JPH0247692B2 - - Google Patents

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JPH0247692B2
JPH0247692B2 JP56182563A JP18256381A JPH0247692B2 JP H0247692 B2 JPH0247692 B2 JP H0247692B2 JP 56182563 A JP56182563 A JP 56182563A JP 18256381 A JP18256381 A JP 18256381A JP H0247692 B2 JPH0247692 B2 JP H0247692B2
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JP
Japan
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pores
blood cells
red blood
filter
area
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JP56182563A
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JPS5883231A (ja
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Masayoshi Hayashi
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Sysmex Corp
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Sysmex Corp
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Publication date
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    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483—Physical analysis of biological material
    • G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/49—Blood

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  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
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  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
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  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、赤血球の特性、とくに、赤血球が毛
細管を通過する際に様々な状態に変形する能力、
すなわち、変形能を測定する方法およびその装置
に関するものである。
〔従来の技術〕
赤血球の種々の特性のうち、赤血球が血管内を
絶えず循環し、通常約8μ前後の直径を有するも
のが、直径数μ足らずの毛細管内を自由に通過し
ているが、これは赤血球が変形能を有しているた
めであり、この変形能を調べることにより、微小
循環障害などの診断に役立てることができる。一
方、赤血球の変形能を定量化する手法の1つとし
て、3μ程度のガラス毛細管に吸い込まれるに要
する陰圧(吸引圧力)を一定のPH、浸透圧で測定
する方法、または、他の手法として、3〜5μ程
度の多孔性のフイルタに赤血球を透過させ、流量
を測定する方法が用いられていた。
〔発明が解決しようとする課題〕
しかし、前者は顕微鏡下における赤血球1個宛
の測定であり、測定結果が必ずしも、赤血球全体
の平均値を代表しているとは限らず、熟練を要し
実用的ではない。後者は多数の赤血球に対する平
均値が得られる反面、赤血球の崩壊による誤差、
赤血球を浮懸する液の粘度、温度などの影響を受
け、流量が必ずしも、変形能に関連したパラメー
タであるとは断定できない欠点があつた。また、
いずれの方法も測定に手間を要し、1検体当りの
測定所要時間はかなり長いものであつた。上記従
来の測定手法においては、血球1個に注目すると
平均的な値が得られず、一方、流量から変形能を
測定する方法においては、赤血球の1個1個につ
いては、いかなる状態にあるかは不明であるとい
う問題点があつた。
本発明は上記の諸点に鑑みなされたもので、血
液希釈液を細孔に通過させ、赤血球と希釈液との
電気的差異に基づいて赤血球を検出する検出方法
において、血液希釈液を直径3μ前後の孔隙を多
数有するフイルタに通過させた後、前記細孔を通
過させることにより、赤血球の変形能を正確に測
定することができる方法およびその装置を提供す
ることを目的とするものである。
〔課題を解決するための手段および作用〕
上記の目的を達成するために、本発明の赤血球
の特性を測定する方法は、第1図および第2図に
示すように、血液希釈液2を細孔4に通過させ赤
血球と希釈液との電気的差異に基づいて赤血球を
検出する検出方法において、血液希釈液2を直径
3μ前後の孔隙を多数有するフイルタ5に通過さ
せた後、前記細孔4を通過させて、赤血球の変形
態を測定することを特徴としている。
そして、フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の
面積の10〜10万倍であり、所定時間に細孔4を通
過する赤血球数を検出するように構成したり、ま
