JPH02237905A - 抗菌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明はグラム陽性及びグラム陰性の細菌に対する抗菌
剤に関するものである。更に詳細には、本発明はα−１
，４結合のポリガラクトサミンを有効成分とする抗菌剤
に関するものである。

本発明の抗菌剤は、その添加または散布によりグラム陽
性の細菌及びダラム陰性の細菌の成育を阻止することが
可能であり、例えばダラム陰性細菌であるＥｓｃｈｅｒ
ｉｃｈｉａ属、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属及びダラム陽
性細菌であるＳｔａｐｈｙｒｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ属の細菌の成育阻止剤として非常に有効に利
用できる， （従来技術及び問題点） 従来の抗菌製剤はサルファ剤に代表されるような化学合
成製剤または主に放線菌の生産する抗生物質等多種の物
質が知られている。しかし、近年薬剤の急性毒性、慢性
毒性、発ガン性の他に遺伝毒性等にも関心が寄せられ、
より安全性の高い製剤が要求されている。

これらのことを反映して、天然の物質であるペクチン分
解物，プロタミン、スパイス類それにエビやカニの殻の
成分であるキチン、キトサンまたはその軽度分解物等に
ついての研究が行われ一部実用化の検討が行われている
。

α−１，４ボリガラク｛−サミンも撤生物の生産する天
然の多糖類で構造上グルコザミンを構成糖と場゛るキト
サンとは類似しており、生理活性等の類似性も期待され
ている。

しかしながら、ポリガラクトサミン（α−１，４ガラク
トサミノガラクタン）は自然界では非常に珍しく、不完
全菌由来のＰＦ−Ｌｏｔ及びＰＦ−１０２が知られてい
る程度である（特公昭５６−１２６３９号、特開昭６２
−２９４０９３号）。

また、一般に多糖類は低分子化することにより物理化学
的性質が変わり，高分子の状態より取扱いが容易になっ
たり、生理活性が顕著になったりする等のことが知られ
ている。本ボリガラクｌ−サミンに於いても、低分子化
する方法として酸やアルカリで処理する方法だけでなく
酵素分解による方法、即ちシュードモナス属菌の生産す
るポリガラクトサミン分解酵素についても既に明らかに
されている（特開昭６３　−　１６４８８４号、特開昭
６３−１６４８８５号）． （問題点を解決するだめの手段） 本発明の目的は、より安全性の高い抗菌製剤を提供する
ことにある。

本発明はα−１．４結合のガラク１・サミンを有効成分
とする抗菌剤に関するものである。本発明に於ける抗菌
剤の有効成分であるα−１，４結合のガラクｌ・ザミン
は、不完全菌ペエシロマイセスＩ−１（微工研条寄第１
１８０　ＦＥＲＭ　ＢＰ−１１８０）を培養することに
より、ＰＦ−１０１及びＰＦ４０２どして得ることが出
来る。

また，　ＰＦ−１０１、ＰＦ−１０２をシュードモナス
ｓｐ　８８８１（ｗｌ工研侑寄第８９５５）の生産する
ポリガラク１−サミン分解酵素で加水分解することによ
り、または、酸加水分解することにより得た分解物を限
外濾過膜で分画することにより各々、分画分子Ｒ５万以
上、１万以上〜５万未満、１万未満のα−１，４結合の
ポリガラクトサミンとして得ることが出来る。

本発明の抗菌剤としては＋　ＰＦ−１０１、ＰＦ−１０
２、これらの分解物及び分画物などα−１，４結合のガ
ラクＩ・サミンはすべて、単独もしくは混合して使用で
きるものである。

次に、α−１．４ポリガラクトサミン．　ＰＦ−１０１
及びＰＦ−１０２の生産菌について説明ずる。

和歌山県の腐植層より分離した不完全菌ＩＩ菌はベエシ
ロマイセス属（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）に属するも
のと認められ，ベエシロマイセスＩ−１と命名され、該
菌株は微工研にＦＥＲＭ　ＢＰ−１１８０として寄託さ
れている。

