JPH02195897A

JPH02195897A - 光学活性１，３―ブタンジオールの製造法

Info

Publication number: JPH02195897A
Application number: JP10701689A
Authority: JP
Inventors: Akikazu Matsuyama; 彰収松山; Yoshinori Kobayashi; 良則小林
Original assignee: Daicel Chemical Industries Ltd
Current assignee: Daicel Corp
Priority date: 1988-04-27
Filing date: 1989-04-26
Publication date: 1990-08-02
Anticipated expiration: 2009-11-30
Also published as: JPH0695951B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は光学活性１，３−ブタンジオールの製造方法に
関する。更に詳しくは、１１，３−ブタンジオールのエ
ナンチオマー混合物に該混合物を不斉的に資化する能力
を有する微生物、或いはその処理物を作用させ、残存す
る光学活性１１，３−ブタンジオールを採取することを
特徴とする光学活性１，３−ブタンジオールの製造方法
に関する。

光学活性１，３−ブタンジオールは種々の医薬品例えば
、抗生物質等の重要合成原料である。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする課題〕従来、
光学活性１，３−ブタンジオールを製造する方法として
は、（１）化学的に合成されたラセミ体の１１，３−ブ
タンジオールを光学分割剤を用いて光学分割する方法（
特開昭６１−１９１６３１号公報）や、（２）光学活性
化合物で処理したラネーニッケル触媒を用いて４−ヒド
ロキシ−２−ブタノンから不斉合成する方法（特開昭５
８−２０４１８７号公報及びＢｕｌｌ、　Ｃｈｅｗ、　
Ｓｏｃ、　Ｊｐｎ、＋　５３＋　１３５６−１３６０　
（１９８０）　）等が知られている。しかし、（］）、
（２）とも高価な光学分割剤、触媒を用いねばならない
こと、（２）は光学純度が低いこと等の欠点がある為、
経済的に優れ、且つ、簡便な手段で光学純度の高い光学
活性１１，３−ブタンジオールを得る方法の確立が望ま
れている。

（課題を解決する為の手段〕本発明者らは経済的に優れ、かつ簡便な方法で、光学純
度の高い光学活性１１，３−ブタンジオールを得る方法
として微生物による不斉資化方法に着目しこの目的に適
した微生物を検索した結果、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｌｌ
）属キャンディダ（Ｃａｎｄ　１ｄａ）属エンテロバクタ−（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属ゲオ
トリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕａ＋）属りレブジーラ（
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属ロデロマイセス（Ｌｏｄｄｅ
ｒｏｍｙｃｅｓ　）属シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍ
ｏｎａｓ　）属ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）
属サツカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｓｙｃｅｓ）属
サツカロマイコブシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓ
　ｉｓ）属ステリグマドマイセス（Ｓｔｅｒｉｇｍａｔ
ｏｍｙｃｅｓ）属、又はトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏ
ｓｐｏｒｏｎ）属に属する微生物が１，３−ブタンジオ
ールのエナンチオマー混合物を不斉資化しくＲ）−１，
３−ブタンジオールを残存させること及びアグロバクテ
リウム（ＡｇｒｏｂａｃＬｅｒｉｕｍ）属、アゾトバク
タ−（Ａｚｏｔｏ−ｂａｃｔｅｒ）属、バチルス（Ｂａ
ｃｉ　１１ｕｓ）属、プレタノマイセス（Ｂｒｅｔｔａ
ｎｏｍｙｃｅｓ）属、キャンデイダ（Ｃａｎｄ　１ｄａ
）属、シトロバクタ−（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）属、
コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ
）属、デッケラ（Ｄｅｋｋｅｒａ）属、エンドマイセス
（Ｈｎｄｏ−ｍｙｃｅｓ）属、エルウィニア（Ｅｒｗｉ
ｎｉａ）属、ハンセヌラ（）Ｉａｎｓｅｎｕｌａ）属、
イサチェンキア（Ｉ３Ｓａｔｃｈｅｎ−ｋｔａ）属、ク
リプシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属、タルイベロマ
イセス（Ｋ　１ｕｙｖｅｒｏＢｃｅｓ）属、ゲオトリカ
ム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）属、ミクロコツカス（Ｍｉ
ｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏ
ｂａｃ　ｔｅｒ　ｉｕｎ＋）属、パキソレン（Ｐａｃｈ
ｙｓｏｌｅｎ）属、パラコツカス（Ｐａｒａ−ｃｏｃｃ
ｕｓ）属、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属、プロタミノバク
タ−（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ）属、シュード
モナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、サツカロマイセ
ス（Ｓａｃｃｈａｒｏ−ｓｙｃｅｓ）属、サツカロミコ
プシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐ−ｓｉｓ）属、セ
レノチラ（Ｓｅｌｅｎｏｔｉｌａ）属、セラチア（Ｓｅ
ｒｒａ　ｔ　ｉ　ａ）属、ステファノアスカス（Ｓ　ｔ
ｅｐｈａｎ。

