JPH03123796A - 新規なヘキサペプチド、その塩及び抗アレルギー剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明は、新規なヘキサペプチド、その塩及び抗アレル
ギー剤に関する。

［従来の技術］ 各種アレルギー疾患の予防及び治療のために種々の薬物
が提案され、開発が行われ、既にいくつかが市販に供さ
れている。

アレルギー症状のうち、即時型アレルギー反応である気
管支喘息、じん麻疹、アレルギー性鼻炎などは■型アレ
ルギー反応として分類される。このＩ型アレルギー反応
は、発症機序および抗アレルギー剤の作用機序から一般
に次の三段階から成るものと考えられている。すなわち
、最初体内に侵入した外来性抗原に対して、マクロファ
ージ、Ｔ細胞及びＢ細胞の相互作用によってＩｇＥ抗体
が産生され、このＩｇＥ抗体が組織の肥満細胞や血中の
好塩基球のＦｃレセプターに固着して感作が成立するこ
とになる。この過程が第１段階である。つぎに、再び外
来抗原が体内に侵入すると、細胞のＦｃレセプターに固
着したＩｇＥ抗体と外来性抗原が結合し、抗原抗体反応
が引き金となって細胞膜酵素の活性化、細胞内へのカル
シウムイオンの流入などが起こり、それによって酵素反
応などの生化学的変化、脱顆粒などの組織学的変化が引
き起こされる。その結果、ヒスタミンや５Ｒ８−Ａなど
のケミカルメデイエータ−（化学伝達物質）が細胞外へ
遊離される。この過程が第２段階である。上記、第２段
階で細胞外に遊離したケミカルメデイエータ−は、平滑
筋の収縮、毛細血管透過性の亢進及び粘液の分泌を促進
し、種々のアレルギー症状を惹起する。この過程が第３
段階である。

従来から知られている抗アレルギー剤のうち、非特異的
減感作療法剤及び抗体産生抑制剤は第１段階に作用する
薬物である。しかし、この第１段階のみに特異的に作用
する薬物は市販されていない。第２段階に作用する薬物
としては、クロモグリク酸ナトリウム（以下、ＤＳＣＧ
と略す）、トラニラストなどのケミカルメデイエータ−
抑制剤がある。また抗ヒスタミン剤及び気管支拡張剤は
第３段階に作用する薬物である。更に特公昭６０−２３
１８号公報には抗アレルギー性ペプチドについての開示
がなされている。

上記公報によればこのペプチドは下記の一次構造式 ％式％ によって示されるように、ＩｇＥ抗体のＦｃ領域のアミ
ノ酸残基５個から成るＩｇＥ抗体由来のペンタペプチド
である。

このペプチドは第１段階のＩｇＥ抗体産生を抑制する作
用は確認されていないが、第２段階の最初に起こる肥満
細胞へのＩｇＥ抗体の結合を阻止すると共に、第２段階
の既に結合したＩｇＥ抗体をこのペプチドで置換するこ
とによって、アレルギーを遮断する性質をもつものと考
えられる。

［発明が解決しようとする課題］ 従来の抗アレルギー剤の開発は、上記のアレルギー症状
発症の３つの段階のうちの１つの段階に作用する薬物の
開発に向けられ、この３つの段階の連鎖をいずれかの段
階で遮断することによってアレルギー症状発症を予防し
、又は治療する療法の研究が行われてきた。そしてこの
ような研究によるアレルギー症状発症の３つの段階のう
ちの１つの段階に作用する薬物の開発によって一応の効
果が期待される療法が開発されている。

しかしながら、既知のこうした化学療法剤は上記の３つ
の段階の連鎖を完全に遮断するものではない。そのため
、３つの段階の１つに作用する薬剤と他の１つに作用す
る薬剤とを組み合わせて用いることによって、連鎖の遮
断を完全なものとする発想のものに複数個の薬剤を組み
合わせて使用することも行われているが、その効果は必
ずしも期待通りのものではない。

そこで、単一の薬剤で上記のアレルギー症状発症の３つ
の段階のうちの複数の段階に作用しうる薬剤が開発され
た場合には、抗アレルギー剤としての効果が飛躍的に増
大されうることが期待され、このような薬剤の開発が望
まれているのである。

また上記のアレルギー症状発症のメカニズムから、Ｉｇ
Ｅ抗体のＦｃ領域由来のペプチド又はそれと類似するペ
プチドを開発することによって優れたアレルギー剤が入
手できる可能性も考えられ、このようなアプローチから
の新規なペプチドの開発も期待されていたのである。

