JPH02193929A - 糖尿病治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は糖尿病治療剤に関する。さらに詳しく述べれば
、すぐれた血中糖量（以下血糖と称する。）低下活性と
安全性をもつミミズ抽出物又は１ミズ抽出物とミミズ乾
燥粉末との混合物を有効成分として含有する糖尿病の治
療・予防剤に関する。

〔従来の技術〕

ミミズの乾燥物は太古の昔より主として東洋諸国におい
て駈矧、地竜と称し、薬として用いられてきた。従来の
文献に報告されているミミズの薬理・薬効作用は次のと
おりである。

■　「みみずと人生」大淵眞龍著１９４７年（昭和２２
年）１０３３０日、牧書房発行、第２２３〜２２６頁及
び「復刻みみず」畑井新喜司著１９８０年４月３０日、
株式会社サイエンティスト社発行、第１６０〜１６３頁
に、ミミズが膀胱内結石の縮小作用剤及び対外への排出
作用剤、買痘の治療剤、分娩剤、強壮剤、毛生薬、強情
剤及び解熱剤の薬理作用を有し、一方、ミミズ毒として
、一つは神経系統を侵し、他は赤血球の破壊即ち、溶血
作用を有することを報告している。

■　「中華人民共和国朽典」中華人民共和国衛生部朽典
委員会編、１９７７年版、一部第１９７〜１９Ｂ頁には
、次のことが記載されている。慣習的に地竜製品には２
種類がある。その一つの広地竜（Ｌｕｍｂｒ　ｉｃｕｓ
Ｋｗａｎｇｔｕｎｇａｓｉｓ）は、腹部を裂いて内蔵と
流砂を洗い流し、天日、日陰又は低温で乾燥させたもの
である。他の土地竜（Ｌｕｍｂｒｉｃｕｓ　Ｎａｔｉｖ
ｕｓ）は草木灰の中に入れて殺したのち、灰をとり去っ
て天日、日陰又は低温で乾燥したもので、ミミズ体内に
は泥土がつまっている。これらの２種の地竜は解熱剤、
ひきつけ治療剤、血行促進剤、半身不随治療剤、関節鎮
痛剤、排尿剤、気管支喘息剤及び高血圧症剤として４．
５〜９ｇ／日使用すると報告している。

■　「わたしたちの漢方薬シリーズ３、地竜・烏賊骨／
中国の科学研究１９７７年版Ｏ月３０日、松浦薬業株式
会社発行、第７頁には地竜チンキ（地竜のエチルアルコ
ール抽出物）には降圧作用のあることを報告している。

■　「天然薬物事典」奥田拓男編、昭和６１年４月１５
日、廣用書店発行、第２１５頁には、地竜が下熱剤、鎮
痛剤、利尿剤及び解毒剤に利用されていることを報告し
ている。

■　田中護〔北海道医学雑誌第２４号、第１８〜２４頁
（１９４９年）〕は、駈矧（乾燥細片物から泥土を除い
たもの）を煮沸水で抽出し、この抽出液の濃縮物にエチ
ルアルコールを添加して得た沈澱物質（Ｌｕｍｂｒｏ−
ｆｅｂｒｉｎ）をリンゲル氏液に溶解し、この液を麻酔
下の猫に静脈注射すると急激な血圧降下をきたし、かつ
ショックに比例して血液凝固の促進が認められたと報告
している。

■　居用賢二部〔山口医学第９巻、第５７１〜５７６頁
（１９６０年）〕は地龍の生理食塩水の抽出液、地竜の
エチルアルコール又はアセトン抽出乾燥物を生理食塩水
に溶解した液を成熟家兎に静脈注射して血圧降下を認め
た。

■　「中弱大辞典」下巻、江蘇新医学院編、１９８０年
、土泥科学技術出版社発行、第２１１２頁には、広地竜
チンキ、蝦矧乾燥粉末懸濁液、駈矧の熱水浸せき液、駈
矧の煎じ液等を麻酔下の犬、大きなネズミ、猫又は慢性
腎性高血圧のハツカネズミに投薬したら緩慢にして持続
的な血圧降下作用がみられた。

麻酔下の犬又は猫に地竜エキスを静脈注射したところ、
血圧降下作用が急速に現われた。ただし、経口投薬した
り、臨床への応用では効果がなかったと報告している。

更に同誌の第２１１４頁には、濃度４０％の地竜チンキ
（地竜４０ｇを６０度のエチルコールｌｏＯｍ（２に浸
せき）を毎回１０ｍＱ、−日に３度〔すなわち、地竜１
２ｇ／日に相当する。（本発明者が換算）〕服用する。

チンキを飲めない者は、純粋な地竜粉末に水を加えて丸
薬（少量の賦形剤を加える）をつくり、毎回３〜４ｇ、
−日に３度〔地竜９〜１２ｇ／日に相当（本発明者が換
算）〕服用し、３０〜６０日間服用続けると本態性高血
圧症に効果がある。

又、地竜Ｂ１液（ＨｇＣ１，を用いてヒポキサンチンを
除き、イオン交換樹脂を用いて血圧降下成分を分離し、
とり出したもの）を毎回’ｌ　ｍＱ（生薬の地竜８ｇを
含む）を−日に３度〔地竜２４ｇ７日に相当（本発明者
が換算）〕服用すると本態性高血圧症に効果があったと
報告している。

従来の慣習的なミミズの乾燥物又は乾燥粉末の製法は大
別すれば次のとおりである。

ｉ、ミミズの腹部を裂いて体内の内容物（内臓と泥土）
をとり去って天日、日陰又は低温（通常５０℃以下）で
乾燥する方法。

ｉ、ミミズを草木灰の中に入れて殺したのち、灰をとり
去って天日、日陰又は低温（通常５０℃以下）で乾燥し
、ミミズ体内に泥土がつまったままのものを得る方法。

ｉｉｉ、ミミズ体内の泥土をとり去ったのち、草木灰又
は火灰の中に入れて乾燥する方法。

などである。これらの乾燥物は必要時又は使用時に粉砕
して使用していた。これらの製法は簡便かつ経済的な方
法で、家庭でも安易に実行できる長所がある。

然しなから、これらの製法で得たミミズの乾燥物又は乾
燥粉末は０〜５℃の冷蔵庫内、又は５〜４５℃の室温に
開放状態で貯蔵したとき約６ケ月以内、密閉状態で貯蔵
したとき１年以内の短期間内に黴が発生し使用不可能と
なる欠点がある。

前記ｄの製法のように、体内に泥土がつまったまま乾燥
したミミズ、又は瓜の製法のように草木灰もしくは火灰
の中で乾燥したミミズは、薬として用いるときにはほと
んどの場合、熱水で抽出又は煮沸水で煎じたのち濾過し
、濾液を服用することが多い。特にＨの製法によるミミ
ズの乾燥物又は乾燥粉末は地竜チンキ又は粉末のまま、
もしくは丸薬などにして服用することは稀である。ｌの
製法によるミミズは、熱水浸せき液、煎じ液として服用
する他に、地竜チンキ又は地竜粉末のまま、もしくは粉
末に少量の水もしくは少量の賦形剤を加えて丸薬として
服用することが多い。ｉ及びｉの製法によるとき、生ミ
ミズから水分１０〜１６％の乾燥ミミズの収率は５〜９
％、同じくＨの製法によるときの収率は１３〜１９％で
ある。

最近、本発明者の一人である石井陽−は、ミミズの蛋白
質及び脂質を主成分とする健康食品又はその製造法〔日
本特許出願公開公報昭５９−２１６５７２号（公開日１
９８４年１２月６日）〕を報告した。

この製法は、健康食品としてのミミズ乾燥粉末を得るた
めには、一つのすぐれた方法である。然し、動脈硬化剤
（別名抗高脂血症剤）、糖尿病治療剤及び血圧降下剤な
どの薬剤を目的としたミミズ乾燥粉末の製法としては、
薬効の点で十分でないことが判明した。すなわち、生ミ
ミズの生体内に残っている糞土などの排泄物を除去する
ために外的な作用を施すときには、糞土のみを選択的に
除去することができない。いくら注意深く操作しても、
薬効上、重要な役割をなす成分を多く含有する内臓及び
体液が、糞土と一緒に除去されるので薬効不足となるこ
とがわかった。又、生きミミズに対する収率は１０〜１
９％と少ない。更に、大きな問題は、最終仕上げ工程の
真空乾燥を８０°０，０．３トールの真空度で２０時間
以上の長時間操作するために、薬理・薬効上、重要な作
用をなすミミズ乾燥粉末中の酵素類が破壊又は失活する
ことがわかった。

そのうえ、その他の有効成分の一部分が熱分解すること
がわかった。従って、本発明の製法で得られたミミズ乾
燥粉末に比較すると、日本特許出願公開公報昭５９−２
１６５７２号で得たミミズ乾燥粉末の糖尿病治療剤の薬
効は約５０％であった。

最近、本発明者の一人である美原恒とその他の共同研究
者等により、ミミズの線溶活性物質は至適ｐＨが８〜１
０．安定ｐＨが５〜ｌＯ、トラジロール（商標名）、ト
ランサミン（商標名）、大豆トリズシンインヒビター及
び血清で阻害され、プラスミノーゲン活性化作用及びフ
ィブリン溶解作用を有し、フィブリノーゲン溶解作用を
有しない諸性質を保有する酵素蛋白質であることが確認
された。

ミミズからの水性溶媒の抽出法による粗製酵素蛋白質画
分と、その精製処理による精製酵素蛋白質画分からなる
線溶活性物質の製造法の出願特許即ち、日本特許出願公
開公報昭５８−１４８８２４号（出願日１９８２年２月
２７日）と、これの優先権主張による外国出願のアメリ
カ特許出願Ｎｏ、４７０３９４（出願日１９８３年２月
２８日）、イギリス特許出願Ｎｏ、８３０３５９（出願
日１９８３年２月２５日）、イタリア特許出願Ｎｏ、４
７７９５Ａ（出願日１９８３年２月２５日）、フランス
特許用［Ｎｏ、０３１６５　（出願日１９８３年２月２
５日）、西ドイツ特許出願Ｎｏ、Ｐ３３０６９４４．１
（出願日１９８３年２月２８日）及びカナダ特許出願Ｎ
ｏ、４２２０３４（出願日１９８３年２月２１日）が報
告されている。

さらに、美原恒らによりミミズからの６種の新現なプロ
テアーゼの物質特許の出願、即ち日本特許出願公開公報
昭５９−６３１８４号（出願日、昭和５７（１９８２）
年１０月２日）及びこれらのプロテアーゼを有効成分と
する血栓溶解剤の特許出願即ち、日本特許出願公開公報
昭５９−１８４１３１号（出願日、昭５８（１９８３）
年３月３１日）と、これらの併合出願の優先権主張の外
国特許出願即ち、韓国特許出願第２９９０号（出願日１
９８３年６月３０日）をはじめ次の特許出願が報告（Ａ
Ｕ、Ｐ、Ａｐｐ、ｌ　６２９３（出願日１９８３年６月
２７日）、ＣＡ、Ｐ、Ａｐｐ、４３１３８７（出願日１
９８３年６月２８日）、ＤＫ、Ｐ。

Ａｐｐ、３００８（出願日１９８３年６月２９日）、Ｅ
Ｐ、Ｐ。

Ａｐｐ、８３１０６２８８．０（出願日１９８３年６月
２８日）、Ｅ　Ｓ、Ｐ、Ａｐｐ、５２３７５４（出願日
１９８３年６月３０ａ）、Ｆ　Ｉ　、Ｐ、Ａｐｐ、８３
２３８３（出願日１９８３年６月２９日）、ＮＯ，Ｐ、
Ａｐｐ、２３９９（出願日１９８３年６月３０日）、Ｐ
　Ｈ，Ｐ　、Ａｐｐ、２９１５１　（出願日１９８３年
６月３０日）、ＴＷ、Ｐ　、Ａｐｐ、７２１１９８３（
出願日１９８３年６月１８日）、Ｕ　Ｓ　、Ｐ　、Ａｐ
ｐ、５０８１６３（出願日１９８３年６月２７日）〕さ
れている。

本発明者等の調査結果では、ミミズ抽出物の単品又はミ
ミズ抽出部とミミズ乾燥粉末との混合物を有効成分とす
る物質の糖尿病治療・予防剤又は血糖低下剤の作用活性
を報告した文献を見出すことができなかった。すなわち
、アロキサンによる実験的糖尿病マウスにミミズ抽出物
の単品又はミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物を
投与したとき、有意に血糖値を低下させることを報告し
た文献を見出すことができなかった。