次にペエシロマイセスＴ刊（ＰａｅｃｉＪｏｌｌｌｙｅ
ｅｓ　Ｉ−１）の菌学的性質を示す。

（ａ）顕微鏡Ｆでの観察 本菌は分生胞子柄（ｃｏｎｉｄｉｏｐｈｏｒｅ）を欠き
、分生胞子は栄養菌糸または栄養菌糸束から直接生えて
いる一本一本独立したフィアライド（ｐｈｉａｌ．ｉｄ
ｅ）の先端に長い連鎖をなして派生している．フィアラ
イドは半透明で２０〜４５μの長さを持ち、基部はやや
太＜（１．．０〜１．５μ）先端はやや先細り（０．５
〜１．０μ）で，直線的あるいは先端部がやや湾曲した
ものもある。分生胞子は電子顕微鏡により葉巻タバコ型
（あるいは桿菌型）であり、そのサイズは４〜６Ｘ１．
０〜１．４μである。

分生胞子は箸通２５〜３５個の連鎖をなしでいるが，ま
れにはもつと長鎖のものち＆ｔ［Ｊされる。この分生胞
子の連鎖は非常にもろく、一寸したショックで簡単にく
ずれる。

（ｂ）各培地における生育状態（２５℃平面培養）（１
）ツアベック寒天培地 コロニーの生育は良く１４日目で直径約４５ｍｍに達す
る。白色のビロード状から羊毛状の菌叢で、中央部に房
状に盛上りがあり、コロニ・一周辺は円形である。水滴
・シワ共になし。コロニー裏面は培養初期白色、培養後
期中央部が淡黄色を呈する。

寒天への色素産生は認められない。

（２）麦芽寒天培地 コロニーの生育は良く，１４日目で直径約５４ｍ＋ｎ、
コロニー周辺は円形にならず梅鉢状を呈する。

菌叢の中央部は白色だが、周辺部は淡黄色を呈する。菌
叢の厚さは中程度で、中央部はやや凹状である。水滴・
シワ共に認められず，コロニー裏面は全面淡黄色を呈す
。寒天培地に淡黄色色素の産生あり。

（３）ポテトデキストロース寒天培地 コロニーの生育は非常に良く１４日目に直径約６０ｍＩ
Ｉ１に達する。白色のビロード状乃至羊毛状の可成り厚
い菌叢を形成し、中央部はやや盛上り，亜中央部は淡い
黄色を呈するやや薄い菌叢、その周辺部は白色の比較的
厚い菌叢となる。表面にシワはないが数個のうすい褐色
の水滴が認められる。コロニー裏面に放射状の数本のシ
ワがあり、同心円状の黄色の濃淡が認められる。寒天へ
の淡黄色色素の拡散がある。

（４）　ＹｐＳｓ寒天培地（組成スターチ１．５％、イ
ーストエキス０．４％、Ｋ２ＨＰ０４０．１％、ＭｇＳ
Ｏ４０．０５％、寒天２％） コロニーの生育は良好で１４日目に直径約５０ｍｍに達
する。白色の全体にふっくらとした羊毛状の厚い菌叢で
ある。水滴・シワなし。コロニー裏面は特記すべき特徴
なし。色素産生なし。

（５）　ＭＹ２。寒天培地（組成グルコース２０％、ポ
リペプトン０．５％、イーストエキス０．３％、モルト
エキス０．３％、寒天２％） コロニーの生育はあまり良くなく１４日目で直径約３０
ｍｍである。気菌糸はあまりたたず細かいシワが多く、
周辺部は淡黄色、中央部は淡褐色を呈する。コロニーの
裏面は淡黄色で、細かいシワがある。色素産生なし。