本発明は、ＩｇＥ抗体のＦｃ領域のペプチド部分又はそ
の類似ペプチドを種々合成し、優れた薬理活性をもつ抗
アレルギー性ペプチドを提供することを目的とする。

［課題を解決するための手段］ 上記目的を達成するため、本発明者らはＩｇＥ抗体のＦ
ｃ領域にみられるペプチドに着目し、種々のオリゴペプ
チドを合成して、その抗アレルギー活性を検討した結果
、Ｈ−Ａｌａ−８ｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ−ＯＨで表わされるヘキサペプチドがヒスタミン遊離
を抑制するとともにＩｇＥ抗体産生を抑制することを見
出し、本発明を完成した。

すなわち本発明は、 （１）次の式ＣＩ） Ｈ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
−ＯＨ［Ｉ　］（ただし、Ａ１ａはＬ−アラニン残基、
ｓｅｒはＬ−セリン残基、ＡｓｎはＬ−アスパラギン残
基、ＰｒｏはＬ−プロリン残基、Ｇｌｙはグリシン残基
、ＬｙｓはＬ−リジン残基を示す）で表されるヘキサペ
プチド又はその薬学的に許容される塩。

（２）上記（１）のペプチド又はその薬学的に許容され
る塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。

に関するものである。

本発明のＨ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ
−Ｌｙｓ−ＯＨで表されるヘキサペプチドの薬学的に許
容される塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無
機酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマール酸塩、酒石酸塩
、乳酸塩等の有機酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の
アルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のア
ルカリ土類金属塩、アンモニウム塩等が挙げられる。

本発明のへキサペプチドはペプチド合成に通常用いられ
る固相法又は液相法により合成することができる。すな
わち、ペプチド結合の任意の位置で二分される２種のフ
ラグメントの一方に相当する反応性カルボキシル基をも
つ原料と、他方のフラグメントに相当する反応性アミノ
基をもつ原料をジシクロへキシルカルボジイミド等の縮
合剤を用いて脱水縮合させ、縮合物が保護基をもつ場合
はその保護基を外すことにより製造できる。

上記の反応で、反応に関与させるべきでない官能基は、
あらかじめ保護基によって保護しておく。

アミノ基の保護基としてはベンジルオキシカルボニル、
ｔ−ブチルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチル
オキシカルボニル等があり、カルボキシル基の保護は、
固相法ではクロルメチル樹脂、ｐ−アルコキシベンジル
アルコール樹脂、オキシメチル樹脂等の担体に結合して
いることにより、液相法ではベンジルエステル、メチル
エステル等によって行われる。

縮合反応後、保護基を外し、固相法ではペプチドのＣ末
端と樹脂の結合を切断する。

更に本発明のへキサペプチドをイオン交換クロマトグラ
フィー、逆相液体クロマトグラフィー等の通常の精製手
段を用いて精製することができる。

式〔Ｉ〕で表されるヘキサペプチドの薬学的に許容され
る塩は、合成の最終工程で保護基を外したのちに、塩酸
、酢酸等の酸を加え、又は水酸化ナトリウム、水酸化カ
リウム等の塩基を加え相当する塩とすることもできるし
、式〔Ｉ〕で表されるヘキサペプチドを単離したのち、
上記と同様に酸又は塩基を加えて塩とすることもできる
。

本発明物質の構造、純度の確認は高速液体クロマトグラ
フィー、元素分析、アミノ酸分析等により行う。

本発明の抗アレルギー剤は製薬的に許容される担体又は
希釈剤と本化合物又は医薬品として許容されるその塩か
らなる製剤を包含する。塩の好ましい例は塩酸塩、硫酸
塩、リン酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマ
ール酸塩、酒石酸塩、乳酸塩等の有機酸塩、ナトリウム
塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マ
グネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩
等が挙げられる。本製剤は、患者への投薬後、活性成分
が迅速に、持続的にまたは遅延的に遊離するように製剤
化することができる。

本発明の抗アレルギー剤は経口的又は非経口的に投与す
るための形態を適宜にとりうる。代表的な投与方法とし
ては経口、直腸、皮膚透過、皮下、静脈内、筋肉内、吸
入または鼻腔内経路を含む種々の経路により投与するこ
とができる。