ａｓｃｕｓ）属、又はキサントモナス（χａｎ　Ｌｈｏ
ｔｍｏｎａｓ）属に属する微生物群から選ばれた微生物
が１，３−ブタンジオールのエナンチオマー混合物を不
斉資化しく５）−１，３−ブタンジオールを残存させる
ことを見出し、本発明を完成したものである。

本発明に使用する微生物としては、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）
属キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属エンテロバクタ−（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属ゲオ
トリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｓ＋）属クレブジーラ（
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属ロデロマイセス（Ｌｏｄｄｅ
ｒｏｍｙｃｅｓ　）属シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｔ
ｇｏｎａｓ　）属ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｔａ
）属サツカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）
属サツカロマイコブシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐ
ｓｉｓ）属ステリグマドマイセス（Ｓｔｅｒｉｇｍａｔ
ｏａ＋ｙｃｅｓ）属、又はトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈ
ｏｓｐｏｒｏｎ）属に属する微生物で１１，３−ブタン
ジオールのエナンチオマー混合物を不斉資化しくＲ）−
１，３−ブタンジオールを残存させうる能力を有する微
生物、或いはアグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃ　ｔ
ｅｒ　１ｕａ）属、アゾトバクタ−（Ａｚｏｔｏｂａｃ
ｔｅｒ）属、バチルス（Ｂａ−ｃｉｌｌｕｓ）属、フ゛
レタノマイセス（Ｂｒｅ　ｔ　ｔａｎｏｉｅｙｃｅｓ）
属、キャンディダ（Ｃａｎｄ　１ｄａ）属、シトロバク
タ（Ｃｉ　ｔｒｏｂａｃ　Ｌｅｔ）属、コリネバクテリ
ウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、デッケラ
（Ｄｅｋｋｅｒａ）属、エンドマイセス（Ｅｎｄｏｍｙ
ｃｅｓ）属、エルウィニア（Ｅｒｗｉｎｉａ）属、ハン
セヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）属、イサチヱンキア（ｌ
ｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ）属、クリブシェラ（にＩｅｂ
ｓｉｅｌｌａ）属、クルイベロマイセス（Ｋｌｕｙｖｅ
ｒｏ−ｍｙｃｅｓ）属、ゲオトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃ
ｈｕｌｌ）属、ミクロコツカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕ
ｓ）属、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃ　ｔｅｒ　
ｉ　ｕｗ＋）属、バキソレン（Ｐａｃｈｙｓｏｌｅｎ）
属翫バラコツカス（Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ）属、ピキア
（Ｐｉｃｈｉａ）属、プロタミノバククー（Ｐｒｏ　ｔ
ａｇ　ｉ　ｎｏｂａｃ　ｔｅｒ）属、シュードモナス（
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、サツカロマイセス（Ｓａ
ｃｃｈａｒｏｖａｙｃｅｓ）属、サツカロミコプシス（
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ）属、セレノチラ（
Ｓｅｌｅｎｏ−ｔｉｌａ）属１１，セラチア（Ｓａｒｒ
ａｔｉａ）属、ステファノアスカス（Ｓ　ｔｅｐｈａｎ
ｏａｓｃｕｓ）属、又はキサントモナス（Ｘａｎｔｈｏ
ｍｏｎａｓ）属に属する微生物で１１，３−ブタンジオ
ールのエナンチオマー混合物を不斉資化しく５）−１，
３−ブタンジオールを残存させうる能力を有する微生物
であればいずれも使用可能である。