ペエシロマイセスＩ−１は通常の糸状菌の液体培養方法
で培養することができる。

ペエシロマイセスＩ−１の胞子または菌糸を液体培地に
接種し、好気的に培養する。炭素源としてはブドウ糖、
麦芽糖、蔗糖、澱粉、廃糖蜜等を使用することが出来る
が好ましくはブドウ糖を用いるのが良い。窒素源として
は硫酸アンモニウム、硝酸ソーダなどの無機窒素、ペプ
トン、酵母エキスなどの有機窒素が使用出来る。

培養温度は本凝集活性物質生産菌が凝集活性物質を生産
する範囲内で適宜変更し得るが通常は２０〜２５℃で培
養することが好ましい。培養時間は培養条件によって異
なるが，通常４〜５日程度であり、凝集活性物質が最高
に達する時間を見積って適当な時間に終了すればよい。

ここで培養濾液を減圧濃縮、限外濾過等の方法で濃縮し
て濃縮液としてエタノール等の有機溶媒を加えて沈澱す
れば，特公昭５６−１２６３９号公報に記載のＰＦ−１
０１が得られるのである。

また、ＰＦ−１０１生産菌であるペエシロマイセスト１
を培養し，濾過し、得られた培養濾液または濾液濃縮液
に各種塩を添加し、沈澱が生じない場合は必要によって
はアルカリを添加してｐＨを７〜９として、析出させ，
析出物を分離し、水洗し、これを希酸水溶液に溶解し、
再び塩を添加するか，アルカリ等の添加によってＰＨを
７〜９として、析出させて、特開昭６２−２９４０９３
号公報に記載のＰＦ−１０２を得ることができる。

ＰＦ−１０１の理化学的性質は次の通りである。

（１）凝集活性；きわめて微量で懸濁微細物を疑集する
。

（２）凝集活性ｐＨ範囲；ｐ８２〜９で安定に凝集活性
を示す。

（３）凝集活性温度範囲；０〜１００℃で凝集活性が認
められる。

（４）凝集活性イオン強度；炭酸イオンおよびＦｅ，　
（ｓｏ４）３　により凝集活性が阻害されるがそれ以外
の各種イオン及びイオン強度によって凝集活性に影響は
なく、ＮａＣｌ．　Ｋ２Ｓｏ４でＩＭまで全く影響を与
えない。

（５）元素分析；窒素５．４４％、炭素３７．４５％、
水素６．３％、リン０．２７％。

（６）紫外部吸収スペクトル；第１図に示すとおリ。

（７）赤外部吸収スペクトル；第２図に示すとおリ。

（８）呈色反応； ニンヒドリン反応 キサントプロテイン反応 エーリッヒ反応 モーリッシュ反応　　　　　　　　十 フェノール硫酸反応　　　　　　　十 レローゼンテスト （９）酸による加水分解：６Ｎ塩酸、１１０”　、２０
時間分解によりガラクトサミンとアンモニアが得られ，
　　４Ｎ塩酸、１００℃、１６時間分解により標品の７
４％のガラクトサミンと少量のアンモニアが得られる． （１０）電気泳動；密度勾配等電点電気泳動により単一
物質として確認され、等電点（ρ工）は８．５である． （１１）物質の色；淡黄白色 （１２）塩基性、酸性、中性の区別；等電点８．５でや
や塩基性を呈す。（０．１％水溶液のｐＨは６．２、脱
イオン水のｐＨは５．８） （１３）溶剤に対する溶解性； 熱水に可溶、溶解後冷却しても析出しない．冷水に難溶
。

希酸、希アルカリに蓮溶。

アルコール類、アセトン、クロロホルム、ベンゼン、酢
酸エチル、ローベンタンに不溶７ＰＦ−１０２の理化学
的性質は次の通りである。

（１）凝集活性；きわめて微量で＠濁微細物を凝集する
． （２）凝集活性ｐＨ範囲；ｐ｝１２〜９で安定に凝集活
性を示す。

（３）凝集活性温度範囲；Ｏ〜１００℃で凝集活性が認
められる。

（４）凝集活性イオン強度：炭酸およびＦｅ，（Ｓｏ．
　）］により凝集活性が阻害されるがそれ以外の各種イ
オン及びイオン強度によって凝集活性に影響はな＜　．
　ＮａＣｌ．　Ｋ，Ｓｏ４でＩＭまで全く影響を与えな
い。

