JPH02504149A - １α―ヒドロキシビタミンＤ同族体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 側鎖不飽和ｌα−ヒドロキンビタミンＤ同族体この発明：よ、保健社会福祉省か らの補助また：よ支給により支援されｆ二研究過程において為され１こ。政府は この発明においである種の権利を有する。

この発明：よ、悪性細胞から正常細胞への分化誘発において特異活性を示す新規 ビタミンＤ化合物に関するものでるる。さらに詳しくは、この発明は、悪性細胞 の分化における高い活性およびカルシウム代謝に対するかなり低い活性を有する ことがら抗腫よう剤として作用選択性を示す、１α、２５−ジヒドロキシビタミ ンＤａ（１，，２５−（ｏ　Ｈ）ＩＤ　＠）の側鎖不飽和および側鎖延長類縁体 に関するものである。

背景 カルシウム代謝および正常な骨の成長および発達の調節におけるＤビタミン類（ ビタミンＤ３またはり、）の活性は、親ビタミンのある種のヒドロキシル化形態 への代謝を必要とすることが知られている。

具体的には、ｌα、２５−ジヒドロキシビタミンＤｓ［１，２５−（。

Ｈ：ＬＤｓ〕、すなわち動物またはヒトにおいてビタミンＤ、から正常に形成さ れ１ニジヒドロキモ 送および骨からのカルシウム血性（骨動員）の刺激に関与することにより、生物 体の全血中カルシウム濃度を調節する活性を示す種類であることが確立された。

（以後の記載において、ビタミンＤ代謝物または類縁体のこれらのカルシウム関 連活性を、集約的に化合物の「カルシウム血性（ｃａｌｃｅｍｉｃ）活性」また は「カルシウム血性作用」と称する）。１　、２５−（ＯＨ）ｔＤ　ｓのある種 の構造類似体、例えばｌα−ヒドロキシビタミンＤｓ、ｌα−ヒドロキシビタミ ンＤ、、１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ、または１．２５−（ＯＨ）ｚＤ ｓのフルオロ置換誘導体はまた、高活性カルシウム剤として知られており、その 結果、１　、２５−　（ＯＨ）ｔＤ　ｓおよびその活性類縁体は、様々なカルシ ウム代謝および骨疾患、例えば腎性骨ジストロフィー、ビタミンＤ抵抗性くる病 、またはオステオポローシスおよび関連疾患の予防または処置における医薬とし て使用または提案されている。

さらに最近、Ｉ　、２５−（ＯＨ）ｔＤｓはまに、そのよく知られｆ二前述の「 カルシウム血性作用」に加えて他の生物学的機能を発現することが発見された。

例えば、１．２５−（Ｏ）（）、Ｄ、および密接に関連した類縁体［ｌα−０Ｈ −Ｄ、、１．２５−（ＯＨ）ｔＤ、、フルオロ置換類縁体等］は、細胞分化を誘 発し得ることが見出された［開部等、「プロシーディンゲス・オブ・ザ・ナショ ナル・アカデミ−・オブ・サイエンシーズ・オブ・ザ・ニー・ニス・エイ」、７ ８．４９９０（１９８１年）、重量等、「プロシーディンゲス・才ブ・ザ・ナシ ョナル・アカデミ−・オブ・サイエンシーズ・オプ・ザ・ニー・ニス・エイ」、 ８０．２０１（１９８３年）］、具体的には、１．２５−（ＯＨ）　！　Ｄ　ｓ およびその類縁体は、培養において生長させた悪性細胞（例、ヒト白血病細胞） の増殖を阻止し、それらの正常なマクロファージ型細胞への分化を誘発すること が示された。（以後、これらのタイプの活性を集約的にビタミンＤ化合物の「分 化活性」と称す）。それらは分化誘発剤として著しい効力を有するため、これら のビタミンＤ誘導体は抗癌剤に有用であり得、事実、ヒト白血病の処置における それらの使用が提案されている（須田等、アメリカ合衆国特許第４３９１８０２ 号）。しかしながら、これらの化合物が培養における悪性細胞の分化に非常に有 効であっても、同等に高いそれらのインビボ・カルシウム血性作用は、実践的抗 癌剤としてのそれらの用途を制限または排除している。すなわち、１．２５−（ ＯＨ）ｔＤ、またはそのフッ素化誘導体は非常に強力な細胞分化剤であるが、そ れらはまた、カルシウム血性活性に関して最も強力な化合物であり、抗癌（抗白 血病）剤としての有効使用にインビボで必要とされるレベルにおいて、これらの 同化合物は、それら固宵のカルシウム血性活性によって危険なほど高い血中カル シウム濃度をもたらし得る。他の既知ビタミンＤ誘導体：ま、分化活性およびカ ルシウム血性活性間で似た対応関係を示すため、有望な抗癌剤としてのそれらの 実際の使用には同じ制限および危険性が伴う。

これらの観察は、抗癌剤としての作用のさらに高い特異性および選択性を有する 化合物、すなわち分化／カルシウム血性活性割合が改善された化合物に対する要 望を明らかに示し、それらの化合物に対する探求心を刺激するものであり、事実 、最近の研究では、高められた分化活性を有する幾つかのビタミンＤ類縁体の製 造に到達している。例えば、側鎖カ月個の炭素により延長された（縦向またはそ の末端において）ある種の１　、２５−　（ＯＨ）ｔＤ　ｓ同族体は、１．２５ 　　（ＯＨ）　ｔ　Ｄ　Ｓ自体よりも培養白血病細胞に関して著しく高い分化活 性（約１０倍）を呈することが見出された［デル力等、アメリカ合衆国特許第４ ７１７７２１号、オストレムおよびデル力、「ステロイズ」、１且、７３−１０ ２頁（１９８８年）、オストレム等、「ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケ ミストリーｊ、２６２，１４８６４（１９８７年）コ。しかしながら、これらの 同族体は依然として非常に強力なカルシウム剤であり、１．２５　　（ＯＨ）ｓ Ｄｓの活性とほぼ同等のカルシウム血性活性を呈する。従って、これらの化合物 は、改善された分化／カルシウム血性活性割合を特徴としているが、それらは前 述の望ましくない強いカルシウム血性作用という問題を克服してはいない。選択 的な分化活性を宵することが報告された他のビタミンＤ−関連化合物も製造され たが［オストレム等、前出、久保寺等、「ケミカル・アンド・ファーマシニーテ ィカル・ブレタン」、３４．２２８６−８９頁（１９８６年）、油側等、「ケミ カル・アンド・ファーマシニーティカル・ブレタンＪ、３５，４３６２頁（１９ ８７年）参照］、これらはこの発明の化合物とは構造的に別個の異なるものであ る。

発明の要旨 ビタミンＤ関連化合物は、それらの分化対カルシウム応答に関して望ましい非常 に有利な活性パターンを呈することが見出された。

これらの新規ビタミン類縁体は、悪性細胞の増殖を阻止し、それらの正常な単核 白血球型細胞への分化を誘発する点で非常に明白な活性（１，２５−（ＯＨ）、 Ｄｔの場合と類似またはそれより大きい）を呈するが、それらのカルシウム血性 作用に関する限り、それらは１゜２５−　（ＯＨ）！’Ｄ　＊よりもかなり低い 活性を示す。すなわち、これらの新規化合物は劇的に改善された分化／カルシウ ム血性活性割合を呈し、この特徴により、これらの化合物は新生物疾史処置用の 好ましい薬剤を代表するものである。分化誘発活性が高く、カルシウム剤として の活性がかｔり低いｆ二め、これらの化合物は過変に高い血中カルシウム濃度を 誘発せずに投与され得ることにより、高いカルシウム血性活性に関連した主たる 実際的問題を克服し得る。

新規化合物は、側鎖が炭素鎖への２個または３個のメチレン単位の挿入により延 長されている１　、　２５−　（ｏ　Ｈ）２Ｄ　ａの側鎖不飽和同族体としての 構造的特徴を有する。従って、それらは下記−殻構造により示され得る。

（式中、Ｘ、ＹおよびＸは同一または異なり得、水素およびヒドロキシ保護基か ら成る群から選ばれ、ｎは３または４の値を有する）これらの化合物の具体的な 好ましい例は、２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミ ンＤ５、すなわち上記化合物（ただし、ＸＳＹ、およびＺは水素、れは３）およ び２４−トリホモ−１，２５−ジヒドロキン−２２−デヒドロビタミンＤ２、す なわち上記構造を有する化合物（ただし、Ｘ、Ｙお上びＺは水素、ｎは４）であ る。

これらの新規化合物は、アメリカ合衆国特許第４７１７７２１号に示された側鎖 不飽和２４−ホモ−ビタミンＤ化合物と関連しにものであることは明らかである 。しかしながら、新規化合物は目立った構造的および生物学的特性を有する。構 造的に目立つ特徴：よ、２個または３個のメチレン単位の挿入により同族体化さ れた不飽和側鎖であり、生物学的には、これらの化合物は、カルシウム血性活性 が全く無いか、有ってもかなり低い、非常に強力な細胞分化剤である。

