JPH03135766A - ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキット - Google Patents
ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキットInfo
- Publication number
- JPH03135766A JPH03135766A JP27186289A JP27186289A JPH03135766A JP H03135766 A JPH03135766 A JP H03135766A JP 27186289 A JP27186289 A JP 27186289A JP 27186289 A JP27186289 A JP 27186289A JP H03135766 A JPH03135766 A JP H03135766A
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はヒト ＩＬ−６の免疫化学的測定方法に関する
ものである。
ものである。
インターロイキン−６（ＢＳＦ ２ ／以下ＩＬ−６と
略す）は、種々の重要な生理活性を有し、広く細胞の増
殖分化に関与しているタンパク質である。さらにＩＬ−
６の異常産生が種々の自己免疫疾患の病因因子である可
能性が報告されている（岸本、平野、Ａｎｎ。
略す）は、種々の重要な生理活性を有し、広く細胞の増
殖分化に関与しているタンパク質である。さらにＩＬ−
６の異常産生が種々の自己免疫疾患の病因因子である可
能性が報告されている（岸本、平野、Ａｎｎ。
Ｒｅｖ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、、 ６． ｐ４Ｂ５．１９８
８年参照）。
８年参照）。
生体内で多様な生理活性を強く発揮するＩＬ−６の生理
的濃度を知ることは、各種疾患の新しい診断マーカーと
して期待されている。ＩＬ−６の生物活性測定法として
は、１１００ｆ／ｍｉ’のＩＬ−６が測定可能な高感度
のものが報告されている（ＴｏＭａｔｓｕｄａら、Ｓｕ
ｒ。
的濃度を知ることは、各種疾患の新しい診断マーカーと
して期待されている。ＩＬ−６の生物活性測定法として
は、１１００ｆ／ｍｉ’のＩＬ−６が測定可能な高感度
のものが報告されている（ＴｏＭａｔｓｕｄａら、Ｓｕ
ｒ。
Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、、 １ｇ、 ｐ９５１．１９８８
年参照）。しかしながら、この方法は、多数の検体を迅
速、且つ簡単に測定することができないという欠点を有
する。
年参照）。しかしながら、この方法は、多数の検体を迅
速、且つ簡単に測定することができないという欠点を有
する。
多数の検体を迅速、且つ簡単に測定する方法として一般
に種々の免疫測定法が知られている。ＩＬ−６の測定の
ために免疫測定法を応用した例として、前記Ｔ、 Ｍａ
ｔｓｕｄａらの報告によれば、検出系にアルカリホスフ
ァターゼを使用する方法によって、ヒト膀胱癌細胞由来
ＩＬ−６をヒト血清に稀釈したモデル検体系において５
０ｐｇ／ｍｊ！のＩＬ−６が測定可能である旨記載され
ている。しかしながら、この方法を大腸菌由来組換ＩＬ
−６をヒト血清に溶解して調製した検体モデル系におい
ては上記のごとき感度は得られなかった（第２図を参照
のこと）。
に種々の免疫測定法が知られている。ＩＬ−６の測定の
ために免疫測定法を応用した例として、前記Ｔ、 Ｍａ
ｔｓｕｄａらの報告によれば、検出系にアルカリホスフ