具体的には１１，３−ブタンジオールのエナンチオマー
混合物を不斉資化しくＲ）−１，３−ブタンジオールを
残存させうる能力を有する微生物としては、ブレビバク
テリウム・イオディナム（８ｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｊｕ
ｓ　ｉｏｄｉｎｕｍ）ＩＦＯ３５５８、キャンディダ・
ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｒｕｇｏｓａ）ＩＰＯ１３６
４、キャンディダ・パラブシロシス（Ｃａｎｄｉｄａ　
ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ）ＩＦＯ０６４０，キャンデ
ィダ・バラプシロシス（Ｃａｎｄｉｄａ　ｐａｒａｐｓ
ｉｌｏｓｉｓ）ＩＦＯ０７０８、キャンディダ・パラブ
シロシス（Ｃａｎｄｉｄａ　ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ
）ＩＦｏ　１３９６、エンテロバクタ−・クロアセ（Ｅ
ｎ　ｔｅｒｏ−ｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｃ）ＡＴＣ
Ｃ７２５６、ゲオトリカム・カンデイダム（Ｇｅｏｔｒ
ｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ）ＩＦＯ４６０１、ゲオ
トリカム・カンデイダム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａ
ｎｄｉｄｕｍ）ＩＦＯ５７６７、ゲオトリカム・カンデ
イダム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ）Ｉ
Ｐｏ　５３６８　、ゲオトリカム・レフタンブラツム（
Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕ＋＋＋　ｒｅｃｔａｎｇｕｌａｔｕ
ｎ＋）ＪＣＭ　１７５０．ゲオトリカム・クレバニ−（
Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｒａｋｌｅｂａｈｎｉｉ）ＪＣＭ　
２１７１、ゲオトリカム・ファーメンタンス（Ｇｅｏｔ
ｒｉｃｈｕｍ　ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）ＪＣＭ　２４６
７、ゲオトリカム・キャビチータム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈ
ｕｍｃａｐｉｔａｔｕｓ）ＪＣＭ　３９０８、ゲオトリ
カム・エリエンセ（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｅｒｉｅｎ
ｓｅ）ＪＣＭ　３９１２、クレブジーラ・−ユーモニア
エ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｆａｅ）Ｉ
ＦＯ１２０１９、ロデロマイセス　エロンジスボラス（
Ｌｏｄｄｅｒｏ＋ｍｙｃｅｓ　ｅｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕ
ｓ）ＩＦＯ１６７６、シェードモナス・ディミヌタ（Ｐ
ｓｕｄｏｍｏｎａｓ　ｄｉｗ＋１−ｎｕＬａ）　ＩＰｏ
　１２６９７　、ロドトルラ・グルティニス（Ｒｈｏｄ
ｏｔｏｒｕｌａ　ｇｌｕｔｉｎｉｓ）ＩＦＯ０３９５、
サツカロマイセス４セレビツシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｓ
ｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＡＨＵ　３４０２　
、サツカロマイコブシス・リボリティカ（Ｓａｃｃｈａ
ｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ　ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＩＴＯ
１５５０、ステリグマドマイセス・エルビニ（Ｓｔｅｒ
ｉｇ−ｍｓｔｏｍｙｃｅｓ　ｅｌｖｉａｅ）ＤＳＭ　７
０８５２、トリコスポロン・クタネウム（Ｔｒｉｃｈｏ
ｓｐｏｒｏｎ　ｃｕｔａｎｅｕｍ）ＩＰｏ　１１９Ｂ、
トリコスポロン・キャビチータム（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏ
ｒｏｎｃａｐｉｔａｔｕｓ）ＩＦＯ０７４３、等を挙げ
ることができる。