新規化合物の製造 この発明の新規化合物の例の合成を反応工程図１，２および３に図示する。第１ 図は、必要とされるｌα−ヒドロキンビタミンＤ−２２−アルデヒド中間体の製 法を示す。これは、第２反応工作図に示されている通り、適当なアルキルフェニ ルスルホン側鎖単位とのカップリング時に、所望のビタミンＤ同族体［例、各々 化合物（２５）および（２６）］を提供する、第３図は、側鎖カップリングに必 要とされるアルキルフェニルスルホン単位の゛製法を示す。図に描かれた化学プ ロセス段階に関する実験の詳細については、後記実施例に記載する。これらの実 施例で使用されているアラビア数字による化合物名称（例、化合物１．２．３等 ）は、図において番号が付されている構造を示す。

金秋れ玉！ ３β−アセトキシ−２２，２３−ビスツルー５−コレン酸（ｃｈｏｌｅｎｉｃ　 ａｃｉｄＸｌ）を（ウィルトン、ニューハンプシャー）から購入した。

他の化学薬剤は全て、市販されている原材料による最上品質のものであった。溶 媒を標準的方法により精製した。

ＥＭサイエンス（ギブスタウン、ニューシャーシー）から購入したＵｖ指標付き の予め被覆したアルミニウム・シリカゲル。シートを用いて、薄層クロマトグラ フィー（ＴＬＣ）を行っに０使用した溶媒系：Ａ：クロｏホルムーエタノール８ ５　：　１５　（ｖ／ｖ）、Ｂ：ヘキサン−酢酸エチル１：ｌおよびＣ：ヘキサ ンー酢酸エチル３：１゜モデル６０００Ａ溶媒デリバリ−・システム、モデル６ ＵＫユニバーサル・インジェクターおよびモデル４５０可変性波長検出器を備え たウォーターズ・アソンエーツ製液体クロマトグラフを用いて、高速液体クロマ トグラフィー（ＨＰ　Ｌ　Ｃ）を行った。ゾルバックスーンル（フエノメネック ス）カラム（６，２ｘＩｘ２５ｃｘおよび＋０１！１Ｘ２５　ｃｘ）を使用した 。溶媒系：Ａ：ヘキサン９３％２−プロパツール、Ｂ：ヘキサン中２％２−プロ パツール、Ｃ：ヘキサ２９６％２−プロパツール、Ｄ・ヘキサン中ｌＯ％２−プ ロパツール、Ｅ：ヘキサン中２０％２−プロパツール。ＨＰＬＣ試料の前ろ過に は、シリカゲル・セップーバック（ウォーターズ・アソンエーツ）カートリッジ を使用した。

クラトスＤＳ−５５データ・システムを備え１ニクラトスＭＳ−５０ＴＣマスス ペクトロメーターにより、７０ｅＶで電子衝撃質量スペクトル（ＭＳ）を８己録 し１こ。

日立機種６Ｏ−１００ＵＶ−ビス分光光度計により、紫外線（Ｕ＼７）吸収スペ クトルを２録しに。

油状物質まには四塩化炭素溶液のフィルムを用い、ニコレットＭＸ−Ｉ　　ＦＴ −ＩＲ分光計において赤外線スペクトルを記録した。

内部標準としてテトラメチルシラン（ＴＭＳ）含有ＣＤＣｌ５溶液中プルカー２ ７０．４００または５００ＭＨｚ分光計を用いて、プロトン磁気共鳴スペクトル （’Ｈ−ＮＭＲ）を得た。

実施例１ 保護Ｃ−２２〜アルデヒドの合成（化合物１８：第り図）。

このアルデヒドは、クトナー等の一般的方法（「テトラヘドロン・レターズ」、 １主、６１２９−３２、＋９８７）に従い製造される。

化合物（ＩＸ１０９）をメタノール中５％ＫＯＨ４２０ｘＱに溶かし、出発原料 がＴＬＣにより全く検出されなくなるまで（溶媒系Ａ）溶液を周囲温度で１５分 間撹はんした。この溶液に、メタノール中１０％硫酸１６０　ｔａ、Ｑを撹はん しながら滴下し、生成した懸濁液をメタノール中１％硫酸４００ｘＱにより希釈 した。混合物を４８時間還流加記エステル）を酢酸エチルで抽出した。有機相を ５％ＮａＨＣＯ，、飽和Ｎ　ａ　Ｃｌにより洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し １こ。生成物である化合物（２Ｘ９．０９．８８％）は、これ以上精製せずに次 の段階で使用した。

１３５ｘＣの乾燥ジメチルホルムアミド（Ｄ　Ｍ　Ｆ　）に化合物（２８４゜４ ｇ、１２ミリモル）を溶かした溶液に、イミダゾール（３，６９，５２，８ミリ モル）、次いでｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（４，０ｇ、２６．４ミリモ ル）を加えた。塊状沈澱が形成されるまでこの溶液を室温で５分間撹はんし、次 いでさらに１５分間撹はんを続けた。反応混合物をヘキサン（４００３１１２） により抽出し、水、飽和ＮａＣ＋溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。

溶媒を濃縮すると、ＴＬＣ純枠（溶媒系Ｂ）生成物である化合物（３Ｍ５．３９ ．９１％）が得られ、これはそれ以上精製せずに次の段階で使用した。ヘキサン ９２％酢酸エチルを用いたフラッシュ・クロマトグラフィーにより分析試料を得 た。

２０ｘＱのヘキサンに化合物（３Ｘ１．Ｏｆ、２．１ミリモル）、ジブロマンチ ン（０，４２９，１，５ミリモル）および無水重炭酸ナトリウム（０，９１９， １（Ｈリモル）を含む混合物を、出発化合物（３）が検出されなくなるまで（Ｔ ＬＣ，系Ｃ）？Ｕ素雰囲気中で３０分間還流加熱した。沈澱物をろ過し、溶液を 減圧乾燥した。残留物を５＝ｆ２の無水ＴＨＰに再溶解し、テトラブチルアンモ ニウムプロミド（０，０６９，０，１９ミリモル）を加え、混合物を室温で窪素 下３０分間撹はんした。次に、テトラブチルアンモニウムプロミド（ｌ　０ｒＩ Ｑ、　ＴＨＰ中１モル）の溶液を加え、次いで０　、７　ｘＱのＳ−コリジンを 加え、混合物を璽素下で１時間室温で撹はんした。さらに５＋Ｑのテトラブチル アンモニウムプロミド溶液を加え、撹はんを３時間続けた。

エーテル（ｓｏｍＱ）を加え、有機相を水、冷ｌＮ−ＨＣｌ、ｌＯ％ＮａＨＣＯ 参で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。生成物である化合物（４）をベ ンゼンに溶かし、シリカゲル７０−２３０メツシユ（３０９）によるクロマトグ ラフィーに付した。ヘキサン中酢酸エチルを用いて化合物（４８０，４４９，５ ８％）を溶離した。ＨＰＬＣにより分析試料を得ｆ：（系ＡＳＲｖ７７ｉｉ２） 。ＩＲ（薄１１ｉ）１７３７．１６０４．１４９５．１’０８２．１０３０ｃｔ ａ−’、ＵＶ（３％２−プロパツール、ヘキサン中）λｍａｘ２６２ｎｍ（ε７ ０００）、λｍａｘ２７２ｎｍ（ｇ９８００）、λｌｌ１ａｘ２８２ｎＩ１１（ ε１０５００）、λｍａｘ２９３　（ε６０００）、’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３） ６０．５４（３Ｈ，ｇ、１８−ＣＨｓ）、０．９４（３Ｈ，ｓ、１９−ＣＨｓ） 、１．２２（３８％ｄ、Ｊ−６Ｈｚ、２−ＣＨｓ）、３．６（Ｉ　Ｈ，Ｏ）、３ −Ｈ）、３．６８（３８％ｓ、　　Ｃ０ｔＣＨ３）、５．４２（Ｉ　ＨＳｔｎ、 ６−Ｈ）、５．５８（Ｉ　Ｈ，ｍ、　　７−Ｈ）、ＭＳｍ／ｚ（相対強度）３５ ８（６１）、３４０（１２）、３２５（１００）、２９９（６８）、２７１（７ ）、２５３（１７）、２３７（２６）、２１１（２７）、１４３（７２）、１１ ９（３５）。

３５０χＱのベンゼン−酢酸エチルエーテル（１：４　Ｖ／Ｖ）に化合物（４Ｘ ８３０ｗ９．２．３ミリモル）を溶かした溶液を、ハフビア６０８Ａ３６中圧Ｕ Ｖランプを用い、窒素発泡器およびビコル・フィルターを備えた水冷石英浸漬ウ ェル中で窪素下撹はんしながら４０分間（Ｊ　Ｘ　Ｉ　０分）照射した。２６５ ｎｍでヘキサン中２％２−プロパツールを用いたＨＰＬＣにより反応をモニター した。溶液を減圧乾燥し、１００峠の無水エタノールに再溶解し、呈素雰囲気中 ３時間還流下加熱した。次いで、溶液を濃縮し、ヘキサン中１０％酢酸エチル１ 村に再溶解し、シリカゲル７０−２３０メツシユ（３０ｇ）によるクロマトグラ フィーにかけた。ヘキサン中１５％酢酸エチルの混合物を用いてビタミンエステ ル（５Ｍ２９１３ｍｇ、３６％）を溶離した。