ァターゼを使用する方法によって、ヒト膀胱癌細胞由来
ＩＬ−６をヒト血清に稀釈したモデル検体系において５
０ｐｇ／ｍｊ！のＩＬ−６が測定可能である旨記載され
ている。しかしながら、この方法を大腸菌由来組換ＩＬ
−６をヒト血清に溶解して調製した検体モデル系におい
ては上記のごとき感度は得られなかった（第２図を参照
のこと）。
一般に、ヒト検体中のＩＬ−６を測定するには、分析系
が、ヒト検体中に自然に存在するＩＬ−６をそれが自然
に存在する程度の濃度レベルにおいて検出することがで
きるだけの感度を有すると共に、同レベルの濃度の組換
ＩＬ−６を検出できなければならない。なぜなら、そう
でなければ、分析系の標準試薬として組換ＩＬ−６を使
用することができないからである。
が、ヒト検体中に自然に存在するＩＬ−６をそれが自然
に存在する程度の濃度レベルにおいて検出することがで
きるだけの感度を有すると共に、同レベルの濃度の組換
ＩＬ−６を検出できなければならない。なぜなら、そう
でなければ、分析系の標準試薬として組換ＩＬ−６を使
用することができないからである。
従って、種々の一般的な免疫測定法が知られているにも
かかわらず、ヒト検体中のＩＬ−６をそれが自然に存在
するような低濃度レベルにおいて検出できる程の実用的
な感度を有する分析方法は知られていなかった。
かかわらず、ヒト検体中のＩＬ−６をそれが自然に存在
するような低濃度レベルにおいて検出できる程の実用的
な感度を有する分析方法は知られていなかった。
従って本発明は、ヒトの検体中に存在するＩＬ−６を検
出するのに十分な感度を有するＩＬ−６の免疫測定法を
提供しようとするものであり、その前提条件としてヒト
の検体中に存在するＩＬ−６及び組換ＩＬ−６の両者を
同程度の感度で検出することができる方法、及びその方
法に使用するためのキットを提供しようとするものであ
る。
出するのに十分な感度を有するＩＬ−６の免疫測定法を
提供しようとするものであり、その前提条件としてヒト
の検体中に存在するＩＬ−６及び組換ＩＬ−６の両者を
同程度の感度で検出することができる方法、及びその方
法に使用するためのキットを提供しようとするものであ
る。
本発明者らは前記の課題を解決すべく種々検討した結果
、−次抗体として抗＝■シー６モノクローナル抗体を使
用し、二次抗体としてビオチンにより標識された抗−Ｉ
シー６ポリクローナル抗体を使用し、そしてストレプト
アビジン／β−ガラクトシダーゼ接合体とβ−ガラクト
シダーゼの基質とを用いるという特定の組合せにより、
数十ｐｇ／−の濃度のＩＬ−６を測定することができる
という全く新しい知見を得、これに基いて本発明を完成
した。
、−次抗体として抗＝■シー６モノクローナル抗体を使
用し、二次抗体としてビオチンにより標識された抗−Ｉ
シー６ポリクローナル抗体を使用し、そしてストレプト
アビジン／β−ガラクトシダーゼ接合体とβ−ガラクト
シダーゼの基質とを用いるという特定の組合せにより、
数十ｐｇ／−の濃度のＩＬ−６を測定することができる
という全く新しい知見を得、これに基いて本発明を完成
した。
従って本発明は、ヒトＩＬ−６に対するモノクローナル
抗体、ビオチン標識抗ヒトＩＬ−６ポリクローナル抗体
、並びに検出系としてのストレプトアビジン／β−ガラ
クトシダーゼ及びその基質を用いることを特徴とするヒ
ト ＩＬ−６の免疫学的測定法；並びにヒトＩＬ−６に
対するモノクローナル抗体、ビオチン標識抗ヒトＩＬ−
６ポリクローナル抗体、並びに検出系としてのストレプ
トアビジン／β−ガラクトシダーゼを含んで成るＩＬ−
６の免疫化学的測定キットを提供する。
抗体、ビオチン標識抗ヒトＩＬ−６ポリクローナル抗体
