JPH02264796A - リボヌクレオチドリダクターゼインヒビター - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は選択的リボヌクレオチドリダクターゼ阻害性を
有するペプチド、その製造法、該ペプチドの医薬組成物
及びリボヌクレオチドリダクターゼを阻害するための該
ペプチドの使用に関する。

〔従来の技術〕

リボヌクレオチドリダクターゼ（ＲＲ）はりボヌクレオ
チドをデオキシリボ゛ヌクレオチドへと還元的に転換す
る酵素である。この転換は細胞複製に基本的なデオキシ
リボ核酸（ＤＮＡ）の生合成の律速段階である。ＲＲ活
性は正常及び腫瘍細胞の増殖に直接結びついており、腫
瘍細胞においては有意に高いレベルのＲＲ活性が見られ
る（Ｅ、タケダ（Ｔａｋｅｄａ）及びＧ、ウェーバ−（
Ｗｅｂｅｒ）　、ライフサイエンス（Ｌｉｆｅ　５ｃｉ
ｅｎｃｅｓ）　、２Ｂ、１００７　（１９８１）及びＧ
、ウニバー（Ｗｅｂａｒ）等、アドバーンス・イン、エ
ンザイム・レギュレーション（Ａｄｖ、　Ｂｎｚ、　Ｒ
ｅｇ、）、脛、８７（１９８１）参照）、それゆえＲＲ
活性の阻害は例えば腫瘍及び乾廚で起こる異常な細胞増
殖を妨害もしくは軽減する薬剤の探索の正当な標的であ
る。

哺乳類のＲＲインヒビターが強力な抗腫瘍剤として研究
されてきている。例えばＢ、ファン）　ＩＪエツト（ｖ
ａｎ’　ｔ　Ｒｉｅｔ）等、ジャーナルオブメディカル
ケミストリ−（Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、）　、２２
．５８９　（１９７９）、Ｊ、　Ｇ、コリー（Ｃｏｒｙ
）等、アドバーンス・イン・エンザイムレギュレーショ
ン（Ａｄｖ、Ｂｎｚ、　Ｒｅｇ、）、１９．１３９（１
９８１）及びＢ、ファントリエツト（ｖａｎ’　ｔ　Ｒ
ｉｅｔ）等、米国特許第４．４４８．７３０号（１９８
４，５月１５日発行）参照。しかし臨床テストにおいて
完全に満足できるものは見られず、わずか１個のＲＲゼ
インビターヒドロキシウレアのみが抗腫瘍剤として医師
により使用されている。それにもかかわらずこの薬剤は
副作用や生体中でこの薬剤の有効濃度を維持するために
は大量投与が必要であることからその使用が制限されて
いる。

本出願は哺乳類ＲＲの強力なインヒビターである一群の
新しいペプチドを公開している。この特性は比較的低い
毒性とともにこれらのペプチドを異常な細胞増殖に関す
る病気をおさえる有効な医薬としている。

先にＲＲゼインビターとなるペプチドが報告されている
０例えばＪ、Ｈ，スバクーシャーブ（Ｓｕｂａｋ−Ｓｈ
ａｒｐｅ）、英国特許出願第２１８５０２４号、１９８
７年７月８日発行、Ｅ、Ａ、コーエン（Ｃｏｈｅｎ）等
、ヨーロッパ特許出願第２４６６３０号、１９８７年１
１月２５日発行及びＲ，フリジンガ−（Ｆｒｅｉｄｉｎ
ｇｅｒ）等、ヨーロッパ特許出願第２９２２５５号、１
９８８年１１月２３日発行参照、しかし本ペプチドとは
異なり以前に報告されたペプチドにはウィルスＲＲのイ
ンヒビターであり哺乳類のＲＲのインヒビターではない
。

〔発明の内容〕

本発明のペプチドは一般式（１） ％式％（１） （式中、Ｒ′はＴｈｒ、、Ｔｈｒ（ＯＢｚｌ）　、Ｓｅ
ｒ　％　Ｌｅｕ　％Ｉｌｅ　。

Ｖａｔ、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｔ又はＡｌａであり、ＲｔはＬ
ｅｕ％Ｄ−Ｌｅｕ　ｓ　Ｎ−１’１ｅ−Ｌｅｕｓ　　Ｉ
ｌｅ、　Ｖａｌ　５Ａｌａ　、。

（’ｈａ　、　Ｎ−λ１ｅ−Ｃｈａ又はＰｈｅであり、
Ｒ３はＡｓｐ、　Ｄ−Ａｓｐ　、Ｈ−Ｍｅ−ＡｓｐＳＡ
ＳＩ）（ＮＭｅ２）、Ａｓｎ　、　Ｇｌｕ　５Ｇｌｎ　
５Ｌｅｕ　、　Ｉｌｅ　、　Ｖａｔ　、　Ａｌａ　、　
Ｇｌｙ又はＰｈｅであり、 Ｒ４はＡｌａ、　Ｄ−Ａｌａ　、　Ｖａｌ　５Ｉｌｅ　
５Ｌｅｕ　、　Ａｓｐ又はＧｌｕであり、 Ｒ３はＡｓｐ、　０−Ａｓｐ　、　Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ、
Ｇｌｕ　ｓ　Ｄ−Ｇｌｕ又はＮ−Ｍｅ−Ｇｌｕであり、 Ｒ６はＰｈｅ、ホモＰｈｅ、又は一般式Ｘ−ＣＨ＊ＣＨ
（ＮＨ−）　Ｃ０−（式中Ｘはシクロヘキシル基、４−
（低級アルコキシ）フェニル基又は４−ハロフェニル基
）で表わされる二価アミノ酸残基であり、 ＹはＰｈｅデサミノ−Ｐｈｅ１（低級アルカノイル）　
−Ｐｈｅ　、　ｐ−ハａＰｈｅ　、　　（低級アルカノ
イル）−ｐ−ハｏＰｈｅ　５Ｔｙｒ　デサミノ−Ｔｙｒ
又は（低級アルカノイル）Ｔｙｒ、又は一般式１ｌ−Ｖ
ａｌ−Ｒ’−３ｅｔ　−Ｒ・−Ｒ’−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−
Ｒｌｏ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ　（式中、Ｗは水素又は低級ア
ルカノイル基であり、Ｒ７はＭｅｔ又はＩｌｅであり、
ｎａばＳｅｒまたはＡｓｎであり、Ｒ’はＰｒｏ又はＳ
ｅｒであり、かつＲｌＧはＡｓｎ　、　Ｇｌｎである）
で表わされるデカペプチド基又は上記式中Ｗ１Ｒ７、Ｒ
６、Ｒ８及び１（１Ｇは先に定義したものであり、かつ
該デカペプチドのアミノ末端の第１番から第９番までの
アミノ酸残基（すなわちＶａｌからＳｅｒ）が欠失して
おり、かつＺが水酸基、アミノ基、低級アルキルアミノ
基又はジ（低級アルキル）アミノ基である該デカペプチ
ドの断片である）で表わされるペプチド又は医薬的に許
容し得るその塩である。

好ましい一群のペプチドは一般式（１）中Ｒ′からＲ６
までが先に定義したものであり、ＹがＰｈｅ。

デサミノＰｈｅ　ｓ　ＡｃＰｈｅ　ｓ＾ｃ−ｐ−ハｏＰ
ｈｅ　、　Ｔｙｒ　％デサミノ−Ｔｙｒ又はＡｃ’ｒｙ
ｒであり、かつＺが水酸基又はアミノ基であるもの又は
医薬的に許容し得るその塩である。

別の好ましいペプチドは一般式（１）中１（１からＲ６
が先に定義したものであり、Ｙが先に定義したデカペプ
チド基又はデカペプチド基の断片であり、かつＺが水酸
基又はアミノ基であるもの又は医薬的に許容し得るその
塩である。

より好ましいペプチドは一般式（１）中ＲＩがＴｈｒ　
、　Ｔｈｒ（ＯＢｚｌ）　、Ｓｅｒ　、　Ｉｌｅ　、　
Ｖａｌ　、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｌ又はＡｌａであり、Ｒ２が
Ｌｅｕ、　Ｎ−Ｍｅ−Ｌｅｕ、　ｌｌｅ　、　Ｖａｌ又
はＮ−Ｍｅ−Ｃｈａであり、Ｒ３がＡｓｐ、Ａｓｐ　（
ＮＭｅ２）、Ａｓｎ　、　Ｇｌｕ　ＸＧｌｎ又はＡｌａ
であり、Ｒ４がＡｌａ、　Ｖａｔ　。

Ａｓｐ又はＧｌｕ、　Ｒ’がＡｓＰｓ　Ｎ−Ｍｅ−Ａｓ
ｐ又はＧｌｕであり、Ｒ６がＰｈｅ、ホモｐｈａ、又は
一般式Ｘ−ＣＨ，ＣＨ（ＮＨ−）　ＣＤ−（式中Ｘはシ
クロヘキシル基、４−メトキシフェニル基又は４−フル
オロフェニル基である）であり、ＹがＰｈｅデサミノ−
Ｐｈｅ、　ＡｃＰｈｅ　、ＡＣ−Ｐ−［Ｐｈｅ　。

Ｔｙｒ　デサミノ−Ｔｙｒ又は＾ｃＴｙｒであり、かつ
Ｚが水酸基又はアミノ基であるもの又は医薬的に許容し
得るその塩である。

別のより好ましいペプチドは一般式（１）中１（＋から
Ｒ６までが先に示した最後の例で定義したものであり、
Ｙが先に述べたデカペプチド基又はデカペプチド基の断
片（Ｗは水素又はアセチル基であり、かつＲ７から［１
０までに先に定義したものである）であり、かつＺは水
酸基又はアミノ基であるもの、又は医薬的に許容し得る
その塩である。

