JPH03131697A - 診断分析系の清浄方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は清浄液、殊に免疫学および臨床化学用の診断分
析系において使用するための清浄液に関する。

〔従来の技術〕

免疫学および臨床化学用診断分析系においては、系の成
分はできるだけ多数の種々の試験に受けない、つまシい
わゆるｇＲ鷺が生じることなしに、使用できねばならな
い。従って、１巣−ビの使用を避けたい場合には、”汚
染”された系成分を清浄にする必要がある。迅速かつ有
効々作業には、自動分析装置の場合、装置から可能な分
析頻数ができるだけ達成されるべきである。

従って、付着汚染物（殊にタンパク質）は、短時間に完
全に除去しなければならない。また、清浄の効果は非常
に迅速に生じ（できるだけ数秒内に）、かつそれ自体多
数の材料（たとえばポリメチルメタクリレートまたはテ
フロン、特殊鋼、ガラス等）に吸着しうる多数のタンパ
ク質（＃素、抗体、複合体）に及ぶべきである。

この場合、典型的な問題点は、殊に分析系において生じ
る連行の問題（Ｖｅ　ｒ　ｓｃｈｌｅｐｐｕｎｇｓｐｒ
ｏｂ−１ｅｍｅ）　、たとえばキュベツトによる連行（
（ａ）試料への試薬、伽）試薬への試薬、（Ｃ）試料へ
の試料の連行）、または針（ホース、噴射器および弁を
包含する）による連行、（（ｄ）試料への試薬、（ｅ）
試料への試料、（ｆ）試薬への試薬の連行）である。

診断用自動分析装置の清浄のためには、従来特殊な清浄
方法が使用されたが（たとえば西ドイツ国特許出願公開
第！１２３８６７９号；米国特許第４４４４５９８号；
東ドイツ国専用特許第３２５８６７９号、西ドイツ国特
許出願公開第１５４１３４号および米国特許第２４８６
４２号参照）、または分析系の個々の成分、たとえば電
極に対し特殊な清浄液が使用された（特開昭５７−６７
８５６号および特公昭６３−２３４３号参照）。

〔発明が解決しようとする課題〕

従って本発明の課題は、特殊な清浄方法の適用を避けか
つ分析系のすべての成分に対して使用可能であり、連行
の問題を簡単かつ広範に解決することのできる、殊に診
断用分析装置に対する清浄剤を提供することである。清
浄液は、臨床化学的試験ないしは免疫化学的試験のため
の診断用自動分析装置において次の点を広範に満足すべ
きであるニ ー数秒内の清浄化； 一唯１種の清浄液での、キュベツト、配量針およびホー
ス系におけるタンパク質による種々の汚染物の除去； 一清浄作用は、上述した診断用自動分析装置成分に使用
されるような種々の材料、つまシガラス、プラスチック
、特殊鋼その他に対して等しく良好に存在すべきである
； 一診断試験は清浄液による影響を受けてはならない；か
つ 一清浄剤は十分な殺菌および駆カビ作用を有すべきであ
る。

〔課題を解決するための手段〕

仁の課題は、請求項１による本発明の対象を用いて解決
される。

本発明の対象は、診断用分析装置のための清浄液であっ
て、該清浄液は、スルホコハク酸エステル、フッ素界面
活性剤および第二級アルカンスルホネートの群から選択
され九、界面活性剤０．３重１に％の濃度で２５℃にお
いて２０秒よりも短かい湿潤時間（ドレーブス試験）を
有する急速湿潤の界面活性剤および２．５よシも大きい
ｐＫｓ値を有する無機酸または有機酸を含有しかつ最高
４．０の…値を有することを特徴とする。

勧湿潤界面活性剤としては、スルホコハク酸エステル（
たとえばヨーロッパ特許に）第７１４１０号、同第７ｉ
４１１号および同第７１４１３号に記載されている）、
フッ素界面活性剤（たとえば”５ｌｉｆｅｎ−６１ｅ−
Ｆｅｔｔｅ−Ｗａｃｈｓｅ“第１０４巻（１９７８年）
、第４２９頁〜第４３２頁に記載されている）および第
二級アルカンスルホネート（とくに炭素原子数１２〜１
８を有するもの）の群からのものが使用される。