、並びに検出系としてのストレプトアビジン／β−ガラ
クトシダーゼ及びその基質を用いることを特徴とするヒ
ト ＩＬ−６の免疫学的測定法；並びにヒトＩＬ−６に
対するモノクローナル抗体、ビオチン標識抗ヒトＩＬ−
６ポリクローナル抗体、並びに検出系としてのストレプ
トアビジン／β−ガラクトシダーゼを含んで成るＩＬ−
６の免疫化学的測定キットを提供する。
１、ＩＬ−６の免疫化学的測定法
ＩＬ−６の免疫化学的測定法は、ヒト血清、尿、その他
例えば関節液等中に含まれるＩＬ−６の生理的濃度、ヒ
ト細胞を培養したときの培養上清中のＩＬ−６濃度、さ
らにはＩＬ−５を遺伝子工学的に生産したり、ＩＬ−６
を反応させたときに生じるサンプルのニジ−６濃度を正
確かつ迅速に測定することを目的としている。
例えば関節液等中に含まれるＩＬ−６の生理的濃度、ヒ
ト細胞を培養したときの培養上清中のＩＬ−６濃度、さ
らにはＩＬ−５を遺伝子工学的に生産したり、ＩＬ−６
を反応させたときに生じるサンプルのニジ−６濃度を正
確かつ迅速に測定することを目的としている。
この方法においては、まず−次抗体としての抗−ＩＬ−
６モノクロ一ナル抗体を固体支持体に固定する。この固
体支持体としては、マイクロタイタープレート、各種の
ビーズ状の例えばポリスチレン、ポリプロピレン等のプ
ラスチック製、金属セラミックス等の無機物質製等の免
疫測定法において常用されている支持体を用いることが
できる。また、抗体の固定も常法に従って行うことがで
きる。次に、この固定された一次抗体と分析検体とを接
触せしめる。これにより検体中のＩＬ−６は特異的に該
抗体と結合する。次に二次抗体を加え、−次抗体を介し
て支持体に固定されたＩＬ−６と二次抗体とを結合せし
める。二次抗体には標識物質としてビオチンが結合して
いる。次に、検出系としてのストレプトアビジン／β−
ガラクトシダーゼを添加し、前記ビオチンとストレプト
アビジンとの結合を介してβ−ガラクトシダーゼが固定
される。検出系の成分としてβ−ガラクトシダーゼを使
用するのが本発明の特徴である。次に、β−ガラクトシ
ダーゼの基質を加えることにより発色せしめ、この発色
強度を常法、例えば光度計により読み取る。
６モノクロ一ナル抗体を固体支持体に固定する。この固
体支持体としては、マイクロタイタープレート、各種の
ビーズ状の例えばポリスチレン、ポリプロピレン等のプ
ラスチック製、金属セラミックス等の無機物質製等の免
疫測定法において常用されている支持体を用いることが
できる。また、抗体の固定も常法に従って行うことがで
きる。次に、この固定された一次抗体と分析検体とを接
触せしめる。これにより検体中のＩＬ−６は特異的に該
抗体と結合する。次に二次抗体を加え、−次抗体を介し
て支持体に固定されたＩＬ−６と二次抗体とを結合せし
める。二次抗体には標識物質としてビオチンが結合して
いる。次に、検出系としてのストレプトアビジン／β−
ガラクトシダーゼを添加し、前記ビオチンとストレプト
アビジンとの結合を介してβ−ガラクトシダーゼが固定
される。検出系の成分としてβ−ガラクトシダーゼを使
用するのが本発明の特徴である。次に、β−ガラクトシ
ダーゼの基質を加えることにより発色せしめ、この発色
強度を常法、例えば光度計により読み取る。
発色性のβ−ガラクトシダーゼ基質としては、免疫測定
において常用されている基質、例えば４−メチルウンベ
リフェリル−β−Ｄ−ガラクトシド、オルトニトロフェ
ニルガラクトピラノシド（ＯＰＮＧ）等を用いることが
できる。
において常用されている基質、例えば４−メチルウンベ
リフェリル−β−Ｄ−ガラクトシド、オルトニトロフェ