又、ヒトの糖尿病患者に食事療法に共に、ミミズ乾燥粉
末を４〜９ケ月間投与した。特に軽・中程度の糖尿病患
者の場合には、投与２〜３ケ月後から血糖値は改善され
、投与４ケ月後以降からは健康人の標準値まで血糖を降
下させることができたなど、このすぐれた効果を報告し
た文献を見出すことができなかった。

更に、かかる効果をもつミミズ乾燥粉末及びミミズ抽出
物の製法を報告した文献を見出すことができなかった。

〔発明が解決しようとする問題点〕

従来から経口的糖尿病治療剤としては、スルフォニルウ
レア（Ｓｕｌｆｏｎｙｌ　ｕｒｅａ）及びビグアニド（
Ｂｉｇｕａｎｉｄｅ）化合物などの有機合成化合物が広
く用いられている。

本発明者らは、このような合成有機化合物の中からでは
なく、天然物から副作用のない安全性の高い医療品の創
製を目的としてミミズ乾燥粉末の利用について長年鋭意
研究してきた。意外にもミミズ抽出物又はミミズ抽出物
とミミズ乾燥粉末との混合物が糖尿病治療・予防に有効
であることを見い出し、本発明を完成したものである。

〔問題点を解決するだめの手段〕

安全で、かつすぐれた糖尿病治療効果を有するミミズ抽
出物の単品又はミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との混合
物を調製するために詳細に研究しｔこ　。

本発明の糖尿病治療剤のミミズ抽出物は、原料のミミズ
を水性溶媒、水混和性有機溶媒（水と混和する性状の有
機溶媒の意味。）及び水非混和性有機溶媒（水と混和し
ない性状の有機溶媒の意味。）からなる群から選ばれる
少なくとも一種類の抽出剤によって抽出処理して得た抽
出物である。このミミズ抽出物は下記の製造方法により
得ることができる。

すなわち、原料のミミズを水性溶媒、水混和性有機溶媒
及び水非混和性有機溶媒からなる群から選ばれる少なく
とも一種類の抽出剤によって抽出処理し、得られた抽出
液を濃縮して沈澱物として析出せしめるか、又は濃縮抽
出液に有機溶媒を加えて沈澱物として得るか、もしくは
常圧、加圧又は減圧下で抽出溶媒を完全に除去して抽出
物を得た。

原料のミミズは前期のｉと山の公知の製造及び日本特許
出願公開公報昭５９−２１６５７２号に記載の製法で得
たミミズの乾燥物及びその乾燥粉末；糞土を除去した生
きミミズ；糞土を除去したなまミミズ（採取したままの
ミミズから糞土を除さ、煮も焼きも干しも漬けもしない
ミミズの意味。）；糞土を除去した生きミミズ／又はな
まミミズの粉砕懸濁液などの形状のミミズを使用するこ
とができる。

本発明者等は詳細に研究した結果、完全で無菌かつ、す
ぐれた血糖低下活性を有し、一方、ミミズ本来の悪臭を
有しないミミズ抽出物を得るためには、抽出処理前の原
料ミミズ（採取又は養殖ミミズなど）の精製方法又は清
浄方法と凍結・真空乾燥条件の組み合せ方法が、特に重
要な操作であることを見い出した。本発明者等の実測値
によれば、通常、採取又は養殖ミミズなどの原料ミミズ
の体表面に付着している汚物は、湿ミミズに対しｌＯ〜
４０（重量）％であり、消火管内の糞土は湿ミミズに対
し５〜１５（重量）％含有している。これらの汚物及び
糞土をすみやかに除去した清浄ミミズを抽出原料にする
ことが薬効及び収率を向上させるために重要な要素であ
ることを発見した。すなわち、最も好ましい原料ミミズ
は、後記の製法ｌ及び２の操作処理工程において湿式粉
砕をおこなって得たミミズ懸濁液及びこれらの凍結・真
空乾燥により製造したミミズの乾燥粉末である。後記に
示すように、製法ｌ及び２の方法で得たミミズ懸濁液及
びミミズ乾燥粉末から調製したミミズ抽出物は、ミミズ
乾燥粉末よりもすぐれた血糖低下活性を有する。又、ミ
ミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物は、ミミズ抽出
物単品よりもさらにすぐれた血糖低下活性を有すること
がわかった。

下記に、本発明品の製法のうえで重要な操作工程である
出発原料の調製方法から説明する。

ミミズ懸濁液及びミミズ乾燥粉末の製造方法−興法ｌ： 生きミミズを酢酸、クエン酸、コノ１り酸、リンゴ酸、
酒石酸、乳酸などの無毒性の有機酸又はリン酸、硫酸、
塩酸などの無毒性の無機酸またはこれらの酸のナトリウ
ム又はカリウム塩の少なくとも１種類の化合物を０．３
（重量）％以下含有好ましくは０．１（重量）％以下含
有の低濃度又はｐＨ３〜６．５の微酸性の水溶液又は真
水中に温度１〜２５℃にて０．５〜４８時間、好ましく
は温度８〜２０°ｃ、１〜２４時間放置して生きミミズ
自身が有する排泄力によって、生きミミズの消化管内の
糞土を十分排泄させたのち、水で生きミミズの体表面に
付着している汚物を洗い落とし、次に湿式粉砕を行ない
ミミズの懸濁液を得た。このミミズの懸濁液を一５℃以
下の低温、好ましくは一１Ｏ〜−６０℃の低温で凍結し
たのち、次に凍結・真空乾燥を行なった。凍結・真空乾
燥の条件は温度−６０〜＋９０℃１真空度１００ｎＩ！
ｌＨｇ以下、好ましくは−４０−＋８０℃で３０ｍｍＨ
ｇ以下の真空度で温度を階段的に上げながら５〜１００
時間好ましくは１０〜６０時間凍結・真空乾燥を行なっ
て無菌のミミズの乾燥粉末を得た。

製法２： 生きミミズの体表面に付着している汚物を水で洗い落と
したのち、酢酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石
酸、乳酸などの無毒性の有機酸又はリン酸、硫酸、塩酸
などの無毒性の無機酸又はこれらの酸のナトリウム又は
カリウム塩の少なくとも１種類の化合物を０．３（重量
）％以下含有好ましくは０．１（重量）％以下含有の低
濃度又はｐＨ３〜６．５の微酸性の水溶液又は真水中に
、温度１〜２５℃にて、０．５〜４８時間好ましくは温
度８〜２０℃にて１〜２４時間放置して生きミミズ自身
が有する排泄力によって、生きミミズの消化管内の糞土
を十分排泄させたのち、湿式粉砕を行ないミミズ懸濁液
を得た。このミミズ懸濁液を一５℃以下の低温、好まし
くは−１０〜−６０℃の低温で凍結したのち、次に、凍
結・真空乾燥を行なった。この凍結・真空乾燥の条件は
温度−６０−＋９０℃１真空度１００ｍｍＨｇ以下、好
ましくは−４０〜＋　８０’０　、３０ｍｍＨｇ以下の
真空度で温度を階段的に上げながら５〜１００時間好ま
しくは１０〜６０時間凍結・真空乾燥を行なって無菌の
ミミズの乾燥粉末を得た。

ミミズの湿式粉砕方法、即ち、ミミズの組織（細胞）破
壊方法としては、ホモジナイザー　ブレンダー、ホモミ
キサー、摺潰機、加圧型細胞破壊装置の機器を利用して
懸濁液又は均質液とすることが好ましい。この湿式粉砕
時の温度は１〜２５℃好ましくは２〜１５℃が望ましい
。

前期の操作により生きたミミズから黄褐色又は褐色のミ
ミズ乾燥粉末を収率２０〜３５％で得ることができた。

通常の場合、このミミズ乾燥粉末の水分は５〜１６％好
ましくは７〜１４％、灰分け３〜８％好ましくは４〜７
％、窒素は１〜１１％好ましくは６〜１１％含有するよ
うに調製した。又、ミミズ乾燥粉末中にはアスパラギン
酸、スレオニン、セリン、グルタミン酸、プロリン、グ
リシン、アラニン、システィン、バリン、メチオニン、
インロイシン、ロイシン、チロシン、フェニルアラニン
、トリプトファン、リジン、ヒスチジン、アルギニンの
１８種又はそれ前後のアミノ酸を含有する。

試験例１ 前期製法ｌ及び２の方法及び後記の実施例の製法で得た
ミミズ乾燥粉末の粗分析結果を表−１に示す。

試験例２ 製法ｌの方法で得たＭ−２とＭ−４、製法２の方法で得
たＭ−５、Ｍ−６、Ｍ−８及びＭ−９のミミズ乾燥粉末
製品の成分分析結果を表−２に示す。

（以下余白） 試験例３ 製法ｌの方法で得たＭ−２とＭ−４及び製法２の方法で
得たＭ−６のミミズ乾燥粉末製品中の粗蛋白室のアミノ
酸分析をおこない、蛋白食品のフイシュミール及び大豆
粉の分析値と比較した結果を表−３に示した。

（以下余白） 表−３ ＊Ｐ、Ｍｃ　Ｄｏｎａｌｄ、　Ｒ，Ａ、　Ｅｄｗａｒｄ
ｓ　ａｎｄ　Ｊ、Ｆ、Ｄ　Ｇｒｅｅｎｈａｌｇｈ：　Ａ
ｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ（１９７３年）に記載さ
れているデータから。

表−２及び表−３より、製法ｌ及び２の方法により得た
ミミズ乾燥粉末中には粗蛋白質、粗脂質及び各種金属類
が豊富に含有していることがわかり、又、粗蛋白質中の
アミノ酸組成では必須アミノ酸を多量に含有しているこ
とがわかった。

前記製法１の方が、製法２で得られたミミズ乾燥粉末よ
りも、若干好ましい製品が得られた。又、前記の有機酸
又は無機酸又はこれらの両酸のナトリウム又はカリウム
塩の少なくとも一種類の化合物を上記のような低濃度に
含む水溶液中に生きミミズを放置した方が、真水中に放
置するよりも生きミミズの消化管内の糞土の排泄が早く
かつ、排泄率が大きい。本発明者等の研究によれば、生
きミミズを例えば８〜１８℃の真水中に放置するときに
は消化管中の糞土を完全に排出するするためには１５〜
４８時間要した。この点、８〜１８℃の前記の希薄水溶
液中に放置したときには０．５〜５時間で糞土を完全に
排出することがわかった。

前記の製法ｌ及び２において乾燥終了後のミミズ乾燥物
製品の仕上り状態は集合状態又は固まりが混合した状態
となっていることが多い。然し、これを粉砕機にかける
と容易に粉末となる。ミミズ乾燥物及びミミズ抽出物を
ヒトを含め哺乳動物に投与するときには固まりよりも粉
末の方が好ましい。

美原恒ら〔日本特許出願公開公報昭５９−６３１８４号
及び５９−１８４１３１号〕は、ミミズから線溶酵素の
６種の新規プロテアーゼを分画した。即ち、美原恒らは
ミミズ乾燥粉末に１０倍量の生理的食塩水を加えて２日
間のインキュベーション（Ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ）を行
なった上溝液について硫安分画を行なったのち、その沈
渣を５ｅｐｈａｃｒｙｌ　Ｓ−２００によるゲル濾過を
行ない、得られた蛋白分画についてＤＥＡＥ−セルロー
スイオン交換クロマトグラフィーを行なった結果、カゼ
イン分解とフィブリン分解活性を有する１１　■、■分
画の蛋白を得た。このｒ、ｎ、ｍ分画について更にＤＥ
ＡＥセルロース、５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ　−７５、トヨ
バールＨＷ５５　、Ａ　ＣＨ−ＳｅｐｈａｒｏｓｅＳＢ
ｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ−Ｓｅｐｈａｒｏｓａなどによる
精製処理を行なった結果、６分画の精製酵素を得た。５
ＤＳ−ＰＡＧＥで分子量を測定すると分画１−０の分子
量が一番低く、２３．５００と計算され、その後、順次
にＩ　−ｌ５Ｉ−２、Ｉ［、■−１、ｍ−２と分子量が
増加し、ｌｌｌ−２は分子量３４．２００であった。ま
た等電点電気泳動でこの６分画の等電点を測定するとＩ
−０が最も高く、ｐＨ４゜１２であり、その後、順次ｐ
Ｈは低くなり、ｍ−２でｐＨ３，５２であった。これら
の６分画はセリン酵素とも異なる新しい蛋白分解酵素で
あり、また、これらの６分画の蛋白分解酵素の至適ｐＨ
は８付近またはｐＨ８〜１０１安定ｐＨは４〜１２また
は５〜１２、至適温度５０℃または５０〜６０°０、失
活条件は７０℃で６０分間であったと報告されている。

