JPH02290814A - プソラレン試薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 プソラレンは、一般構造式 の線状三環複素環式化合物である。それは、近紫外線の
存在下で核酸と共有結合を生成する二官能光反応性分子
である。ＤＮＡと反応するプソラレンの能力は、それに
種々の皮膚の障害の治療Ｃ二おける臨床的な重要性を与
え、そして二本鎖のＤＮＡにおける鎖間交叉結合を生成
するその能力１よ、それを核酸の構造及び機能の研究に
おける有用な薬剤にした。

ｌＯ年以上の間、乾廖を有する患者は、経口投与された
プソラレンによって治療されそして引き続いて長波長の
紫外線−Ａ　（ＰＵＶＡ）によって照射されてきた。現
在のところ、経口投与のために商業的に入手できるただ
一つのプソラレンは８ーメトキシプソラレン（８−ＭＯ
Ｐ）である。プソラレンは親油性化合物であり、水中に
はほとんど溶けないので、一つの現在の経口製剤は柔ら
かなゼラチンカプセル中のポリエチレングリコールと混
合された８−ＭＯＰから成る。この投薬形からの８−Ｍ
ＯＰの経口吸収は個人個人の間でかなり変動するので、
ピーク血清プソラレンレベルは、カプセルが投与された
後で早いものでは１時間または遅いものでは４時間で起
きるであろう。被検者は、この投薬形の経口投与の約２
時間後に紫外線一八照射によって旭置される。カプセル
からの８−ＭＯＰの経口吸収が変動するので、投薬後２
時間での３−ＭＯＰの血清レベルは最適でない可能性が
ある。

８−ＭＯＰの血清レベルと感光性とは直接に関連してい
るので、最適に満たない計ＭＯＰ血清レベルは、ＰＵＶ
Ａ療法に対する乏しい応答における一つの要因である可
能性がある。

８−ＭＯＰのための投与のその他のルートも使用されて
きた。米国においては８−ＭＯＰは局所ローションとし
て入手できる。ヨーロッパにおいては８−ＭＯＰは浴（
ｂａｔｈｓ）を用いて局所に塗布されてきた。ＰＵＶＡ
浴は効果的であるが不便であり、そして８−ＭＯＰの局
所吸収は変動して光毒性の応答の予測可能性の欠如をも
たらす。ＰＵＶＡ浴は、かくして、広いアピールを得ら
れなかった。

直腸に投与されたｇ−ＭＯＰに関しては血清レベル及び
感光性はもっと予測可能であるので、良好な治療の応答
を与える。しかしながら、直腸投与の不便さが広範な人
気を妨げがちである。

その他の経口投薬形は、アルコール及び／またはポリエ
チレングリコール中に溶解されたプソラレンの溶液から
成るか、あるいは油一水エマルションであり：あるいは
その中のプソラレンの平均結晶サイズを大幅に減少させ
た半固体カプセル投薬形である。これらの投薬形はＰＵ
ＶＡ療法の一貫性を改良したが、プソラレンの経口投与
の予測不可能性はなおフ才ト７ォレシス療法に対する一
貫しない応答をもたらす。

従って、疾患を軽減するためにプソラレンが紫外線一八
光線療法と関連して使用される時に一貫した結果を提供
するプンラレンの投薬形に対する需要がなお存在する。

本発明を要約すれば、本発明は、紫外線−Ａフ才トフォ
レシス（ｕｌｔｒａｖｏｌｅｔ−Ａ　ｐｈｏｔｏｐｈｏ
ｒｅｓｉｓ）によって治療されている被検者からの血液
への体外的な投与に適した無菌の水溶液を含有して成る
プソラレン試薬組成物を提供する。

本発明は、被検者中に治療の血液レベルを供給するのに
充分なプソラレンの効果的少量、エチルアルコール、プ
ロピレングリコールそして必要に応じて緩衝系の無菌の
水溶液を含有して成るプソラレン試薬組成物であって、
紫外線一Ａ７オト７オレシスによって治療されている被
検者からの血液への体外投与のために適している組成物
に関する。