ＨＰＬＣにより分析試料を得た（系阻Ｒｖ９４２１２）。ｒＲ（薄膜）１７３８ 　ＣＩ−’、　ＵＶ（ＥｔＯ）１）λｍａｘ　２　６　４　ｒｕｎ、　　　λｍ １ｎ２　２　８　ｒ＋ｍＳ　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１＊）６０．５６（３Ｈ，ｓ、 １８−ＣＨｓ）、１．２０（３Ｈ％　ｄｓ　Ｊ＝７　Ｈ２％　２１−ｃ　Ｈｓ） 、３．６６（３Ｈ，５ＳＣＯ１ＣＨ３）、３．９５（Ｉ　Ｈ，ｍ、　３−Ｈ）、 ４．８０（ＩＨＳｄ％Ｊ＝１．２Ｈｚ、１９Ｚ−Ｈ）、５．０５（ＩＨ％ｄ、Ｊ ＝１．２Ｈｚ、１９Ｅ−Ｈ）、６．０３（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１１Ｈｚ、７−Ｈ）、 ６．２３（ＩＨ％ｄ、Ｊ＝１１Ｈｚ、　６−Ｈ）、ＭＳｍ／ｚ（相対強度）、Ｍ 　　３５８（４５）、３４０（９）、３２５（４５）、２９９（２２）、２５３ （１９）、２３７（１８）、＋３６（６０）、＋１８（１００）。

５ｇ１２の乾燥トルエンに化合物（５ＸＩ０１９．０．０２８ミリモル）を溶か した溶液を、乾燥水−アセトン浴中、窒素下で一７０°Ｃに冷却した。この溶液 に、水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ−Ｈ，５０μｆｆ、　　）ル エン中２５％溶液、０．０８８ミリモル）を撹はんしながら滴下した。反応混合 物を一７０℃で１０分間撹はんし、次いでメタノール（２紅）をゆっくりと加え た。混合物を室温に放暖し、エチルエーテルで希釈し、５％ＨＣＩ、５％ＮａＨ ＣＯｓ、水、飽和ＮａＣ１により洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。

シリカゲル・クロマトグラフィー（ヘキサン中１５％酢酸エチル）により、次の スペクトル・データを有する化合物（６８４、９１９，５４％）が得られた。Ｍ Ｓ：３２８（Ｍ　　、２９）、３１０（５）、２９５（３１）、２６９（１１） 、２５３（６）、＋３６（４７）、１１８（８６）、２９（’１００）、’Ｈ− ＮＭＲ（ＣＤＣ１，）δ：０．５９（３Ｈ％ｓＳ　１８−ＣＨｓ）、１．１４（ ３Ｈ，ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、２１　　ＣＨｓ）、４．０（ＩＨ，ｍ、３−Ｈ）、４． ８１（ＩＨ，ｄ％Ｊ＝１．２Ｈｚ、１９Ｅ−Ｈ）、５．０５（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１ ．２Ｈｚ、１９Ｚ−Ｈ）、６．０５（Ｉ　Ｈ，ｄ。

Ｊ　＝　Ｉ　ＩＨｚ、　７−Ｈ）、６．２３（ＩＨ％ｄ、Ｊ＝Ｉ　ＩＨｚ、６− Ｈ）、９．５８（Ｉ　Ｈ，ｄ、Ｊ＝３．８Ｈｚ、２２−Ｈ）。

さらにヘキサ２９５％２−プロパツールを用いたシリカゲル・カラムによる溶離 後、Ｃ−２２−アルコール、化合物（７０２，７貰９．２９％）が生成した。

４℃で２０時間ピリジン中ｐ−トルエンスルホニルクロリドを用いて化合物（５ ）を化合物（８）に変換した。２ａＱの無水ジクロロメタンに溶かした化合物（ ８Ｘ１０２ｍｇ、０．２ミリモル）を、５５℃で撹はんしながら無水重炭酸カリ ウム（２５０ｘｓ）のメタノール溶液（１５ｘＱ’）に加えた。混合物を５５℃ で２４時間窪窒素下撹はんした。

次いで、溶媒を減圧除去し、残留物をエーテルで抽出した。有機相を水で洗浄し 、無水硫酸マグネシウムで乾燥しに。生成物の化合物（９）を、ヘキサン中２０ ％酢酸エチルを用いたシリカゲル・クロマトグラフィーにより精製した（５０ｉ ９．６８％）。

ｔ−プチルヒドロベルオキンド（１１２μＱ、トルエン中３．０モル溶液、０． ３４ミリモル）を、２ｚ（ｌの乾燥メチレンクロリドに二酸化セレン（９Ｍ９． ０．８ミリモル）を含む懸濁液に加えた。透明な溶液が形成されるまで、混合物 を窒素下室温で撹はんした。次に、無水ピリジン（１２μｍ２，０．１５ミリモ ル）を加え、次いで２ｘＱの無水ジクロロメタンに溶かした化合物（９Ｘ５０ｎ ）を加えた。混合物を窒素下で３０分間撹はんした。冷１０％重炭酸ナトリウム （２ｘｉ２）を加え、混合物をエーテルで抽出した。有機相を冷１０％重炭酸ナ トリウム、氷水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。シリカゲル・クロ マトグラフィー（ヘキサン中１０−２０％酢酸エチル）により、１２．５ｕの化 合物（１０）が得られた。次に、生成物を直ちに０　、５　ｗＱの氷酢酸に溶か し、溶液を窒素下で撹はんしながら１５分間５５℃で加鮪した。反応混合物を氷 に注ぎ、エーテルで抽出し、水冷飽和重炭酸ナトリウムで洗浄した。エーテル抽 出物を合わせ、水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。プレパラティブＨＰ ＬＣにより２．５＋１の割合で（５Ｚ、７Ｅ）および（５Ｅ、７Ｅ）異性体、各 々（１１）および（１２）の分析試料が得られた。

化合物（１１）：ＨＰＬＣ，Ｒｖ６８ｘＱ、ＬＩＶ（ＥｔＯ）りλｍａｘ２６４ 　ｎｍ、λｍ１ｎ２２７　ｎｍ、Ａ　２　ｓ　４　＝２　、０７、’ＨＮＭＲ（ ＣＤ　Ｃ１５）６ｉ、０．５６（３Ｈ，ｓ、１８　　ＣＨｓ）、１．２０（３Ｈ ，ｄＳＪ＝６．５Ｈｚ、２ｌ−ＣＨＩ）、２．０４（３Ｈ％ｇ、３β−アセチル ）、３．６６（３Ｈ。

６．２２−ＣＯｈＣＨ＊）、４．４（ＩＨ，ｍ、１−Ｈ）、５．２（ＩＨ，ｍ。

３−Ｈ）、５．０１（ＩＨ，広い６．１９Ｅ−Ｈ）、５．３４（ＩＨ，広い＄、 １９Ｚ−Ｈ）、６．０１（ＩＨＳｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、７−Ｈ）、６゜３３（ＩＨ ，ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、６−Ｈ）、Ｍ　Ｓ　ｍ／゛ｚ（相対強度）、４１６（Ｍ、 ４）、３５６（１００）、３３８（２１）、２５１（１３）、１３４（９５）。

化合物（１２）：ＨＰＬＣ，Ｒｖ７８ａＱ、ＵＶ（ＥｔＯＨ）λｔｎａｘ２６７ 　ｎｍ、λｍ１ｎ２２７　ｎｍ、−＝３．５１．’）（ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）δ 、０．５６（３ＨＳｓ、１８　　ＣＨ２）、１．２０（３Ｈ，ｄＳＪ＝６．５Ｈ ｚ。

２ｌ−ＣＨｓ）、２．０４（３Ｈ，ｓ、３β−０Ａｃ）、３．６６（３ＨＳｓ。

２２−Ｃｏ、ＣＨ３）、４．５（ｌ　ＨＳｒｎ、１−Ｈ）、５．３（ＩＨ，ｍ、 ３−Ｈ）、４．９９（ＩＨ，広いｓ、＋９Ｅ−Ｈ）、５．１３（ＩＨ，広いＳ。

１９Ｚ−Ｈ）、５．８１（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝　ｌ　ＯＨｚ、７−Ｈ）、６．５６（ ＩＨ，ｄ、Ｊ−１０Ｈｚ、６−Ｈ）。