前記の製法ｌ及び２で得たミミズの乾燥粉末製品Ｍ−４
及びＭ−６に１０倍量の生理的食塩水を加え、その上清
を標準フィブリン平板で測定すると、表−４に示すよう
に、直ぐに線溶活性が認められた。このＭ−４のミミズ
乾燥粉末の生理的食塩水溶液を３７℃でインキュベート
しておくと、表−４に示すようにその上清の線溶活性は
１０日目で約４倍となり、５０日目で５倍、７５日目で
５．５倍となる。

この事実は、ミミズの凍結乾燥粉末中にはこの蛋白分解
酵素の前駆物質が大量に存在し、自己消化により酵素活
性の発現があるものと考えられる。

この５０日目の上清の活性をウロキナーゼの国際単位に
換算して比較すると約８．０００１０１０＋１２と計算
されｔ；。また、この酵素はプラスミノゲン・フリーフ
ィブリン平板、標準フィブリン平板とも溶解し、標準フ
ィブリン平板の方がグラスミノゲン・フリー平板に比較
して溶解窓が大きく、フィブリンを直接分解する酵素活
性とともに、プラスミノゲン・アクチベータ活性も示さ
れた。前記操作において、Ｍ−４の代りに、Ｍ−６のミ
ミズ乾燥粉末を用いて測定した結果は表−４と同一結果
が得られた。

（以下余白） 表−４ミミズ乾燥粉末に１０倍量の生理食塩水を加え、
３７℃でインキュベーションを行なつた際の上清の線溶
活性 ミミズ乾燥粉末及びミミズ抽出物をラット及びヒトへ経
口投与することにより糖尿病治療・予防効果又は血糖降
下作用効果を示す理由についての詳細は不明であるが、
ミミズ乾燥粉末及びミミズ抽出物中に含有されている蛋
白分解酵素（蛋白質）自体又はこの酵素の前駆物質（蛋
白質）自体もしくは蛋白質又は糖質蛋白質、金属結合蛋
白質もしくは脂質又は糖質その他の未知化合物自体又は
これ治療剤として最も好ましいミミズ抽出物及びミミズ
乾燥粉末の窒素含量は７〜１６％、即ち粗蛋白含量４３
．８〜１００％のものである。

次に前記の製法ｌ及び２の方法で得たミミズの湿式粉砕
による懸濁液の凍結・真空乾燥操作の好ましい具体例を
示すと次のとおりである。

ミミズの湿式粉砕物すなわち、ミミズの懸濁液を一１Ｏ
〜−６０℃好ましくは一３０℃〜−５０℃で５〜６０時
間凍結したのち、同温度で０．Ｏ１〜０．２ｍｍＨｇの
真空下、５〜１２時間の凍結乾燥する。次に２０〜３０
℃で５〜１５時間、０．０１〜０．２ｍｍＨＨの真空下
で乾燥する。次に３５〜５０℃、０．１〜０．５ｍｍＨ
ｇの真空下で１０〜２０時間乾燥する。次の最終仕上げ
工程の真空乾燥は、０．０１〜０．５ｍｍＨｇの真空下
、７０〜８０℃好ましくは７５〜８０℃で５〜１０時間
真空乾燥すると無菌で且つ水分５〜１５％含有のミミズ
乾燥粉末を得ることができた。特に最終仕上げの真空乾
燥がこれまた重要操作である。ミミズ乾燥粉末中に含ま
れる蛋白分解酵素、その酵素の前駆物質及びその他のの
乾燥粉末を無菌状態に仕上げるために本発明者は詳細に
研究した結果、凍結・真空乾燥の最終工程の真空乾燥条
件の真空度、加温温度、時間の３要素の組合わせが重要
条件であることを見出し、前記の運転条件を確立した。

前記に示すように、ミミズ乾燥粉末からの精製蛋白分解
酵素の６種共（日本特許出願公開公報昭５９−６３１８
４号及び昭５９−１８４１３１号）７０℃、６０分間で
失活することが報告されているが、製法ｌ及び２で得た
ミミズ乾燥粉末中の蛋白分解酵素は表−４に示すように
失活されていない。又、製法１及び２の方法で得たミミ
ズ乾燥粉末は、５〜４５℃の室温に密閉状態に５年間、
保存した例では、黴の発生その他の変質は全く認められ
なかった。

本発明において最も好ましい原料は、前記のように製法
ｌ及び製法２の操作処理工程において湿式粉砕をおこな
って得たミミズの懸濁液及びこれの凍結・真空乾燥で製
造したミミズの乾燥粉末である。次に好ましい原料ミミ
ズは前記の公知の１１■及び日本特許出願公開公報昭５
９−２１６５７２号の製法で得たミミズ乾燥物及びその
乾燥粉末である。然し、この後者の３種の原料ミミズか
らの抽出物は、前者の最も好ましい２種類の原料ミミズ
からの抽出物よりも薬効の点でかなり劣り、約３０〜５
０％にすぎない。その理由は下記のとおりである。

すなわち、ミミズの消化管内に残留している糞土（湿ミ
ミズに対し約５〜１５％含有。）を除去するために外的
な作用を施すときには、糞土のみを選択的に除去するこ
とができない。いくら注意潔く操作しても薬効上、重要
な役割をなす成分を多く含有する内臓、消化液（セルラ
ーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、リパーゼなどの各種
の有効な酵素を含む。）及び蛋白質を多く含む体腔液（
ｃｏｅｌｏｎｉｃＮｕｉｄ）などの体液などが、糞土と
一緒に生体外へ除去されるので薬効不足となる。又、前
記の製法ｌ及び２の工程説明及び実施例に示すように、
生ミミズを希薄水溶液中に放置するときには、可能な限
り短時間内にミミズの消化管内の糞土を完全に排出せし
めることが薬効上重要である。希薄水溶液の濃度が濃厚
な水溶液のときには、放置したミミズは糞土を排出する
前に、ミミズの体部（Ｓｅｇｍｅｎｔ）の背面（Ｄｏｒ
ｓｕｍ）にある背孔（Ｄｏｒｓａ　１ｐｏｒｅ）より黄
色又は乳白色の体腔液（Ｃｏｅｌｏｎｉｃｆｌｕｉｄ）
を放出して急速に死亡するので希薄水溶液の濃度を０．
３（重量）％以下の低濃度又はｐＨ３〜６．５の微酸性
に制限する理由がある。

ミミズを希薄水溶液もしくは真水中に長時間放置、例え
ば３日間（７２ｈｒｓ）放置すると糞土のほかに、消化
液及び体腔液などの体液を多く排出し、体重が減少する
。この際、ミミズの体重は水中放置時間の長さに逆比例
して減少する。かかるミミズを原料として製造した乾燥
粉末及びこれのミミズ抽出物は薬効不足となる。そのた
め、本発明の実施例に示すように、短時間内に消化管内
の糞土を十分（完全）に排出せしめたミミズが好ましい
のである。又、ミミズの体表面に付着する汚物は、清浄
な水による洗浄により、比較的容易に除去できる。前記
の好ましい原料ミミズの２種の形態の内、特に好ましい
原料形態は、生きミミズを前記の希薄水溶液中に放置し
て生きミミズの消化管内の糞土をはかせｔ；のち、水洗
し、湿式粉砕をおこなって得たミミズのペースト状の懸
濁液である。

この懸濁液を原料としたときには、他の形態のミミズよ
りも溶媒の使用量が節約でき、かつ、有効物質を短時間
内に抽出することができ、さらに処理時間単位当りの抽
出物量が多いなどの抽出効率がすぐれている。

抽出溶媒の水性溶媒は、真水、蒸留水、生理食塩水、ｐ
Ｈ５〜１０の各種の緩衝液又は各種の調製水を用いるの
が好ましい。緩衝液はリン酸、酢酸、ホウ酸、クエン酸
、トリス・塩酸などのｐＨ５〜ＩＯ好ましくはｐＨ６〜
８の各種組成の緩衝液の一種以上が使用できる。又、ｐ
Ｈ５〜ｌＯ好ましくはｐＨ６〜８の調製液とは塩酸、硫
酸、リン酸、酢酸、乳酸、クエン酸、コハク酸又は酒石
酸などの水溶性の無機酸、有機酸とナトリウム、カリウ
ムなどのアルカリ金属の水酸化物又は炭酸塩から自家調
製した希薄水溶液を意味する。最も好ましい水性溶媒は
生理食塩水、緩衝液、真水である。これらの水性溶媒を
使用するときには、パラヒドロキシ安息香酸エチルエス
テル、安息香酸ナトリウム塩、アジ化ナトリウムなどの
防腐剤を帆０１〜０．３（重量）％使用することが好ま
しい。

水混和性有機溶媒としては、例えば、メチル、エチル、
アリル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、Ｓ
−ブチル、又はＬ−ブチルアルコールなどの炭素数１〜
４の低級アルコール類；アセトン又はメチルエチルケト
ンなどの炭素数３〜４のケトン類：エチルエーテル、１
．２−プロピレンオキシド、ジオキソラン、４−メチル
ジオキソラン又はジオキサンなどの炭素数３〜４のエー
テル類；ギ酸メチル、ギ酸エチル、酢酸メチルなどの炭
素数２〜４のエステル類を用いるのが好ましい。

これらの内、最も好ましい水混和性有機溶媒は炭素数１
〜４のアルコール類である。

水非混和性有機溶媒としては、例えば、ｎ−ヘキサン、
ｉ−ヘキサン、ｎ−へブタン、ｉ−へブタン、オクタン
、ｉ−オクタン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン
、キシレン又はエチルベンゼンなどの炭素数６〜１０の
炭化水素類；ｎ−ヘキシル、２−メチルペンチル、２−
エチルブチル、Ｓ−ヘキシル、Ｓ−ヘプチル、ｎ−オク
チル、２−エチルヘキシル、２，６−シメチルー４−ヘ
プチル、ｎ−デシルアルコールなどの炭素数６〜１０の
アルコール類；メチル−ｎ−アミルケトン、ｍ−又はｐ
−メチルシクロヘキサノン又はメチルヘキシルケトンな
どの炭素数７〜８のケトン類；酢酸ｎ−ブチル、酢酸Ｓ
−ブチル、酢酸ｉ−ブチル、酢酸−２−エチルブチル、
酢酸Ｓ−アミル、酢酸メチルアミル又は酢酸２−エチル
ヘキシルのエステルなどの炭素数６〜１０のエステル類
；クロロホルム、ジクロペンタン又はエピクロルヒドリ
ンなどの炭素数１〜５のハロゲン化炭水素類などを用い
るのが好ましい。

抽出方法は一般的な方法で実施すればよく、特に限定さ
れないが、その−例は次のとおりである。

前記の形態の原料ミミズに対し、水性溶媒、濃度５〜７
０（容量）％好ましくは１０〜６０（容量）％の有機溶
媒の水溶液、濃度８０〜１００（容量）％の水混和性有
機溶媒、濃度約１００％の水非混和性有機溶媒から成る
群から選ばれる少なくとも一種類の抽出剤を１〜１００
倍量（容量／重量）好ましくは２〜３０倍量用い、抽出
温度は一４０〜＋６０℃、抽出接触時間は１０分間から
約１００日間好ましくは３０分間から約４０日間の間、
時々又は連続撹拌したのち、静置し、濾過して抽出液を
分取した。濾過は加圧又は減圧濾過器（機）又は遠心分
離機を用いるとよい。

抽出残渣はよく洗浄したのち、抽出液と洗液とを合体す
る。抽出液又は合液を６０℃以下の温度で常圧、加圧又
は減圧下で濃縮、限外濾過濃縮又は凍結乾燥などの濃縮
法で抽出溶媒を除去して抽出物を得た。ただし、抽出剤
として例えばエタノールを使用したときには、最終目的
側形の種類により、完全に除去せずにエタノールを残留
させることもある。又、前記の抽出液又は合液の濃縮液
の放置による結晶析出法又は濃縮液に有機溶媒を添加し
て結晶を析出せしめたのちに、濾過、乾燥して抽出物を
得る方法も用いられる。