最も好ましいペプチドは、一般式（１）中１１７Ｒ２が
先に示した最後の例で定義したものであり、ＲＩがＬｅ
ｕ　、　Ｎ−Ｍｅ−Ｌｅｕ又はＮ−Ｍｅ−Ｃｈａであり
、Ｒ３がＡｓｐ。

Ａｓｐ（Ｎ−Ｍｅ２）、Ａｓｎ　％　Ｇｌｎ又はＡｌａ
であり、Ｒ４がＡｌａ又はＧｌｕであり、Ｒ５がＡｓｐ
又はＮ＝Ｍｅ−Ａｓｐであり、Ｒ＆がＰｈｅであり、Ｙ
がＰｈｅｓデサミノＰｈｅ又は＾ｃＰｈｅであり、かつ
Ｚが水酸基であるもの、又は医薬的に許容し得る塩であ
る。

別の最も好ましいペプチドは一般式（１）中Ｒ１からＲ
６までが先に示した最後の例で定義したものであり、Ｙ
が先に述べたデカペプチド基又はデカペプチド基の断片
（Ｗは水素又はアセチル基であり、Ｒ）はＭｅｔ又はＩ
ｌｅであり、ＲＩはＳｅｒ又はＡｓｎであり、Ｒ９はＰ
ｒｏ又はＳｅｒでありかつＲＩ。はＡｓｎである）であ
り、かつＺが水酸基であるもの、又は医薬的に許容し得
るその塩である。

本発明のペプチドの別の好ましい群は、一般式％式％ 又はＮ−Ｍｅ−Ａｓｐ、　Ｒ’がＰｈｅ又はホモＰｈｅ
　％ＹがＰｈｅ。

＾ｃ−Ｐｈｅ。

ｔｌ−Ｖａ　１−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−＾５ｎ−Ｓｅｒ−Ｔ
ｈｒ−Ｇ　１ｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ。

ｔｌ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇ　ｌｕ−＾５ｎ−Ｓ
ｅｒ−Ｐｈｅ。

Ｈ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−＾５ｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ。

ＡｃＴｈｒ−Ｇ　１ｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ。

ＡｃＡｓｎ−６ｅｒ−Ｐｈｅ。

Ｈ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−＾５ｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ
。

）１−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔ　ｈｒ−Ｇ　１ｕ−Ａｓｎ−
Ｓｅｒ−Ｐｈｅ、又は１（−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−
Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ。

かつＺが水酸基であるペプチド又はその医薬的に許容さ
れる塩であり、特に好ましいものは一般式％式％） はＡｓｎ、　Ｒ’がＡｌａＳＶａｌ又はＧｌｕ、　Ｒ’
がＡｓｐ又はＮ−Ｍｅ−＾５ｐ、Ｒ６がＰｈｅのペプチ
ドである。

本発明の範囲には一般式（１）のペプチド又は医薬的に
許容し得るその塩及び医薬的又は獣医学的に許容し得る
キャリヤーを含む哺乳類における異常な細胞増殖を治療
する医薬組成物が含まれる。

本発明の範囲には効果的な量の一般式（１）のペプチド
又は医薬的に許容し得るその塩を哺乳類に投与すること
を含む、哺乳類中の異常な細胞増殖を妨ぎ、又は軽減す
る方法が含まれる。

また本発明の範囲には所定量の一般式（１）のペプチド
、又は医薬的に許容し得るその塩を、比較的高いリボヌ
クレオチドリダクターゼ活性を有する腫瘍を持つ哺乳類
に投与しりボヌクレオチドリダクターゼを阻害すること
を含むリボヌクレオチ・ドリダクターゼ阻害法が含まれ
る。

一般式（１）のペプチドの合成法を以下に述べる。

アミノ酸に関する“残基”という語はカルボキシル基の
水酸基及びα−アミノ基の１個の水素を除くことにより
対応するα−アミノ酸から誘導される基を意味する。

一般に、アミノ酸及び保護基を示すのに用いている略記
法はＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ生化学命名委員会の推薦するも
のに基づいている。ヨーロピアンジャーナル　オブ　バ
イオケミストリー（Ｂｅａｒｏｐｅａｎ　Ｊａｕｒｎａ
ｌｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、１３８．９（１
９８４）参照。例えばＭｅｔ　ＳＭｅｔ（０）、Ｖａｌ
　、　Ｔｈｒ　、　Ｇｌｕ　、　Ｇｌｎ　、Ａｌａ　。

Ｉｌｅ、Ａｓｐ　５Ｐｈｅ　５Ｓｅｒ　、　Ｌｅｕ　、
Ａｓｎ及びＴｙｒはＬ−メチオニン、Ｌ−メチオニンス
ルホキシド、Ｌ−バリン、Ｌ−ストオニン、Ｌ−７’ル
タミン酸、Ｌ−グルタミン、Ｌ−アラニン、Ｌ−イソロ
イシン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−フェニルアラニン、
Ｌ−セリン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−アスパラギン及びＬ−
チロシン残基を各々表わしている。

アミノ酸残基の三文字記号の接頭語として用いている記
号”Ａｃ’″はアミノ酸のＮ−アセチル誘導体を意味し
ている。例えば’ＡｃＰｈｅ″は゛Ｎ−アセチルーし一
フェニルアラニン残基を表わしている。

同様に、アミノ酸残基の３文字記号の接頭語として用い
ている記号″Ｎ−Ｍｅ’″はアミノ酸のＮ−メチル誘導
体を表わしている。例えばＮ−Ｍｅ−Ｖａ　ＩはＮ−メ
チル−Ｌ−バリンを表わしている。接頭語として用いて
いる“ブザミノ”という語はＮα−アミノ基が水素と置
換したアミノ酸残基を示している。例えば“ブザミノＰ
ｈｅ　”は３−フェニルプロパノイルを表わしている。

ここで用いている他の記号には、 ０３−ベンジル−し−スレオニン残基に対するＴｈｒ　
（ＯＢｚｌ）、 Ｎ’、Ｎ’−ジメチル−Ｌ−アスパラギン残基に対する
＾ｓｐ　（ＮＭｅ＊）、 Ｌ−ホモフェニルアラニン、すなわち２　（Ｓ）−アミ
ノ−４フエニル酪酸に対するホモＰｈｅ　ｓ２　（Ｓ）
−アミノ−３−シクロヘキシルプロピオン酸残基に対す
る［：ｈａ。

２（Ｓ）−アミノ−３−（４−ハロフェニル）プロピオ
ン酸及び２（Ｓ）−アミノ−３−（４−ヨードフェニル
）プロピオン酸にそれぞれ対応するｐ−八〇　Ｐｈｅ及
びｐ　−ＩＰｈｅ。

がある。

先頭に“Ｄ−”が付いていないアミノ酸残基は接頭語と
して低級アルカノイル及びアセチルが付いているものも
含めてＬ型の構造を有している。同様の考え方が二価ア
ミノ酸残基 “χ−Ｃ）ｌ　、Ｃ）Ｉ−（ＮＨ−）　ＣＤ−”にも適
用され、これもＬ型構造を有している。先頭に“Ｄ−″
が付いているアミノ酸残基はＤ−型構造を有している。

アミノ酸残基の出発物質、通常対応するＮα−保護アミ
ノ酸は市販されているか、又は従来法で合成し得る。

ここで用いている“ハロ”という２吾はブロモ、クロロ
、フルオロ又はヨードから選ばれるノ＼ロゲン基を意味
している。

“低級アルカノイル”という語は２個から６個の炭素原
子を含むアルカノイル基を意味し、それらにはアセチル
基、１−オクソブロビル基、２−メチル−２−オクソプ
ロビル基、１−オクソヘキシル基等が含まれる。同様に
、“低級アルカン酸”は２個から６個の炭素原子から成
るアルカン酸を意味し、例えば酢酸、プロピオン酸及び
３−メチル酪酸等が含まれる。

ここで用いている“低級アルコキシ″という語は１個か
ら６個の炭素原子からなる直鎖アルコキシ基及び３個か
ら６個の炭素原子からなる分枝アルコキシ基を意味し、
メトキシ基、エトキシ基、プロキシ基、１−メチルエト
キシ基、ブトキシ基及び２．２−ジメチルプロポキシ基
が含まれる。

ここで用いている“了ミノ”という語は化学式−ＮＨ２
のアミノ基を意味している。“低級アルキルアミノ”と
いう語は１個から３個の炭素原子を含むアルキルアミノ
基を意味し、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピ
ルアミノ基及び１−メチル−エチルアミノ基を含む。“
ジ（低級アルキル）アミノ”という語は各々１個から３
個の炭素原子を含む２個の低級アルキル置換基を有する
アミノ基を意味し、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ
基、エチルメチルアミノ基等が含まれる。

ここで用いている“医薬的に許容し得るキャリヤー”と
いう語は成分に悪影響を与えない無毒で活性成分に対し
て一般的に不活性な担体を意味している。

ここで用いている“獣医学的に許容し得るキャリヤー”
とう層は薬剤物質と反応しないか又はその効果を減じな
い１個以上の無毒性の医薬的に許容し得る賦形物を含む
、薬剤物質を家畜動物に投与するための生理学的に許容
し得る担体を意味する。