大規模製造の場合、異性体（］】）および（１２）はまた、アメリカ合衆国特許 第４５５４１０６号記載の無水マレイン酸方法により効果的で有利に分離され得 る。

ジイソブチルアルミニウムヒドリド（１５μｆｆ、１．５モル溶液、トルエン中 ）を、璽素下−７０℃で無水トルエンＯ，’５ｘＱに化合物（ｌｘＸ２＋９）を 溶かした溶液に撹はんしながら加え六。混合物を一７０℃でｌＯ分間攪はんし、 ０．２蛙のメタノールをゆっくりと加えることにより、有機金属錯体を分解させ た。混合物を室温に温め、エチルエーテルで抽出した。有機相を水洗し、無水硫 酸マグネシウムで乾燥した。溶媒系Ｅを用いたプレパラティブＨＰＬＣにより、 化合物（１３）および化合物（１４）が得られた。化合物（１３）は次のスペク トル・データを与えた。３４４（Ｍ　　、２２）、３２６（１３）、３１１（２ ）、２８５（４）、２６９（４）、１５２（２９）、１３４（１００）、’　Ｈ Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＤ　ＣＩｓ）δ、０．５９（３Ｈ，ｓ、Ｉ　８　　ＣＨａ）、１ ．１５（３Ｈ％ｄ、Ｊ＝７Ｈｚ、２１　　　ＣＨｓ）、４．２（１８％ｍ、３− Ｈ）、４．４（１８％ｍ、１−Ｈ）、４．９９（ＩＨ，ｄ、Ｊ−１，２Ｈｚ。

１９２−）（）、５．３１（ＩＨＳｄ、Ｊ−１，２Ｈｚ、］　９Ｅ−Ｈ）、６゜ ０２（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１１Ｈｚ、７−Ｈ）、６．３６（Ｉ　ＨＳｄ、Ｊζ１１Ｈ ｚ、６−Ｈ）、９．５６（ＩＨ，ｄ％　Ｊ＝４Ｈｚ、２２−Ｈ）。

メタノール（ｌＯＭＱ）にＫＯＨを溶かした０、ＩＮ溶液を、エチルエーテル（ １０友ｇ）に化合物（１１Ｘｌ　００ｍｇ、０．２４ミリモル）を溶かした撹は ん溶液に加えた。出発原料がＴＬＣ（溶媒系Ｂ）により検出されなくなるまで、 生成した溶液を室温で９０分間撹はんした。

標準的抽出方法（酢酸エチル、飽和ＮａＣ１，無水硫酸マグネシウム）により化 合物（１５）を単離すると、無色油状物（８６，２ｕ、９６％）が得られた。

イミダゾール（２５０１１９，３，６ミリモル）およびｔ−ブチルジメチルシリ ルクロリドＣ２５０ｍｇ、１．６ミリモル）およびＤＭＦ（２ｘ＆）から成る混 合物を、４ａＱのジメチルホルムアミドに化合物（１５０８６、２Ｒ９，０，２ ３ミリモル）を溶かした撹はん溶液に加えた。出発原料がＴＬＣ（溶媒系Ｂ）に より検出されなくなるまで、生成した均一混合物を５５℃で１５分間撹はんした 。反応混合物のヘキサン抽出により生成物を単離した。有機抽出物を食塩水で洗 浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。粗生成物のヘキサン溶液をシリカゲル ・セップーバック・カートリッジでろ過することにより、化合物（１６Ｘ１３６ １９．９８％）が得られた。ｌ　ＩＲ（薄膜）２９７４．２９３０．１７３６． １４４７．１２８６．１２５８．１１５０．１０８５Ｃト１、ＵＶ（ヘキサン） 、λｍａｘ２６４　ｎｍ、λｍ１ｎ２２７　ｎ１ｓＡ２６４　Ｒ１，９ｔ、’Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ　Ｃ１５）δ、０．０７Ｃ１２Ｈ１ｓ、　５ｔ（ＣＨｓ）＊］、０ ．５５（３ＨＳｓ、１　Ｂ−ＣＨｓ）、０．８６［１８Ｈ，ｇ、　Ｃ（ＣＨ＊） ｓコ、　　１．２　０（３Ｈ，ｄ％　Ｊ−６，８Ｈｚ、　　２　１　−ＣＨ５） 、３．６５（３Ｈ，ｓ、０−ＣＨｓ）、４．１８（Ｉ　Ｈ，ｍ、　３−Ｈ）、４ ．３６（ＩＨ，ｍ、１−Ｈ）、４．８４（ＩＨ％ｄ、Ｊ−１，２Ｈｚ、１９Ｚ− Ｈ）、５．１６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１．２Ｈ２，１９Ｅ−Ｈ）、５．９６（ＩＨ， ｄ、Ｊ＝１１．２Ｈｚ、？−Ｈ）、６．１９（ＩＨ％ｄ、Ｊ−１１．２Ｈｚ、６ −Ｈ）、ＭＳｍ／ｚ（ｔＩｌ／ｅ２４．８に正規化した強度）６０２（Ｍ、ＩＯ ）、４７０（５９）、４１３（７）、３３８（１０）、２４８（１００）。

水素化アルミニウムリチウム（２５１９，０，６５ミリモル）を、０℃でアルゴ ン下無水Ｔ　ＨＰ　（５ｚＱ”）に化合物（１６Ｘ１３６．２１１９．０゜２３ ミリモル）を溶かした撹はん溶液に加えた。懸濁液を０℃で１５分間撹はんし、 ＴＨＦ中１０％の水を滴下することにより、過剰の水素化アルミニウムリチウム を分解させた。懸濁液を１０１１ＱのＴＨＦで希釈し、さらに１５分間室温で撹 はんを続けた。酢酸エチルを用いた標準的抽出により生成物を単離した。無色油 状物として化合物（１７０１１８，４巧）が収率９１％で得られた。ＩＲ（薄膜 ）３４５０．２９５２．２８８６．１４４７．１２５８．１１０５．１０８５． ８３４ｃｍ−’、ｕｖ（ＥｔｏＨ）、λｍａｘ２６４　ｒｕｎ、λｍ１ｎ２２２ 　ＨＳ８％　Ｓ　ｉ　ＣＨ、）、０．５３（３ＨＳｓ、ｌ　８−ＣＨ，）、０． ８５［＋８　Ｈ，ｓＳＳ　ｉ　　Ｃ（ＣＨｓ）ａ］、１．０４（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝ ６．４Ｈｚ、２ｌ−ＣＨり、３．３７および３．６３（ＩＨおよびＩＨ，各々ｍ １２２−ＣＨｔ）、４．１７（ＩＨ，ｍ、３−Ｈ）、４．３５（ＩＨ，ｍ、１− Ｈ）、４．８４（ＩＨ，広いｓ、１９Ｚ−Ｈ）、５．１６（ＩＨ，広いｓ、１９ Ｅ−）１）、６．００（Ｉ　Ｈ，ｄ、Ｊ＝］、２．２Ｈｚ、７−Ｈ）、６．２１ （ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、６−Ｈ）、ＭＳ　Ｍ／ｚ（ｍ／ｅ２４８に正規 化した強度）、５７４．ＣＭ　　、１７）、４４２（６７）、３８３（１１）、 ３０８（１７）、２４８（１００）。

０．５１のジクロロメタンにオキサリルクロリド（３０μＱ、０．３４ミリモル ）を溶かした溶液を、窪素下−６０℃で３峠のジクロロメタンにＤＭＳＯ（５０ μ（，０，７ミリモル）を溶かした撹はん溶液に滴下した。生成した溶液を一６ ０℃で１０分間撹はんし、１＋Ｑのジクロロメタンに化合物（１７Ｘ２７ｉｇ、 ０．０５ミリモル）を溶かした溶液をゆっくりと加えた。混合物を一６０℃で３ ０分間撹はんした。次いで、０　、２　欝Ｑのトリエチルアミンを加え、溶液を さらに５分間撹はんした。生成物である化合物（１８）をエチルエーテルで抽出 し、有機抽出物を飽和ＮａＣ１で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。シ リカゲル・セップーバックろ過により、ＴＬＣ純粋生成物（１７３１９，６２％ ）が得られた。ＩＲ（薄１１Ｋ）２９５４．２９２９．２８８４．２８５７．１ ７２７．１’　４７２．１３７５．１２５６．１０８５．９０９．８８０．８３ ５ｃｉ−’、Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＨＣ１−）δ０．００（１２Ｈ，ｓ、５ｉ−ＣＨ， ）、０．６０（３Ｈ，ｓ、１８−ＣＨｓ）、０．８８［１８Ｈ，ｓ、５ｉ−Ｃ（ ＣＨ３）３］、１．１１（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６　、９　Ｈｚ、　２１　　ＣＨｓ） 、４．２３（ＩＨ，ｍ、３−Ｈ）、４．４３（ＩＨｓ　ａｓ　　１−Ｈ）、４． ９３（Ｉ　Ｈ１広いｓ、１９Ｚ−Ｈ）、５．１９（ＩＦ５広い６．１９Ｅ−”Ｈ ）、６．０７（ｌ　ＨＳｄ、　Ｊ　＝　１　、Ｏ，０）（ｚ、　　７−Ｈ）、６ ．２６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ、６−Ｈ）、９．５４（ＬＨ，ｄＳ　Ｊ＝ ３Ｈｚ、２２−Ｈ）、ＵＶ（ヘキサン）、λｍａｘ　２６４　ｎｍ。