上記の操作における原料ミミズに対する抽出物の収率は
乾物換算で３〜６０（重量）％である。この収率の相違
は、原料ミミズの形態、溶媒の種類、抽出温度、抽出時
間その他の抽出条件による。抽出温度が高いと、有効物
質が分解される危険があるので抽出温度は一４０〜＋６
０℃が好ましい。

抽出物中の含有成分は表−２及び表−３に示すように、
ミミズの乾燥粉末の成分と同じように１８種のアミノ酸
、８種の金属などを含有する。特に、この抽出物中の蛋
白質は、原料ミミズと同じアミノ酸からなる蛋白質、糖
質蛋白質、金属結合蛋白質などを含有する。さらに抽出
物中には遊離アミノ酸、脂質、各種糖質、ＡＴＰ及びＡ
ＴＰ様物質、各種の酵素類、その他の組成不明の有効な
化学物質を含有する。

製法３ 原料ミミズ及びミミズの乾燥粉末の調製：生きミミズ（
アカミミズ）ｌｏｋｇを、リンゴ酸と乳酸２：ｌの混合
酸を溶解したｐＨ５，８の酸性水溶液２０１２中に温度
ｌＯ℃で２時間放置し、消化管内の糞土を十分に排泄さ
せた。この生きミミズを水でよく洗浄、して生きミミズ
の体表面に７付着している泥、糞などの汚物を洗い落し
たのち、ウルトラホモミキサー（日本精機株式会社製）
で湿式粉砕し、ｆミ。

ズの懸濁液９．３ｋｇを得た。このミミズ懸濁液を１．
５５ｋｇずつに６等分し、それぞれをＥ−１、−２、−
３、−４、−５及び−６とする。

前記で得たＥ−１とＥ−２のミミズの懸濁液１．５５ｋ
ｇを各々のトレーに入れ一４０℃で３０時間凍結する。

次に品温を一４０°０で帆ｌｍｍＨｇの真空下で６、時
間凍結乾燥し、次に２５℃で０．ｌｍｍＨｇの真空下で
８時間乾燥したのち、次に４５℃でＱ、ｌｍｍＨｇの真
空下で１２時間乾燥し、最後に８０“０で０．ｌｍＨｇ
の真空下で６時間乾燥することにより、２個のトレーの
各々にミミズの乾燥物３１８ｇを得た。これをに−１及
びに−２とする。

抽出物の調製： Ｘ−■、ミミズの乾燥物（Ｉｃ　−１）３１５ｇに５倍
量の９９％ｌ　’ｌ　／　−ル１．５７５ｆｆを加え２
５°ｃ−ｃ３回抽出したのち、最後に残渣を３倍量の９
９％メタノール０．９４５Ｑで洗浄し、抽出液と洗液の
合液を３０℃で減圧製甲乾固し、次に真空乾燥すること
により８８．２ｇの粉末抽出物を得た。これを抽出物Ｘ
■とする。

Ｘ−■、ミミズの乾燥物（Ｋ　−２）３１５ｇｉｎ、３
倍量のクロロホルム０．９４５ｍと２倍量のエタノール
０．６３Ｑの合液を加え、２０°０で３回抽出したのち
、最後に残渣を２倍量のエタノール０．６３Ｑで洗浄し
、抽出液と洗液の合液を３０℃で減圧下濃縮乾固し、次
に真空乾燥することにより７２．５ｇの粉末抽出物を得
た。これを抽出物Ｘ−■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸濁液（Ｅ　−３）１．５５ｋｇ＋：
真水６．２Ｑを加えて１０℃で２時間かきまぜたのち、
濾過し、抽出液と残渣に分取する。残渣を水洗したのち
抽出液と洗液との合液７．７Ｑを得た。この合液７．７
Ｑ１．：ｎ−ヘキサン２．３１Ｑを加えてかきまぜたの
ち、静置し、水溶部層とｎ−ヘキサン層に分離後、水溶
部層を分取し、３０℃で減圧濃縮乾固したのち、凍結乾
燥し、粉末抽出物８６．８ｇを得た。これを抽出物Ｘ−
■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸濁液（Ｅ　−４）１．５５ｋｇに４
０％エタノール水溶液１０ｆｆを加え、４０℃で１２時
間かきまぜたのち、濾過し、抽出液と残渣に分取する。

残渣は４０％エタノール０．３αで洗浄したのち抽出液
と洗液との合液を４０℃で減圧濃縮乾固したのち、真空
乾燥し、粉末の抽出物６９．７ｇを得た。

これを抽出物Ｘ−■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸濁液（Ｅ　−５）１．５５に’ｇに
ｐＨ６，４・のリン酸緩衝液２．５Ｑを加えて、３７℃
で８時間インキュベーションし、ミミズ体内に元来から
含有するプロテアーゼの作用を促進させたのち、濾過し
、残渣をｐＨ６，４のリン酸緩衝液で洗浄し、抽出液と
洗浄液との合液３．９Ｑを得た。この合液にアジ化ナト
リウムＩｇを加えて３７℃で８時間インキュベーション
したのち、３０℃で減圧濃縮し、得た濃縮液に２識量の
エタノールを加えて沈澱物を濾過し、分取した沈澱を真
空乾燥し、次に凍結乾燥して粉末の抽出物６４．２ｇを
得た。

これを抽出物Ｘ−■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸汽液（Ｅ　−６）１．５５ｋｇを天
日で自然乾燥したのち、粉末化したミミズの乾燥粉末（
Ｋ−３とする。）にエタノールとエチルエーテル２：１
の混合溶媒９００−を加え、２０℃で３回抽出した。最
後に、残渣を前期の混合溶媒で洗浄し、抽出液と洗液の
合液を３０°０で減圧下濃縮乾固し、次に真空乾燥する
ことにより６１．５ｇの抽出物を得た。これを抽出物Ｘ
−■とする。

製法４ 原料ミミズ及びミミズ乾燥−粉末の調製：泥がついてい
る養殖生きミミズ（アカミミズ）１３ｋｇを水でよく洗
浄し、体表面に付着している泥を洗い落したのち、リン
ゴ酸とクエン酸の１：ｌの混合酸を溶存するｐＨ６，２
の酸性水溶液４０Ｑ中に温度１２℃で２時間放置し、消
化管内の真上を十分に排泄させたのち、生きミミズを水
でよく洗浄して生きミミズの体表面に付着している泥、
糞などの汚物を洗い落したのち生きミミズをミキサーに
かけて湿式粉砕し、ミキサーの懸濁液９．０１τｇを得
た。

このミミズ懸濁液を１．５ｋｇずつに６等分し、それを
Ｅ＝７、−８、−９、−１０．−１１及び−１２とする
。

前記で得たＥ−７とＥ−８のミミズ懸濁液１．５ｋｇを
各々のトレーに入れ一３０℃で４０時間凍結したのち、
次に品温−４０℃でＱ、ｌｍｍＨｇの真空下６時間凍結
乾燥し、次にトレーの乗せている棚温を３０℃に上げＱ
　、　ｌｍｍＨｇの真空下で６時間乾燥したのち、棚温
を５０℃に上げ０．２ｍｍＨｇの真空下で８時間真空乾
燥し、最後に棚温を７８℃に上げ、０．２ｍｍＨｇの真
空下で８時間乾燥することによりミミズの各々の乾燥物
３０５ｇずつを得た。これをに−７とに−８とする。

抽出物の調製： Ｘ−■、ミミズの乾燥物（Ｋ　−７）３００ｇｌ：、３
ｇの０．０２％パラヒドロキシ安息香酸エチルエステル
を含む０．９％塩化ナトリウム水溶液を加え、３０℃で
９６時間かきまぜたのち、濾過し、残渣を帆９Ｑの０．
９％塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、抽出液と洗浄液と
を合わせた清澄抽出液３．８Ｑを得た。

これを限外濾過法で濃縮し、液量を０．１６ｆｆとし、
これにエタノールＯ，１６Ｑを加えて沈澱分別したのち
の濾液に終濃度としてエタノール濃度が８０％になるよ
うに添加して得た沈澱を真空乾燥し、結晶粉末１４．４
ｇを得Ｉ；。これを抽出物Ｘ−■−１とする。

抽出物Ｘ−■−１の濾液を３０℃で減圧濃縮乾固するこ
とにより７２．５ｇの結晶粉末を得た。これを抽出物Ｘ
−■−２とする。

Ｘ−■、ミミズ乾燥物（Ｋ　−８）３００ｇに３Ｑの０
．１％安息香酸ナトリウムを含む真水を添加し、３２℃
で７２時間かきまぜ抽出したのち、濾過し、残渣を０．
６Ｑの真水で洗浄し、抽出液と洗浄液とを合しｔ；清澄
抽出液３．５αを得た。この抽出液を限外濾過法で濃縮
した液を、次に減圧濃縮乾固することにより６９ｇの結
晶粉末を得た。これを抽出物Ｘ−■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸濁液（Ｅ　−９）１．５ｋｇを４０
℃で真空乾燥し、粉末化したミミズの乾燥粉末（Ｋ９と
する。）に、３Ｑの０．０２％のパラヒドロキシ安息香
酸エチルエステルを含む蒸留水を加え、３２℃で１２０
時間かきまぜたのち、濾過し、抽出液と残渣に分取する
。残渣を蒸留水でよく洗浄したのち、抽出液と洗浄液と
の合液を３０℃約１／１０量に減圧濃縮したのち、４倍
量のエタノールを加え、よくかきまぜたのち、−昼夜静
置し、生成した沈澱を濾過し、エタノールで洗浄したの
ち、真空乾燥し粉末抽出物７２．５ｇを得た。これを抽
出物Ｘ−■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸濁液（Ｅ　−１０）１．５ｋｇに６
０％エタノール水溶液７．５Ｑを加え、密栓状態で時々
かきまぜながら２０〜２２℃で８日間静置した。

その後、濾過し、残渣を５０％エタノール水溶液０．５
１２で洗浄し、抽出液と洗浄液との合液を３０℃で減圧
濃縮乾固したのち凍結乾燥し、粉末抽出物４０．５ｇを
得た。これを抽出物ｘ−■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸濁液（Ｅ　　１１）１．５ｋｇに５
０％エタノール水溶液４．５Ｑと５０％インプロパツー
ル水溶液３Ｑの混合溶媒を加え、密栓状態で時々かきま
ぜながら８℃で１６６日間静置た。

その後、濾過し、残液を５０％エタノール水溶液０．５
Ｍで洗浄し、抽出液と洗浄液との合液を３５℃で減圧濃
縮乾固したのち、凍結乾燥し、粉末抽出物２８．２ｇを
得た。これを抽出物Ｘ−■とする。

Ｘ−■、ミミズの懸濁液（Ｅ　−１２）１．５ｋｇに６
０％エタノール水溶液７．５Ｑを加え、２５℃で２時間
かきまぜながら３回抽出し、最後に残渣を６０％エタノ
ール水溶液１（２で洗浄し、抽出液と洗液の合液を３０
℃で減圧濃縮乾固し、次に凍結乾燥することにより９０
．５ｇの粉末抽出物を得た。これを抽出物ｘ−■とする
。

本発明において使用するミミズはアカミミズ（Ｌｕｍｂ
ｒｉｃｕｓ　ｒｕｂｅｌｌｕｓ）、ＬＴミミズ〔別名ツ
リミミズ（Ｌｕｍｂｒｉｃｕｓ　ｔｓｒｒｅｓｔｒｉｓ
））、シマミミズ（Ｅｉｓｅｎｉａｆｏｅｔｉｄａ）、
カッショクツリミミズ（ＡＩｌｏｌｏｂｏｐｈｏｒａｃ
ａｔ　１ｇ１ｎｏｓａ）、ムラサキツリミミズ（Ｄｅｎ
ｄｒｏｂａｅｎａｏｃｔａｅｄｒａ）、サクラミミズ（
Ａｌｌｏｌｏｂｏｐｈｏｒａ　ｊａｐｏ−ｎｉｃａ　Ｍ
ｉｃｈａｅｌｓｅｎ）、ハｙタミミズ（Ｄｒａｗｉｄａ
　ｈａｔｔａ−ｍｉｍｉｚｕ　Ｈａｔａｉ）、セグロミ
ミズ（Ｐｈｅｒｅｔｉｍａ　ｄｉｖｅｒ−ｇｅｎｓ　Ｍ
ｉｃｈａｅｌｓｅｎ）、フツウミミズ（Ｐｈｅｒｅｔ　
ｉｍａｃｏｍｍｕｎｉｓｓｉｍａ）、ハタヶミミズ（Ｐ
ｈｅｒｅｔｉｍａ　ａｇｒｅｓ−ｔｉｓ）、シーボルト
ミミズ（Ｐｈｅｒｅｔｉｍａ　５ｉｅｂｏｌｄｉＨｏｒ
ｓｔ）、ヒトツモンミミズ（Ｐｈｅｒｅｔｉｍａ　ｈｉ
ｌｇｅｎ−ｄｏｒｆｉ）、イソミミズ（ＰｏｎＬｏｄｒ
ｉｌｕｓ　ｍａｔｓｕｓｈｉｍｅｎｓｉｓＩ　１ｚｕｋ
ａ）、　　イ　ト　ミ　ミ　ズ（Ｔｕｂｉｆｅｘ　　ｈ
ａｔＬａｉ　　Ｎｏｍｕｒａ）、ゴトウイトミミズ（別
名ユリミミズ）（Ｌｉｍｎｏｄｒｉ　ｌｕｓｇｏｔｏｉ
　Ｈａｔｏｉ＝Ｌ、　５ｏｃｉａｌｉｓ　５ｔｅｐｈｅ
ｎｓｏｎ）など通常成育しているミミズならばいずれも
利用できる。