本発明はまた、被検者中に治療の血液レベルを供給する
のに充分なプソラレンの効果的少量、エチルアルコール
、プロピレングリコールそして必要に応じて緩衝系の無
菌の水溶液を含有して成るプソラレン試薬組成物であっ
て、紫外線一八フォト７才レシスによって治療されてい
る被検者からの血液にこの組成物の単位投与量を体外投
与するために適当な容器中に貯蔵されている組成物に関
する。

本発明はまた、本発明の体外投与されたプンラレン試薬
組成物によって紫外線一八フ才ト７才レシスを受ける被
検者を治療することによって白血球媒介の疾患を軽減す
るための方法に関する。

定勇： ｌ，フォトフォレシスは、血液を被検者から取り出しそ
して白血球と白血球に乏しい部分に分離する体外光線療
法を意味する。赤血球（白血球に乏しい部分）は直ちに
患者に戻しそして白血球に富んだ部分は紫外線エネルギ
ーにさらしてそして患者に戻す。

２．紫外線−Ａは、３，２００〜４．０００オングスト
ローム（人）の範囲の紫外線Ａスペクトルからの光エネ
ルギーを意味する。

３．白血球に富んだとは、それから赤血球及び非白血球
成分が取り除かれた血液の白血球に富んだ部分を意味す
る。

４．白血球媒介状態（　Ｌ　ｅｕｋｏｃｙＬｅ　　ｍｅ
ｄｉａｔｅｄ　　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ）は、プソラレ
ン及び光線療法による白血球機能の処置が結果として疾
患または状態の軽減をもたらす疾患または医学的状態を
意味し、例えば、皮膚−Ｔ細胞リンパ＠（ＣＴＣＬ）、
慢性リンパ球性白血病（Ｃ　Ｌ　Ｌ）、強皮症、全身性
狼癒紅斑（　Ｓ　Ｌ　Ｅ　）　（Ｓｙｓｔｅｍｉｃ　Ｌ
ｕｐｕｓ　Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ）、乾ｇ　（Ｐ
ｓｏｒｉａｓｉｓ）、天庖涜、乾跡関節炎、異所性皮膚
炎、成人のＴ細胞白血病（ＡＴＬ），エイズ（ＡＩＤＳ
）　（　ＡＲＣ）、リウマチ様関節炎、多発性硬化症（
ＭＳ）、心臓移植拒絶反応、臓器例えば腎臓、肝臓など
の移植拒絶反応を含む。

５．被検者は、人間を意味する。

本発明の試薬組成物は、アルコール、プロピレングリコ
ール及び水中に溶解された所望のプソラレンを含む。グ
ソラレン、特に８−ＭＯＰは塩基性溶液中ではより不安
定である傾向があるように見えるので、２〜６のｐＨ範
囲で製剤されたプソラレン溶液が好ましい。しかしなが
ら、このｐＨ範囲の外ｏｐＨ値でのプソラレン溶液もま
た受け入れることができるであろう。溶液は、緩衝剤例
えば酢酸塩、乳酸塩、リン酸塩、安息香酸塩、りんご酸
塩、クエン酸塩、あるいはｐＨを所望の範囲内に維持す
るであろう任意のその他の適当な緩衝剤によって緩衝し
てよいが、酢酸塩が好ましい。

最後のプソラレン溶液は、適当な酸及び／または塩基に
よって所定のｐＨに調節される。この溶液は無菌性を達
成するために濾過される。本発明のプソラレン調合物は
非常に低い濃度のプソラレンしか含まないので、バイア
ルに貯蔵される調合物に栓をするのに使用されるゴム栓
は、プソラレンが栓の上に吸着されたり栓の中に吸収さ
れたりするのを防ぐために並びに栓の成分が溶液中に浸
出するのを防ぐために処理されていることが重要である
。不浸透のフィルムによって処理されｔ；ゴム栓が示唆
される。フッ素樹脂（テフロン）フイルムを有するプチ
ルの栓が好ましい。