ニルガラクトピラノシド（ＯＰＮＧ）等を用いることが
できる。
上記の方法を実施するための測定キットは、抗−ＩＬ−
６モノクロ一ナル抗体、ビオチン標識された抗−ＩＬ−
６ポリクロ一ナル抗体、及びストレプトアビジン／β−
ガラクトシダーゼ接合体を含んで成る。このキットはさ
らにβ−ガラクトシダーゼ基質を含むことができるが、
これは分析現場において別途調達することも容易である
。
６モノクロ一ナル抗体、ビオチン標識された抗−ＩＬ−
６ポリクロ一ナル抗体、及びストレプトアビジン／β−
ガラクトシダーゼ接合体を含んで成る。このキットはさ
らにβ−ガラクトシダーゼ基質を含むことができるが、
これは分析現場において別途調達することも容易である
。
２、 ＩＬ−６に対するモノクローナル抗体本発明に
適当なＩＬ−６に対するモノクローナル抗体とは生体内
で産生されるＩＬ−６および標準品として使用する遺伝
子工学的に作製されたＩＬ−６に同程度の抗体価を有す
るモノクローナル抗体である。
適当なＩＬ−６に対するモノクローナル抗体とは生体内
で産生されるＩＬ−６および標準品として使用する遺伝
子工学的に作製されたＩＬ−６に同程度の抗体価を有す
るモノクローナル抗体である。
該抗体は常法により作製することができる。すなわち遺
伝子工学的に作製した組換ＩＬ−６や培養細胞の上清等
から分離精製したＩＬ−６をマウス、例えばＢａ１ｂ／
ｃ等に免疫して、抗体価が上がったところで、肺細胞を
ミエローマ細胞と融合してハイブリドーマを作製する。
伝子工学的に作製した組換ＩＬ−６や培養細胞の上清等
から分離精製したＩＬ−６をマウス、例えばＢａ１ｂ／
ｃ等に免疫して、抗体価が上がったところで、肺細胞を
ミエローマ細胞と融合してハイブリドーマを作製する。
次にＩＬ−６を特異的に認識するモノクローナル抗体を
産生ずるハイブリドーマをスクリーニングすればよい。
産生ずるハイブリドーマをスクリーニングすればよい。
３、 ＩＬ−６に対するポリクローナル抗体本発明に
適当なＩＬ−６に対するポリクローナル抗体とは、生体
内で産生されるＩＬ−６および標準品として使用する遺
伝子工学的に生産されるＩＬ−６に対して、同程度の抗
体価を有する抗体である。該抗体を生産する生物種は、
ウサギ、ヒツジ、ヤギなど種々の生物種を例示すること
ができる。該抗体を作製するための免疫原としては、遺
伝子工学的に作製された組換ＩＬ−６、例えば大腸菌由
来ＩＬ−６等を例示できる。
適当なＩＬ−６に対するポリクローナル抗体とは、生体
内で産生されるＩＬ−６および標準品として使用する遺
伝子工学的に生産されるＩＬ−６に対して、同程度の抗
体価を有する抗体である。該抗体を生産する生物種は、
ウサギ、ヒツジ、ヤギなど種々の生物種を例示すること
ができる。該抗体を作製するための免疫原としては、遺
伝子工学的に作製された組換ＩＬ−６、例えば大腸菌由
来ＩＬ−６等を例示できる。
以下本発明をさらに詳細に説明するために実施例を示す
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
実施例１． ヒトＩＬ−６の免疫化学的測定法コート用
緩衝液（０，０５Ｍ炭酸ナトリウム、ｐＨ８〜９）に溶
解した２ｘ／ｍｊ！の抗−ＩＬ−６モノクロ一ナル抗体
ＭＨ１６６（ＴｏＭａｔｓｕｄａ ら、Ｂｕｒ、 Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏｌ、 。
緩衝液（０，０５Ｍ炭酸ナトリウム、ｐＨ８〜９）に溶
解した２ｘ／ｍｊ！の抗−ＩＬ−６モノクロ一ナル抗体