これらの投与方法では、本発明の抗アレルギー剤は種々
の薬学的製剤の形態で投与されうる。これらの薬学的製
剤の形態としては、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤
、顆粒剤、散剤、トローチ剤、坐剤、シロップ剤、クリ
ーム剤、軟膏剤、ハツプ剤、注射剤、懸濁剤、吸入剤、
エアロゾール剤などがある。また他の抗アレルギー剤、
その他の医薬と共に二重層錠、多重層錠などとすること
もできる。さらに錠剤の場合には必要に応じて通常の剤
皮を施し、例えば糖衣錠、腸溶被錠とすることもできる
。

錠剤、顆粒剤、散剤などの固体製剤とする場合は、製剤
化に当って公知の添加剤、例えば乳糖、ショ糖、ブドウ
糖、結晶セルロース、コーンスターチ、リン酸カルシウ
ム、ソルビトール、グリシン、カルボキシメチルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴム、
ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ステ
アリン酸マグネシウム、タルク等を添加することができ
る。

半固体製剤とする場合は、植物性ワ・ソクス、ミクロク
リスタリンワックス、脂肪例えばタローラノリンなどの
材料を添加することができる。

液体製剤とする場合は、添加剤、例えば塩化ナトリウム
、ソルビトール、グリセリン、オリーブ油、アーモンド
油、プロピレングリコール、エチレングリコール、エチ
ルアルコールなどの材料を添加することができる。

式〔Ｉ〕で表されるペプチドの投与量は、患者の年令、
体重、症状などにより適宜増減することができるが、経
口投与の場合の投与量は１日当たり０．０１〜１０ｍｇ
／ｋｇ、鼻腔内では１回の投与量は０．１〜１００ｍｇ
である。非経口投与の場合の量は１日当たり１０〜１　
、０００μｇ／ｋｇである。

［実施例］ 以下に記載する実施例によって本発明を具体的に説明す
る。

なお、ここで用いた略号は次の意味を示す。

Ａｌａ：Ｌ−アラニン残基 Ｓｅｒ　：　Ｌ−セリン残基 Ｇ１ｙニゲリシン残基 Ａｓｎ：Ｌ−アスパラギン残基 Ｐｒｏ　：　Ｌ−プロリン残基 Ｌｙｓ：Ｌ−リジン残基 Ｂｏｃ　：　ｔ−ブチルオキシカルボニル基２：ベンジ
ルオキシカルボニル基 Ｚ（２ＣＩ）　＋　２−クロロベンジルオキシカルボニ
ル基ＰＡＭ：４−（オキシメチル）フェニルアセタミド
メチル ＴＦＡニトリフルオロ酢酸 ＤＣＣニジシクロへキシルカルボジイミドＨ−Ａｌａ−
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌ　−Ｌ　５−ＯＨの　゛
８ペプチド合成機はベックマン社製ペプチド合成機Ｍｏ
ｄｅ１９９０Ｂを用いた。反応槽に１．５０ｇのＢｏａ
−Ｌｙｓ〔Ｚ（２ＣＩ））−ＰＭＡ樹脂ＣＢｏｃ−Ｌｙ
ｓ　（Ｚ（２Ｃ１））　ヲ０．７　ミリモル７ｇ含有、
アプライドバイオシステムズ社製〕をとり、ジクロロメ
タン中にて２時間撹拌し膨潤させた。

次に以下の手順でＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを反応させた。

（１）ジクロロメタン２０ｍ１で２分／３回洗浄。

（２）メタノール２０ｍ１で２分／３回洗浄。

（３）ジクロロメタン２０ｍ１で２分／３回洗浄。

（４）４５ｗｔ％ＴＦＡ及びジクロロメタン２０ｍ１で
５分７１回洗浄。

（５）５ｗｔ％ＴＦＡ及びジクロロメタン２０ｍ１で１
５分／１回洗浄。

（６）ジクロロメタン２０ｍ１で２分／３回洗浄。

（７）メタノール２０ｍ１で２分／３回洗浄。

（８）ジクロロメタン２０ｍ１で２分／３回洗浄。

ここでニンヒドリンでアミノ基の反応が陽性になること
を確認する。

（９）１０ｗｔ％ＴＦＡ及びジグ００メタン２０ｍ１で
２分／１回洗浄。

（１０）ジクロロメタン２０ｍ１で２分７３回洗浄。

（１１）　Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ４，２ミリモルのジク
ロロメタン（１０ｍｌ）溶液とＤＣＣ２，１ミリモルの
ジクロロメタン（５ミリ）溶液を合わせて加え、氷水中
で２０分間振りまぜて反応。生じた沈澱を乾燥させ、ガ
ラスフィルターで吸引ろ過。