また、１１，３−ブタンジオールのエナンチオマー混合
物を不斉資化しく５）−１，３−ブタンジオールを残存
させうる能力を有する微生物としては、アグロバクテリ
ウム・ラジオバクター（Ａｇｒｏｂａｃ−ｔｅｒｉｕｍ
　ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）ＩＦＯ１２６６４、アゾト
バクタ−１クルーコツカム（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ　
ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ）ＩＦＯ１２９９４、バチルス
・プレビス（Ｂａｃｉ　１ｌｕｓｂｒｅｖｉｓ）ＩＦＯ
３３３１、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅ
ｒｅｕｓ）ＡＨＵ　１７０７　、バチルス・セレウス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）ＡＨＵ　１３５５　、
バチルス・スフエリカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｐｈａ
ｅｒｉｃｕｓ）ＩＦＯ３５２５、バチルス・スフエリカ
ス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｐｈａｅｒｉｃｕｓ）ＩＦＯ
３３４１、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　
５ｕｂｔｉｌｉｓ）ＩＦＯ３００７、バチルス・サブチ
リス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｉｓ）ＩＦＯ３
０３７、プレタノマイセス・アブスチネンス（Ｂｒｅｔ
ｔａｎｏｍｙｃｅｓａｂｓｔｆｎｅｓ）ＤＳＭ　７０７
２６　、キャンディダ・キャリオシリグニコラ（Ｃａｎ
ｄｉｄａ　ｃａｒｉｏ−ｓｉｌｉｇｎｉｃｏｌａ）ＤＳ
Ｍ　２１４Ｂ、キャンディダ・ケフィル（ベイジェリン
ク）　（Ｃａｎｄｉｄａ　ｋｅｆｙｒ（Ｂｅｉｊｅ−・
ｒｉｎｃｋ））　ＤＳＭ　７００７３　、キャンディダ
・クルセイ（キャステラー−’−）　（Ｃａｎｄｉｄａ
　ｋｒｕｓｅｉ（Ｃａｓｔｅｌｌａｎｉ））口ＳＭ　７
００７５　、キャンディダ・スクシフィラ（Ｃａｎｄｉ
ｄａ　ｓｕｃｃｉｐｈｉｌａ）ＤＳＭ　２１４９、キャ
ンディダ・ウチリス（Ｃａｎｄｉｄａ　ｕｔｉｌｉｓ）
ＩＦＯ０６３９、キャンディダ・ウチリス（Ｃａｎｄｉ
ｄａ　ｕｔｉｌｉｓ）ＩＦＯ０６２６、シトロバクタ−
・フロインデ４　（Ｃ３ｔｒｏｂａｃｔｅｒ　ｆｒｅｕ
ｎ−ｄｉｉ）ＡＨＵ　１５３４、コリネバクテリウム・
グルタミカム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｔｕｍ　ｇｌ
ｕｔａ＋ｍｉｃｕｍ）ＡＴＣＣ１３０３２、コリネバク
テリウム・ミシガネンス（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃ−Ｌｅｒ
ｉｕｒａ　ｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｅ）ＩＦＯ１３７６
２、デッケラ・プルキセレンシス（Ｄｅｋｋｅｒａ　ｂ
ｒｕｘｅｌｌｅｎｓｉｓ）ＩＰＯ１５９０、エンドマイ
セス・デシピエンス（Ｅｎｄｏｎ＋ｙｃｅｓｄｅｃｉｐ
ｉｅｎ）ＩＦＯ０１０２、エルウィニア・カロトボラサ
ブスピーシーズ・カロトボラ（ｆ’ｒ臀１ｎｉａ　ｃａ
ｒｏ−ｔｏｖｏｒａ　５ｕｂｓｐ、　ｃａｒｏｔｏｖｏ
ｒａ）ＩＰｏ　３８３０　、ゲオトリカム・フラグラン
ス（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｆｒａｇｒａｎｓ）ＪＣＭ
　１７４９、ハンセヌラ・アノマラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌ
ａａｎｏｍａｌａ）ＤＳＭ７０１３０．　ハンセヌラ・
ミクロ（Ｈａｎｓｅ−ｎｕｌａ　ｍｉｎｕｔａ）ＤＳＭ
　７０２７４　％ハンセヌラ・サブペリクロサ（Ｈａｎ
ｓｅｎｕｌａ　５ｕｂｐｅｌｌｉｃｕｌｏｓａ）ＴＰＯ
０８０Ｂ、ハンセヌラ・ウィッケルハミ−（Ｈａｎｓｅ
ｎｕｌａｉｉｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ）ＤＳＭ　７０２８
０　、ハンセヌラ・ウィンゲイ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ　
ｗｉｎｇｅｉ）ＤＳＭ　１０２８１　、イサチェンキア
・スクツラタパライティー・スクツラタ（Ｉｓｓａｔｃ
ｈｅｎｋｉａ　５ｃｕｔｕｌａｔａ　ｖａｒ、　５ｃｕ
ｔｕｌａｔａ）ＩＦＯ１００７０、タレブシエラ・ニュ
ーモニア（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａ
ｅ）　ＩＦＯ１２０５９、クルイベロマイセス０ドロソ
フイラルム（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｔａｙｃｅｓ　ｄｒｏｓ
。