たは、フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の面積
の1〜0.1倍であり、所定体積の血液希釈液の通
過時間を測定するように構成する。
また、本発明の赤血球の特性を測定する装置
は、第1図および第2図に示すように、血液希釈
液を検出器3下端に設けられた細孔4に通過させ
赤血球と希釈液との電気的差異に基づいて赤血球
を検出する粒子検出装置において、細孔4を有す
る検出器3下端に、下部に直径3μ前後の孔隙を
多数有するフイルタ5を設けたアダプタ6を嵌設
してなることを特徴としている。
そして、フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の
面積の10〜10万倍であるように構成するか、また
は、フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の面積の
1〜0.1倍であるように構成する。
特許請求の範囲第2項の方法においては、液の
流量を一定に保ち、所定の時間内に検出される赤
血球数により変形能を測定するものである。した
がつて、従来の手法における単位時間当りの流量
から変形能を測定する方法に比べ、液の流量、す
なわち流速を一定に保つために、液の粘性や温度
による測定結果の影響を軽減できる。液の流量を
一定に保つ有効な手段として、ルビー、サフアイ
アなどの円板に直径100μ前後の細孔4を設け、
細孔の裏側から所定の圧力で吸引圧力を与える。
圧力はたとえば、200mmHg一定とすることによ
り、細孔4につまりが生じない限り流速はほぼ一
定に保たれる。液の温度変化による液自体の粘度
の影響を防止するために、恒温槽などにより一定
温度に保つことが望ましい。前記細孔4は流速を
一定に保つための流量調整用オリフイスだけでな
く、血球と血球を浮懸する液とのインピーダンス
の差異に基づいて、血球がオリフイスを通過する
際に、血球を検出するための検出孔としての役目
をも兼ねる。さらに前記細孔4の前部(上流側)
に、間隙の孔径が3μ前後で、少なくとも、1万
個以上の孔を有するフイルタ5を設ける。すなわ
ち、検出孔(細孔)の孔径が100μ前後で、間隙
の孔径が3μ前後であるから、検出孔1個と間隙
1000個前後とで両者の開孔の面積が等しくなり、
フイルタ5の孔隙の総面積が検出孔の面積の少な
くとも10倍以上有しないと、流速がフイルタで規
制されることになる。したがつて、フイルタの孔
面積を検出孔の面積の10倍程度以上とすれば、流
速は前記検出孔によつてのみ規制される。
以上の手段により、5万倍程度に希釈された血
液を、前記フイルタ5および検出孔が液面下にあ
るようにセツトし、検出孔の裏側から吸引圧力を
与えると、赤血球が3μ程度のフイルタ5を通過
した後、検出孔で1個宛検出される。所定の時間
検出される血球数を計数することにより、フイル
タ5を通過した血球の数が測定される。すなわ
ち、赤血球の直径は通常8μ程度であるが、フイ
ルタ5の孔隙は3μ前後であり、このフイルタを
通過するためには赤血球の変形が必要である。し
たがつて、変形能を有する赤血球のみが通過可能
であり、たとえば、溶血状態で通過したものは赤
血球1個と数えられないために、変形能を数値で
表示することができる。測定時間は10秒〜1分程
度に設定されるが、あまりに長時間設定すると、
変形能を有しない赤血球、あるいは、その他の粒
子により目づまりを生じ、測定値に誤差を与え
る。
特許請求の範囲第2項および第5項において、
フイルタ5の孔隙の総面積は、細孔4の面積の10
〜10万倍である。原理的には上限は無いが、現実
的な検出器3のサイズを考慮すると、検出器3に
設けるフイルタ5のサイズも限定され、したがつ
て、フイルタ5の孔隙の総面積にも限度が生じ
る。10万倍程度を越えるとフイルタ5のサイズが
大きくなりすぎ、装置として構成することが難し
くなる。
特許請求の範囲第3項の方法は、フイルタ5の
孔隙数を1000個かそれ以下、すなわちフイルタの
孔隙の総面積が検出孔の面積と等しいかそれ以下
とする方法である。この方法は、フイルタ自体に
検出孔に与えられる吸引圧力とほぼ同じ圧力が与
えられるために、温度による液の粘度変化の影響
を防止する必要がある。したがつて、より高度の
温度管理下で測定する必要がある。この方法にお
いては、所定量の試料(血液希釈液)を何秒かか
つて吸引することが可能かを測定するものであ
り、検出孔は赤血球が正常状態にあるか否かを監
視するために用いることもできるし、フイルタ通
過前の単位希釈液当りの粒子数を測定することに
より、フイルタ通過可能な粒子数とともに、通過
割合の重要なパラメータを得ることができ、所定
の液量の通過時間のパラメータとともに、赤血球
の変形能の特性を2次元のヒストグラムで表わす
ことができる。
特許請求の範囲第3項および第6項において、
フイルタ5の孔隙の総面積は、細孔4の面積の1
〜0.1倍である。所定量の試料を何秒かかつて吸
引できるかを測定するのであり、血球がフイルタ
5をどの程度通過しやすいかを見ている。したが
つて、試料の流量はフイルタの総面積によつて決
定(制限)されるようにしなければ意味がない。
フイルタの総面積が細孔の面積よりも大きい(1
倍を越える)のでは、細孔により流量が制限され
てしまうことになり、目的の測定が不可能とな
る。逆に、フイルタの総面積が余りにも小さすぎ
ると、所定量の試料の通過に時間がかかりすぎ実
用的でなくなる。したがつて、0.1倍程度までが
限界である。
〔実施例〕
つぎに以上の方法を実施するための本発明の装
置の一実施例を図面に基づいて説明する。第1図
は本発明の装置の全体を示し、第2図は検出孔お
よびフイルタまわりを示している。1は粒子検出
装置で、血液希釈液2を検出器3の下端に設けら
れ孔径100μ前後の細孔4(検出孔)に通過させ、
赤血球と希釈液との電気的差異に基づいて赤血球
を検出するように構成されている。前記細孔4を
有する検出器3下端に、下部に直径3μ前後の孔