する強度）、５７２（Ｍ　　％　１３）、４４０（５３）、３８３（１１）、３ ０８（１４）、２４８（＋００）、Ｃｓ　４Ｈ＊。ＯｓＳ　ｉ！について計算さ れた正確な質量５７２．４０８１．実測値５Ｌ２．４１１７゜次の条件下で酸化 工程を実施すると、アルデヒド（１８）の収率が改善されに。０．７５ｘＱの無 水ジクロロメタンに１５μｌ２（０，１７ミリモル）のオキサリルクロリドを溶 かした溶液を、アルゴン雰囲気下−６０℃で２５μＱ（０，３６ミリモル）のジ メチルスルホキシドおよび０．２５ｘ１２の無水ジクロロメタンから成る撹はん 溶液に滴下した。混合物を一６０℃で１０分間撹はんした後、０　、５　ａＱの 無水ジクロロメタンに２０．３ｉ９（０，０３５ミリモル）のアルコール（１７ ）を含む溶液をゆっくりと加え、フラッシュをさらに０　、２１１２の無水ジク ロロメタンでリンスした。混合物を一６０℃で３０分間撹はんし、０．３ｇ＋＋ ！（２，１５ミリモル）のトリエチルアミンを一６０℃で加えた。混合物を５分 間撹はんし、０℃に温め、エーテルで抽出した。

エーテル相を食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ，）した。シリカゲル・セップー パックろ過により無色油状物として（１８）が得られ、これをＨＰ　Ｌ　Ｃ（ゾ ルパックス−シル９．４Ｘ２５Ｃ１、ヘキサン中１０％ＥｔｏＡｃ）により精製 すると、純粋なアルデヒド（１８Ｘ１９ｉｇ、９６％）が得られた。痕跡量のみ のアルコールが回収された（０．＋２瀧ｇ）。

実施例２ 側鎖結合：２４−ジホモ−１α、２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミン Ｄ、の合成（化合物２５、第２図）。

（ａ）ヒドロキシスルホン（１９）の製造。

−７８℃でアルゴン雰囲気下３００μｇの無水テトラヒドロフラン（指示薬とし て１．１０−フェナントロリン含有ンに３１ｕ（８４マイクロモル）の２−メチ ル−６−（フェニルスルホニル）−２−（）リエチルシリルオキシ）−ヘキサン （化合物３１．第３図）を溶かした撹はん溶液に、１３μｍ２（９０マイクロモ ル）のジイソプロピルアミン、次いで７０ｔｔＱのｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１ ．３０モル）（９１マイクロモル）を加えた。アルゴン雰囲気下−７８℃で３０ 分間溶液を撹はんし、次いで３００μＱの無水テトラヒドロフラン中６２９のＣ −２２−アルデヒド（化合物１８０！０マイクロモル）を加え、−７８℃で１時 間撹はんした。１１の飽和ＮＨ，ＣＩ溶液を加えることにより混合物を分解し、 ０℃に温め、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを水および食塩水で洗浄し、無 水Ｍｇ５Ｏｉで乾燥し、ろ過し、濃縮した。プレバラティブＨＰＬＣ（ゾルパッ クス−シル・カラム９゜６Ｘ２５ＣＬ溶媒系：ヘキサン中１０％酢酸エチル）に より、エピマーの混合物として０　、６　災ｇの未反応アルデヒドおよび６　、 ６　ｍｇのヒドロキシスルホン（１９）が得られた（収率７７％）。

（ｂ）　２’　４−ジホモ−１α、２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロ−ビタ ミンＤＩ（２５）。

メタノール（１，Ｏｓ＋ｉ２）にＮａｔＨＰＯ＊を溶かした飽和溶液を、１゜Ｏ ｘＱの無水テトラヒドロフラン中にヒドロキシスルホン（１９０３゜３　ｍｇ） を含む撹はん溶液に加え、次いで粉末状無水Ｎ５ｔＨＰＯ−（１６０１１１９） を加えた。混合物をアルゴン下で３０分間撹はんし、０℃に冷却した。次いで、 新鮮な５％ナトリウムアマルガム（約４００１９）を加え、混合物を１６時間５ ℃で撹はんした。混合物をｓｉｔのへキサンで希釈し、撹はんを１５分間続けた 。溶媒を傾けて分離し、固体物質をヘキサンで洗浄した（３×５ＭＱ）、有機溶 液を合わせ、氷および飽和ＮａＣ］溶液を加えた。有機層を分離し、ヘキサン中 セップーバック・カートリッジに通した。ＨＰＬＣ精製後、２．０ｘ９Ｃ７１％ ）ノ保護Δ″″−２４−ジホ％−１，２５−（ＯＨ）、Ｄ、４２１）および少量 の２２−ヒドロキシル化生成物（２２）が得られた（ゾルパックス−シフＬ９． ４Ｘ２５カラム、ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ）、保護トリオール（２１Ｘ２ｎ ）を１．０Ｒρの無水ＴＨＦ’に溶かし、この溶液にＴＨＦ（５０Ｈｇ）中テト ラブチルアンモニウムフルオリド（１モル溶液）を加えた。混合物をアルゴン下 ５０℃で１時間撹はんした。

次いで、エーテル（８１１２）を加え、有機相を飽和ＮａＣ１で洗浄した。

溶媒を除去し、残留物をヘキサン中ｌｏ％の２−プロパツールに溶かし、シリカ ・セップーパックでろ過した。ＨＰＬＣ（ヘキサン中２０％２−プロパツール、 ゾルパックス−シル９．４　ｘ　２５ＣＩｌ＋）により、所望の生成物であるジ ホモ化合物（２５）０．６ｘｙが得られた。ＵＶ（ＥｔＯＨ）λｍａｘ２６４　 ｎｍ、λｍｉｎ２２８ｎｍ、　””’＝１．８７、ＩＨＮ　Ｍ　Ｒ（ＣＤ　ＣＩ ｓ）、０．５５（３Ｈ，ｓ、１８−ＣＨｓ）、１．００（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．６ Ｈ２，２１−ＣＨ，）、１．２３（６Ｈ％ｓ、２６．２７　　ＣＨｓ）、４．２ ３（ＩＨ％ａｙ、３−Ｈ）、４．４３（ＩＨ，ｍ、ｌ　−Ｈ）、５．００（ＩＨ ，広いｓ、＋９Ｚ−Ｈ）、５．３２（Ｉ　Ｈ１広い５１１９Ｅ−Ｈ）、５．２９ （２Ｈ，ｍ、２２Ｈおよび２３Ｈ）、６．０１（ＩＨＳｄ、Ｊ＝　１１．３Ｈｚ 、７−Ｈ）、ＭＳ　ｍ／ｚ（相対強度）４４２（Ｍ＋、１５）、４２４（２３） 、４０Ｂ（３３）、３９１（７）、２８７（１１）、２８５（１０）、２６９（ ２７）、２５１（２３）、１５２（３３）、１．３４（１００）、１１６（６） 、５９（２０）、Ｃ２−Ｈ−６Ｏ５に関して計算された正確を質量４４２．３４ ４６、実測値４４２．３４４１゜実施例３ 側鎖結合：　２４−）リホモー１α、２５−ジヒドロキシ−２２−ゾヒドロビタ ミンＤ、の合成（化合物２６、第２図）。

（ａ）ヒドロキシスルホン（２０）の製造。

アルゴン雰囲気下−７８℃で無水テトラヒドロフラン５００μＱ（指示薬として １．１０−フェナントロリン含有）に５８６（１５１マイクロモル）の２−メチ ル−７−（フェニルスルホニル）−２−（トリエチルシリルオキン）−へブタン （化合物３５、第３図）を溶かした撹はん溶液に、２３μＱ（１６０マイクロモ ル）のジイソプロピルアミン、次いで１０６μＣのｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン９１ ．５モル）（１６０マイクロモル）を加えに。溶液をアルゴン雰囲気下−７８℃ で３０分間撹はんし、次いで３００μＱの無水テトラヒドロフラン中７友９のＣ −２２−アルデヒド（化合物１８０１２マイクロモル）を加え、１時間撹はんし た。１峠の飽和ＮＨ，ＣＩ溶液を加えることにより、混合物をその温度で分解さ せ、０℃に温め、酢酸エチルで抽出した。

酢酸エチルを水および食塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮 した。プレパラティブＨＰＬＣ（ゾルパックス−シル９゜４Ｘ２５ｃｚ、溶媒系 、ヘキサン中１０％の酢酸エチル）により、エピマー混合物として０　、４１９ の未反応アルデヒドおよび７．５ｇのヒドロキシスルホン（２０）が得られた（ ７８％）。