ここで用いている１結合剤”という語はアミノ酸又はペ
プチドの遊離したカルボキシル基と他のアミノ酸又はペ
プチドの遊離したアミノ基と脱水的に結合させ、両反応
物間にペプチド結合を形成し得る試薬を意味する。この
試薬は力、ルボキシ基を活性化することによりこの脱水
的結合を推進又は可能にする。これらの結合剤及び活性
基の説明はペプチド化学の一般書に示されている。例え
ばＥ、シュレーダー（Ｓｃｈｒｉ５ｄｅｒ）及びに、Ｌ
、ルブケ（Ｌ’ｊｂｋｅ）　、“ペプチド”第１巻、ア
カデミツクブレス版、ニューヨーク、Ｎ、Ｙ、１９６５
、ｐｐ２−１２８及びに０口、コフブル（Ｋｏｐｐｌｅ
）　、“ペプチドとアミノ酸１−１Ａ、ベンジャミン版
、ニューヨーク、Ｎ、Ｙ、１９６６、ｐｐ３３−５１参
照。結合剤の例にはチオニルクロライド、ジフェニルホ
スホリルアジド、ジクロロへキシルカルボジイミド、Ｎ
−ヒドロキシスクシンイミド、又はジシクロへキシルカ
ルボジイミド存在下の１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ルがある。

実際的で有用な結合剤にはＢ、カスドロ（Ｃａｓ　ｔｒ
ｏ）等、テトラへドロンレターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ
ｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ）、１２１９　（１９７５）及び
り、ハドソン（Ｈｕｄｓｏｎ）、ジャーナル・オブ・オ
ーガニックケミストリー（Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、
）、５３．６１７　（１９８８）で報告されている単独
又はｌ−ヒドロキシベンゾトリアゾール存在下で用いら
れる（ベンゾトリアゾール−１−イロキシ）　トリス（
ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェ
ートである。

一般式（１）のペプチドはアミノ酸残基及び、又はペプ
チド断片の古典的溶液内結合反応及び望ましい場合は固
相法などペプチド合成で一般に用いられている方法で合
成し得る。これらの方法は例えばＢ、シｓＬ／−グー（
Ｓｃｈｒ６ｄｅｒ）及びに、ルブケ化’Ｑｂｋｅ）、（
上述のシリーズ中の“ペプチド二分析、合成、生化学”
、Ｂ、グロス（Ｇｒｏｓｓ）解編、アカデミツクブレス
版、ニューヨーク、Ｎ、　Ｙ、１９７９〜１９８７、第
１巻〜第８巻）、及びＪ、　Ｍ、スチュワート（Ｓｔｅ
ｗａｒｔ）及びＪ、０．ヤング（Ｙｏｕｎｇ）、（″固
相ペプチド合成”第２編、ピアスケミストリー（ｐｉｅ
ｒｃｅＣｈｅｍ、　Ｃｏ、）版、Ｏ−）クツオード、Ｉ
Ｌ、　ＵＳＡ　５１９８４年）により述べられている。

ペプチドに対する上述の方法の共通した特徴は種々のア
ミノ酸残基の不安定な側鎖官能基を適当な保護基で保護
し、その保護基が最終的に除去されるまでその部位で化
学反応が起こることを妨いでいることである。また一般
にアミノ酸又はペプチド断片上のα−アミノ基を保護し
ておく一方そのカルボキシル基で反応させ、つづいてそ
のα−アミノ保護基を選択的に除去することによりその
部位での引きつづく反応を可能にするという方法が共通
した特徴である。一般にその他の共通した特徴には、本
ペプチドのＣ末端官能基となるアミノ酸残基又はペプチ
ド断片のＣ末端カルボキシル基を適当な保護基で最初に
保護しておき、本ペプチドの望ましい配列が組上げられ
た後、その保護基が除去されるまでその部位での化学反
応を妨ぐことがある。

従って一般式（１）のペプチドは結合剤の存在下、適当
なアミノ酸残基又はペプチド断片（正しく保護された側
鎖官能基及び本ペプチドのＣ末端官能基となる、Ｃ末端
カルボキシル保護基で正しく保護された該アミノ酸残基
又はペプチド断片のＣ末端カルボキシル基を有する）を
本ペプチドのアミノ酸配列の順に段階的に結合し、一般
式（２）％式％（２） （式中Ｒ１はＴ、ｈｒ　（Ｖ　’　）、Ｓｅｒ（Ｖ’）
　、Ｌｅｕ　ｓ　Ｉｌｅ　、。

Ｖａｌ　ｓ　Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｌ又はＡｌａ　（式中ｖ１
はＴｈｒ又はＳｅｒの水酸基の保護基である）であり、
Ｒｌｚは先に定義したＲ１と同じもノテあり、Ｒ１３は
Ａｓｐ（Ｖ”）、Ｄ−Ａｓｐ（Ｖす、Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ
（Ｖ”）、Ａｓｐ（ＮＭｅｚ）　、Ａｓｎ　５Ｇｌｕ（
Ｖ”）　、Ｇｌｎ　、　Ｌｅｕ　Ｎ　Ｉｌｅ　、　Ｖａ
ｌ　、、　Ａｌａ　、、Ｇｌｙ又はＰｈｅ　Ｃ式中ｖ８
は付記したアミノ酸残基のω−カルボキシル基の保護基
である）であり、Ｒ′４はＡｌａ、　Ｄ−Ａｌａ　ｓ　
Ｖａｔ　％　Ｉｌｅ　５Ｌｅｕ　ｓ　Ａｓｐ（Ｖ”）、
又はＧｌｕ（Ｖ”）　（式中ｖ２は先に定義したものと
同様である）であり、ＲｌｓはＡｓｐ（Ｖつ、Ｄ−Ａｓ
ｐ（Ｖ”）、Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ（Ｖ”）、Ｇｌｕ（Ｖ”
）　、Ｄ−Ｇｌｕ（Ｖ”）又はＮ−Ｍｅ−Ｇｌｕ（Ｖ”
）　　（Ｖ”は先に定義したものと同様である）であり
、Ｒ１＆は先に定義したＲ６と同じものであり、ｙｌは
Ｕ−Ｐｈｅ、デサミノＰｈｅｓｃ低級アルカノイル）−
Ｐｈｅ、　Ｕ−ｐ−ハロＰｈｅ、（低級アルカノイル）
−ｐ−ハロＰｈｅ　、、Ｕ−Ｔｙｒ（ν３）デサミノ−
Ｔｙｒ（Ｖジ又は（低級アルカノイル）　−Ｔｙｒ（Ｖ
’）　（式中Ｕはαアミノ基保護基及びｖ３はＴｙｒの
水酸基の保護基である）であるか又はソ１はデカペプチ
ドｆ５　Ｗ’−Ｖａｌ−Ｒ１フーＳｅｒ−（Ｖ’）−Ｒ
”−Ｒ”−Ｔｈｒ（Ｖ’）−Ｇｌｕ（Ｖリ−Ｒｔｏ−Ｓ
ｅｒ（Ｖ’）−Ｐｈｅ　（式中ｙｌ及びＶ：は先に定義
したものであり、賀諺はα−アミノ保！Ｉ！基又は低級
アルカノイル基であり、Ｒ１″はＭｅｔＳＭｅｔ（０）
又はＩｌｅであり、Ｒ１１はＳｅｒ（Ｖ’）又は八ｓｎ
　（式中ｖ１　は先に定義したものである）であり、Ｒ
′９はＰｒｏ又はＳｅｒ　（Ｖ　’　）（式中ｖ′は先
に定義したものである）であり、かつＲｏはＡｓｎ又は
Ｇｌｎである）であるか又はＹｌは先に定義したデカペ
プチド基の断片（式中１１４１Ｈ＋ｔ　、Ｒ１１、Ｒ１
９及びＲ”は先に定義シタもノテあり、かつ先に定義し
たデカペプチド基のアミノ末端から、第１番目から第９
番目のアミノ酸残基（すなわちＶａｌからＳｅｒ（Ｖ’
））が連続的に欠失している）であり、かつｚｌ　は従
来のカルボキシル保！ｉ！基又は樹脂サポートである）
の保護ペプチドを得た後、その一般式（２）の保護ペプ
チドを脱保護（樹脂サポートを用いた場合はその切り離
しも含めて）し、かつ必要な場合はアシル化及び、又は
アミド化して一般式（１）の対応するペプチドを得るか
、また望ましい場合は一般式（１）のペプチドを医薬的
に許容し得る塩に転換することを含む方法により合成し
得る。

Ｚｌに関してここで用いている“樹脂サポート”という
語は固相ペプチド合成で使用するタイプの固相樹脂サポ
ートから誘導される官能基を意味している。このような
樹脂サポートにはよく知られているクロロメチル化樹脂
やベンズヒドリルアミン樹脂と同様に、樹脂とペプチド
−樹脂システムの最初のアミノ酸ブロック間にスペーサ
ーを提供し、その結果ペプチド部分合成後その樹脂をそ
のシステムから選択的に切り離し得る樹脂が含まれる。

スペーサーを組込んだ樹脂の例にはα−（フェニルアセ
トアミド）ベンジル樹脂（ＰＡＢ樹脂）（Ｅ、ギラルト
（Ｇｉｒａｌｔ）等、テトラヘドロン（Ｔｅｔｒａｈｅ
ｄｒｏｎ）、釘、２００７（１９８１））及び４−（２
−ブロモ−又は４−（２−クロロ−プロピオニル）フェ
ノキシアセチルＢＨＡ樹脂、光感受性樹脂（Ｄ、ベロフ
（Ｂｅｌｌｏｆ）及びＨ，ミュータ−（Ｍｕｔｔｅｒ）
、ケミア（Ｃｈｅｍｉａ）、皿、３１７　（１９８５）
　）がある。

側鎖保ｉｌ！基の例にはＴｈｒ又はＳｅｒの水酸基に対
する保護基（Ｖ　’　）としてベンジル基、Ａｓｐ又は
Ｇｌｕ及びそれらの関連する誘４体のω−カルボキシ基
に対する保護基（Ｖりとしてベンジル基、２．６−ジク
ロロベンジル基又は好ましくはシクロヘキシル基及びＴ
ｙｒの水酸基に対する保護基（ｖ３）としてベンジル基
又は好ましくは２．６−ジクロロベンジル基がある。一
般式（２）の保護ペプチドのＲ１Ｒ２がＴｈｒ（ＯＢｚ
ｌ）である時、そのベンジル基は２つの働き、すなわち
ＲＩがＴｈｒ（ＯＢｚｌ）である一般式（１）の最終産
物中対応する官能基の起源の役割もしくは保護基として
の役割を果し得ることに注目せよ。