（５）元素分析；窒素８．６４％＆、炭素４：１８０％
、水素６．８７％ 一般式：　（ＣＧ　＋｛１　ｘ　ＮＯ４　・ＸＨ２　０
）ｎ（６）２外部吸収スペク１−ル；第Ｓ３図に示すと
おり。

（７）赤外部吸収スペク１−ル；第４図に示すとおり。

（８）呈色反応； ニンヒドリン反応 キサン１へプロテイン反応 工−リッヒ反応 モーリッシュ反応 フェノール硫酸法 ＋ ± レローゼンテスｊ一 （９）電気泳動；密度勾配等電点電気泳動により単一物
質として確認され、等電点（ｐＩ）は８．５である。

（１０）物質の色；淡黄色 （１１）塩基性、酸性、中性の区別 ０．５％ν／Ｖで水に懸濁した場合のｐＨは７．５（脱
イオン水のＰＨ５．８）である， （１２）溶剤に対する溶解性 熱水に難溶 冷水に難溶 希酸に易溶 希アルカリに難溶 アルコール類、アセトン，グロロボルム、ベンゼン、ｎ
−ペンタンに不溶。

（ｌ３）平均分子量　１６万以」二 上記ＰＦ−１０１及びＰＦ−１０２はいずれもα−１．
４ポリガラクトサミンであると同定され，そして本発明
においていずれも抗菌性が認められ、更にそれらの分解
物及び分解物の分画物にも抗菌性がＵＫぬられ、本発明
が完成さおだのである。

α−１，４ボリガラク１−サミンの分解、即ち低分子化
に際しては、塩酸、硫酸等の酸による加水分解又はポリ
ガラクトサミン分解酵素による加水分解が行なわれる。

次に、ポリガラクトサミン分解酵素の１−例を説明する
。このポリガラクトサミン分解酵素はシュードモナスｓ
ｐ　Ｈ８８１　ＦＥＲＮ　Ｐ−８９５５によって生産さ
れるものである。

（１）作用及び基質特異性 本酵素は重合度ｎ＝４（テトラーガラクトサミン）以上
のオリゴ及びポリガラクトサミン（α−１，４ボリガラ
ク１ヘザミン）に作用してオリゴガラタ１、サミンを生
成する。

その他の多糖類、澱粉（α−１．４グルカン），グリコ
ーゲン（α−１，４グルカン）、プノレラン（α−１，
４グルカン）、デキストラン（α−１．６グノレカン）
、ラミナラン（β−１．３グノレカン）、カルボキシル
セルロス（β−１．４−グノレカン）、キトサン（β−
１，４グルコサミノグルカン）、エチレングリコールキ
チン（β−１，４Ｎ−アセチルグルコサミノグルカン）
，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ
のポリＮ−アセチルガラクトサミノガラクタン（ポリβ
−１，３Ｎ−アセチルガラクトサミノガラクタン）（Ｙ
．　Ａｋｉｙａｍａ．，　ｅｔ．　ａｌ．，Ａｇｒｉｃ
．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．，　５０（３）７４７．　
１９３６）などには全く作用しない。

また、重合度ｎ＝３　（トリーガラクトサミン）以下の
α−１，４ガラクトサミノオリゴ糖にも作用しなＵ）。

（２）至適ｐＨ及び安定ＰＨ範囲 クエン酸リン酸緩衝液を用いた場合、至適ρＨは４．５
〜７．０である。また、安定ρＨ範囲はｐＨ４．５〜８
．０である。この測定は３７℃で１時間放置した酵素の
残存活性を相対値で示した。