本発明の無菌のプソラレン試薬組成物はまた、凍結乾燥
された形でもよい。凍結乾燥は、長期間の間安定に維持
することができる無菌の投薬形を得る優れた方法である
。適当な溶媒中に復元すると、このプソラレン溶液は使
用に適している。本発明による凍結乾燥された調合物に
おいては、この目的のために知られているバルキング剤
（ｂｕｌｋｉｎｇ　ａｇｅｎｔｓ）例えばマニトール、
塩化ナトリウムまたはデキストロースを水中のプソラレ
ン溶液中に溶解させる。ｐＨを好ましい範囲に調節する
ために受け入れられる酸及び塩基を使用し、その後で所
定の容量までの水を添加する。この溶液を濾過しそして
パイアル中に入れ、通常の方法で凍結乾燥し、栓をして
そして密封する。

本調合物溶液中のプソラレンの小量の濃度は所望に応じ
て変動してよい。しかしながら、プソラレンが体外的に
投与される時には、２５〜５００ナノグラム／ｍＱ，も
つとも好ましくは５０〜１００ナノグラム／ｍＱの範囲
の好ましい血液レベルを達成するためには非常に僅かな
量だけが必要とされる。かくして、少量のプソラレンは
、ｌＯｐｇ／　ｍＱ＝　ｌ　ｍ　ｇ　／　ｍｌ２のプソ
ラレンを含む溶液に等しく、もっとも好ましくは２０μ
ｇ／ｍＱの溶液が推奨される。

好ましいプソラレン試薬は、約０．００５〜０，０５ｍ
ｇ／ｄの８−Ｍ　Ｏ　Ｐ　，約０．１−１５％のエチル
アルコール及び約２５〜４００ｍｇ／ｍαのプロピレン
グリコールヲ含ム。

本発明はまた、紫外線−Ａフォトフォレシスによって治
療されている被検者に本組成物の単位投薬量を投与する
のに適した、容器中に貯蔵された無菌の水溶液を含有し
て成るプソラレン試薬組成物に関する。プソラレンの単
位投薬量を投与するために適した容器は、シリンジ、ア
ンプノレまたはバイアルでよく、そしてさらに詳細には
、テフロン化された栓によって貯蔵された耐光性ガラス
バイアル、例えばアンバーバイアルが好ましい。適切な
量の本試薬組成物をアンプルまたはバイアルに添加し、
次にこれをテフロン化された栓によって栓をし、密封し
そして無菌化する。光線療法における所望のプソラレン
の血液レベルを達成するために、プソラレン、特に８−
ＭＯＰの約２０μｇ／ＩＩＩＱ溶液の約１０ｍｌ２を含
む適当なバイアルが好ましい。

８−ＭＯＰが本試薬組成物のために好ましいプソラレン
であるが、その他のプソラレン誘導体も受け入れられる
。８−ＭＯＰは、天然の資源から、即ち、アミ　マユス
　リン（Ａａ＋ｍｉ　Ｍａｊｕｓ　Ｌｉｎｎ）植物の果
実から得ることができる。例えば、゛７アーミイ（Ｆａ
ｈＩＩＩｙ）ら、′結晶性成分、アモイジア（Ａｎ＋＋
ａｏｉｄｉａ）のアミ　マユス　リン．の生薬学的検討
及び単離“、クオンタ．　（Ｑｕａｎｔ．）　Ｊ．ファ
ーム．（Ｐｈａｒ＋ａ．）アンドｙ　７　−？　：Ｉ　
ｏ−（Ｐｈａｒａ＋ａｃｏ１．）、２０：２８１（１９
４８）を参照せよ。加えて、プソラレンのだめの合成方
法が米国特許第４，１３０．５６８号中に述べられてい
る。

本発明による光線療法は、治療されている被検者から血
液を取り出しそして本発明の試薬組成物の効果的な量を
体外的に投与することから成る。

一般に、ｌＯｍＱの２０μｇ／ｍＱ溶液または５０ｍＱ
の２０μｇ／ｍｉ２溶液を含むーまたはそれ以上のバイ
アルが、効果的な光線療法のために必要な血液濃度を提
供するであろう。本組成物は、体からの取り出しの直後
にそして血液を白血球に富んだ及び白血球に乏しい部分
に分離するのに先立って被検者の血液に添加してもよい
し；あるいは本組成物は、照射の直前に白血球に富んだ
部分だけに添加してもよい。好ましくは、フォト７オレ
シスのために取り出される血液中にプソラレンが分布さ
れるのにより多くの時間が取れるように、プソラレンは
血液が被検者から取り出された直後に添加される。