（１２）ジクロロメタン２０ｍ１で２分／３回洗浄しニ
ンヒドリンでアミノ基の反応が陰性になる点を確認。

（１３）メタノール２０ｍ１で２分７３回洗浄。

（１４）ジクロロメタン２０ｍ１で２分／３回洗浄。

以上によってＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨの導入が完了する。

以下順次、上記の手順（１）から（１４）を繰り返し、
ＧｌｙからＮ端へアミノ酸を付加する。加える保護アミ
ノ酸はＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨに代えて次の順序である。

ＢｏＣ−Ｆ’ｒｏ−ＯＨ４、ＺミリモルＢｏｃ−Ａｓｎ
−０１（４、ＺミリモルＢｏｃ−８ｅｒ（ＯＢｚｌ）−
０Ｈ４，２ミリモルＢｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ４，２ミリモ
ル 以上の操作がすべて終了すると樹脂上に次の保護ペプチ
ドが合成される。

ＢｏＣ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ＯＢｚｌ）−Ａｓｎ−Ｐｒｏ
−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　ＣＺ（２ＣＩ））−樹脂 この樹脂上に結合した保護ペプチドは前述の手順（１）
〜（１４）を実施後、ろ取しデシケータ中で一晩乾燥し
た。乾燥した保護ペプチド樹脂が６９０ｍｇ得られた。

これをとり、アニソール２ｍｌ、ジメチルスベリミダー
ト・２塩酸塩（ｄｉｍｅｔｈｙｌ−ｓｕｂｅｒｉｍｉｄ
ａｔｅ　ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）　０．５ｍ
ｌ存在下、０℃、フッ化水素３０ｍ１で１時間処理した
。フッ水化素を留去し、無水エーテル／ｎ−ヘキサン（
容量比１：１）混液、次いで無水エーテルで洗浄し、十
分乾燥させたのち１０ｗｔ％酢酸５０ｍ１にペプチドを
溶解させ、不溶樹脂を除去した。

得られた溶液はダウエックス（Ｄｏｗｅｘ）　ＬＸ−２
カラム（１，ＯＸ１５ｃｍ、ダウケミカルズ社製）にか
け、２Ｎ酢酸で溶出し、０．２２μｍミリポアフィルタ
−にてろ適役、凍結乾燥した。１６３ｍｇの粗ペプチド
が得られた。これをさらに以下に示す条件にて分取用高
速液体クロマトグラフィーにかけた。

カラム：　ＹＭＣ−Ｄ−ＯＤＳ　２０ｍｍＸ２５０ｍｍ
　（山村化学研究新製） 溶　媒＝０．１％ＴＦＡにアセトニトリルが０％から７
０％の混液に至るまでの直線勾配をもった溶媒 流速：　ｌ　、Ｏｍｌ　／ｍｉｎ 分取用高速液体クロマトグラフィーにより純度９８％の
ペプチドが１７ｍｇ得られた。この精製ペプチドの分析
結果は次の通り。

分析高速液体クロマトグラフィー：第１図酸分解後のア
ミノ酸分析値：　（モル比）アラニン　　　　　１，０ セリン　　　　　０．９ アスパラギン酸　　１．１ プロリン　　　　　１．１ グリシン　　　　　１．０ リジン　　　　　　１．２ なお、分析高速液体クロマトグラフィーはカラムとして
カセイソルブ（ＫＡＳＥＩＳＯＲＢ）　Ｃ８−３００ｘ
５（東京化成工業製、４．６Ｘ２５０ｍｍ）を用い、溶
媒は０．１％ＴＦＡを含む水溶液と０．１％ＴＦＡを含
むアセトニトリルの１００：０（容量比）から７０：３
０　（容量比）混合液まで、直線勾配をもつ溶液を用い
、流速は１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出波長２１０ｎｍで行
い、ペプチドの酸分解は６Ｎ塩酸（０，１ｗｔ％フェノ
ール含有）中、１２０°ＣＩ５時間処理し、日立アミノ
酸分析計８３５型でアミノ酸を分析した。

次に式［１）で表されるヘキサペプチドＨ−Ａｌａ−Ｓ
ｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−ＯＨの薬理活
性試験の結果を示す。