（３）酵素活性の測定法 酵素活性は基質にＰａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ　Ｉ−１菌
の生産するＰＦ−１０１又はＰＦ−１０２　（その主構
成糖はα−１，４ガラクトサミノガラクタン）を用いた
。この０．５％７０．１モル酢酸緩衝液ｐＨ６．０溶液
０．５ｍ１２に酵素溶液０　．　５ｍＱを加え、３７℃
、ｌＯ分間反応させ、生じる還元力をＳｏｍｏｇｙｉ−
Ｎｅｌｓｏｎ法で測定した。なお酵素単位は１分間当り
に１μモルのガラクトサミンに相当する還元力を増加さ
せる活性を１単位とした．（４）作用適温及び温度安定
性の範囲 この酵素の至適温度は５５℃であり、それ以上で急激に
低下する。５０℃、１時間で７０％の活性が残存してい
る． α−１，４ポリガラクトサミンの溶液にポリガラクトサ
ミン分解酵素を添加して３５〜４０℃程度で酵素分解す
ることによってα−１，４ポリガラクトサミンの分解物
を得ることができる． α−１．４ポリガラクトサミンの分解物には抗菌性が認
められるので，そのまま抗菌剤として使用することがで
きるが、α−１，４ポリガラクトサミンの分解物を限外
濾過膜等によって分画することによって各種の分子量単
位に分かれた分画物を得ることができる。

α−１，４ポリガラクトサミンの分解物は限外濾過膜に
よって、分子量５万以上，分子量１万以上５万未満、分
子量１万未満とそれぞれの分画物を得ることかできるが
、いずれの分画物も抗菌性を有しており、本発明の抗菌
剤となるものである。

本発明は，α−１，４ポリガラクトサミン、その分解物
又は分解物の分画物を有効成分とする抗菌剤である。

本発明において、有効成分はそのまま添加料として、又
は各種液剤，粉剤に製剤化して抗菌剤として有効に使用
されるものである。

次に本発明の製造例、実施例を示す。

製造例１ α−１，４ポリガラクトサミン（ＰＦ−１０２）の製造
グルコース６００ｇ、ポリペプトン６０ｇ．ＣａＣｌ２
・２Ｈ，０　１２５ｇを水道水１１ｉに溶解し．　’７
３　ＮａＯＨ溶液でＰＨ７．０に調整した後３０Ｑ．容
ジャーファーメンターに移した。

この培地溶液に蒸気を注入することにより加圧、加熱滅
菌（１２１℃、２０分間）を行った。冷却後の培地（最
終液量２０ａ）に、５００ｍｌ２三角フラスコに１５０
１ＩＩＱ同組成の培地（グルコース３％、ポリペプトン
０．３％、ＣａＣ１，　０．５％、ｐＨ７．０）で２６
℃、４日間振盪培養したべエシロマイセスＩ−１、ＦＥ
ＲＮ　ＯＰ−１１８０（ＦＥＲＭ　Ｐ−３９２８）を容
量比で約１０％無菌的に接種した。接種後２７℃、通気
量０．５ＶＶＭ、攪拌数２０ＯＲＰＭ　（７）条件で５
日間培養した。

培養終了後培養物を濾布濾過することにより培養濾液ｉ
ｌｌを得た。この培養濾液を５０℃〜６０℃に加熱しな
がら分画分子量１６万の限外濾過膜（三菱レイヨン・エ
ンジニアリング社ＩＢＵＦ膜チューブラーモジュールＦ
タイプ）を通過させることにより、低分子画分を除き液
量が約３Ｑになる迄濃縮した．更に、約１４０００　Ｘ
　Ｇで遠心分離することにより菌体残渣、熱変性蛋白質
を除去した． 遠心分離後に上澄液画分３Ｑに食塩約７５０ｇ　（約２
５％濃度）を加え攪拌し、溶解後、濃ＮａＯＨでｐ｝ｌ
を７．０〜８．５に調整した。一夜放置し塩析物を十分
析出させた後、サラン製の布（塩化ビニリデンと塩化ビ
ニールの共重合体）上に塩析物を回収した。