ｐｈｉｌａｒｕｍ）ＩＦＯ１０１２、クルレイベロマイ
セス・ラクテイス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ　１ａ
ｃｔｉｓ）ＩＦＯ１２６７、クルイベロマイセス・ラク
ティス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｌａｃｔｉｓ）Ｉ
ＦＯ１９０３、ミクロコツカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏ
ｃｏｃｃｕｓ　１ｕｔｅｕｓ）ＩＦＯ３３３３、ミクロ
コツカス・ロセウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｒｏｓ
ｅｕｓ）ＩＦＯ３７６４、ミコバクテリウム・スメグマ
ティス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ−ｒｉｕｍ　ｓｍｅｇｍａ
ｔｉｓ）ＩＦＯ３１５３、パキソレン・タノフィラス（
Ｐａｃｈｙｓｏｌｅｎ　ｔａｎｎｏｐｈｉｌｕｓ）ＩＦ
Ｏ１００７、バラコツカス・デニトリフィカンス（Ｐａ
ｒａｃｏｃｃｕｓｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ）ＩＦＯ
１２４４２、ピキア・セロビオサ（Ｐｉｃｈｉａ　ｃｅ
ｌｌｏｂｉｏｓａ）ＤＳＭ　２１４７　、ピキア・ファ
リノサ（Ｐｉｃｈｉａ　ｆａｒｉｎｏｓａ）ＩＦＯ１１
６３、ピキア・ヒーディ（Ｐｉｃｈｉａ　ｈｅｅｄｉｉ
）ＩＦＯ１００２０、ピキア・ヒーディ（Ｐｉｃｈｉａ
　ｈｅｅｄｉｉ）ＩＦＯ１００１９、ピキア・リンドネ
リイ（Ｐｉｃｈｉａ　ｌｉｎｄｎｅｒｉｉ）ＤＳＭ　７
０７１８、ピキア・オプンティアバライティー・サーモ
トレランス（Ｐｉｃｈｉａ　ｏｐｕｎｔｉａｅ　ｖａｒ
、　ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ）ＩＦＯ１００２６
、ピキア・オブンティアバライティー・サーモトレラン
ス（Ｐｉｃｈｉａ　ｏｐｕｎｔｉａｅ　ｖａｒ。

ｔｈｅｒｏ＋ｏｔｏｌｅｒａｎｓ）ＩＦＯ１００２５、
ピキア・バストリス　（Ｐｉｃｈｉａ　ｐａｓｔｏｒｉ
ｓ）ＤＳＭ　７０３８２、ピキア・ケエルクム（Ｐｉｃ
ｈｉａ　ｑｕｅｒｑｕｕｍ）ＤＳＭ　７０３８６、ピキ
ア・サーゲンテンシス（Ｐｉｃｈｉａ　ｓａｒｇｅｎｔ
ｅｎｓｉｓ）ＤＳＭ７０３８８　、ピキア・トレハロア
ィア（Ｐｉｃｈｉａ　ｔｒｅ−ｈａｌｏｐｈｉａ）ＤＳ
Ｍ　７０３９１、プロタミノバクタ−・ラバー（Ｐｒｏ
ｔａａｉｎｏｂａｃｔｅｒ　ｒｕｂｅｒ）ＩＡＭ　１０
８１　、シュ−トモナス・アシトポランス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｔｍｏｎａｓａｃｉｄｏｖｏｒａｎｓ）ＩＦｏ　１３
５８２　、シュードモナス・ディミヌタ（Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ　ｄｉｍｉｎｕｔａ）ＩＦＯ１２６９７、シ
ュードモナス・フルオレセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｒ＋５）ＩＦＯ１２０５５、シュ
ードモナス・フルオレセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）ＩＦ０３０８１、シュード
モナス・プティダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｊｄ
ａ）ＩＦＯ３７３８、サツカロマイセス・セレビシア（
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）
ＩＡＭ　０２１６、サツカロミコプシス・フィブリゲラ
（Ｓａｃｃｈａｒｏ−ｍｙｃｏｐｓｉｓ　ｆｉｂｕｌｉ
ｇｅｒａ）ＩＦＯ０１０３、セレノチラ・ペルタタ（Ｓ
ｅｌｅｎｏｔｉｌａ　ｐｅｌｔａｔａ）ＤＳＭ　７０５
７９　、セラチアｅマルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ
　ａ＋ａｒｃｅｓｃｅｎｓ）ＩＡＭ　１１０５、ステフ
ァノアスカス・シフェリイ（Ｓｔｅｐｈａｎｏａｓｃｕ
ｓ　ｃｉｆｅｒｒｉｉ）ＩＰＯ１８５４、キサントモナ
ス・マルトマイリア（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ　ｎ＋ａ
ｌｔｏｐｈｉ１ｉａ）ｆＦｏ　１２６９０、キサントモ
ナス・オリザエ（Ｘａｒ＋ｔｈｏｍｏｎａｓｏｒｙｚａ
ｅ）ＩＡＭ　１６５７等を挙げることができる。