本発明薬剤のミミズ抽出物又はミミズ抽出物とミミズ乾
燥粉末の混合物は臨床治療用として投与するときの形態
は経口剤又は非経口剤のいずれでもよいが、特に経口投
与が好ましい。本発明品の経口用の剤形としては、本発
明品自体又は適宜な薬理的に許容される医薬担体と混合
してカプセル剤、錠剤、顆粒剤、散剤（粉剤）、コーテ
ィング剤、糖衣錠、乳剤などの製剤が用いられる。医薬
担体としては、例えば賦形剤として乳糖、白糖、マニト
ール、ブドウ糖、デン粉、ソルビトール、グリシン、リ
ン酸カルシウム、微結晶セルロースなど；結合剤として
デン粉、ゼラチン、アラビアゴム、ブドウ糖、白糖、ソ
ルビトール、マニトール、トラガント、ヒドロキシプロ
ピルセルロース、ヒドロキシプロポキシメチルセルロー
ス、カルボキシメチルセルロース、２−メチル−５−ビ
ニルピリジン−メタアクリル酸−アクリル酸メチルエチ
ル共重合体、ポリビニルピロリドン、アルギン酸ナトリ
ウムなど；滑沢剤としてステアリン酸、硬化油、ステア
リン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ポリオ
キシエチレンモノステアレート、タルク、酸化ケイ素、
ポリエチレングリコールなど；崩壊剤としてバレイショ
デン粉、界面活性剤などを含むデン粉：湿潤剤としてラ
ウリル硫酸ナトリウムなどがあげられる。更に非経口的
に投与する場合には全開として用いることができる。特
に全開の基剤としてカカオ脂、ウイテブソール（Ｗｉｔ
ｅｐｓｏり、サバナール（Ｓｕｂａｎａｌ）、ポリエチ
レングリコール、ポリプロピレングリコール、グリセロ
ゼラチン、ゼラチンカプセルなどが用いられる。その他
、メチルパラヒドロキシベンゾエート、プロピルパラヒ
ドロキシベンゾエート、ブチルパラヒドロキシベンゾエ
ート、ブチルヒドロキシアニソールなどの公知の安全な
防腐剤、その他の安全な色素を配合して用いる。

本発明の糖尿病治療剤のミミズ抽出物の単品又はミミズ
抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物の投与量は、投与方
法、患者の年齢、体重、状態及び疾患の種類によっても
変動するが、通常ヒトに一日当り０．０１ｇから５ｇ程
度が好ましい。最も好ましいのは一日当り０．０２ｇか
ら２ｇで一日１〜３回に分けて投薬することである。

作用： 本発明のミミズ抽出物、ミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末
との混合物及びミミズ乾燥粉末の毒性及び糖尿病治療効
果又は血糖降下の薬理試験法とその結果について、以下
、詳細に説明する。

Ａ、ミミズ乾燥粉末の急性毒性試験 体重３０±２ｇのｄｄｙ系雄基地ス及び体重１００±２
ｇのウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）基地うット各−群５匹
を用いて経口投与での急性毒性試験を行なった。ミミズ
乾燥粉末Ｍ−１（水分１０．２％、灰分５．１％、窒素
９．４％含有）；ＦＩＭ−２（水分１０．４％、灰分５
．３％、窒素８．６％含有）；同Ｍ−３（水分１０．７
％、灰分５．２％、窒素９．２％含有）；同Ｍ−４（水
分１０．６％、灰分５．６％、窒素９．６％含有）：同
Ｍ−５（水分９．５％、灰分４．５％、窒素７．８％含
有）；同Ｍ−６（水分９．２％、灰分４．７％、窒素８
．４％含有）；同Ｍ−８（水分１０．１％、灰分４．６
％、窒素８．７％含有）−同Ｍ−９（水分９．８％、灰
分４．８％、窒素８．５％含有）の８種のそれぞれの服
用量を０．１ｇ／ｋｇから８　ｇ／ｋｇに増加して前記
のマウス（０，１から５ｇ／ｋｇ）及びラット（２から
８　ｇ／ｋｇ）に咽喉さぐり棒で強制投与によって個々
に投薬した。試験期間中動物は動物室温度２２〜２３℃
に維持し、投薬後１４日間観察した。投薬されたすべて
の薬物の服用量での死亡は全く認められなかった。投薬
後の中毒症及び行動を経時的に観察したが、正常動物群
と何等の相違は認められなかった。又、体重増加も正常
動物群とほとんど差がなかった。試験後に実施した検視
において主要器官のいかなる部分にも同等巨視的障害は
認められなかった。従って、ミミズ乾燥粉末は非常に低
い毒性のためにＬＤ、。値を決定することができなかっ
た。

Ａ−１，ミミズ抽出物の急性毒性試験：前記Ａの急性毒
性試験法と同じ方法により測定した。すなわち、体重３
０±２ｇのｄｄｙ系雄基地ス各−群５匹を用いて経口投
与での急性毒性試験をおこなった。

例えば、前記の本発明のミミズの抽出物Ｘ−■、−■、
−■、−■、−■、−■、−■及び−■の８種を用いて
、前記のマウスに０．１ｇ／ｋｇから５　ｇ／ｋｇに増
加して、咽喉さぐり棒で強制投与によって個々に投薬し
た。

試験中マウスは動物室温度２２〜２３℃に維持し、投薬
後１４日間観察した。投薬された服用量での死亡は全く
認められなかった。かつ中毒症状の所見また剖検では異
常は全く認められなかった。従って、本発明のミミズか
らの水性溶媒及び／又は有機溶媒による抽出物は非常に
低い毒性のためにＬＤ、。値を決定することができなか
った。

Ａ−２，ミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物の急
性毒性試験： 前記Ａと同じ方法により測定した。すなわち、体重３０
±２ｇのｄｄｙ系雄基地ス各−群５匹を用いて経口投与
での急性毒性試験をおこなった。

前記の製法３及び４で得たミミズ抽出物Ｘ−■とミミズ
乾燥粉末に−１の５０：　５０（ｗｔ％）の混合物；以
下同じようにＸ−■とに−１；Ｘ−■とに−２；　Ｘ−
■とに−３；　　Ｘ−■とに−７、Ｘ−■−１とに−７
；　　Ｘ−■、！：に−９；　　Ｘ−＠ｌとに−７；Ｘ
−■とに−８の５０：　５０（ｉｔ％）の混合物の９種
を用いて、前記のマウスにＯ，Ｉｇ／ｋｇから５　ｇ／
ｋｇに増加して、咽喉さぐり棒で強制投与によって個々
に投薬した。試験中マウスは動物室温度２２〜２３℃に
維持し、投薬後１４日間観察した。投薬された服用量で
の死亡は全く認められなかった。かつ中毒症状の所見ま
たは剖検では異常は全く認められなかった。従って、本
発明のミミズからの水性溶媒及び／又は有機溶媒による
抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物は非常に低い毒性の
ためにＬＤ、。値を決定することができなかった。

Ｂ、ミミズ乾燥粉末の実験的糖尿病マウスに対する作用 薬理試験ｌ： １）動物：体重３０±２ｇのｄｄｙ系雄基地ウス１群５
匹を用いた。

２）飼料及び飼育条件：日本タレア社製固型飼料を用い
、１ケージにマウス−匹を入れ、飼料及び水は自由採取
とした。温度２３±１℃及び湿度５５±５％の恒温恒湿
で飼育した。

前記のｄｄｙ系雄性マウスを１６時間絶食後、アロキサ
ン７５ｍｇ／ｋｇを静脈内に投与し、４８時間後に、ミ
ミズ乾燥粉末Ｍ−１（水分１Ｏ９２％、灰分５．１％、
窒素９．４％）、同Ｍ−２（水分１Ｏ９４％、天分５．
３％、窒素８．６％）、同Ｍ−３（水分１Ｏ０７％、灰
分５．２％、窒素９．２％）、同Ｍ−４（水分１０．６
％、灰分５．６％、窒素９．６％）、同Ｍ−５（水分９
．５％、灰分４．５％、窒素７．８％）、同Ｍ−６（水
分９．２％、灰分４．７％、窒素８．４％）の６種（３
００ｍｇ／ｋｇ）をそれぞれ生理的食塩水にけん濁して
経口投与し、１５０分後に心臓から採血し、グルコース
オキシダーゼ法により血中糖量を測定した。

測定結果は表−５に示した。ミミズ乾燥粉末は有意に血
糖を降下することがわかった。

＊　：　ｐ　＜０．０５、＊　＊　：Ｐ　＜０．０１、
＊＊　＊　：　Ｐ　＜０．００１Ｂ−１，ミミズ抽出物
の実験的糖尿病マウスに対する作用 薬理試験２： 前記Ｂの実験的糖尿病マウスに対する作用の薬理試験と
同じ方法により測定した。すなわち、ｌ）動物二体重３
０±２ｇのａｄｙ系雄基地ウス１群５匹を用いた。

２）飼料及び飼育条件：日本夕レア社製固型飼料を用い
、１ケージにマウス１匹を入れ、飼料及び水は自由摂取
とした。温度２３±１℃及び湿度５５±５％の恒温度恒
湿で飼育した。前記のｄｄｙ系雄基地スを１６時間絶食
後、アロキサン７５ｍｇ／ｋｇを静脈内に投与し、４８
時間後に、ミミズ乾燥粉末の４種（Ｋ−１，−３、−７
及び−９〕を３００ｍｇ／ｋｇｓ又、本発明のミミズ抽
出物の９種〔Ｘ−■、−■、−■、−■、−■、−■、
−［相］、−■及び−■〕の５０ｍｇ／ｋｇをそれぞれ
生理的食塩水に懸濁して経口投与し、１５０分後に心臓
から採血し、グルコースオキシダーゼ法により血中糖量
を測定した。

測定結果は表−５−１に示した。本発明のミミズ乾燥粉
末及びミミズ抽出物は有意に血糖を低下することがわか
った。ミミズ抽出物は、ミミズ乾燥粉末の１７６の量で
ミミズ乾燥粉末よりも血糖値の低下率が大であった。

（以下余白） 表−５−１ ＊：Ｐ＜０．０５、＊　＊　：Ｐ＜０．０１．＊　＊　
＊　＋Ｐ＜０．００１Ｂ−２，ミミズ抽出物とミミズ乾
燥粉末との混合物の実験的糖尿病マウスに対する作用 薬理試験３： 前記Ｂの実験的糖尿病マウスに対する作用の薬理試験と
同じ方法により測定した。すなわち１）動物二体重３０
±２ｇのｄｄｙ系雄基地ウス１群５匹を用いた。