隙を多数有するフイルタ5を設けたアダプタ6を
嵌設している。7は細孔4を有するルビーまたは
サフアイアなどの硬質の材料からなる円板で、こ
の円板7はガラスまたは合成樹脂からなる検出器
3の先端(下端)に固定され、細孔4を電路と
し、検出器内外に検出電極8,9が設けられてい
る。10は試料容器、11は検出回路、12は流
体制御装置、13は計数回路である。
フイルタ5は多孔性のメンブランフイルタなど
を、必要な孔隙数を除きパラフイン処理し、所定
の個数分を有するようにしたもので、フイルタ固
定用のアダプタ6に固定される。アダプタ6は底
部にフイルタ5を固定した円筒容器状の形状を有
し、内径は検出器3の先端(下端)部の外径と嵌
合するようになつている。フイルタ5は孔隙の総
面積が細孔4の面積の10〜10万倍となるか、また
は孔隙の総面積が細孔4の面積の1〜0.1倍であ
るように設けられる。なおフイルタ5の孔隙の総
面積が細孔4の面積に比して十分に大きいときに
は、アダプタ6は軟質の合成樹脂の成形品でも十
分であるが、フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4
に等しいか小さいときには、アダプタ6は導電性
金属で構成する必要がある。これは、フイルタ5
の孔隙の総面積が細孔4に比べて十分に大きいと
きには、フイルタ5の孔隙を介し電路が確保され
るが、フイルタ5の孔隙の総面積が小さいときに
は、フイルタ5の孔隙自体で粒子を検出してしま
い、ノイズが発生するからである。また、流体制
御装置12はマノメータ、ポンプなどを内蔵し、
マノメータ接点によりポンプをオン・オフし、所
定の吸引力を発生する。さらに検出回路11には
タイマが内蔵され、特許請求の範囲第2項の方法
においては、測定開始および測定終了信号を発
し、特許請求の範囲第3項の方法においては、流
体制御装置で定量される液の時間測定を行う。な
お、フイルタはアダプタごと使い捨てとすること
が望ましいが、蒸留水を逆流させ、溶血・洗浄し
て再使用も可能である。それぞれの測定に際して
は、前回の赤血球の残渣を十分に拭き取りコンタ
ミネーシヨンを防止する必要がある。
(発明の効果) 本発明のいずれの方法においても、赤血球を1
個宛検出するために、検出パルスの高さが粒子の
大きさに比例することから、検出パルスの大きさ
を見ることにより、赤血球の状態をモニタするこ
とができ、また、いずれの方法も数値が直接測定
結果として得られ、かつ、測定が容易で、血液中
の赤血球の平均の測定結果を得ることができる。
また従来、赤血球の変形能を直接示すパラメータ
がなく、測定法によつて種々のパラメータ、たと
えば、流量(ml/min)、フイルタ通過赤血球
(%)または流量×赤血球数(ml・RBC/min)
などで表現されており、一般に実験室的測定法で
あつたが、汎用の粒子計数装置にフイルタ機能を
付加し、タイマを設けることにより、容易に変形
能の測定を可能とし、また、得られる測定パラメ
ータも数値表示として的確なものであり、一般の
ルーチン用としても十分に価値が高いという効果
がある。
【図面の簡単な説明】
第1図は本発明の装置の一実施例を示す側面説
明図、第2図は検出器の細孔およびフイルタ部分
の拡大断面図である。 1……粒子検出装置、2……血液希釈液、3…
…検出器、4……細孔、5……フイルタ、6……
アダプタ、7……円板、8,9……電極、10…
…試料容器、11……検出回路、12……流体制
御装置、13……計数回路。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 血液希釈液2を細孔4に通過させ赤血球と希
    釈液との電気的差異に基づいて赤血球を検出する
    検出方法において、血液希釈液2を直径3μ前後
    の孔隙を多数有するフイルタ5に通過させた後、
    前記細孔4を通過させて、赤血球の変形態を測定
    することを特徴とする赤血球の特性を測定する方
    法。 2 フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の面積の
    10〜10万倍であり、所定時間に細孔4を通過する
    赤血球数を検出する特許請求の範囲第1項記載の
    赤血球の特性を測定する方法。 3 フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の面積の
    1〜0.1倍であり、所定体積の血液希釈液の通過
    時間を測定する特許請求の範囲第1項記載の赤血
    球の特性を測定する方法。 4 血液希釈液を検出器3下端に設けられた細孔
    4に通過させ赤血球と希釈液との電気的差異に基
    づいて赤血球を検出する粒子検出装置において、
    細孔4を有する検出器3下端に、下部に直径3μ
    前後の孔隙を多数有するフイルタ5を設けたアダ
    プタ6を嵌設してなることを特徴とする赤血球の
    特性を測定する装置。 5 フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の面積の
    10〜10万倍である特許請求の範囲第4項記載の赤
    血球の特性を測定する装置。 6 フイルタ5の孔隙の総面積が細孔4の面積の
    1〜0.1倍である特許請求の範囲第4項記載の赤
    血球の特性を測定する装置。
JP56182563A 1981-11-13 1981-11-13 赤血球の特性を測定する方法およびその装置 Granted JPS5883231A (ja)

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JPS59961U (ja) * 1982-06-25 1984-01-06 東亜医用電子株式会社 血球の特性を測定する装置

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