体重３００〜３５０ｇの雄性ウィスター系ラットを受動
感作し、その腹腔内肥満細胞を用いて試験を行った。受
動感作に用いるラット抗血清はＭｏｔａの方法［Ｉｍｍ
ｕｎｏ　ｌｏｇｙ　、ニＬ　Ｐ、６８１　（１９６４）
］およびＨａｍａｏｋａの方法　［Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ、　１１３．．９５８　（１９７４）］に準じて
作製した。すなわち、卵白アルブミン（１０ｍｇ／ｋｇ
）をウィスター系雄ラット（体重２００〜２５０ｇ）の
両大腿部筋肉内に５ｍｌ／ｋｇを注射し、同時に２　Ｘ
ｌｏＩＯ個の百日咳死菌（Ｋｉｌｌｅｄ　Ｂｏｒｄｅｔ
ｅｌｌａＰｅｒｔｕｓｓｉｓ　）を腹腔内に投与して免
疫した。初回感作から１２日目にエーテル麻酔下に腹部
大動脈から採血し、抗血清を分離した。抗血清は一２０
℃で凍結保存した。抗血清の力価は４８ｈｒラットＰＣ
Ａ反応により測定し、その力価が１２８〜２５６倍のも
のを実験に供した。得られた卵白アルブミンラットＩｇ
Ｅ血清を２倍希釈し、その１ｍｌを腹腔内に投与して感
作した。感作４８ｈｒ後にラットを出血致死させ、腹腔
内にリン酸緩衝化液（ＮａＣ１８ｇ、　ＫＣＩ　０．２
ｇＮａｚＨＰ０４４２ＨｚＯ２，８８ｇ、　ＫＨ２ＰＯ
４０，２ｇ、　ＥＤＴＡ・２ＮａＯ９２ｇ及びウシ血清
アルブミン１ｇを精製水に溶かして１リツトルとした溶
液、ｐＨ７，４、以下ＰＢＳ（−）と略記する）１５ｍ
ｌを注入し、約２分間軽く腹部をマツサージ後、開腹し
て腹腔内細胞を採取した。

この細胞浮遊液を遠心分離（１，００Ｏｒｐｍ、　１０
分間）し、更にＰＢＳ（−）で再懸濁し、アラビアゴム
比重液（比重１．０７５）で重層し、遠心分離（２，５
０Ｏｒｐｍ、　１０分間）した。沈殿した細胞をＰＢＳ
（−）で２回洗浄し、新たにＰＢＳ（＋）［ＰＢＳ（−
）のうちＥＤＴＡ・２Ｎａに代えてＣａＣ１ｚ　０．１
ｇを添加した溶液、ＰＢＳ（＋）と略記する］に浮遊さ
せ、ｌＸ１０５個／ｍｌに調整した後、シリコンで処理
した試験管にその細胞浮遊液を０．８ｍｌずつ分注し、
３７℃で１０分間ブレインキュベートした。細胞浮遊液
を入れた試験管にＰＢＳ（＋）で希釈した種々の溶液の
検体溶液を０．１ｍｌ添加し、３７℃で１５分間インキ
ュベート後、肥満細胞からヒスタミンを浮遊させるため
に抗原である卵白アルブミン（最終濃度１ｍｇ／ｍｌ）
とフォスフアジチル−し−セリン（最終濃度１００μｇ
／ｍｇ）の混合溶液０．１ｍ１を加え、さらに１５分間
インキュベートしてヒスタミンを遊離させた。ただし、
比較薬剤の一つのＤＳＣＧは抗原添加３０秒前に加え、
抗原添加後更に１５分間インキュベートした。水冷した
ＰＢＳ（＋）１ｍｌを加え反応を停止させ、２　、５０
Ｏｒｐｍで１０分間遠心分離した。上滑２ｍｌをとり、
４ｗｔ％過塩素酸溶液１ｍｌを加え、遊離ヒスタミン量
を定量する試料とした。

全ヒスタミン量を定量する試料は無処置の肥満細胞浮遊
液（ＩＸＩＯ’個／ｍｌ）　０．８ｍｌを１０分間沸騰
水中に置き、次いで４ｗｔ％過塩素酸を添加して、試料
とした。

各試料のヒスタミン惜は蛍光法により測定し、次式によ
り、ヒスタミン遊離率（％）を算出した。

ヒスタミン遊離率（％）＝ （遊離ヒスタミン量／全ヒスタミンｉ）　Ｘ１００式［
Ｉ］で表わされるペプチドと比較薬剤のヒスタミン遊離
率（％）を第２図に示した。第２図から明らかなように
、式［Ｉ］で表わされるペプチドは１０−６Ｍ以上の濃
度でヒスタミン遊離抑制作用を示し、その作用は比較薬
剤のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−ＡＲｇ−Ｏ
Ｈより強（、Ｉ）ＳＣＧと同程度又はそれ以上の強さで
あった。