ベンジル基が官能基の起源として用いられるとき、もし
存在する場合一般式（２）の保護ペプチドの保護基は従
来法により、ベンジルの存在下選択的に除去し得る。

Ｃ末端カルボキシル保護基の例には例えばベンジロキシ
基及び４−ニトロフェノキシ基など従来の官能が含まれ
、また本方法の場合は“樹脂サポート“も含まれる。

はとんどの固相法の態様において、Ｚが水酸基である一
般式（１）のペプチドの合成は、カルボキシル末端の第
１番目のアミノ酸（α−アミノ基保護基及び必要な場合
は側鎖保護基を有するアミノ酸）をフン化カリウム又は
塩化セシウムの存在下、ＰＡＢ樹脂と結合して、第１番
目のアミノ酸（保護型）を有する固体樹脂サポートを作
ることにより始める０次のステップは組込まれたアミノ
酸のα−アミノ保護基を除去して遊離したα−アミノ基
を得ることである。α−アミノ保護基がｔ−ブチロキシ
カルボニル基の場合、脱保護には塩化メチレン又はクロ
ロホルム中のトリフルオロ酢酸又はジオキサン中の塩酸
が用いられる。この脱保護は約０℃及び室温の間の温度
で行う、特異的α−アミノ保護基の除去の他の標準切断
試薬及び条件はＥ、シュレーダー（Ｓｃｈｒ６ｄｅｒ）
及びに、ルブケ（Ｌ’ｕｂｋｅ）（１ペプチド”、第１
巻、アカデミツクブレス版、ニューヨーク、１９６５年
、ｐｐ７２−７５）により叩告されている。最後に述べ
た中間体からのα−アミノ保護基除去後、残りのα−ア
ミノ保護アミノ酸（必要な場合は側鎖保護したもの）を
望ましい順に段階的に結合してＰＡＢ樹脂に結合した一
般式（２）の保護ペプチドを得る。各保護アミノ酸は反
応系に１〜４倍過剰ｔｉ入し、かつ結合は塩化メチレン
、ジメチルホルムアミド又はジメチルホルムアミド及び
塩化メチレン混合物の溶媒中結合剤（１〜３倍過剰量）
を用いて行う。不完全な結合が起きた場合、この結合掻
作を次の保護アミノ酸の結合前のα−アミノ保護基除去
前に繰り返す０合成各段階における結合反応の進行はＥ
、カイザー（Ｋａｉｓｅｒ）等（アナリティ力ルバイオ
ケミストリ−（Ａｎａｌ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、）　Ｈ，
５９５（１９７０））により報告されているニンヒドリ
ン反応によりモニターする。

その後生成した一般式（２）の保護ペプチドは液体フッ
化素で処理することにより同時に樹脂から切り離され、
かつ脱保護され、Ｚが水酸基である一般式（１）の相当
するペプチドを得る。

一般式（１）のＣ末端−級アミド（Ｚ−ＮＨりの合成が
望まれる場合、このペプチドはベンズヒドリルアミン樹
脂の使用及びスチュワート（Ｓｔｅｗａｒｔ）及びヤン
グ（Ｙｏｕｎｇ）　　（上述）により報告されているよ
うな方法に従がい、この過程に生成した樹脂結合ペプチ
ドの切断及び必要とされる脱保護を組込んだ固相法によ
り合成し得る。

別に、生成したＣ末端−級アミドと同様に対応する二級
及び３級アミド（すなわちＺがそれぞれ低級アルキルア
ミノ基又はジ（低級アルキル）アミノ基である一般式（
１）のペプチド）を合成する簡便かつ実用的方法には樹
脂サポートとして働く光感受性樹脂を用いた固相法が含
まれる０例えば先に示した４−（２−クロロプロピオニ
ル）フェノキシアセチルＢＨＡ樹脂への適当なアミノ酸
残基の段階的結合によりＺｌが４−（２−オクソブロビ
オニル）フェノキシアセチルＢＨＡ樹脂である一般式（
２）の保護ペプチドが得られる。最終的ペプチド−樹脂
のサスペンション又は溶液の光分解（３５０ｎｍ、　０
℃、６〜２４時間）によりＺが水酸基である一般式（２
）の対応する保護ペプチドが得られる。この保護ペプチ
ドと、ベンジルアミン又はメチルアミン又はエチルアミ
ン等の適当な低級アルキルアミン又はジメチルアミン又
はエチルメチルアミン等の適当なジ（低級アルキル）ア
ミンとの結合により、Ｚｌはベンジルアミノ基、低級ア
ルキルアミノ基又はジ（低級アルキル）アミノ基である
一般式（２）の対応する保護ペプチドが得られる０例え
ばフン化水素酸によるこのペプチドの脱保護により一般
式（１）の対応するＣ末端−級、二級又は三級アミドが
得られる。

一般式１のペプチドの末端アミノ基アシル化誘導体、例
えば、Ｙが（低級アルカノイル）　−Ｐｈｅ又は（低級
アルカノイル）−Ｔｙｒであるか又はＷが低級アルカノ
イル基であるデカペプチド又はその断片である一般式（
１）のペプチドが適当なアシル化剤、すなわち例えばジ
イソプロピルエチルアミン又はＮ−メチルモルホリン存
在下の１−オクソブチルクロライド等、強力な有機塩基
存在下での適当な酸クロライド又は酸無水物による処理
を用い対応する遊離Ｎ末端アミノ基を存するペプチドか
ら得られる。別に、末端アミノ基アシル化誘導体は適当
なＮα−アシル化アミノ酸残基を用い従来法により本ペ
プチドを合成することによっても得られる。また別に末
端アミノ基アシル化誘導体は対応する遊離したＮ末端ア
ミノ基を有するペプチド−樹脂（側鎖を保護したもの）
を結合剤存在下（すなわち好ましくは（ベンゾトリアゾ
ール−１−イロキシ）トリス−（ジメチルアミノ）ホス
ホニウムへキサフルオロホスフェート単独又は１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾールと合せて）、等モル量の適当
な低級アルカン酸と結合させ、ついで従来の脱保護を行
うことにより得られる。

本発明の一般式（１）のペプチドは医薬的に許容し得る
塩の形でも得られる。

特定ペプチドが塩基として働く残基を有する場合、これ
らの塩の例としては例えば酢酸、乳酸、コハク酸、安息
香酸、サリチル酸、メタンスルホン酸又はｐ−）ルエン
スルホン酸及びタンニン酸又はカルボキシメチルセルロ
ースなどの高分子酸などの存機酸との塩又はハロゲン化
水素酸又は硫酸リン酸などの無機酸との塩が含まれる。

望ましい場合、特定な酸付加塩はＲ，Ａ、ボアソナス（
Ｂｏｉｓｓｎｎａｓ）等（ヘルプ・キム・アクタ（Ｈｅ
ｌｖ。

ＣｈｉＩｌ、　Ａｃｔａ）　Ｑ、１８４９　（１９６０
）　）により報告されている方法で適当なイオン交換樹
脂により処理することにより無毒の医薬的に許容し得る
塩など別の酸付加塩に転換する。

特定のペプチドが遊離したカルボキシ基を１つ以上有す
る場合、それらの塩の例には、ナトリウム、カリウム又
はカルシウムカチオンとの塩又は例えばトリエチルアミ
ン又はＮ−メチルモルホリンなどの強力な有機塩基との
塩が含まれる。

一般に一般式（１）のペプチドの医薬的に許容し得る塩
はそのペプチド自体と生物学的に等価である。

（生物学的特性） −Ｓ弐（１１のペプチド又は医薬的に許容し得るその塩
のＲＲ阻害性及び抗腫瘍性は生化学的及び生物学的手法
で示し得る。例えばＨ，Ｌ、エルフォード（Ｅｌｆｏｒ
ｄ）　等、アドバーンス・イン・エンザイム・レギュレ
ーション（Ａｄｖ、　Ｅｎｚ、　Ｒｅｇ、）１エ、１５
１　　（１９８１）参照、以後に示す例で示すヒトＲＲ
に関する一般式（１）の例示的ペプチドのＲＲ阻害効果
は“ヒトのりポヌクレオチドリダクターゼ検定の阻害”
に示されており、その手法はＥ。

Ａ、ローエン（Ｃｏｈｅｎ）　（ジャーナル・オブ・ジ
ェネラル・ピロロジー（Ｊ、　Ｇｅｎ、　Ｖｉｒｏｌ、
）　　６６．７３３　　（１９８５））及びエルフォー
ド（Ｅｌｆｏｒｄ）等（上述）によって報告されている
同様の検定法に基づいている。

後者の検定法が他の哺乳類のＲＲ及び細菌及びウィルス
起源のＲＲについて行なわれた時、哺乳類ＲＲの選択的
阻害が示された事は注目に値する。

哺乳類ＲＲを選択的に阻害する一般式（１１のペプチド
の能力は、例えば腫瘍（良性及び悪性を含めて）及び乾
留において起こる異常は細胞増殖を治療する薬剤として
有効である。

実験質において、該ペプチドの抗腫瘍効果は腫瘍を移植
したロープントを用いたテストで示し得る。生存時間又
は腫瘍細胞増殖が評価パラメータとして用いられる。こ
れら移植可能な腫瘍の例にはリンパ球白血病、結腸がん
、乳がん、色素がん及び上衣芽細胞がんがある。その方
法はいくつかの出版物に報告されている。例えばＲ，１
，ゲラン（Ｇｅｒａｎ）等、キャンサー・ケモセラビー
・レポート（Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ
　Ｒｅｐｏｒ２）、バートＪ１主、１−１０３　（１９
７２）及びその参照文献参照。