２種以上の界面活性剤を使用することもできる。

この場合望ましくは、ドレープス試験（Ｄｒａｖｅｓ−
Ｔｅｓｉ）により測定した、濃度０．３重量チでの、２
０秒よりも短かい、殊に１０秒に等しいかまたはこれよ
シ短かい湿潤時間、清浄液中の有効―度において界面張
力（４５ｍＮ／ｍを有するような界面活性剤が使用され
る。

本発明によるとくに望ましい界面活性剤は、ジヘキシル
ナトリウムスルホスクシネート（ＤＨ８Ｓ）　、ジオク
チルナトリウムスルホスクシネート（ＤＯ８Ｓ）　、テ
トラエチルアンモニウムベフ ル鷺ルオロオクタンスルホネー）　（ＴＡＰＳ）および
ナトリウムドデシル−２−スルホネートである。

清浄液中の界面活性剤の濃度はとくに決定的ではなく、
広い範囲内で変動しうる。該濃度は、殊に本発明によシ
使用される界面活性剤の種類によるが、本発明による清
浄液の常用成分の種類および濃度にもよる。界面活性剤
濃度は、通例０．０１重量％から溶液中の界面活性剤の
溶解限度の濃度まで、殊に０．０５〜１．０重量ＭＬ、
’４の間、第ｊ　Ｋ　Ｏ，１〜０．５重量％の間の範囲
内にある。

通例、既に約０．５重量％またはそれ以下の濃度で最大
の効果が達成されるので、これよυ高い濃度は、実際に
なお等しい効果を生じるが必要ではなくかつ経済上およ
び環境上の観点からはあｔｂ有意義ではない。界面活性
剤は、有効濃度、殊に最大作用を有する濃度において、
水に対する十分な溶解度を有するべきであシ、とくに−
値く４の酸性範囲内で有効であるべきである。

酸としては、ｐＫｓ値〉２．５を有する中強酸、とくに
有機酸、殊に場合によシ置換されたモノ−、ジー　トリ
カルボン酸の群からの酸が使用される。置換カルボン酸
はとくにヒドロキシカルボン酸である。本発明によシ使
用される酸の望ましい例は、クエン酸、酒石酸、コノ・
り酸等であるが、たとえばギ酸、酢酸等も挙げられる。

２種または数種の酸を使用することもできる。

本発明による清浄液中の酸の濃度は、同様に広い範囲内
で変化しうる。有利な濃度は、殊に使用した酸の種類、
常用の成分、殊に使用した界面活性剤の種類に依存する
。とくに、酸は清浄液１１あたＦ）　０．００１　ｍｏ
ｌ　〜０．５　ｍｏｌの範囲内、殊に清浄液１ノあたり
０．０１〜０．１　ｍｏｌの範囲内の濃度で存在する。

本発明による清浄液の効力は一般にβ値の増加につれて
減少するので、清浄液の一値は４の値を上回ってはなら
ない。

本発明による清浄液の製造は、自体公知の方法で成分を
溶解することによって行なうことができ、この場合界面
活性剤と酸は同時にまたは順次に溶解することができる
。１種または数種の成分の溶解を高めた温度で行なうの
も有利である。診断用分析系における本発明による清浄
液の使用には、このような清浄操作に常用の完全脱塩水
が使用される。

本発明による清浄液は、広い範囲の迅速かつ良好な清浄
作用によりすぐれている。試料物質（血清、血漿等）お
よび試験試薬と接触する診断用自動分析装置のすべての
成分に作用し、従って診断用分析系、殊に自動分析装置
の清浄液としての使用に好適である。本発明による清浄
液は殊に下記の、殊に診断用分析系における使用に望ま
しい性質を有するニ ー診断用自動分析装置の種々の成分の唯１種の清浄液に
よる清浄が可能である； 一清浄が数秒内で行なわれる； 一臨床化学および免疫化学における診断用自動分析装置
において生じるような種々の種類の、タンパク質含有汚
染物の除去が可能であり、かつこれら汚染物の除去が、
診断用自動分析装置において使用される種々の材料から
可能である； 一非常に良好な洗除作用を示し、これによって後続の診
断試験が影響を受けることがなく；−清浄液は殺菌およ
び駆カビ作用を有する。