免疫動物は、１群５匹のＢＡＬＢ／ｃ雄マウス（６週令
）とし、抗原のジニトロフェニルアスカリス（ＤＮＰ−
Ａｓｃａｒｉｓ）　１０　μｇを免疫増強剤の水酸化ア
ルミニウムゲル４ｍｇに吸着させて、下記に示す２通り
の実験を行った。

一方の実験では式［１］のペプチド１ｍｇを腹腔内に投
与し、３０分間後にＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓと水酸化ア
ルミニウムゲルを腹腔内に投与し、その後１４日目に採
血して血清を得た。

他方の実験ではＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓと水酸化アルミ
ニウムゲルを腹腔内に投与し、７日目、１４日目及び２
１日目の計３回、式［１］のペプチド１ｍｇを腹腔内に
投与し、２８日目に採血して血清を得た。

両実験で得られた血清はラットの４８時間ＰＣＡ反応を
行い、抗体価を測定した。

すなわち、Ｗｉｓｔａｒ系雄ラット（２００〜２５ＣＩ
ｇ）の背部の皮内に血清を感作し、４８時間後に０．５
ｗｔ％エバンスブルーを含むＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓ溶
液を尾静脈内に注射し、現われる色素斑を３０分後に測
定してＩｇＥ抗体価を求めた。なお、ＰＣＡ反応で得ら
れた抗体価がＩｇＥ抗体であることを確認するために、
血清をあらかじめ５６℃で３時間加熱処置したもので感
作し、同様に操作して、ＰＣＡ反応によって抗体価を測
定した。

式［Ｉ］のペプチドを１ｍｇ／ｋｇ投与したときのＩｇ
Ｅ抗体産生量をＰＣＡ反応で求めた抗体価で表わしたも
のが第３図及び第４図である。第３図及び第４図から明
らかなように、式［Ｉ］のペプチドはＩｇＥ抗体産生を
強く抑制した。なお、加熱処理血清の抗体価は一方の実
験（第３図の斜線部分）ではほとんどＯであったが、他
方の実験（第４図の斜線部分）では、わずかではあるが
抗体価を示した。

［発明の効果］ 本発明の式〔Ｉ〕で表されるペプチドはヒスタミン遊離
抑制作用とともにＩｇＥ抗体産生抑制作用を示す。本発
明により、抗アレルギー剤として優れた性質をもつ新規
ペプチドを提供することができた。

【図面の簡単な説明】 第１図は本発明のＨ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ
−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨの分析用高速液体クロマトグラ
ムを示す。縦軸は２２０ｎｍの紫外線吸収の強度、横軸
は溶出時間（分）である。 第２図は、本発明のＨ−Ａｌａ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒ
ｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−０）１及び比較薬剤（Ｈ−Ａｓｐ
−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＯＨ及びＤＳＣＧ
）のヒスタミン遊離率（％）を示したグラフである。縦
軸はヒスタミン遊離率（％）、横軸は化合物及び濃度（
Ｍ）である。 第３図は、本発明のＨ−Ａｌａ−５ｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒ
ｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨの前投与によって産生された
ＩｇＥ抗体価を示したグラフで、斜線の部分は加熱処理
した血清の抗体価である。 第４図は、ＩｇＥ抗体産生の持続期に本発明のＨ−Ａｌ
ａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨを
投与した場合に産生されたＩｇＥ抗体価を示したグラフ
で、斜線の部分は加熱処理した血清の抗体価である。第
３図及び第４図はそれぞれ縦軸に抗体価、横軸に化合物
及びその投与量（ｍｇ／ｋｇ）を示している。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次の式〔 I 〕 Ｈ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
   −ＯＨ〔 I 〕（ただし、ＡｌａはＬ−アラニン残基、
   ＳｅｒはＬ−セリン残基、ＡｓｎはＬ−アスパラギン残
   基、ＰｒｏはＬ−プロリン残基、Ｇｌｙはグリシン残基
   、ＬｙｓはＬ−リジン残基を示す）で表されるヘキサペ
   プチド又はその薬学的に許容される塩。 ２、請求項１記載のペプチド又はその薬学的に許容され
   る塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。