本発明のペプチド又は医薬的に許容し得るその塩を異常
細胞増殖に関連する病気の治療に用いる薬剤として用い
る場合それらは混血動物、例えばヒト、犬、馬などに医
薬的に許容し得るキャリヤーと共に局所的又は全身的に
投与される。そのキャリヤーとの割合はペプチドの溶解
性及び化学的性質、選択された投与経路及び標準的な生
物学的習慣により決定される。例えば乾留の治療に対し
、一般式（１）のペプチドは局所的に使用される。局所
的に使用する場合、ペプチドは１．０〜１０パーセント
、好ましくは２〜５％の濃度で医薬的に許容し得る担体
中に含まれるような溶液、クリーム又はローションの形
にし、その体の感染部分に局所的に投与される。

全身投与の場合、一般式（１）のペプチドは医薬的に許
容し得る担体又はキャリヤーと共に静脈、皮下又は筋肉
注射により投与される。注射による投与の場合、等張性
を保つのに十分な量の医薬ｎ生に許容し得る塩又はグリ
コースと同時に、バッファ又は防腐剤のような他の溶質
を含む無菌水性担体中の溶液としてそのペプチドを用い
ることが望ましい。

適当な賦形剤又はキャリヤーの例は、標準的医薬書、例
えば“レミントン医薬科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰ
ｈａｒｍａｃｅｎｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ）　”
第１６編、マツク出版社版、イーストン、ペンシルバニ
ア、ＵＳＡ。

１９８０年などに見られる。

ペプチドの投与量は投与形や選択した特定の化合物によ
って異なる。さらに治療する特定の宿主によっても異な
る。−最に治療はその化合物の主通投与量よりも実質的
に少ない量で開始する。その後その状況下で至適効果に
達するまで投与量を徐々に増していく。−最に本発明の
ペプチドは、有毒な副作用を起こさず効果的な結果を示
す濃度で投与されるのが最も望ましい。

抗腫瘍剤として全身的に用いる場合、−Ｓ式（１）のペ
プチドは先に述べた種々のケースがあるが一般に１日当
り体重１キログラム当り１００μｇ〜１０００μｇ投与
される。しかし、１日当り体重１キログラム当り約１０
０μｇから５００μｇの投与範囲が効果的結果を達成す
るのに使用される。

以下の例は本発明を説明するものである。溶液のパーセ
ント又は比率は他言しないかぎり体積／体積で示しであ
る０例中で用いている略号には、Ｂｏｃ：ｔ−ブチロキ
シカルボニル；Ｂｏｐ：（ペン／’　ｌ−ＩＪアゾール
−１−イロキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウ
ムへキサフルオロホスフェート；Ｂｚｌ：ベンジル；　
ｃｏｚｃｈ　：塩化メチレン；　Ｃｈｘｌ　ニジクロヘ
キシル；　２．６−ＤｉＣＩＢｚｌ：２．６−シクロロ
ヘンジル；　ＤＣＣ：Ｎ、Ｎ”−ジシクロヘキシルカル
ボンジイミドＨＤＭＦニジメチルホルムアミド；ＨＦ：
フッ化水素酸；　Ｅｔ、Ｏニジエチルエーテル；　Ｅｔ
ＯＨ：エタノールｉ　）ＩＯＢＴ　：　１−ヒドロキシ
−ベンゾトリアゾール；ＭｅＯＨ：　メタノール；ＴＦ
Ａ：）リフルオロ酢酸、がある。

例Ｉ Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＣＩ、−ＰＡＢ樹脂の合成りｏｃ−Ｐ
ｈｅ−ＯＨ（２９，７ｇ　、　　１１２　ｍｍｏｌ）及
び７′７化カリウム（１５，７ｇ　、　２５２ｍｍｏｌ
）をＯＭＦ　（６００−）中のα−（４−クロロメチル
フェニルアセトアミド）ベンジルコポリ　（スチレン−
１％ジビニルベンゼン）樹脂（５０ｇ、　２８ｍａ＋ｏ
ｌ　（ギラルト（Ｇｉｒａｌｔ）等により報告されてい
る、上述）を含む溶液中に機械的攪拌を行ないながら添
加する。この混合物を７０℃で２４時間攪拌した後、室
温まで冷やす、固形物を濾過により収穫後、ＤＭＦ、　
Ｈ，０（１：　１）　、ＨｌＯ、ＨｚＯ−ジオキサン（
１：　１）、ジオキサン、Ｍｅ叶、ＣＩ（２ＣＩ□及び
Ｅ　［０８の順に各々１００−を用いて洗浄し、ついで
減圧下で乾燥して表題化合物５４．４　ｇを得る。生成
物のフェニルアラニン含量は、Ｂ、Ｓ、ギシン（Ｇｉｓ
ｉｎ）　（アナリティカル・キミカ・アクタ（Ａｎａｌ
、Ｃｈｉｍ、Ａｃｔａ、）′■、２４８　　（１９７２
）の方法に従かい部分標本の脱保護及びピクリン酸滴定
による測定から０、５４　ｍｎ＋ｏｌ／ｇであった。

例２ 式ＡｃＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｓ
ｐ−Ｐｈｅ−ＯＨのＮ−アセチル−へブタペプチドの合
成 この表題化合物は、Ｒ，Ｂ、メリフィールド（Ｍｅｒｒ
ｉｆｉｅｌｄ）　（ジャーナル・オプ・アメリカン・ケ
ミカル・ソサイアテ４−（Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｍ
、　Ｓｏｃ、）８５．２１４９　　（１９６３））の固
相法の修正法を用いて合成した。この方法を用い、正し
いアミノ酸残基配列を有する保護へブタペプチド−樹脂
を例の表題化合物であるＢｏａ−Ｐｈｅ−ＣＨｚ−ＰＡ
Ｂ樹脂にアミノ酸残基を段階的に付加することにより合
成する。以下の操作を用いた。（ａ）　Ｂｏｃ−脱保護
；３０％１’ＦＡ／ＣＨ２ＣＩ□（２回、最初５分、つ
いで２５分）（ｂ）洗浄；　Ｃ）Ｉ２Ｃ１２（２分３回
）　　；　（ｃ）　＆浄；イソプロパツール（２分）；
（ｄ）中和；５％ジイソプロピルエチルアミン／ＣＨ２
Ｃｌ２（各２分２回）；（ｅ）アミノ酸結合；ｐ、ハド
ソン（Ｈｕｄｓｏｎ）　（ジャーナル・第１・オーガニ
ック・ケミストリー（Ｊ。

Ｄｒｇ、　Ｃｈｅｍ、　）　５３．６１７　（１９８８
））の方法に従がい、ＣＨ２Ｃｌ□又はＤＭＦ中Ｎ−メ
チルモルホリン（反応混合物をρ１１８にするため６〜
８モル等量）の存在下、適当な保護アミノ酸（Ｂｏｃ−
Ｐｈｅ−ＣＨ２−ＰＡＢ樹脂ｍｍｏｌ当り２．１モル等
り及びＢＯＰ−ＨＯＯＴ　（Ｂｏｃ−Ｐｈａ−ＣＨｚ−
ＰＡＢ樹脂ｍｍｏｌ当り各々２．２及び１．１モル等量
）を用いて行った。結合反応時間は３〜５ｈの間で変化
させた。（ｆ）洗浄；ＣＬＣｌｉ又はＤＭＦ　（各２分
２回）。Ｇｌｎ及びＡｓｎ残基はＤＣＣ−ＨＯＯＴによ
る対応する５ａｃ−アミノ酸の活性化及び活性化過程に
生成したＮ、　Ｎ’−ジシクロヘキシル尿素の濾過によ
る除去後ＤＭＦ中で結合させた。

Ｂｏａ基は全てのアミノ酸に対してＮα保護を行う。側
鎖保護は以下のように行った。Ｔｈｒ及びＳｅｒに対し
てはＢｚｌ、　Ａｓｐ及びＧｌｕに対してはＣｈｘｌ及
びＴｙｒに対しては２＋　６−ＤｉｃｌＢｚｌを用いた
。

各結合の後、その反応はニンヒドリンテスト（Ｅ。

カイザー（Ｋａｉｓｅｒ）等、アナリティカルバイオケ
ミストリ−（Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、）　３４．５
９５（１９７０））でチエツクした。Ｎ未満アセチル化
は遊離したＮ未満アミノ基を有する保護ペプチド−樹脂
をＢｏｐ−ＨＯＯＴ法を用いて等モルの酢酸と結合させ
るが、又はＣＨｚＣｌ、又はＤＭＦ中ジビジイソプロピ
ルエチルアミン在下酢酸無水物と結合させることにより
行なった。

ペプチド配列が完成した後、保護へブタペプチド−樹脂
を濾過して集め、ＣＨｚＣｌｚ及びＥｔＯＨで洗浄して
から減圧上五酸化リン上で２４時間乾燥させ保護へブタ
ペプチド−樹脂（すなわちペプチド−樹脂）を得る。こ
のヘプタペプチドは蒸留したアニソール（ペプチド−樹
脂１ｇ当り１ｍ１）及びエタンジオール（ペプチド−樹
脂１ｇ当り０．２ｍ１）存在下、ＨＦ（ペプチド−樹脂
１ｇ当り５ｍ１）を用いてペプチド−樹脂から切り出し
た。この混合物を激しく攪拌しながら一２０℃に４０分
間及び０〜５℃に４０分間維持した。ＨＦをエバポレー
ション後その残金をＥＬｔＯで分散させた。この混合物
を珪藻土（セライト０）で濾過した。　ＥｔｚＯで洗浄
後、その濾過固形物を減圧下で乾燥した。残金を１０％
酢酸で何回か洗浄後０．１　Ｍ　Ｎ）１．ＯＮ水溶液（
ペプチド−樹脂１ｇ当り総容積４０ｍりで洗浄した。全
ての濾液を０℃（ｐ）Ｉ　６　）で混合し、乾結乾燥に
より白色固体を得た。