２）飼料及び飼料条件二日本タレア社製固を飼料を用い
、１ケージにマウス１匹を入れ、飼料及び水は自由摂取
とした。温度２３±１℃及び湿度５５±５％の恒温恒温
で飼育した。前記のｄｄｙ系雄基地スを１６時間絶食後
、アロキサン７５ｍｇ／ｋｇを静脈内に投与し、４８時
間後に、ミミズ抽出物の１０種の各１５ｍｇ／ｋｇとミ
ミズ乾燥粉末１０種の各９０ｍｇ／ｋｇとの混合物（こ
の混合物の組み合せは表−５−２に示しｔ；。）及び対
照薬としてミミズ抽出物の３種〔Ｘ−■、−〇及び−＠
〕の各５０ｍｇ／ｋｇとミミズ乾燥粉末の５種〔Ｍ−２
、−４、及び−６、Ｋ−１及びに−７〕の各３００ｍｇ
／ｋｇをそれぞれ生理的食塩水に懸濁して経口投与し、
１５０分後に心臓から採血し、グルコースオキシダーゼ
法により血中糖量を測定した。測定結果は表−５−３に
示した。上記の被験体はすべて有意に血糖を低下するこ
とがわかった。特にミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との
混合物は、単位重量で比較するとミミズ抽出物及びミミ
ズ乾燥粉末の単品よりも血糖値の低下率が大であり、こ
の混合物の相乗効果は明らかである。

（以下余白） 表−５−３ ＊：Ｐ＜０．０５、＊　＊　：　Ｐ　＜０．０１、＊＊
＊：Ｐ＜０．００１Ｃ，ミミズ乾燥粉末のヒトに対する
経口投与実験二本実験に賛同を得た５人のボランティア
（Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒ）に食事療法と共に、後述の参考
例６で製造したカプセネ剤Ｃ（ｌカプセル剤にミミズ乾
燥粉末（前記のＭ−３、水分ｌ００７％、灰分５．２％
、窒素９．２％）１５０ｍｇ含有〕、含有側４で製造し
たカプセル剤Ａ（１カプセル剤にミミズ乾燥粉末（前記
のＭ−２、水分１Ｏ６４％、灰分５．３％、窒素８．６
％）１５０ｍｇ含有〕及含有側例１０で製造したカプセ
ル剤ＤＣＩカプセル剤にミミズ乾燥粉（前記のＭ−２）
１５０ｍｇ含有〕を含有側カプセル剤１日３回を食後３
０分以内に経口服用とした。採血は６２才の男性のみ投
与１ケ月経過毎に行ない、９ケ月間投薬し、採血した。

５９才の男性は投薬前と投薬２．３．４ケ月後に採血し
ｔ；。７６オの女性は投薬前と投薬４ケ月後に採血し、
７９才の女性は投薬前と投薬３及び６ケ月後に採血した
。６１才の女性は投薬前と投薬１．３．４及び８ケ月後
に採血を行なった。血中糖量はグルコースオキシダーゼ
法により測定した。この結果は表−６に示した。

表−６ （以下余白） 〔注〕 ９Ｍａ： ９ケ月後、 その他同じ意味 この実験を行なった地方住民健康人の血糖の標準値（ｍ
ｇ／ｄＱ）は朝食前５０−１００、朝食２時間後１５０
以下、昼食前５０〜１００、昼食２時間後１５０以下、
夕食前５０〜１００、夕食２時間後１５０以下である。

表−６に示した５人のボランティアとも、薬物投与前の
朝食前の空腹時の血中糖量がいずれも高血糖値であり、
糖尿病患者であった。

中程度の糖尿病と考えられる６２才の男性の場合は、本
発明のミミズ乾燥粉末投与２ケ月後から血中糖量の改善
がみられ、投与３ケ月後では６項目の検査値の内、夕食
２時間後の１項目の値が１８５ｍｇ／ｄ（２と高い以外
は、はぼ標準値近くまで改善された。投与４ケ月後は６
項目の検査値全部が標準値に達した。それ以後、５ケ月
間の６項の血中糖量は標準値の範囲内を保持した。

５９才の男性は、投薬３ケ月後に６項目の検査値の内、
昼食前の１項目の値が１１４ｍｇ／ｄ４と僅かに高いほ
かは、標準値に達し、投与４ケ月後には６項目すべてが
標準値の範囲内に達した。

７９才の女性は投薬３ケ月後で、６項目の検査値の内、
昼食２時間後と夕食前の値が１７１及び１０７ｍｇ／ｄ
Ｑと僅かに高い値である以外の４項目の値は、標準値の
範囲内に改善され、投与６ケ月後には完全に標準値に達
した。

７６オの女性は軽度の糖尿病患者であったが、投与４ケ
月後に６項目の血中糖量は標準値に達した。

６１才の女性は、かなり重度の糖尿病患者である。

この女性に、本発明のミミズ乾燥粉末を投与した４ケ月
後から、血中糖量の改善が見られ、８ケ月後には朝食２
時間後と昼食前の値がそれぞれ１９７と２１０ｍｇ／ｄ
（２と高い値である以外の４項目は標準値に達した。

このミミズ乾燥粉末のヒトへの経口投与実験は、完全に
、かつ、副作用は同等発生することなく、無事に終了す
ることができた。たとえば、６〜９ケ月間の長期投与に
おいても、標準下限値以下まで血中糖量値が低下する低
血糖発生の危険は一度もなく、本発明のミミズ乾燥粉末
は安全な薬剤であることがわかった。

上記の結果を総括すると次のとおりである。すなわち、
ミミズ乾燥粉末の経口投与では、かなり重度の糖尿病患
者の場合、前記６項目全部の血中糖量値を標準値まで降
下させることは稍々困難であったが、投与８ケ月後には
６項目中４項目の血中糖量を標準値まで降下させるなど
の改善効果のあることがかわった。然し、軽・中程度の
糖尿病患者の場合には、投与４ケ月後以降から６項目全
部の血中糖量を標準値以内まで低下させることができた
。本発明のミミズ乾燥粉末は安全ですぐれた血糖降下剤
、すぐれた糖尿病治療・予防剤であることがわかった。

これらの結果により、ミミズからの抽出物であるミミズ
抽出物も、ミミズ乾燥粉末と同じようにヒトに対し安全
で、かつ、すぐれた糖尿病治療・予防剤であることが容
易にわかる。同じように、ミミズ抽出物とミミズ乾燥粉
末との任意に比率による混合物も、ヒトに対し安全で、
かつ、すぐれた糖尿病治療・予防剤であることが容易に
わかる。

すなわち、ミミズ乾燥粉末とミミズ抽出物とは、その製
造方法に僅少の相違はあるが、同一の原料から製造した
ものゆえ、すぐれた効果を示すのは当然の結果と考える
。又、ミミズ抽出物はミミズの懸濁液又はその乾燥粉末
中の有効成分を選択的に抽出したものゆえ、ミミズ乾燥
粉末よりも少量で効果を示すものと考える。ミミズ抽出
物とミミズ乾燥粉末との混合物の相乗的効果の理由は不
明であったが、全く予想できなかったすぐれた効果であ
った。

実施例１．カプセル剤Ｅ ミミズの抽出物（前記Ｘ−■）　　　　　　３０ｍｇ乳
　　　　糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２
８微結晶セルロース　　　　　　　　　　４７マニトー
ル　　　　　　　　　　　　１００トウモロコシデン粉
　　　　　　　　　４０ポリビニルピロ、リドン　　　
　　　　　　２ヒドロキシプロピルセルロース　　　　
　３計２５０ｍｇ 上記処方の内、ヒドロキシプロピルセルロース以外の成
分を流動層造粒装置を用いてよく混合したのち、ヒドロ
キシプロピルセルロースの５％水溶液を結合剤として噴
霧し、４０℃で乾燥後顆粒とした。この顆粒硬カプセル
に２５０ｍｇずつ充填して硬カプセル剤を製造した。

実施例２．カプセル剤Ｆ 顆粒剤 ミミズの抽出物（前記Ｘ−■）　　　　　　３０ｍｇ乳
　　　　　糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
０３トウモロコシデン粉　　　　　　　　　８９バレイ
シヨデン粉　　　　　　　　　２２タ　　　ル　　　り
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　３ステアリン酸マグネシウム　　　　　　
　３計２５０ｍｇ 上記処方に従い、よく混合した粉末を抽出機で顆粒剤を
製造した。この顆粒剤を硬カプセルに２５０ｍｇずつ充
填して硬カプセル剤を製造した。

実施例３．カプセル剤Ｇ ミミズの抽出物（前記Ｘ−［相］）　　　　　　３０ｍ
ｇリン酸−水素カルシラ！、、、、　　　　　　　　６
０リン酸−水素ナトリウム　　　　　　　２０マニトー
ル　　　　　　　　　　　　　３８ステアリン酸マグネ
シウム　　　　　　　２計１５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合し、この混合粉末をゼラチ
ンカプセルに１５０ｍｇずつ充填し、カプセル剤を製造
した。

実施例４．カプセル剤Ｈ ミミズの抽出物（前記ｘ−ｏ）　　　　　３０ｍｇラウ
リル硫酸ナトリウム　　　　　　　　４リン酸−水素ナ
トリウム　　　　　　　　ｌマニトール　　　　　　　
　　　　　１１３ステアリン酸マグネシウム　　　　　
　　２計１５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合する。この混合粉末をゼラ
チンカプセルに１５０ｍｇずつ充填し、カプセル剤を製
造した。

実施例５．カプセル剤Ｉ ミミズ乾燥粉末（Ｍ−２）　　　　　　　７５ｍｇミミ
ズ抽出物（前記Ｘ−■）　　　　　　　１５ｍｇラウリ
ル硫酸ナトリウム　　　　　　　　４リン酸−水素ナト
リウム　　　　　　　　ｌマニトール　　　　　　　　
　　　　１５３ステアリン酸マグネシウム　　　　　　
　２計２５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合する。この混合粉末をゼラ
チンカプセルに２５０ｍｇずつ充填し、カプセル剤を製
造した。

実施例６．カプセル剤Ｊ ミミズ乾燥粉末（Ｍ　　４）　　　　　　　　５０ｍｇ
ミミズ抽出物（前記Ｘ−■）２０ｍｇ ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　２マニトール
　　　　　　　　　　　　１７６ステアリン酸マグネシ
ウム　　　　　　　２計２５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合する。この混合粉末をゼラ
チンカプセルに２５０ｍｇずつ充填し、カプセル剤を製
造した。

実施例７．カプセル剤に ミミズ乾燥粉末（Ｍ−１）　　　　　　　７５ｍｇミミ
ズ抽出物（前記Ｘ−■）　　　　　　　１５ｍｇラウリ
ル硫酸ナトリウム　　　　　　　　２リン酸−水素ナト
リウム　　　　　　　　ｌマニトール　　　　　　　　
　　　　　５５ステアリン酸マグネシウム　　　　　　
　２計１５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合する。この混合粉末をゼラ
チンカプセルに１５０ｍｇずつ充填し、カプセル剤を製
造した。

実施例８．カプセル剤Ｌ ミミズ乾燥粉末（前記に−７）　　　　　５０ｍｇミミ
ズ抽出物（前記Ｘ−＠ｌ）　　　　　　　２０ｍｇリン
酸−水素ナトリウム　　　　　　　　２マニトール　　
　　　　　　　　　　　７６ステアリン酸マグネシウム
　　　　　　　２計１５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合する。この混合粉末をゼラ
チンカプセルに１５０ｍｇずつ充填し、カプセル剤を製
造した。

実施例９．カプセル剤Ｍ ミミズ乾燥粉末（前記に−９）　　　　　　７０ｍｇミ
ミズ抽出物（前記Ｘ−■）　　　　　　　１５ｍｇ乳　
　　　　Ｍ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　７０トウモロコシデン粉　　　　　　　　　６９バレ
イシヨデン粉　　　　　　　　　　２２タ　　　ル　　
　り　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　２ステアリン酸マグネシウム　　　
　　　　２計２５０ｍｇ 上記処方に従い、よく混合した粉末を押出機で顆粒剤を
製造した。この顆粒剤を硬カプセルに２５０ｍｇずつ充
填して硬カプセル剤を製造した。

実施例１Ｏ１錠剤Ａ ミミズ抽出物（前記Ｘ−■） マニトール ヒドロキシプロポキシメチルセルロースタ　　ル　　り 微結晶セルロース 水素化ヒマシ油 ０ｍｇ 計　　８０ｍｇ 錠剤Ｂ ミミズ抽出物（前記Ｘ−■）　　　　　　　３０ｍｇト
ウモロキシデン粉　　　　　　　　　３゜乳　　　　　
糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３５タ　　
　ル　　　り　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　３ステアリン酸マグネシウム　
　　　　　　２計１００ｍｇ 錠剤Ｃ ミミズ抽出物（前記Ｘ　−（！Ｄ）　　　　　　　１５
ｍｇミミズ乾燥粉末（前記に−７）　　　　　５０可溶
性デン粉　　　　　　　　　　　　２０トウモロコシデ
ン粉　　　　　　　　　２５微結晶セルロース　　　　
　　　　　　４５酸化ケイ素　　　　　　　　　　　　
　　３ステアリン酸マグネシウム　　　　　　　２計１
６０ｍｇ 上記処方に従い均一によく混合した粉末を打錠機により
、各種の錠剤を製造した。

