール基、ヘテロ
   アリール基もしくはアルキル基から選ばれる基であり、
   Ｒ＾２、Ｒ＾３、Ｒ＾６およびＲ＾７は、炭素原子１〜
   １２個のアルキル基、アリール基、アルキルチオ基、ア
   リールチオ基、アルキルセレノ基、アリールセレノ基、
   アルキルテルロ基もしくはアリールテルロ基、ならびに
   水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、アルコキシ
   ル基およびアミノ基から選ばれる基であり、Ｒ＾９、Ｒ
   ＾１＾０およびＲ＾１＾１は、炭素原子１〜１２個のア
   ルキル基およびアルコキシル基、ならびに水素原子、ハ
   ロゲン原子およびシアノ基から選ばれる基であり、ｎは
   、０、１または２であり、Ｘ＾１およびＸ＾２は、一つ
   がＳｅまたはＴｅのいずれかである以外は相互に相違す
   るカルコゲン化物であり、そしてＺ＾−はルイス塩基以
   外のアニオンを表す）で示される化合物を選択する工程
   、（ｂ）非ルイス塩基アニオンをルイス塩基で交換する
   のに十分な時間、前記化合物をルイス塩基含有イオン交
   換樹脂と混合する工程、を含んでなるセレノピリリウム
   カチオンまたはテルロピリリウムカチオンと水溶性ルイ
   ス塩基アニオンの医薬的に純粋な塩の製造方法。