下記の例は本発明を詳述するものであるが、これに限定
されない、丘部および下記は、別記しない限シ、パーセ
ントおよび量の記載は重量に関し、温度値は摂氏目盛に
関するものである０次の略記が使用される： Ｃ８−クエン酸 ＷＳ＝酒石酸 〔実施例〕 例　　１ 清浄液の製造 清浄液１は、０．２％のジヘキシルナトリウムスルホス
クシネート（ＤＨ８Ｓ）　（２５℃におけるドレープス
湿潤時間１０秒（例８参照）；界面張力４２　ｍＮ／ｍ
　）およびクエン酸５０　ｍ　ｍｏｌ／／（ｐＫｓｍ　
＝　３．１５　）から製造する。

清浄液２は、０．２重址−のジオクチルナトリウムスル
ホスクｙネ−）　（Ｄｏｓｅ）　（）”レーフｘ湿潤時
間＜０．２秒、２５℃で、界面張力２８ｍＮ／ｍ）およ
びクエン酸（ｐＫｓｍ−３，１３）　２５〜５０ｍ　ｎ
ｏ　１／ｌから製造する。

清浄液６は、０．１／ｌ％のテトラエチルアンモニウム
ベルフルオロオクタンスルホネ−ト（ＴＡＰＳ）　（ド
レーブス湿潤時間く２０秒／２５℃、界面張力２３　ｍ
Ｎ／ｍ　＞およびクエン酸（ｐＫｓｌ−３，１３）　２
５〜５０　ｍｍｏｌ／ｌから製造する。

清浄液４は、０．２亜−ＪＬ％のＤＨ３Ｓおよび酒石酸
（ｐＫｓｌ　−３−１１）　２５〜５０　ｍｍｏｌ／ｌ
ｌから製造する。

例　　２ 第１図に概略図示した免疫化学用分析系の例につき、清
浄工程を説明する。下記の工程で作業する： ａ）特殊鋼針１（清浄液、試料および試票の採取のため
に使用される）により、テフロンホース３および押出口
を経て吐出管２中への清浄液の採取 り）　　ａ）工程の繰返し、全作用時間は２０秒である
。

Ｃ）蒸留水での後洗浄（針１および供給管４による）。

ａ）　　ｃ）工程の繰返し。

清浄の目的： たとえばペルオキシダーゼ含有試薬のピペット採取後、
ピペット採取系（Ｌ　　３，５）は、同じピペット採取
系を用いて、ペルオキシダーゼを発色によって検出する
試薬（基質）をピペット採取しうる程度に有効に清浄に
しなければならない。このための前提条件は、上記のペ
ルオキシダーゼ含有試薬が吸着されていることのある系
のすべての表面が、ピペット採取系中での呈色反応をさ
けるために実際に定員的に清浄にすることである。２・
０分の静置時間後、ホース管系中での基質の信号増加の
最低化が清浄効率の尺度である。

例　　６ 分析系の例につき本発明による清浄液の使用を記載する
。

清浄の実施： ａ）キュベツト（別記しない限りポリメチルメタクリレ
ート製）に、連行を調べようとする溶液を鉤針を経て１
０秒間に充填する。

ｂ）こうして充填したキュベツトを、室温で１０分間イ
ンキュベートし、引き続き１０秒で鉤針を用いて吸引す
る。

Ｃ）清浄液を、他の鉤針を経てキュベツト中ヘビベット
採取する；作用時間約１０秒；ｄ）キュベツトを３回交
互に空吸引し、水を満たしく水の作用時間は同様に約１
０秒）、最後にもう一度空吸引する。

ｅ）殊に連行された物質に対する呈色反応により、連行
の程度を測定する。

技術水準との比較のために、Ｃ）による清浄液の代りに
水を使用する。

連行液として、トリス／クエン酸塩緩衝液（ｐＨ７，６
）　１５０　ｍｍｏｌ／Ｊ中のリノクーセ約２００００
　Ｗｌの溶液を使用する。

下記の表１〜５は、リパーゼの連行に対する本発明によ
る清浄液のすぐれた清浄作用を示す。

表　　１ 本発明による界面活性剤の有効範囲 ０．００　　　　　　　　１２００ ０．１０　　　　　　　　　１９０ ０．２０　　　　　　　　　　０ ０．５０　　　　　　　　　　０ ２００ ００ ２００ ００ １）それぞれクエン酸２５　ｍｍｏｌ／ｌの存在で。