実施例１１゜ 水で軽く洗浄した生きミミズ（アカミミズ）　１　ｋｇ
（約２万匹）を、リンゴ酸とクエン酸のｌ＝１の混合酸
を溶存するｐＨ６，２の酸性水溶液４Ｑ中に温度１５℃
で３時間放置し、消化管内の糞土を十分に排泄させたの
ち、生きミミズを水でよく洗浄して生きミミズの体表面
に付着している泥、糞などの汚物を洗い落とす。

次にミキサーにかけて湿式粉砕する。得られたミミズの
懸濁液をトレーに入れ一３０℃で４０１１９間凍結した
のち、品温−４０℃で０．ｌｍｍＨｇの真空下、６時間
凍結乾燥し、次にトレーの乗せている棚温を３０℃に上
げＱ、ｌｍｍＨｇの真空下、６時間真空乾燥したのち、
次に棚温５０℃に上げ、Ｑ、２ｍｍＨｇの真空下１０時
間真空乾燥し、次に棚温を８０℃に上げ、１２ｍｍＨＨ
の真空下で８時間乾燥することによりミミズの乾燥粉末
製品（Ｍ−１）を２８０ｇ得ｔ；。

実施例１２゜ 水で軽く洗浄した生きミミズ（アカミミズＨｋｇを、リ
ン酸と酒石酸および乳酸の１　：ｌ　：ｌの混合酸を含
むｐＨ５，５の酸性水溶液３ａ中に温度１０℃で２．５
時間放置して消化管内の糞土を十分に排泄させたのち、
生きミミズを水でよく洗浄して生きミミズの体表面に付
着している泥・糞などの汚物を洗い落とす。

次にミキサーで湿式粉砕する。得られたミミズの懸濁液
をトレーに入れ、−２５℃で２０時間凍結したのち、品
温を一３５℃に下げ、０．ｌｍｍＨｇの真空下で７時間
凍結乾燥し、次にトレーの乗せている棚温を２８℃に上
げ、０．ｌｍｍＨｇの真空下で１０時間真空乾燥し、次
に４０℃で、０．２ｍｍＨｇの真空下１．１３時間真空
乾燥し、次に７８℃でｌｌｍｍＨｇの真空下で８時間乾
燥することによりミミズ乾燥粉末製品ＣＭ−２）を２７
５ｇ得た。

実施例１３゜ 水で軽く洗浄した生きミミズ（アカミミズ）　１　ｋｇ
を、リンゴ酸を溶解したｐＨ５，８の酸性水溶液２ａ中
に温度１３℃で３時間放置し、消化管内の糞土を十分に
排泄させる。生きミミズを水でよく洗浄して生きミミズ
の体表面に付着している泥、糞などの汚物を洗い落とす
。次にウルトラホモミキサー（日本精機株式会社製）で
湿式粉砕する。得たミミズの懸濁液をトレーに入れ一３
０℃で３０時間凍結したのち、品温を一３０℃でＯ，ｌ
ｍｍＨｇの真空下、８時間凍結乾燥し、次にトレーの乗
せている棚温を２５℃に上げＱ、ｌｍｍＨｇの真空下で
７時間真空乾燥し、次に棚温を４５℃に上げＯ，ｌｍｍ
Ｈｇの真空下で１２時間真空乾燥し、次に棚温を８０℃
に上げ帆１　ｎｏｎＨｇの真空下で７時間乾燥すること
によりミミズ乾燥粉末製品（Ｍ−４）を２７５ｇ得た。

実施例１４゜ 生きミミズ（アカミミズ）１ｋｇの体表面に付着する泥
、糞などの汚物を水で４回よく洗浄して洗い落とす。次
にこの生きミミズをリンゴ酸と乳酸１：１の混合酸を溶
解させたｐＨ５，７の酸性水溶液２．５Ｑ中に温度１５
℃で２．５時間放置して消化管内の糞土を排泄させる。

次に生きミミズを軽く洗浄したのち、ミキサーで湿式粉
砕する。得られたミミズの懸濁液をトレーに入れ一３５
℃で２４時間凍結する。

次に品温−３５℃で帆ｌｍｍＨｇの真空下、７時間凍結
乾燥し、次にトレーの乗せている棚温を２２℃に上げＱ
、ｌｍｍＨｇの真空下、１０時間真空乾燥したのち、次
に棚温を４２℃に上げ０．２ｍｍＨｇの真空下１５時間
乾燥し、最後に棚温を７８℃に上げ０．ｌｍｍＨｇの真
空下で７時間乾燥することによりミミズの乾燥粉末製品
（Ｍ　−６）２６５ｇを得た。

実施例１５゜ クエン酸を溶解したｐＨ６，０の酸性水溶液２．５Ｑ中
にリン酸２水素カリウム１．５ｇを溶解し、これに水で
軽く洗浄した生きミミズ（フトミミズＨｋｇを入れ、１
５℃で２時間放置して消化管内の糞土を排泄させる。次
に生きミミズを水で２回洗浄して、生きミミズの体表面
に付着する泥、糞、わらなどの汚物を洗い落とす。次に
ミキサーで湿式粉砕する。

その後は得られｔ；ミミズの懸濁液をトレーに入れ一４
０°０で２４時間凍結する。次に品温を一４０℃で０、
ｌｍｍＨｇの真空下で５時間凍結乾燥し、次に２５℃で
０．ｌｍｍＨｇの真空下で８時間乾燥したのち、次に４
５℃で０．ｌｍｍＨｇの真空下で１２時間乾燥し、次に
８０℃でｌｌｍｍＨｇの真空下で７時間乾燥することに
よりミミズの乾燥粉末製品（Ｍ　−７）２８０ｇを得た
。

実施例１６゜ 生きミミズ（ツリミミズ）１ｋｇの体表面に付着する泥
、糞、わらなどの汚物を水で５回よく洗浄して洗い落と
す。次に、この生きミミズをコハク酸を溶解したｐＨ５
，７の酸性水溶液３１２（この中に酢酸ナトリウムＩｇ
と硫酸ナトリウム０．５ｇを溶存する。）中に１３℃で
２．５時間放置して消化管内の糞土を排泄した。次に生
きミミズを水で軽く洗浄したのち、ホモジナイザーで湿
式粉砕する。得たミミズ懸濁液をトレーに入れ一３５℃
で２４時間凍結する。次に品温−３５℃でＯ，ｌｍｍＨ
ｇの真空下、７時間凍結乾燥し、次にトレーの乗せてい
る棚温を２２℃に上げ０．ｌｍｍＨｇの真空下、１０時
間真空乾燥したのち、次に棚温４２℃に上げ０．２ｍｍ
Ｈｇの真空下１５時間乾燥し、最後に棚温を７８℃に上
げ帆ｌ　ｍｍＨｇの真空下で７時間乾燥することにより
ミミズの乾燥粉末製品（Ｍ−８）２７５ｇを得た。

実施例１７゜ 生きミミズ（フトミミズ）１ｋｇの体表面に付着する泥
、糞、わらなどの汚物を水で５回よく洗浄して洗い落と
す。次にこの生きミミズをクエン酸と酒石酸ｌ：１の混
合酸を溶解したｐＨ５，９の酸性水溶液２．５１２（こ
の中にクエン酸カリウム０．７ｇを溶存する。）中に１
５℃で２時間放置して消化管中の糞土を排泄した。次に
、生きミミズを水で軽く洗浄したのち、ブレンダーで湿
式粉砕する。得たミミズ懸濁液をトレーに入れ−３５６
０で２４時間凍結した。

次に品温−３５℃で０．ｌｍｍＨｇの真空下、７時間凍
結乾燥し、次にトレーの乗せている棚温を２２℃に上げ
Ｑ、ｌｍｍＨｇの真空下、１０時間真空乾燥したのち、
次に棚温４２℃に上げＯ−２ｍｍＨｇの真空下で１５時
間乾燥し、最後に棚温を７８℃に上げ０．ｌｍｍＨｇの
真空下で７時間乾燥することによりミミズの乾燥粉末製
品（Ｍ　−９）２８３ｇを得た。

実施例１８゜ 水で軽く洗浄した生きミミズ（アカミミズ）　ｌ　ｋｇ
を真水３Ｑ中に温度ｌＯ℃で１６時間放置して消化管内
の糞土を排泄させる。生きミミズを水でよく洗浄して生
きミミズの体表面に付着している泥、糞などの汚物を洗
い落とす。次にウルトラホモミキサーで湿式粉砕する。

得たミミズ懸濁液をトレーに入れ一２５℃で１５時間凍
結する。次に品温を一３５℃に下げ１１ｍｍＨＨの真空
下で６時間凍結乾燥し、次に３０℃で帆Ｏ８ｍｍＨｇの
真空下で１０時間乾燥し！：のち、次に４０℃で０．２
ｍｍＨｇの真空下、１５時間乾燥し、次に７８℃でＱ　
、　ｌｍｍＨｇの真空下で８時間乾燥することによりミ
ミズ乾燥粉末製品（Ｍ−３）を２４５ｇ得た。

実施例１９゜ 生きミミズ（アカミミズ）　１　ｋｇの体表面に付着す
る泥、ワラなどの汚物を水で５回よく洗浄して洗い落と
す。次に、この生きミミズを真水２．５ａ中に温度１５
℃で１８時間放置して消化管内の糞土を排泄した。次に
生きミミズを軽く洗ったのち、ウルトラホモミキサーで
湿式粉砕した。得たミミズ懸濁液をトレーに入れ一４０
℃で２４時間凍結した。次に品温を一４０℃でＱ、ｌｍ
ｍＨｇの真空下で５時間凍結乾燥し、次に２５℃で帆１
＋ｎｍＨｇの真空下で８時間乾燥したのち、次に４５°
Ｏ′ｔｌｓＯ、ｌｍｍＨｇの真空下で１２時間乾燥し、
次に８０℃で０．ｌｍｍＨｇの真空下で７時間乾燥する
ことによりミミズ乾燥粉末製品（Ｍ−５）を２４０ｇ得
ｔ；。

参考例１６錠剤Ａ ミミズ乾燥粉末（Ｍ−８）　　　　　　　１５０ｍｇマ
ニトール　　　　　　　　　　　　１２３ヒドロキシプ
ロポキシメチルセルロース微結晶セルロース タ　　ル　　り 水素化ヒマシ油 錠剤Ｂ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−８） トウモロコシデン粉 乳　　　　糖 タ　　ル　　ク ステアリン酸マグネシウム 錠剤Ｃ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−８） 可溶性デン粉 トウモロコシデン粉 微結晶セルロース 酸化ケイ素 ステアリン酸マグネシウム 計３５０ｍｇ １５０＋ｏｇ 計３００ｍｇ ５０ｍｇ 計３５０ｍｇ 上記処方に従い均一によく混合しｔ；粉末を打錠機によ
り、各種重量の錠剤を製造した。

参考例２．顆粒剤Ａ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−２）　　　　　　１５０ｍｇ乳
　　　　　　糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　
２０微結晶セルロース　　　　　　　　　　６゜トウモ
ロコシデン粉　　　　　　　　　１５ヒドロキシプロピ
ルセルロース　　　　　５計２５０ｍｇ 上記処方に従い、流動層造粒装置を用い、ミミズの乾燥
粉末、乳糖、微結晶セルロース及びトウモロコシデン粉
をよく混合し、ヒドロキシプロピルセルロースの５％水
溶液を結合剤として噴霧し、低温乾燥後顆粒とした。

参考例３．１粒剤Ｂ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−２） マニトール 微結晶セルロース カルボキシメチルセルロ−スカルシウムステアリン ００ｍｇ １、５ 硬化油 １、５ 計２０ ０、０ｍｇ 顆粒剤Ｃ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−２）　　　　　　１５０ｍｇ乳
　　　　　糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
５３トウモロコシデン粉　　　　　　　　　３９バレイ
シヨデン粉　　　　　　　　　　　２タ　　　ル　　　
り　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　３ステアリン酸マグネシウム　　　　
　　　３計２５０ｍｇ よく混合した粉末を押出機で 上記処方に従い、 顆粒剤を製造した。