（ｂ）２４−トリホモ−１，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ、 （２６）。

エタノール（＋、０１ｆ２）中ＮａｔＨＰＯａの飽和溶液を、ヒドロキシスルホ ン（２０Ｘ７　、５　ｕ）および１．０＋ｆ！の無水テトラヒドロフランから成 る撹はん溶液に加え、次いで粉末状無水Ｎａ、ＨＰＯ□（１６０ｉ９）を加えた 。混合物をアルゴン下で３０分間撹はんし、０°Ｃに冷却した。次に、新鮮なナ トリウムアマルガム５％（約４００ｘ９）を加え、混合物を５℃で１６６時間撹 んした。混合物を５ＲＱのヘキサンで希釈し、１５分間撹はんを続けた。溶媒を 傾けて分離し、固体物質をヘキサンで洗浄した（３×５λ１２）。有機相を合わ せ、食塩水で洗浄し、分離し、乾燥し、濃縮した。残留物を、ヘキサン中１０％ の酢酸エチル中でセップーバック・カートリッジに通した。ＨＰＬＣ精製により 、２．１２幻の保護Δ”−２４−）リホモー１．２５−（○Ｈ）。

Ｄ、（２３）および１．３３料の２２−ヒドロキシル化生成物（２４）が得られ た（ゾルパックス−シル９．４Ｘ２５カラム、ヘキサン中１０％酢酸エチル）。

化合物（２３Ｍ２　、１１９）を１．ＯｘＱの無水テトラヒドロフランに溶かし 、この溶液に、テトラヒドロフラン中５０μＱのテトラブチルアンモニウムフル オリド（１モル溶液）を加えた。混合物をアルゴン下５０℃で１時間撹はんした 。次にエーテルを加え、有機相を食塩水で洗浄した。エーテル相を無水Ｍｇ５Ｏ ，で乾燥し、ろ過し、ａ縮した。残留物をヘキサン中３０％の２−プロパツール に溶かし、セップーパックに通した。ＨＰＬＣ精製（ヘキサン中２０％２−プロ パツール、ゾルパックス−シル９．４Ｘ２５ＣＪｌカラム）により、所望のトリ ホモ生成物、化合物（２６８０，８ｘ９）が得られた。

’ＨＮＭＲ：　（ＣＤＣＩ、）０．５６（３ＨＳＳ、１８−ＣＨ，）、１．００ （３Ｈ，ｄＳＪ＝６．６Ｈｚ、２＋−ＣＨ５）、１．２３（６Ｈ，ｓ、２６゜２ ７　　ＣＨｓ）、４．２３（Ｉ　ＨＳｍ、　　３−Ｈ）、４．４３（Ｉ　８％ｍ 、　　１−Ｈ）、５．００（Ｉ　Ｈ，広いｓ、１９Ｚ−Ｈ）、５．３２（Ｉ　Ｈ ，広い５１１９Ｅ−Ｈ）、５．２９（２Ｈ，ｍ、２２Ｈおよび２３Ｈ）、６．０ １（ＩＨ，ｄ、　Ｊ　＝　１１．３　Ｈｚ、　？−Ｈ）：ＭＳｍ／Ｚ（相対強度 ）４５６（Ｍ　　）（１１）４３８（５０）、４２０（３０）、４０２（８）、 ２８７（１０）、２６９（２３）、２５１（２３）、１５２（３５）、１３４（ １００）。

実施例４ スルホン側鎖単位の合成（第３図） （ａ）スルホン側鎖残基の製造（３２）無水ＴＨＰ（２５＋１２）に４−クロロ バレリルクロリド（２７Ｘアルドリツチ、３ｇ、１９．２ミリモル）を溶かした 溶液を、−１０’Ｃで乾燥ＴＨＦ２ＳｘＱ中臭化メチルマグネシウム（エーテル ９３モル溶液１２．９ｘｃ）を含む溶液にアルゴン下で３０分間にわたって激し く撹はんしながら滴下しＬ０次いで、反応混合物を２時間以内で室温に放暖し、 次に水によりクエンチングし、希塩酸により中和した。

混合物をエーテルで抽出し、有機層を合わせて水洗し、硫酸ナトリウムで乾燥し た。溶媒を除去後、残留物を真空蒸留すると、無色液体としてクロロ−アルコー ル（２８）が得られた（２．１？、７０％）。

次いで、無水ジメチルホルムアミド（５峠）中クロローアルコール（２８Ｘ１． ５９．１０ミリモル）を、チオフェノール（１，３２９，１２ミリモル）および カリウム・ｔ−ブトキシド（１，３２９，１１，３ミリモル）および無水ジメチ ルホルムアミド（２５ｘ１２）から成る撹はん溶液に加えた。反応混合物を室温 で一夜撹はんし、溶液をジクロロメタンおよび水量に分配した。有機層を炭酸ナ トリウム水溶液、水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を真空濃 縮し、ヘキサン−酢酸エチルを用いたシリカゲル・フラッシュ・クロマトグラフ ィーにより粗油状物を精製した。硫化物（２９Ｘ２．２９．９８％）が無色液体 として得られた。次に、硫化物（２９Ｘ１．Ｏ１９，４，５ミリモル）を乾燥ジ クロロメタン（４，０Ｉｆｆ）に溶かし、３−クロロ過安息香酸（２，５９，１ １，６ミリモル、アルドリッチ８０−８５％）を撹はんし、時々冷却しながら分 割して加えた。反応混合物を２時間撹はんし、次いでｌ・０％重炭酸ナトリウム によりクエンチングした。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウム水溶液および食 塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を真空除去し、ヘキサン−酢 酸エチル混合物を用いたシリカゲル・フラッシュ・クロマトグラフィーにより粗 油状物を精製すると、無色液体としてスルホン（３０８１，１９，９７％）が得 られた。スルホン（３０）（１，３９，５，１ミリモル）およびイミダゾール（ １，５９，２２，７ミリモル）および乾燥ジメチルホルムアミド（ｓｏｘｃ）か ら成る撹はん溶液に、トリエチルシリルクロリド（１，１５ｇ、７．７ミリモル ）を加えた。反応混合物を２時間室温に保ち、次いでジクロロメタンで希釈した 。混合物を塩化アンモニウム水溶液および水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウ ムで乾燥し、溶媒を真空除去した。シリカゲル・フラッシュ・クロマトグラフィ ーにより残留物を精製した。ますへキサエチルジシロキサンがヘキサンにより溶 離された。トリエチルシリル保護スルホン（３Ｄ（１，，８ｇ、９７％）が、ヘ キサン−酢酸エチル９．１により無色液体として溶離された。ＩＲ（ストレート ）：３０４５．２９４０．１４４０．１３６０．１１３０．１０２０ｃｔ−’、 ’ＨＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ５）δ０．５１．８（６Ｈ，ｑ、Ｊ＝６ ．２Ｈｚ。

５ｉ−ＣＨｔ）、０．８９９（９Ｈ，ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、５Ｎ−Ｃ−ＣＨｓ） 、６０．５１８（６Ｈ−Ｑ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、５ｉ−ＣＨｔ）、０．８９９（９ ＨＳｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、５ｉ−Ｃ−ＣＨ，）、１．１４２（６ＨＳｓ、Ｃ１− １ｓ）、１．３０７−１．４６２（４Ｈ，ｍ）、１．６５５−１．７３８（２Ｈ ｓ　１１％　Ｈ−４）、３．０８０−３．１２２（２Ｈ，ｔｔｒ、　Ｈ−２）、 ７，５６７（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、Ｈ−アリール・メタ）、７．６４８（ ＩＨ，ｔ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、Ｈ−アリール・バラ）、７．９１６（２Ｈ，ｄ。

Ｊ＝６．８３Ｈｚ％Ｈ−アリールーオルト）、ＭＳ（Ｅ　Ｉ、７０ｅＶ）：ｍ２ ２７（１８）、＋７３（２４）、１０３（２２）、７５（４５）、５５（３３） 。

（ｂ）スルホン側鎖単位の製造（３５）。

無水テトラヒドロフラン（１０ｆｆｉＣ）に６−ブロモヘキサノイルクロリド（ ３２Ｘ３，８９．２．８ｉＱ、１８ミリモル）を溶かした溶液を、アルゴン雰囲 気下１５−２０分間にわたって、−１０℃で臭化メチルマグネシウム（エーテル 中３モル溶液１４ｘＣ）および無水テトラヒドロフラン（１５＋１２）から成る 溶液に激しく撹はんしながら滴下した。

混合物を室温で２時間攪はんし、０℃に冷却し、ｌ：ｌ希釈した塩酸により注意 深く分解した。混合物をエーテルにより抽出し、有機層を合わせて水洗し、無水 硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮すると、無色油状物としてブロモ・アルコール （３３）が得られた（３．６９．９４％）。