この固体はＵｖ検出器を装備し、ワンドマンパーティシ
ル＠１００ＤＳ−３Ｇ−１８カラム（２，２×５０ｄ、
１０ミクロン粒径）を用いたウォーターズモデル６００
マルチソルベントデリバリ−システム（ウォーターズ、
ミルフォード、ＭＡ、　ＵＳ八）を使用した逆相）ＩＰ
ＬＣにより９５％以上の純度まで精製した。溶出には以
下に示すような０．１％ＴＦＡ水溶中のア七ト二トリル
の勾配を用いた；ａ）開始二０．１％ＴＦＡ中ｌＯ％ア
セトニトリル、２０分間。

ｂ）２０分間にわたり、２０％アセトニトリルとなるよ
うに徐々にアセトニトリル濃度を増加していき、次の５
０分間にわたってさらに４０％アセトニトリルとなるよ
う徐々に増加していった。

分析用ＨＰＬＣで確認された純粋な両分を合せ、凍結乾
燥によりトリフルオロ酢酸塩として表題化合物を得た。

この生成物は分析ＨＰＬＣにより少なくとも９５％の純
度であることが示された。アミノ酸分析：　Ｐｈｅ　、
２．００　；　Ａｓｐ　、２．０６　；Ｔｈｒ　、０．
９５　；Ｌｅｕ。

０、９９　；　Ａｌａ　、１．ＯＯ；　ＦＡＢ−ＭＳ、
理論値：８６９．３８、実験値：　８７０　（Ｍ＋Ｈ）
、８９２　（Ｍ　＋Ｎａ）、他。

例３ ヒトのりボヌクレオチドリダクターゼの阻害１）活性Ｒ
Ｒを含む抽出物の調製 ａ）細胞系列：ヘラ（ＨｅＬａ）細胞（八ＴＣＣＣＣＬ
　２．２）、ヒト上皮様細胞がん腫、子宮頚部。

ｂ）細胞培養：細胞は熱失活させたウシ胎児血清１０％
（体積）（ギブコカナダ社）、１ミリモルフ１１　度（
ｍ　Ｍ　）　　ピルビン酸ナトリウム、１００ユニツト
／１ｎ！ペニシリンＧ、１００μｇ／−ストレプトマイ
シン及び２　ｍＭ　Ｌ−グルタミンを補ったイスコブ（
Ｉｓｃｏｖｅ）修正ダルベツコ培地（ｐＨ７、２〜７．
４　）（ギブコ　カナダ社、バーリントン、ＯＮ、カナ
ダ）からなる培地中でインキュベートした。インキュベ
ーションは１Ｎスピナ一フラスコ中５％ＣＯ，−空気雰
囲気下３°Ｆで行った。細胞含有培地（培養容積の７５
％）を２４〜４８時間間隔で断続的に抜き取った。新鮮
な培地を各時点で添加し、抜き取った培地と置換した。

収穫時の最終的細胞密度は１〜２Ｘ１０’細胞／−であ
った。

Ｃ）ヒトのりボヌクレオチドリダクターゼ（ｈｌＴＲ）
を含む細胞抽出物の調製 上述のように得られた培養培地収穫物を低速遠心した。

生成した細胞ベレットに対し以下の操作を行った（全て
のステップは他言しない限り４℃で行った）。

ステップ １）洗浄バッファ　０．９％（Ｗ／Ｖ）塩化ナトリウム
溶液中１００　ｍＭ　Ｋ１１ｚＰＯ４／ＫｚｌｌＰＯ。

（ｐＨ７，２）。

２）保存 ３）抽出バッファ ４）！ｌｉｔ胞分散 ５）遠心 ６）沈殿化 抽出まで一８０℃で細胞凍結。

２５ｍＭＮ−２−ヒドロキシエ チルピペラジン−Ｎ’−２−エ タンスルホン酸ＣＩＩＥＰＥｓ）バッ フｙ　（ｐＨ７，６）　、２ｍＭ０Ｌ−ジチオスレイト
ール（ＤＴＴ）及び １　ｍＭ　　ＭｇＣｈ。

４℃、３０分間抽出バッファ 中に細胞を保持した後、ボッ ク−・エルベヘムホモジナイ ザ−（Ｐｏｔｔｅｒ　−ＥｌｖｅｈｊｅｍＨｏｍｏｇｅ
ｎｉｚｅｒ）　（コンテスゲラス社、パインランド、Ｎ
Ｊ。

ＵＳＡ）　　（２０ストローク） で処理した。

４０．０００Ｘｇ、６０分間、 上清回収。

上清に５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、　５ｍＭＤＴＴ　、　５
ｍＭ　　ＭｇＣｌ溶液中５％（Ｗ／Ｖ）ストレプトマイ
シン ７）遠心 ８）沈殿化 ９）遠心 １０）溶解 １１）透析 硫酸塩溶液を滴下して最終ス トレプトマイシン硫酸塩濃度 を１％（Ｗ／Ｖ）とした。

４０．０００Ｘｇ、６０分間、 上滑回収。

上清にＩ（ＥＰＥＳ／ＤＴＴ／ＭｇＣｈバッファ（ステ
ップ６参照）の （ＮＨ４）　ｚｓＯ＜飽和溶液をゆっくり添加し、５０
％飽和溶液と し、その溶液を３０分間攪拌 した。

４０．０００Ｘｇ、６０分間、 ペレット回収。

ペレットを最小限のＨＥＰＥＳ／ＤＴＴ／ＭｇＣ１ｇバ
ッファ　（ステップ６ 参照）に溶かす。

１０、ＯＯＯＭＷ排除フィルタ ーを装着したマイクロコンセ ントレータ−（セントリコン０ １０．７ミコン社、デンバー ス、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用し ｔｌＥＰＥｓ／ＤＴＴ／ＭｇＣ１ｚ　　（ステップ６参
照）に対し３サイクル （サイクル当り１時間）透析 濾過した。

１２）保存　　　　　−８０℃で凍結。

２）検定操作 （ａｌ標準反応混合物 一腹一一一一立一　　　　　　　−１２）ＩＢＰＥｓバ
ッフｙ　　（ｐＨ７，８）　　　　５０　　　　ｍＭア
デノシン三ゾリン酸　　　　　　４　　　　ｍＦＩＤＴ
Ｔ　　　　　　　　　　　　　　　３０　　　　ｍＭＭ
ｇＣｈ　　　　　　　　　　　　　　１１．５　　　ｍ
ＭＮａＦ　　　　　　　　　　　　　　　４　　　　ｍ
Ｍシチジンニリン酸（ＣＤＰ）　　　　　　０．０５４
　　ｍＭ（”Ｃ）ＣＤＰ　（デュポンケミカル、ラシン
、ＱＣ，カナダ）　　０．１７μＣｉ／ａｆｆｉバシト
ラシン　　　　　　　　　１　　　酵テスト化合物　　
　　　　　　　　１〜２５０μ■＊標準反応混合物中の
成分の最終濃度 （ｂｌ検定操作 ＲＲ活性は放射性標識シチジンニリン酸の放射性標識デ
オキシシチジンニリン酸への転換、すなわち（”Ｃ）Ｃ
ＤＰから（”Ｃ）ｄＣＤＰへの転換を測定することによ
り定量した。検定する細胞抽出物の景は酵素濃度とＣＤ
Ｐ転換に線型応答を与える量を用いた（検定当りおよそ
２００μｇのタンパク質）。

検定混合物に細胞抽出物を添加した後３７℃で３０分イ
ンキュベートした。この反応は検定混合物を含む容器を
沸騰水に４分間浸すことにより停止させた。その後上滑
中のヌクレオチドを過剰ｒ量のクロタラス・アダメンチ
ウム（Ｃｒｏｔａｌｕｓ　ａｄａｍｅｎｔｅｕｓ）蛇毒
（１４ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（
ｐＨ８，８）　、４６．５ｍＭ醜Ｃｔ、水溶液中蛇毒４
０■／−溶液約２０μｌ）を添加し後３７“Ｃに６０分
間インキュベーションしてヌクレオシドに転換した０反
応混合物を含む容器を沸騰水に６分間浸すことにより酵
素反応を停止した。その後、この混合物を卓上遠心機で
１０．００　Ｏｒｐｍ　、５分間遠心した。

上清中のａｄしたヌクレオシド、シチジン（Ｃ）及びデ
オキシシチジン（ｄＣ）をホウ酸処理したポリエチレン
イミン−セルロースプレートラ用いた薄層クロマトグラ
フィーで分離した。５μβのサンプルの溶出にはエタノ
ール／２０ｍＦＸギ酸アンモニウム水溶液（１：　１）
　　（ｐＨ４，７）を用いた。Ｃ及びｄＣとして移動す
る放射能標識の定量は放射能分析装置（ＡＭＢ　Ｉ　Ｓ
システム社、サンディエゴ、ＣＡ、ｔＪｓＡ）を用いて
行った。

基質転換率は次のように計算した。

（１４Ｃ）デオキシシチジン＋（”Ｃ）シチジンリボヌ
クレオチドリダクターゼの単位は上述の条件下１分当り
１ナノモルのＣＤＰを還元する量と定義する。活性は以
下の関係を用いて基質転換率から計算した。