次に、プンラレンを含む患者の血液の白血球に富んだ部
分を、約２，０００〜４，０００人そして好ましくは３
．２００〜４，ＯＯＯＡの範囲の波長の紫外線で照射す
る。プソラレンの効果的な量は、リンパ球核酸に結合す
ることができそして、照射の後で、細胞のＤＮＡの間に
入り込むことができる量から成る。紫外線照射、即ち活
性化に先立っては、プソラレンは、一般に、細胞の化学
にほとんどまたは全く影響を持たない。照射の後で、体
外的に投与されたプソラレンは、細胞の核酸と錯体を作
ってそれらを不活性化し、結果として細胞の代謝の機能
の抑制をもたらすであろう。分かれる能力がないので細
胞の死が起きる。もつとも強い代謝の活動を受ける細胞
は、プソラレンフォト７ォレシスプロセスによってもつ
とも無能化されやすい。

すべて引用によって組み込まれる米国特許４，３２１，
９１９；４，６１２，００７；４，６８３　　８８９；
４，６１３，３２２；及び４，６８４，５２１中に述べ
られた方法は、本発明の試薬組成物が利用されてよい光
線療法のプロセスを説明している。

本発明はまた、本発明の体外的に投与されたプソラレン
試薬組成物によって紫外線−八フォト７オレシスを受け
る被検者を治療することによる白血球媒介の疾患を軽減
する方法に関する。

プソラレンと組み合わせた光線療法は、広い範囲の白血
球媒介の状態を軽減するのに効果的であ６：２９７　（
１９８７）　　；及びサイエンティフィックアメリカン
、１９８８年８月、６８頁参照）。

例えば、ＣＴＣＬ，皮膚損傷において表れるリンパ球媒
介の状態は、８−ＭＯＰ／紫外線−Ａフ才ト７才レシス
療法によって効果的に治療することができる。本発明の
グソラレン試薬組成物（好ましくは８−ＭＯＰ）は、被
検者の血液に、それが取り出された直後にそして血液を
白血球に富んだ及び白血球に乏しい部分に分離するのに
先立って投与してもよい。これは、８−ＭＯＰが血液成
分中に分布されるのにより多くの時間が取れるようにす
る。

次に、この血液を白血球に富んだ及び白血球に乏しい部
分に分離し、そして次に白血球に富んだ部分を紫外線一
Ａエネルギーによって光活性化する。

この光活性化は、８−ＭＯＰを吸収した有核の細胞がＤ
ＮＡらせんの隣合う鎖上の窒素塩基の間の橋かけ結合を
生成するようにせしめる。この橋かけ結合は、異常なリ
ンパ球集団（ｐｏｐｕｌａＬｉｏｎ）の複製を妨げる。

無核の血液成分例えば赤血球はＤＮＡを含まずそしてそ
れ故影響されない。光活性化された橘かけ結合によって
中性化されたリンパ球を含む暴露された血液の部分を患
者に返す。動物実験は、これらの橘かけされた細胞の返
還は免疫性応答を刺激しそして特定のリンパ球の亜集団
（ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）の成長をかなり減らす
ことを示唆する。各々の治療の頻度は、患者の必要に依
存して大きく変動してよい。ある場合には、一週間に三
回の療法が必要であろうし、一方他の場合には、５週間
ごとに二療法で充分であろう。典型的なスケジュールに
おいては、患者は５週間ごとに２日間続けてフ才ト７オ
レシスの治療を受ける。