参考例４．カプセル剤Ａ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−２） 乳　　　　　糖 微結晶セルロース マニトール トウモロコシデン粉 ポリビニルピロリドン ヒドロキシプロピルセルロース ５０ｍｇ 計２５０ｍｇ 上記処方の内、ヒドロキシプロピルセルロース以外の成
分を流動層造粒装置を用いてよく混合したのち、ヒドロ
キシグロビルセルロースの５％水溶液を結合剤として噴
霧し、低温乾燥後顆粒とした。この顆粒を硬カプセルに
２５０ｍｇずつ充填して硬カプセル剤を製造した。

参考例５．カプセル剤Ｂ 参考例５により製造した顆粒剤Ｃを硬カプセルに、２５
０ｍｇずつ充填して硬カプセル剤を製造した。

参考例６．カプセル剤Ｃ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−４）　　　　　　１５０ｍｇリ
ン酸−水素カルシウム　　　　　　　６０リン酸−水素
ナトリウム　　　　　　　１０マニトール　　　　　　
　　　　　　　２８ステアリン酸マグネシウム　　　　
　　　２計２５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合し、この混合粉末をＮｏ、
ｌのゼラチンカプセルに２５０ｍｇずつ充填し、カプセ
ル剤を製造した。

参考例７．腸溶錠剤 ミミズ乾燥粉末（Ｍ　　１）　　　　　　　１００ｍｇ
マニトール　　　　　　　　　　　　　ｌＯ微結晶セル
ロース　　　　　　　　　　８５カルボキシメチルセル
ロースカルシウム　　　　　　　　２ステアリン酸マグ
ネシウム　　　　　　　１．５計２００ｍｇ 上記の処方に従い、均一に混合した粉末を打錠機にて素
錠を製造したのち、次に示す腸溶剤皮のコーティング剤
でコーティングし、腸溶錠剤を製造した。

コーティング剤 ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート１４．
８ｍｇ ジオクチルフタレート　　　　　　　　　２．３ステア
リン酸　　　　　　　　　　　　　　２．３軽質酸化ケ
イ素　　　　　　　　　　　０，６計　　２０．０ｍｇ 参考例８．散剤Ａ ミミズ乾燥粉末（Ｍ−４）　　　　　　　１５０ｍｇマ
ニトール　　　　　　　　　　　　　５０トウモロコシ
デン粉　　　　　　　　　５０計２５０ｍｇ 散剤Ｂ ミミズ乾燥粉末（Ｍ−４）　　　　　　　１５０ｍｇリ
ン酸−水素カルシウム　　　　　　　２０トウモロコシ
デン粉　　　　　　　　　８０計２５０ｍｇ 上記成分をそれぞれ円錐混合機中で均一によく混合して
散剤とした。

参考例９．坐剤Ａ ミミズの乾燥粉末（Ｍ−５）　　　　　　２００ｍｇウ
ィテッグソール　　　　　　　　　５４０（Ｗｉｔｅｐ
ｓｏｌ）　Ｅ　−８５ ウイテツプソール　　　　　　　１．４５４（／／　　
）Ｗ−３５ メチルバラヒドロキシベンゾエート　　　３ブチルパラ
ヒドロキシベンゾエート　　　３計２，２００ｍｇ 全開Ｂ ミミズの乾燥粉末ＣＭ−６）　　　　　　２００ｍｇブ
チルヒドロキシアニソール　　　　　　６計３．１０６
ｍｇ 上記処方したものをそれぞれよく混合した熔融物をアル
ミニウム製の型に注入し、冷却して全開を製造した。

参考例１０．カプセル剤Ｄ ミミズ乾燥粉末（Ｍ−２）　　　　　　　１５０ｍｇラ
ウリル硫酸ナトリウム　　　　　　　　４リン酸−水素
ナトリウム　　　　　　　　ｌマニトール　　　　　　
　　　　　　　９３ステアリン酸マグネシウム　　　　
　　　２計２５０ｍｇ 上記処方したものをよく混合する。この混合粉末ヲＮｏ
、１のゼラチンカプセルに２５０ｍｇずつ充填し、カプ
セル剤を製造した。

〔発明の効果〕

上記に述べたように、本発明はミミズ抽出物又はミミズ
抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物を有効成分として含
有する糖尿病治療剤に関する。アロキサンによる実験的
糖尿病マウスに、ミミズ抽出物又はミミズ抽出物とミミ
ズ乾燥粉末との混合物もしくはミミズ乾燥粉末を投与す
ることにより、有意に血中糖量を低下させることができ
た。

次に、５人の糖尿病患者のボランティアに、食事療法と
共にミミズ乾燥粉末カプセル剤（１５０ｍｇ含量）を１
回ｌ剤１日３回食後経口で４〜９ケ月間投与した。投与
１ケ月、２ケ月又は３〜４ケ月後から少なくとも１ケ月
経過毎に、朝食前、朝食２時間後、昼食前、昼食２時間
後、夕食前、夕食２時間後の６回採血し、血中糖量を測
定した。この結果、軽・中程度の糖尿病患者の場合、ミ
ミズ乾燥粉末投与２〜３ケ月後から改善され、投与４ケ
月後以降からは、前記６項目全部の血中糖量を標準値（
朝・昼・夕の３食前の血糖の標準値は５０〜１００ｍｇ
／ｄ１２．同じ各３食２時間後の血糖の標準値は１５０
ｍｇ／ｄＱ以下）の範囲内まで降下させることができた
。重度の糖尿病患者の場合、前記６項目全部の血糖を標
準値の範囲内まで降下させることは精々困難であったが
、投与８ケ月後には６ＴＸ目中４項目の血糖を標準値ま
で降下させる改善効果を示した。又、ミミズ乾燥粉末６
〜９ケ月間の長期投与においても、血糖が標準値の下限
値以下まで降下した低血糖発生の危険は皆無であった。

ミミズ抽出物、ミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との混合
物及びミミズ乾燥粉末の動物実験さらにミミズ乾燥粉末
のヒトへの経口投与実験により、本発明のミミズ抽出物
、ミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物は安全で、
かつ、すぐれた糖尿病治療・予防剤であることがわかっ
た。

特許出願人　株式会社　、イ、イ１．・で”）手続有廿
正書（自発） ｉ、　　４件の表示 平成１年特許願第１２０３７号 ２、発明の名称 糖尿病治療剤 ３、事件との関係　　　　特許出願人 郵便番号　　〒８８０ 住　所　　　宮崎県宮崎市橘通西五丁目１番２３号自　
　　発 ５、補正により増加する請求項の数 な　　し ６、補正の対象 明細書の「特許請求の範囲Ｊ及び「発明の詳細な説明Ｊ
のＷＪ。

別紙 （１）特許請求の範囲を次のとおりに訂正します。

２、特許請求の範囲 １、　ミミズを水性溶媒、水混和性有機溶媒及び水非混
和性有機溶媒からなる群から選ばれる少なくとも一種類
の抽出剤によって抽出処理して得たミミズ抽出物を有効
成分として含有する糖尿病治療剤。

２、　ミミズが生臭ミミズを有機酸、無機酸、有機酸ナ
トリウム塩、無機酸ナトリウム塩、有機酸カリウム塩及
び！ｌ！機酸カリウム塩から成る群から選ばれる少なく
とも一種類の化合物を０．３（重量）％以下含有する水
溶液虫又は真水中に放置して生きミミズの消化管内の糞
土をはかせたのち、生きミミズの体表面に付着する汚物
を水で洗浄除去して湿式粉砕をおこなって得たミミズ懸
濁液、又は生きミミズの体表面に付着する汚物を水で洗
浄除去したのちの生きミミズを前記水溶液史又は真水中
に放置して生きミミズ”の消化管内の糞土をはかせたの
ち、生きミミズの体表面に付着する汚物を水で洗浄除去
して湿式粉砕をおこなって得たミミズ懸濁液からなる請
求項１記載の糖尿病治療剤。

３、ミミズが請求項２記載のミミズ懸濁液を−１０〜−
６０℃で凍結したのち、−６０〜８０℃の範囲内で温度
を段階的に上げながらｌＯ■Ｈｇ以下の真空度で１０〜
１００時間凍結・真空乾燥をおこない、この内、最終工
程の真空乾燥を７０〜８０℃で０．０１〜［ｌ　、　５
ｍｍＨＨの真空下で５〜１０時間乾燥して得たミミズ乾
燥粉末からなる請求項１記載の糖尿病治療剤。

４、ミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末との混合物を有効成
分として含有する糖尿病治療剤。

（２）明細書第３頁の第１１行目の「対外」を「体外」
と訂正します。

（３）明細書第４頁の第２θ行目の「２４号」をｒ２４
巻」と訂正します。

（４）明細書第１４頁の第１３行目、第１８頁の第１７
行目、第１９頁の第１０行目及び第４１頁の第４行目の
「前期」を１前記」と訂正します。

（５）明細書第１４頁の第１３行目の「製造」をｒ製法
」と訂正します。

（６）明細書第２３頁の表−３の第１７行目のアミノ酸
の「チロリン」を「チロシン１と訂正します。

（７）明細書第３１頁の第１５行目及び第３２頁の第５
行目のｒ　Ｃｏｅｌｏｎｉｃ　」をｒｃｅｌｏｎｉｃ　
Ｊと訂正しまず。

（８）明細書第３３頁の第１７行目の「コハク酸又は」
をｒコハク酸、リンゴ酸又は」と訂正します。

（９）明細書、第３４頁の第８行目の「Ｓ−ブチル」を
ｒｌ−ブチル、Ｓ−ブチルｊと訂正します。

（１０）明細書第３５頁の第１０〜１１行目の「酢！−
２−」を「酢酸２−」と訂正しまず。

（１１）明細書第４４頁の第２行目の「３０℃約」をｒ
３０℃で約１と訂正します。

（１２）明細書第４４頁の第４行目の「−昼夜ｎ置し、
」を「−昼夜静置しな、」と訂正します。

（１３）明細書第６４頁の第１６行目の「任意に」を「
任意の」と訂正します。

（１４）明細書第６６頁の第２行目の「顆粒硬カプセル
」を「顆粒を硬カプセルＪと訂正します。

（１５）明細書第７０頁の第２０行目の「トウモロキシ
」を「トウモロコシ」と訂正します。

（１６）明細書第８２頁の第９行目の「参考例５」を「
参考例３」と訂正します。

（１７）明細書第８２頁の第１２行目のｒＭ−４，をｒ
Ｍ−３Ｊと訂正します。

（１８）明細書第８４頁の第１３行目のｒＭ−５，をｒ
Ｍ−９Ｊと訂正します。

特許出願人　　株式会社　エイメイ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ミミズを水性溶媒、水混和性有機溶媒及び水非混和
   性有機溶媒からなる群から選ばれる少なくとも一種類の
   抽出剤によって抽出処理して得たミミズ抽出物を有効成
   分として含有する糖尿病治療剤。 ２、ミミズが生ミミズを有機酸、無機酸、有機酸ナトリ
   ウム塩、無機酸ナトリウム塩、有機酸カリウム塩及び無
   機酸カリウム塩から成る群から選ばれる少なくとも一種
   類の化合物を０．３（重量）％以下含有する水溶液又は
   真水中に放置して生きミミズの消化管内の糞土をはかせ
   たのち、生きミミズの体表面に付着する汚物を水で洗浄
   除去して湿式粉砕をおこなって得たミミズ懸濁液、又は
   生きミミズの体表面に付着する汚物を水で洗浄除去した
   のちの生きミミズを前記水溶液又は真水中に放置して生
   きミミズの消化管内の糞土をはかせたのち、生きミミズ
   の体表面に付着する汚物を水で洗浄除去して湿式粉砕を
   おこなって得たミミズ懸濁液からなる請求項１記載の糖
   尿病治療剤。 ３、ミミズが請求項２記載のミミズ懸濁液を−１０〜−
   ６０℃で凍結したのち、−６０〜８０℃の範囲内で温度
   を階段的に上げながら１０ｍｍＨｇ以下の真空度で１０
   〜１００時間凍結・真空乾燥をおこない、この内、最終
   工程の真空乾燥を７０〜８０℃で０．０１〜０．５ｍｍ
   Ｈｇの真空下で５〜１０時間乾燥して得たミミズ乾燥粉
   末からなる請求項１記載の糖尿病治療剤。 ４、ミミズ抽出物とミミズ乾燥粉末の混合物を有効成分
   として含有する糖尿病治療剤。