＝　活性単位 ヘラ（ＨｅＬａ）検定の場合の転換因子は０．１０８で
あった。比活性はインキエベーション混合物中のタンパ
ク質■当りの単位として表わされた。１つの態様におけ
るヘラ（ＨｅＬａ）抽出物の比活性は０．２単位／■で
あった。

一般式（１）のペプチドを低い３種の濃度でテストした
。ｔＣｓ。は酵素阻害最大値の５０％阻害を起こすマイ
クロモル濃度（μＭ）で表わしたペプチド濃度であり、
これらは各ペプチドの結果をグラフ化することにより見
積った。

式ＡｃＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｓ
ｐ−Ｐｈｅ−ＯＨで表５される例２のＮ−アセチル−へ
ブタペプチドをこの例の検定法に従ってテストした時、
この化合物のＩＣｓ。測定値は３８μ門であった。

例４ −ａ式（１）のペプチドの例について示した以下の表も
本発明を説明するものである０例２のＮ−アセチル−へ
ブタペプチドについて述べた方法と同様の方法で調製し
たペプチドに関する物理的性質データ及び例３のヒトＲ
Ｒ阻害検定により測定したＩＣ，。値をリストした。

Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｓｐ− Ｐｈｅ−ＯＨ １０７０，５ １０９３” １、　プロトン化親イオン（Ｍ＋１） ２、　　Ｎａ”と会合する親イオン（Ｍ＋２３）例２で
述べられ、また上記表にリストされた一般式（１１のペ
プチドに関するハムスターＲＲの酵素活性阻害能は、ヒ
１−ＲＲ細胞呻出物をハムスターＲＲ抽出物で置き換え
た例３のＲＲ検定法の修正法で示された。後者の抽出物
はコーエン（（ｏｈｅｎ）等（上述）の方法に従がい、
ヒドロキシウレア耐性で選択したチャイニーズハムスタ
ー肺細胞系列の過剰生産株に由来するハムスター６００
Ｈ細胞から調製した。

本発明の範囲内のペプチドのその他の例をヒトＲＲ阻害
検定で測定したＩＣ，。（カッコ内にμＨを示す）値と
共に以下にリストした。

ＡｃＰｈｅ−Ｎ−Ｍｅ−Ｖ耐−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ
−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ（４８）。

ＡｃＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｓｐ
−Ｐｈｅ−ＯＨ（１５０）。

Ｈ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ
−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−ＡＩａ−Ａｓｐ−
Ｐｈｅ−ＯＨ（２９）、及び 本発明の範囲内のその他のペプチドには以下のものが含
まれる。

ＡｃＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｌ
ａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＯＨ（２３）。