次光２は、本発明による界面活性剤と酸と組合せにより
生じる協力清浄作用を示す。

表　　２ の ０．０　　Ｏ８／ｖＳ Ｏ，２Ｃ８ Ｑ、５　　Ｃ３ １、ＯＣ３ Ｏ，５ＷＳ １９０ ６０ ０００ ２００ ０８０ 次光６は、本発明による清浄液（界面活性剤と中強酸と
の組合せ）の有効性を強酸と比較して示す。

表　　３ 連　行（リパーゼＵ／ｌ　） 酸なし １９０ Ｃ８Ｏ ＷＳ　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｏギ酸　　
　　　　　　　　　０ コハク酸　　　　　　　　　Ｏ 表４は、本発明による清浄液の有効性の、溶液のβ値か
らの依存性を示す（例１による清浄液を、クエン酸／ク
エン酸塩緩衝液で記載のｐＨ値に調節した）。

表　　４ 連　行（リパーゼＵ／ｌ　） ０　　　　　０　　　　０　　　　２００　　１６２０
表５は、本発明による清浄液の有効性の作用時間からの
依存性を、市場で得られる通常の清浄剤と比較して示す
。

表５ 連　行（リパーゼＵ／１） １０　　　　０　　２００　２０００　１２００　１９
００　１０６０２０　　　　０　　　　−６００　　　
−６００　　　　０　　　　０　　４００　２１０　　
２００　　１００１）エクストラン（ＥｘｔｒａｎＲ）
ＡＰ　４３例　　４ 免疫試験における連行 例２に記載したようにして、免疫試験におけるペルオキ
シダーゼと抗体との複合体の連行を調べる。しかし、こ
の場合、例２とは異なシ、清浄液で２回、水で２回洗浄
する。

連行液ニ リン酸塩緩衝液（ｐＨ６，９）　１５　ｍ　ｍｏｌ／Ｊ
中の、ク ペルオキシダーゼとＴＳ）（に対するポリメロ−ナル抗
体からなる複合体 連行の検介は呈色試験で行なう。このため、清浄および
洗浄の実施後（例２による）、基質溶液（ＡＢＴＳ　（
２，２’−アジノージ〔６−ニチルベンズチアソリンー
スルホン酸（６＞〕−ジアンモニウム塩１−６　ｍ　ｍ
ｏｌ／１％　　！ＪンＨ／クエン酸塩緩衝剤、ｐ）（４
，４９，５ｍｍｏｌ／Ｉｌｓ過ホウ酸ナトリウム３．１
　ｍｍｏｌ／ｌ）を添加し、２０分インキュベートレ、
４２２ｎｍにおける吸光を測定する。表６は結果を示す
。

表６は、本発明による清浄剤の有効性を、ペルオキシダ
ーゼ・抗体の複合体の連行の例につき、市場で得られる
慣用の清浄剤と比較して示す。

一一一一一−，／ 表 清浄液１０ 清浄液２０ 比　　較３）　　　　　　　　　　　２１５比　　較４
）１９８ 水　　　　　　　　　　　　２８６ ３）３％　ＥｘｔｒａｎＲＡＰ　２２ ４）６％　ＥｘｔｒａｎＲＭＡ　０１ （１）、　３）および４）については、ＲＭｍｐｐｓ　
（ｈｅｍｉｅ−Ｌｅｘｉｋｏｎ　、第８版（１９８１年
〕、第１２３０頁参照） 例　　５ 種々のタンパク質における清浄作用 例６に紀献したようにして、３つの異なる酵素の連行を
調べる。

ａ）　　乳酸デヒドロゲナーゼ−１−イソ酵素連行液と
して、カルボン酸塩緩衝剤（ｐＨ１０，０）０．４３　
ｍｍｏｌ／ｌ中の乳酸デヒドロゲナーゼ−１−イソ酵素
５１０００　Ｕ／ｌを使用する。ピペット採取および洗
浄工程は例３に記載したように行なう。連行された酵素
の測定は、”　Ｚ、　Ｃ１１ｎ。