ＭＨ１６６（ＴｏＭａｔｓｕｄａ ら、Ｂｕｒ、 Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏｌ、 。
１８、 ｐ９５１．１９８８年参照）を９６穴プレート
（ＮＵＮＣ社製）にウェルあたり１００１１！入れ、４
℃で１晩放置した。翌日、溶液を捨て、ブロック用緩衝
液（ＰＢＳ。
（ＮＵＮＣ社製）にウェルあたり１００１１！入れ、４
℃で１晩放置した。翌日、溶液を捨て、ブロック用緩衝
液（ＰＢＳ。
０．１％ＢＳＡ、 ０．２％ｇｅｌａｔｉｎ、 ０．
０５％アジ化ナトリウム）をウェルあたり１５０Ｊｌｌ
加え、３０分以上室温で放置した。次に溶液を捨て、リ
ンス用緩衝液（ＰＢＳ、 ０．１％Ｔｗｅｅｎ ２０
）で３回以上洗った後、測定すべきサンプルを加え、室
温で２〜３時間放置した。溶液を捨て、リンス用緩衝液
で３回以上洗った後、リンス用緩衝液に溶解した５ｘ／
ｍｊ！のビオチン化抗−Ｉ Ｌ−６ポリクロ一ナル抗体
を加え、３７℃で１時間放置した。さらに溶液を捨て、
リンス用緩衝液で３回以上洗った後、１ ｍＭ ＭｇＣ
ｌ２を含むリンス用緩衝液で１０００倍に稀釈したスト
レプトアビジン／β−ガラクトシダーゼを加え、３７℃
で３０分放置した。その後、溶液を捨て、リンス用緩衝
液で３回以上洗った。それから基質用緩衝液（０，０１
Ｍリン酸ナトリウム、０．１ Ｍ ＮａＣ１，１ｍＭＭ
ｇＣｌ、、０．１％アジ化ナトリウム、ｐＨ７，０）に
溶解した０、１ｍｇ／ｍｊ！の４−メチルウンベリフェ
リル−β−Ｄ−ガラクトシド（シグマ社）をウェルあた
り１００Ｉ加え、遊離した４−メチルウンベリフェロン
の螢光強度を螢光イムノリーダーで測定した。
０５％アジ化ナトリウム）をウェルあたり１５０Ｊｌｌ
加え、３０分以上室温で放置した。次に溶液を捨て、リ
ンス用緩衝液（ＰＢＳ、 ０．１％Ｔｗｅｅｎ ２０
）で３回以上洗った後、測定すべきサンプルを加え、室
温で２〜３時間放置した。溶液を捨て、リンス用緩衝液
で３回以上洗った後、リンス用緩衝液に溶解した５ｘ／
ｍｊ！のビオチン化抗−Ｉ Ｌ−６ポリクロ一ナル抗体
を加え、３７℃で１時間放置した。さらに溶液を捨て、
リンス用緩衝液で３回以上洗った後、１ ｍＭ ＭｇＣ
ｌ２を含むリンス用緩衝液で１０００倍に稀釈したスト
レプトアビジン／β−ガラクトシダーゼを加え、３７℃
で３０分放置した。その後、溶液を捨て、リンス用緩衝
液で３回以上洗った。それから基質用緩衝液（０，０１
Ｍリン酸ナトリウム、０．１ Ｍ ＮａＣ１，１ｍＭＭ
ｇＣｌ、、０．１％アジ化ナトリウム、ｐＨ７，０）に
溶解した０、１ｍｇ／ｍｊ！の４−メチルウンベリフェ
リル−β−Ｄ−ガラクトシド（シグマ社）をウェルあた
り１００Ｉ加え、遊離した４−メチルウンベリフェロン
の螢光強度を螢光イムノリーダーで測定した。
第１図は、本方法により、血清に溶解した組換ＩＬ−５
（Ｙ、Ａｓａｇｏｅら、ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、
６． ｐ８０６． １９８８年参照）が数十ｐｇ
／ｍｌまで測定できることを示している。第２図は、二
次抗体としてアルカリフォスファターゼ結合抗−ウサギ
イムノグロプリン及びその基質を用いて発色させたとき
と本方法との比較を示す。第１図及び第２図の結果から
、本方法のＩＬ−６の測定感度が優れることが示された
。
（Ｙ、Ａｓａｇｏｅら、ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、
６． ｐ８０６． １９８８年参照）が数十ｐｇ
／ｍｌまで測定できることを示している。第２図は、二