本発明による７才ト７才レシスの療法に反応するその他
の白血球媒介状態は、ＣＬＬ，強皮症、ＳＬＥ，乾跡、
天庖虐、乾席関節炎、異所性皮膚炎、ＡＴＬ１エイズ（
ＡＲＣ）、リウマチ様関節炎、ＭＳ，または心臓移植拒
絶反応及び臓器例えば腎臓、肝臓などの移植拒絶反応で
ある。これらの場合においては、本発明の試薬組成物は
、患者の血液に体外的に投与される。効果的な治療を確
立するためにはｌＩＩＩＱあたり５０〜１００ナノグラ
ムの血液プソラレン濃度を有することが一般に必要であ
る。しかしながら、ｌｍ（１あたり２５〜５００ナノグ
ラムのようなもっと広い範囲も受け入れられる。

以下の実施例と関連して本発明をさらに詳細に説明する
が、これらの実施例は説明の目的のためだけで述べられ
る。

実施例ｌ ８−ＭＯＰ アルコール、Ｕ　Ｓ　Ｐ　（２００プルー７）プロピレ
ングリコール 注射用水、Ｑ．Ｓ． ０．０２ｍｇ ０．０５ｍ＜１ ５０．００＋ｎｇ １．００ｍ（２ 混合しながらアルコール、Ｕ　Ｓ　Ｐ中Ｊ：８−ＭＯ　
Ｐを添加しそして溶解させる。混合しながらプロピレン
グリコールを添加しそして混入する。特定の容量に持っ
ていくのに充分な注射用水を添加しそして次に均一性を
確保するために混合する。適当な細菌を保持するフィル
ターを通して無菌の受け器中に濾過する。無菌状態で無
菌のパイアル中に満たし、栓をし、密封し、そして末端
を無菌化する。

実施例２ 酢酸塩で緩衝された２０μｇ／ｍＱ８−ＭＯＰ溶液の吋 我々の実験室における研究が、８−ＭＯＰは酸性溶液中
に保持される時に一層安定であろうということを示した
ので、これらの溶液は、３．５〜５．５のＰＨ範囲の緩
衝液を用いて調合された。さらに詳細には、溶液は、３
．５、４．５、５．０及び５．５のｐａｌで調合された
。

Ａ．組成 成分 ８−ＭＯＰ アルコール、Ｕ　Ｓ　Ｐ　（２００プルー７）プロピレ
ングリコール 酢酸 水酸化ナトリウム溶液、ｌＯ％ｗ／ｖ　＊酢酸ナトリウ
ム本本 注射用水 ＩｎＱあたり ０．０２ｍｇ ０．０５ｍ（１ ５０．００ｍｇ Ｏ　．　００１　２ｍｆｆ ｑ．ｓ．　ｐ　Ｈ ｑ．ｓ．ｐＨ ｑ．Ｓ−　１．ＯＯｍＱ ＊ ネネ 水酸化ナトリウム溶液は溶液を５．０または５．５のｐ
Ｈに調節するために使用される。

酢酸ナトリウムは溶液を３．５または４．５のｐＨに調
節するために使用される。

注：水酸化ナトリウム溶液と酢酸ナ−トリウムは同じ調
合物においては合わせられない。

２．混合しながらプロピレングリコールを添加しそして
混入する。

３．最後の容量の約９５％に溶液を持っていくのに充分
な注射用水を添加しそして混合する。

４．酢酸を添加しそして混合する。

５．所望のｐＨを得るのに充分な酢酸ナトリウムまたは
水酸化ナトリウム溶液を混合しながら添加する。

６．最後の容量に持っていくのに充分な注射用水を添加
しそして混合する。

７．適当な細菌を保持するフィルターを通して無菌のパ
イアル中に濾過する。

８．無菌状態で無菌のパイアル中に満たし、栓をし、密
封し、そして末端を無菌化する。

実施例３ Ｂ．調合の方法 ｌ．混合しながらアルコール、ＵＳＰ（２００プルー７
）中に８−ＭＯＰを添加しそして溶解させる。

この調合物において使用されるバルキング剤はマニトー
ルであるが、よく凍結乾燥させるために知られている他
の物質、例えば塩化ナトリウム及びデキストロースもま
た使用してよい。凍結乾燥された粉末は、ｌＯ−の適合
する溶媒、例えば注射用水によって復元されて２０μｇ
／ｍＱの濃度を有する製剤を提供する。