これらの微生物は、野生株、変異株、又は細胞融合もし
くは遺伝子操作法などの遺伝的手法により誘導される組
み替え株等、いずれの株でも好適に用いることができる
。

尚、ＩＦＯ番号の付された微生物は、（財）醗酵研究所
（ＩＦＯ）発行のＬｉ５ｔ　ｏｆ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ、
第８版、第１巻（１９８Ｂ）に記載されており、該ＩＦ
Ｏから入手することができる。ＩＨＵ番号の付された微
生物は、日本微生物株保存連盟（ＪＦＣＣ）発行のＣａ
ｔａｌｏｇｕｅ　ｏｆ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ　、第４版（
１９８７）に記載されており、北海道大学農学部から入
手することができる。ＡＴＣＣ番号の付された微生物は
、Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ
１１ｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）発行のＣａｔａｌｏｇｕ
ｅ　ｏｆ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　Ｐｈａｇｅｓ　ｒＤＮ＾
Ｖｅｃｔｏｒｓ　、第１６版（１９８５）に記載されて
おり該ＡＴＣＣ記載されており該ＡＴｃｃから人手する
ことができる。　ＪＣＭ番号の付された微生物は、理化
学研究所微生物系保存施設発行の微生物株カタログ第３
版（１９８６年）に記載されており、該施設から入手す
ることができる。　［Ａ？１番号の付された微生物は、
東京大学応用微生物学研究所から入手することができる
。　ＤＳＭ番号の付された微生物はＤｅａｔｓｃｈｅ　
Ｓａｍｍｌｕｎｇ　ｖｏｎ　Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓ
ｍｅｎ（ＤＳＭ）発行のＣａｔａｌｏｇ　ｏｆ　５ｔｒ
ａｉｎｓ（１９８３）に記載されており、該ＤＳＭから
入手することができる。

本発明に用いる微生物を培養する為の培地はその微生物
が増殖し得るものであれば特に制限はない０例えば、炭
素源としては、上記微生物の利用可能であればいずれも
使用でき、具体的には、グルコース、フルクトース、シ
ュクロース、デキストリン等の糖類、ソルビトール、エ
タノール、グリセロール等のアルコール類、ファー／Ｌ
ｚ酸、クエン酸、酢酸、プロピオン酸等の有機酸類及び
その塩類、パラフィン等の炭化水素類等或いはこれらの
混合物を使用することができる。窒素源としては例えば
、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸アンモ
ニウム等の無機酸のアンモニウム塩、フマル酸アンモニ
ウム、クエン酸アンモニウム等の有機Ｍ（７）７ンモニ
ウム塩、肉エキス、酵母エキス、コーンステイープリカ
ー、カゼイン加水分解物、尿素等の無機有機含窒素化合
物、或いはこれらの混合物を使用することができる。他
に無機塩、微量金属塩、ビタミン類等、通常の培養に用
いられる栄養源を適宜、混合して用いることができる。

また必要に応じて微生物の増殖を促進する因子、本発明
の目的化合物の生成能力を高める因子、あるいは培地の
ｐｌ＋保持に有効な物質も添加できる。

培養方法としては培地ｐＨは３．０〜９．５、好ましく
は、４〜８、培養温度は２０〜４５°Ｃ５好ましくは２
５〜３７°Ｃで、嫌気的或いは好気的に、その微生物の
生育に適した条件下５〜１２０時間、好ましくは１２〜
７２時間程度培養する。

不斉資化反応の方法としては培養液をそのまま用い該培
養液に１１，３−ブタンジオールのエナンチオマー混合
物を添加する方法、遠心分離等により、菌体を分離し、
これをそのまま、或いは、洗浄した後、緩衝液、水等に
再懸濁したものに、１１，３−ブタンジオールのエナン
チオマー混合物を添加し反応させる方法等がある。

二の反ｔ５の際、グルコース、シュクロース等の炭素源
をエネルギー源として添加したほうが良い場合もある。

また、菌体は生菌体のままでも良いし、国体破砕物、ア
セトン処理、凍結乾燥等の処理をほどこしたものでも良
い。また、これらの菌体或いは、菌体処理物を、例えば
、ポリアクリアミドゲル法、含硫多糖ゲル法（カラギー
ナンゲル法等）、アルギン酸ゲル法、寒天ゲル法等の公
知の方法で固定化して用いることもできる。更に、菌体
処理物から、公知の方法を組み合わせて精製取得した酵
素も使用できる。