更にこの塩析物の上から大量の微アルカリ性の水（ＰＨ
７．０以上）を撒布することにより余分の食塩及び培養
液に同時に混在している中性糖、その他の夾雑物を洗い
流した６ 次に、水洗後の塩析物に０．１Ｍ塩酸溶液を容量比で約
３倍量加え溶解した９この溶解物に濃Ｎａｉｌ溶液を加
えポリガラク！−サミンの等重点であるｐＨ８。５に合
せた。一夜放置し十分析出物を析出させた後、上記と同
様サラン製の布」−二に析出物を回収し、大量の水道水
で洗った。この水洗物をもうｊ度Ｏ。１Ｍ塩酸に溶解後
、等電点沈澱を行い水洗を繰返すことにより精製した． この精製した析出物を１２１℃５１５分間滅菌後、凍結
乾燥することにより、ポリガラクトザミンを主成分とす
るＰＦ−１０２の精製粉末（α−１，４ボリガラクｌ−
サミンとしての純度約９９％）を７ｇ得た。

製造例２ α−１，４ポリガラクトザミンの分両方法精製α−１．
４ポリガラクトザミン（ＰＦ−１０２）　１００ｇを４
規定塩酔２Ｑに分散させ、冷却管付き三角フラスコ中に
て，８０℃，４時間塩酸加水分解した。

分解後，この塩酸加水分解溶液を１０規定水酸化ナ１−
リウムで中和しｐ！｛７とした。この、溶液を先ず分画
分子址５万の限外濾過膜で処理（グレースジャパン社製
）シ，更に分両分子斌Ｊ万の限外濾過膜で処理１７た。

この様にして、各々分子旦５万以上、１〜５万，］−万
未満のα−１，４結合のポリガラクトサミンを得た。

各々の両分を凍結乾燥する、τとにより、粉末試料とし
た。

製造例３ ボリガラク｝−サミン分解＃素の製造 シュードモナスＳｐ　Ｈ８８１、ＦＥＲＭ　Ｐ−８９５
５を５００ｍＱ三角フラスコ中で、グルコース０．５％
，酵母エキス０．０５％、ポリペプトンＯ。０５％の組
成を有する種培地１００ｍ（ｌに植菌し、３０’Ｃで２
０時間培養する。

得られた種培養液を３０Ｑのジャーファーメンタ・一中
で、ポリガラクトサミン（ＰＦｌ０２）　０．２５％、
グルコース０．２５％，酵母エキス０．０５％、ポリペ
ブトン０．０５％の酵素生産培地１８Ｑに植菌し，３０
℃で４８時間通気（１８Ｑ／分）攪拌（２００ｒｐｍ）
培養する。

得られた培養液を遠心分離（１４．００Ｏｒｐｍ）　Ｌ
，て、菌休を除き、得られた培養濾液（酵素活性０．０
０３５１Ｊ／ｒｒｒＱ．総活性６３１Ｊ／１８ｆ’！）
に冷却したエタノールを６０％濃度まで加えて、タンパ
ク質を沈殿させ，この沈殿タンパク質を遠心して、溶液
から分離する，，得られたタンパク質を０。１モル酢酸
緩衝液（　ｐ　Ｈ　５．０）で平衡化したＣトセファデ
ソクスｃ−２５カラム（２。５Ｘ　６０ｃｍ）に吸着さ
せ，０〜０。５モル食塩の濃度勾配を有する同緩衝液を
用いて溶出させる。