Ａ．組成 ８　−　ＭＯＰ マニトール 酢酸 水酸化ナトリウム 溶液；ｌＯ％Ｗ／Ｖ 注射用水 ０．２０ｍｇ　　　　　　　　　０．２０ｍｇ５０．０
０ｍｇ ５０．ＯＯｍｇ ０．０１２ｍＱ 痕跡 ｑ．ｓ．　ｐＨ３．　５ 痕跡 ｑ．ｓ．　５．ＯＯｍ（２ 本 本凍結乾燥の間に本質的に揮発された せる。

３．溶液を室温に冷却する。

４．マニトールを添加しそして混合して溶解させる。

５．酢酸を添加しそして混合する。

６．３．５０＊のｐＨを得るのに充分な水酸化ナトリウ
ム溶液を混合しながら添加する。

７．最後の容量に持っていくのに充分な注射用水を添加
しそして混合する。

８．適当な細菌を保持するフィルターを通して無菌の受
け器中に濾過する。

９ｏ無菌状態で無菌のパイアル中に満たし、凍結乾燥の
栓で部分的に栓をしそして凍結乾燥する。

ｌＯ．栓を据えそしてバイアルを密封する。

Ｂ．調合の方法 ■．約９０〜９５％の注射用水を約９５℃に加熱する。

２．混合しなから８−ＭＯＰを添加しそして溶解さネこ
の実験においてはこのｐＨを使用したが、その他の酸性
のｐＨもまた選択することができる。

好ましい実施態様に関連して本発明を述べてきたけれど
も、本発明の範囲を述べられた特定の形態に限定する意
図はなく、むしろ反対に、添付の請求の範囲によって定
義される本発明の精神及び範囲内に含まれるような代替
物、変更物及び等価物を含めることを意図している。

本発明の主なる特徴及び態様は以下の通りである。

ｌ）被検者中に治療的血中レベルを供給するのに充分な
グソラレンの効果的少量、エチルアルコール、プロピレ
ングリコール及び水の無菌の水溶液を含有することを特
徴とすプるプソラレン試薬組成物。

２）該プソラレンが８−メトキシプソラレン（８−ＭＯ
Ｐ）である上記ｌに記載の組成物。

３）約ＣＩ　　０　０　５〜０．０　５ｍｇ／ｍＱの８
−Ｍ　ＯＰ，約０．１−１５％のエチルアルコール及び
約２５〜４００ｍｇ／ｍ４のプロピレングリコールを含
む上記２に記載の組成物。

４）ｐＨを２．０〜６．０に維持するための緩衝系を含
有する上記ｌないし３のいずれかに記載の組成物。

５）該ｐＨが３．５〜５．５である上記４に記載の組成
物。

６）７ツ素樹脂で積層された（テフロン化された）ゴム
栓によって栓をされたアンバーガラスバイアル中に貯蔵
された上記ｌないし５のいずれかに記載の組成物。

７）フッ素樹脂フィルムによって積層されたブチルゴム
の栓によって栓をされたアンバーガラスバイアル中に貯
蔵された上記ｌないし５のいずれかに記載の組成物。

８）紫外線一八フ才ト７才レシスにおける血液の体外的
処置における使用のための上記ｌないし５のいずれかに
記載の組成物。

９）紫外線一Ａフ才ト７オレシスにおける血液の体外的
処置によって白血球媒介疾患を軽減するのに使用するた
めの上記エないし５のいずれかに記載の組成物。

１０）該疾患が、皮膚一丁細胞リンパｌｍ（ＣＴＣＬ）
、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、強皮症、全身性狼
厘紅斑（ＳＬＥ）、乾癖、天庖迩、乾薄関節炎、異所性
皮膚炎、成人のＴ細胞白血病（ＡＴＬ），エイズ（ＡＲ
Ｃ），　リウマチ様関節炎、多発性硬化症、心臓移植拒
絶反応及び臓器移植拒絶反応である上記９に記載の使用
のための上記ｌないし５のいずれかに記載の組成物。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 被検者中に治療的血中レベルを供給するのに充分なプソ
   ラレンの効果的少量、エチルアルコール、プロピレング
   リコール及び水の無菌の水溶液を含有することを特徴と
   するプソラレン試薬組成物。