ＡｃＰｈｅ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｓｐ
−Ｐｈｅ−ＯＨ。

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式（１）で表わされる化合物又はその医薬的
   に許容しえる塩。 Ｙ−Ｒ＾１−Ｒ＾２−Ｒ＾３−Ｒ＾４−Ｒ＾５−Ｒ＾６
   −Ｚ（１）（式中、Ｒ＾１はＴｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＢｚｌ
   ）、ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａ
   ｌ又はＡｌａであり、Ｒ＾２はＬｅｕ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｎ
   −Ｍｅ−Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｃｈａ、Ｈ
   −Ｍｅ−Ｃｈａ又はＰｈｅであり、Ｒ＾３はＡｓｐ、Ｄ
   −Ａｓｐ、Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ、Ａｓｐ（ＮＭｅ＿２）、
   Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａ
   ｌａ、Ｇｌｙ又はＰｈｅであり、 Ｒ＾４はＡｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ
   、Ａｓｐ又はＧｌｕであり、 Ｒ＾５はＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ、Ｇｌ
   ｕ、Ｄ−Ｇｌｕ又はＮ−Ｍｅ−Ｇｌｕであり、 Ｒ＾６はＰｈｅ、ホモＰｈｅ、又は一般式 Ｘ−ＣＨ＿２ＣＨ（ＮＨ−）ＣＯ−（式中Ｘはシクロヘ
   キシル基、４−（低級アルコキシ）フェニル基又は４−
   ハロフェニル基）で表わされる二価アミノ酸残基であり
   、 ＹはＰｈｅ、デサミノＰｈｅ、（低級アルカノイル）−
   Ｐｈｅ、ｐ−ハロＰｈｅ、（低級アルカノイル）−ｐ−
   ハロＰｈｅ、Ｔｙｒ、デサミノ−Ｔｙｒ又は（低級アル
   カノイル）−Ｔｙｒ、もしくは一般式Ｗ−Ｖａｌ−Ｒ＾
   ７−Ｓｅｒ−Ｒ＾８−Ｒ＾９−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｒ＾１
   ＾０−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ（式中、Ｗは水素又は低級アルカ
   ノイル基であり、Ｒ＾７はＭｅｔ又はＩｌｅであり、Ｒ
   ＾８はＳｅｒまたはＡｓｎであり、Ｒ＾９はＰｒｏ又は
   Ｓｅｒであり、Ｒ＾１＾０はＡｓｎ又はＧｌｎである）
   で表わされるデカペプチド基、もしくはＷ、Ｒ＾７、Ｒ
   ＾８、Ｒ＾９及びＲ＾１＾０が先に定義したものであり
   、かつ該デカペプチドのアミノ末端から１番目から９番
   目のアミノ酸残基（すなわちＶａｌからＳｅｒ）が連続
   して欠失しており、かつＺが水酸基、アミノ基、低級ア
   ルキルアミノ基又はジ（低級アルキル）アミノ基である
   該デカペプチド基の断片である）
2. （２）請求項（１）記載の一般式中、Ｒ＾１からＲ＾６
   までは請求項（１）で定義したものであり、ＹがＰｈｅ
   、デサミノ−Ｐｈｅ、ＡｃＰｈｅ、Ａｃ−ｐ−ハロＰｈ
   ｅ、Ｔｙｒ、デサミノ−Ｔｙｒ又はＡｃＴｙｒであり、
   かつＺが水酸基又はアミノ基である請求項（１）記載の
   ペプチド又は医薬的に許容し得るその塩。
3. （３）請求項（１）記載の一般式中、Ｒ＾１からＲ＾６
   までは請求項（１）で定義したものであり、Ｙが請求項
   （１）記載のデカペプチド基又はその断片であり、かつ
   Ｚが水酸基又はアミノ基である請求項（１）記載のペプ
   チド又は医薬的に許容し得るその塩。
4. （４）一般式（１）中、Ｒ＾１がＴｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＢ
   ｚｌ）、ｓｅｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｌ又
   はＡｌａであり、Ｒ＾２がＬｅｕ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌｅｕ、
   Ｉｌｅ、Ｖａｌ又はＮ−Ｍｅ−Ｃｈａであり、Ｒ＾３が
   Ａｓｐ、Ａｓｐ（ＮＭｅ＿２）、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌ
   ｎ又はＡｌａであり、Ｒ＾４がＡｌａ、Ｖａｌ、Ａｓｐ
   又はＧｌｕであり、Ｒ＾５がＡｓｐ、Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ
   またはＧｌｕであり、Ｒ＾６がＰｈｅ、ホモＰｈｅ又は
   一般式Ｘ−ＣＨ＿２ＣＨ（ＮＨ−）ＣＯ−（式中Ｘはシ
   クロヘキシル基、４−メトキシフェニル基又は４−フル
   オロフェニル基である）で表わされる二価残基であり、
   ＹがＰｈｅ、デサミノＰｈｅ、ＡｃＰｈｅ、Ａｃ−ｐ−
   ＩＰｈｅ、Ｔｙｒ、デサミノＴｙｒ又はＡｃＴｙｒであ
   り、かつＺが水酸基又はアミノ基である請求項（２）記
   載のペプチドもしくは医薬的に許容し得るその塩。
5. （５）一般式（１）中Ｒ＾１がＴｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＢｚ
   ｌ）、Ｓｅｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｌ又は
   Ａｌａであり、Ｒ＾２がＬｅｕ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌｅｕ、Ｉ
   ｌｅ、Ｖａｌ又はＮ−Ｍｅ−Ｃｈａであり、Ｒ＾３がＡ
   ｓｐ、Ａｓｐ（ＮＭｅ＿２）、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ
   又はＡｌａであり、Ｒ＾４がＡｌａ、Ｖａｌ、Ａｓｐ又
   はＧｌｕであり、Ｒ＾５がＡｓｐ、Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐま
   たはＧｌｕであり、Ｒ＾６がＰｈｅ、ホモＰｈｅ又は一
   般式Ｘ−ＣＨ＿２ＣＨ（ＮＨ−）ＣＯ−（式中Ｘはシク
   ロヘキシル基、４−メトキシフェニル基又は４−フルオ
   ロフェニル基である）であり、Ｙが請求項（３）記載の
   デカペプチド又はその断片であり、かつＺが請求項（３
   ）で定義したものである請求項（３）記載のペプチド及
   び医薬的に許容し得るその塩。
6. （６）一般式（１）中、Ｒ＾１が請求項（４）で定義す
   るものであり、Ｒ＾２がＬｅｕ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌｅｕ又は
   Ｎ−Ｍｅ−Ｃｈａであり、Ｒ＾３がＡｓｐ、Ａｓｐ（Ｎ
   −Ｍｅ＿２）、Ａｓｎ、Ｇｌｎ又はＡｌａであり、Ｒ＾
   ４がＡｌａ又はＧｌｕであり、Ｒ＾５がＡｓｐ又はＮ−
   Ｍｅ−Ａｓｐであり、Ｒ＾６がＰｈｅであり、ＹがＰｈ
   ｅ、デサミノＰｈｅ又はＡｃＰｈｅであり、かつＺが水
   酸基である請求項（４）記載のペプチドもしくは医薬的
   に許容し得るその塩。
7. （７）一般式（１）中Ｒ＾１が請求項（５）で定義した
   ものであり、Ｒ＾２がＬｅｕ、Ｎ−Ｍｅ−Ｌｅｕ又はＮ
   −Ｍｅ−Ｃｈａであり、Ｒ＾３がＡｓｐ、Ａｓｐ（Ｎ−
   Ｍｅ＿２）、Ａｓｎ、Ｇｌｎ又はＡｌａであり、Ｒ＾４
   がＡｌａ又はＧｌｕであり、Ｒ＾５がＡｓｐ又はＮ−Ｍ
   ｅ−Ａｓｐであり、Ｒ＾６がＰｈｅであり、ＹがＷが水
   素又はアセチル基であるデカペプチド基又はその断片で
   あり、Ｒ＾７がＭｅｔ又はＩｌｅであり、Ｒ＾８がＳｅ
   ｒ又はＡｓｎであり、Ｒ＾９がＰｒｏ又はＳｅｒであり
   、Ｒ＾１＾０がＡｓｎであり、かつＺが水酸基である請
   求項（５）記載のペプチドもしくは医薬的に許容し得る
   その塩。
8. （８）一般式（１）中、Ｒ＾１がＴｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＢ
   ｚｌ）又はＮ−Ｍｅ−Ｖａｌ、Ｒ＾２がＬｅｕ、Ｎ−Ｍ
   ｅ−Ｌｅｕ又はＰｈｅ、Ｒ＾３がＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、
   Ａｓｐ（ＮＭｅ＿２）、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ又はＰ
   ｈｅ、Ｒ＾４がＡｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｖａｌ又はＧｌｕ
   、Ｒ＾５がＡｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ又はＮ−Ｍｅ−Ａｓｐ、
   Ｒ＾６がＰｈｅ又はホモＰｈｅ、ＹがＰｈｅ、Ａｃ−Ｐ
   ｈｅ、 Ｈ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ
   −Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ、Ｈ−Ａｓｎ−Ｓｅ
   ｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ、Ｈ−Ｔ
   ｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ、ＡｃＴｈｒ−
   Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ、ＡｃＡｓｎ−Ｓｅｒ
   −Ｐｈｅ、 Ｈ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ
   、Ｈ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅ
   ｒ−Ｐｈｅ、又はＨ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ
   −Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ、Ｚが水酸基である
   請求項（１）記載のペプチドもしくは医薬的に許容され
   るその塩。
9. （９）一般式（１）中、ＹがＡｃＰｈｅ、Ｒ＾１がＴｈ
   ｒ、Ｔｈｒ（ＯＢｚｌ）又はＮ−Ｍｅ−Ｖａｌ、Ｒ＾２
   がＬｅｕ又はＮ−Ｍｅ−Ｌｅｕ、Ｒ＾３がＡｓｐ又はＡ
   ｓｎ、Ｒ＾４がＡｌａ、Ｖａｌ又はＧｌｕ、Ｒ＾５がＡ
   ｓｐ又はＮ−Ｍｅ−Ａｓｐ、Ｒ＾５がＰｈｅである請求
   項（８）記載のペプチド。
10. （１０）請求項（１）記載の一般式（１）で表わされる
    ペプチドで、 【遺伝子配列があります。】 からなる群から選択されるペプチド。
11. （１１）請求項（１）乃至（１０）記載のペプチドもし
    くは医薬的に許容し得るその塩及び医薬的に又は獣医学
    的に許容し得るキャリヤーを含む医薬組成物。
12. （１２）抗新生物又は抗腫瘍剤として使用する医薬製造
    に関する請求項（１）乃至（１１）記載のペプチド又は
    組成物の使用。
13. （１３）哺乳類のリボヌクレオチドリダクターゼインヒ
    ビターとして使用する医薬製造に関する請求項（１）乃
    至（１１）記載のペプチド又は組成物の使用。
14. （１４）請求項（１）記載の一般式（１）で表わされる
    ペプチドの製造法で、一般式（２） Ｙ＾１−Ｒ＾１＾１−Ｒ＾１＾２−Ｒ＾１＾３−Ｒ＾１
    ＾４−Ｒ＾１＾５−Ｒ＾１＾６−Ｚ＾１（２）（式中、
    Ｒ＾１＾１はＴｈｒ（Ｖ＾１）、Ｓｅｒ（Ｖ＾１）、Ｌ
    ｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｌ又はＡｌａ（
    式中Ｖ＾１はＴｈｒ又はＳｅｒの水酸基の保護基）であ
    り、Ｒ＾１＾２は請求項（１）記載のＲ＾２と同様に定
    義されるものであり、Ｒ＾１＾３はＡｓｐ（Ｖ＾２）、
    Ｄ−Ａｓｐ（Ｖ＾２）、Ｎ−Ｍｅ−Ａｓｐ（Ｖ＾２）、
    Ａｓｐ（ＮＭｅ＿２）、Ａｓｎ、Ｇｌｕ（Ｖ＾２）、Ｇ
    ｌｎ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ又はＰ
    ｈｅ（Ｖ＾２は該当するアミノ酸残基のω−カルボキシ
    ル基の保護基である）であり、Ｒ＾１＾４はＡｌａ、Ｄ
    −Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ａｓｐ（Ｖ＾２）
    又はＧｌｕ（Ｖ＾２）、（Ｖ＾２は先に定義したもので
    ある）であり、Ｒ＾１＾５はＡｓｐ（Ｖ＾２）、Ｄ−Ａ
    ｓｐ（Ｖ＾２）、Ｈ−Ｍｅ−Ａｓｐ（Ｖ＾２）、Ｇｌｕ
    （Ｖ＾２）、Ｄ−Ｇｌｕ（Ｖ＾２）又はＮ−Ｍｅ−Ｇｌ
    ｕ（Ｖ＾２）（Ｖ＾２は先に定義したものである）であ
    り、Ｒ＾１＾６は請求項（１）記載のＲ＾６と同様に定
    義されるものであり、Ｙ＾１はＵ−Ｐｈｅ、デサミノＰ
    ｈｅ、（低級アルカノイル）Ｐｈｅ、Ｕ−ｐ−ハロＰｈ
    ｅ、（低級アルカノイル）−ｐ−ハロＰｈｅ、Ｕ−Ｔｙ
    ｒ（Ｖ＾３）、デサミノＴｙｒ（Ｖ＾３）又は（低級ア
    ルカノイル）Ｔｙｒ（Ｖ＾３）（Ｕはα−アミノ保護基
    であり、かつＶ＾３はＴｙｒの水酸基の保護基である）
    であるか、又はデカペプチド基Ｗ＾１−Ｖａｌ−Ｒ＾１
    ＾７−Ｓｅｒ（Ｖ＾１）−Ｒ＾１＾８−Ｒ＾１＾９−Ｔ
    ｈｒ（Ｖ＾１）−Ｇｌｕ（Ｖ＾２）−Ｒ＾２＾０−Ｓｅ
    ｒ（Ｖ＾１）−Ｐｈｅ（式中Ｖ＾１及びＶ＾２は先に定
    義したものであり、Ｗ＾１はα−アミノ保護基又は低級
    アルカノイル基であり、Ｒ＾１＾７はＭｅｔ、Ｍｅｔ（
    Ｏ）又はＩｌｅであり、Ｒ＾１＾８はＳｅｒ（Ｖ＾１）
    又はＡｓｎ（式中Ｖ＾１は先に定義したものである）で
    あり、Ｒ＾１＾９はＰｒｏ又はＳｅｒ（Ｖ＾１）（Ｖ＾
    １は先に定義したものである）であり、Ｒ＾２＾０はＡ
    ｓｎ又はＧｌｎである）であるか、又は該デカペプチド
    基中Ｗ＾１、Ｒ＾１＾７、Ｒ＾１＾８、Ｒ＾１＾９及び
    Ｒ＾２＾０は先に定義したものであり、かつ該デカペプ
    チド基のアミノ末端から１番目から９番目のアミノ酸残
    基（すなわちＶａｌからＳｅｒ（Ｖ＾１）が連続して欠
    失してもよい該デカペプチド基の断片であり、かつＺ＾
    １は従来のカルボキシル保護基又は樹脂サポートである
    ）の保護ペプチトの脱保護及び必要な場合は一般式（２
    ）の保護ペプチドのアシル化及び／又はアミド化により
    一般式（１）の対応するペプチドを得ること及び必要な
    場合は一般式（１）のヘプチドを医薬的に許容し得る塩
    に転換することを含む方法。
15. （１５）一般式（２）の保護ペプチド（式中Ｚ＾１はカ
    ルボキシル保護基又は樹脂サポートである）の製造方法
    で、 ｉ）段階的結合完了後、最終的に保護基をはずすまでそ
    の部位に化学反応が起こることを妨ぐためにアミノ酸残
    基又は断片の不安定な側鎖官能基を適当な保護基で保護
    すること、 ｉｉ）結合反応物のα−アミノ基をα−アミノ保護基で
    保護しておき、一方該反応物の遊離したカルボキシル基
    が第２の反応物の遊離したα−アミノ基と結合する（す
    なわち該アミノ基保護基はそのα−アミノ基で引きつづ
    き結合を起し得るように選択的に除去し得るものである
    ）こと、 ｉｉｉ）保護ペプチドのＣ末端官能基となるアミノ酸残
    基又はペプチド断片のアミノ酸残基のＣ末端カルボキシ
    ル基を、適当な保護基で保護し、保護ペプチドの望まし
    いアミノ酸配列が集合するまでその部位で化学反応が起
    こることを妨ぐこと、 以上ｉ）〜ｉｉｉ）のステップを含む、一般式（２）の
    保護ペプチドのアミノ酸配列の順に保護アミノ酸残基又
    はペプチド断片を段階的に結合し請求項（１４）記載の
    一般式（２）の保護ペプチドを得る方法。