溶出した酵素活性区分を集め，限外濾過装置（分子量１
万保持）を使って濃縮する。次に、２モル食塩を含む０
．１モル酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）溶液とし、同緩衝液
で平衡化したセファデックスＧ−５０カラム（５　Ｘ　
９０ｃｍ）クロマトグラフィーにかける。次いで、活性
区分の食塩濃度を４モルにまで高め、同様な溶液で平衡
化したフエニルーセファロースＣＬ−４Ｂ力ラム（２．
５　ｘ　２０ｅ＋ｉ）に吸着させ、食塩の逆濃度勾配を
持つ０．１モル酢酸緩衝液で溶出して精製ポリガラクト
サミン分解酵素５０蔀（収率２３．１％、比活性５２μ
ｇ　ｇａｌ．Ｎ／ｍｉｎ／ｍｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ）を得
た。

製造例４ α−１．４ポリガラクトサミンの分両方法精製ポリガラ
クトサミン２５Ｋを４，８Ｑの０．１モル酢酸に溶解し
、次に水酸化す１・・リウムでｐＨ６．０に調整し，全
液料を５Ｑとした６このボリ１ガラクトサミン溶液を基
質とし、これに製造例３で得た精製ポリガラクトザミン
分解酵素１０ｍｇを加え３７℃で酵素分解した。この分
解後の溶液を先ず、分両分子量５万の限外濾過膜で処理
（グレースジャパン社製）し２更に分両分子斌１万の限
外濾過膜で処理した。この様にして、各々分子量５万以
上、〕一５万，１−万未満のα−１，４結合のポリガラ
クトサミンを得た。

更に、各々の両分を凍結乾燥することにより、粉末試料
とした。

二二に得られた分画分子量５万以上のα−七４結合のポ
リガラクトサミンの理化学的諸性質は次の通りである。

１．元素分析；窒素８．６％、炭素４２．８％、水素６
。９％、酸素４１．７％ ２．比旋光度；Ｃα〕６°＝．＋２１５〜２２５３．融
点；１６０℃以上で褐変、２１０’ＣＴＦ炭化、２３０
℃で灰化 ４．物質の色；淡黄色 ５．　呈色反応； ニンヒドリン反応　　　　　　　　十 キサントプロテイン反応 エーリッヒ反応 モーリッシュ反応 フェノール硫酸反応　　　　　　　士 ６．溶剤に対する溶解性； 水に難溶 希酸に可溶 メタノール、エタノール、アセトン、クロロフォルム、
ヘキサンに難溶 ７．紫外部吸収スペクトル；第５図に示される。

８．赤外部吸収スペクトル；第６図に示される。

また、分画分子量１万以上５万未満のα−１，４結合の
ポリガラクトサミンの理化学的諸性質は次の通りである
。

■．元素分析；窒素８．７％、炭素４５．７％、水素３
．２％、酸素４２．４％ ２．比旋光度；〔α〕ら’＝＋２１０〜２２０３．融点
；特定の融点を持たず、１６０℃で褐変，２１０℃で炭
化、２３０℃で灰化 ４．物質の色：淡黄色 ５．呈色反応； ニンヒドリン反応　　　　　　　　十 キサントプロテイン反応　　　　　一 エーリッヒ反応 モーリッシュ反応 フェノール硫酸法　　　　　　　　士 ６．溶剤に対する溶解性； 水に可溶 メタノールに微溶 ジメチルスルホオキシドに微溶 エタノール、アセトン、クロロホルム，ヘキサンに難溶 ７．紫外部吸収スペクトル；第７図に示される。

８．赤外部吸収スペクトル；第８図に示される。

また，分画分子量１万未満のα−１，４結合のポリガラ
クトサミンの理化学的性質は次の通りである。

■．元素分析；窒素８．６％、炭素４４．３％、水素６
．９％、酸素４０．２％ ２．比旋光度；〔α〕♂’　：　＋２０６．８３．融点
；特定の融点を示さず、１６０℃以上で炭化をはじめる
。