７０℃で４−１／２時間、無水ジメチルホルムアミド中ベンゼンスルフィン酸ナ トリウム塩（３，３ｙ、２０ミリモル）によりブロモ−アルコール（３，４ｙ、 １６ミリモル）を処理した。混合物を氷に注ぎ、ジクロロメタンで抽出し、ＩＮ −ＭＣＩ、水、ｌＯ％ＮａＨＣＯｓ溶液で洗浄し、無色Ｍｇ５Ｏａで乾燥し、ろ 過し、濃縮すると、スルホン（３４）がマ専られ、これをシリカゲル１こよるフ ラッシュ・クロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン中４０−５０％酢酸エチ ルで溶離すると、ある程度の対応するスルフィン酸エステル（４，１８９，９８ ％）を含むスルホンが得られた。ＭＳ、ｍ／ｚ２７０（Ｍ　’）、２無水ジメチ ルホルムアミド（１３１Ｑ）にスルホン（３４８４Ｌ　　１４ミリモル）および イミダゾール（３，８ｇ、５５ミリモル）を含む撹はん溶液に、トリエチルシリ ルクロリド（４，６９，５，Ｉｘ（ｉ、３０ミリモル）を加えた。反応混合物を 室温で２時間撹はんし、氷水に注ぎ、エーテルで抽出し、無水Ｍｇ５Ｏａで乾燥 し、ろ過し、濃縮した。残留物をフラッシュ・クロマトグラフィーにより精製し た。まずヘキサンによりヘキサエチルジシロキサンが溶離され、ヘキサ２９３％ 酢酸エチルにより、ある程度のスルホンを含むスルフィン酸エステルが溶離され 、ヘキサン中１０％酢酸エチルにより、保護された純粋なスルホン（３５）が溶 離された（３．４９．６０％）工Ｃ２゜Ｈ３ｓ　Ｏ５ＳＳｉ１＝関する分析にお ける計算ｍ：ｃ６２．４５％、８９．４３％、Ｓ３８．３４％、実測値Ｃ６１， ９７％、８９．４５％、Ｓ８．３３％、ＭＳ、＋ｎ／ｚ（相対強度）３５５　（ １０００Ｍ”　−２９）、２２７（１５）、１７３（３５）、１０３（４３）、 ７５（９５）、５５（２３）、ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ５）、０．５４ （６Ｈ，ｑＳ　Ｊ＝７Ｈｚ、５ｉ−ＣＨｔ）、０．９４（９Ｈ，ＬＳＪ＝８Ｈｚ 、５ｉ−Ｃ−ＣＨ，）、１．１５（６Ｈ。

ｓ、ＣＨｓ）、１．３１−１．３６（４Ｈ，＋ｏ）、３．０８−３．＋　２（２ Ｈ。

ｍ、）Ｉ−２）、７．５７（２Ｈ，ｔ％　Ｊ＝６．８Ｈｚ、Ｈ−アリール−メタ ）、７．６６（ＩＨＳｔＳＨ−アリール・パラ）、７．９２（２８％ｄ％Ｊ＝６ ．８Ｈｚ、Ｈ−アリール・オルト）。

生物学的活性 当業界で周知の確立された検定法を用いることにより、分化活性およびカルシウ ム血性活性の両方について新規同族体（２５）を試験した。下記実施例では、検 定方法および得られた結果をさらに詳しく記載する。

実施例５ ＨＬ−６０細胞におけるジホモ化合物（２５）の分化活性の測定（第１表）。

試験化合物に応じたＨＬ−６０細胞（ヒト白血病細胞）の分化程度を、３種の異 なる検定法、すなわちＮ　Ｂ　Ｔ−還元、食作用およびエステラーゼ活性により 評価した。最初の２つの検定法は、デル力等によるアメリカ合衆国特許第４７１ ７７２１号記載の一般的方法に従い実施した。分化マーカーとして非特異的酸エ ステラーゼ活性を測定する第３の検定法は、シグマ・ケミカル社（セントルイス 、ミズーリ）から入手され得るシグマ・キット９０番において与えられた方法に 従い実施した［また、オストレム等、「プロシーディンゲス・オブ・ザ・ナショ ナル・アカデミ−・オブ・サイエンシーズ・才ブ・ザ・ニー・ニス・エイ」、ｌ 土、２６１０−２６１４頁（１９８７年）、オストレム等、「ジャーナル・オブ ・バイオロジカル・ケミストリー」、ムロ２，１４１６４−１４１７１頁（１９ ８７年）を参照］。結果を下記第１表に示す。様々な濃度の１　、２５　　（Ｏ Ｈ）ｔＤｓ（比較標準として使用）またはビタミンＤ３試験化合物による処理か ら得られた分化細胞のパーセンテージとして表す。

第１表 培養中のＨＬ−６０細胞における１、２５−（ＯＨ）ｔＤｓおよび側鎖ジホモ化 合物の分化活性の比較。

分化した細胞の％ 濃度　　　エステ 投与された化合物　　　ΩＪａ　　５二竺　　象色肚　　凡１工１　、２５−　 （ＯＨ）！Ｄ　ｓ　　ＬＸ　１０−’Ｍ　　　９１±２　９０±３　９０±２１ ×１０ノｌｉ１　　６１±４　５６±２　５５±４１×１０−１　　３０±３　 　　３１±２　　３４±４２４−ジホモ−１，２５ｘｌＯ−１Ｍ　　　９２±２ 　９３±３　９２±２５−（ＯＨ）！−２２−ｌＸｌ０−”１　　７ｇ±４　７ ７±３　７８±３デヒドロビタミ：／　Ｄ　ｓ　　５ｘ　１０−１Ｍ　　　６７ ±４　　６９±２　６９±３（化合物２５）　　　　　　ｌＸｌ０−”ｌｉ　　 　４９＋２　　５０±３　　４８＋３５ｘ　１０−”Ｍ　　　３６±４　　３６ ±４　４０±３実施例６ ジホモ化合物（２５）のカルシウム血性活性。

（ａ）ＩｉＪ＆内カルシカルシウム輸送活性表）。

ハーランースブラーグ・ドーリ−・カンパニー（マディソン、ライスコンシン） から離乳したでの雄ラットを得、須田等により記載された（「ジャーナル・オブ ・ニュートリジョン」、１００．１０４９−１０５２頁、１９７０年）低カルシ ウムくる病発病性食餌（０，０２％Ｃａｘ　Ｏ−３％Ｐ）を与えた。全部で４週 間、無制限にこの食餌を与えてそれらを育てた。第３週の最後に、動物を各々６ ラツトから成る群に分けた。１群には、７日間毎日賦形剤（０，１＋Ｑの９５％ プロピレングリコール、５％エタノール）の腹腔内注射を行った。

残りの群には、同じ期間にわたって、同量ではあるが１２．５ｎ９または２５ｎ ９の１．２５−（ＯＨ）ｔＤ３または１２５ｎｇの２４−ジホモ−１α、２５− ジヒドロキン−２２−デヒドロビタミンＤＳ（化合物２５）のいずれか１用量を 含む賦形剤を投与した。最終投与の２４時間後に動物を殺し、腸を摘出し、ノ＼ ロランおよびデル力による記載に従い（［アーカイブス・オブ・バイオケミスト リー・アンド・バイオフィジックス」、主１」−１４７７−４８６頁、１９８１ 年）、十二指腸部分を用いて腸内カルシウム輸送を測定した。結果を下８２第２ 表に示す。

第２表 ラットにおける１　、　２　Ｓ　−（ＯＨ）ｔＤ　ｓおよび側鎖同族体の腸内カ ルシウム輸送活性。

１！ｉ　　　　　　　Ｃａ輸送 １．２５−（ＯＨ）ｔＤｓ　　　　　　１２．５　　　　１１．２立０．６２５ ．８　　　　１３．４±１．２ ２４−ジホモ−１，２５−１２５，０６，Ｂ±０．４５（ＯＨ）！−２２−デヒ ドロ ビタミンＤＳ（化合物２５） （ｂ）骨カルシウム動員の測定（第３表）ハーランースブラーグ・ドーリ−・カ ンパニーから離乳したでの雄ラットを得、須田等により記載された（「ジャーナ ル・オブ・ニュートリジぢン」、１００．１０４９−１０５２頁、１９７０年） 低カルシウム（０，０２％Ｃａ、０．３％Ｐ）ビタミンＤ−欠損食餌を４週間与 えた。第３通口の最後に、動物を各々６動物から成る群に分け、指示用量（第３ 表参照）を０　、１　ｘＱの９５％プロピレングリコールおよび５％エタノール に溶かしたものを投与した。対照群には溶媒賦形剤のみを投与した。他の群には 、７日間毎日指示用量の１．２５−（ＯＨ）、Ｄ、またはジホモ化合物（２５） を投与した。原子吸収法により、７日間の投与の最後に血清カルシウムを測定し た。これら２案験の結果を下記′Ｍ３表に示す。