１１，３−ブタンジオールのエナンチオマー混合物はそ
のまま、或いは、水に溶解し、又は反応に影響を与えな
いような有機溶媒に溶解したり、界面活性剤等に分散さ
せたりして、反応始めから一括に或いは分割して添加し
ても良い。

反応はｐＨ３〜１０、好ましくはｐＨ５〜９の範囲で温
度は１０〜６０°Ｃ１好ましくは２０〜４０°Ｃの範囲
で、１〜１２０時間程度、撹拌下あるいは静置下で行う
０反応時間を長くすると１１，３−ブタンジオールの残
存量は減少するが、光学純度の高い光学活性１１，３−
ブタンジオールを得ることが可能である。基質の使用濃
度は特に制限されないが、０．１〜１０％程度が好まし
い。

反応によって残存生成した光学活性１１，３−ブタンジ
オールの採取は反応液から直接或いは菌体分離後、有機
溶媒による抽出、蒸留、カラムクロマトグラフィー等の
通常の精製方法を用いれば容易に得られる。

〔実施例〕

以下、本発明を具体的に実施例にて説明するが、本発明
はこれらの実施例のみに限定されるものではない。

なお、実施例に於ける反応液中の１１，３−ブタンジオ
ールの定量はガスクロマトグラフィー（カラム：　Ｔｈ
ｅｒｍｏｎ　３０００．　（２ｍ）　、温度１３０℃）
により容易に行うことができ、光学純度は反応により得
られた光学活性１，３−ブタンジオールを常法により塩
化アセチルでアセチル化した後、光学分割カラムを用い
た高速液体クロマトグラフィー（カラム：ダイセル化学
工業製キラルセ／Ｌ１０　Ｂ、　を容媒：　ｎ−ヘキサ
ン／２−プロパツール＝１９：１、波長２２０ｎｍ　、
流速０．５ｄ／分）により測定した。（保持時間；（Ｓ
）体１５分、（Ｒ）体１９．３分）。

実施例１〈菌体調製用培地〉グルコース　　　　　　　　　　１１，０％酵母エキス
　　　　　　　　　０．３％ペプトン　　　　　　　　
　　　０．５％１１，３−ブタンジオール　　　　　０
．５％にχＨＰＯａ　　　　　　　　　　　　　Ｏ，１
％Ｍｇ５Ｏ，・７Ｈ１００，０５％ｐＨ７，２上記の菌体調製用培地１００＠Ｉを５０〇−容坂ロフラ
スコに入れ、滅菌後、第１表に示した微生物をそれぞれ
植菌し、３０°Ｃで４８時間振盪培養を行った。続いて
遠心分離で菌体を分離し、生理食塩水で１回洗浄し、生
菌体を得た。

次に５００　ＴＬｌ容坂ロフラスコに蒸留水５０ｍ１を
入れ、これに上記生菌体を懸濁した後、１，３−ブタン
ジオールのラセミ体を０．５ｇ添加し、３０゛Ｃで４８
時間往復振盪反応させた。

反応終了後、遠心分離にて除菌し、得られた上澄液を塩
化ナトリウムで飽和させた後、酢酸エチル５０ａＺを用
いて抽出を行い、酢酸エチル層をガスクロマトグラフィ
ーで分析し、残存している１、３−ブタンジオール量を
測定した。

次に、酢酸エチルを無水芒硝で脱水後、脱溶媒を行いシ
ロップを得、これを常法により塩化アセチルでアセチル
化した後、溶媒に溶解し、高速液体クロマトグラフィー
にて分析し、得られた１、３−ブタンジオールの短体配
置及び光学純度を測定した。

得られた結果を第１表に示す。

実施例２実施例１で用いた培地５１を含む１０！容ジャーファー
メンタ−にキャンディダ・バラプシロシスＩＦ０１３９
６を植菌し、３０°Ｃで撹拌２５０ｒ、ｐ、ｍ。

通気量０．５ｖ、ｖ、ｍで２４時間培養を行った。培養
終７後、遠心分離で集菌し、水５１で洗浄し、水５００
１７に懸濁した。これにラセミ体の１，３−ブタンジオ
ール１０ｇを添加し、３０°Ｃで４８時間、撹拌して反
応させた。反応終了後、遠心分離にて除菌し、得られた
上澄液を塩化ナトリウムで飽和させた後、酢酸エチル２
５０−を用いて、二回抽出を行い、酢酸エチル層を無水
芒硝で脱水後、減圧下、脱溶媒を行い、４．２ｇのシロ
ップを得た。