４．物質の色；淡黄色 ５．　呈色反応； ニンヒドリン反応　　　　　　　　十 インドール塩酸反応　　　　　　　十 ソモギー−ネルソン反応　　　　　十 フェノール硫酸反応 ヨード反応 ６．溶剤に対する溶解性； 水に可溶 希酸に可溶 メタノールに微溶 ジメチルスルフォオキシドに微溶 エタノール、アセトン、クロロフォルムには難溶 ７．紫外部吸収スペクトル：第９図に示される．８．赤
外部吸収スペクトル；第１０図に示される。

実施例１ 培養培地；肉エキス１０ｇ、ペプトンＬｏｇ、塩化ナト
リウム５ｇを脱イオン水に溶解し．　ｐＨを６．０に調
整した後、ＩＱとした． 別に、製造例１で製造したα−１．４ポリガラクトサミ
ン（ＰＦ−１０２）、製造例２で製造したα−１，４ポ
リガラクトサミンの塩酸分解物及び製造例２で調整した
塩酸分解物の分画物で各々の分子量のものについて、各
α−１．４ポリガラクトサミンを０．１規定の酢酸に溶
解し、各々最終濃度で０．１、０．０５、０．０１２５
、０．００６、０．００３％　になるように培養培地に
添加した。

更に、寒天を最終１．５％になるように加え、１２１℃
、１５分オートクレープした後ポリガラクトサミン含有
平板培地とした。

抗菌作用の判定は、接種した菌株の増殖阻止が確認され
た培地中のポリガラクトサミンの最小濃度で示した。菌
株の培養は、３０℃、２日間行いその観察結果で判定し
た。

試験に供した菌株は Ｅｓｅｈｃｒｉｃｈｉａ　ｅｏＨ．　ＩＦＯ　１２７３
４，Ｂａｃｉｌｌ．ｕｓ　ｓｕｂｔｊｌｉｓ　ＩＦＯ　
３５１３，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉ．ｎ
ｏｓａ　ＩＦＯ　３４４９，Ｍｉｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　
ｌｕｔｅｕｓ　ＩＦＯ　１２７０８，Ｍｙｃｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ　ｐｈｌｅｊ．　ＩＦＯ　３１５８，Ｓｔａ
ｐｈｙｌｏｅｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＩＦＯ　２２
７３２である。

結果は、第１表に示した通りである。

【図面の簡単な説明】

第］図はＰＦ−１旧の紫外部吸収スペクトルを示す図で
、第２図はＰＦ−１０１の赤外部吸収スペクトルを示す
図で、第３図はＰＦ−１０２の紫外部吸収スベク１ヘル
を示す図で、第４図はＰＦ−１０２の赤外部吸収スペク
トルを示す図で、第５図はＰＦ−１０２の分解物の分子
量５万以上の分画物の紫外部吸収スペク１−ルを、第６
図はその赤外部吸収スペク１・ルを示す図で、第７図は
ＰＦ−１０２の分解物の分子量１万以上５万未満の分画
物の紫外部吸収スペクトルを，第８図はそ．の赤外部吸
収スペクトルを示す図で，第９図番才ＰＦ−１０２の分
解物の分子量〕万未滴の分画物の紫外部吸収スペクトル
を、第１０図はその赤外部吸収スペクトルを示す図であ
る。 代理人　弁理士　戸　田　親　男 第 図 波 長 ｎｍ 第 図 波 長 ｎｍ

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）α−１，４ポリガラクトサミン、その分解物又は
   分解物の分画物を有効成分とする抗菌剤。
2. （２）α−１，４ポリガラクトサミンの分解物の分画物
   が分子量５万以上のα−１，４ポリガラクトサミンであ
   ることを特徴とする第１項記載の抗菌剤。
3. （３）α−１，４ポリガラクトサミンの分解物の分画物
   が分子量１万以上５万未満のα−１，４ポリガラクトサ
   ミンであることを特徴とする第１項記載の抗菌剤。
4. （４）α−１，４ポリガラクトサミンの分解物の分画物
   が分子量１万未満のα−１，４ポリガラクトサミンであ
   ることを特徴とする第１項記載の抗菌剤。