Ｃｈｅｍ、　Ｕ、　Ｃ１１ｎ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、”　
、第８巻（１９７０年）第６５８頁および第１０巻（１
９７２年）第１８２頁に記載されたように行なう。その
後、リン酸塩緩衝剤（ｐＨ７，５）　４９　ｍｍｏｌ／
１ＳＮＡＤＨＯ，１７１１７およびビルｔビン酸塩０．
６　ｍｍｏｌ／ｌの溶液を添加し、３６５ｎｍにおける
吸光を測定し、＃未活性を確かめる。

乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ） ＬＤＨの測定は、乳酸デヒドロゲナーゼ−１−イソ酵素
の測定と類似に行なう。

コレステリンオキシダーゼ 連行液として、トリス緩衝剤（ｐＨ７，７）　１００ｍ
ｍｏｌ／７中のコレステリンオキシダーゼ２４０Ｕ／ｌ
の溶液を使用する。測定の実施は、’　Ｃ１１ｎ、　Ｃ
ｈｅｗ、”　　第２９巻（１９８３年）、第１０７５頁
に記載されたように行なう。これに必要な、コレステリ
ンの測定試薬は、コレステリンオキシダーゼの添加なし
に使用する。コレステリンオキシダーゼが連行されると
、呈色が観察される。

試薬の組成 トリス緩衝剤（ｐＨ７，７）　　　１　［）　Ｏｍｍｏ
Ｌ／Ｊ塩化マグネシウム　　　　　　５０　　ｍｍｏｖ
１４−７ミノ７エナゾン　　　　　１　　ｍｍｏｖｌコ
ール酸ナトリウム　　　　　１Ｑ　　ｍｍｏｌ／ｊ！７
、ｚノーＡ＝　　　　　　　　　　　６　　ｍｍｏＶ１
３．４−ジクロルフェノール　　４ｍｍｏ凶コレステリ
ンエステラーゼ　　０，４ｕｙｆｄペルオキシダーゼ　
　　　　　０．２Ｕ〜表７は、種々の汚染物質の除去に
対する本発明による清浄剤の作用を、水と比較して示す
。

表 連 行 （ Ｕ／／ ） 乳酸塩デヒドロゲナーゼ　　００５００コレステリンオ
キシダーゼ　　０　　　　　　　　　　２０例　　６ 種々の材料からなる容器を使用する場合のバーゼの連行 試験の実施は例３および例２と類似 衣　　８ リパーゼの連行（Ｕ／ｌ　） リ ガ　　ラ　　ス　　　　　　　　　　　　　　　０特殊
鋼　　　　０ ポリテトラフルオロエチレンリ　　　　０り費）ペルオ
キシダーゼＵ／１ ００ ００ １００”） 例　　７ ドレープス試験 ドレープス試験は、木綿テープにおける界面活性剤溶液
の相対的湿潤力の測定方法である◇検査すべき洗剤の１
重量％水溶液は、脱イオン水を用い２５℃±１℃で製造
する。引続き、溶液を０．３重量％に希釈する。

固定する。つシ下げ鴇テープを有する重シを、メスシリ
ンダ中へ、テープの端が丁度溶液の表面上に来るまで下
げる、重シは浸漬する。次いで、全部分を落す。ｘｂが
底に触れた瞬間に、ストップウォッチをスタートさせ、
テープが一定速度で沈むときに止める。測定した時間間
隔を湿潤時間と定義する。

【図面の簡単な説明】

図は本発明による清浄液が使用される免疫化学用分析系
の概略図である。 １・・・特殊鋼針、２・・・吐出管、３・・・テフロン
ホース、４・・・供給管 １・・針 ２・・、吐出管 ３・・ホース ４・・供給管

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、スルホコハク酸エステル、フッ素系界面活性剤およ
   び第二級アルカンスルホネートの群から選択された、２
   ５℃で濃度０．３重量％において２０秒より短かい湿潤
   時間を有する急速湿潤性界面活性剤およびｐＫｓ値＞２
   ．５を有する無機酸または有機酸を含有し、最大４．０
   のｐＨ値を有することを特徴とする水性清浄液。 ２、スルホコハク酸エステル、フッ素系界面活性剤およ
   び第二級アルカンスルホネートの群から選択された、２
   ５℃で濃度０．３重量％において２０秒より短かい湿潤
   時間を有する急速湿潤性界面活性剤およびｐＫｓ値＞２
   ．５を有する無機酸または有機酸を含有し、最大４．０
   のｐＨ値を有する水性清浄液を使用することを特徴とす
   る診断用分析系の清浄方法。