更にこれを減圧蒸留することにより４．０ｇの無色透明
の（Ｒ）−１，３−ブタンジオールを得た。こレノ比旋
光度４：！　（（ｒ）　Ｆ　＝　　２８”　　（Ｃ＝１
１，　ＥｔＯＨ）絶対配置は（Ｒ）体で）ＩＰＬＣ分析
による光学純度は９６％ｅ、ｅ、であった。

実施例３実施例２と全く同様にゲオトリカム・カンデイダムＩＦ
Ｏ４６０１について培養、反応、抽出を行い、４．０ｇ
のシロップを得た。得られた１、３−ブタンジオールに
ついて分析したところ絶対配置は（Ｒ）体、光学純度は
９０％ｅ、ｅ、であった。

実施例４実施例２と全く同様にキャンディダ・ウチルスＩＦＯ０
６３９について培養、反応、抽出を行い４．９ｇのシロ
ップを得た。得られた１、３−ブタンジオールについて
分析したところ絶対配置は（Ｓ）体、光学純度は９２％
ｅ、ｅ、であった。

実施例５実施例２と全く同様にピキア・オブンティアバライティ
ー・サーモトレランスＩＦＯ１００２５について培養、
反応、抽出を行い３．７ｇのシロップを得た。得られた
１、３−ブタンジオールについて分析したところ絶対配
置は（Ｓ）体、光学純度は９７％ｅ、ｅ、であった。

〔発明の効果〕

本発明の微生物を用いた光学活性１，３−ブタンジオー
ルの製造方法は、簡便に光学純度の高い光学活性１１，
３−ブタンジオールを製造することを可能にさせるもの
であり工業的に極めて有利である。

表表１続き表１４ｆｉき表１続き表１ａき表１続き表１８＊き表１続き

Claims

【特許請求の範囲】１　１，３−ブタンジオールのエナンチオマー混合物に
該混合物を不斉的に資化する能力を有する微生物、或い
はその処理物を作用させ、残存する光学活性１，３−ブ
タンジオールを採取することを特徴とする光学活性１，
３−ブタンジオールの製造法。２　微生物が、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）
属キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属ゲオ
トリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）属クレブジーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属ロデロマイセス（Ｌｏｄｄｅｒｏｍｙｃｅｓ）属シュー
ドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属ロドトルラ（Ｒ
ｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属サ
ツカロマイコプシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉ
ｓ）属ステリグマトマイセス（Ｓｔｅｒｉｇｍａｔｏｍ
ｙｃｅｓ）属又はトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏ
ｒｏｎ）属に属する微生物群から選ばれ、１，３−ブタ
ンジオールのエナンチオマー混合物を不斉資化して（Ｒ
）−１，３−ブタンジオールを残存させうる能力を有す
る微生物である請求項１記載の光学活性１，３−ブタン
ジオールの製造法。３　微生物が、アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ）属、アゾトバクター（Ａｚｏｔｏｂａｃｔ
ｅｒ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ブレタノ
マイセス（Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ）属、キャンデ
ィダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、シトロバクター（Ｃｉｔｒ
ｏｂａｃｔｅｒ）属、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎ
ｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、デッケラ（Ｄｅｋｋｅｒａ
）属、エンドマイセス（Ｅｎｄｏｍｙｃｅｓ）属、エル
ウィニア（Ｅｒｗｉｎｉａ）属、ハンセヌラ（Ｈａｎｓ
ｅｎｕｌａ）属、イサチェンキア（Ｉｓｓａｔｃｈｅｎ
ｋｉａ）属、クリブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属
、クルイベロマイセス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）
属、ゲオトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）属、ミクロ
コッカスウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、パキ
ソレン（Ｐａｃｈｙｓｏｌｅｎ）属、パラコッカス（Ｐ
ａｒａｃｏｃｃｕｓ）属、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属、
プロタミノバクター（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ
）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、
サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、
サッカロミコプシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉ
ｓ）属、セレノチラ（Ｓｅｌｅｎｏｔｉｌａ）属、セラ
チア（Ｓｅｒｒａｔｉａ）属、ステフアノアスカス（Ｓ
ｔｅｐｈａｎｏａｓｃｕｓ）属、又はキサントモナス（
Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ）属に属する微生物群から選ば
れ、１，３−ブタンジオールのエナンチオマー混合物を
不斉資化して（Ｓ）−１，３−ブタンジオールを残存さ
せうる能力を有する微生物である請求項１記載の製造法
。