次抗体としてアルカリフォスファターゼ結合抗−ウサギ
イムノグロプリン及びその基質を用いて発色させたとき
と本方法との比較を示す。第１図及び第２図の結果から
、本方法のＩＬ−６の測定感度が優れることが示された
。
実施例２． エイズ患者血清中のヒト ＩＬ−６濃度の
測健常人及びエイズウィルス保持者（症状により３段階
に区別）の血清を実施例１に示す方法でＩＬ−６濃度を
測定した結果を第３図に示す。第３図はエイズウィルス
保持者では疾患の進行と血清中のＩＬ−６濃度が相関し
ていることを示す。
測健常人及びエイズウィルス保持者（症状により３段階
に区別）の血清を実施例１に示す方法でＩＬ−６濃度を
測定した結果を第３図に示す。第３図はエイズウィルス
保持者では疾患の進行と血清中のＩＬ−６濃度が相関し
ていることを示す。
実施例３． ＡＴＬ患者血清中のヒＨＬ−６濃度の測定
健常人及びＨＴＬＶウィルス保持者（症状により３段階
に区別）の血清を実施例１に示す方法でＩＬ−６濃度を
測定した結果を第４図に示す。第４図はＨＴＬＶウィル
ス保持者では疾患の進行と血清中のＩＬ−６濃度が相関
していることを示す。
に区別）の血清を実施例１に示す方法でＩＬ−６濃度を
測定した結果を第４図に示す。第４図はＨＴＬＶウィル
ス保持者では疾患の進行と血清中のＩＬ−６濃度が相関
していることを示す。
ＡＴＬ患者からＨＴＬＶ感染Ｔ細胞を採取し、これより
自立的に増殖するＴ細胞株を樹立し、ＴＬ−Ｍａｒと名
付けた。ＴＬ−Ｍａｒを１０％牛脂児血清を含むＲＰＭ
１１６４０培地でＩ ＸＩＯ’／ｍｌの濃度で３日間培
養し、土浦中のＩＬ−６濃度を測定した結果を第５図に
示す。第５図は、ＨＴＬＶ感染Ｔ細胞はＩＬ−６を産生
じていることを示している。
自立的に増殖するＴ細胞株を樹立し、ＴＬ−Ｍａｒと名
付けた。ＴＬ−Ｍａｒを１０％牛脂児血清を含むＲＰＭ
１１６４０培地でＩ ＸＩＯ’／ｍｌの濃度で３日間培
養し、土浦中のＩＬ−６濃度を測定した結果を第５図に
示す。第５図は、ＨＴＬＶ感染Ｔ細胞はＩＬ−６を産生
じていることを示している。
本発明で提供されるＩＬ−６の免疫化学的測定法はＩシ
ー６濃度を高感度で迅速に、しかも多数の検体を同時に
測定することを可能にした。この方法は、各疾患でのＩ
Ｌ−６の生理的濃度を調べたり、ＩＬ−６の疾患におけ
る役割を解明したり、他の薬剤の効果を調べるのに有用
である。
ー６濃度を高感度で迅速に、しかも多数の検体を同時に
測定することを可能にした。この方法は、各疾患でのＩ
Ｌ−６の生理的濃度を調べたり、ＩＬ−６の疾患におけ
る役割を解明したり、他の薬剤の効果を調べるのに有用
である。
第１図は、血清に溶解した大腸菌由来組換ＩＬ−６濃度
を実施例１に示す方法で測定したときの、各種ＩＬ−６
濃度に対する発色を示す。 第２図は、血清に溶解した大腸菌由来組換ＩＬ−６濃度
をＴ、 Ｍ、Ｉｔｓｕｄａ らの方法（Ｂｕｒ、Ｊ、Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ、、 １３゜ｐ９５１．１９８８年参照）
により測定した場合と、本方法により測定した場合の各
種ＩＬ−６濃度に対する基質の発色を示す。 第３図は、健常人（ＮＩＩＳ）及びエイズウィルス感染
者（ＡＳＹＭＰＴＯＭＭＡＴＩＣＣＡＲＲＩＥＲは症状
のでていない感染者、＾ＲＣは免疫不全様の患者、ＡＩ
ＤＳは免疫不全患者）の血清中のＩＬ−６濃度を実施例
１に示す方法で測定した結果（６〜１０検体の平均値）
を示す。 第４図は、健常人（ＮＨ３）及びＨＴＬＶ感染者（ＨＴ
ＬＶ−ＩＨＣは症状のでていない感染者、ＴＵＭＯＲＴ
ＹＰＢは皮膚に腫瘍をもつ患者、ＮＯＮ−ＴＵＭＯＲＴ