第３表 ラットにおける１　、　２５　　（ＯＨ）ｔＤ　＊および側鎖同族体の骨カルシ ウム動員活性（血清カルシウム濃度）投与され　　　　　　　　量　　　　　　 血清カルシウムた化合物　　　　　島ν里１１拝ｌ　　　（平均士標準誤差）翼 ９％ １．２５−（０１（）ｔＤＩ　　　　　　　１２．５　　３．７±０．１７　　 ４．８±０．０８２５．０　　　４．１±０．０７　　４．８±０．０８７５． ０　　　４．６±０．０９　　　　　−−２４−ジホモ−２５，０３，６±０． １６　　　−−１．２５−（ＯＨ）ｘ−１２５，０３，７±０．１３　　４．３ ６±０．１５２２−デヒドロ　　　　　　　２５０．０　　　４．１±０．０５ 　　　　−−ビタミンＤｓ　　　　　　　　　５００，０　　　３．８±０．１ １　　　　−−（化合物２５） 第１表に示された結果は、ジホモ類縁体（２５）が、白血病細胞から正常単核白 血球への分化誘発において１．２５−（ＯＨ）ｙＤｓよりも明らかに強力である ことを明確に示している。例えば、１×１０−”Ｅ−ル（１）濃度で、１．２５ −（ＯＨ）ｔＤｓは５５−６１　％（Ｄ分化細１ｍを生じるが、化合物（２５） は同濃度で７８％の分化を誘発する。５×１０ノモル濃度のジホモ類縁体により 誘発される場合（約９２％）と同程度の分化（〜９０％）を達成するのにｌＸｌ ０−’モル濃度の１゜２６−（Ｏ）Ｉ）、Ｄ、が要求されることを考えると、類 縁体（２５）は分化剤として１．２５−（ＯＨ）ｔＤａよりも５倍程度強力であ るという結論に達し得る。

全く対照的に、ジホモ化合物は、１　、２５−（ＯＨ）ｔＤ　、と比べて非常に 低いカルシウム血性活性を示す。この結論は、第２表および第３表の結果により 支持される。第２表に示された腸内カルシウム輸送検定は、例えば、７日間１２ ．５または２５　ｎｓ＋／日の用量で投与された場合、既知活性代謝物、１．２ ５−（ＯＨ）、Ｄ、が予想通り非常に明白な（対照と比べて）応答を誘発するこ とを示す。しかしながら、新規ジホモ化合物（２５）の場合、応答を誘発するの に７日間！２５ｎ９／日の用量を必要とするが、そのような高い用量レベルでも 応答は低調であり、１０倍低い用量の１．２５−（０１（）ｔＤｓにより誘発さ れる場合の半分より僅かに高いだけである。従って、この検定では、新規ジホモ 類縁体は１．２５−（ＯＨ）ｔＤａよりも少なくとも１０倍活性が低い。

第３表に示された骨カルシウム動員検定の結果から、同じ結論が誘導され得る。

この点について、１２．５および２５ｎ９の１．２５−（ＯＨ）ｔＤａが誘発す る場合と同程度の応答を達成するためには、各々１２５および２５　Ｏｒ１ｇ７ 日（７日間投与）の用量のジホモ類縁体（２５）が必要とされる。ジホモ化合物 の用量をさらに増加させても（５００ｎ９／日まで）、骨カルシウム動員応答は それ以上増強されず、むしろ抑制されるという事実も注目に値する（第３表参照 ）。第二の実験では（これも第３表に示されている）、１．２５−（ＯＨ）ｔＤ ａはまた１２．５および２５ｎｉ＋／日の用量で（対照と比べて）非常に顕著な 応答を誘発し、ジホモ類縁体は１２５　ｎ９／日の用量では活性を示さなかった 。第三の実験では、ｌ０００ｎ？／日以下の用量範囲においてジホモ類縁体（２ ５）を試験した結果、化合物はいかなる用量レベルでもカルシウム動員応答を誘 発せず゛ミ本質的にこの物質が、骨を犠牲にした血清カルシウムの上昇活性を伴 わないことを示した。

従つて、これらの骨動員検定は、第２表のカルシウム輸送データと完全に一致し 、新規ジホモ類縁体（２５）が、そのカルシウム血性作用において！、２５−（ ＯＨ）ｔＤｓよりも何倍も活性が低いことを明らかに示している。

この発明のトリホモ化合物（２６）についても同タイプの活性パターンが観察さ れる。この物質はまた、ＨＬ−６０細胞分化誘発において明白な活性を示し、か つラットにおける血清カルシウム・レベルに関して（対照と比べて）顕著な応答 を誘発しないことから、非常に好ましく劇的に向上した分化／カルシウム血性活 性割合を呈する。

勿論、このタイプの活性パターンは、新生物疾患の処置における分化剤としての 使用を目的として設計された化合物にとってまさに望ましいものである。望まし い活性である悪性細胞の細胞分化作用は非常に顕著であり、望ましくない活性で あるカルシウム血性作用は劇的に低減されているため、非常に大きく高められた 分化／カルシウム血性割合を示している。既知ｌα−ヒドロキシビタミンＤ化合 物は、白血病の処置における有効な治療剤であることが示されている（頭出等、 アメリカ合衆国特許第４３９１８０２号）。これに引用された生物検定データに 基づくと、この発明の新規側鎖ホモ化合物は、先行技術による化合物と同じ用量 レベルで投与された場合、先行技術による化合物の望ましくないカルシウム血性 活性を全くまたはその１０分の１未満しか呈しないことにより、処置対象におい て過度に高い血中カルシウム濃度を生じるといった問題を大きく排除するという 結論に達し得る。さらに第１表に示された結果に基づくと、新規ホモ化合物は、 悪性細胞、特に白血病細胞に対して非常に高い分化活性を呈することにより、そ れらの治療利益をさらに高めることか予想され得る。それ故、この発明の新規化 合物は、悪性疾患の分化療法の概念の有効な実践具体例を示すもので、それらの 活性パターンは、それらが前記処置にとって好ましい治療剤であることを明白に 示唆している。

処置目的の場合、これらの化合物は、無害な溶媒に溶かした溶液、または適当で 無害な溶媒または担体中の乳液、懸濁液もしくは分散液、または丸薬、錠剤もし くはカプセルとして当業界で周知の慣用的方法により製剤化され得る。それらの 製剤はまた、他の医薬的に許容し得る非毒性賦形剤、例えば安定剤、酸化防止剤 、結合剤、着色剤または乳化もしくは風味調整剤を含有し得る。

これらの化合物は、適当な無菌溶液の注射または静脈内注入により、または消化 管経由の経口用量形態で有利に投与される。ヒト白血病の処置の場合、この発明 のホモビタミンＤ化合物は、白血病細胞からマクロファージへの分化を誘発する のに充分な用量で対象に投与される。適当な用量は１日当たり０．５μｇ〜５０ μりであり、用量は、当業界で充分理解されているように、病気の重症度または 対象の反応もしくは状態に従い調節され（すなわちさらに増量され）得るものと する。

ＦＩＧ、　ｆ ＦＩＧ、３ ＣＨ３ 国際調ＴＬ＠告 １ｍ＃１Ｉｌａｌ＃ｅ＋＋ｌ　ｉＬＩｌｍｌ、ｌＩ＋４１１１１１１．　　ＰＣ τ／υＳ　８９１０ｉ６３２国際調査報告

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記構造 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘ、ＹおよびＺは、同一または異なり得、水素およびヒドロキシ保護基 から成る群から選ばれ、ｎは３または４である）を有する化合物。
2. （２）Ｘ、ＹおよびＺが各々水素である、請求項１記載の化合物。
3. （３）２４−ジホモー１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３ 。
4. （４）２４−トリホモー１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ ３。
5. （５）下記構造 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘ、ＹおよびＺは、同一または異なり得、水素およびヒドロキシ保護基 から成る群から選ばれ、ｎは３または４である）を有する化合物。
6. （６）医薬的に許容し得る賦形剤と一緒に請求項１記載の少なくとも１種の化合 物を含む医薬組成物。
7. （７）２４−ジホモー１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３ を含有する請求項６記載の医薬組成物。
8. （８）２４−トリホモー１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ ３を含有する請求項６記載の医薬組成物。
9. （９）約０．５μｇ〜約５０μｇの量でビタミン同族体を含有する請求項７記載 の医薬組成物。
10. （１０）約０．５〜約５０μｇの量でビタミン同族体を含有する請求項８記載の 医薬組成物。
11. （１１）悪性細胞における細胞分化の誘発および増強方法であって、前記細胞を 請求項１記載の少なくとも１種の１α−ヒドロキシビタミンＤ同族体に晒すこと を含む方法。
12. （１２）１α−ヒドロキシビタミンＤ３同族体が、２４−ジホモー１α，２５− ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３である、請求項１１記載の方法。
13. （１３）１α−ヒドロキシビタミンＤ３同族体が、２４−トリホモー１α，２５ −ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３である、請求項１１記載の方法。
14. （１４）新生物疾患にり患した対象に、請求項１記載の１α−ヒドロキシビタミ ンＤ同族体の有効量を投与することを含む、新生物疾患の処置方法。
15. （１５）投与される１α−ヒドロキシビタミンＤ同族体が、２４−ジホモー１α ，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３である、請求項１４記載の 方法。
16. （１６）投与される１α−ヒドロキシビタミンＤ同族体が、２４−トリホモー１ α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３である、請求項１４記載 の方法。