ＹＰＥは白血病性の患者）の血清中のＩＬ−６濃度を実
施例１に示す方法で測定した結果（６〜１０検体の平均
値）を示す。 第５図は、培養液及びＨＴＬＶ感染Ｔ細胞の培養上清中
のＩＬ−６濃度を実施例１に示す方法で測定した結果を
示す。 ＩＬ−６濃Ｉｆ （ｎｇ／ｍｌ ） 第１回
を実施例１に示す方法で測定したときの、各種ＩＬ−６
濃度に対する発色を示す。 第２図は、血清に溶解した大腸菌由来組換ＩＬ−６濃度
をＴ、 Ｍ、Ｉｔｓｕｄａ らの方法（Ｂｕｒ、Ｊ、Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ、、 １３゜ｐ９５１．１９８８年参照）
により測定した場合と、本方法により測定した場合の各
種ＩＬ−６濃度に対する基質の発色を示す。 第３図は、健常人（ＮＩＩＳ）及びエイズウィルス感染
者（ＡＳＹＭＰＴＯＭＭＡＴＩＣＣＡＲＲＩＥＲは症状
のでていない感染者、＾ＲＣは免疫不全様の患者、ＡＩ
ＤＳは免疫不全患者）の血清中のＩＬ−６濃度を実施例
１に示す方法で測定した結果（６〜１０検体の平均値）
を示す。 第４図は、健常人（ＮＨ３）及びＨＴＬＶ感染者（ＨＴ
ＬＶ−ＩＨＣは症状のでていない感染者、ＴＵＭＯＲＴ
ＹＰＢは皮膚に腫瘍をもつ患者、ＮＯＮ−ＴＵＭＯＲＴ
ＹＰＥは白血病性の患者）の血清中のＩＬ−６濃度を実
施例１に示す方法で測定した結果（６〜１０検体の平均
値）を示す。 第５図は、培養液及びＨＴＬＶ感染Ｔ細胞の培養上清中
のＩＬ−６濃度を実施例１に示す方法で測定した結果を
示す。 ＩＬ−６濃Ｉｆ （ｎｇ／ｍｌ ） 第１回
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、ヒトＩＬ−６に対するモノクローナル抗体、ビオチ
ン標識抗ヒトＩＬ−６ポリクローナル抗体、並びに検出
系としてのストレプトアビジン／β−ガラクトシダーゼ
及びその基質を用いることを特徴とするヒトＩＬ−６の
免疫化学的測定法。 ２、ヒトＩＬ−６に対するモノクローナル抗体、ビオチ
ン標識抗ヒトＩＬ−６ポリクローナル抗体、ストレプト
アビジン／β−ガラクトシダーゼを含んで成るヒトＩＬ
−６の免疫化学的測定用キット。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27186289A JP2884628B2 (ja) | 1989-10-20 | 1989-10-20 | ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキット |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27186289A JP2884628B2 (ja) | 1989-10-20 | 1989-10-20 | ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキット |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03135766A true JPH03135766A (ja) | 1991-06-10 |
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1989
- 1989-10-20 JP JP27186289A patent/JP2884628B2/ja not_active Expired - Lifetime
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